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甘油三酯试剂盒使用说明书

甘油三酯试剂盒使用说明书
甘油三酯试剂盒使用说明书

自己从试剂说明书上打的,主要是为了了解酶比色法测定甘油三酯的原理。

甘油三酯试剂盒使用说明书

Triglycerides Kit (TG)

酶比色法 通用型(冻干粉)

用途:

本试机用于测定人血清中甘油三酯的浓度。 测定原理:

甘油三酯+??→?LPS

O H 23甘油+脂肪酸 甘油+ATP ?→?GK

甘油-3-磷酸+ADP

甘油-3-磷酸+2O ??

→?GPO

磷酸二羟丙酮+22O H 22O H +4-氨基安替砒啉+4-氯酚??

→?POD

醌亚胺+O H 22+HCL

试剂稳定性:

原装试剂在2~8℃避光保存,有效期36个月。

试剂复溶后在2~8℃保存稳定2周,在15~25℃保存稳定2天。 样品:

新鲜无溶血血清。 操作步骤:

波长:500nm (480~520nm) 反映温度:37℃ 比色杯光径:1cm

取一定量R1(参看R2瓶签)加入1瓶R2中,溶解后即为工作液,工作液预先保温至测试温

分别混合均匀,在反应温度保温10分钟,以试剂空白管校零,度校准A 及样品A 。 计算: 甘油三酯浓度=

校准

样品A A ×校准浓度(mmol/L 或mg/dl )

参考值:

正常值范围<1.71mmol/L(150mg/dl)

临界值1.71mmol/L~2.26mmol/L(150mg/dl~200mg/dl) 高甘油三酯症>2.26mmol/L(200mg/dl)

各医院应根据本地区实际情况建立自己的参考值。 线性上限:`

甘油三酯浓度可达11.29mmol/L(100mg/dl) 主要性能指标:

1. 试剂空白吸光度:在500nm(480~520nm)处,A ≤0.1。

2. 准确性:相对偏差不超过±10%。

3. 瓶间差:变异系数(CV%)≤4%

4. 批间差:随机抽取三批试剂盒的批间差≤6%。

5. 线性误差:在1.13mmol/L~11.29mmol/L 范围内不超过±10%。 注意事项:

1. 若样品甘油三酯含量过高,用生理盐水稀释后重新测定。结果乘以稀释倍数。

2. 由于样品中可能存在游离甘油,为得真正的甘油三酯值,应用以上计算所得的值减去

0.11mmol/L(10mg./dl)。若使用的校准液是质控定制血清,则应使用生产厂家提供的值。 3. 操作本试剂时,特别要防止器皿、移液器、手对试剂的污染。

4. 本产品仅用于体外诊断,内含叠氨钠,应避免直接接触皮肤和眼睛,切勿吞咽。

5. 本产品应在2~8℃条件下贮存。

6. 若试剂在全自动生化分析仪上使用,可参照本公司提供的相应型号仪器的参数,并在本

公司技术人员指导下使用。 禁忌症:暂未发现

甘油三酯(triglyceride, TG)含量测定试剂盒说明书

货号:MS2408 规格:100管/96样甘油三酯(triglyceride, TG)含量测定试剂盒说明书 微量法 注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 测定意义: TG是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不仅是细胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。 测定原理: 用异丙醇抽提取TG,KOH皂化TG后水解生成甘油及脂肪酸,过碘酸氧化甘油生成甲醛,在氯离子存在下甲醛与乙酰丙酮缩合生成黄色物质,在420 nm有特征吸收峰,其颜色的深浅与TG含量成正比。 自备实验用品及仪器: 可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、水浴锅、可调式移液枪、双蒸水 试剂组成和配置: 试剂一:液体60mL×2瓶,4℃保存。 试剂二:液体5mL×1瓶,4℃保存。 试剂三:液体6mL×1瓶,4℃保存。 试剂四:液体2mL×1瓶,4℃避光保存。 试剂五:液体6mL×1瓶,4℃避光保存。 试剂六:液体6mL×1瓶,4℃避光保存。 标准品:液体1mL×1支,1mg/mL标准甘油三酯溶液,4℃避光保存。 TG的提取: 1、组织中TG的提取:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,8000g,4℃离心10min,取上清,即TG待测液。 2、细胞、细菌中TG的提取:先收集400-500万细胞或细菌到离心管内,弃上清,加1mL试剂一,超声波破碎1min(强度20%,超声2s,停1s),8000g,4℃离心10min,取上清,即TG 待测液。 3、血清(浆)样品:直接测定。 测定操作: 1. 可见分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长到420 nm,蒸馏水调零。 15μL,置于新的Ep 管。 3.甘油三酯含量测定: 第1页,共3页

