中国药科大学
综述题目：药物中有关物质检查的新技术与新进展
学院：药学院
年级：2014级
专业：药学（工业药学）
姓名：张红月
学号：14221010788
指导教师：王志群
日期：2014年11月1日
药物中有关物质检查的新技术与新进展
摘要：药品中的有关物质贯穿药品研究、生产、储存的全过程，这对药品的纯度会产生很大影响，进而影响到用药的安全、有效等各个方面，因此药品中有关物质的检查是控制有关物质的重要手段。本文简要介绍了药物中有关物质检查的一些传统方法，主要色谱方法：薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法；阐述了现今应用越来越广泛的一些新技术：毛细管电泳、超临界流体萃取、超高效液相色谱以及一些联用技术，并对这些新技术的特点及其发展进行了简要的说明。
关键字：有关物质、色谱法、新技术、新进展
药物中任何影响其纯度的物质统称为杂质，主要包括有机杂质、无机杂质、和残留溶剂。其中，由药物的制备和储存过程中所引入的有机杂质以及残留溶剂和手性化合物中无特殊毒性的对映体三者共同成为药物中的有关物质。有关物质的种类与药物的合成路线密切相关，合成过程中任意一个因素都容易产生影响药品纯度的物质，从而进一步影响药物的安全有效。[1]因此，检测有关物质，控制药品纯度是确保用药安全、有效，保证药品质量的一个重要方面。
有关物质的检查方法主要有光谱法和色谱法。其中，光谱法是利用药物和有关物质之间的光学活性不同，通过相关参数的测定来进行检查。例如，旋光分析法是根据旋光性质的差异进行检查；分光光度法是根据对光吸收性质的差异进行检查。色谱法是根据吸附和分配性质的差异来进行检测。主要包括高效液相色谱法、薄层色谱法、气象色谱法以及一些近年来发展的新技术，如毛细管电泳、超临界流体色谱、超高效液相色谱、高效毛细管电泳等等。有关物质多为微量，必须选择专属性强、灵敏度高、重复性好的检测方法，因此多用色谱法。下面对药物分析中传统的色谱方法以及色谱技术的新方法及其发展进行介绍。
一、传统色谱方法
传统的色谱方法包括薄层色谱法（TLC）、气相色谱法（GC）、高效液相色谱法（HPLC）等。
1、薄层色谱法
薄层色谱法是近几十年来发展起来的一种分离分析技术，传统的TCL方法简便易行，只需较少的实验设备，需要的样品量较少，且一次可分析多种样品，应用成本较低。其分析过程通常是先把固定相（通常是硅胶）均匀地涂布在玻璃板上，使其在玻璃板上形成薄层，在玻璃板的一端点样后放到装有展开剂的展开室中进行色谱分离。[2]不同的物质在进行分离的过程中，由于其分配性质的差异，会在薄层板的不同位置上有各自相应的点，因此达到对有关物质进行检查的目的。但它只是一种半定量的方法,不能准确测定药物中杂质的含量，且操作灵敏度受操作条件影响大，影响重现性和精密度的因素较多，展开剂、固定相、点样、检测等众多因素。如要完全定量,并获得较好的准确度和精密度,就需要使用自动化的仪器。
2、气相色谱法
气相色谱法（Gas Chromatography ，GC）法具有分离效能高、灵敏度高、
样品用量少、操作简便、分析速度快、应用范围广等几大特点。首先，对于沸点非常接近的化合物、各种异构体，特别是光学异构体都可用GC法进行分离；其次，如果适当的选配检测器，GC法可测定达到10ˉ12g以下的微量样品，因此常用于痕量杂质和超纯物质的检测；再次，目前使用的色谱仪器自动化程度高，这样就使得分析操作在几秒钟即可完成；最后，GC法可用于测定化学成分，可进行单一化学成分的分离与精制，也可得到化合物极性、沸点、结构等相关的信息以及基于吸附、分配反应等有关的热力学数据。
虽然GC法的优点很多，但是GC法要求样品能够气化且具有热稳定性，因而受到样品挥发性的限制，故GC应用于药物有关物质的检查要少得多，主要用于检查挥发性杂质和药物在生产过程中引入的有害有机溶剂残留量,包括苯、甲苯、氯仿、二氯甲烷、二氧六环、砒啶及环氧乙烷等。[3]2005年版中国药典中只有林旦等少数几个化学药品采用GC法进行有关物质的检查。因此该法应用不及TLC和HPLC广泛。
3、高效液相色谱法
高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）具有分析速度快、分离效率高、灵敏度高等特点，已被广泛应用于药物中有关物质的测定。其与GC法比较可不受式样的挥发性和热稳定性的限制，应用范围广，有几乎80%的样品可以用其分析、可选择的流动相多，分离选择性高、一般可在室温下进行分析，不需要高的操作温度。随着色谱技术的发展，结合计算机各种软件的开发，HPLC与各种检测器联用，更加拓宽了其应用范围。
HPLC是一种利用高效液相色谱仪使混合物通过色谱柱，根据其分配系数的不同将其分离后，依次通过检测器后组分及含量情况转变为色谱信号情况，然后对其进行记录，从而达到对其进行分离分析检测的目的。[4]目前，HPLC测定有关物质的定量方法主要有杂质对照品法、主成分自身对照法和峰面积归一化法。
3.1 杂质对照品法
此方法适用于药物中有关物质已知并可获得其对照品时。其测定过程为：按各品种项下的规定，精密称（量）取对照品或供试品，配制成溶液，分别精密量取一定量，注入仪器，记录色谱图。测量对照品溶液或供试品溶液中待测组分的峰面积（或峰高）,根据相应公式计算即可。由于微量注射器不易精密控制进样量，当采用此方法时以定量环或自动进样器为好。此法具有较强的专属性且灵敏度与准确度均较高，但是由于杂志对照品通常难以获得，因此使得此方法的应用变的局限。
3.2 主成分自身对照法
主成分自身对照法又可分为加校正因子和不加校正因子两种。
（1）加校正因子的主成分自身对照法
若杂质已知但无对照品，可采用加校正因子的主成分自身对照法对杂质进行定量检测。其测定过程为：按各品种项下的规定，精密称（量）取杂质对照品和待测成分对照品各适量，配置测定杂质校正因子的溶液，进样，记录色谱图，根据图谱数据计算相关变量。此法能减小杂质与主成分的响应因子不同所引起的误差，从而提高准确度。但是由于实验时相对保留时间会有所波动，所以较难确定色谱图中的杂质峰。
（2）不加校正因子的主成分自身对照法
若杂质未知或无法获得杂质对照品，可采用不加校正因子的主成分自身对
照法对杂质进行检测。其测定过程为：配置对照品溶液并调节检测器灵敏度后，取供试品溶液和对照品溶液适量，分别进样，前者的记录时间，除另有规定外，应为主成分色谱峰保留时间的两倍，测量供试品溶液色谱图上各杂质的峰面积并与对照品溶液主成分峰面积比较，计算杂质含量。此法操作简单，又无需对照品，因此应用较广泛。[5]但是由于杂质和主成分的响应因子有可能不同，因此会造成误差。药典规定当杂质对主成分的校正因子超出0.9-1.1范围时，应采用加校正因子的主成分自身对照法测定。
应用主成分自身对照法对有关物质进行检测时，检测波长的选择尤为重要。如果将有关物质的检测波长定为主成分的最大吸收波长时，会使杂质在此波长下的吸收与主成分差异较大，从而使得测量结果反映的药品中杂质含量变得不真实。因此在选择检测波长时应综合考察主成分和杂质的紫外吸收特性，既要保证有关物质在该波长下有较高的灵敏度，又要尽量减小有关物质与主成分之间的响应差异。可通过二极管阵列检测器(DAD)来考察主成分和各个杂质的紫外吸收特性，选取响应基本一致的波长作为有关物质的检测波长。
3.3 面积归一化法
由于峰面积归一化法测定误差较大，因此，本法通常只能用于粗略考察供试品中的杂质含量。
二、新技术及其发展
1、毛细管电泳
