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实验七 动物染色体标本的制备与观察

实验七 动物染色体标本的制备与观察
实验七 动物染色体标本的制备与观察

实验七动物染色体标本的制备与观察

实验目的

1.初步掌握动物骨髓染色体标本制备过程,了解操作步骤的原理。

2.了解常用实验动物染色体的数目及特点。

实验原理

染色体的分析往往是选择细胞处于活跃增殖状态,或者经过各种处理后细胞进入分裂的动物组织。在正常动物体内,骨髓是处于不断分裂的组织之一。给动物注射一定剂量的秋水仙碱即可使许多处于分裂的细胞停滞于中期,然后采用常规空气干燥法制备染色体,即可得到大量可分析的染色体标本。在动物实验时,可在取材前经腹腔注射有丝分裂抑制剂,一般常用秋水仙素,这此方法对于动物的核型分析是非常有用的。本方法简便、可靠,不需要经体外培养和无菌操作,易于推广。因此骨髓细胞是用于动物细胞遗传学研究很好的材料。

实验用品

一、材料

无尾两栖类蛙属或蟾蜍属动物

二、器材

水平离心机、显微镜、刻度离心管(10ml)、注射器(1ml)、载玻片、烧杯(400ml)、量筒(100ml)、试管架、镊子、剪刀、解剖刀、吸管。

三、试剂

1.1%柠檬酸钠溶液:称取1g柠檬酸钠(柠檬酸三钠,Tri-sodium citrate, AR)溶解于100ml 蒸馏水中。

2.500μm/ml、100mg/ml秋水仙素溶液。

3.Giemsa(姬姆萨)原液(pH6.8)

Giemsa染粉1g

甘油(丙三醇,glycerine, AR)33ml

甲醇(methyl alcoholA, AR)45ml

将染粉倾入乳钵,加几滴甘油,在乳钵内研磨直到无颗粒为止,此时再将全部剩余甘油倒入,放入60~65℃保温箱中保温2h后,加入甲醇搅拌均匀,保存于棕色瓶中备用。

4.0.067mol/L磷酸盐缓冲液(pH6.8)

Na2HPO4·12H2O 11.81g

(或Na2HPO4·2H2O 5.92g)

KH2P04 4.5g

溶解于蒸馏水中至1000 ml。

5.1:10 Giemsa磷酸缓冲液(pH6.8):取1ml 姬姆萨原液用9ml 0.067mol/L 磷酸盐缓冲液(pH 6.8)稀释即可。当天临时配制,一天后失效。

6.甲醇7.冰醋酸8.0.4% KCl

实验方法

1. 动物按30μg/g体重的剂量经腹腔注射秋水仙素,3~4h后杀死动物.取出动物后肢的胫骨和股骨。剪去两端。

2.将1ml 1%柠檬酸钠用lml注射器接上5"针头注入骨髓腔.将骨髓细胞先冲入离心管,反复冲洗直至股骨变为灰白色,取下注射器针头(或用吸管),反复吸打骨髓细胞,使细胞团块分散成单个细胞。

3. 视骨髓量之多寡加入事先预热至26±0.5oC的0.4%KCl溶液8ml.随即将离心管置26±0.5℃水溶中低渗20-30min。

4.以l 000r/min离心8min。

5. 弃上清液,沿离心管壁缓慢加入新配制的甲醇:冰醋酸(3:1)固定液5ml,加固定液时注

意不要冲动细胞团块。

6.加完固定液后,立即用吸管将细胞轻轻吸打均匀,静置固定20min。如此反复固定2~3次,每次20min。

7 固定的细胞经离心(l 000r/min离心8min。)后,吸去上层固定液,视管底的细胞多寡加入少量新配制的固定液,将细胞团块轻轻吸打成悬液。

8.在干净、湿、冷(最好低温处理一下,冰片容易使细胞固定)的载玻片上滴2-3滴上层细胞悬液,立即用口向同一方向吹,使细胞染色体分散,在酒精灯上文火烘干(在空气干燥的地方可不用,室温下晾干)。

9.将玻片标本平放于支架上,细胞面朝上,每片滴加1: 10 Giemsa磷酸盐缓冲液3-4ml,染色10min。

10.在自来水管下细流冲洗数秒,去掉Giemsa磷酸盐缓冲液,用小块纱布擦干玻片标本底面和四周,显微镜观察和分析。

实验结果:在显微镜下可观察到染色体被Giemsa磷酸盐缓冲液染为紫红色。

作业:绘制染色体图。

实验十人类染色体g显带技术及g带核型分析

实验十人类染色体G显带技术及G带核型分析 实验目的 1、初步掌握染色体G带标本的制备技术。 2、了解人类染色体的G显带的带型特征。 实验用品 1、材料:常规方法制备的中期人类染色体标本(标本片龄不超过30天为宜)。 2、器材:显微镜、恒温培养箱、烤箱、恒温水浴箱、冰箱、染色缸、小镊子、玻片架、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸。 3、试剂:%胰蛋白酶溶液、%EDTA溶液、胰蛋白酶一EDTA混合液、%生理盐水、蒸馏水、Giemsa原液、Giemsa稀释液、1/15mol /L磷酸缓冲液。 实验原理 人们将用各种不同的方法,以及用不同的染料处理染色体标本后,使每条染色体上出现明暗相间,或深浅不同带纹的技术称为显带技术(banding technique)。本世纪70年代以来,显带技术得到了很大发展,且在众多的显带技术中(Q带、G带、C带、R带、T带),G带是目前被广泛应用的一种带型。因为它主要是被Giemsa染料染色后而显带,故称之为G显带技术,其所显示的带纹分布在整个染色体上。 研究发现,人染色体标本经胰蛋白酶、Na0H、柠檬酸盐或尿素等试剂处理后,再用Giemsa 染色,可使每条染色体上显示出深浅交替的横纹,这就是染色体的G带。每条染色体都有其较为恒定的带纹特征,所以G显带后,可以较为准确的识别每条染色体,并可发现染色体上较细微的结构畸变。关于G显带的机理目前有多种说法,例如,Lee等(1973)认为染色体上与DNA结合疏松的组蛋白易被胰蛋白酶分解掉,染色后这些区段成为浅带,而那些组蛋白和DNA结合牢固的区段可被染成深带。有人认为,染色体显带现象是染色体本身存在着带的结构。比如用相差显微镜观察未染色的染色体时,就能直接观察到带的存在。用特殊方法处理后,再用染料染色,则带更加清楚,随显带方法不同,显出来的带特点也不一样,说明带的出现又与染料特异结合有关。一般认为,易着色的阳性带为含有AT多的染色体节段,相反,含GC多的染色体段则不易着色。总的来说,G显带的机理还未搞清。 内容与方法 一、人类染色体G显带标本制备 1、胰蛋白酶法 ①将常规制备的人染色体玻片标本(未染色的白片)置70℃烤箱中处理2小时,然后转入37℃培养箱中备用,一般在第3~7天进行显带。 ②取%的胰蛋白酶原液加生理盐水至50ml,配成%的工作液并用NaHCO3调pH值至7左右。 ③将配好的胰蛋白酶工作液放入37℃水浴箱中预热。 ④将玻片标本浸入胰蛋白酶中,不断摆动使胰蛋白酶的作用均匀,处理1~2分钟(精确的时间自行摸索)。 ⑤立即取出玻片,放入生理盐水中漂洗两次。 ⑥染色。将标本浸入37℃预温的Giemsa染液(1:10的Giemsa原液和的磷酸缓冲液)

