第一节微生物发酵制药
一、微生物发酵的概念及分类
(一)微生物发酵的概念
所谓发酵( fermentation)原来是指在厌氧条件下酵母菌分解碳水化合物释放能量以及得到产物的过程。随着科学技术的进步，尤其是分子生物学的发展，赋予了发酵新的更广泛的内涵，即发酵是借助于生物细胞(含动、植物细胞和微生物)在有氧或无氧条件下进行生命活动来制备产物的所有过程。
微生物发酵就是利用微生物生命活动产生的酶对各种原料进行酶加工以获得所需
产品的过程。它已成为一门工程学科，其利用的细胞一般都经过人工改造，然后再通过
控制培养条件使其最大限度地生产目的产物。
（二）微生物发酵的类型
由于微生物代谢类型的多样化，不同的微生物对同一物质进行发酵或用同一种微生物在不同的条件下进行发酵，可以获得不同的产物。因此，发酵的类型也多种多样。常见的微生物发酵类型有几种工业生产中常将发酵类型结合使用，如液体深层发酵、需氧浅层发酵。二、微生物发酵制药的基本流程
微生物的发酵技术一般分为上游技术、中游技术和下游技术二个阶段。上游技术是指发酵生产用菌种的选育；中游技术是指微生物在适宜条件下的培养过程，即发酵阶段;下游技术是指从发酵培养液中分离、提取、精制加工有关产品的过程，即提取阶段。
2.微生物发酵培养的方法现代发酵工业上常用的培养方法有分批发酵法、连续发酵法、补料分批发酵法和固定化细胞发酵法。
3，发酵工艺控制微生物发酵生产的水平最基本的是取决于生产菌种的性能，而优良菌种还需要有最佳的环境条件即发酵工艺加以配合，使其处于最佳的产物合成状态，才能取得优质高产的效果。
(l)无菌操作:发酵过程中发生杂菌污染影响产品生成量，因此，在移种、取样等过程中应进行严格的无菌操作。
（2）营养物质:发酵中微生物所需要的营养必须充足。因此，应定时抽取发酵液对其营养物质进行监测，及时添加或调整各种营养物质，确保微生物细胞的快速生长及代谢活动。
（3）溶解氧:氧气的供给往往是需氧深层发酵能否成功的重要限制因素。氧在培养基中的溶解度极低，即使培养基是被空气饱和的，其中溶解氧依然很少。生产中大多是往发酵罐内通人无菌空气并加以搅拌，来维持溶解氧水平。
(4)通气和搅拌:通气的目的是为微生物细胞提供所需要的氧。搅拌除有利于增加“培养基中溶解氧的浓度，提高通气效果外，还有利于热交换，使培养液的温度，致;有利于营养物质和代谢物的分散均匀。
(5)温度:发酵过程中的温度可影响微生物的生长、产物的形成、发酵液的物理性质、生物合成的方向等，而最适发酵温度又因菌种、培养基成分和浓度、菌体生长阶段、培养条件的不同有所差异。在抗生素发酵中，选择最适发酵温度主要从两方面考虑，即微生物生长的最适温度和代谢产物合成的最适温度，因为这两个阶段所需温度往往不同，如青霉素产生菌生长的最适温度为30℃，而产生青霉索的最适温度是24.7℃:因此，实践中应结合考虑具体情况进行最适温度的选择控制。
(6)酸碱度:各种微生物都有自己生长与生物合成的最适酸碱度，有些生长繁殖阶段与产物形成阶段所需的最适ph是不一致的。如链霉菌生长最适pH为6.3~6.9，而链霉索形成的最适pH为6. 7~7. 3。发酵过程中培养基的酸碱度会随多种因素的影响而发生变化，因此在发酵过程中应定时测定，并以生理酸性物质(如硫酸钱等)或生理碱性物质（如氨水等）调节pH，以适应微生物生长和产物合成的需要。
(7)泡沫:通气、搅拌、微生物代谢等多方面因素均可造成泡沫的形成，这是发酵中的正常现象，但过多的泡沫会影响生产，如会占据空间而使发酵液减少、会增加杂菌污染机会、
影响微生物的呼吸而使其代谢异常等。生产中常通过机械的强烈振动或加人消沫剂来除去泡沫。
（8）杂菌污染:非发酵用微生物进人发酵系统会影响发酵的正常进行。因此在发酵的进程中，要及时发现和消除杂菌污染。监测方法是在发酵的各个阶段定期从取液孔取出一定量的发酵液进行检杳，发现污染及时采取相应的处理措施。
(9)发酵终点的判断;发酵过程中通过定期取样，测定产物的含量、发酵液的酸碱度、含糖量和含氮量、菌体量及菌体形态的观察等，判断合适的放罐时机。一般放罐应在产物产量的高峰期，过早或过迟都会影响产物的产量。
〔二)下游加工过程—提取阶段
发酵液组成非常复杂，其中微生物细胞碎片、杂蛋白质、无机离子、代谢产物等杂质含量很高，发酵目的产物所占比例极少，大多低于10% ,各种抗生素的浓度不足1 %。提取阶段的主要任务就是采取适宜的方法技术，从发酵液中分离得到符合要求的发酵产品。
由于发酵生产的目的产物不同(如有的需要菌体、有的需要初级代谢产物、有的需要次级代谢产物)，对产品质量的要求也有所差异，因此获取产品的方法技术不尽相同，但通常按生产过程的顺序将提取阶段分为四个环节，即发酵液的预处理、提取、精制、成品加工等。
1.发酵液的预处理无论发酵产物是在发酵液中还是在微生物细胞内，因发酵液体积大，且杂质含量高，首先都必须进行发酵液的预处理，其目的有三:①将发酵液的固相与液相分开;②尽可能地使发酵目的产物转人以后要处理的液相中;③去除发酵液中的大部分杂质。
发酵液预处理过程包含以下基本内容:
(1)菌体分离:离心和过滤的目的是将发酵液中的菌体从液相中分离出来。常用的分
离方法是采用离心分离和过滤。对于发酵液中的细菌和酵母菌一般采用高速离
心法进行分离。对于细胞体积较大的丝状菌包括霉菌和放线菌的分离则采用过
滤方法进行分离。
(2)破碎细胞与细胞碎片的分离:其目的是得到目标产物。细胞破碎常用高压匀浆法和
研磨法等。细胞碎片的分离方法常采用离心分离法。
(3)去除蛋白质:目的是去除发酵产品以外的可溶性蛋白质。常用方法有等电点法或加热法。
(4)调整发酵液的酸碱度和温度:其目的一方面通过调整发酵液的酸碱度和温度，尽可能地使发酵产物转人便于以后处理的相中(多数是液相)。另一方面尽量避免因温度及酸碱度过高或过低引起发酵产物的破坏或损失，保证发酵产物的质量。
(5)除去金属离子、热原质等有机杂质:发酵液中存在重金属离子、色素、热原质和毒性物质，直接影响发酵产物的质量和收获率，也影响发酵产物的提取和精制，一定要予以去除。
2.发酵产物的提取(初步纯化)
发酵产物的提取方法很多，归纳起来有以下几种
3.发酵产物的精制(高度纯化)生产实践中，通常采用层析法来分离和精制浓度比较低的产物。常用的层析技术有吸附层析法、离子交换层析法、凝胶过滤层析法、亲和层析法等。
以上各提纯、精制方法，还有蒸馏分离(对液体混合物分离或从溶液中回收某些溶剂的方法)、膜分离法(物质透过或被截留于膜的“筛分离”方法)，均可在提纯、精制过程中使用，实际工作中，常需根据目标产物的特性来选用不同的合适方法，并需多次分离、提纯，最终达到精制目的。
4.成品加工根据产品应用要求，利用浓缩、结晶、干燥等技术对已纯化的产物作最后加工处理，以获得符合质量要求的产品。浓缩的目的是将低浓度的溶液除去一定量的溶剂变成高浓度的溶液;结晶可使溶质从溶液中析出呈晶体状态;干燥的目的是除去发酵产品中的水分。常用浓缩、结晶、于燥方法。
加工完成后的产品，应进行有关产品的纯度、稳定性和活性等方面的检测，以确保产品的质量。通常需从下列两个方面进行检验。
发酵产物经过上述分离、提取和精制的各个过程，经检验达到规定的纯度、含量等标准。然后进行分装。根据不同的发酵产物的性质、特点，采用不同的容器将产品分装成便于储藏和运输的形式。
三、微生物发酵制药举例
(一)撇生物发酵产业的发展状况
葡萄、梨等水果在自然条件下会发酵产生酒，这一自然现象早在公元前40~39世纪已为人类所了解并且用于酿酒。1857年，著名的法国生物学家Fasterur通过实验证明酒的发酵是由活酵母引起的;1897年，德国的Edward Bunchner又进一步证明了酵母对发酵的作用:J 从此人类对发酵的木质才开始有了认识。
从19世纪到20世纪的30年代末，微生物培养技术不断改进，促进了新的发酵产品的不断出现，如乳酸、乙酸、柠檬酸、淀粉酶和蛋自酶等也相继问世，但此时的发酵生产工艺简单、规模小、操作粗放，常常限制了口的产物的产量，也难以满足高品质的要求。
1929年Fleeting发现了青霉素,940年才开始少量生产，且生产技术水平低下。由于第
二次世界大战的需要，迫使人们对发酵技术进行深人的研究。人们开始改变固体表面培养手段，逐步发展液体深层培养技术。为了解决深层培养的技术要求，开发了机械搅拌式的、可通人无菌空气的密封式发酵罐。利用发酵罐技术，再配以离心，溶媒萃取和冷冻十燥等技术，使青银素的发酵效价得到了显著提高。随后链霉素、金霉素等抗生素的相继问世，抗生素工业迅速发展，带动微生物发酵工业进人了一个崭新的发展阶段，同时也带动了其他发酵产品的发展‘:随着生物化学技术的进步，人们对发酵机制及代谢调节做了深人研究，才有了20世纪50年代谷氨酸的产业化生产，以及随后采用营养缺陷及类似物杭性变异菌株进行赖氨酸、苏氨酸等生产。
20世纪六七十年代是现代微生物r业极其迅猛发展的年代，这个时期的特点是产品类型多，不但有初级代谢产物，如氨基酸、酶制剂、有机酸等，也有次级代谢产物，如抗生素、多糖等，还有微生物转化的苗体化合物的微生物加I_p在这一时期，发酵技术和工艺、优良生产菌种的选育技术有r较大的发展，新产品、新技术、新工艺、新设备不断出现，并得到了广泛应用、使发酵工业有了巨大变化。