毛细管电泳法(Capillary Electrophoresis,CE) 又叫高效毛细管电泳( HPCE) , 是一类以毛细管为分离通道，以高压电场为驱动力的液相分离分析新技术。毛细管电泳是在20世纪80年代电泳技术的基础之上发展起来的，它将电泳技术和色谱技术结合起来，与HPLC相比具有高效分离、快速分析和微量进样的特点，并使得分析科学得以从微升水平进入纳升水平，适合于从无机离子到生物大分子、从带电离子到中性分子的分离分析。[6]因其极高的分离效率和多种分离模式，毛细管电泳法分析技术应用广泛，已成为生命科学、环境及医药分析等领域常用的分析方法。
毛细管电泳法的操作方法是将缓冲液装入到内径在25~70um，长约10~70cm的石英毛细管中，然后从一端将样品引入，而毛细管两端均应插入到电极槽中，电极槽中同样装有缓冲液，且槽中插有通以数千伏直流电压的铂电极。基于试样中各种离子组分间质荷比的差异，依靠试样中的不同离子组分再外加电场作用下电泳淌度的不同而以不同的速度向极性相反的两个方向迁移。同时，由于电极槽中缓冲液与毛细管内壁的硅羟基形成双电层，从而使得缓冲液不断从正极迁移到负极，这样就使得样品中的各个组分通过检测器时被检测出来。这就是所谓的毛细管区带电泳（CZE）。除此之外，还有同时既能分离带电组分又能分离中性组分的胶束电动毛细管色谱(MEKC)、在毛细管中装入凝胶，使得试样组分在分离中不仅受电场力的作用，同时还受到凝胶尺寸排阻效应的作用的毛细管凝胶电泳（CGE）、同时使用两种电解质的毛细管等速电泳（CITP）以及毛细管等电聚焦（CIEF）、毛细管电色谱（CEC）、亲和毛细管电泳（ACE）等，以及近几年兴起的免疫毛细管电泳（CEIA）、非水毛细管电泳（NACE）、芯片毛细管电泳（Chip-CE）等模式。[7]
Perez利用胶束毛细管电动色谱法分析不同药物制剂中九种内酰胺类抗生素（氯唑西林、双氯西林、苯唑西林、青霉素G、青霉素V、氨苄西林、萘夫西林、哌唑西林和阿莫西林）。最优实验设计方案的筛选变量主要为：胶束介质浓
度、分离电压、缓冲液的pH、浓度、毛细管温度。对氨苄西林胶囊、Britapen 片剂和Veterin-Micipen注射剂在人体和动物体内的分析，说明这种方法可用于制药工业的质量控制。K.Racaityte等研究了将毛细管区带电泳和反相高效液相色谱法应用于测定高度糖基化蛋白类药物中的中性和氨基的单糖。[8]在CZE 法分析中，单糖首先经过乙酰基化，然后用8-氨基芘-1,3,6-三磺酸进行衍生化；而RP-HPLC法则采用邻氨基苯甲酸进行柱前衍生化，以甲醇-醋酸盐-硼酸盐为反应媒介，不需要进行乙酰基化处理。
在不同模式适用性的研究中，Leonard等比较了CZE,NACE,MEKC,MEEKC等电泳模式，认为只有MEEKC模式在优化的电泳条件下能完成16种HIV蛋白酶抑制剂的分析；Lim等比较了CZE、MEKC、CEC在分离6种结构相似的鸦片剂麻醉药物的情况，结果表明CEC具有最大的分辨效率。
毛细管电泳（CE）技术因其不用填料，且其分离介质是缓冲液，因此它的添加剂可以有很多，可根据要求选择添加剂已达到改善分离的目的。不仅节省了费用,而且它可分析各种性质的药物，所以应用相对来说更加广泛。已成为目前应用越来越广泛的分离分析技术。
2、超临界流体色谱
超临界流体色谱( supercritical fluid chromatography，SFC)，是以超临界流体作为流动相的色谱，超临界流体有CO2、N2O、NH3等。其中以CO2的应用居多。此色谱方法可分为填充超临界流体色谱和毛细管超临界流体色谱。它是一种以固体吸附剂（如硅胶）或键合到载体（硅胶或毛细管）上的高聚物以及使用液相色谱的柱填料等为固定相的色谱。混合物在SFC上的分离机制与气相色谱及液相色谱一样，即基于各化合物在两相间的分配系数不同而得到分离。由于流动相的使用量很小，因此使得流动相的使用范围得以扩大。
SFC在20世纪60年代提出，80年代毛细管超临界流体色谱的出现使其得到了快速发展。毛细管超临界流体色谱具有液相、气相色谱不具有的优点。其具有分离速度快、样品的前处理简单、灵敏度高、选择性好、条件温和等特点，且SFC法可处理GC法不能处理的高沸点、不挥发性试样，还能比高效液相色谱相法的流速快、具有更高的柱效和分离效率。
伴随着微柱高效液相色谱的不断发展，SFC技术经过改进，使得填充装柱式SFC得以出现。填充SFC是根据其流动相为超临界流体的特点，由HPLC改装而成，其使用的固定相是也是采用HPLC普遍使用的柱子和填料。其在分析某些热敏性、低挥发性、极性化合物的应用已非常广泛。填充柱式SFC不论是在样品的分离方面还是在样品的收集方面，此方法都比毛细管GC法和HPLC法要好得多。由于SFC流动相具有高扩散性和低粘性，所以流动相带动样品流过柱时的速度快，从而样品被分离的速度也快。流动相的溶剂化能力受较多因素影响，其中密度的变化对流动相影响最大，他直接影响流动相对样品的分离能力，因此适当改变流动相的密度对样品的分离分析极为重要。
SFC不仅固定相可以选择HPLC的填料，而且其检测器也可以使用GC和HPLC 的检测器。并且由于其与质谱、傅立叶变换红外光谱仪和核磁共振仪等联用技术的广泛应用，使得其技术的发展也越来越快。在药物分析中，SFC的应用越来越广，他可分析热不稳定的天然脂类、甾类化合物、多元不饱和脂肪酸及其酯、天然色素、氨基酸、糖类等，已成为药物分析的重要手段，在某些方面已经超过了GC和HPLC的应用。[9]SFC在对药物进行分析时，由于多数药物都有极性，所以通常采用加有极性改良剂的CO2为流动相，极性改良剂通常为甲醇，
可以使得分析时间大大缩短。通常情况下也可根据局药物具有的其他性质，在流动相中加入其它的添加剂，例如三氟乙酸、乙酸、三乙胺和异丙醇胺等，可起到改善色谱峰形的作用。
虽然超临界流体色谱法(SFC)具有如此多的优点，而且它即可用于热不稳定、极性大、挥发性小以及不能衍生化的杂质的分析，又能广泛应用于手性药物的分析，但在有关物质的测定中应用较少，主要是因为其技术还不够完善，检测的重复性差。
3、超高效液相色谱技术
在药物分析中高效液相色谱通常是应用最为广泛的分析方法。可是由于复杂化合物，例如药物中有毒有害物质、天然产物、肽的消解产物、代谢产物及其他有害物质等这些物质的存在使得药物的分析工作者面临着巨大的挑战。因此色谱工作者们在高效液相的基础上发展起了超高效液相色谱技术（UHPLC）。超高效液相色谱技术，又称超高压液相色谱，是近年来液相色谱领域最活跃的发展领域。此技术的基本原理与高效液相色谱技术的基本原理几乎完全形同，不同的是他的填料颗粒是粒径小于二微米的小颗粒且应用了新型表面多孔层进行高效填料。除此之外，超高效液相色谱技术还应用了压力大于105Kpa的超高压系统，因此是一种新型液相色谱技术。根据Van Deemter曲线及其方程式，当使用小颗粒填料色谱柱时，可以通过提高流速进一步加快分离速度而不损失或分离度的损失比较小，在能显著改善色谱峰的分离度和检测灵敏度的基础上，UHPLC同时大大缩短了分析周期。因此超高效液相色谱技术与传统液相色谱技术相比具有更加快速、更加高效、分辨率更高的色谱系统，是特别适用于微量复杂混合物的分离和高通量分析。世界上的第一台超高效液相色谱系统是在2004年3月Waters公司率先推出的，其目的是用于商业销售。在此公司研制的超高效液相色谱系统的基础上Agilent公司以及Therrmo Electron等公司根据其小粒径填充色谱柱的特点都陆续推出类似的产品，并给色谱研究者们带来了极大的方便。
自UPLC系统推出以来，由于其技术快速、灵敏、高分离度和节省溶剂等优势，以及UHPLC填料及仪器技术的快速发展和普及，使得越来越多的液相色谱工作者希望应用UHPLC技术来提供工作效率，并解决实际工作中的问题。不仅如此，UPLC与MS等设备联用技术的发展也很迅速，现已成功应用于农药残留物检测、水质和环境监测、化妆品质量控制、药物及制剂的分析检测和质量控制、中药复杂组分分析及代谢组学等领域。