ADP含量试剂盒使用说明

ADP含量试剂盒使用说明 产品简介: ADP广泛存在于动物、植物、、微生物和培养细胞中,是描述细胞能量代谢状态的主要参数。测定ADP含量并且计算能荷,能够反映能量代谢状态。 ADP在254nm下有吸收峰,可以利用高效液相色谱法测定其含量。 试验中所需的仪器和试剂: 高效液相色谱仪、低速离心机、溶剂抽滤装置、针头式过滤器(水系,50个,0.22μm)、滤膜(水系和有机系各1个,0.45μm)、C18柱(4.6×150mm)、可调式移液器、样品瓶(50个,2mL)、甲醇(色谱级,300mL)、甲醇(色谱级,300mL)、蒸馏水 产品内容: 试剂一:液体60mL×1瓶,4℃保存; 试剂二:液体60mL×1瓶,4℃保存; 试剂三:粉剂1×1瓶,粉剂2×1瓶,4℃保存;临用前用少量蒸馏水将粉剂1和粉剂2溶解后倒入1000mL容量瓶中,用蒸馏水定容至1000mL,形成流动相缓冲液基质(注:试剂瓶中的粉剂要冲洗干净),4℃可保存1周; 试剂四:ADP标准品5mg×1支,-20℃保存。临用前加入1mL双蒸水,配成5mg/mL溶液,配好后-20℃可保存1周; 操作步骤: 一、实验前的准备工作: 1、将双蒸水1000mL、流动相缓冲液基质1000mL和甲醇300mL用0.45μm的滤膜抽滤,以除去溶剂中的杂质,防止堵塞色谱柱。(注:双蒸水和缓冲液基质用水系滤膜抽滤,甲醇用有机系滤膜抽滤)。 2、流动相的配制:将抽滤完毕的流动相缓冲液基质1000mL与甲醇配比为99.9:0.1(v/v),即取999mL缓冲液基质与1mL甲醇混合。

3、将抽滤完毕的甲醇和双蒸水配比成100%的甲醇,10%的甲醇,双蒸水各250mL。将2和3中的溶剂超声30分钟,以脱去溶剂中的气泡,防止堵塞色谱柱。 二、ADP的提取: 1、组织的处理:准确称取组织重量0.1g,加入1mL试剂一,提取ADP,4000g常温离心15min,取上清液,加入等体积的试剂二,混匀,4000g常温离心15min,取上清,0.22μm水系微孔滤膜过滤后冰上放置,待测。 2、细胞处理:收集约30mL细胞,离心菌体经干燥后,加入1mL试剂一,超声破壁细胞(950 W,30%,15min,工作1s间隔2s),4000g常温离心15min,取上清液,加入等体积的试剂二,混匀,4000g常温离心15min,取上清,0.22μm水系微孔滤膜过滤后冰上放置,待测。 三、ADP含量测定操作步骤: 1.开启电脑、检测器和泵,安装上色谱柱,打开empower软件,在方法组中设置进样量20μL,流速1mL/min,保留时间10min,检测波长254nm,设置完毕保存方法组。 2.用100%的甲醇、10%的甲醇、双蒸水按甲醇浓度从大到小的顺序洗色谱柱30min。 3.用流动相洗柱子,待基线稳定后开始加样。 4.加入标准品20μL,在10min内可分离ADP,ADP的保留时间在4min左右(柱子不同,保留时间有差异),计算不同浓度的ADP标准品的峰面积。 5.加入样品20μL,在相应保留时间处检测ADP的峰面积。 ADP含量的计算: 将5mg/ml的ADP标准品用双蒸水分别稀释成100μg/ml、80μg/ml、60μg/ml、40μg/ml和20μg/ml的ADP标准品溶液,以标准品浓度(μg/ml)为横坐标,峰面积为纵坐标分别计算ADP标准曲线。 注:标准品的稀释倍数要根据样品中ADP浓度确定,样品中ADP的峰面积必须落在不同浓度的ADP标准品的峰面积之内,该标准品稀释倍数只是一个参考。

甘油三酯测定试剂盒(GPO-PAP法)产品技术要求danda

甘油三酯测定试剂盒(GPO-PAP法) 适用范围:本品用于体外定量测定人血清中甘油三酯的含量。 1.1规格 规格1: (试剂1:20mL;试剂2: 5mL); 规格2: (试剂1:40mL;试剂2:10mL); . 规格3: (试剂1:80mL;试剂2:20mL); 校准品:(选配) 规格1(0.3mL×1;1水平);规格2(0.5mL×1;1水平);规格3(1.0mL×1;1水平); 质控品:(选配) 规格1(0.5mL×2;2水平);规格2(1.0mL×2;2水平)。 1.2组成 试剂盒组成见表1 表1甘油三酯测定试剂盒组成