1953年，Watson和Crick发现DNA双螺旋结构，为基因重组莫定了基础。到20世纪70年代在实验室中实现了基因转移，可以按照人们的意志把外来目的的基因克隆到容易大规模培养的微生物细胞中，并且通过微生物的大规模培养，以往只有动物或植物才能生产的物质，如胰岛素、干扰素、白细胞介素和多种细胞生长因子等均可利用基因工程菌进行大量生产。基因工程、蛋白质工程、细胞融合等技术为人们开创了构建新的具有各种生产能力、性能优良的物种的新天地，也为发酵工程产品增加了许多新的内容，使现代发酵产品的发酵水平大大提高。
近年来，由下代谢调控技术、连续发酵技术、高密度培养技术、固定化增殖细胞技术、反应器设计、发酵与分离偶联技术、在线检测技术、自控和计算机控制技术、产物的分离纯化等所需技术的发展，使发酵工程的操作达到了一个新的高度，使得发酵工业的自动化、连续化成为可能。
(二)常见的医药发酵产品
随着微生物学基础理论和实验技术的发展，微生物在药学领域中的应用越来越广泛。在医药生产中已广泛应用微生物发酵来制备各种药物，并且该领域形成了一门独立的微生物药物学科。
医学上常见的微生物发酵制品有抗生素、维生素、氨基酸、酶和酶抑制剂以及其他微生物制剂(如酵母片、乳酶生、肌昔,ATP、辅酶A等核酸类药、生物碱、右旋糖昔)等。这里将对抗生素、维生素、氨基酸等发酵产品作简单介绍。
1.抗生素
(1)抗生素的概念:抗生素是生物(包括微生物、植物和动物)在其生命活动过程中所产生的(或由其他方法获得的)，能在低微浓度下有选择性地抑制或影响他种生物机能的有机物质。临床治疗中所用的抗生素主要是由微生物产生的、对其他微生物及肿瘤细胞有选择性抑制作用的天然有机化合物。
(2)常见抗生素的种类:迄今为止已从自然界中发现和分离的抗生素已达10 000多种，实际用于生产和医疗上的抗生素约一百多种，连同各种半合成衍生物及盐类共约三百余种。抗生素种类繁多，性质复杂，用途又是多方面的，目前尚无较完善的系统分类方法。习惯上以产生来源、作用对象、作用机制、化学结构等进行分类。
2.氨基酸氨基酸是构成蛋白质的基本单位，亦是人体及动物生长代谢所需要的营养物质，具有重要的生理作用，在食品、饲料、医药、化工等工.业和农.业上也有广泛的用途。早期(1820年)氨基酸的制造是用蛋白质酸水解开始，1850年化学合成氨基酸研究成功1956年开始发酵生产谷氨酸，现在发酵法或酶法生产的氨基酸已有20多种，已经成为氨基酸生产的
主要方法。在各种氨基酸的生产中，以谷氨酸的发酵规模量最大，产量最大，赖氨酸次之。
日前在医药方面使用量最大的是氨基酸输液，给手术后或烧伤病人补充大量蛋白质营养，在医疗保健事业上起着重要作用。
3.维生素维生素是人和动物维持生命活动所必需的一类营养物质，也是一类重要的药物，它不仅可以有效地应用于维生素缺乏症的治疗和预防，还可与许多药物联合使用，增强药物的作用以及防止、减轻药物的副作用。
目前采用微生物发酵法生产的维生素有VC、VB12、VB2等，其中以VC的生产规模最大。
(1)维生素C:又称抗坏血酸，具有抗坏血病功能，可参与人体内多种代谢过程人体内必需的营养成分，已在医药、食品工业等方面获得广泛应用。
(2)维生素B2:又称核黄素，在自然界中多数以与蛋白质相结合的形式存在，因此又被称为核黄素蛋白。维生素B:是动物发育和许多微生物生长的必需因子，是临床上治疗眼角膜炎、白内障、结膜炎等的主要药物之一。
(3)维生素B12:是含钴的有机化合物，故又称为钻维生素或钻胺素，简称钻维素。维生素B12及其类似物参与机体内许多代谢反应，是维持机体正常生长的重要因子，是临床上治疗恶性贫血的首选药物。
第二节药物制剂的微生物学检测
一、药物体外杭菌试验
药物体外抗菌试验是在体外测定微生物对药物敏感程度的试验，是筛选抗菌药物或测试新药抗菌性能的重要环节，现已广泛地应用于科研、生产和临床，如抗菌药物的筛选、抗菌谱的测定、药物含量的测定、药物血浓度测定、指导临床用药的药敏试验等。抗菌试验包括抑菌试验和杀菌试验。抑菌即抑制微生物的生长繁殖，但不能杀死微生物，在药物除去后微生物又能生长;杀菌即能杀死微生物，当药物除去后，微生物也不能再生长繁殖。两者并非绝对，只是在一定条件下相对而言。常用的方法有琼脂扩散法和连续稀释法。
（一）琼脂扩散法
（1）纸片法
（2）挖沟法
（3）管碟法
（二）连续稀释法
试管稀释法在一系列试管中，用液体培养基对抗菌药物进行倍比稀释，获得药物浓度递减的系列试管，然后在练一管中加人定量的试验菌，经培养一定时间后，肉眼观察试管混浊情况，记录能抑制试验菌生长的最低抑菌浓度此种方法由于细菌与药液接触，比其他方法更为敏感，可作为筛选抗生素、无深色中草药制剂抗菌作用的研究。
2.平板稀释法平板法可同时测定大批试验菌株对同一药物的MIC民不受药物颜色及浑浊度的影响，适于中药制剂或评定新药的药效学(药物的体外抗菌活性测定)试验。其方法是先按连续稀释法配制药物，将不同系列浓度、定量的药物分别混人琼脂培养基，制成，批药物浓度呈系列递减的平板。然后将含有一定细胞数的试验菌液〔通常为i }"左右)以点种法接种于平板上，可以逐个点种，也可采用多点接种器接种;同时设无药空白平板对照。培养后可测定各菌对该药的MIC。
二、药物卫生微生物检验
根据给药途径及使用要求不同，可将药物制剂分为两种类型，即规定灭菌制剑和非规定灭菌制剂。灭菌制剂(如各种注射剂、输液剂、供角膜创伤及手术用的眼药制剂等)需要直接进人血液、肌肉、皮下组织或接触创伤、溃疡等部位发挥作用，必须保证不含活的微生物，否则将导致严重后果。为此.规定灭菌制剂制成后须进行严格的无菌检查，证明绝对无菌才为合格。非规定灭菌制剂包括门服药、外用药及其辅料等，虽不必要求达到无菌状态，但为保证质量和使用安全，对其染菌数量和种类也有限制。
药物卫生微生物检验项目主要包括灭菌制剂的无菌检验和非规定灭菌制剂的微生
物限度检查。
(一)灭菌制剂的无菌检验
无菌检验的基术原理是以无菌操作方法将被检药品分别接种于适合需氧菌、厌氧菌、真菌生长的液体培养基中，置于适宜温度下培养一定时间，观察有无微生物生长，以判断药品是否合格。因此，灭菌制剂的无菌检验内容就是需氧菌、厌氧菌及真菌的培养检查。
1.无菌检验的基木原则
(1}严格进行无菌操作:尤菌检验的全部过程都必须严格遵守无菌操作，防止因微生物污染而影响检验结果。
(2)正确进行样品采集:无菌检验是根据对整体中部分样品的检查结果，来推断整体的无菌或染菌情况。在对一批药品做无菌检验时，取样数量越少，检出染菌的几率越小;取样越多，检出染菌的几率越大，检查结果越能反应该批药物的真实情况。因此，无菌检验时采样数量和比例必须按药典的规定进行。
2.灭菌制剂的无菌检验方法
(1)一般灭菌制剂的无菌检验:通常采用直接接种法。若被检品是液体，可直接接种于培养基内;若被检品是固体粉剂或冻干制剂，则需先用无菌生理盐水溶解，或制成均匀悬液，
再接种于培养基内。各种培养基种类、数量及培养温度和时间。被检品无菌检验的同时，还须做相应的阴、阳性培养对照试验。我国药典规定，以金黄色葡萄球菌CMCC ( B) 26003、生抱梭状芽胞杆菌CMCC ( B) 64941、白色假丝酵母菌CMCC(F)98001分别作为需氧菌、厌氧菌及真菌培养的对照菌。
(2)油剂的无菌检验:油剂药物与液体培养基不能混溶，常因漂浮于培养基表面而影响试验结果。检验这类药物时，应先在培养基中加人表面活性剂(如吐温80)，使药物能够均匀分布于培养基中，以利于微生物的生长。若药物的粘稠度过大，可先用灭菌植物油或灭菌液体石蜡稀释，再接种于含表面活性剂的培养基中。
(3)抗菌药物及含防腐机剂药物的无菌检验:抗菌药物是指本身为抗菌剂(如抗生素、磺胺药等)或其中含有部分抗菌剂的药物。由于抗菌剂、防腐剂有杀菌、抑菌作用，可影响无菌检验结果的正确判断，故接种前必须采取必要方法使抗菌剂、防腐剂消除或失效。常用方法有:
1)灭活法:在培养基中加入合适的灭活剂，此灭活剂本身以及与抗菌药物作用后的产物对细菌和霉菌没有毒性。
2)微孔滤膜过滤法:将供试药物通过孔径为0. 22~0. 45μm的灭菌微孔滤膜，用生理盐水洗涤抽滤滤膜几次，以除去抗菌剂或防腐剂;然后将滤膜剪成若干片，在严格的无菌操作条件下，放人培养基中进行检验。
3.无菌检查结果判定阴性对照应无菌生长，说明培养基本身是无菌的;阳性对照管试验必须长菌，说明应用的对照菌在该试验条件下能正常生长，其试验结果是准确、可靠的。
当阳性对照管显浑浊并确有菌生长，阴性对照管呈阴性时，可根据待检品的结果进
行判定。
如需氧菌、仄氧菌及真菌培养基为澄清均应判为供试品合格。
如需氧菌、厌氧菌及真菌培养基管中任何1管显浑浊并确证有菌生长，应重新取2倍量供试品，分别依法复试，除阳性对照管外，其他各管均不得有菌生长，否则应判为待检试品不合格。
如为抗生素类药物，无论细菌或霉菌，培养时间均为7天。放射性药物则为8~14
天，无菌生长才为合格。
(二)非规定灭菌制剂的微生物限度检查
非规定灭菌制剂一般不要求绝对无菌，允许一定限量的微生物存在，但同时规定不得有病原菌存在。非规定灭菌制剂的微生物限度检查包括数量和种类的限度检查，其检查项目是:①染菌量检查:包括细菌数、霉菌数及酵母菌数测定，以检查这几类微生物对药品的污染程度;②控制菌检查:我国药典规定控制菌检查包括大肠埃希菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、破伤风梭菌检查和活蜡的检验。不同的药物，其检查的控制菌种类有所不同。
1. 微生物限度检查的基本原则
