往复式磨耗仪的实验方法
技术领域
[0001]本发明涉及一种摩擦、磨损领域技术，特别是涉及一种直线往复式滑动摩擦磨损测试装置及方法。
背景技术
[0002]两体间的勻速直线、往复相对滑动磨损是一种常见的两体磨损形式。经一定周期磨损后，材料的磨损失重、以及两体材料间的最大静摩擦或滑动摩擦系数、或与其他材料间的最大静摩擦或滑动摩擦系数，是材料的重要基础指标。例如，美军标MIL-PRF-24667B (SH) 提出了以下测试要求：(1)耐磨性测试：钢缆轴线与试板测试面平行，对钢缆均勻施加额定载荷，使之压在试板上，钢缆轴线与运动方向垂直，二者进行额定行程的勻速直线、往复相对运动，单向行程不小于225mm，从而在试板上形成225mmX 150mm的磨损平面，测量若干磨损周期后试板、钢缆的失重。(?摩擦系数测试：经若干磨损周期后，将橡胶滑块平放在涂层的磨损平面上，施加额定正压力，二者进行额定速度和额定行程的水平相对运动，行程不小于25_，用力矩传感器测量最大静摩擦力，计算出最大静摩擦系数。
[0003]该测试条件具备如下四个技术特征：(1)可实现两体在较长单向行程内的勻速直线、往复相对滑动磨损。(2)在一定磨损周期后，可测试两体材料与其他材料间的最大静摩擦系数。(3)可设置直线滑动速度、载荷与行程。(4)可完成线缆、板材、块体等不同结构形式样品的摩擦磨损试验。
[0004]目前的滑动磨损测试方法大致可分为三类：
[0005]一是摩擦盘与摩擦副对磨形式。依靠摩擦盘的旋转，形成摩擦盘的外圆或端面与摩擦副的相对滑动磨损，只能实现两体间的单向滑动，两体材料均为块体材料。当摩擦盘的外圆与摩擦副发生相对滑动磨损时，摩擦盘的磨损面即外圆，摩擦副的磨损面为弧面。磨损面往往受材料的特性、制样水平、设备精度等的影响，而产生不规则形状。虽可测量磨损过程中二者间的滑动摩擦阻力，但滑动摩擦系数实际上只具有相对意义。而且经一定周期磨损后，两体间的最大静摩擦系数，以及任一材料与第三种材料间的最大静摩擦或滑动摩擦系数无法测量。当摩擦盘的端面与摩擦副发生相对滑动磨损时，摩擦盘的磨损面即端面上的环状平面，摩擦副的磨损面为平面。虽然磨损面为规则的平面，也可测量磨损过程中二者间的滑动摩擦阻力，但磨损面上的线速度因半径差异而不同，不同部位的磨损状态存在显著差异，滑动摩擦系数实际上
也只具有相对意义。而且经一定周期磨损后，两体间的最大静摩擦系数，以及任一材料与第三种材料间的最大静摩擦或滑动摩擦系数无法测量。
[0006]二是两体间的小振幅对磨形式。两体间的小振幅对磨虽然可实现两体间的往复直线运动，但线速度不可控，行程有限，两体材料均为块体材料。形成的磨损面过小，材料的一致性难以评价，无法测量经一定周期磨损后，两体间的最大静摩擦系数，以及任一材料与第三种材料间的最大静摩擦或滑动摩擦系数。
[0007]三是模拟工况，但应用对象和获得的性能参数非常有限。例如拖动钢缆使其与摩擦副形成对磨，用以考核钢缆在额定周期内的磨损失重。其应用对象为电梯钢缆，只考核了其磨损失重指标。
[0008]显然，上述滑动磨损测试方法无法实现两体间的勻速直线、往复相对滑动磨损，也难以测定经一定周期磨损后，两体材料间的最大静摩擦或滑动摩擦系数，或与其他材料间的最大静摩擦或滑动摩擦系数。
发明内容
[0009]本发明所要解决的技术问题是设计一种直线往复式滑动摩擦磨损测试方法及装置，依靠这种方法及装置，在一个装置上可以达到磨损试验和摩擦系数测试要求，并具有如下效果：(1)可实现两摩擦体在较长单向行程内的勻速直线、往复相对滑动磨损;(?在一定磨损周期后，既可测试两摩擦体间的最大静摩擦或滑动摩擦系数，又可测试两摩擦体材料与其他材料间的最大静摩擦或滑动摩擦系数;(3)磨损和摩擦系数测试时的直线滑动速度可调，载荷可调，行程可调;(4)可完成线缆、板材、块体等不同结构形式样品的摩擦磨损试验。
[0010]为解决上述技术问题，本发明采用了如下技术方案：
[0011]本发明的直线往复式滑动摩擦磨损测试装置，装置由变频器、工作台、试样台、拖动框、拉力传感器、转向开关、计数器传感器、锁定装置、导轨、挡板、钢丝绳、减速机、峰值保持仪、控制部分以及辅助组件组成，其中，工作台的前后限位处各有至少一个转向开关，转向开关之间放置试样台和拖动框，工作台上有至少一个锁定装置固定试样台，拖动框上有摩擦块以及固定摩擦块的挡板，拖动框上配置有拉力传感器，用钢丝绳来将电机的运动转化为拖动框和试样台之间的运动，工作台的前后两侧各有至少一个滑轮，用来转换钢丝绳的运动方向和运动形式。根据需要还可以在工作台下面设置钢丝绳的张紧轮，用来保持钢丝绳的张紧度。
[0012]本发明的直线往复式滑动摩擦磨损测试装置，进一步优选具体的技术方案是：装置的控制部分由以下几部分组成：由变频器精确调整试样的移动速度，可实现额定速度的勻速直线运动;在工作台两侧安装
转向开关，实现往复运动;安装计数器，实现磨损周期的设定和磨损周期的显示。设备可自动完成设定周期
的磨损试验，可手动完成摩擦系数的测试ο
[0013]本发明的直线往复式滑动摩擦磨损测试方法为：利用本专利的直线往复式滑动摩擦磨损测试装置，首先测量摩擦块和试样的原始重量，然后将摩擦块垂直放置在试样上，试样也可视作摩擦块，并保持一定
的正压力，使两体发生往复水平相对滑动，完成额定周期的磨损后，再次测量摩擦块和试样的重量，获得
磨损失重率;滑块可为两摩擦体材料中的任一个或第三种材料，将滑块垂直放置在试样上，并保持一定的正
压力，牵引滑块，使滑块从静止到勻速运动，记录牵引力的峰值和开始滑动后的稳定值，除以正压力，即
为最大静摩擦系数和滑动摩擦系数;可多次重复上述循环，以获得不同磨损周期材料的磨损率、最大静摩擦
系数和滑动摩擦系数。测试装置工作原理见附图1、2、3。
[0014]通过采用以上技术方案，本发明的一种直线往复式滑动摩擦磨损测试装置及方法，与现有测试装置和方法相比，其有益效果在于：
[0015](1)可实现两体在较长单向行程内的勻速直线、往复相对滑动磨损。
[0016](2)在一定磨损周期后，既可测试两体间的最大静摩擦或滑动摩擦系数，又可测试
4两体材料与其他材料间的最大静摩擦或滑动摩擦系数。
[0017](3)磨损和摩擦系数测试时的直线滑动速度可调，载荷可调，行程可调。
[0018](4)可完成线缆、板材、块体等不同结构形式样品的摩擦磨损试验。