注:校准品及质控品赋值具有批特异性,每批次浓度详见标签。 2.1试剂 2.1.1外观 试剂盒外观应整洁,文字符号标识清晰;组分齐全,液体无漏液;试剂1为淡黄色透明液体;试剂2为无色透明液体,不得有沉淀和絮状物。 2.1.2装量 每瓶不少于标示值。 2.1.3试剂空白吸光度 用指定的空白样品测试试剂(盒),在光径1cm下,在A546nm处测定试剂空白吸光度A≤0.1。 2.1.4分析灵敏度 在温度37℃,测定2.26 mmol/L样本,吸光度变化在0.10-0.35之间。

2.1.5线性范围 2.1.5.1在[0.2,10.0] mmol/L内,相关系数R≥0.990。 2.1.5.2在[0.2,2.0] mmol/L内,线性绝对偏差不超过±0.2mmol/L;(2.0,10.0] mmol/L内,线性相对偏差不超过±10%。 2.1.6重复性 重复测试(1.1±0.22) mmol/L和(3.0±0.6)mmol/L样本,所得结果的变异系数(CV%)应不大于5%。 2.1.7批间差 测定(1.1±0.22) mmol/L和(3.0±0.6)mmol/L样本,所得结果的批间相对极差(R)应不大于10%。 2.1.8准确度 用国家标准物质GBW09148检测,实测值与标示值的相对偏差在±10%内。 2.2校准品 2.2.1外观 校准品为淡黄色液体。 2.2.2装量 每瓶不少于标示值。 2.2.3准确度 与配套试剂组成测试系统,指标要求同2.1.8。 2.2.4 校准品溯源性 根据GB/T21415-2008的要求,校准品溯源至国家标准物质GBW09148。 2.3质控品

人elisa试剂盒,人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒使用说明书

人elisa试剂盒,人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆 樊克生物专业供应: 使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本8羟基脱氧鸟苷 (8-OHdG)含量。 试验原理: 8-OHdG试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知8-OHdG浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板 内进行检测。先将8-OHdG和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合 的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中8-OHdG的浓度呈比例关系。 试剂盒内容及其配制 试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制 96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型 塑料膜板盖1块半块即用型 标准品:80ng/ml 1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀 稀 空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型 标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型 生物素标记的抗8-OHdG抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型 亲和链酶素-HRP 1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型 洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀 释 底物A 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 底物B 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型 自备材料 1.蒸馏水。 2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。 3.振荡器及磁力搅拌器等。 安全性

β-葡萄糖苷酶测定试剂盒使用说明

β-葡萄糖苷酶测定试剂盒使用说明 分光光度法50管/24样货号:BC2560 产品简介: β-GC(EC3.2.1.21)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化β-糖苷键水解,具有多方面生理作用:在纤维素的糖化作用中,β-GC负责进一步水解纤维素二糖和纤维素寡糖生成葡萄糖;β-GC水解萜烯类香气前驱体,使糖苷键合态变成游离态。从而产生香味;β-GC能够水解植物体内野黑樱苷,释放HCN,从而防止昆虫取食。 β-GC分解对-硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算β-GC活性。 试验中所需的仪器和试剂: 可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 产品内容: 提取液:液体50ml×1瓶,4℃保存。 试剂一:粉剂×2瓶,-20℃保存;临用前每瓶加入10ml双蒸水,充分溶解备用;用不完的试剂仍-20℃保存。 试剂二:液体25ml×1瓶,4℃保存。 试剂三:液体80ml×1瓶,4℃保存。 标准品:液体×1支,取1.5ml EP管加入1ml,5mol/ml的对硝基苯酚溶液。 操作步骤: 一、样品的前处理:

1.细菌或培养细胞: 先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);15000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2.组织: 按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml 提取液),进行冰浴匀浆。15000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 3、标准样品的准备:取100μL标准液,加入到400μL试剂三中,得到1mol/ml标准液,十倍稀释到100nmol/ml,倍比稀释:50、25、12.5、6.25nmol/ml,稀释液用试剂二。100、 50、25、12.5、6.25nmol/ml做标准液。 二、测定步骤: 1.分光光度计预热30min以上,调节波长至400nm,蒸馏水调零。 2.加样表 试剂名称(μl)对照管测定管标准管试剂一400 试剂二500500 样本100100 迅速混匀,放入37℃准确水浴30min后,立即放入沸水浴中煮沸5min(盖紧,以防止 水分散失),流水冷却后充分混匀(以保证浓度不变) 试剂一400 充分混匀,8000g,4℃,离心5min,取上清液