Davy等为了实现快速分离，使用了Waters公司生产的超高效液相色谱仪，以盐酸利多卡因、尼泊金甲酯、氨甲酸苄苯酯等为研究对像，分别采用了粒径低于2μm，柱长20~50mm的不同短柱，探讨了柱长和颗粒大小对色谱分离的柱外死体积和分析时间的影响，推导出根据超高效的短柱与传统的柱子（150mm，5μm）的柱外体积、填料粒径、柱内径、柱长等计算样品保留时间以及柱效的基本方程式。[10]通过该方程式的计算，短柱的柱外展宽约为5μl，而传统色谱柱的柱外展宽约为200μl。粒径低于2μm的短柱无论在分析时间、柱效上都显示了很好的优势。
Al-Dirbashi等使用液液萃取和UPLC-MS╱MS分析人血浆中的多沙唑嗪（一种选择性a1受体拮抗剂），其LOD约为0.102ng╱ml,灵敏度优于HPLC-FD（荧光检测法），而分析时间却由15分钟缩短为2分钟。[11]Apollonio等将UPLC与MS联用，用于分析血浆中的多种毒性成分，在分析时间和分离度方面也都明显
优于传统的HPLC法。
4、联用技术
色谱技术在有关物质的检查中占主要地位，因为其具有分离能力强、检测灵敏度高、分析速度快且分析广泛，但是对于未知物的定性方面，色谱给出的信息较少，根据其给出的数据进行定性缺乏可靠性。因而就需要光谱技术对其进行协助，因为光谱技术具有很强的鉴定未知物结构的能力，但却不具有分离能力，对复杂混合物无能为力。从而就出现了集色谱的高分离能力与光谱的高灵敏度和极强的定性专属特异性于一体的两谱联用技术。联用技术构成了药物分析学科领域中最主要和最基本的研究手段和方法。其中，色谱-光谱联用、色谱-质谱联用、质谱-质谱联用尤为活跃。这些先进技术在药物中有关物质的检查中应用，充分而有力的显示了这些联用技术的威力。
4.1、GC-MS
气相色谱-质谱(Gas Chromatography-Mass Spectrometry, GC-MS)联用法是一种结合了色谱高的分离效能以及质谱高的灵敏度等特点的分离分析方法。GC-MS的联用使得样品进入气相被分离，而后马上进入质谱仪中进行定性分析，是一种高效连续的操作技术。此操作技术所具备的仪器及系统有气相色谱系统、色谱与质谱联用所需的接口，离子源，质量分析器、检测器、真空系统、计算机控制及数据处理系统等。操作方法是将待测样品通过气相色谱分离后，流出气体经接口进入离子源。所产生离子在加速电压的作用下，进入质量分析器，按照离子的质荷比大小分离并列谱。其中，质谱的检测器与传统检测器相比具有更高的灵敏度，样品用量少，只需10-9~10-12g，分析速度快、应用范围广，如果电离方法合适，一般化合物都能被电离，因此能获得更多的化合物结构信息，弥补了传统检测器的不足。 随其商品化仪器设备及分析检测技术的日益完善，GC-MS联用技术已广泛应用于石油、化工、医药、食品、环境保护等需要进行化学成分检测的各个领域。
4.2、LC-MS
液相色谱-质谱（Liquid Chromatography-Mass Spectrometry，LC-MS）联用技术通常应用的是高效液相色谱与质谱进行联用。其操作方法是将待测样品通过液相色谱分离后，流出液经接口部分或全部进入离子源。所产生离子在加速电压的作用下，进入质谱质量分析器，按照离子的质荷比大小分离并列谱的分析方法。此法适用于极性强、挥发度低、分子量大及热不稳定的混合有机物体系。
质谱的检测器灵敏度高、选择性好、比较通用且药物中的化合物在电离室中电离后，质谱的数据处理系统会给出化合物的分子量及详细的结构信息。近年来，面对研究领域变得越来越广泛，人们对技术的要求也越来越强烈，这使得高效液相色谱和质谱的联用技术或与质谱串联技术已成为一种高度自动化、成熟的分析手段。在新药研发的过程中，每个环节都有可能引入有关物质，使得新药的纯度降低，甚至给新药带来毒害，因此分析人员经常应用液质联用技术对新药研发的各个阶段进行整体分析，从而使得液质联用技术得到推广。分析人员应用HPLC-MS和HPLC-MS-MS技术来分析某些新合成的化合物，通过数据处理系统给出的信息，可以确定正确的化合物是否被合成，而且还可以测定和评价这些新的化学实体的各种物理和化学性质。除此之外，这些新化学实体在体内的吸收、分布、代谢和排泄等一系列的药物代谢和药代动力学的参数都会得以分析。因此高效液相色谱-质谱联用技术在药物中有关物质检查方面得到广
泛应用。
4.3、CE-MS
毛细管电泳-质谱(Capillary Electrophoresis - mass spectrometry，CE-MS）联用技术是将具有高分离效率和多种分离模式的毛细管电泳与高灵敏度和能提供较多化合物结构信息的质谱联用起来的新型应用技术。其中，质谱所用的检测器通常是紫外、二极管阵列或激光诱导荧光等检测器。综合毛细管电泳和质谱的优点，使得两者的联用技术在近年来发展迅速已成为有关物质检测的最重要技术之一。在毛细管电泳与质谱的联用中，质谱仪中的离子源通常使用的离子化手段是快原子轰击和电喷雾电离；而毛细管电泳的分离模式则主要集中在毛细管区带电泳、毛细管凝胶电泳、胶束电动毛细管色谱、毛细管等速电泳等。由于CE的分离效率较高，且MS能提供的化合物信息较多，因此两者的联用技术在药物中有关物质检查的研究中得到广泛应用。但是由于此技术与液质联用技术相比检测的波动性较大、较低的样品利用率以及由此产生的较弱的浓度灵敏度、分离灵敏度过于依赖样品基底离子强度等原因使得此技术的应用不及液质联用技术。
4.4、光谱-色谱
光谱-色谱联用技术是一种结合了高效分离技术与高灵敏度检测技术的现代分析方法。此联用技术的结合方式很多，但由于价格昂贵，所以应用较少。目前已知的应用此联用技术的有：袁耀佐等科研人员应用HPLC-MS/MS法对药物中七种有关成分进行分析、方文信等人采用GC-MS 检查磷酸氯喹中的脱乙基物等杂质、Vikas R. Shinde等采用HPLC- NM检查凡那普利中的未知杂质。
三、总结
有关物质有可能存在于药品研究、生产、储存的全过程中，这多药品的质量以及纯度会造成严重的影响，因此药物中有关物质的检查尤为重要，这关乎到药物的安全、有效和质量控制等方面。目前，人们对有关物质的检查多集中在含量在0.1％左右的有关物质，科研人员应用各种检测手段检查药物中的有关物质，这使得分析方法变得越来越准确、快速且灵敏，同样也使得各种分析方法的应用越来越广泛。其中，HPLC法在有关物质检测与分析中仍将占主导地位，TLC法长做补充手段使用。当杂质需要准确定量时，通常选则HPLC法测定，当杂质不需要准确定量时则使用TLC法测定。GC法由于测定有关物质时需要对有关物质进行衍生化，因此在此方面应用较少，多用于检测残留有机溶剂。随着科研人员对检测技术及方法的成熟，CE法近年来发展的越来越快, 特别是在手性异构体的检查中能发挥重要的作用，其在有关物质测定的应用中也正逐年增加,并且由于此技术本身的优点再加上如果技术上得到改进，它的应用范围有望成为药品生产和质量控制中的常用分析方法。除了这些常规的方法之外，近年来SFC、UPLC、联用技术等方法在有关物质研究中的应用逐年增加。而且LC —MS及LC-MS—MS技术在有关物质的结构分析中已相当成熟。随着检测手段的进一步完善，人们对药物中有关物质的研究将会更加深入，药品质量也将得到进一步的提升。
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物质[J].药学学报,2007,42(6):639-642.