实验动物学理论考试题

第一章复习题 1、何谓实验动物?实验动物学的研究内容? 2、3R的含义及拼写? 3、何谓动物福利,动物的五大自由? 4、实验动物在医学生物学中的地位和作用? 5、实验动物科学发展史上的里程碑是什么? 6、我国实验动物法规建设如何? 第二章复习题 实验动物遗传学控制分类 近交系的定义、特点及命名法 亚系、重组近交系、同源突变近交系、同源导入近交系的定义和命名 封闭群动物实验动物的定义、特点及命名法 杂交群动物实验动物的定义、特点及命名法 第三章思考题 1、普通级动物、清洁动物、SPF动物、无菌动物的概念。 2、不同等级的实验动物对实验结果的影响。 2、人兽共患病、动物烈性传染病主要病原体的名称。 3、淋巴细胞脉络丛脑膜炎、鼠痘、狂犬病、流行性出血热等疾病的传染源、传播途径、易感者和症状表现。 第四章复习题 1、实验动物营养学的概念。 2、实验动物饲料含的六大营养成分。 3、体内不能合成维生素C的实验动物有哪些。 4、啮齿类、兔、犬和猴的营养需要。 5、常用的实验动物饲料消毒灭菌方法 第五章复习题 1、实验动物的环境、外环境和内环境的概念? 2、以R=(A+B+C)×D+E说明环境控制的重要性。 3、影响实验动物的环境因素有哪些? 4、国标中对实验动物小鼠动物实验屏障设施的温度、湿度、噪声有哪些要求? 第六章复习题 1、屏障设施的概念? 2、屏障设施运行的四要素有哪些?各有何特点? 3、常用的小型独立实验动物设备有哪些? 4、在无人协助的情况下你如何应用清洁级小鼠在实验动物屏障设施内进行动物试验? 第七章复习题 各种动物的主要生物学特性及在医学生物学中的应用 第八章复习题 1、免疫缺陷动物 2、转基因动物(Transgenic animals) 3、克隆动物(cloning animal) 1、何谓实验动物和实验用动物? 实验动物(Laboratory animals)是指经人工饲育,对其携带的微生物实行控制,遗传背景明确或者来源清楚的,用于科学研究、教学、生产、检定以及其他科学实验的动物。

染色体标本的制作及组型观察

染色体标本的制备及组型观察 【实验目的】 1. 掌握染色体标本制作的基本方法; 2. 认识不同生物的染色体的状态,学会做染色体组型图。 【制作染色体标本的意义】 了解染色体的特征(形态、大小、数目)一一绘制染色体组型图 【染色体组型图的应用】 ①生物学方面:根据染色体特征鉴别生物及种类:兔44条;小鼠40条;大鼠42条; 鸡78条;猫38条;狗78条;人46条;马64条 ②临床医学方面:主要用于遗传性疾病的诊断和研究: 十21三体综合症:是21对常染色体多一条,此种人“先天愚型”,或称“伸舌样白痴” J卵巢退化症:45 XO,外貌表现为女性,卵巢发育不全或无, 1.5米以下,不能生育。 .睾丸退化症:47 XXY,外貌为男性,比一般男性高,睾丸发育不全,有女性样乳房, 智力低下或超常,不能生育,发声尖高。 因此,染色组型实验广泛应用于胎儿遗传性疾病早期诊断中(抽羊水做组型) 【染色体标本制作的原理】 ------------------ 选择活跃的组织:胸腺,骨髓,睾丸,小肠“ 细胞具有旺盛尸 _________________ 的分裂能力卞 制作染色体标彳J施加药物使细胞分裂:PHA 本的先决条件 设法得到大量的分裂中期细胞:秋水仙素 1. PHA促进细胞分裂,使淋巴细胞返幼,变成淋巴母细胞。 2. 秋水仙素:破坏微管装配,使纺锤体不能形成,使大量细胞停在分裂中期。 3. 空气干燥:使细胞与染色体展开。 4. 低渗作用:水进入细胞内,细胞内容空间变大,染色体间的距离变大,易于染色体分散开。 5. 固定:用Camoy s solution,作用使蛋白变性,对染色体内的组蛋白讲,变形后硬度增力口,保持了染 色体的“即时形态”对细胞膜蛋白讲,变性使细胞膜硬度增强,形成屏障作用,防止了细胞内物质外溢 和丢失。 【实验用品】

常用实验动物

常用实验动物 1、小鼠 喜欢群居,怕热,高温容易中暑 雌雄性小鼠交配后10~12小时,在雌性小鼠阴道口会形成白色的阴道栓 主要解剖学特性 消化系统:食管内壁有角质化鳞状上皮,利于灌胃;有胆囊;胰腺分散,色淡红,似脂肪组织。 生殖系统:雌性小鼠为双子宫型,呈“Y”形,卵巢不予腹腔相通,无宫外孕。 骨髓为红骨髓,无黄骨髓,终身造血。 皮肤无汗腺。 小鼠常用品种、品系 1. 近交系小鼠 C3H:1975年从美国引进,野生色毛; ? C57BL/6:1975年从日本引进,黑色毛; ? BALB/c:Bagg1913年获得小鼠白化株,经近亲繁殖20代以上育成,毛色为白色; ? DBA:分为DBA/1和DBA/2两个品系,1977年由美国实验动物中心引进,毛色均为浅灰色。 2、封闭群小鼠 ①KM小鼠:我国使用量最大的远交种小鼠,白色,抗病、适应力强,繁殖、成活率高。 ②ICR:1973年由日本国立肿瘤研究所引入我国,白色,其显著特点是繁殖

力强。 ③LACA :1973年由英国实验动物中心引入我国,白色。其实是小鼠改名而成。 ④NIH :由美国国立卫生研究院培育,白色,繁殖力强,幼仔成活率高,雄性好斗 3、突变系 1、裸鼠:第11对染色体上的裸基因(nu)导致无毛裸体、无胸腺 2、SCID小鼠:第16对染色体上的Scid隐性基因突变基因导致T、B淋巴细胞联合免疫缺陷.外观与普通小鼠差别不大,被毛白色,体重发育正常 3、快速老化模型小鼠:4~6月龄以前与普通小鼠的生长一样,4~6月龄以后迅速出现老化症状。如心、肺、脑、皮肤等器官老化,出现骨质疏松和老化淀粉样变。侏儒症:比正常小鼠体型小,缺少生长素和促甲状腺素,用于内分泌研究。小鼠在医学、生物学的应用 1、重组近交系小鼠将双亲品系的基因自由组合和重组产生一系列的子系,是遗传分析的重要依据,用作基因定位及其连锁关系的研究 2、提供自然的动物模型 2、大鼠染色体数2n=42 喜独居,喜啃咬,性情较凶猛、抗病力强,对新环境适应力强,但对环境刺激、炎症反应敏感。强烈噪音可引起食仔或抽搐;湿度低于40%易发生环尾巴症。行为表现多样,情绪反应敏感,易接受通过正负强化进行的多种感觉指令的训练雌性2.5月龄达到性成熟,具有产后发情、产后妊娠的特点。寿命2.5~3年。解剖学特征