(1)为便检验结果具有代表性.被检药物的采样应有一定数量。一般每个批号的药物至少随机抽样2瓶(盒)以上。从各瓶〔盒)被检药物中的采样量不得少于10g或10ml,蜜丸应采4丸以上共10g贵重或微量包装的药物采样量可酌减。
(2)药物在检验前，应保持原包装状态燥处，不得开启，以免污染。药物应放置阴凉干防止微生物繁殖而影响检验结果。
(3)检验的全部过程应严格无菌操作。被检药物一旦稀释后，必须在l~2小时内操作完毕，以防微生物继续繁殖或死亡。
(4)为排除药物中所含防腐剂或抑菌成分对试验结果的干扰，应同时利用已知阳性对照菌设立阳性对照。
2.染菌数量的检查即分别测定单位重量或体积(克或毫升)的被检药物中所含活的细菌总
数(实际是活的需氧菌数量)、霉菌和酵母菌总数。一般而言，染菌量越多，药物受致病菌污染的可能性越大。
〔1)细菌、霉菌与酵母菌总数的测定方法:均采用倾注平皿培养计数法，即取一定量的被检药物、将其稀释成不同浓度的稀释液(如1 : 10、1: 100 ,1:1000 . . . . . .)，吸取不同稀释度的药液各1ml，分别注人无菌平皿中(每一浓度的稀释液做2~3个平皿)，然后倾注适量培养基，混匀凝固后，放适宜温度的培养箱中培养至规定时间(细菌总数测定放35℃培养48小时.、霉菌与酵母菌总数测定放25℃一28℃培养72小时)。
检验所用培养基应适合待测微生物的生长繁殖。《中国药典》(现行版)规定:营养琼脂培养基用于细菌计数，玫瑰红钠琼脂培养基用于霉菌计数，酵母浸出粉陈葡萄糖琼脂培养基用于酵母菌计数。合剂用玫瑰红钠琼脂培养基与酵母浸出粉脉葡萄糖琼脂培养基，分别测定霉菌、酵母菌菌落，合并计数。液体制剂用玫瑰红钠琼脂培养基，同时计霉菌菌落数及酵母菌菌落数。
(2)菌落总数测定结果及计数方法:经过适宜条件培养后统计培养基上生长的菌落数。一般选取菌落数在30~300个之间(霉菌菌落计数一般选取菌落数在5~50个之间)的平板进行计数，然后乘以稀释倍数即得每克或每毫升待检药物中的菌落总数，如超过规定的限量则认为不合格。
为了确保药品在整个生产、保存和使用过程中的质量，制定一个合理的药品微生物
限度标准是十分重要的。《中国药典》(现行版)按不同剂型制定了药品的微生物限度标准。
3.控制菌检查在药品中不能检出的控制菌根据不同类型的药物制剂，要求不得检出的控制菌的种类也不同。
控制菌检验的原则:控制菌的形态和培养特征的观察是鉴别的基本要求，对生化反应、血清学反应、动物毒力试验等项目的要求因菌而异，各有其侧重点。
控制菌检验的基本程序:根据各种控制菌的生物学特性来进行鉴定，其检查的基本程序为，药物的准备或预处理*增菌培养*分离培养、染色镜检一生化试验、血清学试验、动物试验等。控制菌鉴定一卫生评价。
（1）大肠埃希菌的检验:大肠埃希菌是口服药品的常规必检项目之一。药品中的大肠埃希菌来源于人和温血动物的粪便。凡由检品中检出大肠埃希菌时，表明该药品可能被粪便污染，患者服用后，有被粪便中可能存在的其他肠道致病菌和寄生虫卵等病原体感染的危险。因此，口服药品中不得检出大肠埃希菌。
1)增菌培养:目的是使被检药物中的大肠埃希菌增殖，从而避免漏检。方法是取适量被检药液，接种于胆盐乳糖增菌液中进行培养。
2)分离培养:目的是从混有杂菌的增菌培养物中分离出大肠埃希菌。方法是将增菌培养物接种于肠道选择性平板上，经培养后，大肠埃希菌呈乳糖发酵型有色菌落。
3)染色镜检:挑叮疑菌落作革兰染色镜检，大肠埃希菌应呈革兰阴性短小无芽胞杆菌。
4)生化反应;主要目的是与产气肠杆菌区别，因为两者的形态、染色性、培养特征等非常相似，但产气肠杆菌广泛分布于自然界，无P生学意义。利用IMViG试验可将两者这别。大肠埃希菌的主要鉴定依据是:①革兰阴性短小无芽胞杆菌;②在麦康凯琼脂培养菌落为紫黑色，并有金属光泽;③分解乳糖产酸产气，IMViC试验结果为++——
(2)沙门菌的检验:沙门菌可引起伤寒、副伤寒、急性肠胃炎及败血症等多种疾病。该群细菌主要寄生在人和动物肠道内，因此以动物脏器为原料制成的药物，被污染的几率较高。药典规定口服脏器药物除不得检出大肠埃希菌外，亦不得检出沙门菌。
1)增菌培养:沙门菌的增菌培养通常采用四硫磺酸钠增菌液。
2)分离培养:将增菌培养物接种于SS琼脂平板上，经培养后，沙门菌均成无色(或半透明)细小菌落，产H2S的沙门菌菌落中心呈黑褐色。
3)染色镜检:应为革兰阴性短小无芽胞杆菌。
4）生化特性
5)血清学鉴定:取被检细菌与沙门菌A~F多价O诊断血清作玻片凝集实验，若发生凝集则可判为沙门菌。
沙门菌的主要鉴定依据为:①革兰阴性短小无芽胞杆菌;②SS琼脂平板上的菌落为无色、透明或半透明，或中心呈黑褐色;③生化反应结果应符合药典规定④可与沙门菌A~F多价O 诊断血清发生凝集。
(3)铜绿假单胞菌的检验:铜绿假单胞菌是条件致病菌，特别在大面积烧伤、烫伤患者，眼科疾病和其他外伤后，常因感染铜绿假单胞菌后病情加重，造成患者伤处化脓，严重的可引起败血症，眼角膜溃疡甚至失明。因此，一般眼科制剂和外伤用药中不得检出铜绿假单胞菌。
1)增菌培养:将待检药物接种于肉汤培养基中进行增菌培养。铜绿假单胞菌繁殖，可在液体表面形成菌膜。
2)分离培养:挑取菌膜接种于十六烷三甲基嗅化铵琼脂平板上作分离培养。
3)染色镜检:应为革兰阴性短小无芽胞杆菌。
4)生化反应:以氧化酶试验、绿脓菌素试验、硝酸盐还原试验、明胶液化试验、42℃生长试验等加以鉴定。
铜绿假单胞菌的主要鉴定依据为:①革兰阴性短小无芽胞杆菌;②十六烷三甲基溴化铵琼脂平板上铜绿假单胞菌呈扁平湿润·边缘不整齐·绿色带荧光的菌落。因产生水溶性绿色色素，故扩散至培养基中使之呈绿色;③氧化酶试验、绿脓菌索试验、硝酸盐还原试验、明胶液化试验、42℃生长试验均呈阳性。
(4)金黄色葡萄球菌的检验:金黄色葡萄球菌是葡萄球菌属中致病力最强的一种菌，若经皮肤、粘膜感染人体，可引起人体局部化脓感染，严重者可导致败血症。目前规定，凡外用药和眼科制剂不得检出金黄色葡萄球菌。
1)增菌培养:采用亚啼酸钠肉汤培养基作增菌培养。
2)分离培养:取增菌培养物接种于卵黄高盐琼脂平板或甘露醇高盐琼脂平板或血液琼脂平板。
3}染色镜检:为革共阳性葡萄状排列的球菌。
4)生化反应:主要用血浆凝固酶试验加以鉴定。
金黄色葡萄球菌的主要鉴定依据是:①革兰阳性葡萄球菌;②血液琼脂平板上菌落呈金黄色，周围有透明溶血环。在高盐培养基上能生长并形成金黄色菌落;③血浆凝固酶试验为阳性。
(5)破伤风梭菌的检验:破伤风梭菌广泛分布于自然界，特别是土壤中。若经伤口感染人体，可引起破伤风。以植物的根、茎为原料的药品，常可受到破伤风梭菌的污染。因此，用于深部组织、创伤和溃疡面的外用制剂不得检出破伤风梭菌。
1)增菌培养:破伤风梭菌是专性厌氧菌，增菌时。通常将被检药物加人葡萄糖疱肉培养基中，置于无氧环境中培养。
2)分离培养:将L述培养物接种到血液琼脂平板上，进行厌氧培养。
3)染色镜检:应为革共阳性杆菌，菌体顶端有芽胞。
4)毒力试验:将分离出的可疑菌制成菌液，于小自鼠皮下注射0.3~0.5ml,6~48小时内观察动物反应。若小白鼠出现后腿强直痉挛或全身抽搐、尾部竖起并强直等症状，则毒力试验为阳性。为证实小白鼠的症状是由破伤风外毒素所致，应同时进行破伤风抗毒素保护试验。即取适当稀释的破伤风抗毒素和待检菌液各0.3~0.5ml注射另一小白鼠，若小白鼠末出现上述症状，则可确认被检药物中检出的是破伤风杆菌。
破伤风梭菌的主贾鉴定依据是:①革兰阳性细长杆菌，芽胞位于菌体顶端，形似鼓槌状;②疱肉墙养基中生长后，消化肉渣变黑;血液琼脂平板厌氧培养后形成菌落扁平、呈羽毛状，周围有透明落血环;③毒力试验为阳性。
三、其他微生物学检查
〔一)热原测定
药物中的热原主要是由微生物产生的、能引起人体和恒温动物体温异常升高的代谢产物。在注射剂的制造过程中，如果原料不洁、操作不慎，就可能导致出现热原污染。而热原物质耐高温，普通高温、高压灭菌法不能彻底将其破坏，因此被污染的注射剂虽经灭菌，但注人体内仍可引起热原反应，约在半小时后，使人体产生发冷、寒战、体温升高，并有恶心呕吐等不良反应，严重者出现昏迷、虚脱甚至有生命危险。
1.家兔试验法是将一定剂量的供试品，由静脉注人家兔体内，在规定时间内观察家兔体温升高情况，以判定供试品所含热原的限度是否符合规定的一种方法。该方法需要一定的试验条件如动物房、合格的供试用家兔，且操作时间较长，诸多因素对家兔体温波动有影响。具体检查方法详见《中国药典》现行版。
2.鲎试验法鳖试验法是20世纪70年代创建的一项用于检测微量内毒素的技术方法，由于制药工业中涉及的热原反应主要是内毒素造成的，故该技术可作为注射剂热原检查的代替方法。与家兔试验法相比，鲎试验法有快速、灵敏、重现性好、简便易作等优点，并更利于热原检查标准化。
鲎试验法的原理是:堂的血变形细胞中含有凝固酶原和凝固蛋白原两种物质，前者经内毒素激活可转化为具有活性的凝固酶:在凝固酶的作用下、凝固蛋白原转化成为凝固蛋白，凝固蛋白通过交联作用相互聚合形成牢固的凝胶。
鲎试试验法操作方法，取0. 1 ml鳖试剂(含有凝固酶原和凝固蛋白原)，与0. 1 ml被检药液混合于lOmm x75mm试管中，置37℃水浴60分钟。取出试管缓缓倒转1800,管内凝胶不变形、不从管壁滑脱者为阳性。
(二)抗生素效价的微生物学测定
1.抗生素的效价与单位效价是在同一条件下抗生素检品的抗菌活性与标准品的抗菌活性之间的比值，常用百分数表示。