中国药科大学药物分析期末试卷（B卷） 2016～2017学年第一学期 专业药学专业药物分析方向班级学号姓名 核分人： 一、选择题（共15分） (最佳选择题) 每题的备选答案中只有一个最佳答案(每题1分) 1. 中国药典主要内容包括：( ) A 正文、含量测定、索引 B 凡例、制剂、原料 C 鉴别、检查、含量测定 D 前言、正文、附录 E 凡例、正文、附录 2. 日本药局方与USP的正文内容均不包括( ) A.作用与用途 B.性状 C.含量规定 D.贮藏 E.鉴别 3. 按药典规定, 精密标定的滴定液(如氢氧化钠及其浓度)正确表示为( ) A.氢氧化钠滴定液(0.1520M) B.氢氧化钠滴定液 (0.1524mol/L) C 氢氧化钠滴定液(0.1520M/L) D. 0.1520M氢氧化钠滴定液 E. 0.1520mol/L盐酸滴定液 4、药物中氯化物杂质检查的一般意义在于它( ) A. 是有疗效的物质 B. 是对药物疗效有不利影响的物质 C.是对人体健康有害的物质 D. 是影响药物稳定性的物质 E.可以考核生产工艺和企业管理是否正常
5. Ag-DDC 法是用来检查 ( ) A. 氯化物 B. 硫酸盐 C. 硫化物 D. 砷盐 E. 重金属 6. 采用碘量法测定碘苯酯含量时，所用的方法为 ( ) A. 直接回流后测定法 B. 碱性还原后测定法 C. 干法破坏后测定法. D. 氧瓶燃烧后测定法 E. 双氧水氧化后测定法 7. 四环素类药物在碱性溶液中，C 环打开，生成 ( ) A. 异四环素 B. 差向四环素 C. 脱水四环素 D. 差向脱水四环素 E. 配位化合物 8. 甾体激素类药物鉴别的专属方法为 ( ) A. UV B. GC C. IR D. 异烟肼法 E. 与浓硫酸反应 9. 药物的碱性溶液，加入铁氰化钾后，再加正丁醇，显蓝色荧光的是 ( ) A ．维生素A B ．维生素B 1 C ．维生素C D ．维生素D 10. 中国药典2000年版测定维生素E 含量的内标物为 ( ) A.正二十八烷 B.正三十烷 C.正三十二烷 D.正三十烷 E.十六酸十六醇酯 11. 加入氨制硝酸银后能产生银镜反应的药物是 ( ) A.地西泮 B.阿司匹林 C.异烟肼 D.苯佐卡因 E.苯巴比妥 12. 坂口(Sakaguchi)反应可用于鉴别的药物为 ( ) A. 雌激素 B. 链霉素 C. 维生素B 1 D. 皮质激素 E. 维生素C 13. 维生素A 采用紫外分光光度法测定含量，计算公式中换算因子为 ( ) A ．效价(IU/g) B ．效价(g/IU) C ．(g/IU)1% cm 1效价E D ．1% cm 1(IU/g)E 效价 E ．(IU/g)1% cm 1效价E
一、 原料药百分含量的计算 (一)滴定 1. 直接滴定法 %100%3010?=-???-m F T V V ）（含量 2. 剩余滴定法 %100%3 010?=-???-m F T V V ）（含量 （二）紫外 1. 对照品对照法 %100%?= ??? m V D A A C R X R 含量 2. 吸收系数法 %100%1001% 11?=???m V D E A cm 含量 （三）色谱 1. 外标法 %100%?=??? m V D A A C R X R 含量 2. 内标加校正因子法 R R S S C A C A f //= ）校正因子（ %100%?=??m V D C X 含量 S S X X C A A C f /? = %100%?=?????m S S X A V D C A f 含量 二、 制剂标示量百分含量的计算 (一) 滴定分析法 1.片剂 （1）直接滴定法 %10010%3??????=-B m W F T V 标示量 %10010)(%30??????-=-B m W F T V V 标示量 （2）剩余滴定法 %10010)(%30??????-=-B m W F T V V 标示量 2. 注射液 （1）直接滴定法
%10010%3??????=-B m F T V 每支容量标示量 （2）剩余滴定法 %10010%30??????-=-B m F T V V 每支容量）（标示量 (二) 紫外-可见分光光度法 1.片剂 （1）对照品比较法 %100%??=????B m W V D A A C R X R 标示量 (二)紫外-可见分光光度法 %100%1001% 11??=????B m W V D E A cm 标示量 2.注射剂 （1）对照品比较法 %100%??=???? s V B V D A A C R X R 每支容量标示量 （2）吸收系数法 %100%1001% 11??=????s V B V D E A cm 每支容量标示量 （三）色谱法 1、片剂 %100%??= ????B m W V D A A C R X R 标示量 2、注射液 %100%??= ???B s V V D C X 每支容量标示量
各论总结第六章芳酸类非甾体抗炎药物 1.结构特征：苯环、游离羧基 2.代表药物：水杨酸（游离羧基）、阿司匹林（酯键、游离羧基）、双水杨酯（酯键、游离羧基）、二氟尼柳（游离羧基）、甲芬那酸（游离羧基）、双氯芬酸钠（酯键）、布洛芬（游离羧基）、酮洛芬（二苯甲酮、游离羧基）、萘普生（酯键）、吲哚美辛（游离羧基）、吡罗昔康（S、酰胺键）、美洛昔康（S、酰胺键）、尼美舒利、对乙酰氨基酚（酰胺键） 3.鉴别实验： （1）三氯化铁反应： ①．水杨酸反应：水杨酸加三氯化铁试液，生成紫堇色配位化合物 阿司匹林（水解）、双水杨酯（水解）、二氟尼柳 ②．酚羟基反应：对乙酰氨基酚的水溶液加三氯化铁试液，显蓝紫色 吡罗昔康、美洛昔康：烯醇式羟基 （2）缩合反应（酮洛芬） 酮洛芬（二苯甲酮）：乙醇溶解，酸性条件下（硫酸），与二硝基苯肼缩合（加热至沸）生成橙色的偶氮化合物 （3）重氮化偶合反应（对乙酰氨基酚：潜在的芳伯氨基）
对乙酰氨基酚：稀盐酸加热条件下，与亚硝酸钠试液，再加入碱性β萘酚生成红色偶氮化合物 （4）水解反应（阿司匹林） 阿司匹林与碳酸钠加热水解，加入过量稀硫酸酸化，生成白色沉淀，并产生醋酸臭气（5）荧光反应（甲芬那酸） 溶于硫酸后，与重铬酸钾反应显深蓝色，随即变为棕绿色 4.阿司匹林及双水杨酯中游离水杨酸与有关物质的检查 （1）阿司匹林中的有关物质：合成起始原料苯酚及合成中间体与副产物，如游离水杨酸、醋酸苯酯、水杨酸本酯、水杨酰水杨酸、水杨酸酐、乙酰水杨酸本酯、乙酰水杨酸酐 游离水杨酸：阿司匹林为乙酰水杨酸，在生产过程中因乙酰化不完全，或在精制过程中及贮藏期间的水解而产生水杨酸。游离水杨酸对人体有毒性，因其分子中所含的酚羟基在空气中易被逐渐氧化生成一系列有色（如淡黄、红棕甚至深棕色）醌型化合物而使阿司匹林成品变色，因而需加以控制 ①阿司匹林中游离水杨酸的检查（HPLC） 检测方法：稀硫酸铁铵溶液显色反应 注：药典采用1%冰醋酸溶液制备供试品溶液，以防阿司匹林水解，同时采用HPLC检查，C18作填充柱 ②双水杨酯中游离水杨酸的检查（紫外）
中国药科大学药物分析期末试卷（A卷） 2007-2008学年第一学期 专业药学专业药物分析方向班级学号姓名 人： 得分评卷人一、填空题（每空0.5分，共15分） 1、非盐酸盐药物在生产过程中也可能引入的氯离子，氯离子对人体_______，但它能反映药物的_______及生产过程_______，因此氯化物常作为_______杂质检查。药物中的微量氯化物检查的条件是在______比色管中，在_________条件下与__________反应，生成氯化银胶体微粒而显白色浑浊，与一定量的_____________溶液在相同条件下产生的氯化银浑浊程度比较，判定供试品中氯化物是否符合________规定。比较时，比色管同置______背景上，从比色管__________观察，比较，即得。氯化物浓度以50ml中含_________μg的Cl-为宜，此范围内氯化物所显浑浊度明显，便于比较。供试品溶液如不澄清，应________；如带颜色，可采用____________解决。 2、药品质量标准分析方法验证的目的是证明采用的方法适合于相应检测要求。建立药品质量标准时分析方法需经验证。验证内容有：_________、__________、__________、__________、_________、 _________、_________、_________。HPLC法进行药物分析测定时系统适用性试验的目的是________________；系统适用性试验的常见内容有：_________、__________、___________、___________。 3、砷盐的检查时，有机结合的砷通常须经 ______________________处理：取规定量的供试品与_________或氢氧化钙、硝酸镁共热转化为_________后，依法检查。操作中应注意炽灼温度不宜超过700℃。