a) 水平微动螺 旋 b) 电池仓 c) 圆水准器 d) 瞄准器 e) 调焦螺旋 f) 提把 g) 目镜 h) 显示屏 i) 基座 j) 基座螺旋 安置仪器 整平 1、安置三角架。将三脚架的腿伸展到合适的长度拧紧螺丝，在将三脚架的三条腿踩牢的同时注意使三脚架的顶部保持近似水平。 2、把水准仪放到三脚架上面并用三脚架的中心螺旋将仪器和三脚架连接在一起。 3、通过调整三个基座螺旋使仪器上圆水准器的气泡居中，从而达到整平的目的。旋转仪器使仪器的望远镜与基座螺旋A和B的连线平行，同时在相反方向上调整螺旋A和B使气泡在该方向上居中，然后调整第三个螺旋C使圆气泡居中。 目镜调焦 旋转仪器使望远镜对准稳定并且比较亮的目标如墙面或白纸，调整目镜使望远镜中的十字丝最清晰为止。
通过瞄准器瞄准标尺，用水平微动螺旋使标尺位于视场的中间，调整物镜调焦螺旋使标尺最清晰。用眼睛在目镜的上下左右移动，观察十字丝与标尺之间是否有位置相对移动，若有移动说明目镜调焦不正确，需重新进行目镜调焦。 只能用徕卡专用标尺。 开机 至此仪器准备完毕，可以进行测量。 仪器操作 开/ 关机 a) 开关 b) 测量按钮 ·开机只需轻轻一按 开机后显示按任意键显示版本号或退出显示 ·关机按1秒钟 5.2 测量过程
测量 高程和距离测量 带点号的高程和距离测量 存应该打开 带点号的高程、距离、地面高、高差测量 存应该打开 注意事项·首先要检验和校正视线误差，然后是圆水准器和标尺。 ·使用之前。 ·长时间的存放后。 ·长途运输后。 ·保持镜头干净。灰尘和其它凝结物都会影响测量。 ·让仪器适应环境温度后再工作（每℃的温差大概需要2分钟适应时间）。 高程和距离测量 精确测量时，一般要瞄准标尺中间并且物镜调焦到标尺最清晰为止。 5.3 测量 5.3.1 高程和距离测量（不用存） 等待测量模式测量进程高程和距离测量仅高程测量仅距离测量5.3.2 高差、地面高、高程和距离测量（不用存） 输入基准高时测量进程测量到基准面的测量目标时显示的显示的信息高程和距离信息
流式细胞仪实验方法 一、实验准备 1．标本制备： 2．最小化非特异性结合： 二、凋亡 1．凋亡的检测方法：和其它 2．PI染色法 3．Annexin V 法 4．TUNNEL法 三、细胞因子 1．激活的细胞因子 2．CBA 四、血小板 1．活化 2．活化检测 3．网织血小板 五、红细胞 1．网织红细胞 2．PNH 3．胎儿红细胞 六、肿瘤学 1．DNA 细胞周期 2．蛋白 3．多药耐药 4．微小残留白血病
第一部分标本处理 一、流式细胞术常规检测时的样品制备 (一)直接免疫荧光标记法 取一定量细胞(约1X106细胞／ml)，在每一管中分别加入50μl的HAB，并充分混匀，于室温中静置1分钟以上(),再直接加入连接有荧光素的抗体进行免疫标记反应(如做双标或多标染色，可把几种标记有不同荧光素的抗体同时加入)，。孵育20-60分钟后，用PBS(pH7．2—7．4)洗1-2次，加入缓冲液重悬，上机检测。本方法操作简便，结果准确，易于分析，适用于同一细胞群多参数同时测定。虽然直标抗体试剂成本较高，但减少了间接标记法中较强的非特异荧光的干扰，因此更适用于临床标本的检测。 (二)间接免疫荧光标记法 取一定量的细胞悬液(约1X106细胞／ml)，先加入特异的第一抗体，待反应完全后洗去未结合抗体，再加入荧光标记的第二抗体，生成抗原—抗体—抗抗体复合物，以FCM检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。本方法费用较低，二抗应用广泛，多用于科研标本的检测。但由于二抗一般为多克隆抗体，特异性较差，非特异性荧光背景较强，易影响实验结果。所以标本制备时应加入阴性或阳性对照。另外，由于间标法步骤较多，增加了细胞的丢失，不适用测定细胞数较少的标本。 二、最小化非特异性结合的方法 1．荧光标记的抗体的浓度应该合适，如果浓度过高，背景会因为非特异性的相互作用的增加而增加。 2．在使用第一抗体之前，将样品与过量的蛋白一起培育，如小牛血清蛋白（BSA），脱脂干奶酪，或来自于同一寄主的正常血清来作为标记的第二抗体。这个步骤通过阻断第一抗体和细胞表面或胞结构的非特异性的交互作用来降低背景。 3．在使用第一抗体之后，将样品与5%至10%的来自于同一寄主的正常血清和作为标记的第二抗体一起培育。这个步骤会减少不必要的第二抗体与第一抗体、细胞表面或胞结构之间的交互作用。 通过用来自于同样的样品的血清稀释标记过的抗体可以略过此步骤。此步骤适用于很多方面，但有时候它也会导致已标记的第二抗体和正常血清中的免疫球蛋白的免疫复合体的形成。这种复合体会优先与一些细胞结构进行结合，或者它们最终会导致期望得到的抗体活性的丢失。 4．使用F(ab’)2片段会使背景决定于第一或第二抗体与FC受体的全分子结合。大多数的第二抗体的F(ab’)2片段容易利用。而第一抗体的F(ab’)2 存在的条件下，将新鲜组织或片段一般是不能利用或很难制作。因此，在NaN 3
细胞分选的简要操作步骤 一、上样前的准备 FACSCalibu可以分选细胞进行培养或功能性研究，而这些研究需要清洁环境以保持分选后细胞不受污染继续培养，因此在样本制备，上机检测分选等过程中需严格按无菌技术操作。 1、应用无菌技术制备下列无菌工作液。 3L 70%乙醇（用无菌蒸馏水配制） 5L无菌蒸馏水 5L无菌PBS 2、在干净的鞘液筒中加入3L 70%乙醇。盖紧盖子，振摇鞘液筒，确保桶内壁被乙醇充分洗 涤。安好鞘液筒。 3、将过滤器短接，否则乙醇将破坏滤膜。。 4、用70%乙醇冲洗收集管接口处，并喷洒进样口处的空气。 5、在收集管接口处安装2支BD 50ml收集管（若不使用浓缩器）。 6、放上一支装有70 %乙醇的进样管。 7、设分选门（画一个空门使机器进行分选操作）。 9、从Acquire menu选择SortSetup。在Sort Gate菜单中选择步骤7设定的分选门。按液流控制 键RUN。 10、在Setup 方框中打叉，点击Acquisition Control 菜单中Acquire。。 11、跑乙醇直至2支收集管注满（每管注满需要9min ），点击Pause, Abort。 12、再重复上述步骤2次，共需要1h。 13、断开鞘液筒，在鞘液筒中加入500mL无菌蒸馏水，振摇鞘液筒，倒掉液体，反复操作直 至洗净桶内壁残余乙醇。 14、在鞘液筒中加入3L无菌蒸馏水，盖紧盖子。安好鞘液筒。 15、在收集管接口处安装2支新的收集管。 16、放上一支装有无菌蒸馏水的进样管。 17、点击Acquisition Control 菜单中Acquire。 18、跑无菌蒸馏水直至2支收集管注满（每管注满需要9min），点击Pause Abort。 19、再重复上述步骤2次，共需要1h。 20、断开鞘液筒，在鞘液筒中加入3L无菌PBS盖紧盖子。安好鞘液筒。 21、在收集管接口处安装2支新的收集管。 22、放上一支装有无菌PBS的进样管。 23、点击Acquisition Control 菜单中Acquire。 24、第一支收集管（最左）中收集15 mL PBS后取下，使PBS由左至右流入下一收集管。重复 操作至2个管都收集了15 mL PBS为止。点击Pause, Abort。 25、在收集管接口处安装2支新的收集管。若要分选动物细胞，则应用无菌技术，用无菌 PBS4 % BSA缓冲液过夜包被50mL锥型管，将包被好的锥型管安置于收集接口。 26、按下述分选步骤分选样本 二、分选细胞
