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大鼠尿微量白蛋白(ALB)说明书

大鼠尿微量白蛋白(ALB)说明书
大鼠尿微量白蛋白(ALB)说明书

大鼠尿微量白蛋白(ALB)酶联免疫分析

试剂盒使用说明书

本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,细胞上清及相关液体样本中尿微量白蛋白(ALB)的含量。

实验原理:

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠尿微量白蛋白(ALB)水平。用纯化的大鼠尿微量白蛋白(ALB)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入尿微量白蛋白(ALB),再与HRP标记的尿微量白蛋白(ALB)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的尿微量白蛋白(ALB)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠尿微量白蛋白(ALB)浓度。

样本处理及要求:

1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上

清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心

20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程

中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/

分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备

用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上

进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤:

1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标

准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180μg/ml,120μg/ml,60μg/ml,30μg/ml,15μg/ml)。

2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样

品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此

重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.温育:操作同3。

8.洗涤:操作同5。

9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色

15分钟.

10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止

液后15分钟以内进行。

注意事项:

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好

控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计

算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

计算:

在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD

值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释

倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标

准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值

代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释

倍数,即为样品的实际浓度。

(此图仅供参考)

试剂盒性能:

1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。

2.批内与批见应分别小于9%和11%

检测范围:

5μg/ml -200μg/ml

保存条件及有效期:

1.试剂盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6个月

FOR RESEARCH USE ONLY

Rat ALB

Drug Names

Generic Name:Rat ALB ELISA Kit.

Purpose

This kit allows for the determination of ALB concentrations in Rat serum, cell culture supernatant and other biological fluids.

Principle of the assay

T he kit assay Rat ALB level in the sample,use Purified Rat ALB antibody to coat microtiter plate wells, make solid-phase antibody, then add ALB to wells, Combined ALB antibody which With HRP labeled ,become antibody - antigen - enzyme-antibody complex, after washing Completely, Add TMB substrate solution,TMB substrate becomes blue color At HRP enzyme-catalyzed, reaction is terminated by the addition of a sulphuric acid solution and the color change is measured spectrophotometrically at a wavelength of 450 nm. The concentration of ALB in the samples is then determined by comparing the O.D. of the samples to the standard curve.

Materials provided with the kit

Specimen requirements

1.serum- coagulation at room temperature 10-20 mins,centrifugation 20-min at the speed of

2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.

2.plasma-use suited EDTA or citrate plasma as an anticoagulant,mix 10-20

mins ,centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.

3.Urine-collect sue a sterile container, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m.

remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again. The Operation of Hydrothorax and cerebrospinal fluid Reference to it.

4.cell culture supernatant-detect secretory components, collect sue a sterile container,

centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant,detect the composition of cells, Dilut cell suspension with PBS(PH7.2-7.4), Cell concentration reached 1 million / ml, repeated freeze-thaw cycles, damage cells and release of

intracellular components, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.

5.Tissue samples- After cutting samples, check the weight,add PBS(PH7.2-7.4), Rapidly

frozen with liquid nitrogen, maintain samples at 2-8℃after melting,add PBS(PH7.4), Homogenized by hand or Grinders, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m.

remove supernatant.

6.extract as soon as possible after Specimen collection,and according to the relevant

literature, and should be experiment as soon as possible after the extraction. If it can’t, specimen can be kept in -20 ℃ to preserve, Avoid repeated freeze-thaw cycles.

7.Can’t detect the sample which contain NaN3, because NaN3 inhibits HRP active. Assay procedure

1.Dilute and add sample to Standard: set 10 Standard wells on the ELISA plates coated, add Standard 100μl to the first and the second well, then add Standard dilution50μl to the first and the second well, mix; take out 100μl form the first and the second well then add it to the third and the forth well separately. then add Standard dilution 50μl to the thi rd and the forth well ,mix ; then take out 50μl from the third and the forth well discard, add 50μl to the fifth and the sixth well ,then add Standard dilution 50μl to the fifth and the sixth well, mix ; take out 50μl from the fifth and the sixth well and add to the seventh and the eighth well, then add Standard dilution 50μl to the seventh and the eighth well ,mix ; take out 50μl from the seventh and the eighth well and add to the ninth and the tenth well, add Standard dilution 50μl to the ninth and the te nth well, mix , take out 50μl fro m the ninth and the tenth well discard(add Sample 50μl to each well after Diluting ,(density: 180μg/ml,120μg/ml,60μg/ml,30μg/ml,15μg/ml)

2.add sample:Set blank wells separately (blank comparison wells don’t add sample and HRP-Conjugate reagent, other each step operation is same). testing sample well. add Sample dilution 40μl to testing sample well, then add testing sample 10μl (sample final dilution is 5-fold), add sample to wells , don’t touch the well wall as far as possib le, and Gently mix.

3.Incubate: After closing plate with Closure plate membrane ,incubate for 30 min at 37℃.

4.Configurate liquid: 30-fold (or 20-fold)wash solution diluted 30-fold (or 20-fold) with distilled water and reserve.

5.washing:Uncover Closure plate membrane, discard Liquid, dry by swing, add washing buffer to every well, still for 30s then drain, repeat 5 times, dry by pat.

6.add enzyme:Add HRP-Conjugate reagent 50μl to each well, except blank well.

7.incubate:Operation with 3.

8.washing:Operation with 5.

9.color:Add Chromogen Solution A 50ul and Chromogen Solution B to each well, evade the light preservation for 15 min at 37℃

10.Stop the reaction:Add Stop Solution50μl to each well, Stop the reaction(the blue color change to yellow color).

11.assay:take blank well as zero , Read absorbance at 450nm after Adding Stop Solution and within 15min.

Important notes

1.The kit takes out from the refrigeration environment should be balanced 15-30 minutes in

the room temperature, ELISA plates coated if has not use up after opened, the plate should be stored in Sealed bag.

2.washing buffer will Crystallization separation, it can be heated the water helps dissolve

when dilute . Washing does not affect the result.

3.add Sample with sampler Each step, And proofread its accuracy frequently, avoids the

experimental error. add sample within 5 mins, if the number of sample is much , recommend to use Volley .

4.if the testing material content is excessively higher (The sample OD is bigger than the first

standard well ),please dilute Sample (n-fold), Please diluente and multiplied by the dilution factor.(×n×5).