教科版科学四年级下册《动物的卵》公开课教案附实验观察记录单

动物的卵 一、教学目标 科学概念: 1、认识到很多动物都要产卵,且卵有相似的基本构造。 2、知道卵在合适的条件下会发育成动物。 3、知道青蛙、鸡这样繁殖后代的方式叫做卵生,靠卵繁殖后代的动物叫卵生动物。 过程与方法: 1、让学生经历一次对动物的卵进行观察和探究的过程。 2、在观察的基础上能对研究的问题进行推测,并通过进一步的观察和查阅资料寻找证据。 情感态度价值观: 培养乐于探究动物繁殖奥秘的兴趣,感受自然界生命的多样性和延续行。 二、教学重点 1、认识到很多动物都要产卵,且卵有相似的基本构造。 2、知道青蛙、鸡这样繁殖后代的方式叫做卵生,靠卵繁殖后代的动物叫卵生动物。 三、教学难点:让学生经历一次对动物的卵进行观察和探究的过程。 四、教学准备: 1、电脑课件:各种各样动物的繁殖活动图片、各种动物的卵的图片、鸡蛋的知识及小鸡的孵化过程影片、青蛙卵的发育繁殖过程影片。 2、学生收集关于动物卵的知识的资料。 3、教师为每组准备鹅蛋、鸭蛋、乌鸡蛋、鹌鹑蛋各1枚,2枚生鸡蛋、半个熟鸡蛋,小盘子一个,放大镜一个. 五、教学过程: (一)观图激趣,质疑引入 师:春天到了,植物们忙着发芽生长,刚过夏天就开始孕育果实、种子,繁殖后代。动物们也不甘落后,同学们看!它们在做什么?(电脑课件:动物繁殖图片) 对了,这些小动物们都在为繁殖他们的后代而努力, 你知道动物用什么方式繁殖后代吗?(胎生、卵生) 哪些动物是用蛋(卵)生吗?(归类) 师:科学家把动物的蛋叫做卵。(科学家把我们平时说的‘蛋’叫做卵,学生怎么说你都可以接话题)今天我们就来研究动物的卵。 板书: 动物的卵 (二)观察探究、探索真相。 1、观察动物的卵: (1)出示脑课件:各种动物的卵的图片:一起来看看,卵是什么样的 师:你能说说它们有什么不同和相同的地方? 学生:观察后汇报观察结果:1、都是圆形的;2、有的透明有的不透明;3、颜色不同……) 问:这些卵有哪些不同呢?(此句为环节转换) 你能猜到是什么原因造成卵的差别这么大呢?(动物种类不同)

小白鼠染色体标本的制作染色与观察

小白鼠染色体标本的制作、染色与观察 姓名:学号:实验时间: 1.实验目的 (1)初步掌握小鼠睾丸细胞染色体标本的基本制作过程和Giemsa染色法,了解各操作步骤的原理。(2)了解常用实验动物染色体的数目及特点。 (3)认识不同生物染色体的特征。 2.实验原理 凡处于活跃增殖状态或者经过各种处理,任何动物组织的细胞都可进入分裂时期,均可用于染色体分析。在正常动物体内,精巢和骨髓均为是活跃分裂的组织。给动物注射一定剂量的秋水仙素,即可使许多处于分裂的细胞停滞于中期,然后采用常规空气干燥法制备染色体,即可得到大量可分析的染色体标本。本方法简便、可靠,不需要经体外培养和无菌操作,易于推广。骨髓细胞是用于动物细胞遗传学研究很好的材料。但在取材方面,精巢又比骨髓要简易一些,故本实验选用小鼠的精巢为实验材料。 对于小鼠精巢染色体标本的制作,一般包括以下几个要点:①用一定剂量的秋水仙素破坏纺锤丝的形成,使细胞分裂停滞在中期, 使中期染色体停留在赤道面处;②用低渗法使细胞膨胀, 以至于在滴片时细胞胀破, 使细胞的染色体铺展到载玻片上;③空气干燥法可使细胞的染色体在载片上展平,经Giemsa染色后便可观察到染色体的显微图象。 Giemsa染色是最常用的染色方法之一,适用于多种细胞和染色体染色。主要用Giemsa染液可以将细胞核染成紫红色或蓝紫色,胞浆染成粉红色,在光镜下呈现出清晰的细胞及染色体图像。3.实验材料和用品 (1)材料:小白鼠 (2)试剂:秋水仙素、生理盐水(0.9%的NaCl溶液)、0.3%KCl低渗溶液、固定液(甲醇:冰醋酸=3:1)、Giemsa染液 (3)器材:解剖盘、解剖镊、解剖剪、小烧杯(×2)、吸管、玻璃刻度离心管、恒温水浴锅、离心机、铜网、预冷载玻片、记号笔、普通光学显微镜、玻璃等 4.实验步骤 (1)小白鼠染色体标本制作 ①取雄性小鼠以每克体重4μg注射秋水仙素,经14~16小时后,断头法杀死小鼠,取出睾丸用生理盐水(0.9%的NaCl)洗去血污。 ②放入装有1ml 0.3%KCl液的小烧杯中剪碎至呈乳白色。 ③用铜网过滤到刻度离心管中,再加0.3%KCl液至4ml。 ④37℃静置30分钟,进行低渗处理。 ⑤以800~1000转/分离心8分钟。 ⑥弃上清液,加入2ml甲醇·冰醋酸固定液(3:1),并用吸管至管底吹气,轻轻打散细胞,固定8分钟。 ⑦再以800~1000转/分离心8分钟。 ⑧弃上清液,加1ml固定液,再制成细胞悬液,固定5分钟。 ⑨取洁净的低温预冷载片,距载片10~15cm高度滴下2~3滴细胞悬液,从载片一边向另一边轻轻吹气,并同时轻轻敲打载片,以使细胞均匀分布和促使染色体展开。