等级水准测量作业指导书 本指导书等级水准测量专指三等水准、四等水准，等外水准可参考本指导书。本指导书中提到的规范条文均出自《城市测量规范》CJJ 8-99。 水准测量外业测量原则采用“段段清”原则，往返测量原则采用“8字形”原则。 1.任务接收 项目测量负责人必须明确任务的技术要求和作业工期。 2.作业前准备工作 2.1项目测量负责人获得任务后，立即收集相关资料到实地进行踏勘。编写技术设计书。 2.2项目测量负责人组织相关人员进行作业准备，包括设备检校等。三、四等水准测量的仪器i角应小于20”、标尺的米间隔平均真长与名义长之差，应小于0.50mm，有不合格项目不得开始作业。 3.选点、埋桩 3.1标桩分为：基本水准标桩、普通水准标桩。具体尺寸各等级高程控制点标桩按《城市测量规范》CJJ 8-99 P156-P159附录G 要求进行埋桩。也可参考《国家三、四等水准测量规范》执行。工程使用的水准点可按照客户设计和要求执行。 3.2水准点标桩选在坚实稳固与安全之处，避免大河、湖泊、峡谷、滑坡、管线、冻土，便于寻找、长期保存和引测，按
《城市测量规范》CJJ 8-99 3-2项执行。 3.3各等水准观测，需待埋设标桩稳定后方可进行。 3.4点之记的绘制 3.4.1作业人员熟悉地形，在外业及时绘制点之记。 3.4.2点之记绘制与实地相符，首先用指北针确定北方向，按比例绘制草图，确定标桩所处位置，记录交通路线、电杆号码、门牌或户主名，用Autocad绘制点之记图。 4.精度指标及限差 4.1各等水准测量主要技术要求按照《城市测量规范》CJJ 8-99 P30 3-1-7条执行。 4.2各等水准测量的视线长度、前后视距差、视线高度按照《城市测量规范》CJJ 8-99 P34 3-3-5条执行。当读数由于大气遮光影响抖动时，需把前后视距差缩短使读数稳定，当成像清晰、稳定时三等、四等水准观测视线长度可放长20%。 4.3各等水准测量的测站观测限差要求按照《城市测量规范》CJJ 8-99 P34 3-3-6条执行。 4.4各观测读数和记录的数字取位：使用DS05或DS1级仪器，读记至0.05mm或0.1mm，对于区格式木质标尺读记至1mm。 5 观测与记录 5.1观测注意事项 5.1.1选择合理的水准路线，各等水准路线应选择沿坡度较小、土质坚实施测方便的道路布设。
流式细胞仪检测细胞周期操作步骤 取对数生长期的A549细胞，按1×106 cells/ mL以1mL接种于100mm培养皿内 ↓ 24h后，进行所需的处理（比如加药,照射） ↓ 特定时间后终止培养，进行下一步的实验 ↓ 收集原培养液，洗后的PBS和消化后的细胞，将三者混匀放入15ml 离心管中 ↓ 1000rpm离心5min（短时低速离心） ↓ 弃上清，用1.5ml预冷PBS，1000rpm离心5min后去除PBS和细胞 悬液内的细胞碎片 ↓ 加入1.5ml预冷PBS,在涡旋状态下加入3.5ml无水乙醇，混匀后，于4℃固定30min,或-20℃长期保存。 ↓ 1000r/min,离心5min ↓
将乙醇吸除，加PBS清洗混匀 ↓ 1000r/min,5min再离心一遍，将残留在细胞上的乙醇除去 ↓ 吸除离心管内PBS，加入200ul PBS和2ul的RNA酶（0.25mg/ml）(37℃下孵育30min) ↓ 加入0.5ml的50ug/ml的PI溶液室温下避光染色30min ↓ 将离心管内的细胞过滤(300um尼龙网膜)至含有PBS的EP管中（PI 具有很强的粘附性，容易使细胞聚团），标记EP管 ↓ 提前一天网上预约 ↓ 开机（先开仪器后开软件） ↓ 流式细胞仪的结构一般分为5部分：①流动室及液流驱动系统；②激光光源及光束成形系统；③光学系统；④信号检测、存贮、显示、分析系统；⑤细胞分选系统。 ↓ 检测前先涡旋使细胞混匀悬浮呈单个细胞，然后插入流式细胞仪上
↓ 流动室内充满鞘液，细胞排成单列由喷嘴中心喷出，形成细胞液柱 ↓ 液柱与激光束相交，细胞上的荧光染料被激发产生荧光（488nm激 发光源） ↓ 荧光信号变成电信号输出到计算机，软件分析（荧光染料和细胞DNA分子特异性结合，可以检测出细胞周期各时相细胞比例） ↓ 在用第三方软件分析之前，将流式结果按如下所示导出 结果分析——Modfit软件分析
、准备工作 1，清洗偏转板，防止盐离子影响电荷加载，电流偏转。 1）用超纯水沾湿医用棉签，擦拭偏转板所有金属物件。再用干棉签擦干。 2）5ml 注射器吸超纯水，清洗缝隙。用滤纸先吸水，再用干棉签擦干。 2，鞘液桶加液 3, 喷嘴超声，喷嘴放入超纯水中，超声2min。用滤纸吸干水分，晾干。 二、开机启动 1, 启动电脑，密码BDIS,点开软件，无密码 2，机箱侧面依次打开总机开关，蓝色、红色激光。 3, 液流启动：Cytometer --- FiuidSetup 1 ）气路（透明管）、液路（蓝色管） ,从乙醇桶上拔下,插到鞘 液桶 2）闭合喷嘴从侧面放入到喷嘴位置,旋转至12 点方向 3）取下闭合喷嘴 4）将超声过的喷嘴放入喷嘴位置。 4, 喷嘴压力切换：菜单栏中Sort---SortSetup --- 70um （选择当前使用的喷嘴大小） 5, 液流调整：
点开电脑界面中70um图标栏里的Stream，从打叉状态变为打勾。查看是否都处于正常状态：1）打开仪器机箱，查看液流是否流到废液槽。如果偏离，拧开两边的螺丝，左右推动使液流到达槽内，拧好螺丝。 2）查看电脑界面，液流图像是否稳定，如果有黑白灰图片变化，用棉签擦拭偏转板上方 3）查看电脑界面，液流是否在中央，如果不是，可以手动调整仪器摄像头，或者重新插好喷嘴。 4）机箱中查看激光束是否完好通过，用干棉签挡住通过位置，如果看到激光射出，则正常。然后关闭主机箱外盖。 调整液流：通过调整振幅来实现。 1）振幅Ampl,数值调大，使液流断滴在上1/3处，即2滴连续液流。 2）频率Freg ，一般不动。 3）Gap：当喷嘴为70um时，数值一般为7、8、9。100um时，为10, 、11 、12。 4）当Ampl和Gap都稳定时，把实际值（后面）手动输入到确定值的框内（前面）。 5）点击StreamSpot ，锁死数值，保持液流稳定。 Dropl :实际值和确定值，变化幅度保持在10以内。 Gap：实际值和确定值，变化幅度保持3以内。此视为稳定液流。 三、手动调补偿： 样品：Negative （双阴管），FITC（单阳），PE（单阳）