5.Closure plate membrane only limits the disposable use, to avoid cross-contamination.

6.The substrate evade the light preservation.

7.Please according to use instruction strictly, The test result determination must take the

microtiter plate reader as a standard.

8.All samples, washing buffer and each kind of reject should according to infective material

process.

9. Do not mix reagents with those from other lots.

Calculate

Assay range

5μg/ml -200μg/ml

Storage and validity

1.Storage : 2-8℃. 2.validity : six months.

Take the standard density as the horizontal, the OD value for the vertical ,draw the standard curve on graph paper, Find out the corresponding density according to the sample OD value by the Sample curve, multiplied by the dilution multiple, or calculate the straight line regression equation of the standard curve with the standard density and the OD value ,with the sample OD value in the equation, calculate the sample density, multiplied by the dilution factor, the result is the sample actual density.

This chartis for reference only

小鼠尿微量白蛋白ALB说明书

小鼠尿微量白蛋白(ALB)酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆,相关液体样本尿微量白蛋白(ALB)含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠尿微量蛋白(ALB)水平。用纯化的小鼠尿微量蛋白(ALB)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入尿微量蛋白(ALB),再与HRP标记的ALB抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的尿微量蛋白(ALB)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中小鼠尿微量蛋白(ALB)浓度。 试剂盒组成: 试剂盒组成48孔配置96孔配置保存 说明书1份1份 封板膜2片(48)2片(96) 密封袋1个1个 酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存 标准品:540μg/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存 样本处理及要求: 1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上 清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心 20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程 中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/ 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞

尿微量白蛋白的临床检测的注意事项(精)

尿微量白蛋白的临床检测的注意事项 欧阳嵘 目前,我国患糖尿病、高血压、心脑血管病的人数日益增多。随着病程的发展,肾脏受累的可能性与受累的程度也不断上升。通常情况下血尿素和血肌酐的测定值正常时并不能排除肾脏的受损, 而尿 常规蛋白测定结果为阳性时,肾脏的损伤往往已达到不可恢复的阶段,尿微量白蛋白(MAU) 的测定已越来越多地用做肾组织损伤的早期诊断指标,其临床意义也已日益为临床医生所重视。若在发生微量白蛋白尿的这一阶段积极有效地控制血糖、降压、降脂、减少蛋白摄入量、改善生活方式,仍有希望阻止病情向大量蛋白尿发展或延缓其发展速度,同时也能减少心血管事件的发生[1-2]。但在临床实际操作中,尿微量白蛋白的测定亦有很多需要注意的相关事项,值得我们临床医生去关注。 1、尿微量白蛋白的定义 1982年Viberti等发现1型糖尿病时尿总蛋白在参考范围内,而尿白蛋白排泄却增加,由此提出了“微量白蛋白尿”的概念,并把它作为糖尿病早期肾损害一个敏感指标[3]。其特征是尿白蛋白浓度为 20-200mg/L或白蛋白排泄率20-200μg/min(或30-300mg/24小时),或白蛋白/肌酐比率30-300mg/每克肌酐)。此时尿常规试纸条检测蛋白为阴性。尿常规试纸条检测蛋白为阳性时白蛋白浓度已大于 200mg/L(或白蛋白排泄率大于200μg/min),称为大量白蛋白尿。因尿蛋白浓度受主客观因素影响比较大,故临床上更多采用白蛋白排

泄率或尿白蛋白/肌酐比率来表示尿白蛋白的值。国际上多采用白蛋白排泄率表示尿中白蛋白的排出量。 2、尿微量白蛋白发生的机理 白蛋白(Albumin)占血浆总蛋白量的60%,分子量为69kD,是一种带有负电荷的大分子蛋白。正常情况下在肾小球滤过膜上有许多小孔起机械屏障作用,膜孔直径为5.5nm,限制大分子物质(如血细胞和大分子蛋白质)的滤过。在滤过膜上还存在着带负电荷糖蛋白和硫酸乙酰肝素,这些带负电荷的结构形成了滤过膜的电子学屏障,限制了带负电荷的分子滤过。血浆白蛋白分子量69 kD,且由于其带负电荷,所以正常情况下只有极少部分能滤过,经肾小球滤过的蛋白质几乎全部被近曲小管以主动方式重吸收,因此最后随着尿液而排出的白蛋白只有极少量。正常情况下,绝大部分蛋白不能通过滤过膜。但在病理情况下[4],如各种炎症、代谢异常和免疫损伤,使肾小球血流动力学异常,肾小球滤过膜损害是造成尿微量白蛋白排出量增加的重要原因。糖尿病病人由于长期高血糖使非酶糖酰化速率增加,导致缺氧,血液黏度增高,同时内皮细胞释放内皮素和一氧化氮等血管活性物质使肾小球毛细血管张力改变,进而引起肾血流动力学变化,使肾小球处于高滤过状态并导致肾损害,同时糖尿病患者肾小球滤过膜上硫酸乙酰肝素合成减少,硫酸肝素分子带有许多阴离子侧链,对于维持基底膜电荷和孔径的大小起重要作用,导致肾小球滤过膜电荷选择性屏障受损,使尿微量白蛋白在尿中排出增加[。再加上糖尿病病人存在三多一少症状,近曲小管内的尿流速增加,导致被滤出的白蛋白又不