色谱外标法含量计算 对：对照品溶液样：供试品溶液峰的峰面峰的峰面积计算公式 对：对照品稀释平均重：供试品平均100 =含Spe.AV均 对照品比样：供试品稀释对：对照品取样×含———————————————————————————————————————W样：供试品取样量———————
供试品标示Spec色谱外标法均匀度计算对：对照品溶液样：供试品溶液主峰的峰面峰的峰面对照品比值平AV计算公式 对：对照品稀释样：供试品稀释体V样样×VA×100%=含量积AVGSpec. ×积 W对：对照品取样量A对×V对Spec.：供试品标示量对照品比值=W对×含量 AVG：对照品比值平均———————————————————————————————————————系数A= |100-含量平值 ———————均值| 色谱外标法溶出度计算供试品标示量：Spec.样：供试品溶液主A含量标准差S=系数 峰的峰面积计算公式对：对照品溶液主AA+1.80S 判断值为 峰的峰面积样：供试品稀释体V对W样×样×AV100%×=溶出度
对×对VA.×Spec积 对：对照品稀释体V积对：对照品取样量W ×含量—————————————————————————————————————————————— 样：供试品溶液主A内：对照溶液内标A峰的峰面积峰面积色谱内标法含量计算 样：供试品稀释体V对：对照品取样量W计算公式： 积×含量 内VW对×A内× =校正因子（f）AV对对×W内×平均重：供试品平W内：对照溶液内标V均重稀释体积平均重W×V样×A样×W内100%××=f含量样W内′×Spec.×A内′ ×VA内'：供试溶液内标A对：对照溶液主峰———————————————————————————————————————峰面积的峰面积——————— V内'：供试溶液内标W内：内标物质取样色谱内标法均匀度计算稀释体积量×含量样：供试品溶液主A 峰的峰面积计算公式样：供试品取样量W对：对照品稀释体V 积样：供试品稀释体V样V内×：供试品标示量A样×Spec.W100%××f含量=.×SpecVA内′×内′积 ；含量平均值系数A= |100-|A内'：供试溶液内标峰面积系数S=含量标准差；判断值为A+1.80S V内'：供试溶液内标———————————————————————————————————————稀释体积——————— Spec.：供试品标示量 光谱法（有参照）含量计算A样：供试品吸光度A对：对照品吸光度 计算公式：V样：供试品稀释体V对：对照品稀释体积积A样×V样×W平均重×W对×100%=含量样WSpec.××V对×A 对W平均重：供试品平Spec.：供试品标示量———————————————————————————————————————均重 W样：供试品取样量——————— W对：对照品取样量光谱法（有参照）均匀度计算×含量 计算公式： A样：供试品吸光度A对：对照品吸光度 A样×V样×W对×100%=含量V样：供试品稀释体V对：对照品稀释体 .SpecV对×A对×积积
. 《药物分析》1-2章课堂练习 一．选择题 1. 下列关于药物纯度的叙述正确的是（ C ） A.优级纯试剂可替代药物使用 B.药物的纯度标准主要依据药物的性质而定 C.药物纯度是指药物中所含杂质及其最高限量的规定 D.物理常数不能反映药物纯度 2. 关于药典的叙述最准确的是（ D ） A.国家临床常用药品集 B.药工人员必备书 C.药学教学的主要参考书 D.国家关于药品质量标准法典 3. 《中国药典》（2010年版）分为（ C ） A.1部 B.2部 C.3部 D.4部 4. 要知道缓冲液的配制方法应在药典中查找（ B ） A.凡例 B.正文 C.索引 D.附录 5. 某药厂新进3袋淀粉，取样应（ A ） A.每件取样 B.在一袋里取样 C.按x +1随机取样 D 按2 x +1随机取样 6. 药物鉴别主要目的（ B ） A.判断药物优劣 B.判断药物真伪 C.确定有效成分含量 D.判断未知物组成和结构 7. 下列叙述与药物鉴别特点不符的是（ ） A.为已知药物的确证试验 B.是个别分析而不是系统试验 C.是鉴定未知药物的组成和结构 D.制剂鉴别主要附加成分合各有效成分之间的相互干扰 8. .对专属鉴别试验的叙述不正确的是（ ） A.是证实某一种药物的试验 B.是证实某一类药物的试验 C.是在一般鉴别试验的基础上，利用各种药物化学结构的差异来鉴别药物 D.是根据某一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性的不同，选用某些特有的灵敏定性反应来鉴别药物真伪 9. 下列不属于物理常数的是（ B ） A.折光率 B.旋光度 C.比旋度 D.相对密度 10.下列各项中不属于一般性杂质的是（ ） A.氯化物 B.砷盐 C.硫酸盐 D.旋光活性物 11. 当溶液的厚度不变时，吸收系数的大小取决于（ ） A.光的波长 B.溶液的浓度 C.光线的强弱 D.溶液的颜色 二、填空1.美国药典的缩写为（ ） 2.标定和复标的份数不少于 （ ）份 3.具有旋光性的药物，结构中应含有（ ） 4.测定PH 时，通常选择两种标准缓冲液的PH 约相差（ ）个PH 单位。 5.溶解度测定法中，溶剂温度为（ ），每隔（ ）分钟， 强力振摇（ ）秒，观察（ ）分钟内的溶解情况。 15. 平行试验结果的误差允许范围规定，采用高效液相法时相对偏差不得超过（ ）
药物分析计算题 滴定度的计算 公式： 滴定度，每1 ml 滴定液相当于被测组分的mg 数，mg/ml ——T 1 mol 样品消耗滴定液的摩尔数，常体现为反应摩尔比，即1∶n ——n 例题：用碘量法测定维生素C 的含量：已知维生素C 的分子量为176.13，每1ml 碘液 （0.1mol/L ）相当于维生素C 的量为多少？ mg 61.17L 1mol g 176.13L mol 0.1=?==CM T 杂质限量计算 例题：对乙酰胺基酚中氯化物的检查：取本品 2.0g ，加水100ml ，加热溶解后，冷却，滤过， 取滤液25ml ，依法检查，与标准氯化钠溶液5.0ml （每1ml 相当于10μg 的Cl-）制成的对照液比较，浊度不得更大。问氯化物限量为多少（%）？ 例题：葡萄糖中重金属的检查：取本品4.0g ，加水23ml 溶解后，加醋酸盐缓冲液（pH3.5） 2ml ，依法检查，含重金属量不得过百万分之五。问应取标准铅溶液多少ml （每1ml 相当于10μgPb/ml 的Pb ）？
含量计算-容量分析法 原料药 例题：硝西泮的含量计算：称取本品0.2135g ，加冰醋酸15ml 与醋酐5ml 溶解后，加结晶 紫1滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L ，F=0.9836）滴定液至溶液显黄绿色，消耗滴定液7.80ml ，空白消耗滴定液0.15ml 。每1ml 高氯酸滴定液（0.1mol/L ）相当于28.13mg 的硝西泮。求硝西泮的百分含量。 100 )(%0???-=W F T V V 含量 ? %=（7.80-0.15）ml ×28.13mg/ml ×0.9836×100% / 0.2135g =99.14% 片剂 ? 公式 例题：奋那露片的含量测定：取本品（0.2g/片）10片，精密称定其重量为2.0159g ，研细， 精密称取片粉0.0510g ，照氧瓶燃烧法依法进行实验。消耗硝酸汞滴定液（0.005mol/L,F=1.042)17.60ml 。已知，1ml 硝酸汞滴定液（0.005mol/L)相当于2.737mg 奋那露。试求奋那露片的标示百分含量。 注射液 ? 公式：
药物分析试题及答案 第一章药品质量研究的内容与药典概况(含绪论) 一、填空题 1．中国药典的主要内容由凡例、_正文、附录、引索四部分组成。 2．目前公认的全面控制药品质量的法规有 GLP、GMP、GSP、GCP。 3．“精密称定”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一；“称定”系指称取重量应准确至所取重量的百分之一；取用量为“约”若干时，系指取用量不得超过规定量的±10% 。 4．药物分析主要是采用化学或物理化学、生物化学等方法和技术，研究化学结构已知的合成药物和天然药物及其制剂的组成、理化性质、真伪鉴别、纯度检查以及有效成分的含量测定等。所以，药物分析是一门研究与发展药品质量控制的方法性学科。 5．判断一个药物质量是否符合要求，必须全面考虑三者_鉴别、检查、含量测定_的检验结果。 6．药物分析的基本任务是检验药品质量，保障人民用药_ 合理、有效、安全_、的重要方面。 二、选择题 1．《中国药典》从哪年的版本开始分为三部，第三部收载生物制品，首次将(生物制品规程)并入药典 (A)1990版 (B)1995版 (C)2000版(D)2005版 (E)2010版 2． ICH（人用药品注册技术要求国际协调会）有关药品质量的技术要求文件的标识代码是() (A)E（药品有效性的技术要求） (B)M（药品的综合技术要求） (C)P (D)Q (E)S （药品安全性的技术要求） 3．《药品临床试验质量管理规范》可用()表示。 (A)GMP（药品生产质量管理规范） (B)GSP（药品经营质量管理规范） (C)GLP（药品非临床研究质量管理规范） (D)GAP（中药材生产质量管理规范（试行））(E)GCP 4．目前，《中华人民共和国药典》的最新版为() (A)2000年版 (B)2003年版(C)2010年版 (D)2007年版 (E)2009年版 5．英国药典的缩写符号为()。