测量仪器操作规程
测量仪器操作规程 2016年3月
目录 水准仪操作规程 (2) 经纬仪操作规程 (4) 全站仪操作规程 (8) GPS操作规程 (11)
水准仪操作规程 1.目的和适用范围 为了正确使用测量仪器,确保仪器的完好率和利用率,适用于本项目所有水准仪的操作。 2.引用标准：使用说明书 3.进行水准标高测量时，应按以下操作规程使用： 3.1整平 先将三脚架两只铁脚踩入土中，观测者操纵三脚架的一条腿前、后、左、右移动，直到圆水准气泡基本居中时，固定这条腿不动，然后调节三个脚螺旋使气泡完全居中（仪器内设自动安平）。 3.2瞄准 先转动目镜对光螺旋，使十字丝的成像清晰，然后放松固定螺旋，用望远镜筒外的缺口和准星瞄准水准尺，粗略地进行物镜对光，当在望远镜内看到水准尺像时，即将固定螺旋固定，转动微动螺旋，使十字丝纵丝靠近水准尺的一侧。 3.3读数 读数时要按由小到大的方向，应先用十字丝横丝估读出毫米数，然后再读米、分米、厘米数。 4.进行水准标高测量前注意事项： 4.1检查水准仪及配套工具是否带齐，包括测量尺、脚架、水准点标高资料等。 4.2架设时，应先把脚架螺旋旋紧，在地面上踩紧脚架。对水准仪进行精平调整，对后视水准点后进行标高测量。 4.3在标高测量时，须转点搬移过程中，应检查好仪器的螺旋是否拧紧，防止掉损仪器。 5.水准仪自检规程 5.1圆水准器的检验和校正： 5.1.1检验方法：
①转动脚螺旋使圆水准气泡居中； ②将仪器旋转180度，如气泡居中，则正常，否则需校正。 5.1.2校正方法： ①首先整平仪器，使圆水准气泡居中，旋转180度，调整脚螺 旋，使气泡退回到偏离量的一半； ②松开圆水准仪的固定螺旋，用拔针，拔动圆水准器的校正螺 丝，使气泡居中； 重复第②步直到，仪器转到任何位置，圆水准气液始终居中。 5.2I角的检验与校正 5.2.1检验方法： ①在平坦地面上选取相距100m的高差为ΔHA、ΔHB两点； ②将水准仪置于A、B两点之间,在距A或B点,1m处测其高差Δ H′ ③若ΔH=ΔH′则正常，否则需校正。 5.2.2校正方法： ①将需校正的仪器整平置于A、B之间的A 端或B 端，在A 尺 上读出a1; ②然后读出B尺，其读数为a1+ΔH′，用拔针拔动校正螺旋使 a1+ΔH′=a1+ΔH 重复以上步骤，使仪器放任一位置，a1+ΔH′=a1+ΔH。 5.3十字丝的检验与校正 5.3.1检验方法： ①整平仪器，将横丝对准一固定点；
流式检测细胞凋亡 Annexin V 检测细胞凋亡 (2) 实验原理 (2) 实验用品 (2) 操作步骤 (3) Annexin V Blocking (5) 凋亡细胞的DNA 断裂片段分析 (7) 实验原理 (7) 实验用品 (8) 操作步骤 (9) BrdU Flow Kits 检测细胞增殖 (12) 实验原理 (12) BrdU Flow Kits 试剂盒 (12) 结果分析 (17) 流式仪器设置指南 (18) 线粒体膜电位变化检测细胞凋亡 (22) 实验原理 (22) 实验用品 (22) 样本制备 (23) 结果分析 (24) 注意事项 (24) Active Caspase-3 检测细胞凋亡 (26) 实验原理 (26) 实验步骤 (27) 结果分析 (28)
Annexin V 检测细胞凋亡 实验原理 Annexin V 是检测细胞凋亡的灵敏指标之一。它是一种磷脂结合蛋白，可以与早期凋亡细胞的胞膜结合，而细胞质膜的改变是细胞发生凋亡时最早的改变之一。在细胞发生凋亡时，膜磷脂酰丝氨酸(PS) 由质膜内侧翻向外侧。Annexin V 与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，因而与细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸结合。由于在发生凋亡时，磷脂酰丝氨酸外翻的发生早于细胞核的改变，因此，与DNA 碎片检测比较，使用Annexin V 可以更早地检测到凋亡细胞。因为细胞坏死时也会发生磷脂酰丝氨酸外翻，所以Annexin V 常与鉴定细胞死活的核酸染料(如PI 或7-AAD)合并使用，来区分凋亡细胞(Annexin V+/核酸染料-) 与死亡细胞(Annexin V+/核酸染料+)。 实验用品 1. 一次性12×75mm Falcon试管。 2. PBS缓冲液：含0.1%NaN ，过滤后2-8°C保存。 3 3. 微量加样器和加样头。
一、开机程序： 1.检查鞘液桶和废液桶。确认鞘液充满状态（鞘液为鞘液桶体积的3/4位 置，可以连续工作3个小时左右）、盖紧黑盖、管道畅通、废液桶有足 够空间容纳本批标本排弃的废液。如果要添加鞘液，要先释放鞘液桶中 气压。 2.依次打开流式细胞仪FACSCalibur稳压器、主机开关、电脑开关，打印 机。 3.气压阀置于加压位置，待流式细胞仪处于STANDBY状态，做Prime，以 排除管路中气泡。 二、运行FACSComp软件、检查仪器状况 1.制备三色标准微球样本。一般情况向1ml鞘液（或过滤PBS）中加入 1滴质控小微球，也可以根据实际情况调节浓度。 2.机器预热5 min，打开FACSComp软件，选择保持路径。选择所需校 正内容，如果使用的微球是新一批产品要输入微球的批号。 3.在软件界面左侧Assay Selection选项中选择质控类型，即实验过 程中是否需要清洗样品。 4.上样品，微球溶液上样之前要充分混匀。功能键设置在“RUN”。 5.仪器自动检查，并做电压、补偿等设置。 6.FACSComp软件运行完毕，显示结果通过测试。 7.做Set up。 8.打印校正结果，退出FACSComp程序。 备注：在质控过程中，如果提示收集细胞速度慢可以提高细胞收集速度，但是在调节灵敏度（Sens）时，一定要用“Low”的状态上样，保证仪器灵敏度的准确。在使用仪器过程中要养成好的习惯，在上样品过程中，仪器保持在“Low”“Standby”状态。 三、样品分析软件：CellQuest Pro 软件，选择“联机”。 1.