中碳链甘油三酯及其应用_罗登林

文章编号:1009-4881(2002)02-0004-04 中碳链甘油三酯及其应用① 罗登林 (武汉工业学院食品科学与工程学院,湖北武汉430022) 摘 要:综述了中碳链甘油三酯的理化性质、体内代谢特色、中碳链甘油三酯的合成方法以及中碳链甘油三酯的应用及其安全性,对于开发研究中碳链甘油三酯具有参考价值。 关键词:中碳链甘油三酯;性质;代谢特色;合成;应用 中图分类号:TQ225.24 文献标识码:B 中碳链甘油三酯(Medium-Chain Trigly c-erides,简称MCT)是指主要由八个碳原子和十个碳原子的饱和一元羧酸所组成的甘油三酯,即辛酸甘油三酯、癸酸甘油三酯或辛酸-癸酸混酸组成的甘油三酯[1]。它在自然界中是不存在的,属于一种天然油酯的改性产品,是非专一性结构脂。据最新估计,目前全球市场有MCT约9.98×106kg, 45%在美国,剩余55%在西欧。M CT的价格约为1.55~4.52美元/kg。由于我国椰子油和棕榈仁油产量很少,目前还未见有大批量生产MCT的厂家。国家每年都得花费大量外汇7.5~10万元/t 从国外进口。 1 理化性质 M CT在室温下呈无色无刺激性气味的液体,粘度约是普通植物油的一半(25~31cp/20℃)[2],具有稳定的抗氧化性。用Rancima试验法测定,在100℃下,氧化稳定性是豆油的16倍,用AOM法测定,在300h以上,过氧化值无变化。而豆油在16h 时,过氧化值即达100mg/kg。即使在高温或低温下M CT也非常稳定,长时间保持在油煎温度下使用后,其粘度仅略有增加,在0℃下也能保持透明的外观和较低的粘度。另外,MC T与各种溶剂、油脂、一些抗氧化剂、维生素都有很好的互溶性。由于它碳链短,在食品添加剂中可作为乳化剂使用,在水相与油相之间能形成稳定的乳化体系。所以,它的乳化稳定性、溶解性、延伸性和润滑性都优于普通油脂[3]。M CT与普通植物油脂的性质比较见图1~5[4] 。图3 MCT的延展性 4 武汉工业学院学报 Journal of Wuhan Poly technic U niversity 2002年 ①收稿日期:2001-11-21 作者简介:罗登林(1976—),男,湖北省麻城市人,99级研究生。

TPPA试剂盒说明书

T P P A试剂盒说明书-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1

梅毒TPPA试书剂盒说明书 1、试验原理: 梅毒抗体检测是采用抗原抗体凝集反应中的抗原抗体凝集反应。其原理如下:将梅毒 (Nichols 株)的精制菌体成分包被在人载体明胶粒子上。这种致敏粒子和样品中的梅毒螺旋体(TP)抗体进行反应发生凝集,产生粒子凝集反应(TP)抗体,并且可用来测定抗体效价。 2、样本收集和贮存: 血清或血浆1ml,标本应无溶血,无脂血,无微生物污染。不满足上述要求的标本拒收,标本的采集应使用清洁,无菌的一次性的干燥管。 标本用量最少50ul,七天内检测的标本应在2-8℃保存,贮存在-20℃可保存4W,同时避免反复冻融血清。 3、安全防范: 3.1此试剂盒内含人血成分。尽管所有的对照及定点对照都已经过试验验证并且发现对于乙型肝炎表面抗原,丙型肝炎抗体,HIV抗体均为阴性;但仍认为它们具有潜在的感染性。 3.2移液过程禁止用口。 3.3 在处理试剂和标本的地方禁止吸烟,饮食。 3.4使用试剂盒和标本时,必须戴一次性手套,穿试验服。使用后请彻底洗手清洁。 3.5患者样本及其他潜在感染材料试验后应放入医用垃圾桶内。 3.6试剂的溶解液,血清稀释液和阳性对照血清含有叠氮钠作为防腐剂,叠氮钠可以和铅铜反应形成爆炸的金属叠氮化合物.为防止金属叠氮化合物的形成,应用大量的水冲洗以免其堆积. 4、试剂: 4.1 储存与稳定性: 试剂应在2-10℃保存。 冻干试剂必须在复溶后的当天使用,如果保存在2-10℃最多可使用7天。 4.2 试剂盒组成:(由富士瑞士欧公司出产) (1)溶解液(液体) 8mL×1瓶 用于调制致敏粒子和未致敏粒子。 (2)血清稀释液 29mL×1瓶 用于样品的稀释。 (3)致敏粒子(冷冻干燥)

小鼠cfos试剂盒使用方法

小鼠c-fos试剂盒使用方法 检测范围:96T 20pg/ml-480pg/ml 使用目的: 本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中c-fos含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠c-fos水平。用纯化的小鼠c-fos抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入c-fos,再与HRP标记的c-fos抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的c-fos呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠c-fos 浓度。 试剂盒组成 1 30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7 终止液6ml×1瓶 2 酶标试剂6ml×1瓶8 标准品(960pg/ml)0.5ml×1瓶 3 酶标包被板12孔×8条9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 4 样品稀释液6ml×1瓶10 说明书1份 5 显色剂A液6ml×1瓶11 封板膜2张 6 显色剂B液6ml×1/瓶12 密封袋1个 标本要求 1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融 2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 操作步骤 1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀 释。 480pg/ml 5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 240pg/ml 4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 120pg/ml 3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 60pg/ml 2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 30pg/ml 1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用 5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此 重复5次,拍干。 6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 7.温育:操作同3。