第二篇 ALB尿微量白蛋白检测

第一部分 尿微量白蛋白(U-Albumin)的临床意义 1982年Viberti等发现了糖尿病患者尿中总蛋白在正常范围,而尿白蛋白排泄增加的现象,首先提出了尿微量白蛋白的观点,并指出了这种蛋白的出现是肾病发生的早期预兆。 随着检测技术的进步,目前主要用于对糖尿病、高血压患者早期检测发现微量蛋白尿,以便及时采取保护肾功能的措施,如限制蛋白的摄入量、禁烟、及时控制血糖和血压。 因此及时检测尿微量白蛋白,对控制和防止早期肾病的发生极为重要。 1、微量白蛋白尿的基本概念 多种疾病可引起尿白蛋白排泄率持续增加,尿中用常规方法不能检测到,叫微量白蛋白。其含量在20-200mg/L,此时如能及时治疗,肾脏损害处在尚可逆转的时期,这种常并发于糖尿病,高血压病人中的尿蛋白,称微量白蛋白。 2、尿正常代谢及尿蛋白的形成 尿是在肾脏内形成的。体内血流经肾小球毛细管时,其中的细胞、大分子蛋白质和脂类等胶体被截留,其余成份则经半透膜滤过进入肾小球中此称为原尿。原尿通过肾小管时,绝大部分水分及电介质和葡萄糖等物质又被吸收回血,同时肾小管也分泌一些物质加入尿中,最后生成终尿。经输尿管、膀胱、尿道排出体外。 病理情况下,由于肾小球内压力增高滤过增加或是基底膜改变,导致高滤过率而出现蛋白尿。 3、微量白蛋白正常值: 健康成年人尿微量白蛋白参考区间 24h尿:<30mg/L(24h最高量) (摘自卫生部医政司“全国临床检验操作规程”2006,第三版p356) 与定性法比较有下列优点: *敏感性高,可测出定性法阴性的标本 *精密度CV5-8% *定量结果测定范围广5-200mg/L *标本量少,20ul尿液 *特异性强能抗尿中多种物质的干扰 *测量时间快,3分钟报告结果 4、尿微量白蛋白测定的临床意义 (1) 、对高血压病的应用价值

尿微量白蛋白

尿微量白蛋白 微量白蛋白尿:指在尿中出现微量白蛋白,定义是24小时尿白蛋白排泄率在30-300mg;微量白蛋白尿反映肾脏异常渗漏蛋白质。 检测方法:临床上主要使用免疫透视比浊法尿微量白蛋白进行检测。除此之外,放射免疫法、酶联免疫法和化学发光等方法。 免疫透视比浊法:抗原抗体结合后,形成免疫复合物,在一定时间内复合物聚合出现浊度。当光线通过溶液时,可被免疫复合物吸收。免疫复合物量越多,光线吸收越多。光线被吸收的量在一定范围内与免疫复合物的量成正比。利用比浊计测定光密度值,复合物的含量与光密度值成正比,同样当抗体量一定时,光密度值也与抗原含量成正比。本法较单向琼脂扩散试验和火箭电泳等一般免疫化学定量方法敏感、快速简便,但要求免疫复合物的数量和分子量达到一定高度,否则就难以测出。该方法注意事项:1、抗原或抗体量大大过剩,可出现可溶性复合物,造成误差。2、应维持反应管中抗体蛋白始终过剩。3、易受到脂血的影响。 意义:正常情况下,由于肾小球滤过膜电荷选择性屏障的静电同性排斥作用,MAU大部分不能通过滤过膜,而各种炎症、代谢异常和免疫损伤均可导致滤过膜上负电荷减少,静电排斥力下降,造成MAu从尿中漏出增多;尿微量白蛋白是早期发现肾病最敏感、最可靠的诊断指标,判断肾小球受损程度的重要蛋白,是糖尿病肾病最早期的生化表现,也是肾病进展和发生心血管事件危险性的一个重要标记。 24小时尿蛋白 24小时尿蛋白:包括尿液中出现的所有蛋白(分子量最小的白蛋白,分子量较中-大的免疫球蛋白、转铁蛋白、β2一微球蛋白等); 检测方法:24小时尿蛋白定量检测前必须排除泌尿系感染、运动等影响,要先用量杯量总尿量,然后搅匀,取出一小杯测定每100毫升的蛋白量,再根据实际尿量进行计算,可计出24小时的蛋白量,检测方法为双缩脲比色法、比浊法和染料结合法;意义:24小时尿蛋白可以反映各期肾炎、肾病等早期病变、治疗效果及转归化时; 两者区别 微量白蛋白主要是指白蛋白,主要早期反映肾小球滤膜的损害; 尿蛋白是包括白蛋白,还包括分子量较中-大的免疫球蛋白、转铁蛋白、β2一微球蛋白等,尿蛋白异常反映可能为肾小球损害,也可能为肾小管损害。

尿检微白蛋白是什么意思呢

如对您有帮助,可购买打赏,谢谢 生活常识分享尿检微白蛋白是什么意思呢 导语:随着现代社会实体经济日益俱下,很多白领人士为了保住自己的饭碗,所以他们经常都会养成憋尿的习惯,从而才能挪出更多的时间来进行工作。可 随着现代社会实体经济日益俱下,很多白领人士为了保住自己的饭碗,所以他们经常都会养成憋尿的习惯,从而才能挪出更多的时间来进行工作。可这些不良的生活习惯却容易导致他们出现一些肾脏疾病,因此很多朋友都会进行尿检微白蛋白,那么尿检微白蛋白是什么意思呢?接下来的时间就请朋友们和我一起去讨论一下。 尿微量白蛋白英文缩写:mAlb。量白蛋白尿是指在尿中出现微量白蛋白。微量白蛋白尿是指在尿中出现微量白蛋白。白蛋白是一种血液中的正常蛋白质,但在生理条件下尿液中仅出现极少量白蛋白。白蛋白是一种血液中的正常蛋白质,但在生理条件下尿液中仅出现极少量白蛋白。微量白蛋白尿反映肾脏异常渗漏蛋白质。尿微量白蛋白的增高多见于糖尿病肾病、高血压、妊娠子痫前期,是肾损伤的早期敏感指标。尿微量白蛋白,是糖尿病肾病、高血压肾病等的早期肾脏受损的表征。尿微量白蛋白正常值的参考值为0.49~2.05mg/mmol·Cr或4.28—18.14mg/g·Cr。 微量白蛋白尿是指在尿中出现微量白蛋白。白蛋白是一种血液中的正常蛋白质,但在生理条件下尿液中仅出现极少量白蛋白。微量白蛋白尿反映肾脏异常渗漏蛋白质。尿微量白蛋白的增高多见于糖尿病肾病、高血压、妊娠子痫前期,是肾损伤的早期敏感指标。尿微量白蛋白正常值的参考值为0.49~2.05mg/mmol·Cr或4.28—18.14mg/g·Cr。尿微量白蛋白是评估肾脏受损程度:当发现尿微量白蛋白在20mg/L-200mg/L范围内,尿常规尿蛋白的显示为阴性(-)或(+-),就属于微量白

