免疫细胞化学常用试剂
一、固定剂
大多数神经激素、肽类物质为水溶性,在用于免疫细胞化学研究之前,常需固定。但肽类和蛋白质的物理、化学性质不同,因而对不同的固定方法或固定剂的反应也不尽相同。某些固定剂甚至可同时破坏和/或保护同一抗原的不同抗原决定簇。因此,在进行免疫细胞化学研究之前,很有必要了解所要研究的物质(蛋白质或肽类)的化学性质,并根据需要来选择适宜的固定剂(或固定方法)以及改进固定条件。
目前,免疫细胞化学研究中常用的固定剂仍为醛类固定剂,其中以甲醛类和戊二醛最为常用。在此,简要介绍几种目前较为常用和推荐的固定剂,以供读者选用。
1.4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液(pH7.3)
试剂:多聚甲醛40g
0.1mol/L磷酸缓冲液至1000ml
配制方法:称取40g多聚甲醛,置于三角烧瓶中,加入500~800ml 0.1mol/L 磷酸缓冲液(Phosphate Buffer以下简称PB),加热至60℃左右,持续搅拌(或磁力搅拌)使粉末完全溶解,通常需滴加少许1n NaOH才能使溶液清亮,最后补足0.1mol/L的PB于1000ml,充分混匀。
该固定剂较适于光镜免疫细胞化学研究,最好是动物经灌注固定取材后,继续浸泡固定2~24h。另外,该固定剂较为温和,适于组织标本的较长期保存。
2.4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢氧化钠
试剂:A液:多聚甲醛40g
蒸馏水400ml
B液:Na2HPO4·2H2O16.88g
蒸馏水300ml
C液:NaOH 3.86g
蒸馏水200m
配制方法:A液最好在500ml的三角烧瓶中配制(方法同前),至多聚甲醛完全溶解后冷却待用。注意,在溶解多聚甲醛时,要尽量避免吸入气体或溅入眼内。B液和C液配制好后,将B液倒入C液中,混合后再加入A液,以1n NaOH 或1N HCl 将pH调至7.2~7.4,最后,补充蒸馏水至1000ml充分混合,4℃冰箱保存备用。
该固定剂适于光镜和电镜免疫细胞化学研究,用于免疫电镜时,最好加入少量新鲜配制的戊二醛,使其终浓度为0.5%~1%。该固定剂较温和,适于组织的长期保存。组织标本于该固定液中,4℃冰箱保存数月仍可获得满意的染色效果。
3.Bouin’s液及改良Bouin’s液
试剂:饱和苦味酸
40%甲醛250ml
冰醋酸50ml
配制方法:先将饱苦味酸过滤,加入甲醛(有沉淀者禁用),最后加入冰醋酸,混合后存于4℃冰箱中备用。冰醋酸最好在临用前加入。改良Bouin’s液即不加冰醋酸。
该固定液为组织学、病理学常用固定剂这一,对组织的穿透力较强,固定较好,结构完整。但因偏酸(pH为3~3.5),对抗原有一定损害,且组织收缩较明显,故不适于组织标本的长期保存。此外,操作时,应避免吸入或与皮肤接触。
4.Zamb oni’s(Stefanini’s)液
试剂:多聚甲醛20g
饱和苦味酸 150ml
Karasson-Schwlt’s PB至1000ml
配制方法:称取多聚甲醛20g,加入饱和苦味酸150ml,加热至60℃左右,持续搅拌使充分溶解、过滤、冷却后,加Karasson-Schwlt’s PB至1000ml充分混合(Karasson –Schwlt’s磷酸缓冲液的配制配制方法见后)。
该固定液适于电镜免疫细胞化学,对超微结构的保存较纯甲醛为优,也适于光镜免疫细胞化学研究,为实验室常用固定剂之一。我们在应用中,常采用2.5%的多聚甲醛和30%的饱和苦味酸,以增加其对组织的穿透力和固定效果,保存更多的组织抗原。固定时间为6~18h。
5.PLP液PLP液即过碘酸盐-赖氨酸-多聚甲醛固定液
(Periodate-Lysine-paraform-alde-hyde fixative)
试剂:过碘酸钠
赖氨酸盐酸盐(或盐酸赖氨酸):
多聚甲醛
蒸馏水
配制方法:
(1)贮存液A(0.1mol/L赖氨酸-0.5mol/l Na3PO4,pH7.4):称取赖氨酸盐酸盐1.827g溶于50ml蒸馏水中,得0.2mol/L的赖氨酸盐酸盐溶液,然后加入Na2HPO4至0.1mol/L,将pH调至7.4,补足0.1mol/L的PB至100ml,使赖氨酸浓度也为0.1mol/L,4℃冰箱保存,最好两周内使用。此溶液的渗透浓度为300mOs mmol/L/kg。
(2)贮存液B(8%多聚甲醛溶液):称8g多聚甲醛加入100ml蒸馏水中,配成8%多聚甲醛液(方法见前)。过滤后4℃冰箱保存。
(3)临用前,以3份A液与1份B液混合,再加入结晶过碘酸钠(NaIO4),使NaIO4终浓度为2%。由于AB两液混合,pH从约7.5降至6.2,故固定时不需再调pH值。固定时间为6~18h。
该固定剂较适于富含糖类的组织,对超微结构及许多抗原的抗原性保存较好。其机制是借助于过碘酸氧化组织中的糖类形成醛基,通过赖氨酸的双价氨基与醛基结合,从而与糖形成交联。由于组织抗原绝大多数都是由蛋白质和糖两部分构成,抗原决定簇位于蛋白部分,故该固定剂有选择性地使糖类固定,这样既稳定了抗原,又不影响其在组织中的位置关系。Mclean和Nakane等认为,最佳的混合是:含0.01mol/L的过碘酸盐、0.075mol/L的赖氨酸、2%的多聚甲醛及0.037mol/L的磷酸缓冲液。
6.Karnovsky’s液(pH7.3)
试剂:多聚甲醛30g
25%戊二醛80ml
0.1mol/L PB 至1000ml
配制方法:先将多聚甲醛溶于0.1mol/L PB中,再加入戊二醛,最后加
0.1mol/L的PB至1000ml,混匀。
该固定剂适于电镜免疫细胞化学,用该固定液在4℃短时固定,比在较低浓度的戊二醛中长时间固定能更好地保存组织的抗原性和细微结构。固定时最好先灌注固定,接着浸泡固定10~30min,用缓冲液漂洗后即可树酯包埋或经蔗糖溶液后用于恒冷切片。
7.0.4% 对苯醌(Parabenzoquinone)
试剂:对苯醌 4.0g
0.01mol/L PBS 1 000ml
配制方法:称取4.0g对苯溶于1000ml 0.01mol/L的PBS即可。
对苯醌对抗原具有较好的保护作用,但对超微结构的保存有一定影响,故常与醛类固定剂混合使用。一般要求临用前配制,且避免加热助溶,因加热或放置时间过长,固定液变为棕色至褐色,会使组织标本背景增加,影响观察。此外,对苯醌有剧毒,使用时避免吸入或与皮肤接触。
8.PFG液(Parabenzoquinone-Formaldehyde-Glutaraldehyde fixative, PFG)
试剂:对苯醌20g
多聚甲醛15g
25%戊二醛40ml
0.1mol/L二甲酸钠缓冲液至1000ml
配制方法:先以500ml左右的二甲酸钠缓冲液溶解对苯醌及多聚甲醛,然后加入戊二醛,最后加入二甲酸钠缓冲液至1000ml充分混合。
对苯醌与戊二醛及甲醛联合应用,即可阻止醛基对抗原的损害,又不影响超微结构的保存,故适于多种类抗原的免疫细胞化学,尤其是免疫电镜的研究。
9.碳二亚酰胺-戊二醛(ECD-G)液
试剂:0.05mol/L PB 500ml
0.01mol/L PBS 500ml
Tris 约14g
浓HCl 少许
ECD 10g
25%戊二醛 3.5ml
配制方法:先以约500ml的PB与相同体积的PBS混合,加入Tris(使其终浓度为1.4%)溶解,以浓HCl调pH至7.0,再将事先称取好的ECD和戊二醛加
入混合液,振摇后计时,用pH计检测,约2~3min时,pH降至6.6,再以1N
的NaOH在4min内调pH至7.0,此时,将该混合固定液加入盛有细胞(经PBS 漂洗过)的器皿中,在23℃固定7min后,以PBS洗去固定液,即可进一步处理。
ECD即乙基-二甲基氨基丙基碳亚胺盐酸盐
[1-ethyl-3(3-dimethyl-aminoprpyl)-carboi-imide hydrochloride],简称乙基-CDI,常用于多肽类激素的固定,对酶等蛋白质的固定也有良好效果。ECD单独应用时,边缘固定效应重,但与戊二醛、Tris及PB联合应用,效果明显改善,细胞质仍可渗透,利用细胞中抗原的定位,超微结构保存较好。目前认为是一种用于培养细胞电镜水平免疫细胞化学研究的很好的固定剂。
10.四氧化锇(锇酸Osmic Acid, OsO4)
配制:将洗净装有OsO4的安瓿中加热后,迅速投入装有溶剂的棕色瓶中,使安瓿遇冷自破。也可用钻石刀在安瓿上划痕,洗净后再放入瓶中,盖好瓶塞,用力撞击安瓿,待其破后加溶剂稀释。为保证充分溶解,应在用前几天配制。
(1)2% OsO4水溶解:取OsO41g溶于重蒸水中。此液常作为储备液,于冰箱中密封保存。
(2)1% OsO4-PB:
试剂:A、2.26% NaH2PO4·2H2O 4.15ml
B2.52% 8.5ml
C、5.4% 葡萄糖5ml
D、OsO4 0.5g
配制方法:先分别配好A、B、C三种液体,取A液41.5ml与B液8.5ml混合,将pH调至7.3~7.4,取A-B混合液45ml再与5ml C液混合即为0.12mol/L PBG。
(3)1% OsO4/0.1mol/L二甲胂酸钠缓冲液(pH7.2~7.4):