（2）对实验样本进行命名； （3）对实验通道进行预设（FSC,SSC,FL1-FL4）。 备注：如果界面被关闭，重新调出步骤： 2.调出质控模板。 3.画图 选择画图工具（一般选择散点图），Inspect 界面会自动弹出，对几个常用选项进行设定：将散点图选中（用鼠标点击散点图边框才能够 选中图形），将 更改横纵坐 备注：第一个散点图横坐标为FSC，纵坐标为SSC 。 （1一般获取10000个细胞。 （2 （ 3）将所有补偿调为0 （4）将非 52 （5）FSC和SSC （6 4.上阴性对照 将阴性对照管混匀，上机，功能键设置在“RUN”,散点图出现细胞信 号，第一个图：让细胞信号出现在自己看上去舒服的区域；其他三个 散点图，要将细胞信号调整到阴性区域，即左下角区域。通过移动通
测量工程施工作业指导书遵义建工（集团）务川有限公司
二?一六年^一月 一、等级控制测量（平面）作业指导书 (1) 二、等级水准测量（含等外）作业指导书 (6) 三、地形测量（采集）作业指导书 (10) 四、线路测量作业指导书 (14) 五、沉降观测、变形监测作业指导书 (19) 六、基坑监测作业指导书 (22) 七、GPS/RTK作业指导书 (35) 八、工程测量用仪器设备使用、维护保养要求 (39) 3.1全站仪使用、维护保养 (39) 3.2全球定位系统使用、维护保养 (40) 3.3水准仪使用、维护保养 (42) 4仪器设备维护保养计划 (43)
九、水准仪器的校验 (44) 十、水准仪I角的核查方法 (45)
一、等级控制测量（平面）作业指导书 本作业指导书是针对等级控制测量的特点和作业需要编写的，服务范围是三等导线、一级导线、二级导线、三级导线以下平面控制网、平高控制网、高程控制网的建立和控制点加密。使用本指导书进行测量作业，应遵守《城市测量规范》、《工程测量规范》等规程规范。在遵循务川珍珠大道项目的设计要求下进行作业。 1.0任务接收 项目测量组长接受任务后，明确任务的技术要求和作业工期。 2?作业前准备工作 2.1项目测量组长获得任务后，立即收集相关资料到实地进行踏勘。编写技术设计书。 2.2项目测量组长组织相关人员进行作业准备。组织相关作业人员认真学习有关测量规范 和技术指示或技术设计书，确定作业任务的性质和要求。继续完善测区资料的收集（包括测区所在地点、范围、道路、交通、控制点等）。 2.3项目测量组长根据平面控制等级选择合适的测量仪器，并对仪器进行相关的检校，包 括全站仪、电子手簿或一般记录手簿、脚架、觇牌、棱镜、气压计、温度计等的完好状态，是否处在检定期内，有不合格项目不得用于作业。 2.4项目测量组长组织相关人员熟悉全站仪的使用方法，对仪器进行参数设置如气压、温 度和加乘常数。进行气压、温度改正。 3. 选点、埋石 3.1按《城市测量规范》CJJ 8-99选点密度按P8 2-2条实施。 3.2选点注意事项 3.2.1点位应选在土质坚实的地方或坚固稳定的建筑物顶面上，邻点之间通视良好。测线 离开障碍物和地面距离在1米以上，离开高压线宜大于5米。点位应选取在便于架设仪器和便于观测作业。标混凝土桩便于长期限保存的地方，同时应保证方便低等级加密。 3.2.2选点埋桩时除考虑工作因素外，还要考虑到人身安全的因素。 3.3埋桩
经纬仪和水准仪的操作规程 一、经纬仪操作规程 1、操作前技术准备 （1）熟悉施工图纸：主要了解拟建工程的规划红线控制点的位置，与原有建筑物之间的关系。 （2）确定测量方案：根据拟建建筑物的平面定位的情况，确定出测量方案。 方案一：根据附近原有建筑物或构筑物进行定位。 方案二：根据城市规划部门测定的道路中心线、规划红线或场地平面控制网定位。 2、操作前仪器准备 （1）选择满足测量精度要求的经纬仪。 （2）经纬仪必须经过检定部门检定合格，并且在检定有效期内（经纬仪的检定周期为12个月）。 （3）操作人员具有一定的专业业务知识，明确测量方案并熟悉仪器的操作要领。 3、经纬仪的操作 （1）对中 用经纬仪观测水平角，应先将仪器安置在角的顶点上，先将三脚架张开，使其高度适中，架头大致水平，大致垂直于角点。然后装上仪器，旋上连接螺旋（不必太紧），伸缩仪器上光学对中器的长度，使图象清晰，旋转对中器螺旋，使分划板清晰，双手扶基座，在架头上移动仪器，使角点处于对中器刻划圈之内。然后调整仪器的三个脚螺旋，使圆水准器水泡居中，完成粗略整平。观察光学对中器，重新进行上述对中过程。 （2）整平 整平时，先转动照准部，使照准部水准管与任一对脚螺旋的连线平
行，两手相向转动这两个脚螺旋，使水准管气泡居中。将照准部转动90度，使水准管与原来两个脚螺旋的连线垂直，转动第三个脚螺旋，使气泡居中。然后照准部转回原位置，检查气泡是否仍然居中。 若不居中则应按以上步骤反复进行，直到照准部转至任意位置气泡皆居中为止。整平误差，即整平后气泡的最大偏移量不能超过一格。 （3）瞄准、读数 先松开望远镜的水平制动螺旋和垂直制动螺旋，调节目镜使十字丝清晰。然后通过望远镜上的瞄准器瞄准目标，使目标成像在望远镜视场中央部位。旋紧望远镜水平和垂直制动螺旋，转动望远镜对光螺旋，使目标成像清晰。最后用望远镜水平和垂直微动螺旋精确瞄准目标读取数据。 （4）校核 当建筑物的控制点全部测设完毕后，对建筑物整个控制网做闭合，其误差必须在规范允许范围内。 二、三、水准仪操作规程 1、操作前技术准备 （1）熟悉施工图纸：主要了解拟建工程所处地区的水准点的位置和标高，和建筑物首层和各层的绝对标高。 （2）确定测量方案： 方案一：根据附近原有建筑物、构筑物或道路等的某一指定部位为准，用相对标高定位。 方案二：根据设计部门给定的水准点或导线点的已知标高，用绝对标高定位。 2、操作前仪器准备 （1）选择满足测量精度要求的水准仪。 （2）水准仪必须经过检定部门检定合格，并且在检定有效期内（水