人尿微量白蛋白(m-Alb)检测试剂盒(透射比浊法)

人尿微量白蛋白(m-Alb)检测试剂盒(透射比浊法) 简介: Viberti 等人发现尿中白蛋白排泄的增加率,可以提示胰岛素依赖性糖尿病肾病发作,但此时尿中总蛋白排泄正常,尿常规蛋白定性实验为阴性,而尿白蛋白排泄增加,称之为微量白蛋白(microablumin ,m-Alb)尿。 Leagene 人尿微量白蛋白(m-Alb)检测试剂盒(透射比浊法)其检测原理是尿液中的白蛋白与抗白蛋白特异抗体在液相中反应生成m-Alb 抗原抗体复合物,使反应液呈一定浊度。本试剂盒专门用于人尿液中的微量白蛋白含量测定。本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。 组成: 操作步骤(仅供参考): 1、 准备试剂:临用前,各种试剂均应平衡至室温。 2、 绘制标准曲线:取白蛋白标准(198mg/L),依次稀释后供标准曲线用,其浓度分别为 198mg/L 、99.0mg/L 、49.5mg/L 、19.8mg/L 、9.9mg/L 。 3、 m-Alb 测定操作:分光光度计手工或半自动生化分析仪检测,按下表依次加入试剂: 4、 充分混匀, 盖上塑料膜,37℃孵育。 5、 再次混匀,分光光度计测定340nm 波长处的吸光度。以空白管调零,读取标准管和各 待测管的最终吸光度为A 2。 6、 绘制标准曲线:以上述5种浓度的标准液,分别制作5个标准管,同上操作,测定吸 编号 名称 TC068950T Storage 试剂(A): m-Alb buffer 50ml RT 试剂(B): 白蛋白标准(198mg/L) 0.2ml -20℃ 试剂(C): m-Alb 抗体工作液 0.5ml -20℃ 试剂(D): m-Alb 生理盐水 30ml RT 使用说明书 1份 标准管 待测管 m-Alb buffer(ml) 1.0 1.0 白蛋白标准(μl) 100 待测样本(μl) 100 混匀,m-Alb 生理盐水调零,读取起始吸光度A 1,然后加入: m-Alb 抗体工作液(μl) 100 100

尿微量白蛋白MALB检测

尿微量白蛋白MALB检测 1检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果的准确。 2 实验原理 将未稀释的样品加入含有抗人血清白蛋白特异性抗体的缓冲液变浊溶液吸光度值(340nm)与尿液样品中白蛋白浓度成正相关。 3 标本: 3.1 病人准备:留取24h尿液标本(加苯防腐)混匀后记录尿液总量取少量尿液离心;清晨中段尿。 3.2 类型:尿液 3.3 标本存放尿液的稳定性:20~25℃保存可稳定1天,2~8℃保存至少可稳定2天; -20℃保存可稳定6个。 3.4 标本运输常温条件下运输。 3.5 标本拒收标准细菌污染的标本。 4 实验材料

4.1 试剂:上海倍特生物科技有限公司Malb试剂盒 4.1.1 试剂组成 R1:TRIS /HCL缓冲液:20 mmol/l,pH 7.4;氯化钠:150 mmol/L;聚乙二醇6% R2:抗人白蛋白TRIS /HCL缓冲液:20 mmol/l,pH 7.4氯化钠:150 mmol/l 4.1.2 试剂准备:试剂为即用式。 4.1.3 试剂稳定性与贮存:2-8°C下保存期限:见试剂标签上的有效期。机上稳定期:90天。 4.1.4变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染则试剂不能使用。 4.2 校准品:使用试剂盒里校准品自动分析仪进行校准。 5 仪器 AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪 6 操作步骤

6.1 样品的准备:将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。 6.2 试剂的检测:仪器开机后,检查各种试剂的位置,体积等确认无误后方可进行测定。 6.3 项目基本参数:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。 6.4仪器操作步骤:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪操作规程。 7 质量控制 在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。 8 计算方法 以MALB校准品校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果,以mg/L报告。

尿微量白蛋白(mALB)检测试剂盒(化学发光—免疫分析法)产品技术要求深圳安群生物

医疗器械产品技术要求编号: 尿微量白蛋白(mALB)测定试剂盒(化学发光-免疫分析法) 2性能指标 2.1试剂盒 2.1.1外观和性状 (1)试剂盒各个组分应齐全、完整、液体无渗漏。 (2)中文包装标签应清晰,准确、牢固。 (3)试剂R1 为澄清透明液体,无沉淀、颗粒或絮状物。 (4)试剂R2 为略带乳白色均一性液体,无明显沉淀、颗粒或絮状物。 (5)试剂R3 为澄清透明液体,无沉淀、颗粒或絮状物。 2.1.2装量 液体装量应不少于标示值。 2.1.3准确度 相对偏差应不超过±10 .0%。 2.1.4空白限 应不大于 2.0mg/L。 2.1.5线性 (a)在 4.0mg/L~200.0mg/L 范围内,其相关系数r 应不小于0.9900。 (b)[4.0,20.0] mg/L 范围内,线性绝对偏差应不超过±2.0 mg/L;在(20.0,200.0] mg/L 范围内,线性相对偏差应不超过±10 %。 2.1.6批内精密度 批内变异系数(CV)应≤10.0%。

2.1.7批间精密度 批间变异系数(CV)应≤10.0%。 2.2校准品 2.2.1外观和性状 澄清透明液体,不得有沉淀、颗粒或絮状物。

2.2.2装量 液体装量应不小于标示值。 2.2.3校准品测量准确度(S0 除外) 用工作校准品校准测量系统后,以试剂盒配套的校准品作为样本进行检测,其测定结果与标示值的相对偏差应在±10.0%范围内。 2.2.4校准品均一性(S0 除外) 瓶内CV 应不大于10.0%; 瓶间CV 应不大于10.0%。 2.3质控品 2.3.1外观和性状 澄清透明液体,不得有沉淀、颗粒或絮状物。 2.3.2装量 液体装量应不小于标示值。 2.3.3质控品测定值 用试剂盒配套的校准品校准测量系统后,以试剂盒配套的质控品作为样本进行检测,其测定结果应在标示范围内。 2.3.4质控品均一性 瓶内CV 应不大于10.0%; 瓶间CV 应不大于10.0%。