试剂:2% OsO4水溶液10ml
0.2mol/L二甲胂酸钠缓冲液(pH7.2~7.4)10ml
配制方法:取2%OsO4储备液10ml与等量0.2mol/L、pH7.2~7.4的二甲胂酸钠缓冲液充分混合即可。
OsO4是电镜研究所必需的试剂,常用于后固定。尽管OsO4主要为脂类固定剂,但也可与肽类及蛋白质起作用,形成肽-蛋白质或肽-脂交联。过氧化物酶的反应产物经OsO4处理后,电子密度增高,适于电镜研究。但由于OsO4的反应产
物对光及电子有较明显的吸收能力,因此在免疫细胞化学染色前常需去除,去锇在光镜水平常用1%的高锰酸钾,在电镜水平则常用H2O2来处理。
以上介绍了目前免疫细胞化学中常用的一些固定液。关于固定液种类还很多,如70%~90%的酒精、丙酮、醋酸酒精(含0.1%~1%醋酸的70%~90%的酒精等),这些溶液都能促使蛋白质凝固。它们最初只是光学显微镜通用的固定液,但在免疫细胞化学上用其它方法不成功时,也可试用。总之,掌握一个原则,免疫细胞化学中,含重金属的固定液禁用(但Zenker-Formalin可进行短时的固定)。目前多数认为,对生物标本较好的固定措施是:用4℃的Karnovsky’s 液灌注固定10~30min后,接着在pH7.3、0.1mol/L的二甲胂酸钠缓冲液中漂洗过液,这种短时冷固定处理,有助于超微结构和许多肽类抗原的保存。对其它较难保存的抗原可尝试PFG、PLP及Zamb oni’s液等混合固定液。
二、缓冲液
免疫细胞化学中应用的缓冲液种类较多,即使是同种缓冲液,其浓度、pH、离子强度等也常常不同。在此介绍几种最常用的缓冲液的配制。
1.0.2mol/L(pH7.4)磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer, PB)
试剂:NaH2PO4·2H2O
Na2HPO4·12H2O
配制方法:配制时,常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4,两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液(PB),根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。
(1)0.2mol/L的 Na2HPO4;称取Na2HPO4.12H2o 31.2g(或NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
(2)0.2mol/L的 Na2HPO4:称取NaHPO4.·12H2o 71.632g(或Na2HPO4·7H2O 53.6g或Na2HPO4·2H2o 35.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
(3)0.2mol/L pH7.4的PB的配制:取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB(pH约为7.4~7.5)。若pH偏高或偏低,可通过改变二者的比例来加以调整,室温保存即可。
2.0.01mol/L磷酸盐缓冲生理盐水(Phosphate Buffered Saline, PBS)
试剂:0.2mol/L PB 50ml
NaCl 8.5~9g(约0.15mol/L)
重蒸水至1000ml
配制方法:称取NaCl 8.5~9g及0.2mol/L的PB 50ml,加入1000ml的容量瓶中,最后加重蒸水至1000ml,充分摇匀即可。若拟配制0.02mol/L的PBS,则PB量加倍即可,依此类推。
PB和PBS是免疫细胞化学实验中最为常用的缓冲液,0.01mol/L的PBS主要用于漂洗组织标本、稀释血清等,其pH应在7.25~7.35之间,否则需要调整。
0.1mol/L的PB常用于配制固定液、蔗糖等。一般情况下,0.2mol/l PB的pH
值稍高些,稀释成0.01mol/L的PBS时,常可达到要求的pH值,若需调整pH,通常也是调PB的pH。
3.Karasson –Schwlt’s磷酸盐缓冲液
试剂:NaH2PO4·H2O 3.31g
Na2HPO4·7H2O33.77g
重蒸水至1000ml
配制方法:同前
该缓冲液主要用于配制Zamboni’s固定液。
4.0.5mol/L pH7.6的Tris- HCl缓冲液。
试剂:Tris(三羟甲基氨基甲烷) 60.57g
1N HCl 约420ml
重蒸水至1000ml
配制方法:先以少量重蒸水(300~500ml)溶解Tris,加入HCl后,用1N 的HCl或1N的NaOH将pH调至7.6,最后加重蒸水至1000ml。此液为储备液,于4℃冰箱中保存。免疫细胞化学中常用的Tris-HCl缓冲液浓度为0.05mol/L,用时取储备液稀释10倍即可。
该液主要用于配制Tris缓冲生理盐水(TBS)、DAB显色液。
5.Tris缓冲生理盐水(Tris Buffered,Saline,TBS)
试剂:0.5mol/L Tris-HCl缓冲液100ml
NaCl 3.5~9g(0.15mol/L)
重蒸水至1000ml
配制:先以重蒸水少许溶解NaCl,再加Tris-HCl缓冲液,最后加重蒸水至1000ml,充分摇匀使Tris终浓度为0.05mol/L。
TBS主要用于漂洗标本,常用于免疫酶技术中。
6.Tris-TBS(PBS)
试剂:Triton X-100 10ml(1%)或3ml(0.3%)
0.5mol/L Tris缓冲液(pH7.6)1000ml(50ml)或(0.2mol/L的PB)
NaCl 8.5~9g
重蒸水至1000ml
配制方法:先以重蒸水少许溶解NaCl后,加入Triton X-100及Tris缓冲液或(PB),最后加重蒸水至1000ml,充分摇匀。
该液常用浓度为1%及0.3%,前者主要用于漂洗标本,后者主要用于稀释血清。
7.0.1mol/L(pH7.4)二甲胂酸缓冲液
试剂:0.2mol/L二甲胂酸钠500ml
0.1N HCl 28ml
蒸馏水至1000ml
配制方法:先称取二甲胂酸钠(MW:214)42.8g,加蒸馏水至1000ml,使0.2mol/L的二甲胂酸钠溶液;再取HCl 1.7ml加蒸馏水至1000ml ,配成0.1N,最后取0.2mol/L二甲胂酸钠溶液500ml及0.1n HCl 28ml混合,加蒸馏水至1000ml,即为0.1mol/L的二甲胂酸钠缓冲液。
8.几种常用的不同pH值缓冲液的配制表
(1)0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.7~8.0)
(2)0.05mol/L Tris-HCl缓冲液(pH7.19~9.10)
(3)0.2mol/L醋酸盐缓冲液(pH3.6~5.6)
(4)0.1mol/L二甲胂酸钠缓冲液(pH5.0~7.4)
注:HCI可由NCO3代替,配制成二甲胂酸钠-HNO3缓冲液。
(5)0.2mol/L碳酸盐缓冲液(pH9.2~10.7)
三、显色液
免疫细胞化学中,由于抗原-抗体反应所形成的复合物本身无色,无法直接观察,因而需借助于某些化学基团的呈色作用,使其得以显示,以利于在显微镜下观察。常用的显色液有:
1.DAB(Diaminobenzidine)显色液
DAB即3,3-二氨基苯联胺
试剂:DAB(常用四盐酸盐)50mg
0.05mol/L TB 100ml
30% H2O2 30~40μl
配制方法:先以少量0.05mol/L(pH7.6)的TB溶解DAB,然后加入余量TB,充分摇匀,使DAB终浓度为0.05%,过滤后显色前加入30%的H2O230~40μl,使其终浓度为0.01%。
DAB显色液主要用于免疫过氧化物酶法(如酶标法、PAP法等),其终产物可直接在光镜下观察,也可经OsO4处理后,增加反应产物的电子密度,用于电镜观察。但有几点需注意:DAB溶解要完全,否则未溶解的颗粒沉积于标本上影响观察;DAB浓度不易过高,否则显色液呈棕色,增加背景染色,另外DAB有致癌作用,故操作时应戴手套,尽量避免与皮肤接触,用后及时彻底冲洗,接触DAB的实验用品最好经洗液浸泡24h后使用。
2.4-氯-1-萘酚(4-Cl-1-Naphthol)显色液
配方1:4-Cl-1-萘酚100mg
纯乙醇 10ml
0.05mol/L TB(pH7.6) 190ml
30% H2O2 10μl(0.003%)
配制方法:先将4-Cl-1-萘酚溶解于乙醇中,然后加入Tb 19ml,用前加入30% H2O2使其终浓度为0.005%,切片显色时间通常为5~20min。
配方2:4-Cl-1-萘酚
N-二甲基甲酰胺(DMF)
0.05mol/L TB(pH7.6)
30% H2O2
配制方法:先将4-Cl-1-萘酚加入DMF中,加热溶解使呈乳白色,再加入TB,乳白色变为絮状,在7.5℃加热5min后加入H2O2,搅动使絮状消失,趁热过滤,当降至略低于50℃时才放入组织标本(注意:温度过高易损伤标本,过低则易重新出现沉淀)。显色时间通常为5min左右。
4-Cl-1-萘酚的终产物显示蓝色。