生物课堂观察记录表单

生物课堂观察记录表单 作业3-2:“国培”课堂观察记录表单 提交日期: ,,,?年,月10日学生物年七教材人教版课生物与环境组科级版本题成的生态系统观察视角二、怎么教观察者: 朱然俊网络班级台山市初中生物,班学员朱然俊 观察视点观察记录 主要是通过图片观察,获取信息,将日常知识片段整理,1.先学后教:能否通过预学~暴 形成生物学的系统知识露学习中的问题, 通过问题情境,完成了教学目标,使学生获得有关生态系2.以学定教:能否针对学生的问 统的概念,以及食物链和食物网的概念题有效教学, 课堂主要以启发式的提问展开教学,引领学生形成新概念 3.课堂提问:启发式提问的次数~ 无效提问的次数, 采用多媒体课件,教师的示范性的实验操作没有出现 4.示范操作:教师能否示范高水 平操作行为, 通过板书示范食物链的书写 生态系统的概念解析,训练题型多样 5.变式训练:能否分层设计变式 训练题, 没有出现分层的训练题 概念出现后,及时检测,测评学生概念是否当堂掌握。 6.当堂检测:能否当堂检测学习通过“动物园是否是一个生态系统,”这一问题,来检测学效果~及时反馈回授, 生对生态系统的理解,进行反馈检测学生确实掌握了这一

概念 通过图片和实例分析形成食物链和食物网的概念, 7.平衡教学:能否将探究式教学 与有意义接受式教学相结合, 本课的推进可以看出,教师的专业素养很扎实,学生的学补充视点: 习注意力一直很强,一般常态课很难达到 课堂时间布局不太合理,分析概念的时间略多,课堂小结 没有进行。学生回答问题,思考的时间太短,学生回答时, 不停的被教师打断,不利于学生的问题暴露教学改进建议:

人体外周血淋巴细胞染色体制备与观察实验方案

实验方案 实验外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备,染色体组型分析 一、实验目的 1、了解动物细胞培养的方法。掌握人体外周血淋巴细胞培养与染色体标本制备。 2、初步掌握人类染色体G-带的显示方法及人类染色体G-带在染色体识别中的意义。 3、熟悉人类染色体的镜下检查和核型分析方法。初步掌握人类染色体G带的特征及其 识别。 二、实验原理 所谓外周血培养即是将外周血接种在适当的培培养物中加入适量的秋水仙素,使纺锤体微管解聚,这样细胞停留在中期,可以获得大量的分裂细胞。用低渗盐溶液(一般是0.075mol/L的KCl)处理,使其中的红细胞及分裂相细胞膜和一部分细胞质除去,最后以气干法制片,可获得较好的染色体养基中进行培养。人类外周血细胞本来是终末分化细胞,一般没有分裂能力,但经PHA(植物血球凝集素)或ConA等药物刺激后,转变成可分裂的转化细胞。 染色体显带是将染色体标本经过一定程序处理,并用特定染料染色,使染色体沿其长轴显现明暗或深浅相间的横行带纹――染色体带,这种技术,称为染色体显带技术。通过显带,人们可以准确地识别每一条染色体及染色体上的各个区段,并可发现染色体上较细微的结构变化。 在所有的显带技术中,G显带(G banding)是最常见的显带技术,它是将染色体标本用碱、胰蛋白酶或其它盐溶液处理后,再用Giemsa染液染色,在普通显微镜下,可见深浅相间的带纹,称G带(G band)。G显带方法简便,带纹清晰,染色体标本可以长期保存,因此被广泛用于染色体病的诊断和研究。 正常人类染色体的数目为46条(23对),1960年的Denver会议和1963年的London会议制定了统一的人类染色体命名体制:按照染色体的相对长度、臂比和着丝粒指数,将常染色体(22对)按大小用阿拉伯数字标记,顺次排列为1~22号,性染色体用X和Y标记;并按染色体大小和着丝粒位置,把人类染色体分为七个组,用大写字母A~G表示。 染色体经显带处理后,每条染色体都显示出其特定的带纹特征(见下表)。根据这些特征,可以准确地识别每条染色体,检出染色体数目或结构畸变。 表1 人染色体组型及其特征

实验五 人类染色体标本制备

实验五人类染色体标本制备 【目的要求】 1.熟悉人外周血淋巴细胞培养的原理。 2 3 【实验原理】 人类间期细胞核中的遗传物质染色质,在细胞进入分裂期时,经逐级螺旋形成染色体。 在分裂期的中期,染色体达到最大程度的凝集,表现为短而粗的典型结构。人外周血的有形 成分中,只有白细胞有核,而白细胞中只有淋巴细胞(主要是小淋巴细胞)具有潜在的细胞分 裂能力。 培养液中加入有丝分裂刺激剂植物血凝素(PHA)可使处于G0期、具有潜在分裂能力的淋 巴细胞转化为具有分裂能力的淋巴母细胞,并进入旺盛的有丝分裂周期;加入纺锤体抑制剂 秋水仙素可使处于分裂过程的淋巴细胞停滞在分裂中期,在收获细胞时,用低渗剂0.075 mol/L KCl对细胞进行低渗处理,可使胞膜胀破,染色体均匀分散;经离心、固定、制片等 过程,最终可获得便于观察分析的染色体标本。 制备的染色体标本片,不经特殊处理,直接染色,在显微镜下观察识别,并进行核型分 析的过程称为染色体非显带核型分析。 【实验用品】 (一) 材料:人外周静脉血。 (二) 器材:吸管、刻度离心管、量筒、5ml注射器、6号针头、台式离心机、试管架、 冷藏载玻片(一端磨砂)、铅笔、酒精灯、超净工作台、恒温水浴箱、载玻片、止血带、酒 精棉球、显微镜、废液缸。 (三)试剂 1. RPMI1640培养液 (1) RPMI1640:RPMI1640固体培养基10.4 g,溶于1000 ml双蒸水中,抽滤除菌。 (2) RPMI1640培养液:每100 ml RPMI1640培养液中含RPMI 1640 80 ml、灭活的小牛血 清20 ml、PHA 50 mg、青霉素(终浓度100 U/ml)、链霉素10000 μg (终浓度100 μg /ml), 15磅、20min高压灭菌的NaHCO3调pH至7.2~7.4,分装20小瓶,每瓶5 ml。 (3) 配制方法 配制过程所需的玻璃器具先用浅水洗刷干净,烘干,放入清洁液中浸泡2 d,取出后用自来水冲洗15次,蒸馏水冲洗3次,双蒸水冲洗1次,烤干后包装,15磅20 min高压灭菌。 新瓶塞等橡胶类制品用水洗刷后,用0.5mol/L NaOH煮沸20min,自来水冲洗;用0.5mol/L HCl煮沸20 min,自来水冲洗,蒸馏水冲洗,在双蒸水中浸泡24h;浸泡后取出晾干,包装后高