尿微量蛋白正常值是多少

尿微量蛋白正常值是多少 拥有健康的身体是每个人的愿望,肾脏是我们身体中比较重要的排泄器官,然而一旦肾脏出现问题,往往都是通过化验尿液就能很准确的检查出肾脏的疾病,其中尿微量蛋白检查就是对肾脏疾病很好判断的一种检查项目,但是我们对他缺少了解,对它的正常值并不知道是多少,为了能够更早的知道化验结果,下面一起了解一下尿微量蛋白正常值是多少。 尿微量蛋白正常值是多少 人体代谢正常情况下,尿中的白蛋白极少,具体到每升尿白蛋白不超过20mg(20mg/L),所以叫微量白蛋白。如果在体检后发现尿中的微量白蛋白在20mg/L-200mg/L范围内,就属于微量白蛋白尿。如果是高血压及糖尿病患者则高度怀疑是肾小球早期损伤,此时正规治疗可阻止肾脏纤维化进展,修复受损肾脏固有细胞,恢复正常肾脏功能。 提醒:当尿中微量白蛋白超过200mg/L时,就应该引起注意了,此时证明肾病患者已有大量白蛋白漏出,可能出现低蛋白血症,肾病发展离不可逆期只有一步之遥,尿常规测试尿蛋白阳性

(+)~(+++),如果不及时进行医治,就会进入尿毒症期。 尿微量白蛋白的检测是早期发现肾病最敏感的、最可靠的治标,通过尿微量白蛋白的检查,以及结合病人病史、发病情况、症状、其他化验治标,一般可以判定导致尿微量白蛋白的原因,是生理性尿微量白蛋白?还是病理性尿微量白蛋白?排除肾病 的可能性,或发现病因及早治疗 上面就是对尿微量蛋白正常值是多少的介绍,通过了解之后我们对这种疾病有了更新的认识,知道患有疾病一定要及时的进行检查和治疗,另外平时也要保持良好生活习惯,尽量不要抽烟喝酒,饮食上一定要注意营养的均衡,另外平时也要注意自己身体的保暖,在出现不适的时候要及时咨询医生。

尿液微量白蛋白

概 述 华通牌HT系列干化学尿液分析试纸条可以检测尿液中的维生素C(Vc)、白细胞(LEU)、潜血(BLD)、尿胆原(URO)、胆红素(BIL)、尿比重(SG)、酸碱度(PH)、蛋白质(PRO)、亚硝酸盐(NIT)、葡萄糖(GLU)、酮体(KET)、肌酐(CRE)、钙离子(Ca)、微量白蛋白(MCA)等十四个项目。其中肌酐(CRE)、钙离子(Ca)、微量白蛋白(MCA)是全国首创,对干化学尿液分析临床检验有重大的突破,用户可以根据选购的仪器型号来检测相应的项目。该试纸条可目测,属体外诊断试剂,仅限于专业人员使用。 本试纸的应用是建立在临床分析研究之上的,适用于半定量的仪器。对临床尿样,试验敏感度取决于下面几个因素:对颜色接收的差异,尿样中有无干扰因素或抑制因素,尿比重、尿酸碱度和比色时的光强度等。每一色标或仪器显示(或打印)的数值代表一个数值范围。由于尿样和比色的差异,检测得到有关分析物的浓度,如果在两个设定值之间,检测结果由仪器认定的其中一个值是合理的。 1

一、尿液微量白蛋白 (一)微量白蛋白试纸条的临床意义 尿中微量白蛋白测定应用,被称为80年代对糖尿病学的两大贡献之一,微量白蛋白的测定不仅对糖尿病肾病的早期诊断和改善预后具有划时代的意义,而且对于高血压肾病,子痫及各种毒性物质的肾损伤其具有重要的诊断价值.因此,对MCA测定已成为早期肾脏损伤监测和追踪的重要生化指标. 微量白蛋白与肌酐的比值是即刻检查尿液微量白蛋白的方法,因此这个比值的异常也就是糖尿病肾病和高血压肾病最早出现的生化指标。 糖尿病诱发微量白蛋白的原因有三: 1. 是肾球损伤的结果,具体的说是肾小球滤膜上电荷的丢失,尤其是孔径大小选择功能的破坏。 2. 是血流功力学的改变,也就是说糖尿病人常伴有肾小球血管调节功能障碍。而引起肾内高压。 3. 高浓度糖化血红蛋白及白清蛋白引起的基膜屏障功能的改变,但是蛋白穿透基膜,形成蛋白尿。 (二) 白的生化特性和影响因素 白蛋白是血浆中含量最高的蛋白质,是一种带负电荷的大分子,分子量为69KD,平均44g/L,半径为3.6nm。而正常的肾小球基底膜平均孔径为5.5nm,表面也带有负电荷。因此,正常情况下只有少量的白蛋白被滤过,滤过系数为0.0002,滤过的白蛋白有95%又在近曲小管被重新吸收,故尿中的MCA的含量是很低的,通常在几个mg/L以下;当大于15mg时,就被称为临床蛋白尿。 影响微量白蛋白浓度的因素有: 1. 尿MCA排出量受人的体位,运动血压,蛋白质摄入人量的影响,发热,精神紧张也可以使尿中的MCA增加。 2