人MyoDELISA试剂盒使用说明书

人Myo-DELISA试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人Myo-D含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人Myo-D水平。用纯化的人Myo-D抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入Myo-D,再与HRP标记的Myo-D抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的Myo-D 呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人Myo-D浓度。 样本处理及要求: 1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上 清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后, 离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中 如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

中链甘油三酯的研究进展

中链甘油三酯的研究进展 张星弛1,韩培涛2,李晓莉1,邵剑钢1,张启勇2 (1.陆军勤务学院,重庆401331;2.93975部队,新疆乌鲁木齐830000) 摘要:中链甘油三酯独特的理化性质和代谢特点使其具有预防肥胖、改善机体糖脂代谢等多种功能,在食品、医药、化妆品、饲料等多种行业得到广泛应用。本文对中链甘油三酯的理化性质、代谢特点、功能性质及安全性进行综述。 关键词:中链甘油三酯;抗疲劳;脂肪酸 The Research Progress of Medium Chain Triglyceride ZHANG Xing-chi 1,HAN Pei-tao 2,LI Xiao-li 1,SHAO Jian-gang 1,ZHANG Qi-yong 2 (1.Army Logistics University of PLA ,Chongqing 401331,China ;2.93975Force ,Urumqi 830000,Xinjiang ,China ) Abstract :Medium chain triglyceride with the unique physical and chemical properties and metabolic charac - teristics was discovered to have many functions ,such as preventing obesity ,improving the body's glucose and lipid metabolism ,and so on.It was reported to be widely used in food ,medicine ,cosmetics ,feed and other in -dustries.In this paper ,the physical and chemical properties ,metabolic characteristics ,functional properties and safety of medium chain triglycerides were reviewed. Key words :medium chain triglyceride ;anti-fatigue ;fatty acid 食品研究与开发 F ood Research And Development 圆园17年12月 第38卷第23期 DOI :10.3969/j.issn.1005-6521.2017.23.042 作者简介:张星弛(1994—),男(汉),硕士研究生,研究方向:军事装备保障。 早在上世纪五十年代,中链甘油三酯(Medium Chain Triglyceride ,MCT )就被引入到临床领域,最初的应用是用来替代长链甘油三酯用作脂肪吸收障碍患者的营养治疗,半个多世纪以来,随着对MCT 理化性质、功能性质、代谢特点、营养药理学以及营养生理学等特性研究的深入,使得MCT 在食品、医药、化妆品、动物饲料等诸多方面得到广泛应用与发展。1中链甘油三酯的定义 根据研究者研究对象的不同,对于中链脂肪酸中碳原子数的界定也有所差别。在营养学和生物化学中将中链脂肪酸(Medium Chain Fatty Acid ,MCFA )定义为含有8个~12个碳原子的饱和脂肪酸主要是指辛酸(C 8)和癸酸(C 10),而在有机化学中将其定义为含有6个~12个碳原子的饱和脂肪酸。MCFA 在日常摄取的食物中以中链甘油三酯(MCT )的形式存在,MCT 是由 中链脂肪酸构成的甘油三酯,主要指辛酸甘油三酯和癸酸甘油三酯。2 中链甘油三酯的来源 在自然界中,MCT 含量较少,主要来源于椰子油、棕榈仁油、母乳、牛奶及其制品。根据美国农业部营养数据库的资料显示,椰子油中含有58%的MCT ,棕榈仁油中含有54%的MCT ,椰丝中含有37%的MCT ,原椰子肉中含有19%的MCT 。人工合成MCT 的方法主要有化学合成法和酶合成法两种。化学合成法主要包括水解酯化法、酰氯醇解法等。水解酯化法是指以椰子油或者棕榈仁油为原料,经过水解分馏切割,得到富集MCFA ,然后再将MCFA 与甘油进行酯化、精制得到MCT 。此法的缺点是能耗大,耗时长,副产物分离难度大,优点是制得的MCT 纯度较高。酰氯醇解法是将椰子油、棕榈仁油水解、分馏得到MCFA ,然后MCFA 与三卤化磷(PX3)、五卤化磷(PX5)或者亚硫酰氯(SOCl 2)等反应制得酰氯,最后酰氯与甘油醇解制得 MCT [1]。改法虽然能耗较低,操作时间短,但是工艺比较 专题论述 220