单位(U)是衡量抗生素有效成分的具体尺度，是效价的表示方法。抗生素单位的表示方法有四种:
（1）重量单位:以抗生素的生物活性部分的重量作为单位，1mg=1U，lmg=1000U。对同一种玩生素的不同盐类而言，只要单位相同，即使盐类重量不同，它们的抗生素有效含量是相同的。
(2)类似重量单位:以抗生素盐类纯品的重量1 mg为1U。如纯金霉素盐酸盐及四环素盐酸盐(包括无活性的盐酸根在内)，1μg为1U。
(3)重量折算单位:以与原始的活性单位相当的抗生素实际重量为1单位加以折算而得的单位。如青霉素的单位，最初是以在5Oml肉汤培养基内能完全抑制金黄色葡萄球菌生长的最小青霉素量为1U。青霉素纯化后，这一量相当于青霉素G钠盐纯品0. 5988μg，因而国际上一致将0. 5988μg定为1U，则l mg = I 67O U 。
(4)特定单位:属特定的抗生素样品的某一重量作为lU。如特定的一批杆菌肽1 mg=55U。上iu色一~~~口
2.抗生素效价的微生物学测定法，抗生素效价的测定方法有物理方法、化学方法、微生物学方法等。由于微生物学方法是以抗生素的抑菌、杀菌能力来衡量其效价(其原理和临床应用的要求一致，能直接反映出抗生素的疗效) 且灵敏度较高、需用供试品量较小，因此被广泛应用于抗生素生产及药检部门。
微生物学测定方法有稀释法、比浊法、琼脂扩散法等，而扩散法中的管碟法是国际通用的方法，也是《中国药典》推荐的方法。
管碟法的原理是:抗生素可扩散渗透至培养基内，对培养基中的试验菌产生抑菌或杀菌作用，并形成一定大小的抑菌圈。比较标准品和待检品的抑菌圈大小即可计算出被检抗生素溶液的效价。常用二剂量法计算效价。
二剂量法是利用抗生素浓度的对数值与抑菌圈直径成直线关系的原理，将抗生素的标准品和待检品分别稀释成高、低两种剂量(2:I或4:1)，在同一平板上进行试验后，根据它们所产生的抑菌圈大小。按下述公式即可计算出待检品的效价。取含菌层的双层平板培养基，每个平板表面放置4个小钢管，管内分别放人检品高、低剂量和标准品高、低剂量溶液。先测量出四点的抑菌圈直径，按下列公式计算出供试品的效价。
(1)求出W和V:
W=(SH+UH)一(SL+UL)
V=(UH+UL)一(SH + SL)
UH .供试品高剂量之抑菌圈直径
UL.:供试品低剂量之抑菌圈直径
SH:标准品高剂量之抑菌圈直径
SL:标准品低剂量之抑菌圈直径
(2)求出6:
θ=D·antilog( IV/w})
θ:供试品和标准品的效价比
D:标准品高剂量与供试品高剂量之比，一般为1
I：高低剂量之比的对数，
〔3)求出Pr
Pr=Ar xθ
Pr;供试品实际单位数
Ar:供试品标示量或估计单位
医学微生物学考试试卷（A） (临床医学本科、影像医学本科、中医药学本科、实验技术本科、预防医学本科) 班级学号姓名 注意事项： 1．在试卷上写上姓名、班级。在答题卡上填上学号，将相应的数字涂黑，并写上班级、姓名和试卷类型（A卷/B卷）。交卷时必须将答题卡与试卷一起上交，否则以零分计算！ 2．本份试卷由基础知识题和病例分析题组成，共150个选择题，请按题目要求，在备选答案中选择一个最佳答案，并在答题卡上将相应的字母涂黑，做在试卷上无效。 3．考试时请严格遵守考场纪律，原则上不允许上厕所。 第一部分、Ａ型选择题 （由一题干和５个备选答案组成，请选出一个最佳答案。共90个选择题） 1.哪种疾病的病原体属于非细胞型微生物： A.疯牛病 B.梅毒 C.结核病 D.沙眼 E.体癣 2.细菌属于原核细胞型微生物的主要依据是: A.单细胞 B.二分裂方式繁殖 C.对抗生素敏感 D.有由肽聚糖组成的细胞壁 E.仅有原始核结构，无核膜 3.革兰阳性菌细胞壁： A.肽聚糖含量少 B.缺乏五肽交联桥 C.对溶菌酶敏感 D.所含脂多糖与致病性有关 E.有蛋白糖脂外膜 4.青霉素杀菌机制是: A.干扰细胞壁的合成 B.与核糖体50S亚基结合，干扰蛋白质合成 C.影响核酸复制 D.与核糖体30S亚基结合，干扰蛋白质合成 E.损伤细胞膜 5.有关“细菌鞭毛”的叙述，哪一项是错误的: A.与细菌的运动能力有关 B.许多革兰阳性菌和阴性菌均有鞭毛 C.在普通光学显微镜下不能直接观察到 D.可用于细菌的鉴定 E.将细菌接种在固体培养中有助于鉴别细菌有无鞭毛(半固体) 6.有关“芽胞”的叙述，错误的是: A.革兰阳性菌和阴性菌均可产生（都是阳性） B.不直接引起疾病 C.对热有强大的抵抗力 D.代谢不活跃 E.通常在细菌处于不利环境下形成 7.用普通光学显微镜油镜观察细菌形态时，总放大倍数为: A.10倍 B.100倍 C.400倍 D.900～1000倍 E.10000倍 8.脑膜炎奈瑟菌和肺炎链球菌经结晶紫初染、碘液媒染、95%乙醇脱色后，菌体分别呈: A.红色和紫色 B.紫色和紫色 C.紫色和无色 D.无色和无色 E.无色和紫色 9.革兰染色法是最常用的一种染色法，其实际意义不包括:
药物微生物 一.药源微生物 药物的来源无外乎化学合成、生物合成，以及化学半合成。 微生物作为天然药物的资源已经完全显露出它的优势： 首先，微生物种类繁多，并且生活环境条件复杂多样，从而使得微生物在生理代谢上和遗传上存在着其他生物类群无法比拟的多多样性，其生活过程中产生的代谢产物也因此多种多样，为我们寻找药物提供了充分的可能性。 其次，微生物生长快速，并且可以进行大规模的工业化生产。 第三，微生物的遗传背景简单，易于利用各种遗传突变手段，改变微生物的代谢途径和调控方式，使得各种微量的药用成分能够大量合成，开发价廉物美的药物 第四，药物的疗效包括两个方面，一是治疗疾病的效果，二是药物的毒性大小。 1.微生物的多样性 细菌真菌藻类植物动物 2.药源微生物 （1）放射菌（链霉菌庆大霉素） （2）细菌 （3）真菌 二.药用微生物 药用微生物通常是指传统中药（汉方药）中的大型药用真菌，如灵芝、虫草等。 三.基因工程菌 基因工程微生物的应用主要要求是：一个适宜外源基因操作的载体系统和一个适宜外源基因活性产物表达的宿主系统。 第二节微生物药物 在医药用微生物中，最重要的是药源微生物。一方面是由于大量的药物来自微生物的天然产物，另一方面，即使是药用微生物，其有效部位也是各种微生物的代谢产物。 一．初级代谢和次级代谢
从表中可以得出次级代谢产物合成的特点：1.次级代谢产物多在细胞生长停止以后合成；2.初级代谢产物可直接或修饰后成为次级代谢产物合成的前体；3.合成反应常包括聚合作用和修饰；4.次级代谢产物分泌胞外；5.合成反应受初级代谢影响，但控制较为间接、松弛，主要受次级代谢自身系统控制。 次级代谢产物可能的合成理由是：1.食物储备；2.拮抗作用；3.次级代谢过程的重要性；4.诱导产生菌的细胞分化；5.诱导其他生物的细胞分化。 将次级代谢系统按如下方式进行分类（1）I 级反应 在这一步反应中，初级代谢物被转化为次级代谢合成的中间体。 这类反应根据其相关的初级代谢途径可以进一步划分，如氨基酸的合成和代谢、核苷酸的代谢、糖的转化或辅酶的合成。（2）II 级反应 这是一类缩合反应，相近的小分子单元被聚合成大分子（1）乙酸-丙二酸单元的缩合（2）氨基酸的缩合 二.次要组分 通常是主要产物的同系物，但是在有些列子中它们会呈现不同的结构类型。 三.微生物药物的定义 微生物药物通常来源于微生物的次级代谢产物，但并不是所有的微生物次级代谢产物都可以作为药物。 抗生素是指能够以低浓度仰制其他微生物生长的低分子量的微生物代谢物。 低分子量的微生物代谢物：指的是在大多数情况下抗生素的相对分子质量为几千以内，而酶以及其他复杂蛋白质分子尽管可能具有抗微生物活性，却不认为是抗生素。 人们所说的抗生素还包括由天然产物经化学修饰后的产物，即半合成抗生素 一个狭义的微生物药物的定义为：微生物在其生命活动过程中产生的能以及低浓度有选择地抑制或影响其他生物机能的低分子量的代谢物。 微生物药物的广义定义为：能以低浓度有选择的抑制或影响其他生物机能的微生物或微生物的代谢。 四.微生物药物的几个相关基本概念 （1）最小抑制浓度 （MIC ）这是药物活性测定常用的参数。 （2）抑制谱 药物能够选择性抑制/影响（即MIC 值较低）的生物或生物分子的范围。抗菌药物的抑制谱是指选择性抑制微生物的范围，抗肿瘤药物的抑制谱是指选择性抑制肿瘤细胞的范围等， （3）药物活性 是指药物对病原体作用的强弱 （4）毒性 药物对宿主生物细胞的抑制或杀死作用，通常半致死剂量（50LD ）表示。 （5）化疗指数 判断一种药物的安全性和有效性的综合指标。 ((= (C CI T 明显疗效的最低给药剂量） 化疗指数）治疗对象对药物不呈明显毒性反应的最大耐受剂量） （6）抑制曲线 药物对作用对象的抑制活性随时间变化的曲线，如抑菌曲线。 （7）药物敏感性 药物对其所作用的对象的抑制活性的高低。 （8）药物的相互作用 不同药物同时存在时，将会对各自的活性产生相互的影响。 五.微生物药物的命名 一般有以下几种命名药物的方法： （1） 根据产生药物的微生物分类命名 如青霉素 链霉素等。 （2） 根据结构类型的特征命名 常常是一族药物，如四环素类药物、氯霉素药物等。 （3） 根据地名或纪念意义而命名 如井冈霉素、土霉素、制霉菌素等。