[整理]ALB尿微量白蛋白检测

第一部分尿微量白蛋白(U-Albumin)的临床意义 1982年Viberti等发现了糖尿病患者尿中总蛋白在正常范围,而尿白蛋白排泄增加的现象,首先提出了尿微量白蛋白的观点,并指出了这种蛋白的出现是肾病发生的早期预兆。 随着检测技术的进步,目前主要用于对糖尿病、高血压患者早期检测发现微量蛋白尿,以便及时采取保护肾功能的措施,如限制蛋白的摄入量、禁烟、及时控制血糖和血压。 因此及时检测尿微量白蛋白,对控制和防止早期肾病的发生极为重要。 1、微量白蛋白尿的基本概念 多种疾病可引起尿白蛋白排泄率持续增加,尿中用常规方法不能检测到,叫微量白蛋白。其含量在20-200mg/L,此时如能及时治疗,肾脏损害处在尚可逆转的时期,这种常并发于糖尿病,高血压病人中的尿蛋白,称微量白蛋白。 2、尿正常代谢及尿蛋白的形成 尿是在肾脏内形成的。体内血流经肾小球毛细管时,其中的细胞、大分子蛋白质和脂类等胶体被截留,其余成份则经半透膜滤过进入肾小球中此称为原尿。原尿通过肾小管时,绝大部分水分及电介质和葡萄糖等物质又被吸收回血,同时肾小管也分泌一些物质加入尿中,最后生成终尿。经输尿管、膀胱、尿道排出体外。 病理情况下,由于肾小球内压力增高滤过增加或是基底膜改变,导致高滤过率而出现蛋白尿。 3、微量白蛋白正常值: 健康成年人尿微量白蛋白参考区间 24h尿:<30mg/L(24h最高量) (摘自卫生部医政司“全国临床检验操作规程”2006,第三版p356) 与定性法比较有下列优点: *敏感性高,可测出定性法阴性的标本 *精密度CV5-8% *定量结果测定范围广5-200mg/L *标本量少,20ul尿液 *特异性强能抗尿中多种物质的干扰 *测量时间快,3分钟报告结果

尿微量白蛋白(MAU)测定试剂盒(胶体金免疫层析法)产品技术要求贝尔

尿微量白蛋白(MAU)测定试剂盒(胶体金免疫层析法) 适用范围:于体外定量测定人尿液中的尿微量白蛋白(MAU)含量。 1.1包装规格 20人份/盒 1.2 主要组成成分 本试剂盒由MAU检测卡、干燥剂和滴管组成。MAU检测卡由试纸条外壳与试纸条构成。试纸条由样品垫、胶体金垫(喷有由胶体金标记的MAU单克隆抗体)、层析膜(T线包被有MAU单克隆抗体,C线包被有羊抗鼠IgG抗体)、吸水纸、衬垫构成。检测卡为20人份/盒,干燥剂为1个/袋,滴管为20个/盒。 2.1 物理性状 2.1.1 外观 试剂盒各组分齐全、完整;包装袋应密封性好无破损;标签清晰;材料附着牢固,条宽应适应于卡壳且装配紧密。 2.1.2 膜条宽度 膜条宽度应不低于4.0mm。 2.1.3 液体移行速度 液体移行速度应不低于10mm/min。 2.2 空白检测限 应小于5.0mg/L。 2.3 重复性 用10mg/L尿微量白蛋白(MAU)参考品和100mg/L尿微量白蛋白(MAU)参考品各重复检测10次,其变异系数(CV)应不大于15%。 2.4 准确度 将200.0mg/L尿微量白蛋白(MAU)参考品加入到尿微量白蛋白(MAU)含量5.0mg/L 正常人尿液参考品中,按照体积比1:9混合,对混合后样本进行检测,回收率应在85%~115%范围内。 2.5 线性 线性范围为[5.0,200]mg/L,试剂盒的相关系数r应≥0.99。 2.6 批间差

用3个批号试剂盒分别对10.0mg/L尿微量白蛋白(MAU)参考品和100.0mg/L 尿微量白蛋白(MAU)参考品各重复检测10次,则3个批号试剂盒之间的批间相对偏差(R)应不大于15%。 2.7 稳定性 效期稳定性:2~30℃条件下放置有效期12个月后一个月内,检测物理性状、空白检测限、重复性、准确度、线性应符合2.1~2.6项的要求。

尿微量白蛋白测定试剂盒(免疫比浊法)产品技术要求海丰

尿微量白蛋白测定试剂盒(免疫比浊法) 适用范围:本产品适用于体外定量测定人尿液中白蛋白(mALB)的含量。 1.1 产品规格 1.2 主要组成成分 注:校准品具有批间、赋值特异性,具体值详见靶值单。 2.1外观 2.1.1试剂盒标签标识清晰,外包装完整无破损; 2.1.2试剂1为无色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物; 2.1.3试剂2为无色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物; 2.1.4校准品:无色或浅黄色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物。

2.2净含量 净含量不低于标示值。 2.3空白吸光度 测定待检试剂在主波长340nm、副波长700nm、37℃条件下:A≤0.2。 2.4线性范围 (5,280)mg/L范围内,相关系数r≥0.990; (5,30]mg/L范围内,绝对偏差不超过±3mg/L; (30,280)mg/L范围内,相对偏差不超过±10.0%。 2.5分析灵敏度 在说明书规定参数设定条件下,测定浓度50mg/L的样本,△A≥0.05。 2.6 精密度 2.6.1批内重复性 CV≤10.0%。 2.6.2 批间差 相对极差R≤10.0%。 2.7 准确度 与已上市产品比对:(5,280)mg/L范围内,相关系数r≥0.990;(5,30]mg/L 范围内,绝对偏差不超过±3mg/L;(30,280)mg/L范围内,相对偏差不超过±10.0%。 2.8 校准品 2.8.1 均一性:CV≤5.0%; 2.8.2 开瓶稳定性:开瓶后3天,相对偏差不超过±10.0%。 2.9 稳定性 未开封试剂2℃~8℃储存,可稳定12个月。取到效期后2个月内产品进行检测, 检测结果应满足2.3、2.4、2.5、2.6.1和2.7的要求。 2.10溯源性 依据GB/T 21415—2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求,校准品溯源至工作校准品,工作校准品经与Audit Diagnostics尿微量白蛋白测定试剂盒比对测量赋值。

尿检微白蛋白是什么意思呢

尿检微白蛋白是什么意思呢 随着现代社会实体经济日益俱下,很多白领人士为了保住自己的饭碗,所以他们经常都会养成憋尿的习惯,从而才能挪出更多的时间来进行工作。可这些不良的生活习惯却容易导致他们出现一些肾脏疾病,因此很多朋友都会进行尿检微白蛋白,那么尿检微白蛋白是什么意思呢?接下来的时间就请朋友们和我一起去讨论一下。 尿微量白蛋白英文缩写:mAlb。量白蛋白尿是指在尿中出现微量白蛋白。微量白蛋白尿是指在尿中出现微量白蛋白。白蛋白是一种血液中的正常蛋白质,但在生理条件下尿液中仅出现极少量白蛋白。白蛋白是一种血液中的正常蛋白质,但在生理条件下尿液中仅出现极少量白蛋白。微量白蛋白尿反映肾脏异常渗漏蛋白质。尿微量白蛋白的增高多见于糖尿病肾病、高血压、妊娠子痫前期,是肾损伤的早期敏感指标。尿微量白蛋白,是糖尿病肾病、高血压肾病等的早期肾脏受损的表征。尿微量白蛋白正常值的参考值为0.49~2.05mg/mmol·Cr或4.28—18.14mg/g·Cr。

