批内方差
批内标准差
批间标准差
总标准差
批内不精密度CV
批间不精密度CV
总不精密度CV
4.2评价标准：检测系统不精密度要求：以能力验证/室间质评评价界限作为允许总误差（TEa），重复性精密度<1/4TEa；中间（室内）精密度<1/3TEa； --------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------医学实验室
ISO 15189
认可性能验证实验方案
为了满足目前医学实验室认可的需求保证实验室检测结果的准
确性，特制定本方案。适用于强生
VITROS
产品的试验项目的性能验
证，
包括
V250/V350/V950/FS5.1//V3600/V5600
上所能开展的所有定
性检测项目。本方案从准确度、精密度、参考范围、线性范围以及方
法学比对
5
个方面对各个试验项目进行评价。
一、
精密度
（
Precision
）
：
精密度是指在规定条件下所获得的
检测结果的接近程度，
表示测定结果中随机误差大小程度的指标。
精密度通常用不精密度表示。
可以分别评价连续精密度
（批内精密度）
、
重复性不精密度（中间精密度，包括批间、日间精密度等）和再现性
精密度。
本方案采用批内和天间两种方法对各个试验项目的精密度进
行评价。
全部实验过程使用同批号试剂和质控品，
并且保证检测当日
质控在控。
1
、
批内精密度（连续精密度）：
方法：
在检测患者标本过程中，连续运行高低水平质控品各
20
次，
记录检测结果。计算批内精密度的
CV
值和
SD
值。
结果评价
（
1
）厂家评价标准：计算精密度指数
=
验证
SD/
厂商
SD
，
精密度指数要求小于等于
1
，或者实测
CV
小于等于厂家要求的
CV
，
两者符合其一即可。具体见《精密度评价》表格。
（
2
）按照国际推荐标准：批内精密度应在
CLIA88
允许误
差的
1/4
以内，见美国
CLIA
’
88
能力比对检验的分析质量要求。
2
、天间精密度（中间精密度）：
方法：
同样使用两个水平的质控品，若需复溶冻干质控品做实验，要
注意选择产品的稳定性和瓶间差。
要严格控制每次复溶冻干品时的操
作手法。连续测试
20
天，每天检测
1
次。在次过程中不能更换试剂批
号及质控品批号，
是否需要重新定标则取决于实验室。
测试完成后记
录检测结果。
结果评价
（
1
）厂家评价标准
:
计算天间的
SD
及
CV
值，并计算精密度
指数
=
验证
SD/
厂商
SD
。精密度指数要求小于等于
1
，或者实测
CV
小于
等于厂家要求的
CV
，
两者符合其一即可。
具体见
《精密度评价》
表格。
（
2
）按照国际推荐标准：批内精密度应在
CLIA88
允许误
差的
1/3
以内，见美国
CLIA
’
88
能力比对检验的分析质量要求。
二、准确度
准确度
(accuracy)
指检测结果与被测量物真值之间的接近程度。
是
分析测量范围、分析灵敏度以及生物参考区间评价的基础。
准确度的评价方法很多，比如检测定值参考物质，同参考方法进
行比对，同有溯源性的检测系统进行方法学比对，卫生部临检中
心质评的汇报结果均可以作为评价准确性的方法之一。本方案采
用测定定值标准物质的方法来评价各个检测项目的准确度。定值
标准物质采用厂家定值标准品。
方法：
（
1
）
试
验期间保证机器状态正常，保证试验当日室内质控在控。
（
2
）
按
厂家要求准备各个项目的新批号定标品
（要与定标时使用
的定标品批号不同）各一套，按照标准复溶。
（
3
）
记
录该新批号定标品的定值。
（
4
）
在
设备上检测各个定标品
（多水平）
的相关项目，
每个水平
重复
2
次，记录检测结果，将检测结果录入《准确度评价》
表格。
结果评价：
（
1
）
厂
家标准：
按照各定标品各水平的定值和不确定度
（厂家提供）
，
来确定准确度的偏倚范围。计算实测均值的各项目各水平定标
品的偏倚，与偏倚范围相比较，来判断偏倚是否可以接受。详
见《准确度评价》表，实测的均值如果落在该限度内，则为其
准确度认为可被接受。
（
2
）
按
照国际推荐标准：
准确度偏倚应该在
CLIA88
允许误差的
1/2
以内，见美国
CLIA
’
88
能力比对检验的分析质量要求。
三、
参考范围验证
参考
NCCLSC28
一
A2
文件，本方案仅对厂家提供的或者实验室正在使
用的各个项目的参考范围进行验证。
方法：
（
1
）选择
20
个能够代表实验室的健康总体的标本。
（
2
）保证试验系统运行正常，依照标准操作程序检测标本。
（
3
）运行该
20
份标本，记录结果，将结果填入《参考区间验证》表
格。
结果评价
如果
20
个参考个体中不超过
2
例的检测值在验证的参考限之外，厂
商或提供参考区间的实验室报告的
95%
参考区间可以接受。如果
3
例
以上超出界限，再选择
20
个参考个体进行验证，若少于或等于
2
个