农业知识综合三（食品加工与安全）大纲 《食品卫生学》考试大纲 总体要求： 考生应全面系统的了解食品卫生学基本概念、生物性污染、化学性污染、动植物食品的安全与卫生加工过程中的食品安全问题，食品生产过程中食品安全的管理与控制措施等知识。了解掌握造成食品安全问题的主要污染物及其来源和途径，了解有关污染可能造成的危害，掌握从原料验收到产品加工过程中减少和控制各种污染物的途径与方法。 具体要求： 一、掌握食品安全、食品卫生及食品安全性评价的定义、食品安全与卫生学研究的主要内容、国内外主要的食品卫生问题。熟悉食品中可能存在的有害因素的种类，有害因素的分类。 二、掌握评价食品卫生质量的细菌指标及其意义；食品腐败变质的原因及卫生学意义；熟悉霉菌的生长繁殖及产毒条件，霉菌毒素的结构、性质和毒性。 三、掌握食品中有机磷、拟除虫菊酯类农药的毒性；滥用氮肥、抗生素对人体健康可能的危害。 四、掌握汞、镉、铅、砷污染食品的来源及危害，影响金属毒物毒作用强度的因素。 五、掌握N-亚硝基化合物种类、来源、体内外合成、致癌性；熟悉苯并（a）芘对食物的污染、毒性，了解其它有机污染物对人体健康的影响。 教学重点：N-亚硝基化合物种类、来源、体内外合成、致癌性，苯并（a）芘对食物的污染、毒性。 六、掌握食品添加剂的定义、分类及使用原则。 七、掌握各类食品及加工过程中存在的主要卫生问题及控制措施。 八、掌握食物中毒的定义、分类，沙门氏菌、葡萄球菌、副溶血弧菌、肉毒梭菌食物中毒的特点，组胺、毒蕈、亚硝酸盐食物中毒机理。 九、掌握HACCP、GMP和 SSOP的概念。掌握HACCP计划的制定包括哪些方面、制
定HACCP体系的基本原则。 《食品安全管理与法规》考试大纲 一、食品安全性评价 1、掌握食品安全性与安全性评价的概念。 2、熟悉食品安全性评价主要内容。 3、了解国内外食品安全现状、研究热点及食品安全管理的主要对策。 4、熟悉食品安全性毒理学评价程序的内容。 5、了解食品安全性毒理学评价程序 6、熟悉保健食品的概念与特征、保健食品的基本要求。 7、了解保健食品安全性毒理学评价程序。 8、掌握转基因食品的安全性问题及安全性评价。 9、熟悉主要的转基因食品。 10、了解转基因食品的管理。 二、食品安全性管理 1、掌握无公害食品、绿色食品和有机食品的管理。 2、掌握食品质量安全市场准入制度的内容。 3、熟悉GMP的主要内容。 4、掌握HACCP体系的定义、基本原理、涉及的术语及建立步骤。 5、了解ISO 9000系列标准体系。 三、食品法规与标准 1、了解食品安全的概念、涉及的领域、食品法律和法规的研究内容。 2、了解标准与标准化的基本概念及方法原理。 3、熟悉食品标准的分类和制定标准的原则和程序。 4、掌握GB/T 1.1-2000 的结构、层次、格式与食品标准的编制 5、了解我国食品标准体系的构成。 6、掌握采用国际标准的原则和采用国际标准的程度和编写方法。 7、了解食品企业标准体系的概念和特征，企业标准体系管理的建立和评价。 8、掌握食品企业标准体系中主要标准的制定方法和步骤。 9、掌握我国食品卫生法规体系及制定原则和依据。 10、熟悉食品标准法规的实施与监督管理。 11、了解食品卫生法与其他相关法律基本内容以及卫生许可证的要求。 12、掌握保健食品、新资源食品、绿色食品、有机食品等规定的内容。
医学微生物学练习题 一名词解释 微生物病原微生物消毒灭菌无菌无菌操作正常菌群菌群失调症菌血症毒血症败血症脓毒血症病毒干扰素院内感染人工自动免疫垂直传播 二选择题（单选） 1 下述有关微生物的描述正确的是：E A 体形小于1mm的生物 B 单细胞生物 C 不具备细胞结构的微生物 D 体形小于1um的生物 E 以上均是错误的 2 属于非细胞型微生物的是：D A 衣原体 B 支原体 C 放线菌 D 病毒 E 真菌 3 细菌属于原核细胞型微生物的主要依据是E A 单细胞，结构简单 B 二分裂方式繁殖 C 有细胞壁 D 对抗生素敏感 E 原始核，细胞器不完善 4 下列不属于原核细胞型微生物的是：E A 细菌 B 衣原体 C 支原体 D 放线菌 E 病毒 5 细菌细胞壁的主要成分是：E
A 磷壁酸 B 外膜 C 脂多糖 D 蛋白质 E 粘肽 6 细菌细胞膜的功能不包括：E A 物质交换 B 呼吸作用 C 合成和分泌作用 D 物质转运 E 维持细菌的外形 7 G+菌细胞壁的特点是：C A 较疏松 B 无磷壁酸 C 肽聚糖含量多 D 有脂多糖 E 有脂蛋白 8 具有抗吞噬作用的细菌特殊结构为：C A 芽孢B细胞壁 C 荚膜 D 鞭毛 E 细胞膜 9 青霉素类抗生素杀菌机理为：E A 破坏磷壁酸 B 损伤细胞膜 C 干扰核糖体上菌体蛋白质的合成 D 破坏肽聚糖骨架 E 抑制四肽侧链与甘氨酸交联桥之间连接 10 细菌缺乏下列哪种结构时，在一定条件下仍可存活？A A 细胞壁 B 细胞膜 C 细胞质 D 核质 E 以上均可 11 有关质粒的描述，下列哪项错误？D A 为染色体外的遗传物质 B 具有自我复制的特点
绪论 一、填空题 1、微生物学作为一门学科，是从显微镜开始的，其发展经历的三个时期是、、和。 2、微生物学的奠基人是。 二、判断是非 1、巴斯德是一位著名的微生物学家，他第一个在显微镜下看到微生物的个体形态。 2、因为显微镜稀少，列文虎克逝世后微生物学未能迅速发展。 ( ) 3、病原菌学说最初是由科学家柯赫提出来的。 ( ) 三、名词解释 1、微生物：指大量的、极其多样的、不借助显微镜看不见的微小生物类群的总称。 2、微生物学：是研究微生物在一定条件下的形态结构、生理生化、遗传变异以及微生物的进化、分类、生态等生命活动规律及其 应用的一门学科。 四、选择题 1、微生物的研究从形态描述推进到生理学研究阶段，以哪两位为代表的科学家揭露了微生物是造成腐败发酵和人畜疾病的原因。 A、巴斯德、列文虎克 B、柯赫、列文虎克 C、巴斯德、柯赫 D、巴斯德、弗莱明 2、第一个发现微生物的人是。 A、列文虎克 B、柯赫 C、巴斯德 D、斯坦利 3、菌种的分离、培养、接种、染色等研究微生物的技术的发明者是。 A、巴斯德 B、柯赫 C、吕文虎克 D、别依林克 4、自然发生说的理论认为。 A、微生物来自无生命的物质 B、大动物中发现有系统发育 C、人类是从类人猿进化的 D、病毒是从细菌退化的。 5、巴斯德采用曲颈瓶试验来。 A、驳斥自然发生说 B、证明微生物致病 C、认识到微生物的化学结构 D、提出细菌和原生动物分类系统。 五、问答题 1、什么是微生物？它包括那些种类？ 2、微生物的一般特性是什么？ 3、微生物学发展的各个时期有哪些主要成就？ 第一章细菌 第一节细菌的形态与结构 一、名词解释 l、细菌2、中介体3、质粒4、异染颗粒5、荚膜6、鞭毛7、芽胞8、L型细菌 二、填空题 1．细菌个体微小，通常以——作为测量单位。 2．细菌的基本形态可分为——、——和——三种。 3．菌体有一个弯曲的叫——、有多个弯曲叫——。 4．细菌的基本结构从外向内分别为——、——、——、和——。细菌的特殊结构有——、——和——。 5．细菌细胞壁共有的成分是——，G＋菌细胞壁特有的成分是——，G—菌细胞壁特有——的成分是——、——和——多层结构组成，其——是G—菌的内毒素的毒性基团。 6．细胞膜的主要功能有——、——、——、——和——。 7．细菌的遗传物质有——和——。
一、名解 1. Continuous cell line 连续细胞系 2. Plant protoplast 植物原生质体 3. Snp 单核苷酸多态性 4. CDNA library cDNA文库 5. Intron 内含子 6. Apoptosis 细胞凋亡 7. Meiosis 减数分裂 8. RNA interference RNA干扰 9. PD-1 程序性死亡受体1 10. Gluconeogenesis 糖异生 11. Cytoskeleton 细胞骨架 12. Extracellular matrix 细胞外基质 13. Oncogene 癌基因 14. Mitochondria 线粒体 15. Semiconservative replication 半保留复制 16. Epitope 表位；抗原决定部位；抗原决定基 17. Metastasis 转移灶 18. Pseudogene 假基因；假性基因 19. Transposon 转座子 20. Endocytosis 内吞作用 二、简答 1.制备目的基因的方法和过程。 2.影响mRNA稳定性的因素 3.顺式作用原件和反式作用因子是如何影响基因表达的。 4.G蛋白偶联受体分类和作用机制 5.同源重组的分子机制 6.简述人类基因组计划的意义。 7.细胞内微管的功能有哪些? 8.简述细胞凋亡的途径有哪些? 9.密码子的偏好性。 10.线粒体氧化磷酸化的过程。 三、论述 1.原核生物、真核生物的转录过程以及转录后的加工过程。 2.什么是克隆载体和表达载体？为什么基因工程中既需要克隆载体也需要表达载体？他们各需要哪些功能元件？ 3.高通量测序和生物信息学技术在肿瘤诊断及个性化治疗过程中的应用前景？ 4.结合信号假说，蛋白分选信号介绍糖基化分泌蛋白翻译后转运的过程。