仪器部件 a)水平微 动螺旋 b)电池仓 c)圆水准 器 d)瞄准器 e)调焦螺 旋 f)提把 g)目镜 h)显示屏 i)基座 j)基座螺 旋 安置仪器 整平 1、安置三角架。将三脚架的腿伸展到合适的长度拧紧螺丝，在将三脚架的三条腿踩牢 的同时注意使三脚架的顶部保持近似水平。 2、把水准仪放到三脚架上面并用三脚架的中心螺旋将仪器和三脚架连接在一起。 3、通过调整三个基座螺旋使仪器上圆水准器的气泡居中，从而达到整平的目的。旋转 仪器使仪器的望远镜与基座螺旋 A 和 B 的连线平行，同时在相反方向上调整螺旋 A 和 B使气泡在该方向上居中，然后调整第三个螺旋 C 使圆气泡居中。 目镜调焦 旋转仪器使望远镜对准稳定并且比较亮的目标如墙面或白纸，调整目镜使望远镜中的十
字丝最清晰为止。 物镜调焦 通过瞄准器瞄准标尺，用水平微动螺旋使标尺位于视场的中间，调整物镜调焦螺旋使标 尺最清晰。用眼睛在目镜的上下左右移动，观察十字丝与标尺之间是否有位置相对移动，若有移动说明目镜调焦不正确，需重新进行目镜调焦。 只能用徕卡专用标尺。 开机 至此仪器准备完毕，可以进行测量。 仪器操作 开/关机 a)开关 b)测量按钮 ·开机只需轻轻一按
开机后显示按任意键显示版本号或退出显示·关机按 1秒钟 测量过程 测量 高程和距离测量 带点号的高程和距离测量 内存应该打开 带点号的高程、距离、地面高、高差测量 内存应该打开 注意事项·首先要检验和校正视线误差，然后是圆水准器和标尺。 ·使用之前。·长时间的存放后。·长途运输后。·保 持镜头干净。灰尘和其它凝结物都会影响测量。·让仪 器适应环境温度后再工作（每℃的温差大概需要 2分钟适应时间）。 高程和距离测量 精确测量时，一般要瞄准标尺中间并且物镜调焦到标尺最清晰为止。 测量
流式细胞仪的使用方法及相关资料 仪器名称：流式细胞仪 生产厂家：美国贝克曼库尔特有限公司 使用方法： 一．开机程序 1．检查稳压器电源，打开电源，稳定5分钟。 2．打开储液箱，倒掉废液, 并在废液桶中加入400ml漂白水原液。打开压力阀，取出鞘液桶，将鞘液桶加至4/5满（一般可用三蒸水，做分选必须用PBS或FACSFlow），合上压力阀。确实盖紧桶盖，检查所有管路是否妥善安置。 3．将FACSCalibur开关打开，此时仪器功能控制钮的显示应是STANDBY，预热5－10分钟。排出过滤器内的气泡。 4．如果需要打印，打开打印机电源。 5．打开电脑,等待屏幕显示出标准的苹果标志。 6．执行仪器PRIME功能一次，以排除Flow cell中的气泡。 7．分析样品时，先用FACAFlow 或PBS进行HIGH RUN约2分钟。 做过分选后，每次开机后需冲洗管道：向分选装置上装上两个50ml离心管，不接通浓缩系统，摁下右下角白色按钮开始冲洗。待自动停止后接通浓缩装置，同上法冲洗一次。 二．预设获取模式文件(Acquisition Template Files) 1．从苹果标志中选择CELLQuest见一个新视窗，可利用此视窗编辑一个获取模式文件。 2．选取屏幕左列绘图工具中的Dot plot，绘出一个或多个Dot Plots（点图）。从Dot Plot对话框中选取Acquisition作为图形资料来源，并确定适当的x轴和y轴参数。 3．选取屏幕左列绘图工具中的Histogram，同上法可绘出Histogram（直方图）。4．将此视窗命名后储存于FACStation G3\BD Applications \CELLQuest Folder \EXP文件夹中，下次进行相同实验时可直接调用。 本计算机中已设定两个模式文件：ACQ和EXP，储存于FACStation G3\BD Applications \CELLQuest \EXP文件夹中，ACQ用于细胞DNA检测，EXP用于细胞表面标志分析。 三．用CELLQuest进行仪器的设定和调整 1．从苹果画面中选取CELLQuest，进入CELLQuest后在File指令栏中打开合适的获取模式文件。 2．从屏幕上方Acquire指令栏中，选取Connect to Cytometer（快捷键：＋B）进行电脑和仪器的连机。将出现的Acquisiton Control对话框移至合适位置。3．从Cytometer指令栏中，开启Detectors/Amps、Threshold、Compensation、Status 等四个对话框，并将它们移至屏幕右方，以便获取数据时随时调整获取条件。也可以用+1，2，3，4获得此四个对话框。 4．在Detectors/Amps对话框中，先为每个参数选择适当的倍增模式(amplifier mode)：线性模式Lin或对数模式Log。一般进行细胞表面抗原分析如分析外周
一、样品制备 1、取样（大约1×106 cells），离心弃上清，以PBS洗两遍，逐滴加入1ml 70%的冷乙醇固定细胞，﹣20℃冻存过夜。分析时，离心弃上清，以PBS洗两遍，加入100μl的Rnase（GenScript试剂A），37℃水浴30min，然后再加入400μl的PI染液（GenScript试剂B），在4℃避光条件下孵育30min后即可上FCM检测。每个样品至少获取2×104cells， 二、上流式测细胞 1.1、打开液流抽屉，确认气压阀处于减压状态；打开金属挡板；取出鞘液桶，倒掉废液，将鞘液桶加至2/3满（一般可用三蒸水，做分选必须用PBS或FACSFLow），拧紧鞘液桶盖，安上金属挡板，保证管路畅通无扭曲。检查废液桶，将废液桶的气路和液路的快速连接阀打开，倒掉废液（加鞘液一定要倒废液）向废液桶中倒入400ml浓度为10%的次氯酸钠溶液，合上压力阀。确实盖紧桶盖，检查所有管路是否妥善安置。 1.2、依此接通电源、打开稳压器电源（指示灯由bypass变Ac putput）、变压器电源，稳定5分钟。