《药物色谱分析》复习重点 第三章 气相色谱法 1. 了解气相色谱法的特点及分类； 2. 气相色谱的固定液 （1）对固定液的要求 （2）样品组分与固定液之间的分子作用力的种类 （3）固定液的极性与分离特性评价，主要掌握Rohrschneider 常数，了解McReynolds 常数 （4）固定液的分类，掌握几种常见固定液如聚二甲基硅氧烷类、聚苯基甲基硅氧烷类、氰烷基聚硅氧烷类和聚乙二醇的特点及使用分析对象。 （5）气相色谱中如何选择固定液 3、气-液色谱柱气相色谱法 （1）气-液色谱柱气相色谱法中对担体的要求； （2）使用前担体的表面处理的原因及方法，其中担体表面处理时釉化的目的是什么？ （3）填充柱的老化的目的、方法及注意事项 4.气-固色谱与气-液色谱的特点比较 5. 毛毛细细管管柱柱气气相相色色谱谱法法 （1）毛细管柱的柱管使用聚酰亚胺涂层的原因及作用 （2）交联毛细管柱的特点及常用交联方法，毛细管气相色谱柱交联引发剂主要有哪些？
（3）毛细管柱进样方式，掌握分流及吹尾气目的。 （4）分流比及测定方法；线性分流与非线性分流及影响样品失真的因素。 （5）分流进样法的优缺点。 第四章气相色谱检测器 气相色谱检测器的种类及其原理、性能特点（主要FID、 ECD、NPD） 第五章气相色谱相关技术 1.程序升温色谱法 （1）特点 （2）主要方式及适用对象 2.顶空气相色谱法 （1）特点、分类 （2）静态顶空分析的原理及影响静态顶空气相色谱分析的因素 （3）动态顶空分析的原理及动态顶空法操作条件选择 第六章GC在药物分析中的应用 1. 如何判断待测物是否可以直接进行GC分析 2. 哪些化合物经过衍生化后可以进行GC分析
（一）杂质限量计算题4道 1.检查某药物中的砷盐，取标准砷溶液2ml （每1ml 相当于1μg 的As ）制备标准砷斑，砷盐的限量为0.0001％，应取供试品的量为多少？ 答：g 0.2% 0001.0% 100102g/m l 1%1006=???=?= -ml L CV S μ 供试品应取2.0g 2.取葡萄糖4.0g ，加水30ml 溶解后，加醋酸盐缓冲溶液（pH 3.5）2.6ml ，依法检查重金属（中国药典），含重金属不得超过百万分之五，问应取标准铅溶液多少ml ？（每1ml 相当于Pb10μg/ml ） 答：ml C LS V 2% 10010ml /g 10g 0.4105%1006 -6=????=?=-μ 标准铅溶液应取2.0ml. 3.肾上腺素中肾上腺酮的检查：称取肾上腺素0.250g ，置于25mL 量瓶中，加0.05mol/L 盐酸液至刻度，量取5mL 置另一25mL 量瓶中，用0.05mol/L 盐酸液稀释至刻度，用此液照分光光度法，在310nm 处测定吸收度，不得大于0.05，问肾上腺素的限量是多少？（以百分表示，肾上腺素 %1cm 1E =453） 答：%055.0%100g 250.0ml 5ml 25ml 25100145305.0=?? ??==S CV L 肾上腺酮的限量为0.055% 4. Ch.P.（2010）泼尼松龙中有关物质的检查： 取本品，加三氯甲烷-甲醇（9∶1）溶解并稀释制成每1 ml 中约含3 mg 的溶液，作为供试品溶液；精密量取2 ml ，置100 ml 量瓶中，用三氯甲烷-甲醇（9∶1）稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。照薄层色谱法（附录V B ）试验，吸取上述两种溶液各5 μl ，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以二氯甲烷-乙醚-甲醇-水（77∶12∶6∶0.4）为展开剂，展开，晾干，在105 ℃干燥10分钟，放冷，喷以碱性四氮唑蓝试液，立即检视。供试品溶液如显杂质斑点，不得多于3个，其颜色与对照溶液的主斑点比较，不得更深。 答：%02.0%1005 35 10023%100=???? = ?= 供试品量 杂质最大允许量 L （二）含量测定15道计算题 一、原料药的含量测定 1、精密称得乙酰半胱氨酸供试品W=0.3001g ，加水30mL 溶解后，精密量取25ml 于锥形瓶，
1.药物标准：根据药物自身的理化与生物学特性，按照批准的来源、处方、生产、工艺、贮藏运输条件等所制定的，用以检验药品质量是否达到用药要求并衡量其质量是否稳定均一的技术规定。 2.性状：是对药物的外观、嗅味、溶解度以及物理常数等的规定，反映了药物特有的物理性质。 3.熔点：一种物质按规定方法测定，由固体熔化成液体的温度熔融同时分解的温度或在熔化时自初熔到全熔的一段温度。 4.比旋度：在一定波长和温度下，偏振光透过长1dm且每1ml中含有旋光性物质1g的溶液时测得的旋光度。 5.吸收系数：在给定的波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质在单位浓度、单位液层厚度时的吸收度称为吸收系数。 6.一般鉴别试验：依据某一类药物的化学结构或者理化性质的特性，通过化学反应来鉴别药物的真伪。 7.专属鉴别试验：根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的理化性质的不同，选用某些特有的、灵敏的定性反应来判断药物的真伪。 8.比移值：薄层色谱法中原点到斑点中心的距离与原点到溶剂前沿的距离的比值。（百度) 9.色谱鉴别法：利用不同物质在不同色谱条件下，产生各自的特征色谱行为（比移值或保留时间）进行的鉴别试验。 标准物质：系指供试品中物理和化学测试及生物方法试验用，具有确定特性量值，用于校准设备、评价测量方法或者给供试药品赋值的物质，包括标准品、对照品、对照药材、参考品。 10.标准品：用于生物鉴定、抗生素或生化药品中含量或效价测定的标准物质。按效价单位(或μg)计，以国际标准品标定。 11.对照品,：用于结构确切物质（如化学药）分析。按干燥品（或无水物）进行计算后使用。 12.鉴别：根据药物的某些物理、化学或生物学等特性所进行的试验，以判定药物的真伪。 13.检查：是对药物的安全性、有效性、均一性和纯度四个方面的状态所进行的试验分析。 14.制剂的规格：制剂的规格，系指每一支、片或其他每一个单位制剂中含有主药的重量（或效价）或含量（%）或装量，即制剂的标示量。 16.空白试验：系指在不加供试品或以等量溶剂替代供试液的情况下，按同法操作所得的结果。含量测定中的“并将滴定的结果用空白试验校正”，系指按供试品所消耗滴定液的量（ml）与空白试验中所消耗滴定液的量（ml）之差进行计算。 17.含量（效价）测定：采用规定的试验方法对药品（原料及制剂）中有效成分的含量进行的测定。 19化学试剂的纯度与药物纯度的区别：均规定所含杂质的种类和限量.药物纯度从用药安全、有效和对药物稳定性等方面考虑,只有合格品和不合格品. 试剂纯度是从杂质可能引起的化学变化对使用的影响以及试剂的使用范围和使用目的加以规定,它不考虑杂质对生物体的生理作用及毒副作用. 20.纯度：药物的纯净程度。 21.杂质：药物中存在的无治疗作用或影响药物的稳定性和疗效，甚至对人体健康有害的物质。 22.一般杂质：指在自然界中分布广泛，在多种药物的生产或贮存过程中容易引入的杂质。 23.特殊杂质：指在药物的生产或贮存过程中，它是由于药物的性质、生产方法和工艺条件等原因，引入的杂质。 24.杂质限量：药物中所含杂质的最大允许量。通常用百分之几或百万分之几。 25.重金属：在实验条件下，能与硫代乙酰胺或硫代钠作用显色的金属杂质。