多数认为最好去除白色沉淀(如上述),但Larsson等认为,白色沉淀可作为背景,使阳性部位更易观察。由于酒精可溶解4-Cl-1-萘酚显色的组织标本,勿用酒精脱水。
3.3-氨基-9-乙基卡唑(3-amino-9-ethylcarbozole,AEC)显色液
试剂:AEC 20mg
二甲基甲酰胺(DMF) 2.5ml
0.05mol/L醋酸缓冲液(pH5.5)50ml
30%H2O2 25ml
配制方法:先将AEC溶于DMF中,再加入醋酸缓冲液充分混匀。临显色前,加入30%H2O2。切片显色时间为5~20min。
该显色液作用后,阳性部分呈深红色,加以苏木精或亮绿等作为背景染色,则效果更佳。由于终产物溶于酒精和水,故需用甘油封固。
4.TMB显色液
试剂:TMB
HCl
亚硝基铁氰化钾
无水酒精
配制方法:
(1)醋酸盐缓冲液:取1.0mol/L的HCl 190ml加入1.0mol/L的醋酸钠400ml 中混合,再加蒸馏水稀释至1000ml,用醋酸或NaOH将pH调至3.3。
(2)A液:取上述缓冲液5ml,溶解100mg亚硝基铁氰化钾,加蒸馏水92.5ml 混合。
(3)B液:称取5mg TMB加入2.5ml无水酒精中,可加热至37℃~40℃直到TMB完全溶解。
(4)孵育液:放入标本前数秒,取2.5ml B液及97.5ml A溶于试管中充分混合。(液体在20min内应保持清亮的黄绿色,否则可能已有污染)。酶反应时,加入终浓度为0.005%的H2O2。
(5)主要显色步骤:组织标本在蒸馏水(或PBS)中漂洗数次(每次约10~15min)后放入未加H2O2的孵育液中作用20min(19℃~30℃),然后向孵育液中放入H2O2(每100ml孵育液中加0.3%的H2O2 1.0~5.0ml)继续孵育液20min 左右(19℃~23℃),捞出标本漂洗数次(共30min左右)。在0~4℃条件下可在漂洗液放置4h直至贴片、脱水,封片。也可在贴片前在1%的中性红中负染2~3min,也可在1%派诺宁(pH3.3~3.5)中负染5min后贴片、脱水、封片。
TMB即四甲基联苯胺(Tetrabenzidine)是一种脂溶性较强的基团,因此容易进入细胞与细胞器中的HRP反应,且由于这种高度的脂溶性,使其易形成多聚
体,在HRP活性部位产生粗大的、深兰色沉淀物,这使得TMB成为组化实验中的一种很好的发色团。同时反应产物的沉淀,使得HRP的活性部位更加暴露,利于酶氧化反应进行。TMB的反应产物为深蓝色,利于光镜观察,且反应产物越聚越大,常超出单个细胞器的范围(而DAB则被限制在其内),故TMB反应的检测阈较低。由于上述优点,目前TMB常用于光镜及超微结构水平的HRP及HRP-WGA
神经投射的研究。需要注意的是:TMB显色液中的A液和B液应在2h内新鲜配制。另外,TMB是一种较强的皮肤刺激剂,并有致癌的潜在可能,故使用时应带手套及在通风条件下操作。
5.NBT显色液
试剂A液:5%NBT:称取0.5gNBT溶于10ml 70%的DMF(二甲基甲胺)内,充分混合,常存于4℃,也可装成小份,-20℃保存,用前复温。
B液:5% BCIP:称取BCIp 0.5g溶于10ml 100%的DMF内,混匀。4℃或分装存于-20℃,用前恢复至室温。
C.显色液:取A液40μl,加入到盛有10ml的0.1mol/l Tris-HCl(pH9.5,钤0.1mol/L NaCl、5mmol/L MgCl2)管内,充分混匀;再加入B液40μl,轻轻混合即可。最好用前新鲜配制。
NBT即四唑氮蓝(Nitro-Blue-Tetrazolium),MW=818,为深蓝色无定形微溶物质。BCIP即5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸盐
(5-bromo-4-chloro-3-indolyl-phosphate)。当二者存在时,在碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase, AP)作用下,NBT被还原形成显微镜下可见的蓝色或紫色沉淀。
四、粘附剂
在免疫细胞化学工作中,由于标本(如切片)的脱落常影响工作的质量的速度,故粘附剂的选择和使用就显得较为重要。
1.铬矾明胶液
试剂:铬矾0.5g
明胶(Gelatine)5g
H2O ~1000ml
方法:在1000ml的烧杯或烧瓶中,以500~800ml H2O加温溶解明胶,待其完全溶解后,再加入铬矾。注意温度过高易使明胶烧糊,包被玻片时最好控制水温在70℃。如有明显残渣,过滤后使用。
2.甲醛-明胶液
试剂:40%甲醛 2.5ml
明胶0.5g
蒸馏水至100ml
配制方法:用少许蒸馏水(约80ml)加热溶解明胶,待完全溶化后,加入甲醛,最后补充蒸馏水至100ml混匀即可。
3.多聚赖氨酸(Poly-L-Lycine,PLL)
试剂:多聚赖氧酸 5g
蒸馏水 ~1000ml
配制方法:称取PLL,溶于H2O,充分混合即可,此液浓度为0.5%,可适当稀释配成0.01~0.5%浓度。4℃保存,也可-20℃备用。PLL可反复冰冻,效果无明显影响,工作液常再稀释10~50倍。
4.Vectabond试剂该试剂是Vector公司新进推出的一种新型玻片粘附剂。该试剂与一般的粘附剂不同,它是通过对玻璃表面起化学修饰作用,改变其表面的化学物理特性,使组织切片牢固地贴于玻璃片上,贴上后不易脱落,保留时间较久。一个试剂盒(7ml)可配成350ml工作液(用丙酮配)。处理载玻片前(事先酸处理),用染色缸装好各种液体,按下列程序进行:
干净载玻片→丙酮5min→Vectabond试剂工作液(7ml Vectabond+ 350ml 丙酮):将载玻片用镊子夹住浸入Vectabond试剂1~2次→dH2O,2×5min→干燥(37℃过夜)→用铝箔包好,室温存放备用。
注意:避免污染(尘埃等)。
综上述方法处理的载片一般可存放半年以上。
五、封固剂
1.甘油-TBS及甘油-PBS
配制方法:按比例将甘油和TBS(或PBS)充分混合后,置4℃,冰箱静止;待气泡排除后方可使用。
2.甘油-明胶(冻)
试剂:明胶 10g
甘油12ml
蒸馏水 100ml
香草酚少许
配制方法:称取1g明胶于温热(约40℃)的蒸馏水中,充分溶解后过滤,再加入12ml甘油混合均匀。少许香草酚是为了防腐。
3.液体石蜡液体石蜡因含杂质少,很少引起非特异性荧光,故常用于荧光组化及免疫荧光法时标本的封固。
4.DPX
试剂:Distrene 10g
酸二丁 5ml
二甲苯35ml
DPX为中性封固剂,用于多种染色方法匀不易褪色,但组织收缩较明显,故应尽量使其为均匀的一薄层。DPX现有商品出售,可直接应用。若感过于粘稠,也可加少量二甲苯稀释后应用。注意:二甲苯不可加得太多,二甲苯挥发后,片子上出现许多干燥的空泡,影响观察,遇有这种情况,可用二甲苯浸泡掉盖玻后重新封固。
六、酶消化液
1.0.1%胰蛋白酶
试剂:胰蛋白酶0.1gm
0.1%氯化钙(pH7.8)100ml
配制方法:先配制0.1%的CaCl2,用0.1mol/L的NaOH将其pH调至7.8,然后加入蛋白酶溶解之。用前将胰蛋白酶消化液在水浴中予热至37℃(载有标本的玻片也在TBS中予热至同样样温度)。该消化液时间约为5~30min。
2.0.4%胃蛋白酶
试剂:胃蛋白酶400mg
0.1N HCl 100ml
配制方法:同胰蛋白酶。消化时间在37℃约为30min。
3.0.06% Pronase
试剂:Pronase 0.06g
0.05mol/L TB(pH7.5) 100ml
配制方法:同前。
在免疫细胞化学染色中,有时经Formalin过度固定的标本,常会产生过量的醛基,遮盖抗原,影响一抗与抗原的结合。用蛋白酶溶液消化,可起到暴露抗原部分的作用。消化时间应根据不同组织而异,总之,在保持组织形态不被破坏的前提下,宜尽量延长消化时间。以上三种酶消化液中,以第一种最为常用。
七、其它
1.蔗糖溶液免疫细胞化学中应用的蔗精,常用浓度为5%~30%。一般光镜研究,仅用20%蔗糖处理已足矣,若制备电镜标本,在冰冻前最好经上行蔗糖(5%、10%、15%、20%及20%蔗糖-5%甘油等)处理,以确保其良好的细微结构。
(1)20%蔗糖液:
试剂:蔗糖20g
0.1mol/L PB(pH7.5) 至100ml
配制方法:先以少许0.1mol/L的PB溶解蔗糖,再加0.1mol/l PB至100ml 充分混合,置4℃冰箱保存。
该液多用于纯光镜研究。标本在刚放入浓度如此高的蔗糖液,常浮在上面,当标本沉到底部时即可。通常光镜标本浸泡在20%蔗糖液中过夜。都能达到要求。
(2)20%蔗糖-5%甘油:
试剂:蔗糖 20g
甘油5ml
0.1mol/L PB 至100ml(约95ml)
配制方法:先用少许PB溶解蔗糖后,再加入甘油,充分混匀,最后补足PB 至100ml,于4℃保存备用。
该液主要用于电镜标本的处理,常浸泡过夜(其它浓度的蔗糖中常分别为2h左右)。
蔗糖是一种廉价的防冻剂,兼有脱水的作用,它可减小标本在冰冻切片时冰晶形成的数量和大小,应用较为方便。若无试剂蔗糖(Sucrose)也可用普通蔗糖(Cane Sugar)。配制好的蔗糖溶液,放置时间超过一个月时,应重新配制。