动植物观察记录

蒜生长的观察记录 2014年10月20日 今天妈妈在菜市场买了一塑料袋大蒜。我想:这么多,反正好长时间才能吃完,为什么不拿一瓣大蒜去做发芽实验呢?于是,我拿了挑了一瓣大小中等、健康的大蒜,放在平地碗中,杯子里适当加了一些清水,放在餐厅的桌子上,开始观察。 2014年10月26日 下午放学后,回家的第一件事就是观察:大蒜有没有什么变化?只是发现泡大蒜的清水变得浑浊了,有点泛黄泛黄的,还有些刺鼻的大蒜味。 清水变浑浊这个问题我觉得很奇怪,便上网查资料,资料上讲:清水之所以那么浑浊,是因为大蒜在清水里泡了一整天,清水把大蒜的味道和颜色吸收了,大蒜的外皮和底部有些物质溶进水中,所以清水才会那么浑浊不清。并且不需要换新水,这种浑浊的水的营养价值很高,这样的话,蒜苗才能更快的成长。 大蒜在水中贪婪地吸收着水分,像一个花苞一样,总觉得比原来胖了一些。 2014年11月1日

早晨起来,路过餐厅时,眼前的景象不禁令我大吃一惊:大蒜终于发芽了。我盼星星盼月亮终于盼到了这一天!小芽从大蒜的尖上冒出来,一两个绿中透黄。 但是,我发大蒜下没有长根!一般的植物都是先长根后发芽,而大蒜为什么这么“另类”呢?原来,大蒜芽很长的时候,根还是很短,这时的营养靠块茎自身胚芽供给。 啊!大蒜多么“与众不同”,神奇啊! 2014年11月6日 不经意之间发现小蒜苗长得真快呀!呀!眨眼工夫,就窜了那么高,用尺子量了一下最高的4厘米,蒜苗尖微微泛着黄色,这时突然发现,大蒜下冒出了根!大蒜根为弦线状须根,黄白色、无根毛,根长0.5-1厘米不等,这些根就像柔滑的丝带,装饰着成长的蒜苗显得大蒜可爱又生动。 我很奇怪,为什么大蒜生长得这么快?原来,大蒜每年6月收获,在炎热的夏季进行休眠,到了潮湿而温暖的气候,就会从休眠中醒来,发芽生长,开始新一轮的生长周期。这是蒜在适应环境过程中形成的生长习性。 2014年11月11日 一早起床,我看见大蒜最长的有14厘米了,而且有一两个蒜苗长出了两三个叶子了。

(完整word版)实验动物学(选择题-1)

二、单项选择题(每题只有一个正确答案) 第一章医学实验动物学概论(5) 1.国际实验动物科学协会的简称是____。(A) A.ICLAS B.CIOMS C.IUBS D.WHO 2.《实验动物管理条例》是____年经国务院批准,由国家科技部颁布的第2号令,这是我国政府颁布的一部实验动物管理法规,是全国实验动物工作的法律依据和管理准则。(D) A.1981年B.1983 年C.1986年D.1988年 3.实验动物科学自____诞生以来,至今已成为一门具有自己理论体系的独立性学科。(C) A.19世纪50年代B.19世纪70年代C.20世纪50年代D.20世纪70年代 4.____的出现,为分子生物学、特别是人类功能基因组学研究提供了最好的技术平台。(A) A.转基因动物B.无菌动物和悉生动物C.免疫缺陷动物D.近交系动物 5.我国《实验动物质量管理办法》是国家科技部和国家技术监督局于____联合制发的。(B) A.1993年12月B.1997年12月C.2000年12月D.2004年12月 第二章医学实验动物学标准(16) 1.为保持封闭群动物的遗传异质性及基因多态性,引种动物数量要足够多,小型啮齿类封闭群动物引种数目一般不能少于____对。(C)A.15 B.20 C.25D.30 2.至少连续20代的全同胞兄妹交配培育而成,品系内所有个体都可追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先,是指____。(A) A.近交系B.封闭群C.杂交群D.重组系 3.下列属于封闭群命名的是____。(B) A.A(F87) B.NIH C.B6D2FI D.CXBl 4.以非近亲交配方式进行繁殖生产的一个实验动物种群,在不从其外部引入新个体的条件下,至少连续繁殖4代以上,称为____。(B) A.近交系B.封闭群C.杂交群D.重组系 5.由不同品系或种群之间杂交产生的后代,称为____。(C) A.近交系B.封闭群C.杂交群D.重组系 6.不携带所规定的人兽共患病病原和动物烈性传染病的病原的动物是——。(A) A.普通级动物B.清洁动物C.无特定病原体动物D.无菌动物 7.除普通动物应排除的病原外,不携带对动物危害大和对科学研究于扰大的病原的动物是——。(B) A.普通级动物B.清洁动物C.无特定病原体动物D.无菌动物 8.除清洁动物应排除的病原外,不携带主要潜在感染或条件致病和对科学实验干扰大的病原的动物是——。(C) A.普通级动物B.清洁动物C.无特定病原体动物D.无菌动物 9.设施符合动物居住的基本要求,不能完全控制传染因子,适用于饲育教学等用途的普通级实验动物,该环境是——。(A) A.普通环境B.屏障环境C.隔离环境D.半屏障环境 10.环境设施适用于饲育清洁级实验动物及SPF实验动物,该环境严格控制人员、物品和环境空气的

幼儿园幼儿观察记录表

鄞州区学府实验幼儿园幼儿观察记录表 观察主题好玩的汽车观察者胡丹丹班级小一班童宇航 姓名焦焦、 性别男年龄 4 时间2010-10 乐乐 今天早上,我和往常一样组织幼儿玩区域活动,孩子们都来到了自己喜欢的区域,有的玩娃娃家、有的玩数学屋、有的玩巧手坊、还有的 玩玩具和建构区。让我发现与往常不一样的是有的孩子拿着汽车玩具来 到了建构区,出于好奇,想看看他们究竟会怎么玩这个汽车,所以也没 背景有阻拦。我看到他们把积木玩具搭成了滑滑梯,童宇航真拿着两辆不一 分析样的汽车在开呢。在他一旁真玩积木的乐乐也想玩开汽车,便和童宇航·商量能否给个她玩玩,童宇航说:“哪里还有汽车的,你拿来和我一起 情景玩。”乐乐真的去拿来了一辆汽车,他们真拿着汽车比赛。 描述他们比了一次又一次,在比赛时由童宇航说:预备——开始,可由于滑板太窄,汽车老掉下来,玩了一会乐乐就不高兴玩了,便走了。这 时在一旁一直看他们玩的焦焦便走来说:“童宇航我们一起玩吧。”童宇 航说好。童宇航用高的木头在脚,而焦焦用了矮的木头做脚,每一次焦 焦都输给了童宇航。 在游戏中幼儿只是为玩而玩,他们有权利选择在游戏中玩什么、怎样玩、和谁玩等等,他们是游戏的主人。幼儿游戏是一种快乐的、满足 分析需要和愿望的、自发的、不同寻常的行为,注重的是游戏的过程体验,·而对游戏会有什么样的结果并不在乎,他们想玩就玩,不想玩就停止; 行动不同年龄幼儿游戏的特点是不同的,同一年龄段的幼儿也是有差异的。·由于对幼儿游戏的特点缺乏充分的认识,成人对幼儿游戏时,往往会以 思考自己的制定标准去看待不同的幼儿,对他们游戏的不同水平缺乏真正的·了解,出现几种类型的“重轻失调”现象,即重知识技能的掌握,轻情 反思感及社会性的发展;重游戏的预成结果,轻幼儿的实际能力水平;重游戏的逼真性,轻幼儿在游戏中的创造性的发挥;重直接的语言指导,轻 幼儿在游戏中的自由探索;重游戏的结果,轻游戏的过程体验;重游戏