中国药科大学研究生入学考试药物分析复试题汇总 A.10年药分复试 共十道大题，考3h 1.为什么要进行砷盐检查？砷盐检查方法有哪些及装置 2.复方。。包括丹参、冰片、三七，及各自特征成分及如何进行质量控制？含量测定 3.光谱题：苯佐卡因，画出氢谱和碳谱 二维谱中HMBC、HMQC 、NOESY、ROESY 名词解释 4.色谱分析，确定所用色谱分析方法（多为书中例题)，考过 二甲双胍、硝酸异山梨酯、好像还有个多糖 5.质谱离子化方法有哪些，各自特点，有哪些质谱仪（）如离子肼 6.好像还有个关于青霉素杂质的检查 实验与专外 1.配流动相 2.画下FID检测器及气化室 3.阿司匹林分析挑错，水解后剩余滴定法。 4.英文翻译（）基本都为药物分析方向期末考试所用专外书上内容 B.08年药分复试 一、单选 二、多选 三、问答题 1.盐酸伪麻黄碱的质量控制项目应有哪些，各自目的，并各自简述一种合适的控制方法及简要步骤、 2.抗生素类药物的分类，其含量测定方法与化学分析方法有何区别 3.按色谱条件选对应物质 条件一：ODS柱...，流动相：庚烷磺酸钠的磷酸缓溶液：水（）2:98） 条件二：ODS柱....，流动相：甲醇：水：冰醋酸，254nm; 条件三：ODS柱....，流动相：乙腈：水 （72:28）; 条件四：ODS柱....，流动相：甲醇：水（20:80）； 物质：柴胡皂苷，二氟尼柳，醋酸甲地孕酮，CH3N(CH3)2RCOO 4.(1)盐酸普萘洛尔含量测定方法？方程式？滴定度
（2）用ODS柱时拖尾的原因？解决方法？ （3）盐酸普萘洛尔，...普萘洛尔,.......普萘洛尔出峰顺序。 5.尼可刹米 （1） （2）IR峰归属，振动形式，3032cm 1,2975,1685,1589,1570,1465,1210,1120,711(3)NMR峰归属 偶合裂分原因，图中化学位移：9.0；7.0；3.0；1.0；0； （4）C13谱：10个峰，a j,J=0 指出对应C，及原因 （5）质谱：m/z 178;177;163;150;28;51;78;106（基峰），裂解方程式 6.什么是GC衍生化？特点（目的）？写出三种衍生化方程式 7.系统适应性试验包括？各自标准。计算公式 8.（1）上海华联制药厂 （2）欣弗 （3）梅花K （4）齐二药 以上各自事件的药物？原因，谈谈对药物质量控制的具体措施。 C.07年药物分析复试题 一、选择题（20'） 二、克伦特罗相关问题（60’） 三、克伦特罗的作用（0结构式已给出） 请推测克伦特罗的紫外吸收的特征峰位？ 请画出克伦特罗的大概的H NMR和C NMR 请推测克伦特罗的红外光谱的主要峰归属 请推测克伦特罗的主要质谱裂解方式 三、其他（70） 制剂分析的检查项目 多种药物色谱条件的选择？包括柠檬烯、龙脑、依那普利、VE以及二甲双胍。只需写出是采用GC还是LC，以及检测方式。为什么 色谱适应性考察项目有哪些 还不全，就记得这么多了10年药分复试 共十道大题，考3h 1.为什么要进行砷盐检查？砷盐检查方法有哪些及装置 2.复方。。包括丹参、冰片、三七，及各自特征成分及如何进行质量控制？含量测定 3.光谱题：苯佐卡因，画出氢谱和碳谱 二维谱中HMBC、HMQC
色谱外标法含量计算 计算公式 —————————————————————————————————————————————— 色谱外标法均匀度计算 计算公式 —————————————————————————————————————————————— 色谱外标法溶出度计算 计算公式 —————————————————————————————————————————————— 色谱内标法含量计算 计算公式： —————————————————————————————————————————————— 色谱内标法均匀度计算 计算公式 系数A= |100-含量平均值|； 系数S=含量标准差；判断值为A+1.80S —————————————————————————————————————————————— A 样：供试品溶液主峰的峰面积 V 样：供试品稀释体积 Spec.：供试品标示量 AVG ：对照品比值平均值 A 对：对照品溶液主峰的峰面积 V 对：对照品稀释体积 W 对：对照品取样量×含量 A 样：供试品溶液主峰的峰面积 W 平均重：供试品平均重 V 样：供试品稀释体积 W 样：供试品取样量 Spec.：供试品标示量 AVG ：对照品比值平均值 A 对：对照品溶液主峰的峰面积 V 对：对照品稀释体积 W 对：对照品取样量×含量 系数A= |100-含量平均值| 系数S=含量标准差 判断值为A+1.80S A 样：供试品溶液主峰的峰面积 V 样：供试品稀释体积 W 对：对照品取样量×含量 A 样：供试品溶液主峰的峰面积 V 样：供试品稀释体积 W 平均重：供试品平均重 A 内'：供试溶液内标峰面积 V 内'：供试溶液内标稀释体积 W 样：供试品取样量 Spec.：供试品标示量 A 内：对照溶液内标峰面积 W 对：对照品取样量×含量 V 内：对照溶液内标稀释体积 A 对：对照溶液主峰的峰面积 W 内：内标物质取样量×含量 V 对：对照品稀释体积 Spec.：供试品标示量 A 对：对照品溶液主峰的峰面积 V 对：对照品稀释体积 A 样：供试品溶液主峰的峰面积 V 样：供试品稀释体积 A 内'：供试溶液内标峰面积 V 内'：供试溶液内标稀释体积 Spec.：供试品标示量
药物分析计算题 1. 检查维生素C 中重金属时，若取样量为1.0g ，要求重金属含量不得过百万分之十，应吸取标准铅溶液（每1ml 相当于0.01mg 的Pb ）多少毫升？ 解： ()3 0.00001 1.010=1.0ml 0.01 LS V c ??==％ 2. 依法检查枸橼酸中的砷盐，规定含砷量不得超过1ppm ，问应取检品多少克？(标准砷溶液每1ml 相当于1μg 砷) 解： ()6 2110 2.01CV S g L ppm ??===－ 3. 取葡萄糖2g ，加水溶解后，依法检查铁盐，如显色与标准溶液3ml （10μgFe/ml ）比较，不得更深，铁盐限量为多少？ 解： 610103100100=0.00152 cV L S -??=?=?％％％ 4. 用直接滴定法测定阿司匹林原料药的含量，若供试品的称样量为0.3838（g ），氢氧化钠滴定液的浓度为0.1015（mol/L ），消耗氢氧化钠滴定液的体积为21.50(ml ），每1ml 的氢氧化钠滴定液（0.1mol/L ）相当于l8.02mg 的阿司匹林，则该阿司匹林的百分含量含为？ 解：30.101518.0221.500.1= 100=100=102.50.383810 TVF W ?????含量％％％％ 5. 乙琥胺的含量测定：精密取本品约0.1517g ，精密称定，加二甲基甲酰胺30ml 使溶解，加偶氮紫指示液2滴，在氮气流中，用甲醇钠滴定液(0. l035mol/L)滴定至溶液显蓝色，消耗甲醇钠滴定液（0.1035mol/L ）23.55ml 并将滴定的结果用空白试验校正。空白试验消耗甲醇钠滴定液（0.1035mol/L ）10.27ml 。每1ml 甲醇钠滴定液(0. l mol/L)相当于14.12mg 的C 7H 11NO 2。计算乙琥胺的百分含量。
中国药科大学 药物分析 期末试卷（A 卷） 学年第一学期 一、选择题（共50分） (一)A 型题(最佳选择题) 每题的备选答案中只有一个最佳答案(每题1分) 1．硫喷妥钠在吡啶溶液中可与铜盐反应，所呈的颜色为 ( ) A ．紫色 B ．红色 C ．绿色 D ．玫瑰红色 E ．紫堇色 2．雌激素的特有反应为 ( ) A ．麦芽酚反应 B ．硅钨酸反应 C ．硫色素反应 D ．Kober 反应 E ．坂口反应 3．四环素类药物中存在异四环素杂质是由于药物发生了 ( ) A ．差向异构化 B ．酸性降解 C ．碱性降解 D ．脱水反应 E ．光反应 4．维生素A 采用紫外分光光度法测定含量，计算公式中换算因子为 ( ) A ．效价(IU/g) B ．效价(g/IU) C ．(g/IU)1%cm 1效价E D ．1%cm 1(IU/g) E 效价 E ．(IU/g)1%cm 1效价E 5．薄层色谱法可用于检查药物中的杂质，如 ( ) A ．氯化物 B ．挥发性杂物 C ．有关物质 D ．硫化物 E ．硫酸盐 6．药物中砷盐检查采用古蔡氏法测定时，必须加入 ( ) A ．三氯化铁 B ．氯化亚汞 C ．氯化亚铁 D ．亚硝酸钠 E ．氯化亚锡 7．中国药典2000年版测定维生素E 含量采用GC 法，所用内标物质为 ( ) A ．正二十烷 B ．正二十二烷 C ．正三十烷 D ．正三十二烷 E ．正四十烷 8．酸性染料比色法中，水相的pH 值过小，则 ( )