2.T riton X-100(聚乙二醇辛基苯基醚) 免疫细胞化学中,Triton X-100常用浓度为1%和0.3%,但通常是先配制成30%的Triton X-100储备液,临用时稀释至所需浓度。
30% Triton X-100的配制:
试剂:Triton X-100 28.2ml
0.1mol/L PBS(pH7.3)或0.05mol/l TBS(pH7.4) 72.8ml
配制方法:取Triton X-100及PBS(或TBS)混合,置37℃~40℃水浴中2~3h,使其充分溶解混匀。用前取该储备液稀释至所需浓度。
Triton X-100是一种非离子型表面活性剂(或称清洁剂),分子量为646.86(C34H62O11)。它能溶解脂质,以增加抗体对细胞膜的通透性。1%的Triton X-100常用于漂洗组织标本,0.3%的Triton X-100则常用于稀释血清,配制BSA等。
3.甲醇-H2O2液
试剂:纯甲醇10ml
30% H2O2 0.1ml
配制方法:吸取30%的H2O20.1ml,加入100ml纯甲醇中,充分混匀即可,使H2O2终浓度为0.3%(也有的用0.03%、0.5%等)。
甲醇-H2O2处理组织标本,具有封闭内源性过氧化物酶活性的作用,但其具体机制至今仍不详。通常处理时间在室温约为5~30min。注意,用H2O2处理标本,对某些抗原的抗原性有影响,故建议在使用新的抗血清或抗原时,最好同时设立非处理对照组。
4.常用生理盐液
常用生理盐液的成分(g/1000ml)
配制方法:精确称取各种药品(如上表),加入500ml重蒸水中,待完全溶解后,补足重蒸水至1000ml,充分混匀即可。
在免疫细胞化学实验中,某些物质不宜经固定剂作用或经固定剂作用后仍易丢失,而需浸泡在生理盐液中。这些生理盐液的成分与正常哺乳动物血清的成分相似,能使组织离体后能处于尽量接近生理状态时的环境。Glucose通常是在用前临时加入。有的(如Kerbs液)在使用时通常需通入含CO2/O2为2.5~
5%/97.5~95%的气体。这些生理盐液中的CO2和二碳酸盐,主要起缓冲作用,Glucose主要是提供离体组织有限的代谢所需的能量。
扑救燃油类易燃液体火灾时,应()。使用干粉灭火器 化工原料电石或乙炔着火时,严禁用()。四氯化碳灭火器 化学品泄漏事故发生时,下面()做法是错误的。所有人员参加事故救援 一氧化碳气味()无味 氧气钢瓶瓶身颜色是什么?天蓝色 超级恒温水浴使用时错误的操作是()。可以使用自来水 下列属于易制爆化学品的是()。硝酸钠 何种毒性的化学品为高毒药品?大鼠一次经口LD50 为1-50 大多数氧化剂和()都能发生剧烈反应,放出有毒气体。强酸 气体钢瓶的使用步骤是()。先开总阀门,再开减压阀 化学实验中,为防止()发生氧化自燃,常将其置于水中保存。黄磷 是否能在纸上称量过氧化钠?不能 关于氢氟酸的描述哪个是错误的?氢氟酸有强烈的腐蚀性和危害性,皮肤接触氢氟酸后可出现疼痛及灼伤,随时间疼痛渐剧,皮肤下组织被破坏,这种破坏会传播到骨骼;稀的氢氟酸危害性很低,不会产生严重烧伤 实验室内的浓酸、浓碱处理,一般可()。先中和后倾倒,并用大量的水冲洗管道 市售浓硝酸质量分数约为多少?65 何种毒性的化学品为低毒药品?大鼠一次经口LD50 为500-5000 吸湿性强、遇水释放较多热量的化学品沾染皮肤后应立刻()用软纸、软布抹去 化学药品存放室要有防盗设施,保持通风,试剂存放应()。按不同类别分类存放 有些特殊金属遇水会发生燃烧,比如,钾、()。钠 在使用液化石油气时,钢瓶应该()。直立放置 用剩的活泼金属残渣应如何处理()。缓慢滴加乙醇将所有金属反应完毕后,整体作为废液处理 试剂或异物溅入眼内,处理措施正确的是()。以上都对 下列属于易制毒化学品的是()盐酸 实验中吸入Cl2或HCl气体时,应如何处理?立即到室外呼吸新鲜空气 关于化学品的使用、管理,下列说法哪个是错的?有机溶剂可以置于普通冰箱保存 以下关于气体钢瓶使用说法正确的是()。不可把气瓶内气体用光,以防重新充气时发生危险 甲烷气体的气味()。无味 大量销毁易燃易爆化学物品时,应征得所在地()监督机构的同意。公安消防 在装卸易燃易爆品操作中,不能使用( )工具。铁制 H2S的气味()。臭鸡蛋味道 当做实验时,皮肤不小心被碱灼伤怎么办?先用大量水冲洗,再用1 %硼酸或2 %醋酸溶液浸洗,最后用水洗 危险化学品单位发生危险化学品事故造成人员伤亡、财产损失的,应当依法承担()责任。赔偿 ()可能发生阴燃。煤 实验时废弃的少量金属钠该如何处理?先用乙醇处理,再用大量水冲洗 相互反应产生会产生有毒气体或剧烈放热的废液,应()。不得倒入同一收集桶中 下面()物质属于自燃物品?黄磷 甲醇属于何种级别的毒性?低毒 对于高挥发性化学试剂,正确的储存方式为?放在通风橱内
初中化学实验常用仪器介绍 酒精灯 胶头滴管用于吸取和滴加少 量液体 滴瓶用于盛放液体药品 胶头滴管用过后应立即洗 净,再 去吸取其它药品 滴瓶上的滴管与滴瓶配套使用 用于固定和支持各种仪器, 一 般常用于过滤、 加热等实验操 作 用作配制溶液和较大量试剂 的反应容器, 在常温或加热时 使用 加热时应放置在石棉网上,使受 热均匀 烧杯 仪器 用途 注意事项 用作少量试剂的反应容器, 在 常温或加热时使用 加热后不能骤冷,防止炸裂 用于夹持试管 防止烧损和腐蚀 玻璃棒 用于搅拌、 过滤或转移液体时 引 流 用于加热 见酒精灯的使用及给物质加热 部分的说明 试管 试管夹 胶头滴管 滴瓶 铁架台
化学实验操作及注意事项: 1.药品的取用: (1)取用原则 ①“三不”原则:不摸——不用手接触药品。不闻——不要把鼻孔凑到容器口直接闻药品气味。不尝— —不尝任何药品的味道。 ②节约原则:若没有说明用量时,液体一般取1~2ml ,固体以盖满试管底部为宜。 ③处理原则:实验剩余药品既不能放回原瓶,也不能随便丢弃,要放在指定的容器内。 (2)取用方法 ①固体药品一般放在广口瓶中,固体药品的取用:用药匙取,块状——用镊子夹取,一横二放三慢立固 体粉末——用纸槽送入,一斜二送三直立 ②液体药品的取用: a.液体药品一般放在细口瓶(试剂瓶)中,取用时注意:瓶塞倒放,手握标签,瓶口紧挨试管口,回收
一滴。 b.少量液体药品可用滴管取用。一般做到“垂直悬空四不要”,即应在仪器的正上方垂直滴入,胶头滴管不要接触烧杯等仪器壁;不要平放或倒置,保持橡胶乳头在上;不要把滴管放在实验台或其它地方,以免沾污滴管;不能用未清洗的滴管再吸别的试剂,(但滴瓶上的滴管不能交叉使用,也不能冲洗)。 c.定量取用——量筒读数时量筒必须放平稳,视线与量筒内液体凹底保持水平 注意:量筒的0 刻度在下,读数时俯视——数值偏高(大) 仰视——数值偏低(小)先将液体倾倒入量筒至接近刻度时,用滴管逐滴滴入至刻度值。 (3)浓酸、浓碱的使用使用时注意保护眼睛,若不慎溅到皮肤、衣服或实验台上要采取相应的措施。 2.托盘天平的使用: (1)构造:托盘、指针、标尺、平衡螺母、游码、分度盘。 (2 )称量范围:砝码5~50g ,精确称至0.1g(只用于粗略称量)。(3)操作: ① 称量前应把游码放在标尺的零刻度处,检查天平是否平衡。 ② 称量时,左物右码,砝码用镊子夹,放砝码先大后小再游码。 ③称量后,复位,砝码放回砝码盒,游码移回零刻度处。 (1)称干燥固体药品——两盘各放一张等质量的纸。 (2)称易潮解和有腐蚀性的药品——放在小烧杯等玻璃器皿中。 3.连接仪器装置:实验时常把玻璃导管、胶管、带孔的胶塞、试管、广口瓶等连接在一起组成一定的装置,连接仪器的顺序是从左到右,从下到上。玻璃管插入橡皮塞孔内的方法是:先将玻璃管的一端用水润湿,然后稍用力转动着插入。 4.检查装置气密性:组装完制取气体的装置时,一般先检查装置的气密性,只有气密性良好,才可装入实验用的药品。检查装置气密性的方法是:导管口入水,手贴管瓶壁;管口冒气泡,放手水回流;若无此现象,装置必漏气。夏天,当手温与室温相近时,可微热试管。 5.物质的加热:(1)酒精灯的使用:酒精量——不得超过酒精灯容量的2/3 ,不少于容积的1/4 。 注意:熄灭酒精灯必须用灯帽盖灭,不能用嘴吹灭;燃着时不得添加酒精,不得用燃着的酒精灯引燃其它的灯,以免引起火灾;若酒精洒在实验台上燃着,应用湿布扑灭。 灯焰分为焰心、内焰、外焰三部分,外焰温度最高,焰心温度最低,用外焰加热。 (2)可以直接加热的仪器:试管、蒸发皿、坩埚等;可以加热但必须垫上石棉网的仪器:烧杯、烧瓶等;不能加热的仪器:集气瓶、量筒、漏斗等。 给液体加热:用试管、烧杯、烧瓶、蒸发皿等。给固体加热:用干燥的试管、蒸发皿等。 (3)加热时,试管外壁不得有水。 (4)加热后不得立即用冷水冲或放在实验台上。
实验室常用化学试剂有效期探索 [导读]化学试剂不像食品和药品有严格的保质期,化学试剂还 没一个保质期的具体要求和界限,这与化学试剂的保质期受多方面因素影响有关;但主要是因其性质和应用而变化的。 化学试剂是进行化学研究、成分分析的相对标准物质,是化学实验课程重要的消耗性物资,广泛用于物质的合成、分离、定 性和定量分析。试剂的有效日期是影响实验结果准确性的重要因素。在实际使用过程中,人们总是习惯于用生产日期来判断化学 试剂的有效性,其实大谬不然。化学试剂不像食品和药品有严格的保质期,化学试剂还没一个保质期的具体要求和界限,这与化学试剂的保质期受多方面因素影响有关;但主要是因其性质和应用而变化的。因此化学试剂要在妥善保存之下,再结合工作的实际情况判断试剂是否出现变质、能否继续使用或是否可以通过采取适当措施提纯使用。 1、化学试剂的分类 化学试剂品种繁多,目前还没有统一的分类方法,一般按试剂的化学组成或用途进行分类。表1列出了常用化学试剂的分类。