微量白蛋白尿是指在尿中出现微量白蛋白。白蛋白是一种血液中的正常蛋白质,但在生理条件下尿液中仅出现极少量白蛋白。微量白蛋白尿反映肾脏异常渗漏蛋白质。尿微量白蛋白的增高多见于糖尿病肾病、高血压、妊娠子痫前期,是肾损伤的早期敏感指标。尿微量白蛋白正常值的参考值为0.49~2.05mg/mmol·Cr 或4.28—18.14mg/g·Cr。尿微量白蛋白是评估肾脏受损程度:当发现尿微量白蛋白在20mg/L-200mg/L范围内,尿常规尿蛋白 的显示为阴性(-)或(+-),就属于微量白蛋白尿,这个时候说明 肾脏已经损伤。而当尿中微量白蛋白超过200mg/L时,尿常规测试尿蛋白阳性(+)~(+++),就应该警惕了,此时证明机体已有大 量白蛋白漏出,可能出现低蛋白血症,肾病发展离不可逆期只有一步之遥,如果不及时进行医治,就会进入尿毒症期。 上面几段文字内容就为我们详细地介绍了尿检微白蛋白,在此我衷心希望有这方面疑虑的朋友们能够认真阅读上面的内容,这样在日常生活中针对尿检微白蛋白偏高的时候才能做出更多 有效的措施。当然我想提醒大家的是,不管我们的工作多么忙碌,一定不要养成憋尿的习惯,否则后果将是非常严重的。

晨尿微量白蛋白测定对早期糖尿病肾病的诊断意义(一)

晨尿微量白蛋白测定对早期糖尿病肾病的诊断意义(一) 【摘要】目的:证实晨尿微量白蛋白测定可代替24h尿微量白蛋白测定。方法:取124例住院的糖尿病患者晨尿和24h尿液同时行尿微量白蛋白测定,并进行对比分析。结果:晨尿微量白蛋白和24h尿微量白蛋白浓度两者之间存在正相关性。结论:晨尿微量白蛋白测定可代替24h尿微量白蛋白测定。 【关键词】糖尿病肾病晨尿微量白蛋白DiagnosticSignificanceofEarlyMorningUrineMicroAlbuminDeterminationtoEarlyDiabetesNephrosi s AbstractObjective:Toprovetheearlymorningurinemicroalbumindeterminationmayreplace24hours urinesmicroalbumindetermination.Methods:Takesdiabetespatientearlymorningurineand24hours urine,which124examplesishospitalizedwithfashionableurinemicroalbumindetermination.Results: Theearlymorningurinemicroalbuminand24hoursurinesmicroalbumindensitytwobetweenhasthere levance.Conclusion:Theearlymorningurinemicroalbumindeterminationmayreplace24hoursurines microalbumindetermination. Keyword:Diabetesnephrosis;Earlymorningurine;Microalbumin 随着人们生活水平的日益提高,糖尿病的发病率也在逐年上升,每年约增加100万新发糖尿病患者,且主要在发展中国家流行。因此,对糖尿病及其并发症的早期诊断和治疗显得尤为重要。众所周知,尿微量白蛋白是糖尿病肾病的一个早期诊断指标,但是,连续24h留取尿液对当今生活节奏日益加快的人们来说,增加了诸多不便,尤其是门诊患者。我院多年来开展了晨尿微量白蛋白检测项目,大大地方便了患者,简化了留取尿液的复杂程序,取得了较好的社会效益和经济效益。 1对象与方法 本组收集的病例均为近2年在我科住院的糖尿病患者,其中有179例同时行晨尿和24h尿微量白蛋白测定,去除55例不合格病例,还剩124例,其中男性65例,女性59例。患者年龄在11岁~85岁,平均年龄54.76岁,病程长短不一,所收集病例尿常规检查蛋白均为阴性,肾功能正常、否认肾炎、近期尿路感染、发热、心力衰竭等病史。受检者留取晨起第一次尿液和同日24h尿液(放入一固定容器中、内加防腐剂)。本实验采用中国原子能科学研究院同位素研究所所提供的放射免疫测定药盒检测,放射源为I125,本药盒主要用于测定人尿中白蛋白的含量,采用免疫沉定剂(DP-R试剂)分离法,操作简便、快捷、准确、可靠。 2结果 根据白蛋白放射免疫测定药盒说明书提供的正常参考值,晨尿微量白蛋白为0.82ug/ml~8.68ug/ml。24h尿微量白蛋白30mg~300mg为微量白蛋白尿阳性,笔者将本组病例分为两组即晨尿微量白蛋白<8.68ug/ml组和晨尿微量白蛋白≥8.68ug/ml组,结果显示:晨尿微量白蛋白<8.68ug/ml者,其24h尿微量白蛋白均<30mg,最高值仅为24.03ug/ml,且进一步分析发现,晨尿微量白蛋白<10ug/ml者其24h尿微量白蛋白也均<30mg,见表1。对两组资料行相关分析,第一组(尿微量白蛋白<8.68ug/ml)相关系数r=0.8054,直线方程y=0.804+1.723X。第二组(尿微量白蛋白≥8.68ug/ml)相关系数r=0.8162,直线方程y=2.249+1.612X。由此可得出结论:晨尿微量白蛋白测定分别与相应的24h尿微量白蛋白浓度具有直线相关性,晨尿微量白蛋白测定完全可代替24h尿微量白蛋白测定。表1晨尿微量白蛋白与24h尿微量白蛋白的关系例(略)