医学微生物 1.医学微生物包括细菌学、病毒学和其他微生物三大部分 2.原核细胞型微生物包括细菌、支原体、立克次体、衣原体、螺旋体、放线菌共六类微生物。。 3.病毒必须在活细胞才能增殖，为非细胞型微生物。 4.正常菌群对人体具有生物拮抗、营养作用、免疫作用和抗衰老作用等作用. 5.测量细菌大小的单位是微米/μm。 6.细菌的基本形态有球菌、杆菌和螺形菌。 7.细菌细胞的遗传物质有染色体和质粒两种，其中质粒不是细菌生命活动所必需的。 8.细菌的菌毛有普通菌毛和性菌毛两种，前者与细菌粘附有关，后者具有传递遗传物质作用。 9.经革兰染液染色后，被染成紫色的是革兰阳性菌，被染成红色的是革兰阴性菌。 10.细菌的特殊结构有荚膜、鞭毛、菌毛和芽胞。 11.革兰阴性菌细胞壁的脂多糖包括脂质A、核心多糖和特异多糖3种成分。 12.革兰阴性菌细胞壁的肽聚糖是由聚糖骨架和四肽侧链构成。 13. 革兰阳性菌细胞壁的主要结构肽聚糖，是由聚糖骨架和四肽侧链和五肽交联桥构成。 14. 固体培养基是在液体培养基中加入2-3%琼脂，加热溶化经冷却凝固后即成；当加入0.2-0.7%琼脂。时，即成半固体培养基。 15.细菌的繁殖方式是二分裂。绝大多数细菌繁殖一代用时为20-30分钟，而结核杆菌繁殖一代用时为18-20小时。 16.半固体培养基多用于检测细菌动力。 17.根据菌落的特点可将菌落分为光滑型菌落、粗糙型菌落和粘液型菌落。 18.SS琼脂培养基含有胆盐、枸橼酸、煌绿，可抑制革兰阳性菌和大肠杆菌的生长,常用于肠道致病菌的分离和培养。19．细菌色素分为水溶性色素和脂溶性色素两种。 20．以简单的无机物为原料合成复杂的菌体成分的细菌称为自养型菌， 只能以有机物为原料合成菌体成分及获得能量的细菌称为异养型菌。 21．细菌生长繁殖的条件包括充足的营养物质、适宜的温度、合适的酸碱度和必需的气体环境。 22.大多数致病菌生长的最适PH值为7.2-7.6，最适温度为37℃，而结核杆菌生长的最适PH值为6.5-6.8，霍乱弧菌生长的最适PH值为8.4-9.2。 23.细菌群体生长的生长曲线可分为迟缓期、对数期、稳定期和衰亡期四个时期，细菌的形态、染色、生理等性状均较典型的是对数期。 24.培养基按其用途不同可分为基础培养基、营养培养基、选择培养基、鉴别培养基、厌氧培养基。 三.单项型选择题 1. 下列描述的微生物特征中，不是所有微生物共同特征的是(E ) A.个体微小; B.分布广泛; C.种类繁多; D.可无致病性; E.只能在活细胞生长繁殖; 2. 不属于原核细胞型的微生物是(C ) A.螺旋体; B.放线菌; C.病毒; D.细菌; E.立克次体 3. 属于真核细胞型的微生物是(C ) A.螺旋体 B.放线菌; C.真菌; D.细菌; E.立克次体 4.有关微生物的描述正确的是(E ) A.体形小于1mm的生物； B.单细胞的小生物； C.不具备细胞结构的微小生物； D.体形小于1μm的生物； E.以上均是错误的 5.与动物细胞比较，细菌所特有的一种重要结构是(E ) A.核蛋白体； B.线粒体； C.高尔基体；D细胞膜；E细胞壁 6.与细菌的运动有关的结构是( A) A.鞭毛； B.菌毛； C.纤毛；D荚膜；E轴丝 7.与毒素有关的细菌结构是(A ) A.外膜; B.核膜; C.线粒体膜; D.荚膜; E.细胞膜 8.芽胞与细菌有关的特性是(C )
一、选择题(每题1分,共30分) A型题: 每一考题有A、B、C、D、E五个备选答案，请从中选择一个最佳答案填入题干后括号内。 1．细菌的革兰染色性主要决定于：( ) A．核质结构B．细胞壁结构C．细胞膜结构 D．磷壁酸的有无E．中介体的有无 2．溶原性细菌是指：( ) A．带有前噬菌体基因组的细菌B．带有毒性噬菌体的细菌 C．带有温和噬菌体的细菌D．带有R质粒的细菌 E．带有F质粒的细菌 3．能引起内毒素性休克的细菌成分是：( ) A．肽聚糖B．磷壁酸C．LPS D．菌体抗原E．荚膜多糖 4．关于顿挫感染，下列叙述中哪项正确?( ) A. 因宿主细胞内有相应抑制物 B. 因宿主细胞DNA有关基因激活 C. 因宿主细胞缺乏有关酶 D. 因感染病毒有核酸缺失 E. 因感染病毒抗原性转变 5．细菌芽胞特有的、并与其高度耐热性有关的成分是：( ) A．磷脂B．肽聚糖C．磷壁酸 D．二氨基庚二酸E．吡啶二羧酸 6．下列哪种实验可用来检测致癌物质？( ) A．Ames test B．transformation test C．fluctuation test D．replica plating test E．Widal test 7．杀灭包括芽胞的所有微生物的方法称作：( ) A．消毒B．无菌C．灭菌D．灭活E．防腐 8. 下列无芽胞的细菌中，抵抗力最强的是: ( ) A. 乙型溶血性链球菌 B. 金黄色葡萄球菌 C. 淋病奈瑟菌 D. 肺炎球菌 E. 脑膜炎奈瑟菌 9. 下列哪项不是病毒在细胞内增殖的指标？( ) A. 细胞病变效应 B. 红细胞吸附 C. 细胞代谢的改变 D. 干扰现象 E. 细胞培养液混浊 10．霍乱弧菌能粘附定植于小肠粘膜上皮细胞是因为具有：( ) A．鞭毛B．ＬＴＡC．菌毛D．Ｋ抗原E．Ｖｉ抗原11．对青霉素产生耐药性的最常见的细菌是：( ) A．Streptococcus B．Staphylococcus C．Meningococcus D．Gonococcus E．Pneumococcus 12．分枝杆菌属最突出的特点是：( ) A．胞壁含大量脂质B．无特殊结构C．呈分枝生长 D．一般不易着色E．抗盐酸乙醇脱色 13. 下列哪种物质与结核结节和干酪样坏死有关？( ) A．分枝菌酸B．蜡质ＤC．磷脂 D．索状因子E．硫酸脑苷脂
《微生物学与检验》题库及答案 一.名词解释 1.医院感染 2.肥达反应 3.内基小体 4. 噬菌体： 5.血浆凝固酶 6.败血症 7.灭菌 8.药物敏感试验 9.外 - 斐氏试验 10.L 型细菌 11.菌群失调：12.微生物 13.细菌 14.最小抑菌浓度 15.菌落 16.汹涌发酵 17.无菌操作18.流感杆菌“卫星现象” 19.培养基 20.包涵体 21.正常菌群 22. 内毒素 23. 干扰现象： 24.菌血症 25菌丝： 二.填空题 1 L 型细菌是指（）。 2 杀灭物体上所有微生物的方法称为（）。 3 细菌 H-O 变异是指（）。 4 药敏试验所用标准培养基是，所用菌液相当于（）个细菌／ ml ，细菌接种采用（）划线接种法。 5 细菌致病因素包括（）、（）和（）。 6 细菌引起的全身感染包括（）、（）、（）和（）四种类型。 7 不染色标本检查主要用于观察细菌的（）。 8 影响革兰染色结果的关键步骤是（）。 9 有动力细菌在半固体培养基中的生长现象是穿刺接种线（），无动力细菌穿刺接种线（）。 10 糖发酵试验用于观察细菌分解糖是否产（）和（）。 11 靛基质试验的原理为，细菌产生的色氨酸酶分解蛋白胨中的色氨酸而生成（），此代谢产物与加入的试剂反应，生成（）。 12 链球菌根据溶血现象分为（）、（）和（）三种类型。 13 葡萄球菌触酶试验结果为（）性，链球菌触酶试验结果为（）性。 14 呈现脐窝状菌落的球菌是（）。 15 抗 O 试验是测定病人血清中（）抗体效价的试验，用于风湿热等疾病的辅助诊断。 16 血平板上呈现草绿色溶血环的病原性球菌是（）和（）。 17 IMViC 试验包括（）、（）、（）和（）四项试验。 18 分解乳糖的细菌在肠道选择平板上呈现（）菌落，不分解乳糖则为（）菌落。 19 KIA 斜面红色表明，底层黄色、有气泡表明（）、（），有黑色沉淀表明（）试验阳性 20 霍乱弧菌生物型包括（）和（）。 21 AIDS 的传染源是（）和（），传播途径主要有（），（）和（）。 22 真菌菌落有（）、（）和（）三种。 23 病毒培养方法有（）、（）和（）。 24 病毒的基本结构由（）和（）组成，有些病毒还具有（）。 25 流感病毒根据抗原结构不同分（）、（）、（）三型，其中容易引起流感大流行的是其中的（）型。 26 防止微生物进入机体和物品的操作方法称为（）。 27 含菌量较多的标本（如粪便）的接种通常采用（）接种法。
医学微生物学-绪论复习题 一、选择题 A型题 1. 不属于原核细胞型微生物的是 A.细菌 B. 病毒 C. 支原体 D. 立克次体 E. 衣原体 2. 属于真核细胞型微生物的是 A.螺旋体 B. 放线菌 C. 真菌 D. 细菌 E. 立克次体 3. 下列哪项不是微生物的共同特征 A.个体微小 B. 种类繁多 C. 分布广泛 D. 可无致病性 E. 只能在活细胞内生长繁殖 4. 属于非细胞型微生物的是 A.真菌 B. 噬菌体 C. 支原体 D. 立克次体 E. 衣原体 5. 原核细胞型微生物与真核细胞型微生物的根本区别是 A.单细胞 B. 有细胞壁 C. 仅有原始核结构，无核膜和核仁等 D. 对抗生素敏感 E. 繁殖方式 6. 非细胞型微生物的是 A.支原体 B. 放线菌 C. 衣原体 D. 细菌 E. 以上都不是 7. 下列对原核细胞型微生物结构的描述中，正确的一项是 A.有细胞壁但不含肽聚糖 B.有细胞膜且含有胆固醇 C.含有线粒体、内质网、溶酶体等细胞器