2、化学试剂的性质对有效期的影响 化学试剂都没有注明保质期,确定试剂是否变质主要是凭经验和做新旧试剂对比试验。要了解化学试剂的理化性质,化学试剂的有效期随着化学品的化学性质的改变,有着很大的区别。一般情况下,化学性质稳定的物质,保存有效期就越长,保存条件 也简单。初步判断一个物质的稳定性,可遵循以下几个原则。 无机化合物,只要妥善保管,包装完好无损,理论上可以无 限期使用。但是,那些容易氧化(如亚硫酸盐、苯酚、亚铁盐、 碘化物、硫化物等应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放;其水溶液亚硫酸、氢硫酸溶液要密封存放;钾、钠、白磷更要采 用液封形式)、容易潮解的物质,在避光、阴凉、干燥的条件下, 只能短时间(1~5 年)内保存,具体要看包装和储存条件是否符合 规定。
化学实验常见仪器 各种化学仪器都有一定的使用范围。有的玻璃仪器可以加热用,如试管、烧杯、烧瓶、蒸发皿等;有的不能加热,如量筒、集气瓶、水槽等。有的仪器可以做量具用。有的仪器在实验装置中起支撑作用。有些仪器外观很相似,容易混淆,应该通过对比加以分辨。化学仪器在做化学实验时经常用到,学会正确使用这些仪器的方法,是十分重要的。每种仪器,根据它的用途不同,有着不同的使用要求。因此,在使用各种化学仪器前都应该明确它的要求及这种要求的原因。 一.容器与反应器 1.可直接加热 (1)试管 主要用途: ①常温或加热条件下,用作少量试剂的反应容器。 ②收集少量气体和气体的验纯。 使用方法及注意事项: ①可直接加热,用试管夹夹住距试管口1/3处。
②试管的规格有大有小。试管内盛放的液体不超过容积1/3。 ③加热前外壁应无水滴;加热后不能骤冷,以防止试管破裂。 ④加热时,试管口不应对着任何人。给固体加热时,试管要横放,管口略向下倾斜。 ⑤不能用试管加热熔融NaOH等强碱性物质。 (2)蒸发皿 主要用途: ①溶液的蒸发、浓缩、结晶。 ②干燥固体物质。 使用方法及注意事项: ①盛液量不超过容积的2/3。 ②可直接加热,受热后不能骤冷。 ③应使用坩埚钳取放蒸发皿。 2.垫石棉网可加热
(1)烧杯 主要用途: ①用作固体物质溶解、液体稀释的容器。 ②用作较大量试剂发生反应的容器。 ③冷的干燥的烧杯可用来检验气体燃烧有无水生成;涂有澄清石灰水的烧杯可用来检验CO2气体。 使用方法及注意事项: ①常用规格有50mL、100mL、250mL等,但不用烧杯量取液体; ②应放在石棉网上加热,使其受热均匀;加热时,烧杯外壁应无水滴。 ③盛液体加热时,一般以不要超过烧杯容积的1/2为宜。 ④溶解或稀释过程中,用玻璃棒搅拌时,不要触及杯底或杯壁。 (2)烧瓶 主要用途:
草酸的化学品安全技术说明书(MSDS) 第一部分:化学品名称回目录 化学品中文名称:乙二酸 化学品英文名称:ethanedioic acid 中文名称2:草酸 英文名称2:oxalic acid 技术说明书编码:1180 CAS No.:144-62-7 分子式:C2H2O4 分子量:90.04 第二部分:成分/组成信息回目录 有害物成分含量CAS No. 乙二酸144-62-7 第三部分:危险性概述回目录 危险性类别: 侵入途径: 健康危害:本品具有强烈刺激性和腐蚀性。其粉尘或浓溶液可导致皮肤、眼或粘膜的严重损害。口服腐蚀口腔和消化道,出现胃肠道反应、虚脱、抽搐、休克而引起死亡,肾脏发生明显损害,甚至发生尿毒症。可在体内与钙离子结合而发生低血钙。长期吸入蒸气引起神经衰弱综合征,头痛,呕吐,鼻粘膜溃疡,尿中出现蛋白,贫血等。 环境危害:对环境有危害,对水体和大气可造成污染。 燃爆危险:本品可燃,有毒,具强腐蚀性、强刺激性,可致人体灼伤。 第四部分:急救措施回目录 皮肤接触:立即脱去污染的衣着,用大量流动清水冲洗至少15分钟。就医。
眼睛接触:立即提起眼睑,用大量流动清水或生理盐水彻底冲洗至少15分钟。就医。 吸入:迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。如呼吸困难,给输氧。如呼吸停止,立即进行人工呼吸。就医。 食入:尽快用清水或清水加乳酸钙、葡萄糖酸钙或石灰水洗胃。再用葡萄糖40g 灌入胃内。第五部分:消防措施回目录 危险特性:遇明火、高热可燃。加热分解产生毒性气体。 有害燃烧产物:一氧化碳、二氧化碳。 灭火方法:消防人员须戴好防毒面具,在安全距离以外,在上风向灭火。灭火剂:雾状水、泡沫、干粉、二氧化碳、砂土。 第六部分:泄漏应急处理回目录 应急处理:隔离泄漏污染区,限制出入。切断火源。建议应急处理人员戴防尘面具(全面罩),穿防毒服。避免扬尘,小心扫起,置于袋中转移至安全场所。也可以用大量水冲洗,洗水稀释后放入废水系统。若大量泄漏,用塑料布、帆布覆盖。收集回收或运至废物处理场所处置。 第七部分:操作处置与储存回目录 操作注意事项:密闭操作,局部排风。操作人员必须经过专门培训,严格遵守操作规程。建议操作人员佩戴防尘面具(全面罩),穿连衣式胶布防毒衣,戴橡胶手套。远离火种、热源,工作场所严禁吸烟。使用防爆型的通风系统和设备。避免产生粉尘。避免与碱类、碱金属接触。搬运时要轻装轻卸,防止包装及容器损坏。配备相应品种和数量的消防器材及泄漏应急处理设备。倒空的容器可能残留有害物。 储存注意事项:储存于阴凉、干燥、通风良好的库房。远离火种、热源。保持容器密封。应与碱类、碱金属、食用化学品分开存放,切忌混储。配备相应品种和数量的消防器材。储区应备有合适的材料收容泄漏物。
生物试剂分类 生物试剂(BR:Biological reagent) 涉及到化学试剂分类。 我国的试剂规格基本上按纯度(杂质含量的多少)划分,共有高纯、光谱纯、基准、分光纯、优级纯、分析和化学纯等7种。国家和主管部门颁布质量指标的主要优级纯、分级纯和化学纯3种。 (1)优级纯(GR:Guaranteed reagent),又称一级品或保证试剂,99.8%,这种试剂纯度最高,杂质含量最低,适合于重要精密的分析工作和科学研究工作,使用绿色瓶签。 (2)分析纯(AR),又称二级试剂,纯度很高,99.7%,略次于优级纯,适合于重要分析及一般研究工作,使用红色瓶签。 (3)化学纯(CP),又称三级试剂,≥ 99.5%,纯度与分析纯相差较大,适用于工矿、学校一般分析工作。使用蓝色(深蓝色)标签。 (4)实验试剂(LR:Laboratory reagent),又称四级试剂。 除了上述四个级别外,目前市场上尚有: 基准试剂(PT:Primary Reagent):专门作为基准物用,可直接配制标准溶液。 光谱纯试剂(SP:Spectrum pure):表示光谱纯净。但由于有机物在光谱上显示不出,所以有时主成分达不到99.9%以上,使用时必须注意,特别是作基准物时,必须进行标定。 纯度远高于优级纯的试剂叫做高纯试剂(≥ 99.99%)。 目前,国外试剂厂生产的化学试剂的规格趋向于按用途划分,常见的如下: 生化试剂(BC:Biochemical) 生物试剂(BR:Biological reagent) 生物染色剂(BS:Biological Stain) 络合滴定用(FCM:For Complexometry) 层析用(FCP:For chromatography purpose) 荧光分析(FIA) 微生物用(FMB) 显微镜用(FMP:For microscopic purpose) 合成用(FS:For synthesis) 气相色谱(GC:Gas chromatography) 高压液相色谱(HPLC:High Pressure Liquid chromatography) 指示剂(Ind:Indicator) 红外吸收(IR) 液相色谱(LC) 核磁共振(NMR) 有机分析标准(OSA:Organic analytical standard) 分析用(PA:Pro analysis) 实习用(Pract:Practical use)
初中化学基本实验常用仪器介绍