A．能形成离子对B．有机溶剂提取能完全C．酸性染料以阴离子状态存在D．生物碱几乎全部以分子状态存在E．酸性染料以分子状态存在9．亚硝酸钠滴定法中，加KBr的作用是( ) A．添加Br-B．生成NO＋Br-C．生成HBr D．生成Br2 E．抑制反应进行 10．头孢呋辛酯中应检查的杂质是( ) A．异烟肼B．甲醇C．丙酮D．异构体E．游离肼 11．中国药典（2000年版）采用双相滴定法测定苯甲酸钠的含量，其所用的溶剂体系为( ) A．水-乙醚B．水-冰醋酸C．水-氯仿D．水-乙醇E．水-丙酮12．药物纯度合格是指( ) A．含量符合药典的规定B．符合分析纯的规定C．绝对不存在杂质D．对病人无害E．不超过该药物杂质限量的规定 13．药物中氯化物杂质检查的一般意义在于( ) A．它是有疗效的物质B．它是对疗效有不利影响的物质 C．它是对人体健康有害的物质D．可以考核生产工艺中容易引入的物质E．检查方法比较方便 14．测定卤素原子与脂肪碳链相连的含卤素有机药物（如三氯叔丁醇）的含量时，通常选用的方法是( ) A．直接回流后测定法B．直接溶解后测定法C．碱性还原后测定法D．碱性氧化后测定法E．原子吸收分光光度法 15．各国药典对甾体激素类药物常用HPLC或GC法测定其含量， 主要原因是( ) A．它们没有特征紫外吸收，不能用紫外分光光度法 B．不能用滴定分析法进行测定 C．由于“其它甾体”的存在，色谱法可消除它们的干扰 D．色谱法比较简单，精密度好 E．色谱法准确度优于滴定分析法 16．下列药物的碱性溶液，加入铁氰化钾后，再加正丁醇，显蓝色荧光的是( ) A．维生素A B．维生素B1C．维生素C D．维生素D E．维生素E 17．两步滴定法测定阿司匹林的含量时，每1ml氢氧化钠溶液（0.1/mol/L）相当
药物分析学 药物分析学是药学学科下设的二级学科，是我国高等教育药学专业教学计划中规定设置的一门主要专业课程，也是我国执业药师考试中指定考试的专业课程之一。本课程主要介绍药品质量标准及其制订和药品质量检验的基本知识，通过本课程的学习为从事药品质量检验和新药的研究开发工作奠定基础。 第一节药物分析的性质和任务 药物分析学是药品全面质量控制的一个重要学科，它主要运用物理学、化学、生物化学的方法与技术研究、解决化学结构已经明确的合成药物或天然药物及其制剂的质量控制问题，也研究有代表性的中药制剂和生化制剂的质量控制方法。因此，药物分析学是一门研究与发展药品质量控制的“方法学科”，是药学学科的重要组成部分。 药物分析学科和药物分析工作者的任务，除了药品的常规理化检验以及药品质量标准的研究和制订外，尚需深入到生物体内过程并进行综合评价的动态分析研究中；所采用的分析方法应该更加准确、灵敏、专属和快速，并力求向自动化、最优化和智能化方向发展。 第二节药物分析与药品质量标准 一、我国药品质量标准体系 我国药品质量标准体系包括：法定标准和非法定标准；临时性标准和正式标准；内部标准和公开标准等。其中，法定标准又可分为中国药典、局颁标准和地方标准等三级药品标准。 （一）法定药品质量标准 我国现行的法定的药品质量标准体系包括：中华人民共和国药典、国家药品监督管理局药品标准、省（自治区、直辖市）药品标准，人们习称为“三级标准”体系。 中华人民共和国药典，简称为中国药典。是由国家药典委员会主持编纂、国家食品药品监督管理局批准并颁布实施。中国药典是我国记载药品标准的法典，是国家监督管理药品质量的技术标准。凡生产、销售和使用质量不符合药典标准规定的药品均为违法行为。 国家食品药品监督管理局标准（简称局颁标准），系由国家食品药品监督管理局批准并颁布实施的药品标准 省（自治区、直辖市）药品标准，系由各省、自治区、直辖市的卫生行政部门〔卫生厅（局）〕批准并颁布实施的药品标准，属于地方性药品标准（简称地方标准），主要收载具有地方性特色的药品标准。 （二）临床研究用药品质量标准 该标准仅在临床试验期间有效，并且仅供研制单位与临床试验单位使用，属于非公开的药品标准。
中国药科大学药物分析实验试卷（B卷） 2006～2007学年第一学期 一、选择题（共15分） 1.中国药典主要内容包括：() A 正文、含量测定、索引 B 凡例、制剂、原料 C 鉴别、检查、含量测定 D 前言、正文、附录 E 凡例、正文、附录 2.日本药局方与U S P的正文内容均不包括() A.作用与用途 B.性状 C.含量规定 D.贮藏 E.鉴别 3.按药典规定,精密标定的滴定液(如氢氧化钠及其浓度)正确表示为( ) A.氢氧化钠滴定液(0.1520M) B.氢氧化钠滴定液(0.1524mol/L) C 氢氧化钠滴定液(0.1520M/L) D. 0.1520M氢氧化钠滴定液 E. 0.1520mol/L盐酸滴定液 4、药物中氯化物杂质检查的一般意义在于它() A. 是有疗效的物质 B. 是对药物疗效有不利影响的物质 C.是对人体健康有害的物质 D. 是影响药物稳定性的物质 E.可以考核生产工艺和企业管理是否正常 5. Ag-DDC法是用来检查( ) A. 氯化物 B. 硫酸盐 C. 硫化物 D. 砷盐 E. 重金属 6.采用碘量法测定碘苯酯含量时，所用的方法为() A. 直接回流后测定法 B. 碱性还原后测定法 C. 干法破坏后测定法. D. 氧瓶燃烧后测定法 E. 双氧水氧化后测定法 7.四环素类药物在碱性溶液中，C环打开，生成() A. 异四环素 B. 差向四环素 C. 脱水四环素 D. 差向脱水四环素 E. 配位化合物 8.甾体激素类药物鉴别的专属方法为() A. UV B. GC C. IR D. 异烟肼法 E. 与浓硫酸反应 9.药物的碱性溶液，加入铁氰化钾后，再加正丁醇，显蓝色荧光的是( ) A．维生素A B．维生素B1C．维生素C D．维生素D 10.中国药典2000年版测定维生素E含量的内标物为() A.正二十八烷 B.正三十烷 C.正三十二烷 D.正三十烷 E.十六酸十六醇酯 11.加入氨制硝酸银后能产生银镜反应的药物是() A.地西泮 B.阿司匹林 C.异烟肼 D.苯佐卡因 E.苯巴比妥 12.坂口(S a ka g u c h i)反应可用于鉴别的药物为( ) A. 雌激素 B. 链霉素 C. 维生素B1 D. 皮质激素 E. 维生素C 13.维生素A采用紫外分光光度法测定含量，计算公式中换算因子为( ) A．效价(IU/g) B．效价(g/IU) C． (g/IU) 1% cm 1 效价 E D． 1% cm 1 (IU/g) E 效价 E． (IU/g) 1% cm 1 效价 E 14．雌激素的特有反应为( ) A．麦芽酚反应B．硅钨酸反应C．硫色素反应D．Kober反应E．坂口反应 15.苯甲酸钠的含量测定采用双相滴定法时所用溶剂体系为() A. 水-乙醇 B. 水-丙酮 C. 水-氯仿 D. 水-乙醚 E. 水-甲醇 二、匹配题（每小题5分，共15分） [1-5] A.吸附或分配性质的差异 B .杂质与一定试剂产生沉淀 C.杂质与一定试剂产生颜色反应 D.杂质与一定试剂反应产生气体 E.旋光性质的差异 1.药物中易碳化物的检查() 2.酸性条件下,用醋酸铅试纸检查药物中所含微量硫化物() 3.T L C法检查有关杂质() 4.硫酸阿托品中莨菪碱的检查() 1
药物分析计算题 Datou 1.容量分析 (1)直接滴定法 维生素C的含量测定：精密称取本品0.2054g，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml 使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液滴定，至溶液显蓝色，在30秒内不褪，消耗碘滴定液（0.04999mol/L）23.48ml。每1ml碘滴定液（0.05mol/L）相当于8.806mg的C6H8O6。计算本品的百分含量。 (2) 剩余滴定法 尼可刹米的含量测定：精密称取本品0.1517g，加冰醋酸10ml与结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（0.1036mol/L）滴定, 至溶液显蓝绿色，消耗高氯酸滴定液( 0.1036mol/L) 8.23ml；并将滴定结果用空白试验校正，空白试验消耗高氯酸滴定液（0.1036mol/L）0.05ml。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于17.82mg的C10H14N2O。计算本品的百分含量。 2.紫外-可见光光度法 (1)对照法 对乙酰氨基酚的含量测定：精密称取本品41.3mg，置250ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液10ml，加水至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法（附录Ⅳ A），在257nm的波长处测得吸光度为0.589，C8H9NO2的吸收系数为715。计算本品的百分含量。 (2)吸收系数法 炔雌醚的含量测定：精密称取本品49.5mg，置50ml量瓶中，加无水乙醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml ，置另一50ml量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，照
紫外-可见分光光度法（附录Ⅳ A），在280nm 的波长处测得吸光度为0.502；另精密称取炔雌醚对照品19.8mg，置200ml量瓶中，加无水乙醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，在280nm 的波长处测得吸光度为0.498。计算本品的百分含量。