加A试剂盒使用说明书

编码品名规格单位 北京华越洋生物 加A试剂盒50次盒GX9133 北京华越洋生物 加A试剂盒100次盒GX9133 产品及特点本产品利用Taq DNA polymerase的不依赖于模板的末端转 移酶活性,在只有dATP存在的情况下,在平末端的DNA片段加 上一个dA尾巴,使平末端片段也能被T载体克隆。 1.简单, 2X Tailing Buffer 中含有所需要的所有成分,不需要 单独准备。 2.适用于任何平末端的DNA片段,包括Pfu DNA polymerase等酶合成的DNA片段。 3.产物可以直接用于与T载体的连接。 规格及成分成份50 次包装 2 X Tailing Buffer 1.25 mL Taq DNA olymerase(5U/uL) 50 uL 使用手册1份运输及保存低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。 自备试剂PCR片段 使用方法一:反应前纯化处理: 用Vent, Deep Vent, Pfu, Pwo等具有3到5外切活性的 DNA聚合酶扩增得到的DNA片段,必须经过彻底的去除残留的酶 的处理过程(如酚/氯仿抽提或Proteinase K处理),否则它们将 在加A反应时,切除掉加上的A尾巴,干扰反应。可以采取胶回收 和酚/氯仿抽提法等常规方法纯化,最后溶解在水或TE中,终浓度 以0.1 ug/uL为宜。 二:加A反应

在干净的0.5 mL或1.5 mL离心管中,分别加入下列成分: 回收的DNA片段(0.2-2 ug) 25 uL 2 X dA Tailing Buffer 1 uL Taq DNA polymerase(5 U/uL) 补水到50 uL 72℃保温2小时 三:反应后处理 加A反应后,Taq DNA polymerase将与DNA末端紧密结合,所以必须酚/氯仿抽提去除。如果使用Proteinase K处理后再 用酚/氯仿抽提效果会更好。得到的DNA溶于适量水和TE中后即 可用于T载体的连接反应。 疑难解答Q:Taq DNA polymerase加尾有特异性吗? A:在有四种核苷酸存在的反应体系中,Taq DNA polymerase加 尾特异性跟DNA的3’末端的核苷酸有关。如果要加T,要加尾的 DNA片段最好末位为T。如果要加A,要加尾的DNA片段最好末 位为C。其关系具体见下表: 3’末端核苷酸加尾核苷酸 A A,但效率极低 C A>C G G>A>C T T>A --DNA & Cell Biol. 12:763, 1993 关联产品加T试剂盒(dT Tailing Kit)、一站式T载体制备套装

甘油三酯(triglyceride, TG )含量测定试剂盒说明书

货号: QS2408 规格:50管/48样甘油三酯(triglyceride, TG)含量测定试剂盒说明书 可见分光光度法 注意:正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。 测定意义: TG是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不仅是细胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。 测定原理: 用异丙醇抽提取TG,KOH皂化TG后水解生成甘油及脂肪酸,过碘酸氧化甘油生成甲醛,在氯离子存在下甲醛与乙酰丙酮缩合生成黄色物质,在420 nm有特征吸收峰,其颜色的深浅与TG含量成正比。 自备实验用品及仪器: 可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、双蒸水 试剂组成和配置: 试剂一:液体60mL×2瓶,4℃保存。 试剂二:液体15mL×1瓶,4℃保存。 试剂三:液体30mL×1瓶,4℃保存。 试剂四:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。 试剂五:液体30mL×1瓶,4℃避光保存。 试剂六:液体30mL×1瓶,4℃避光保存。 标准品:液体1mL×1支,1mg/mL标准甘油三酯溶液,4℃避光保存。 TG的提取: 1、组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织, 加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,8000g,4℃离心10min,取上清待测。 2、细胞、细菌:先收集400-500万细胞或细菌到离心管内,弃上清,加1mL试剂一,超声波破碎1min(强度20%,超声2s,停1s),8000g,4℃离心10min,取上清待测。 3、血清(浆)等液体样品:直接测定。 测定操作: 1. 分光光度计预热30min,调节波长到420 nm,蒸馏水调零。 0.15mL,置于新的EP管中。 3.甘油三酯含量测定: 第1页,共2页

Annexin V-FITC 凋亡检测试剂盒操作方法及步骤说明书

Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒 说明: 细胞凋亡是细胞的基本特征之一,它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面起着十分重要的作用。Annexin Ⅴ是一种分子量为35-36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)高亲和力特异性结合。以标记了FITC的Annexin Ⅴ作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。 Propidium iodide(PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能够透过细胞膜而使细胞核红染。将Annexin Ⅴ与PI匹配使用,可以将凋亡早期的细胞和晚期的细胞以及死细胞区分开来。 产品组成(50/25次反应): · Annexin V-FITC 500ul/250ul(20ug /ml) · Binding Buffer 40ml/20 ml · Propidium Iodide (PI) 250ul/125ul(50ug /ml) 保存条件: 2-8℃储存,有效期一年。 注意事项: 1.为保证得到理想的实验结果,在使用此试剂盒之前请认真阅读该注意事项; 2.试剂(尤其是小瓶装的试剂)在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖 时液体洒落; 3.Propidium iodide(PI)能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用; 4.此试剂盒仅供科研使用,不宜用于临床诊断; 5.本试剂盒中提供的PBS为随试剂赠送,并非试剂盒的真正组成成分;细胞的洗涤同常规方法。 操作注意要点: 1.整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作; 2.反应完毕后请尽快检测,因为细胞凋亡是一个动态的过程,反应1小时后荧光强度就开始衰 变;

structolipid(长链中链甘油三酯)