仪器名称使用范围注意事项仪器名称使用范围注意事项 A、加热物质(直接加热) B、作反应容器 C、作小型气体发生器 D、收集少量气体1、用作反应器时液体体积不超过 1/2,加热时不超过1/3。 2、试管应用试管夹或铁夹,自试管 底部往上套,夹在试管中上部。 3、振荡试管时,用手指捏住试管, 用手腕甩动。 4、加热时不能骤冷,防止炸裂。 用于夹持试管1、防止烧损和腐蚀。 2、应握住长柄,不可按住短柄。 用于蘸取、搅拌、过滤转移液体时的引流1、当用于蘸取溶液时,取完一样要 洗涤,然后取另一样。 2、搅拌不可碰到仪器外壁 用于加热1、使用前检查灯芯,用外焰加热。 2、绝对禁止过火或向燃着的酒精灯 添加酒精。 3、要用灯帽盖灭酒精灯,不可用嘴 吹。 4、灯内酒精的体积V必须 1/4 1、用于较准确的量取一 定体积的液体。 1、决不可用来加热或反应容器和溶解 物质,也不可用来盛放液体。 2、量取一定体积的液体要选择大小 合适和量筒。或准确至0.1克。 3、常与滴管配套使用。 1、用作收集或贮存少量 气体。 2、用作一些气体反应容 器。 1、防止炸裂。(实验时先铺一层细沙 或少量的水。) 蚌埠市钰诚新材料科技有限公司 实验室常用化学试剂的 贮存和使用规范 编辑日期:二零一四年八月 钰诚新材料常用化学试剂的存放和使用 化学试剂又叫化学药品,简称试剂。化学试剂是指具有一定纯度标准的各种单质和化合物(也可以是混合物。要进行任何实验都离不了试剂,试剂不仅有各种状态,而且不同的试剂其性能差异很大。有的常温非常安定、有的通常就很活泼,有的受高温也不变质、有的却易燃易爆:有的香气浓烈,有的则剧毒……。只有对化学试剂的有关知识深入了解,才能安全、顺利进行各项实验。既可保证达到预期实验目的,又可消除对环境的污染。因此,首先要知道试剂的分类情况,然后掌握各类试剂的存放和使用。 一、化学试剂的分类 试剂分类的方法较多。如按状态可分为固体试剂、液体试剂。按用途可分为通用试剂、专用试剂。按类别可分为无机试剂、有机试剂。按性能可分为危险试剂、非危险试剂等。 从试剂的贮存和使用角度常按类别和性能2种方法对试剂进行分类。 (一)无机试剂和有机试剂 这种分类方法与化学的物质分类一致,既便于识别、记忆,又便于贮存、取用。 无机试剂按单质、氧化物、碱、酸、盐分出大类后,再考虑性质进行分类。 有机试剂则按烃类、烃的衍生物、糖类蛋白质、高分子化合物、指示剂等进行分类。 (二)危险试剂和非危险试剂 这种分类既注意到实用性,更考虑到试剂的特征性质。因此,既便于安全存放,也便于实验工作者在使用时遵守安全操作规则。 1.危险试剂的分类 根据危险试剂的性质和贮存要求又分为: (1)易燃试剂 这类试剂指在空气中能够自燃或遇其它物质容易引起燃烧的化学物质。由于存在状态或引起燃烧的原因不同常可分为: ①易自燃试剂:如黄磷等。 ②遇水燃烧试剂:如钾、钠、碳化钙等。 ③易燃液体试剂:如苯、汽油、乙醚等。 ④易燃固体试剂,如硫、红磷、铝粉等。 (2)易爆试剂 指受外力作用发生剧烈化学反应而引起燃烧爆炸同时能放出大量有害气体的化学物质。如氯酸钾等。 (3)毒害性试剂 指对人或生物以及环境有强烈毒害性的化学物质。如溴、甲醇、汞、三氧化二砷等。 (4)氧化性试剂 指对其它物质能起氧化作用而自身被还原的物质、如过氧化钠、高锰酸钾、重铬酸铵、硝酸铵等。 (5)腐蚀性试剂 指具有强烈腐蚀性,对人体和其它物品能因腐蚀作用发生破坏现象,甚至引起燃烧、爆 . 实验室化学药品、试剂管理制度及规范 1 目的 1.1规范实验室化学药品、试剂的管理,确保化学药品、试剂正确安全使用,保证检测工作质量。 1.2所有被允许使用的化学药品(化验室的化学试剂、杀虫剂、车间使用的消毒剂、洗涤剂、润滑油、油漆等)应被有序地标记、存放、使用,避免污染食品、食品接触面和包装物料。 2 适用范围 适用于实验室化学药品、试剂的采购、贮存、标识、领取和使用的全过程。 3 职责及术语 负责实验室化学药品、试剂的控制和管理。 从与食品或食品接触面接触的可能性角度分类,把工厂可能使用的化学品分为A、B、C三类: A类化学品:指与原材料、食品或食品接触面发生接触的化学品。(如CIP使用 的酸、碱、清洗剂等)。 B类化学品:在线使用但不与食品及原材料、食品接触面接触(如车间所用的链条润滑油、墨水等)。 C类化学品:为实验室分析用的标准试剂或指示剂。 4 内容及要求 4.1化学药品、试剂的采购 4.1.1实验室依据本室检测任务或药品台账,制定各种化学药品、试剂的采购计划,写清品名、单位、数量、纯度、包装规格等。 4.1.2化学药品、试剂购进后,由相关使用人员负责验收,确认安全有效后,方可领回存放,并记录于台账。 4.2化学药品、试剂的贮存 4.2.1化学药品试剂贮存环境应通风、干燥,实验室用配备消防器材和灭火设备。 4.2.2化学药品、试剂种类繁多,需严格按其性质和贮存要求(参见中国药典2005版附录XV试药项下)分类陈列整齐,放置有序。一般遵循以下原则:①酸液、碱液分开存放;②固体、液体化学品分开存放;③有毒、有害化学品单独存放; ④不常用的化学药品、试剂单独存放。 4.2.3化学性质不同或灭火方法相抵触的化学试剂应分柜存放,化学危险品按其特性单独存放,并有明确规范的标识,较贵的特纯试剂等药品应与一般药. . 品分开,妥善存放。 4.2.4操作区内的橱柜中及操作台上存放化学试剂的数量不应超过三个月使用 的量。 初中化学实验常用仪器介绍仪器用途注意事项 试管用作少量试剂的反应容器,在 常温或加热时使用 加热后不能骤冷,防止炸裂 试管夹 用于夹持试管防止烧损和腐蚀 玻璃棒用于搅拌、过滤或转移液体时引流 酒精灯用于加热 见酒精灯的使用及给物质加热 部分的说明 胶头滴管滴瓶胶头滴管用于吸取和滴加少 量液体 滴瓶用于盛放液体药品 胶头滴管用过后应立即洗净,再 去吸取其它药品 滴瓶上的滴管与滴瓶配套使用 铁架台用于固定和支持各种仪器,一般常用于过滤、加热等实验操作 烧杯 用作配制溶液和较大量试剂 的反应容器,在常温或加热时 使用 加热时应放置在石棉网上,使受 热均匀 量筒 量度液体体积不能加热,不能作反应容器 集气瓶用于收集或贮存少量气体或作为某些化学反应的发生装置 除上面介绍的九种仪器外,比较常见的仪器还有以下十几种。 化学实验操作及注意事项: 1. 药品的取用: (1)取用原则 ①“三不”原则:不摸——不用手接触药品。 不闻——不要把鼻孔凑到容器口直接闻药品气味。 不尝——不尝任何药品的味道。 ②节约原则:若没有说明用量时,液体一般取1~2ml,固体以盖满试管底部为宜。 ③处理原则:实验剩余药品既不能放回原瓶,也不能随便丢弃,要放在指定的容器。 (2)取用方法 ①固体药品一般放在广口瓶中,固体药品的取用:用药匙取, 块状——用镊子夹取,一横二放三慢立 固体粉末——用纸槽送入,一斜二送三直立 ②液体药品的取用: a. 液体药品一般放在细口瓶(试剂瓶)中,取用时注意:瓶塞倒放,手握标签,瓶口紧挨试管口,回收一滴。 b. 少量液体药品可用滴管取用。一般做到“垂直悬空四不要”,即应在仪器的正上方垂直滴入,胶头滴管不要接触烧杯等仪器壁;不要平放或倒置,保持橡胶乳头在上;不要把滴管放在实验台或其它地方,以免沾污滴管;不能用未清洗的滴管再吸别的试剂,(但滴瓶上的滴管不能交叉使用,也不能冲洗)。 c. 定量取用——量筒读数时量筒必须放平稳,视线与量筒液体凹底保持水平 注意:量筒的0刻度在下,读数时俯视——数值偏高(大) 仰视——数值偏低(小) 先将液体倾倒入量筒至接近刻度时,用滴管逐滴滴入至刻度值。 (3)浓酸、浓碱的使用 使用时注意保护眼睛,若不慎溅到皮肤、衣服或实验台上要采取相应的措施。 化学试剂手册 ?化学试剂安全操作指南 ?紧急事件处理方式 ?常见化学试剂性质简介 ?元素周期表(注音) 1 / 32 一.化学试剂安全操作指南 化学实验室是一个危险的工作环境,因为大家常常要使用一些危险的药品,这些潜在的危险通常是不可避免的。所以,在进入实验室之前,每个人都有必要学习化学实验室的重要安全守则和规章制度。 化学实验简单地用两个词来描述:一定、禁止。 一定 一定要熟悉实验室的安全程序 一定要穿实验服 离开实验室之前一定要洗手 在实验开始之前一定要认真阅读实验内容 一定要检查仪器是否安装正确 对待所有的药品一定要小心、仔细 一定要保持自己的工作环境清洁 一定要注意观察实验现象 遇到疑问一定要问指导老师 禁止 实验室里禁止吃东西或喝水,抽烟 禁止穿露脚趾的鞋进入实验室 禁止吸入、品尝药品 禁止妨碍或分散别人注意力,或在实验室里奔跑和大声喧哗 禁止独自一个人在实验室做实验 禁止做一些未经批准的实验 二.紧急事件处理方式 1.化学药品危害的级别及名称 一级(极度危害):汞及其化合物、苯、砷及其无机化合物(非致癌的除外)、氯乙烯、铬酸盐与重铬酸钾、黄磷、铍及其化合物、对硫磷、羟基镍、八氟异丁烯、氯甲醚、锰及其无机化合物、氰化物。 二级(高度危害):三硝基甲苯、铅及其化合物、二硫化碳、氯、丙烯腈、四氯化碳、硫化氢、甲醛、苯胺、氟化氢、五氯酚及其钠盐、铬及其化合物、敌百虫、氯丙烯、釩及其化合物、溴甲烷、硫酸二甲酯、金属镍、甲苯二异氰酸酯、环氧氯丙烷、砷化氢、敌敌畏、光气、氯丁二烯、一氧化碳、硝基苯。 三级(中度危害):苯乙烯、甲醇、硝酸、硫酸、盐酸、甲苯、二甲苯、三氯乙烯、二甲基甲酰胺、六氟丙烯、苯酚、氮氧化物。 四级(轻度危害):溶剂汽油、丙酮、氢氧化钠、四氟乙烯、氨。 2.常见化学毒物的急性致毒作用于救治方法 2.1硫酸、盐酸、硝酸 主要致毒作用与症状 接触:硫酸局部红肿痛,重者起水泡、呈烫伤症状;硝酸、盐酸腐蚀性小于硫酸。 吞服:强烈腐蚀空腔、食道、胃粘膜。 救治方法 立即用大量流动清水冲洗,再用2%碳酸氢钠水溶液冲洗,然后清水冲洗。初服可洗胃,时间长忌洗胃以防穿孔;应立即服7.5%氢氧化镁悬 2 / 32 课题3 走进化学实验室 原创不容易,为有更多动力,请【关注、关注、关注】,谢谢! 师者,所以传道,授业,解惑也。韩愈 镇海中学陈志海 学生在参与了课题2中的两个探究活动后,对化学实验的重要性已有初步的亲身体验,此时,不失时机地引导学生走进化学实验室,是符合学生的心理特点和学习规律的。