观测值超过原始参考值，则可接受，若还有
3
个超出参考限，需要重
新检查各种条件，决定是否建立自己的参考区间。
四、
线性范围
分析测量范围即定量检测项目的线性范围，
是整个检测系统
（包
括仪器、试剂、校准品、质控品、操作程序、检验人员等）对应于系
列分析浓度的仪器最终输出的信号间是否呈恒定比例的性能，
是一个
很重要的仪器性能分析指标。
本实验通过测定不同配比比例的高低值新鲜患者标本，
以验证实测值
和理论值的线性关系，来评估每个检测项目的线性范围。
方法
：
（
1
）
实
验室人员必须十分熟悉仪器的操作、质量控制和定标方法，
以及正确的收集样本。试验期间保证仪器状态良好下，质控在
控。
（
2
）
全
部实验数据尽可能在较短的时间内收集，如可能，单个分析
试验最好在一天内做完。
（
3
）
用
于验证线性范围的标本类型应与临床测试所用的标本类型相
同或相类似，
所有标本应不含厂家所标定的干扰因素
（如溶血、
黄疸、脂血等）。如果上述条件不可避免，则应在最后的报告
中注明在评价实验中所用的标本处理方法或基质类型。注意
收集的高浓度标本应尽可能的接近线性范围高限。
（
4
）
按
照《线性评价》表格要求配比标本。将
H
和
L
样品按
: 5L
、
4L+IH
、
3L+2H
、
2L
十
3H
、
lL
十
4H
、
5H
关系各自配制棍合，
形成系列评价样品。
（
5
）
难
以收集到低限样品，可收集高值样品，用相应稀释液作系列
不同程度稀释，形成系列评价样品。
（
6
）
在
《线性评价》表格记录检测结果。
结果评价：
将数据填入
《线性评价》
表格，
以
X
表示各样品的预期值，
以
Y
表示各样品的实测值，得出散点图。
若所有实验点呈明显直线趋势，
用直线回归对数据进行统计，
得
直线回归
Y=bX+a
，若
r2>0.95
，斜率
b
在
1.00
±
0.03
范围内，可直
接判断测定方法在实验所涉及的浓度范围内成线性。
五、用患者标本进行方法比对及偏倚评估
实验室准备用一个新的检测系统或测定方法
(
或新的试剂盒、新仪器
进行病人标本测定前，应与原有的检测系统或者公认的参考方法
-
起
检测一批病人标本，
从测定结果间的差异了解新检测系统或方法引人
后的偏倚。如果偏倚不大，
或者偏倚量在允许误差范围内，说明两检
测系统或方法对病人标本测定结果基本相符，
新检测系统或方法替代
原有检测系统或方法不会对临床引人明显偏倚，
这样的实验称为
方法
学比较实验。在方法学比较中，常将新方法称为实验方法，与之比较
的方法称为比较方法。
试验方法：
（
1
）
各
种仪器处于良好的工作状态，严格按
SOP
操作。
（
2
）
检
验人员有足够的时间熟悉检测系统的各个环节，熟悉评价方
案。
（
3
）
在
整个实验中，保持实验方法和比较方法都处于完整的质量控
制之下，始终对实验结果有校准措施。
（
4
）
实
验时间至少做
5
天，
时间长一些更好，
可以客观反映实际情况。
（
5
）
至
少做
40
份病人标本，多一点更好。
（
6
）
尽
可能使
50%
的实验标本分析物的含量不在参考区间内，
各个标
本分析物含量越宽越好。
（
7
）
不
要使用对任一方法有干扰的标本。
（
8
）
每
份标本应有足够的量，以便使实验方法和比较方法都能做双
份测定。例如，第
l
次序号为
1
、
2..3..4
、
5..6
、
7
、
8
，
第
2
次序号为
8
、
7
、
6
、
5
，，
4
、
3
、
2...1
。两方法都
按此实验。
（
9
）
应
在
2
个小时内两种方法对同批标本分别开始实验，
最好使用当
天采集的标本。
（
10
）
实验结束后，记录数据。保留原始数据。
结果评价：
（
1
）
不
采用已明确有人为误差的结果。
（
2
）
将
所有无明显误差的实验结果记录下来。但是，若两种方法结
果的各自差值大于任一方法的批内不精密度，应查对标本，并
重新实验。若找不出原因，应保留数据备考。
（
3
）
整
个实验一定要有内部质量控制，失控时结果必须重做。
（
4
）
对
实验数据的初步筛查：
①设比较方法测定结果为
X
值，实验方法测定结果为
Y
值。在
《方法学比对》
表格上录入检测数据，
若有
40
个标本，
则有
80
个
X
和
Y
的结果。
②检查每一方法内现份测定值有无离群表现，先计算每一标本
每一方法成对结果的差值和差值的均值。
以
4
倍的各方法差值的均值
为判断限，
各方法内标本的成对差值都应在限值内，
说明双份测定结
果符合要求。
③若原数据仅
40
例病人标本的结果，
剔除的数据应另做实验补
上。若有
1
例以上需剔除，
应检查原因是标本原因，其他数据仍可使
用。无法找出原因，则保留使用所有数据。若最大差异超过临床允许
误差，应从仪器、试剂、方法上寻找原因，停止继续实验。
（
5
）
在
《方法学比对》
表格上，
以
X
均值
、
Y
均值和
(Y-X)
、
X
作图，
通过这两种图了解线性关系