将FACSCalibur开关打开，此时仪器功能控制钮的显示应是STANDBY。如果需要打印，打开打印机电源。打开电脑（密码：BDIS），等待屏幕显示出标准的苹果标志（先开仪器，后开电脑主机）。 1.3、将压力阀置于加压位置，轻拍过滤器，使气泡位于滤器的上方，打开管路开关，将过滤器中的气泡排除，关闭管路开关。若滤器管路中有气泡，打开连接头，挤出鞘液，以排除气泡。关闭液流抽屉。执行仪器PRIME功能一次，以排除Flowcell中的气泡（反向压力使鞘液从进样针中流出）。结束后自动STANDBY，5分钟后即可进行试验。 2.1、从苹果画面中选取CELLQuest，最大化，选散点图标，打开，Plot type选择Acq-analysis，X参数和Y参数分别取FSC-H、SSC-H（选择散点图主要是确定所需细胞的细胞群）。选择单参数图标，打开，Plot type选择Acq-analysis，X参数选择FL2-H 1024(此属于荧光,根据荧光染料的波长范围选择不同的荧光,本实验使用PI作为荧光染料,故选择FL2-H)
徕卡S R R I N T E R250水准仪 作业指导书 -标准化文件发布号：（9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII
仪器部件 a) 水平微动 螺旋 b) 电池仓 c) 圆水准器 d) 瞄准器 e) 调焦螺旋 f) 提把 g) 目镜 h) 显示屏 i) 基座 j) 基座螺旋 安置仪器 整平 1、安置三角架。将三脚架的腿伸展到合适的长度拧紧螺丝，在将三脚架的三条腿踩牢的同时注意使三脚架的顶部保持近似水平。 2、把水准仪放到三脚架上面并用三脚架的中心螺旋将仪器和三脚架连接在一起。 3、通过调整三个基座螺旋使仪器上圆水准器的气泡居中，从而达到整平的目的。旋转仪器使仪器的望远镜与基座螺旋A和B的连线平行，同时在相反方向上调整螺旋A和B使气泡在该方向上居中，然后调整第三个螺旋C使圆气泡居中。
目镜调焦 旋转仪器使望远镜对准稳定并且比较亮的目标如墙面或白纸，调整目镜使望远镜中的十字丝最清晰为止。 物镜调焦 通过瞄准器瞄准标尺，用水平微动螺旋使标尺位于视场的中间，调整物镜调焦螺旋使标尺最清晰。用眼睛在目镜的上下左右移动，观察十字丝与标尺之间是否有位置相对移动，若有移动说明目镜调焦不正确，需重新进行目镜调焦。 只能用徕卡专用标尺。 开机
至此仪器准备完毕，可以进行测量。 仪器操作 开/ 关机 开关 a) b) 测量按钮 ·开机只需轻轻一按 开机后显示按任意键显示版本号或退出显示·关机按1秒钟 5.2 测量过程 测量 高程和距离测量 带点号的高程和距离测量 内存应该打开
带点号的高程、距离、地面高、高差测量 内存应该打开 注意事项·首先要检验和校正视线误差，然后是圆水准器和标尺。 ·使用之前。 ·长时间的存放后。 ·长途运输后。 ·保持镜头干净。灰尘和其它凝结物都会影响测量。 ·让仪器适应环境温度后再工作（每℃的温差大概需要2分钟适应时间）。 高程和距离测量 精确测量时，一般要瞄准标尺中间并且物镜调焦到标尺最清晰为止。 5.3 测量 5.3.1 高程和距离测量（不用内存） 等待测量模式测量进程高程和距离测量仅高程测量仅距离测量5.3.2 高差、地面高、高程和距离测量（不用内存）
1、流式细胞术(英文flow cytometry)是一种生物学技术，用于对悬浮于流体中的微小颗粒进行计数和分选。这种技术可以用来对流过光学或电子检测器的一个个细胞进行连续的多种参数分析。 目录 * 1 原理 * 2 流式细胞仪(flow cytometer) * 3 应用 * 4 参见 原理 一束单色光（通常是激光）照到流体力学聚焦的一股流体上。若干个检测器瞄向流束和激光相交的这个点，其中一个和激光在同一直在线（称作前散射(FSC)），其它几个和激光垂直（旁散射(SSC)和一个或几个荧光监测器）。当每个悬浮颗粒通过光束时会按某种方式把光散射，同时所带有的荧光化合物被激发并发射出频率低于激发光的荧光。这些散射光和荧光的组合数据被检测器记录，根据各检测器亮度的波动（每个细胞会显出一个散射或荧光的峰）就能够推算出每个颗粒的物理和化学性质。前散射与细胞体积相关，而旁散射取决于颗粒的内部复杂程度（比如核的形状、胞质内颗粒的种类或者末的粗糙程度）。 可以检测的参数有： 细胞的体积和形态复杂程度、细胞中的色素、DNA（细胞周期分析、细胞动力学、细胞增殖等）、RNA 染色体分析和分选（文库构建、染色体涂染）、蛋白质、细胞表面抗原（CD标记）、胞内抗原（各种细胞因子(cytokine)、次级媒介等）、核抗原、酶活性、pH，胞内离子化的钙、镁，膜电势、膜流动性细胞凋亡(apoptosis)（定量检测DNA降解、线粒体膜电位、通透性变化）、细胞存活能力、监测细胞电通透性、氧爆作用(oxidative burst) 、研究癌细胞中的多重耐药性(multi-drug resistance, MDR) 、谷胱甘肽、各种组合（DNA/表面抗原等等） 流式细胞仪(flow cytometer) 流式细胞仪又称荧光激活细胞分选器、荧光活化细胞分类计（FACS，Fluorescence Activated Cell Sorter）。现代的流式细胞仪每秒可以实时检测几千个颗粒，并且可以主动分离具有不同特性的颗粒。 流式细胞仪和显微镜比较像，但能够对大量的单个细胞利用一组参数进行高通量的自动量化。固体组织需要在检测前制备成单细胞的悬浮液。 一个流式细胞仪包括五个组成部分： * 细胞流动系统：液流（鞘液(sheath fluid)）携带细胞，使颗粒以串流形式通过光束。 * 光源：有通常的灯（汞或氙）、高功率水冷的激光源（氩、氪、染料激光）、低功率气冷激光（氩(488nm)，红氦氖(633nm)，绿氦氖，氦镉(紫外)）、偶极激光（蓝、绿、红、紫）。 * 检测和模数转换(analogue-to-digital conversion, ADC)系统：产生前散射、旁散射光和荧光的信号。 * 放大系统，线性或对数放大。 * 计算机，用于分析信号。 早期的流式细胞仪主要是实验设备，但目前仪器和相关的试剂有了很广的市场。不同厂商的仪器特性也不同，主要的厂商和品牌如下： * Beckman-Coulter (ex-Coulter): Epics XL/XL-MCL; Epics Altra (Hypersort) (IBM-PC compatible platforms) * Becton, Dickinson: (FACS's): FACSCAlibur, FACScan, FACSort, FASCSVantage (Mac OS platform) FACS Canto, LSRII, Aria, DiVa (PC PLatform) * Cytomation: MoFlo, Cyan (IBM-PC platform) * Partec/Dako: Galaxy; PAS; CCA; PA (IBM-PC compatible platforms) 应用 流式细胞术在很多领域中都有应用，包括分子生物学、病理学、免疫学和海洋生物学等。在分子生物学中，
目录 1主要功能 (2) 2使用精密水准仪时注意事项 (2) 3精密水准仪的操作流程 (2) 4水准测量原理及计算方法 (2) 4.1测量原理 (2) 4.2计算未知点高程 (3) 5测量精度 (4) 6测量前准备 (4) 6.1桥梁线形测量前准备 (4) 6.2桥梁挠度测量前准备 (5) 7测量步骤 (5) 7.1桥梁线形测量步骤 (5) 7.2桥梁挠度测量步骤 (6) 8仪器的维护及保养 (6)
水准仪作业指导书 1主要功能 精密水准仪广泛用于建筑行业，是测量水平高低的仪器，具有精度高、使用方便、快速、可靠等优点，使用在引测、大面积场地测量、楼面水平线标志、沉降观测等（这里我们讲如何使用精密水准仪进行桥面线形测量和桥面挠度测量）。 2使用精密水准仪时注意事项 1)当对水准仪所测数据怀疑或经过一定时间的使用后，应送往法定校定机构进行必要的检验与校正。 2)仪器到标尺的最短可测量距离为2米。 3)测量时，仪器与标尺之间应没有障碍物遮挡。 4)使用完毕后，应擦干净仪器和标尺。不能使用稀释剂和苯等易挥发性溶液擦洗。擦完后应将仪器放入盒内，同时将布盖好标尺及联结处。 5)长期使用后，应检查三脚架的每部分，看是否有松动。 3精密水准仪的操作流程 1)在测站上张开三脚架，高度适合观测者观测，架顶大致水平，然后将水准仪用连接螺旋安装三脚架上； 2)固定三脚架，调整水准气泡，将水准仪整平； 3)瞄准水准尺，转动微动螺旋，使十字丝纵丝靠近水准尺的一侧，仔细对光，消除视差，使水准尺的分划成像十分清晰； 4)调整十字丝的横丝至精密水准尺至尺面夹住小黑格中间，先读水准尺的大数，然后读右边小刻度上的小数，将两读数相加得出最后的观测数据； 5)在水准测量的外业结束后，进行成果整理。 4水准测量原理及计算方法 4.1测量原理
第四部分流式细胞术分析血小板 流式细胞术分析血小板 血栓性疾病、出血性疾病、心血管疾病以及自身免疫性血小板减少症等疾病的病理生理过程与血小板相关。血小板功能检测包括黏附、聚集和活化功能试验。使用流式细胞仪检测全血中血小板表面相关标志物是一种新技术，它拓宽了血小板相关疾病的诊断与功能研究方法，丰富了血小板功能评估指标。 一、流式细胞仪血小板分析应用范围 1.通过分析信号传递、细胞骨架结构、颗粒释放、糖蛋白构形、膜磷脂、与抗凝因子的结合和微粒形成，分析血小板活化，血小板对刺激物的反应性。 2. 通过分析受激后表面结合蛋白触发凝血链式反应和表面糖蛋白缺陷检测，分析血小板止血功能的 获得性和遗传性缺陷。 3. 结合血小板大小，检测血小板RNA含量，分析血小板成熟度，计数网织血小板。 4. 发现血小板抗体，做定性和定量分析。 二、血小板分析的临床意义 1. 血栓性疾病：活化血小板的检测能预测冠状血管成形术后发生急性缺血事件的危险性，非风湿 性心房纤颤患者栓塞和栓塞前期均有血小板活化，胰岛素依赖性糖尿病，子痫前期，外周血管疾病等均可测出血小板活力增加和(或)循环中存在活化血小板，而早产儿的血小板对凝血酶、二磷酸腺苷(ADP)、TXA2的体外激活能力降低。 2. 血小板缺陷性疾病：全血法流式细胞术提供了一个简单、迅速的方法来诊断血小板膜糖蛋白缺 陷性疾病，如巨大血小板综合征，血小板无力症等。前者是由于GPIb-IX复合物先天缺陷所致的血小板形态巨大，功能异常的出血性疾病。后者由于GPⅡb/Ⅲa复合物先天缺陷，导致血小板聚集功能障碍 3. 贮存池疾病：原发性贮存池疾病（δ-SPD）常规用血小板聚集法检测，但特异性和灵敏度均不理想。 检测血小板致密颗粒的阿的平荧光显微镜法，主观性大，操作繁琐，而且一次检测的血小板数目有限。 全血法流式细胞术为δ-SPD的诊断提供了一个简单、迅速的方法，一次能定量检测5 000个以上阿的平染色的血小板。与正常人相比，δ-SPD患者阿的平染色显著下降(从49%降至15%)。常在骨髓增殖异常综合征和晚期肾衰中出现的获得性致密颗粒贮存池疾病，也能用全血法流式细胞术进行检测和诊断。 4. 血小板减少性疾病：破坏过多或生成减少均能导致血小板减少。血小板相关抗体（PAIg）是反 映血小板的破坏的指标，虽然其临床意义仍有争议。PAIg的检测有多种方法，但流式细胞术法有其优越性。流式细胞仪能测定单个血小板上的PAIg，只要测定104甚至103个血小板，在统计学上就能精确地得出PAIg的平均水平，因而用血量少，只要1 ml血液制备的血小板就足够。流式细胞术还能同时测定其他一些反映血小板破坏的指标，如PAIgG、PAIgM、C3等。血小板的生成与巨核细胞有