教材首先利用实验室的实物照片和简短的文字阐述了走进化学实验室的重要性和要求,然后引导学生进行药品的取用、加热和洗涤仪器等基本操作训练。教材没有采用单纯的基本操作训练的方法,而是结合具体实验和"活动与探究"等,引导学生在实验和探究过程中,了解加热等实验基本操作方法,并在现象明显的实验过程中进行基本操作训练,这样更能激发学生的学习兴趣。 第1课时化学实验常用仪器及药品的取用 【玉壶存冰心,朱笔写师魂。——冰心《冰心》 ◆教学目标】 1.知识与技能 (1)了解一些化学实验室的规则。 (2)掌握常见仪器的名称和使用方法。 (3)学会固体药品和液体药品的取用方法。 (4)培养学生的观察能力和动手能力。 2.过程与方法 (1)实验操作时能做到“眼到、心到、手到”,提高学生的操作技能。 (2)通过教师演示、学生演示、学生互教互学等方法,促使学生掌握规范的操作方法。 3.情感、态度与价值观 (1)了解化学实验是进行科学探究的重要手段,知道严谨的科学态度、正确的实验原理和操作方法是实验成功的关键。 (2)能自觉遵守实验室规则,养成良好的实验习惯。 (3)培养学生主动参与、大胆实验、勇于探究的科学精神。 【教学重点】 固体、液体、药品的取用 【教学难点】 1.量筒和滴管的使用。 2.遵守实验室规则及实验规范的重要性的认识及形成良好的实验习惯。 【教学准备】 仪器:铁架台、量筒、滴瓶、试管架、试管夹、锥形瓶、试管、胶头滴管、药匙、镊子等。药品:稀盐酸、碳酸钠粉末、大理石、锌粒、氢氧化钠溶液、硫酸铜溶液、水。 一、导入新课 学习化学的一个重要途径是科学探究。实验是进行科学探究的重要手段,因此学习化学就必然要了解化学实验室。实验室是进行科学探究的重要场所,下面就让我们走进化学实验室。 二、推进新课 1.实验室规则 [讲解]当你走进化学实验室时,首先要仔细阅读实验室规则。请大家不要轻视这些规则,因为它们是你安全地进行实验并使实验获得功的重要保证! 教师向学生展示实验室规则。 [交流]讨论遵守实验室规则的必要性和重要性,让学生成宏观印象,加强纪律、安全措施的教育。 2.常见化学仪器介绍 [讲解]化学实验室配备有化学实验仪器和化学试剂(药品)。 [观察]引导学生观看课本P17相关图片。大家看实验台上放着的就是化学实验室常用的化学实验仪器,另外还有几种化学试剂。(分别是碳酸钠固体、锌粒、稀盐酸、硫酸铜溶液和氢氧化钠溶液) [提问]你能叫出这些仪器的名称吗?试一试! [阅读]看课本中的附录I初中化学实验常用仪器简介。 [讲解]老结合实验台上常见仪器讲解其名称、用途和注意事项。 国标试剂(该类试剂为我国国家标准所规定,适用于检验、鉴定、检测)的分级为(要求从高到低排列): 1、工作基准试剂(国标无简写标记,用汉语注明,绿色标签):作为基准物质,标定标准溶液。 2、优级纯(GR,绿色标签):主成分含量很高、纯度很高,适用于精确分析和研究工作,有的可作为基准物质。 3、分析纯(AR,红色标签):主成分含量很高、纯度较高,干扰杂质很低,适用于工业分析及化学实验。这个是一般实验室用的最多的等级。 4、化学纯(CP,蓝色标签):主成分含量高、纯度较高,存在干扰杂质,适用于化学实验和合成制备。 5、实验试剂(LR,黄色标签):主成分含量高,纯度较差,杂质含量不做选择,只适用于一般化学实验和合成制备。 其他根据不同用途的要求,又可分为很多特定的等级。此类试剂质量注重的是:在特定方法分析过程中可能引起分析结果偏差,对成分分析或含量分析干扰的杂质含量,但对主含量不做很高要求。部分如下: 1、色谱纯(GC、LC):气相色谱、液相色谱分析专用。质量指标注重干扰色谱峰的杂质。主成分含量高。 2、指示剂(ID):配制指示溶液用。质量指标为变色范围和变色敏感程度。可替代CP,也适用于有机合成用。 3、生化试剂(BR):配制生物化学检验试液和生化合成。质量指标注重生物活性杂质。可替代指示剂,可用于有机合成。 4、生物染色剂(BS):配制微生物标本染色液。质量指标注重生物活性杂质。可替代指示剂,可用于有机合成。 5、光谱纯(SP):用于光谱分析。分别适用于分光光度计标准品、原子吸收光谱标准品、原子发射光谱标准品。 6、电子纯(MOS):适用于电子产品生产中,电性杂质含量极低。 7、当量试剂(3N、4N、5N):主成分含量分别为99.9%、99.99%、99.999%以上。 8、电泳试剂:质量指标注重电性杂质含量控制。 1.一级品即优级纯,又称保证试剂(符号G.R.),我国产品用绿色标签作为标志,这种试剂纯度很高,适用于精密分析,亦可作基准物质用。99.8% 2.二级品即分析纯,又称分析试剂(符号A.R.),我国产品用红色标签作为标志,纯度较一级品略差,适用于多数分析,如配制滴定液,用于鉴别及杂质检查等。99.7% 3.三级品即化学纯,(符号C.P.),我国产品用蓝色标签作为标志,纯度较二级品相差较多,适用于工矿日常生产分析。≥99.5% 初中化学实验常用仪器 分类名称图形主要用途使用时的注意事项 用于加热的仪器试 管 ①在常温或加热时用作 少量试剂的反应容器;② 用于少量物质的溶解或 收集少量气体或作简易 气体发生装置 ①加热前应擦干试管外壁,先预热 后加热,加热后不能骤冷; ②加热时,试管夹或铁夹应夹在试 管的中上部(距试管口1/3处); ③加热固体时,试管口要略向下倾 斜; ④加热液体时,液体不能超过试管 容积的1/3,且管口应与桌面成 45o角,试管口不能对着自己或 别人 蒸 发 皿 用于少量溶液的蒸发、浓 缩和结晶 ①可耐高温,能直接加热; ②蒸发皿中的液体不能超过其容积 的2/3,注意及时搅拌 ③热的蒸发皿应避免骤冷及被溅上 水,以防炸裂;③用完之后立即 清洗干净; 烧 杯 ①用作配制溶液 ②较大量试剂的反应容 器, ③也可用于加热 ①加热时,应擦干试管外壁并放在 石棉网上,以使其均匀受热; ②溶解固体时,要轻轻搅拌 锥 形 瓶 滴定中的反应器,也可收 集液体,组装洗气瓶加热要垫石棉网 圆 底 烧 瓶 用作加热或不加热条件 下较多液体参加的反应 容器 加热要垫石棉网 平底烧瓶用作加热或不加热条件 下较多液体参加的反应 容器 加热要垫石棉网 燃 烧匙少量固体燃烧反应器 可以直接加热;硫磺等物燃烧实验 应在匙底垫少许石棉或细砂 加热仪器酒 精 灯 用于加热 ①添加酒精时,不得超过酒精灯 容积的2/3,也不能少于1/3; ②严禁用燃着的酒精灯去点燃另 一只酒精灯; ③用酒精灯的外焰给物质加热; ④不加热时,应用灯帽盖灭,不可 用嘴吹灭 盛放物质的仪器细 口 瓶 用于盛放液体试剂不能用于加热; 广 口 瓶 用于盛放固体试剂,也可 以做洗气瓶 不能用于加热; 集 气 瓶 ①用作收集或贮存少量 气体; ②用于有关气体的化学 反应 ①不能用于加热; ②做物质在气体里燃烧的实验时, 如有高温固体物质生成,应预先在 瓶底铺一薄层细沙或装入少量的水 实验室危险化学品、易燃易爆物品安全使用管理规定 五华县潭江中学 为加强危险化学品的安全使用监督管理,根据中华人民共和国国务院《危险化学品安全管理条例》(国务院令第344号),特制定本管理规定。 一、危险化学品的范围 本规定所指危险化学品,是指中华人民共和国国家标准GB-86《危险货物分类与品名编号》规定的分类标准中的爆炸品、压缩气体和液化气体、易燃液体、易燃固体、自燃物品和遇湿易燃物品、氧化剂和有机过氧化物、毒害品和腐蚀品等七大类及国家经贸委、公安部、国家工商行政管理局《关于加强易制毒化学品生产经营管理的通知》(国经贸产业[2000]1105号)中的两大类易制毒化学品。 二、危险化学品的管理 1.使用、储存危险化学品必须建立危险化学品安全管理制度。 2.使用危险化学品必须按国家相关要求到指定的管理机关备案。 3.危险化学品需经保管员检查登记后方可经指定路线(或消防专用电梯)进入实验室。 4.使用、储存危险化学品需按制定危险化学品安全使用操作规 程。 三、危险化学品的储存 1.储存危险化学品要落实保管责任制,责任到人。保管人员调动应做好交接工作,并及时备案。 2.危险化学品应按规定分类、分项存放,相互之间保持安全距离; 3.危险化学品的存储量不得超过一个季度的用量或一个实验周期所需用量; 4.遇火、遇潮容易燃烧、爆炸或产生有毒气体的危险化学品,不得在露天、潮湿或低洼容易积水的地点存放; 5.受阳光照射易燃烧、易爆炸或产生有毒气体的危险化学品和桶装、罐装等易燃液体、气体应当在阴凉通风地点存放; 6.化学性质防护和灭火方法相互抵触的危险化学品,不得在同一储存室存放。 四、化学废弃物的处理 化学固体、液体废物处理前,必须按国家规范要求进行预处理和使用符合国家要求的包装、容器等存储,随时分级、分类收集,并在外包装醒目位置标明化学废弃物的内容、已经处理的工艺等,并应由专人负责妥善保管,在实验室定点存放,不得随意排放、丢弃、掩埋 管置于滴瓶内,酸和其它能腐蚀橡胶制品的液体(如液溴)不宜长期盛放 在瓶内。滴管用毕应及时放回原瓶,切记!不可“串瓶”。 干燥器用于存放需要保持干燥的 物品的容器。干燥器隔板下 面放置干燥剂,需要干燥的 物品放在适合的容器内,再 将容器放于干燥器的隔板 上。 灼烧后的坩埚内药品需要干燥时,须待冷却后再将坩埚放 入干燥器中。