个案观察记录表修订稿

个案观察记录表 内部编号:(YUUT-TBBY-MMUT-URRUY-UOOY-DBUYI-0128)

培养学生认真倾听能力——实验班级课堂观察记录表(四) 授课内容:《司马光》 时间:2012年5月29日地点:一(6)班教室学生人数:48人记录人:韩冰 低年级的语文课有一块是识字教学,枯燥的识字教学总会让老师叫苦连天,学生的识字兴趣更加不大。例如:识字课上,让学生口头组词,一些孩子不顾一切地高高举手喊:“我!我!”当叫到他时,他心满意足地回答,然后,叫别人回答时,一些孩子就只管自己玩或说话不再去关注别人的回答,而当我叫了别人回

答,而没有叫他的时候,这些孩子兴奋劲就一下子没了,真的跟泄了气的皮球似的,至于别人说什么,并不在意,也不理会。因此,我在教学过程中改变一些教学方式:首先为学生树立起倾听的榜样。低年级学生的表达能力比较弱,因此有时在回答一个问题时会牛头不对马嘴,或者是滔滔不绝,自说自话。这个时候我也耐心地听孩子把话说完,在孩子的意识里他肯回答问题就是参与进了学习。而孩子的这种回答很可能会引起其他同学的哄笑或者议论。这时我会适时的引导孩子倾听他人的发言。其次,把学生的注意力引到自己的讲课思路上。设计的思路要既精辟简洁,又新颖有趣,选择一些学生感兴趣的话题,创设情境尊重学生的情感体验,不断地多角度多层次地吸引学生的注意力,让学生在亲历中体验。最后,学生相互评价。让学生在一节课的结束时互相评一评这着课的表现,对于良好习惯的养成也是一个有力的举措。总之适时恰当地评价学生,学生认真倾听的好习惯就会稳定形成。 曾有这么一句名言:“播下一种行为,收获一种习惯;播下一种习惯,收获一种性格;播下一种性格,收获一种命运。”这段话我们都听到过,良好的学习习惯形成后,会对学生今后的学习产生深远的影响。可见,习惯的力量是巨大的。 培养学生认真倾听能力”课堂观察记录及反思(五) 澄迈县加乐中心学校颜小玉 一、学生课堂倾听观察记录情况 培养学生认真倾听能力——实验班级课堂观察记录表授课内容:苏教版小学数学四年级上册《找规律》 活动时间:2012年5月20日 活动地点:四(5)班教室 参加人员:数学中心组全体教师,学生60人。

常见动物实验中实验动物的选择

常见动物实验中实验动物的选择 一、药理学研究中的选择 1、临床药物代谢动物学研究:首选动物及性别,应尽量与药效量或毒理学研究所用动物一致。 药物动力学参数测定:最好使用犬、猴子等大动物,可在同一动物上多次采样。药物分布实验:大、小鼠较方便。药物排泄试验:一般首选大鼠,胆汁采集可在乙醚麻醉,胆管插管引流。 2、一般药理研究 主要药效作用以外广泛药理作用的研究。动物:小鼠、大鼠、猫、犬等性别不限。 3、作用于神经系统的药物研究: 促智药:成年大小鼠一般应用幼年、老年鼠。 镇静催眠药:成年小鼠便于分组。 抗痛药:成年大小鼠,以雄性为宜。 镇痛药:需在整体动物上进行,常用成年小鼠、兔,也可用豚鼠、犬等,雌雄兼用。 中枢性肌松药:小鼠、猫。 解热药:首选兔。兔:品种、年龄、室温、动物活动情况等不同,对发热反应速度和程度有明显影响,应按药典规定进行。 神经节传导阻滞影响药物:首选猫,最常用的是颈神经节,因其前后部易于区分。 4、心血管系统的药物研究: 抗心肌缺血药:狗、猫、兔、大小鼠。 抗心率失常药:豚鼠。小鼠不便操作。 降压药:狗、猫、大鼠。不宜用兔:外周循环对外界环境刺激极敏感,血压变化大。 治疗心功能不全药:狗、猫、豚鼠、兔。一般不用大鼠。 降血压药:大鼠、兔。模型动物:遗传性高脂血症WHHL兔。 抗动脉粥样硬化药:一般用兔、鹌鹑。 抗血小板聚集药、抗凝血药:大鼠、兔,个别也可用小鼠。 5、呼吸系统药物: 镇咳药筛选:首选豚鼠,对化学刺激或机械刺激都很敏感。猫:生理条件下很少咳嗽,可用于刺激喉上神经诱发咳嗽,在初筛基础上进一步肯定药物的镇咳作用。犬:适用于观察药物的镇咳作用持续时间。 兔:对化学、电刺激不敏感。大小鼠:实验可靠性差。 支气管扩张药:常用豚鼠:气道平滑肌对致痉剂药物反应敏感。大鼠:某些免疫和药理学特点与人类较近。 祛痰药:一般用雄性小鼠,兔、猫。 6、消化系统药物: 胃肠解痉药:大鼠、豚鼠、家兔、犬等,雌雄均可。 催吐、止吐:犬、猫、鸽等。兔、豚鼠、大鼠,无呕吐反射,故不选用。 7、泌尿系统药物: 利尿、抗利尿药:雄性大鼠或犬为好。 8、内分泌系统药物:

人外周血染色体标本制备

人外周血染色体标本制备 一、培养基的选择与接种 培养基主要的作用是为培养的细胞提供营养,以让其更好的生长。其基本成分有双抗(青霉素和链霉素)、水、PHA、小牛血清、酚红等。小牛血清和植物血凝素偏高或偏低,以及PH值均会影响染色体的分裂。反复冻融的培养基对培养的效果也不好,一因PHA随着不断的解冻其效价也不断降低,二是因为含有细胞DNA生长必须的氨基酸,而此氨基酸会随不断的解冻而消失。培养基颜色改变及浑浊均不能再用。 接种血液时,视不同年龄群的人而异。小孩或者新生儿接种量比成人少,因为小孩和新生儿的白细胞比成人的高很多。血液太少,细胞稀薄并且生长速度减慢;血液太多,会造成培养细胞生长时营养成分不够,影响细胞的生长状态。 二、秋水仙素 其作用是阻断纺锤体拉向两级,使正在分裂的细胞停留在分裂中期,以便获得大量中期的分裂相以分析染色体之用。使用秋水仙素时应注意使用时间、作用时间、浓度、量等。一般而言,在收获细胞前1.5-2h加入。加入过多,染色体太短;反之,染色体瘦长或无中期分裂相。 三、低渗 这是染色体制备中关键的环节,目的是使淋巴细胞吸收水分而膨胀和中期染色体分散铺展。低渗效果与处理的时间、低渗的温度,低渗时吹打混匀细胞的力度有关。一般用 0.075mol/L的KCL。低渗时间不够,染色体分散不好,细胞粘连,呈团状;低渗时间过长,可是细胞破碎,染色体丢失,甚至会因染色体胀大得过分和使其形态结构模糊不清,变得难以消化及染色。一般加入8毫升,于37度水浴箱中低渗20-30min为好。 四、固定 为了维持染色体的固有形态。固定液可使细胞脱水,蛋白变性而使染色体粗大适中。注意:固定液需要现配现用,因为固定液所含的水分与固定效果有关。吹打细胞时,要注意用力,以免细胞丢失过多,因为低渗后的细胞很脆弱。 五、滴片 先制成细胞悬液,浓度适中,随个人喜好。但不因太浓,因其会使染色体分散程度受限。也不宜太淡,以免滴片时细胞分裂相稀少。一定要注意好温度、湿度的关系,这是要点。一般制片两张,然后置于75摄氏度烤箱中烘烤3h。

个案观察记录表

早上,排队时间,李德勋小朋友一边走一边拿着不知道从哪儿拿来的广告纸在撕,纸屑洒了一路,当我正要进行制止的时候,发现车俊哲落在了队伍的后面,他一边走,一边在捡掉在地上的纸屑。我让队伍停了下来,看看地面上的碎纸,先请李德勋说说为什么要这样撕纸、丢纸?他说觉得很好玩。我再请孩子们说说自己的感受,然后再把车俊哲请到前面来,让他跟大家说说自己为什么要捡这些纸屑,他说觉得弄脏了操场。在这样的情境下,我请小朋友们来评评谁做得好谁做得不好?为什么??通过对比,孩子们知道了不能随地乱丢纸 屑,要尊重别人的劳动果实。 分析与说明措施 李德勋小朋友是个留守儿童,父母打工在外,平时都由外公外婆带着,很宠他,几乎什么都顺着他,所以他是个较随心所欲的孩子,撕纸只是觉得好玩而已,并没有想到这样会弄脏操场。而车俊哲的家长是比较注重对孩子的培养的,在一些行为规则方面,家长都要求得较到位,卫生习惯也培 养得很好。 我抓住了这个教育契机,让孩子们自己在对比中得出了哪样做比较好,哪样做不好的结论。然后找时间再让孩子们一起来打扫操场,使他们知道了扫地的大伯的辛苦及不易,从而知道要去尊重别人的劳动果实。这样随机的教育,比我们在活动中刻意的去营造 气氛、说教有效得多。

挂上的步骤图进行自学的,这步骤图本是想特别用一次正式的教育活动来向孩子们进行教育的,可一直没能去实施,没想到,在环境的影响下,孩子们学会了自学,这是可喜的。 分析与说明措施 开展卫生习惯的课题研究以来,我们一直努力去地让孩子在各种活动中潜移默化地得到良好习惯的培养,一路走来,孩子们都得到了一定的发展。特别是这个学期进行了家长团队的建设后,家长的老师之间的联系密切了,随时都能知晓孩子在家或在园的情况,交换培养建议,共同进行教育,孩子们的进步是很大的。 马上及时地在全班孩子面前进行表扬和鼓励,班上的孩子也都在学着开始自学,现在个个学得有模有样了。从这个小例子,也让我们看见了,“教”固然是一种方式,可是有计划地去“育”,从侧面去影响孩子,让他们自己去感受,去学习,效果更胜于去刻意地“教”。 培养学生认真倾听能力——实验班级课堂观察记录表(四) 授课内容:《司马光》 时间:2012年5月29日地点:一(6)班教室学生人数:48人记录人:韩

人类染色体G显带标本的制备

人类染色体G显带标本的制备 一、原理 常规制备的染色体标本经烤片后,用热碱、各种蛋白酶、尿素、去垢剂或其它溶液等预处理再以Giemsa 染色,在油镜下可看到染色体两臂显示出着色深浅不同的横纹。最常用的是胰蛋白酶法。 可能的机理是:G带区含有较丰富的A-T 对,在间期核呈固缩状态,而且是DNA晚复制区之一。Giemsa染料在G带区是与DNA结合,而且与结合DNA的染色质非组蛋白有关。Giemsa染料是噻嗪--曙红染料,染色体的着色有赖于在原位形成噻嗪--曙红(2∶1)的沉淀物。着色首先取决于二个噻嗪分子同DNA结合,在此基础上再结合一个曙红分子,其次取决于一个疏水环境,以利于染料沉淀而着色。通过胰酶的显带预处理可除去阴性G带区的疏水蛋白,或使它们的结构变成更亲水状态。由此可知,在G显带中抽取的蛋白往往是疏水的,且主要来自阴性G带区。 二、试剂及器材 (一)试剂:胰蛋白酶、0.4%酚红、5% NaHCO3、Giemsa原液、pH7.4磷酸盐缓冲液,0.85%生理盐水 (二)器材:37℃恒温水浴箱、染色缸、刻度吸管、滴头 三、实验步骤 1、取胰酶25mg,溶解于盛有50 ml0.85%生理盐水的染色缸中,置37℃恒温水浴箱中,加入0.4%酚红2滴,混匀,以5% NaHCO3调节pH为6.6-7.0。 2、待胰酶液温度升至37℃后,将染色体标本片(37℃烘箱烤片3-7天)放入胰酶液中,并轻轻摆动,3-7秒后取出,立即自来水冲洗。 3、染色: pH7.4磷酸盐缓冲液 4.5 ml Giemsa原液0.5 ml 染色8-10分钟。 自来水冲洗,空气干燥,镜检。 四、注意事项 1、良好的培养效果为,标本片上中期分裂相要多,且染色体分散要好。 2、染色体长度应能适应显带分析技术的要求。 3、G显带成败之关键取决于胰酶液的浓度和处理时间之搭配。 五、实验结果 低倍镜下可看到中期分裂相,进而转至高倍镜及油镜下观察,可见23对染色体较为饱满,分布均匀,着色较好,沿染色体长轴可显出深浅不同的G带横纹。