Structolipid? 20% Long Chain, Medium Chain Triglycerides Consumer Medicine Information What is in this leaflet This leaflet answers some common questions about Structolipid. It does not contain all the available information. It does not take the place of talking to your doctor or pharmacist. All medicines have risks and benefits. Your doctor has weighed the risks of you taking Structolipid against any benefits they expect it will have for you. Please read this leaflet carefully before using Structolipid 20%. If you have any questions or are unsure about anything, please ask your doctor or pharmacist. Keep this leaflet with the medicine. You may need to read it again. What is Structolipid used for and how does it work Structolipid is a sterile fat emulsion, which provides your body with energy and fatty acids. The active ingredient in Structolipid is purified structured triglyceride. It also contains other ingredients like egg lecithin which is isolated from egg yolk, glycerol and water for injections. Structolipid provides the energy and fatty acids in patients who require intravenous nutrition. Before you are given Structolipid If the answer to any of the following questions is YES, you should tell your doctor BEFORE using Structolipid. ?Are you allergic to soya oil, eggs, peanuts or any of the ingredients listed at the end of this leaflet? ?Are you pregnant or trying to become pregnant? ?Are you breastfeeding? ?Do you have liver or kidney disease? ?Are you a diabetic? ?Do you have a disease of the pancreas? ?Do you have a disorder of the thyroid gland? ?Are you taking anticoagulants (medicines for preventing blood clotting)? ?Are you taking any other medicines including any that you buy without a prescription from your pharmacy, supermarket or health food shop. These medicines may affect the action of Structolipid or may affect how well Structolipid works. How is Structolipid given The dose of Structolipid which you will require will be determined by your doctor or pharmacist. Your doctor will supervise your treatment with Structolipid. Side Effects Structolipid, like all other nutrient solutions which are given intravenously, may cause side effects in some people. All the side effects associated with Structolipid may not yet have been detected. The common (this occurs in more than 1% of people who used it) side effects are nausea, headache and rises in your body temperature. Other side effects (in less than 1% of people who used it) that have occurred during treatment with Structolipid are lower back pain, breathing difficulties (rapid breathing, shortness of breath); increased blood pressure; shivering, dizziness, diarrhoea, rapid pulse, vomiting and rash. If you have these or any other side effects during treatment, tell your doctor. In case of Overdosage The symptoms of overdose include fever, abnormalities in blood results, blood clotting disturbances, enlarged spleen and coma. These symptoms are usually reversible if the infusion of the fat emulsion is discontinued. If you think you or anyone else have been given too much Structolipid, telephone your doctor or contact the Poisons Information Centre - New Zealand: 0800 764 766. Storage

生物素标记试剂盒使用说明书

生物素标记试剂盒 使用说明书 货号: EBLK0002

产品介绍: Elabscience生物素标记试剂盒提供了生物素标记所需全部试剂,用于含有氨基(NH2-)抗体的标记。生物素已经活化,可直接使用,每个试剂盒足以完成3次标记,每次可标记0.2-2mg。试剂盒中包括6个用于抗体标记脱盐的Filtration tube,不用透析,操作简便,熟练操作90min可完成整个标记过程。 产品特点: 试剂全面:本试剂盒提供了生物素标记所需全部试剂。 快速:整个过程仅需90min。 方便:通过Filtration tube即可脱盐,无需透析或者凝胶过滤。 使用灵活:既可用于微量标记又可大量标记,每次可标记0.2-2mg。 理想的标记效果:已经优化确定了最适的标记比例,降低标记不足或由于过度标记而失活的可能性。 产品组成: 标记过程需要仪器: 1. 10ul,50ul,200ul,1000ul可调高精度移液器 2. 恒温箱(37℃) 3. 离心机(离心力可达到12,000×g) 储存条件: 本试剂盒未开封前在2-8℃可稳定保存一年