干燥器盖子与磨口边缘处涂一层凡士林,防 止漏气。干燥剂要适时更换。开盖时,要一手扶住干燥器, 一手握住盖柄,稳稳平推。 贮气瓶用做实验中短期内贮备较 多量气体的专用仪器。 贮气瓶等所有容器类玻璃仪器均不能加热,使用时也 切记骤冷骤热。 贮气前要检查气密性。 3、测量仪器 托盘天平称量药品(固体)质量,精 度≥。 称前调零点,称量时左物右码,精确至克,药品不能直接 放在托盘上( 两盘各放一大小相同的纸片),易潮解、腐 蚀性药品放在玻璃器皿中(如烧杯等)中称量, 温度计测定温度的量具,温度计有 水银的和酒精的两种。常用 的是水银温度计。 使用温度计时要注意其量程,注意水银球部位玻璃极薄 (传热快)不要碰着器壁,以防碎裂,水银球放置的位置 要合适。如测液体温度时,水银球应置于液体中;做石油 分馏实验时水银球应放在分馏烧瓶的支管处。 量筒粗量取液体体积(精确度≥)。无0刻度线,刻度由下而上,选合适规格减小误差,读数 同滴定管。不能在量简内配制溶液或进行化学反应,不可 加热。 容量瓶用于准确配置一定物质的量 浓度的溶液,常用规格有5、 10、25、50、100、150、200、 250、500、1000毫升等。 用前检查是否漏水,要在所标温度下使用,加液体用玻璃 棒引流,定容时凹液面与刻度线相切,不可直接溶解溶质, 不能长期存放溶液,不能加热或配制热溶液。回答要选用 的容量瓶时要带规格。 PH计测量溶液pH值用的仪器。以pH玻璃电极为测量电极。 酸式滴定管碱式滴 定管中和滴定(也可用于其它滴 定)的反应,可准确量取液 体体积,酸式滴定管盛酸性、 氧化性溶液,碱式滴定管盛 碱性、非氧化性溶液,二者 不能互代。 使用前要洗净并检查是否漏液,先润洗再装溶液,‘0’刻 度在上方,但不在最上;最大刻度不在最下。精确至,可 估读到.读数时视线与凹液面相切。 滴定管夹 移液管常用的移液管有5,10,25, 和50mL等规格。具有刻度的 直形玻璃管称为吸量管。常 用的吸量管有1,2,5,和1 0mL等规格。可准确到。 同一实验中应尽可能使用同一支移液管。移液管在使用完 毕后,应立即用自来水及蒸馏水冲洗干净,置于移液管架 上。 操作步骤 重铬酸钾的化学品安全技术说明书(MSDS) 第一部分:化学品名称 化学品中文名称:重铬酸钾化学品俗名:红矾钾 化学品英文名称: potassium dichromate 英文名称: 技术说明书编码: 601 CAS No.: 7778-50-9 生产企业名称: 地址:生效日期: 第二部分:成分/组成信息 有害物成分重铬酸钾;含量≥98.0% ;CAS No. 7778-50-9 第三部分:危险性概述 危险性类别:侵入途径: 健康危害:急性中毒:吸入后可引起急性呼吸道刺激症状、鼻出血、声音嘶哑、鼻粘膜萎缩,有时出现哮喘和紫绀。重者可发生化学性肺炎。口服可刺激和腐蚀消化道,引起恶心、呕吐、腹痛和血便等;重者出现呼吸困难、紫绀、休克、肝损害及急性肾功能衰竭等。慢性影响:有接触性皮炎、铬溃疡、鼻炎、鼻中隔穿孔及呼吸道炎症等。 环境危害: 燃爆危险:本品助燃,为致癌物,具强腐蚀性、刺激性,可致人体灼伤。 第四部分:急救措施 皮肤接触:脱去污染的衣着,用肥皂水和清水彻底冲洗皮肤。眼睛接触:提起眼睑,用流动清水或生理盐水冲洗。就医。 吸入:迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。如呼吸困难,给输氧。如呼吸停止,立即进行人工呼吸。就医。 食入:用水漱口,用清水或 1%硫代硫酸钠溶液洗胃。给饮牛奶或蛋清。就医。 第五部分:消防措施 危险特性:强氧化剂。遇强酸或高温时能释出氧气,促使有机物燃烧。与还原剂、有机物、易燃 物如硫、磷或金属粉末等混合可形成爆炸性混合物。有水时与硫化钠混合能引起自燃。与硝酸盐、氯酸盐接触剧烈反应。具有较强的腐蚀性。 有害燃烧产物:可能产生有害的毒性烟雾。 灭火方法:采用雾状水、砂土灭火。 初中化学实验常用仪器介绍 除上面介绍的九种仪器外,比较常见的仪器还有以下十几种。 化学实验操作及注意事项: 1. 药品的取用: (1)取用原则 ① “三不”原则:不摸——不用手接触药品。 不闻——不要把鼻孔凑到容器口直接闻药品气味。 不尝——不尝任何药品的味道。 ② 节约原则:若没有说明用量时,液体一般取1~2ml ,固体以盖满试管底部为宜。 ③ 处理原则:实验剩余药品既不能放回原瓶,也不能随便丢弃,要放在指定的容器内。 (2)取用方法 ① 固体药品一般放在广口瓶中,固体药品的取用:用药匙取, 块状——用镊子夹取,一横二放三慢立 固体粉末——用纸槽送入,一斜二送三直立 ② 液体药品的取用: a. 液体药品一般放在细口瓶(试剂瓶)中,取用时注意:瓶塞倒放,手握标签,瓶口紧挨试管口,回收一滴。 b. 少量液体药品可用滴管取用。一般做到“垂直悬空四不要”,即应在仪器的正上方垂直滴入,胶头滴管不要接触烧杯等仪器壁;不要平放或倒置,保持橡胶乳头在上;不要把滴管放在实验台或其它地方,以免沾污滴管;不能用未清洗的滴管再吸别的试剂,(但滴瓶上的滴管不能交叉使用,也不能冲洗)。 c. 定量取用——量筒读数时量筒必须放平稳,视线与量筒内液体凹底保持水平 注意:量筒的0刻度在下,读数时俯视——数值偏高(大) 仰视——数值偏低(小) 先将液体倾倒入量筒至接近刻度时,用滴管逐滴滴入至刻度值。 (3)浓酸、浓碱的使用 使用时注意保护眼睛,若不慎溅到皮肤、衣服或实验台上要采取相应的措施。 2. 托盘天平的使用: (1)构造:托盘、指针、标尺、平衡螺母、游码、分度盘。 (2)称量范围:砝码5~50g,精确称至0.1g(只用于粗略称量)。 (3)操作: ①称量前应把游码放在标尺的零刻度处,检查天平是否平衡。 ②称量时,左物右码,砝码用镊子夹,放砝码先大后小再游码。 ③称量后,复位,砝码放回砝码盒,游码移回零刻度处。 注意: (1)称干燥固体药品——两盘各放一张等质量的纸。 (2)称易潮解和有腐蚀性的药品——放在小烧杯等玻璃器皿中。 3. 连接仪器装置: 实验时常把玻璃导管、胶管、带孔的胶塞、试管、广口瓶等连接在一起组成一定的装置,连接仪器的顺序是从左到右,从下到上。玻璃管插入橡皮塞孔内的方法是:先将玻璃管的一端用水润湿,然后稍用力转动着插入。 4. 检查装置气密性: 组装完制取气体的装置时,一般先检查装置的气密性,只有气密性良好,才可装入实验用的药品。检查装置气密性的方法是:导管口入水,手贴管瓶壁;管口冒气泡,放手水回流;若无此现象,装置必漏气。夏天,当手温与室温相近时,可微热试管。 5. 物质的加热: (1)酒精灯的使用: 酒精量——不得超过酒精灯容量的2/3,不少于容积的1/4。 实验室各种常见试剂的味道 HCl(盐酸) 稀:比较酸,感觉嘴里滑溜溜的,典型的呕吐物感,微辣。 浓:极度的酸,吐掉以后回味苦,然后整个嘴里发凉,10分钟后好转。 H2SO4(硫酸) 稀:淡淡的酸味,回味感觉油腻,微热,甜,无任何不适感。 较浓的(40%左右的):超烫,感觉喝烫稀饭了,然后微甜感和痛感并存,持续2天才退(98%的纯正浓硫酸不敢喝)。 HNO3(硝酸) 稀:先是苦,然后整条舌头麻了,然后痛,起了白斑,持续疼痛,3-4天后消退,同时嘴里感觉大吸了一口汽车尾气。 浓:不敢喝(猜测是浓硫酸的加强版)。 NaOH(氢氧化钠) 稀:基本上同浓的Na2CO3(我尝过,咸的),多一些辣感(对蛋白质腐蚀性强的都会有辣感)。 浓:含在嘴里十分的辣(可能是已经反应起来了) 然后舌头烧坏,呈黄色,肉腐烂,1个月不能说话,口里有赤痛感而且舌头麻木有辛辣感半年后出院,说话变得不准,味觉几乎消失,嘴部留下疤痕(这东西对蛋白质的反应不是闹着玩的……)。 CuSO4(硫酸铜) 一开始没味道,吐出后回味淡淡的苦涩(我的确尝过)。 BaCl2(氯化钡) 极苦咸,大约相当于MgCl2的加强版 CCl4(四氯化碳) 这个最恐怖了,整个嘴里感到烧塑料的味道,极浓郁,吐掉以后出现说不出的怪异甜味,直感觉全身松软(的确,闻起来还可以,尝起来就郁闷了)。 Na2O2(过氧化钠) 一般的咸(Na盐基本都这个味道)。 无水酒精 嘴里完全没味道,之后花露水的味道在鼻子里挥之不去。 FeCl3)(氯化铁) 凉,然后酸,与硬币放嘴里感觉差不多(Fe盐都这味道)。 AgNO3(硝酸银) 没味道。。。 稀Br2(溴)水溶液 极其浓重味道,感觉像汽车尾气与松节油混合的味(只能如此形容) Hg(NO3)2(硝酸汞) 很淡的味道,有点像味精和醋混合了。 H2O2(双氧水) 特辣,赶紧吐了,之后就没什么事情了。 还有一个百度知道里面的: 极其微量的氰化物是苦的,宝贵资料啊。 乙酰水杨酸我试过有点酸,有点涩,最后有点苦尽甘来的那种感觉。 氯化钾的味道跟氯化钠差不多。 我尝过溴化氢,一不小心吸进去的。味道上没什么感觉,但是非常呛,吸进去很少,但是咳了一整个下午,一直到吃晚饭都反胃,印象深刻!实验室常用化学试剂的贮存和使用
试验室化学药品试剂管理制度
初中化学实验常用仪器介绍
常用化学试剂手册
九年级化学下册第1课时 化学实验常用仪器及药品的取用教案与教学反思
化学试剂分级
初中化学实验常用仪器
实验室危险化学品安全使用管理规定
高考化学实验常用仪器
重铬酸钾实验室常用化学品MSDS
初中化学实验常用仪器介绍
实验室各种常见试剂的味道