D.细胞核内含染色体遗传物质 E.无核膜，核质为裸露环状DNA 8. 最先创用固体培养基将细菌进行培养的科学家是 A. 法国的巴斯德 B. 德国的柯霍 C. 俄国的伊凡诺夫斯基 D. 英国的李斯特 E. 荷兰的列文虎克 9. 下列哪种不属于1973年以来发现的感染人类的新病原 A.嗜肺军团菌 B.幽门螺杆菌 C.埃博拉病毒 D.伤寒杆菌 E.阮粒 10. 关于在微生物学发展史上作出重要贡献的科学家及其所作出的贡献，下列哪项叙述是错误的 A.巴斯德首次研制出狂犬病疫苗 B.柯霍先后分离出炭疽杆菌、结核杆菌和霍乱弧菌 C.伊凡诺夫斯基发现烟草花叶病毒 D.琴纳分离出天花病毒 E.弗莱明发现青霉菌产物能抑制金黄色葡萄球菌的生长 11. 严格说来，结核分枝杆菌在分类上属于 A . 放线菌B. 衣原体C. 支原体D. 螺旋体E.立克次体 12. 下列哪种病原体不含有核酸 A.朊粒 B.小病毒B19 C.巴尔通氏体 D.伯氏疏螺旋体 E.汉坦病毒 13. 导致机体免疫系统致死性破坏的病原体是 A.轮状病毒 B. 疱疹病毒 C. HIV D. HAV E. TSST-1 14. 谁首次分离出黄热病毒 A. Edward Jenner B. Louis Paseur C. Robert Kock D. Walter Reed E. Alexander Fleming
医学免疫学与微生物学试题（1）一. 选择题（每题1分，共40分）： A型题（选择一个最佳答案） 1.类毒素具有 A. 无毒性 B. 无毒性和无抗原性 C. 有抗原性和毒性 D. 有抗原性和无毒性 E. 抗原性 2.兄弟姐妹间进行器官移植引起排斥反应的物质是 A. 异种抗原 B. 同种异体抗原 C. 自身抗原 D. 异嗜性抗原 E. 超抗原 3.异物是指 A. 异种物质 B. 同种异体物质 C. 结构发生改变的自身物质 D. 胚胎期机体免疫细胞未曾接触过的自身物质 E. 以上均是 4.免疫是 A. 抗病原体等侵袭的一种生理功能 B. 防止细胞癌变 C. 防止病毒的持续性感染 D. 识别和排除抗原性异物的一种功能 E. 是机体在种系发育过程中建立的一系列防卫机能 5.免疫球蛋白分五大类是根据 A. 轻链的结构及抗原性不同 B. λ链的结构及抗原性不同 C. κ链的结构及抗原性不同 D. J链的结构及抗原性不同 E. 重链的结构及抗原性不同 6.激活补体能力最强的Ig是 A. IgG B. IgA
C. IgM D. IgE E. IgD 7.免疫耐受实验结果表明 A.T细胞免疫耐受产生较早，维持时间较短 B.B细胞免疫耐受产生较早，维持时间较短 C.T细胞免疫耐受产生较早，维持时间较长 D.B细胞免疫耐受产生较早，维持时间较长 E.T细胞与B细胞免疫耐受形成情况大致相同 8.下列哪种情况不属于IV型超敏反应 A. 接触性皮炎 B. 传染性超敏反应 C. 移植排斥反应 D. 特应性皮炎 E. 结核菌素试验 9.T细胞活化的第二信号是指 A. CD4与MHC-II类分子间的相互作用 B. CD8与MHC-I类分子间的相互作用 C. IL-2与相应受体间的相互作用 D. IL-1与相应受体间的相互作用 E. 协同刺激分子与相应受体间的相互作用 10.HLA-I类抗原存在于 A. 白细胞表面 B. 有核细胞表面 C. 淋巴细胞表面 D. 巨噬细胞表面 E. 上皮细胞表面 11.下列细胞因子中哪种不是由T淋巴细胞所产生 A. IL-1 B. IL-2 C. IFN-γ D. TNF-β E. IL-4 12.补体的生物学功能不包括 A. 调理作用 B. 溶菌作用 C. 发挥ADCC作用 D. 与细胞C3b受体结合
微生物在药学中的应用 药管一班黄凤11068112 1. 什么是微生物发酵? 答:微生物的发酵就是利用微生物生命活动产生的酶对各种原料进行酶加工以获得所需产品的过程。 2. 微生物发酵有哪些类型? 答：厌氧发酵、需氧发酵；固体发酵、液体发酵；浅层发酵、深层发酵；微生物菌体发酵、微生物酶的发酵、微生物代谢产物的发酵、微生物转化发酵。 3. 什么叫药物的体外抗菌试验? 药物体外抗菌试验有哪些方法? 答：在体外测定微生物对药物敏感程度的实验，是筛选抗菌药物或测试新药抗菌性能的重要环节。琼脂扩散法（纸片法、挖沟法、管碟法）、连续稀释法（试管稀释法、平板分析法） 4. 药物体外抗菌试验的琼脂扩散法有哪几种方法? 答：三种；纸片法、挖沟法、管碟法。 5. 什么叫药敏试验K-B法?具体操作方法是怎样的? 答：K-B法就是纸片法；该法是将药敏纸片贴在已接种细菌的琼脂平板上，抗菌药物通过纸片在琼脂内向四周呈递减扩散，是纸片周围一定距离范围内实验细菌的生长受到抑制。 6. 能够测定药物最低抑菌浓度(MIC=minimal inhibitory concentration) )和最低杀菌浓度(MBC=minimal bactericidal concentration )的方法是什么方法?具体怎么检测? 答：连续稀释法；试管稀释法：在一系列试管中，用液体培养基对抗菌药物进行倍比稀释，获得药物浓度递减的系列试管，然后在每一管中加入定量的实验菌，经培养一定时间后，肉眼观察试管浑浊情况，记录能抑制实验菌生长的最低抑菌浓度。平板稀释法：先按连续稀释法配制药物，将不同系列浓度、定量的药物分别混入琼脂培养基，制成一批药物浓度呈系列递减的平板。然后将含有一定细胞数的实验菌液（通常为十的四次方左右）以点种法接种于平板上；同时设无药空白平板对照。培养后可测定各菌对该药的MIC。 7. 灭菌制试剂的无菌检测需要检测哪几类菌? 按照药典规定,分别以什么菌作为对照菌? 答：需氧菌、厌氧菌及真菌的培养检查。以金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003、生孢梭状芽胞杆菌CMCC(B)64941、白色假丝酵母菌CMCC(F)98001分别作为需氧菌、厌氧菌及真菌培养的对照菌。 8. 抗菌药物和防腐剂药物的无菌检测方法有哪些? 答：灭活法、微孔滤膜过滤法 9. 什么叫非规定灭菌剂? 答：不需要绝对无菌的制剂。虽然允许一定限量的微生物存在，但是严禁病原微生物存在。 10.非规定灭菌剂的微生物限度检查包括哪些指标检查? 答：染菌量检查（包括细菌数、霉菌素及酵母菌数测定）、控制菌检查（大肠埃希菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、破伤风梭菌检查和活螨的检查）。 11. 微生物限度检查的基本原则有哪些?
《包装材料学》考试大纲 总体要求: 包装材料学是随着我国现有包装技术的发展而兴起的一门新兴学科，是研究包装材料的结构、性能及应用的科学。它是包装工程专业的技术基础课程，也是包装科学的基础课程，为包装工程专业必修课之一。本课程要求学生掌握纸、塑料、金属、玻璃、陶瓷、复合材料及包装辅助材料等的物理、化学结构、性能、用途及其制品成型工艺；掌握改善和提高包装材料包装适应性的技术和方法；掌握相应包装材料及制品的质量检测技术，熟悉相关仪器设备的使用；了解包装材料的发展趋势和学科前沿知识。学生通过该课程的学习能够根据商品性能和包装要求，正确选择包装材料、制订材料加工成型工艺、正确测试评价材料质量，并能分析和解决生产中出现的技术问题。 绪论 掌握包装的概念和包装的目的与功能；掌握包装材料及容器的定义和分类。 了解包装材料的发展历史和发展趋势。 第1章纸包装材料及容器 掌握纸和纸板的分类；纸和纸板的制造，重点是造纸的生产工艺和技术方法、瓦楞纸板的生产工艺和技术方法及生产设备；包装常用纸和纸板性能和应用；瓦楞纸箱形式、制造及质量检测。 掌握纸盒的分类、生产工艺和技术方法、性能及应用。 了解纸的结构组成、纸包装的历史、现状和发展趋势；了解其他纸包装容器生产技术、性能及应用。 第2章塑料包装材料及制品 掌握高分子材料的基本知识、塑料制品的加工成型方法、常用塑料品种及性能; 掌握复合材料的组成、加工方法、性能及应用；掌握塑料缓冲包装材料生产工艺和技术方法、性能及应用。 了解塑料包装制品的分类、塑料包装容器及制品和塑料软包装材料的生产工艺
和技术方法、性能及应用；了解塑料捆扎材料及制品的生产工艺、性能及应用；了解塑料包装材料的鉴别方法；了解生物降解塑料的研究进展。 第3章金属包装材料及其包装容器 掌握金属包装材料的主要品种（镀锡钢板、镀銘钢板和铝材）的生产工艺和技术方法、性能及应用；掌握金属包装容器的生产工艺和技术方法、性能及应用，重点是生产金属三片罐和两片罐生产工艺和技术方法。 了解金属包装材料的结构和性能；了解除金属三片罐和两片罐之外的其他金属包装容器的生产工艺和技术方法、性能及应用。 第4章玻璃包装材料及容器 掌握玻璃包装材料的基本知识、玻璃的性能、玻璃容器的制造和提高玻璃容器使用性能的相关技术方法。 了解玻璃容器发展趋势；了解玻璃容器的分类、安甑和管制玻璃药瓶生产工艺和技术方法。 第5章陶瓷包装材料及容器 掌握陶瓷包装容器的生产工艺和技术方法、性能及应用。 了解陶瓷包装材料和容器的分类、结构组成和发展趋势。 第6章木材包装材料及容器 了解木材包装材料和容器的种类、生产工艺和技术方法、性能及应用。 第7章功能性包装材料 了解水溶性包装材料、可食性包装材料、生物降解包装材料等功能性包装材料研究进展。 第8章包装辅助材料 掌握黏合剂的黏合机理和基本组成，了解各类黏合剂的组成和基本配方，理解各类材料的粘合方法。 掌握胶带的构成及各组成的作用，熟悉压敏型黏合剂的黏附特性，了解常用的封缄和捆扎材料。 了解涂料在包装中的应用，掌握涂料的组成及其作用，了解涂料的命名方法和施涂方式。
医学微生物学模拟试题(一) [A1型题] 以下每一考题下面有A、 B、 C、 D、 E 5个备选答案，请从中选一个最佳答案，并在答题卡将相应题号的相应字母所属方框涂黑。 1．用来测量细菌大小的单位是 A. cm B．mm C. um D．nm E．Pm 2．细菌缺乏下列哪一种结构仍可存活 A．细胞壁 B．细胞膜 C．细胞质 D．核质 E．以上均可