生物素标记反应原理: NH2-Reactive Biotin专一地与伯胺反应(N-末端及赖氨酸残基侧链)形成稳定的酰胺键 生物素标记NH 2 -Reactive Biotin使用量的计算: 每个反应中生物素试剂的使用量取决于待标记蛋白质的量和浓度。通过优化,我们确定了标记2mg/ml的抗体(IgG ,150KD),使用生物素和抗体的分子比为20:1能达到较理想的标记效果。 1、标记2mg/ml的抗体,使用生物素和抗体的分子比为20:1时,应加入生物素量的计算方 法: ml蛋白×2mg蛋白 ml蛋白×1mmolIgG 150,000mgIgG ×20mmol生物素 mmol蛋白 = mmol生物素 2、对于10mmol的生物素溶液,应加入反应中该生物素体积的计算方法: mmol生物素×1,000,000μL L ×L 10mmol = ul生物素 计算示例: 对于0.5ml 2mg/ml的IgG(分子量为150,000)溶液,需加入10mM的生物素溶液13.3ul。 0.5ml IgG×2mgIgG 1mLIgG ×1mmolIgG 150,000mgIgG ×20mmol生物素 1mmolIgG =0.000133mmol生物素 0.000133mmol生物素×1,000,000μl L ×L 10mmol =13.3ul生物素溶液 操作过程: 实验前准备: 1.仔细阅读使用说明书。 2.计算待使用NH2-Reactive Biotin的量。 3.提前20min从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温(注:不需要用到的NH2- Reactive Biotin 继续放置冰箱中)。

AMP含量试剂盒使用方法及注意事项等说明

AMP含量试剂盒使用方法及注意事项等说明 产品简介: AMP广泛存在于动物、植物、、微生物和培养细胞中,是描述细胞能量代谢状态的主要参数。测定AMP含量并且计算能荷,能够反映能量代谢状态。AMP在254nm下有吸收峰,可以利用高效液相色谱法测定其含量。 试验中所需的仪器和试剂: 高效液相色谱仪、低速离心机、溶剂抽滤装置、针头式过滤器(水系,50个,0.22μm)、滤膜(水系和有机系各1个,0.45μm)、C18柱(4.6×150mm)、可调式移液器、样品瓶(50个,2mL)、甲醇(色谱级,300mL)、甲醇(色谱级,300mL)、蒸馏水产品内容: 试剂一:液体60mL×1瓶,4℃保存; 试剂二:液体60mL×1瓶,4℃保存; 试剂三:粉剂1×1瓶,粉剂2×1瓶,4℃保存;临用前用少量蒸馏水将粉剂1和粉剂2溶解后倒入1000mL容量瓶中,用蒸馏水定容至1000mL,形成流动相缓冲液基质(注:试剂瓶中的粉剂要冲洗干净),4℃可保存1周; 试剂四:AMP标准品5mg×1支,-20℃保存。临用前加入1mL双蒸水,配成5mg/mL 溶液,配好后-20℃可保存1周; 操作步骤: 一、实验前的准备工作: 1、将双蒸水1000mL、流动相缓冲液基质1000mL和甲醇300mL用0.45μm的滤膜抽滤,以除去溶剂中的杂质,防止堵塞色谱柱。(注:双蒸水和缓冲液基质用水系滤膜抽滤,甲醇用有机系滤膜抽滤)。 2、流动相的配制:将抽滤完毕的流动相缓冲液基质1000mL与甲醇配比为99.9:0.1(v/v),即取999mL缓冲液基质与1mL甲醇混合。

3、将抽滤完毕的甲醇和双蒸水配比成100%的甲醇,10%的甲醇,双蒸水各250mL。将2和3中的溶剂超声30分钟,以脱去溶剂中的气泡,防止堵塞色谱柱。 二、AMP的提取: 1、组织的处理:准确称取组织重量0.1g,加入1mL试剂一,提取AMP,4000g常温离心15min,取上清液,加入等体积的试剂二,混匀,4000g常温离心15min,取上清,0.22μm水系微孔滤膜过滤后冰上放置,待测。 2、细胞处理:收集约30mL细胞,离心菌体经干燥后,加入1mL试剂一,超声破壁细胞(950W,30%,15min,工作1s间隔2s),4000g常温离心15min,取上清液,加入等体积的试剂二,混匀,4000g常温离心15min,取上清,0.22μm水系微孔滤膜过滤后冰上放置,待测。 三、AMP含量测定操作步骤: 1.开启电脑、检测器和泵,安装上色谱柱,打开empower软件,在方法组中设置进样量20μL,流速1mL/min,保留时间10min,检测波长254nm,设置完毕保存方法组。 2.用100%的甲醇、10%的甲醇、双蒸水按甲醇浓度从大到小的顺序洗色谱柱30min。 3.用流动相洗柱子,待基线稳定后开始加样。 4.加入标准品20μL,在10min内可分离AMP,AMP的保留时间在7min左右(柱子不同,保留时间有差异),计算不同浓度的AMP标准品的峰面积。 5.加入样品20μL,在相应保留时间处检测AMP的峰面积。 AMP含量的计算: 将5mg/ml的AMP标准品用双蒸水分别稀释成100μg/ml、80μg/ml、60μg/ml、40μg/ml和20μg/ml 的AMP标准品溶液,以标准品浓度(μg/ml)为横坐标,峰面积为纵坐标分别计算AMP 标准曲线。 注:标准品的稀释倍数要根据样品中AMP浓度确定,样品中AMP的峰面积必须落在不同浓度的AMP标准品的峰面积之内,该标准品稀释倍数只是一个参考。

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