染色体标本制作与观察 实验报告

姓名班级 13级生命基地班学号同组者 科目细胞生物学实验实验题目染色体标本制作与观察 【实验题目】 染色体标本制作与观察 【实验目的】 1、掌握小鼠睾丸细胞染色体标本的基本制作过程和Giemsa染色法,了解各操作步骤的原理。 2、了解常用实验动物染色体的数目及特点。 3、认识不同生物染色体的特征,学会做染色体组型图。 【实验材料与用品】 1. 器材:显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、手术剪、解剖盘、胶头滴管、离心管、离心机、 小烧杯、冰箱、酒精灯、小烧杯等 2. 材料:小鼠 3. 试剂:蒸馏水、0.9% NaCl溶液、0.3% KCl溶液,固定液(甲醇:冰醋酸=3:1)、 秋水仙素 【实验原理】 一、制作染色体标本的先决条件 ①细胞具有旺盛的分裂能力:选择活跃的组织,如胸腺、骨髓、睾丸、小肠;或施加药物使 细胞分裂(PHA) ②设法得到大量的分裂中期细胞:利用秋水仙素 二、染色体 染色体是基因的载体。真核细胞染色体的数目和结构是重要的遗传特性之一。制备染色体标本是细胞学最基本的技术之一,优良的染色体制片是进行染色体显带、组型分析、原位杂交等的先决条件。 染色体的制备在原则上可以从所有发生有丝分裂的组织和细胞悬浮液中得到。最常用的途径是从骨髓细胞、血淋巴细胞、、和组织培养的细胞中制备染色体。本实验采用的方法是

姓名班级 13级生命基地班学号同组者 科目细胞生物学实验实验题目染色体标本制作与观察 从小鼠的睾丸细胞中获取。 染色体的形态结构在细胞增殖周期中是不断的运动变化的,一般在有丝分裂中期,染色体形态最典型、最易辨认和区分。因此,制备染色体标本获取的是中期细胞。 染色体特征:数目、长度(绝对长度、相对长度)、着丝粒位置(M/SM/ST/T)、随体与次缢痕的数目大小和位置、带型分析 描述染色体的四个参数: ①相对长度=(每条染色体的长度)/(单倍常染色体之和+X染色体)*100,相对长度可以 用来表示每条染色体的长度。 ②臂指数=(长臂的长度)/(短臂的长度),臂指数可以用来确定臂的长度。 ③着丝粒指数=(断臂长度)/(染色体全长)*100,着丝粒指数可以决定着丝粒的相对位 置。 ④染色体臂数(NF),根据着丝粒的位置来确定。 三、操作原理 小型动物的染色体制片最好最有效的材料就是骨髓组织(由于分裂活动旺盛,睾丸也可)利用睾丸细胞的制片技术虽然需要离心以及细致的操作,但基本程序并不复杂。在小鼠睾丸中,细胞有丝分裂和减数分裂比较旺盛,因此不需要体外培养就可以直接得到分裂中期细胞。通过小鼠睾丸得到染色体比较简便,一般不需要无菌操作。用秋水仙素作为有丝分裂的抑制剂,将其注入到小鼠腹腔中,可以阻止分裂细胞纺锤体的形成。 由于小鼠睾丸细胞分裂活动旺盛,具有高度的分裂能力,本次实验通过前处理、低渗、固定、制片染色等步骤制得染色体标本,可观察到许多处于分裂中期的染色体,可以进行染色体组型分析。 Giemsa染色法的染色结果:细胞核染成紫红色、细胞质和核仁染成蓝紫色 四、制作染色体标本的意义 了解染色体的特征(形态、大小、数目)——绘制染色体组型图 染色体组型:把真核动物一个体细胞各染色体按长度、形状、着丝粒位置排列成一定顺序。 染色体核型:某一物种特有的一组或一套染色体的形态特征。

常用实验动物的种类与应用

常用实验动物的种类与应用 了解常用的实验动物的种类与应用范围,对组织实施实验研究有着不可低估的作用。当确立了实验研究题目及目标后,选择合适的实验动物对进行必要的研究是一项重要的工作。现将机能学实验教学中常用的动物用途简介如下: 一、家兔 家兔品种很多,目前我国实验用的家兔主要有以下三种。 1.中国本兔又称白家兔,毛色多为纯白,红眼睛,是我国长育的一种品种,成年兔体重1.5~3.5 kg。 2.青紫兰兔(山羊青兔或金基拉兔)毛色银灰色,成年兔体重2.5~3.5 kg. 3.大耳白兔(日本大耳白兔)毛色纯白,红眼睛,两耳长大,血管清晰,便于静脉注射和采血,成年兔体重4~5 kg. 家兔常用于机能学实验教学的各项实验中,如直接记录呼吸、血压、泌尿调节、减压神经放电、膈神经放电、观察药物对心脏的影响、了解心电图的变化、中枢神经兴奋药实验、药物对肠平滑肌的影响、药物中毒及解毒,复制许多病理过程和疾病,如水肿、炎症、电解质紊乱、酸碱平衡紊乱、失血、出血性休克、DIC、肺癌、动脉粥样硬化、高脂血症、心律失常、慢性肺心病、慢性肺动脉高血压、肺水肿、肝炎、胆管炎、阻塞性黄疸、肾性肾小球肾炎、急性肾功能衰竭。由于家兔体温变化比较敏感,也常用于研究发热、解热药和检查致热源等。 二、小白鼠: 小白鼠能用于药物的筛选,半数致死量的测定,复制许多病理过程和疾病,如水肿、炎症、缺氧、多种癌、肉瘤、白血病、多种传染病、慢性气管炎、心室纤颤等。 小白鼠做实验动物有以下特点: 1.小白鼠是实验室最常用的一种动物,价格低廉,便于大量繁殖,对动物实验同种、纯种、性别和年龄的要求,比较容易满足,生活条件也容易控制。因而只要符合实验要求,应尽量采用。它特别适用于需要大量动物的实验,容易满足统计学的要求。如药物的筛选,半数致死量的测定和安全实验,用于药物的效价比较及抗癌药的研究等。小白鼠也适用于避孕药的实验。 2.小白鼠对许多疾病有易感性,因而适用于研究下列疾病。如血吸虫病、疟疾、流感、脑炎等病。小白鼠的纯种品系很多,每系有其独特性,对某些疾病易感。如C1HA系,对癌瘤敏感,C5a系则抗癌;因此,纯系小白鼠广泛应用于各种肿瘤的研究。 3.当研究指标主要是观察组织学,特别是观察电镜下的结构时,应用小白鼠的器官较小,可节省人力、物力。如用于研究慢性气管炎时肺的变化。 4.小白鼠具有发达的神经系统,能应用于复制神经官能症模型。 5.小白鼠对外界环境适应性较差,不耐冷热,经不起饥饱,比较娇嫩;因此,做实验时要耐心细致,动作要轻,不然会干扰实验结果。 三、大白鼠: 大白鼠常用于复制许多病理过程和疾病,如水肿、炎症、缺氧、休克、DIC、胆固醇、肉芽肿、心肌梗塞、肝炎、肾性高血压、各种肿瘤等。 大白鼠做实验动物有以下特点: 1.大白鼠与小白鼠相似,便于大量繁殖,对动物实验同种、纯种、性别和年龄的要求,比较容易满足,生活条件也容易控制,适合于需要大量动物,而当小白鼠不能满足实验要求时。如:不对称亚硝酸胺口服和胃肠道外给药,能诱发大白鼠食道癌,而在小白鼠则很少引起食道癌;因而,在这种情况下,采用大白鼠较为适合。

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