尿微量白蛋白正常值

尿微量白蛋白正常值 微量白蛋白尿是指在尿中出现微量白蛋白。白蛋白是一种血液中的正常蛋白质,但在生理条件下尿液中仅出现极少量白蛋白。微量白蛋白尿反映肾脏异常渗漏蛋白质。尿微量白蛋白的增高多见于糖尿病肾病、高血压、妊娠子痫前期,是肾损伤的早期敏感指标。尿微量白蛋白正常值的参考值为0.49~2.05mg/mmol〃Cr或4.28—18.14mg/g〃Cr。通常应用尿微量蛋白指标来监测肾病的发生。尿微量蛋白的检测是早期发现肾病最敏感、最可靠的诊断指标。通过尿微量白蛋白的数值,结合发病情况、症状以及病史陈述就可以较为准确的诊断病情. 尿微量白蛋白是评估肾脏受损程度:当发现尿微量白蛋白在20mg/L-200mg/L范围内,尿常规尿蛋白的显示为阴性(-)或(+-),就属于微量白蛋白尿,这个时候说明肾脏已经损伤,如果患者能够经过规范的修复肾单位,逆转纤维化治疗,尚可彻底修复肾小球,消除蛋白尿。而当尿中微量白蛋白超过200mg/L时,尿常规测试尿蛋白阳性(+)~(+++),就应该警惕了,此时证明机体已有大量白蛋白漏出,可能出现低蛋白血症,肾病发展离不可逆期只有一步之遥,如果不及时进行医治,就会进入尿毒症期。

微量白蛋白尿诊断 判断依据:尿中蛋白排出增加是糖尿病肾病的特征之一,根据蛋白排出量,可将糖尿病肾病分为早期肾病期和临床肾病期。微量白蛋白尿是临床诊断早期糖尿病肾病的主要依据。 ①正常尿中微量白蛋白小于20微克/分(即30毫克/24小时)。 ②早期肾病期,也叫微量白蛋白尿期,即尿白蛋白排泄率持续在20~200微克/分。 ③临床蛋白尿期,尿蛋白逐渐增多,尿白蛋白排泄率超过200微克/分,也就是超过300毫克/24小时,相当于尿蛋白总量超过0.5克/24小时。 注意事项:微量白蛋白尿用常规的方法基本不能查出,临床上多采用免疫化学技术测定,所以仅仅检查尿常规是不能发现尿中微量白蛋白的。 取样方法 检测尿微量白蛋白时,尿样的留取方式有三种:定时留尿法计算出单位时间内的尿白蛋白排出率。 留尿方法: ①主要取临睡前至次晨这一时间段的尿样本进行检测, ②临睡前排尿并准确记录时间(精确到分钟),睡前尿样不留。

尿微量白蛋白的临床检验意义及诊断价值

尿微量白蛋白的临床检验意义及诊断价值 【摘要】目前,我国患糖尿病、高血压、心脑血管疾病的人数日益增多。随着病程的发展,肾脏受累的可能性与受累的程度也不断上升。通常,血尿素和血肌酐的测定值正常时并不能排除肾脏的受损,而尿常规蛋白测定结果为阳性时,肾脏的损伤往往已达到不可恢复的阶段。尿微量白蛋白(MA)的测定已越来越多地用做肾组织损伤的早期诊断指标,其临床意义也已日益为临床医生所重视。 【关键词】尿微量白蛋白;糖尿病;尿微量蛋白 1 尿微量蛋白的定义 微量蛋白尿是指尿中蛋白含量超出健康人参考范围,但不能用常规的方法检测这种微量的变化。白蛋白(Albumin)占血浆总蛋白量的60%,分子量为69 kD,是一种带有负电荷的大分子蛋白。正常情况下只有极少量的白蛋白可以通过尿液排出到体外。肾小球毛细血管基底膜具有滤过功能,膜孔直径为5.5 nm。Albumin半径为3.6 nm,正常状态下Albumin很难通过肾小球基底膜。任何能够引起肾小球基底膜通透性增高的病变,均可导致Albumin的排出。尿微量白蛋白(MA)是指尿液中白蛋白一直处于20 mg/min~200 mg/min的持续排泄浓度,或者晨尿的白蛋白量位于20 mg/L~200 mg/L之间。当肾脏受到损害时,尿MA排出会增加。我们认为尿MA排出增加的机制可能与膜上的硫酸肝素合成异常相关。 2 尿微量蛋白的检测方法 目前国内常用的尿MA的检测方法有:免疫扩散法、免疫电泳法、免疫比浊法、放射免疫法、酶联免疫吸附法等[1],现在较多采用的方法是免疫比浊法。 3 尿MA的临床检验意义 3.1 尿MA在糖尿病肾病(DN)诊断中的作用 DN是糖尿病(DM)的重要并发症之一,在早期存在可逆性,如果能及早发现并进行干预治疗,肾脏损伤有可能恢复早期,肾损伤的确诊有赖于肾脏组织的病理学检查,但必须做侵害性的肾活检,我们通过检测DM患者尿MA帮助其在肾组织早期损伤的诊断。正常尿中有少量白蛋白存在,肾脏损伤早期,MA滤出的重要原因之一是肾小球滤过膜负电荷的选择性丢失。梁淑媛、于晓春等人对158例DM患者(男性78例,女性80例;年龄在36岁~74岁,平均年龄52岁)的尿MA进行检测,结果表明DM组约45%的人尿MA含量有不同程度的增高,而正常对照组的结果均<30 mg/L(P<0.05),说明尿MA可以做为诊断DN和肾功能损伤的指标之一。 3.2 尿MA检测在心血管疾病中的临床意义

大鼠尿微量白蛋白(ALB)说明书

大鼠尿微量白蛋白(ALB)酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,细胞上清及相关液体样本中尿微量白蛋白(ALB)的含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠尿微量白蛋白(ALB)水平。用纯化的大鼠尿微量白蛋白(ALB)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入尿微量白蛋白(ALB),再与HRP标记的尿微量白蛋白(ALB)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的尿微量白蛋白(ALB)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠尿微量白蛋白(ALB)浓度。 样本处理及要求: 1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上 清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心 20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程 中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/ 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备 用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上 进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 操作步骤: 1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标 准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180μg/ml,120μg/ml,60μg/ml,30μg/ml,15μg/ml)。 2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样 品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。 5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此 重复5次,拍干。 6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 7.温育:操作同3。 8.洗涤:操作同5。 9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色 15分钟. 10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止 液后15分钟以内进行。 注意事项: 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好

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