，
即有无明显离群点，
是否呈恒定变异等
情况。如果实验结果具良好线性关系，继续处理数据。
（
6
）
X
、
Y
关系实验点有无离群表现
先看图在无明显离群点。
若无，
可作以后的统计；
若有，
应对
X
、
Y
配
对值作离群值计算。
将每一个标本两个方法的前后两个测定值一一对
应，求出第
1
个
X
与第
1
个
Y
的差值和第
2
个
X
与第
2
个
Y
的差值，
并计算出所有标本总的平均差值，
以
4
倍的平均差值为判断限值。
所
有差值都不应超出限值。若有，为离群点，仅一点离群点，剔除。有
（
3
）
整
个实验一定要有内部质量控制，失控时结果必须重做。
（
4
）
对
实验数据的初步筛查：
①设比较方法测定结果为
X
值，实验方法测定结果为
Y
值。在
《方法学比对》
表格上录入检测数据，
若有
40
个标本，
则有
80
个
X
和
Y
的结果。
②检查每一方法内现份测定值有无离群表现，先计算每一标本
每一方法成对结果的差值和差值的均值。
以
4
倍的各方法差值的均值
为判断限，
各方法内标本的成对差值都应在限值内，
说明双份测定结
果符合要求。
③若原数据仅
40
例病人标本的结果，
剔除的数据应另做实验补
上。若有
1
例以上需剔除，
应检查原因是标本原因，其他数据仍可使
用。无法找出原因，则保留使用所有数据。若最大差异超过临床允许
误差，应从仪器、试剂、方法上寻找原因，停止继续实验。
（
5
）
在
《方法学比对》
表格上，
以
X
均值
、
Y
均值和
(Y-X)
、
X
作图，
通过这两种图了解线性关系，
即有无明显离群点，
是否呈恒定变异等
情况。如果实验结果具良好线性关系，继续处理数据。
（
6
）
X
、
Y
关系实验点有无离群表现
先看图在无明显离群点。
若无，
可作以后的统计；
若有，
应对
X
、
Y
配
对值作离群值计算。
将每一个标本两个方法的前后两个测定值一一对
应，求出第
1
个
X
与第
1
个
Y
的差值和第
2
个
X
与第
2
个
Y
的差值，
并计算出所有标本总的平均差值，
以
4
倍的平均差值为判断限值。
所
有差值都不应超出限值。若有，为离群点，仅一点离群点，剔除。有
一点以上离群点，需查原因，判断是否保留数据。若原因不清，不能
随意剔除，全部保留作统计分析，或者用一批新标本重做评价。凡有
剔除的，应另用标本补做。
（
7
）
标
本内分析物含量分布是否适当的检验。相关系数
r
常用来表
示两个变量间互相关系密切的程度。
在直线回归统计时，除所
有实验点和回归线间的离散度会影响
r
值的大小外，实验点对
应的分析物含量分布宽度也会明显影响
r
值的大小。若实验点
过于密集，尽管离散度不大，但
r
值偏小。因此，可用
r
检验
X
取值范围是否适当。
一般要求
r
大于或等于
0.975
(
或
r2
大于或
等于
0. 95)
，认为
X
范围是适合的。若
r
小于
0.975
时，应再
多做实验，扩大数据范围。
（
8
）线性回归统计
可用直线回归分析来估计斜率和截距。
数据以回归式
Y=bX
十
a,
表示这
些数据的直线趋
.
这是以
X
方法为准，
Y
方法与之配合的关系式。式
中
b
为斜率
,a
为截距
。
两方法理想状态的回归式应为
Y=X
，
即
b
=1
，
a=0
。根据临床使用要求，可在各个临床医学决定水平浓度
Xc
处，
了解
Y
方法引人后相对于
X
方法的系统误差
(SE) , SE == | (b -1)Xc
+ a |
。
（
9
）以美国
CLIA
’
88
能力比对检验的分析质量要求允许误差的
1/2
为判断依据，
由方法学比较评估的系统误差
(SE)
不大于允许误差，
认
为系统误差在可接受水平内
备注：
1
、
各个实验室应该根据自己的实际情况，
建立性能验证的方法和
标准。该方法适用于科室内所有生化设备的验证。
2
、
上述试验方案可用于强生
Vitros
系列产品，
仅供实验室参考。
参考文献：
1
、
临床检验质量管理技术，冯仁丰
，上海科学技术文献出版
社
2
、
临床检验方法学评价
，杨有业
张秀明，人民卫生出版社
3
、
NCCLS
，
Method Comparison and Bias Estimation Using
Patient Samples; Approved Guideline
—
Second Edition
4
、
NCCLS
，
Evaluation of the Linearity of Quantitative
Measurement Procedures: A Statistical Approach;
Approved Guideline
5
、
NCCLS
，
Evaluation of Precision Performance of
Quantitative Measurement Methods; Approved
Guideline
—
Second Edition