3．下列有鉴别意义的细菌代谢产物是：A．靛基质 B. 色素 C．H2S D．酸性气体 E．以上均是 4．H—O变异属于 A．毒力变异 B．菌落变异 C．鞭毛变异 D．形态变异 E．耐药性变异 5. 是已知毒物中毒性最强者 A．肉毒毒素 B．破伤风痉挛毒素 C．白喉外毒素 D．霍乱肠毒素 E．金葡萄肠毒素 6．抗毒素 A．为外毒素经甲醛处理后获得 B．可中和游离外毒素的毒性作用。
C．可中和与易感细胞结合的外毒素的毒性作用D．由细菌内毒素刺激机体产生 E．B十C 7．湿热灭菌法中效果最好的是 A．高压蒸气灭菌法 B．流通蒸气法 C．间歇灭菌法 D．巴氏消毒法 E．煮沸法 8．哪种实验不属于细菌的生化反应 A．糖发酵试验 B．外斐试验 C．VP试验 D. 靛基质生化试验 E. 甲基红试验 9．链球菌感染后引起的变态反应性疾病 A．产褥热 B. 风疹 C．风湿热 D．波状热 E．以上均不是
10．关于淋球菌 A．女性感染者比男性更严重 B．G+肾形双球菌 C．空气传播 D．无垂直传染 E．人是惟一宿主 11．关于痢疾杆菌 A．易入血引起败血症 B．菌毛是致病的重要因素 C．不能引起休克 D．福氏痢疾杆菌因能产生外毒素，故引起的痢疾比较严重E．我国以志贺氏痢疾感菌感染多见。 12．肠道致病菌特征 A．抗原结构复杂，均有H、 O抗原 B．在SS琼脂上为无色不透明菌落 C．多数分解乳糖 D．可用免疫血清鉴定分型 E．革兰阴性杆菌 13．霍乱弧菌 A．有周鞭毛，运动十分活泼
临床药师进修小结 临床药师进修小结 随着医药卫生事业的发展，患者对医疗及药学服务需求的增加，如何合理地使用药物，使药物的应用更加安全、有效、经济已成为医务工作者及患者关注的问题。2018年9月，我非常幸运地获得医院批准到卫生部指定的临床药师培训基地上海交通大学附属第一人民医院参加临床药师培训，我也非常珍惜这难得的机会。现将艺年的学习心得总结如下： 一、简述学习经过 一年进修时间先后在药剂科的门诊药房、病区药房、骨科、心内科、神经内科、心血管科等科室轮转。每日跟随医生查房，学习临床知识的同时巩固药学知识。对各病例的用药进行分析，给医生合理的用药建议及提醒医生不合理用药情况。 进修期间完成作业：药历书写20份；处方医嘱审核15000份；呼吸系统疾病抗菌药物使用评价100例，i类切口手术预防使用抗菌药物评价100例；患者用药教育50人次以上；编写用药教育材料2份；病例分析报告10份；文献阅读报告10份；药品不良反应/事件分析与评价30份。最后通过临床问诊、病例分析、患者用药教育等考核通过后获批临床药师证书。 二、对临床药师的认识 所谓临床药师就是跟随临床医师查房、病例讨论、制定个体化用药方案，
在临床中发现和解决问题的专业药技人员。离开临床实践的临床药师开展临床药学工作只能说是纸上谈兵。 我国药学服务工作起步较晚，现已逐步以“药品供应为中心”向“以病人为中心”的服务模式转变，这就是临床药师产生的原因。临床药师服务的对象是所有用药者，包括患者。只有这样才能真正体现出“以病人为中心”的新的医疗服务理念。 三、我院开展临床药学工作的现状 我院目前药学工作主要就是采购和供应药品，还未做到药学服务。开展的临床药学工作主要做了处方点评，药品排名等，还存在较为突出的问题有： 1、药事管理相关制度不完善，开展工作未明确责任与工作流程； 2、未开展药学咨询服务，药学人员知识缺乏，导致患者咨询药物相关情况无法解答； 3、未对处方和医嘱不合理情况及抗菌药使用不规范情况进行整改，医生抗菌药物滥情情况较为严重； 4、未开展不良反应监测制度，临床患者发生不良反应未及时分析及上报。 四、有关我院今后临床药学工作开展的思路： 1、进一步完善临床药学相关工作制度，拟定出工作规范，使临床药学工作制度化，程序化、标准化。 2、临床药师工作是非常需要得到院领导及各医护人员的支持才能更好的开展，目前医护人员对临床药师是陌生的，可通过讲课宣教等方式让医
医学微生物学考试试卷（A）(附答案) (临床医学本科、影像医学本科、中医药学本科、实验技术本科、预防医学本科) 班级学号姓名 注意事项： 1．在试卷上写上姓名、班级。在答题卡上填上学号，将相应的数字涂黑，并写上班级、姓名和试卷类型（A卷/B卷）。交卷时必须将答题卡与试卷一起上交，否则以零分计算！ 2．本份试卷由基础知识题和病例分析题组成，共150个选择题，请按题目要求，在备选答案中选择一个最佳答案，并在答题卡上将相应的字母涂黑，做在试卷上无效。 3．考试时请严格遵守考场纪律，原则上不允许上厕所。 第一部分、Ａ型选择题 （由一题干和５个备选答案组成，请选出一个最佳答案。共90个选择题） 1.哪种疾病的病原体属于非细胞型微生物： A.疯牛病 B.梅毒 C.结核病 D.沙眼 E.体癣 2.细菌属于原核细胞型微生物的主要依据是: A.单细胞 B.二分裂方式繁殖 C.对抗生素敏感 D.有由肽聚糖组成的细胞壁 E.仅有原始核结构，无核膜 3.革兰阳性菌细胞壁： A.肽聚糖含量少 B.缺乏五肽交联桥 C.对溶菌酶敏感 D.所含脂多糖与致病性有关 E.有蛋白糖脂外膜 4.青霉素杀菌机制是: A.干扰细胞壁的合成 B.与核糖体50S亚基结合，干扰蛋白质合成 C.影响核酸复制 D.与核糖体30S亚基结合，干扰蛋白质合成 E.损伤细胞膜 5.有关“细菌鞭毛”的叙述，哪一项是错误的: A.与细菌的运动能力有关 B.许多革兰阳性菌和阴性菌均有鞭毛 C.在普通光学显微镜下不能直接观察到 D.可用于细菌的鉴定 E.将细菌接种在固体培养中有助于鉴别细菌有无鞭毛 6.有关“芽胞”的叙述，错误的是: A.革兰阳性菌和阴性菌均可产生 B.不直接引起疾病 C.对热有强大的抵抗力 D.代谢不活跃 E.通常在细菌处于不利环境下形成 7.用普通光学显微镜油镜观察细菌形态时，总放大倍数为:
2011药学专业专升本药学微生物真题 一、填空 1、细胞型微生物包括( )和( ) 两大类 2、医学微生物包括医学细菌学微生物( ), ( ) 3、细菌结构中与革兰染色和致病性有关的是( ) 4、细菌的特殊结构有( ) ( ) ( ) ( ) 5、细菌生长繁殖所需要的条件( ) ( ) ( ) -( ) ( ) 6、病毒的形态有( ) ( ) ( ) ( ) -( ) 7、衣原体对低温( ),对热( ) 二、判断题 1、病毒包膜表面凸起称为壳微粒 2、芽胞保持了细菌的生命活动,所以能繁殖 3、真菌为原核细胞型微生物 4、前噬菌体是整合在细菌染色体上的噬体基因组 5、转化是受体菌直接摄取供体菌游离的DNA片段 6、细菌的耐药性与突变有关 7、有F质粒的细菌能产生普通菌毛
8、病毒的遗传物质均为DNA 9、干扰素具有免疫调节作用 10、HBV主要通过性传播 三、名词解释 荚膜鲎试验病毒质粒革兰染色简答 1、简述病毒体的结构 2、简述细菌内外毒素区别 3、简述真菌菌落的结构 四、选择题 1、肺炎链球菌致病物质( ) A 荚膜 B 血溶酶 C 神经氨酸酶 D 溶血素 2、流感病毒分型的依据( ) A 血凝素
B 神经氨酸酶 C 核蛋白和M蛋白D基质蛋白 3、引起婴儿腹泻的病毒( ) A 轮状病毒 B ECHO病毒 C 柯萨奇病毒 D 肠道腺病毒 4、不是细菌表面结构的是 A中介体B 鞭毛C 菌毛D荚膜 5、以温和噬菌体( ) A 转化 B 转导 C 接合D溶原性转换 6、结核杆菌的抗酸性与何物质有关( ) A 磷壁酸 B 胞壁酸 C 核糖核酸D分枝菌酸
医学微生物学考试试卷（A ）（附答案） （ 临床医学本科、影像医学本科、中医药学本科、实验技术本科、预防医学本科 ） 班级 学号 姓名 注意事项： 1．在试卷上写上姓名、班级。在答题卡上填上学号，将相应的数字涂黑，并写 上班级、姓名和试卷类型（A 卷/B 卷）。交卷时必须将答题卡与试卷一起上交， 否则以零分计算！ 2．本份试卷由基础知识题和病例分析题组成， 共 150 个选择题， 请按题目要求， 在备选答案中选择一个最佳答案， 并在答题卡上将相应的字母涂黑， 做在试卷上 无效。 3．考试时请严格遵守考场纪律，原则上不允许上厕所。 第一部分、A 型选择题 （由一题干和5个备选答案组成，请选出一个最佳答案。共 1. 哪种疾病的病原体属于非细胞型微生物： A. 疯牛病 B. C. 结核病 D. E.体癣 2. 细菌属于原核细胞型微生物的主要依据是 A. 单细胞 B. C .对抗生素敏感 D. E. 仅有原始核结构，无核膜 3 .革兰阳性菌细胞壁： A. 肽聚糖含量少 B. C. 对溶菌酶敏感 D. E. 有蛋白糖脂外膜 4. 青霉素杀菌机制是 : A. 干扰细胞壁的合成 B. 质合成 C. 影响核酸复制 D. 质合成 E. 损伤细胞膜 5. 有关“细菌鞭毛 ”的叙述，哪一项是错误的 A. 与细菌的运动能力有关 B. 许多革兰阳性菌和阴性菌均有鞭毛 C. 在普通光学显微镜下不能直接观察到 D. 可用于细菌的鉴定 E. 将细菌接种在固体培养中有助于鉴别细菌有无鞭毛 6. 有关 “芽胞”的叙述，错误的是 : A. 革兰阳性菌和阴性菌均可产生 B. 不直接引起疾病 C. 对热有强大的抵抗力 D. 代谢不活跃 E. 通常在细菌处于不利环境下形成 7. 用普通光学显微镜油镜观察细菌形态时，总放大倍数为 : 梅毒 沙眼 二分裂方式繁殖 有由肽聚糖组成的细胞壁 缺乏五肽交联桥 所含脂多糖与致病性有关 与核糖体 50S 亚基结合，干扰蛋白 与核糖体 30S 亚基结合，干扰蛋白 90 个选择题）