名词解释：
1.分子生物学：是研究核酸、蛋白质等所有生物大分子的结构与功能相互关系的科学，是从分子
水平研究生命的本质。
2.转录激活：复制引发的关键步骤就是前导链DNA的合成，一旦前导链DNA的聚合作用开始，
滞后链上的DNA合成也随着开始，在所有前导链开始聚合之前有一必需的步骤就是由RNA聚
合酶(不是引物酶)沿滞后链模板转录一短的RNA分子。在有些DNA复制中，(如质粒ColE)，
该RNA分子经过加式成为DNA复制的引物。但是，在大部分DNA复制中，该RNA分子没有
引物作用。它的作用似乎只是分开两条DNA链，暴露出某些特定序列以便引发体与之结合，在
前导链模板DNA上开始合成RNA引物，这个过程称为转录激活(transcriptional activation)。
3.PCR（Polymerase Chain Reaction）即聚合酶链式反应：是指在DNA 聚合酶催化下，以母链DNA
为模板，以特定引物为延伸起点，通过变性、退火、延伸等步骤，体外复制出与母链模板DNA
互补的子链DNA的过程。是一项DNA体外合成放大技术，能快速特异地在体外扩增任何目
的DNA。可用于基因分离克隆，序列分析，基因表达调控，基因多态性研究等许多方面。
4.依赖DNA的RNA聚合酶（DDRP)：以DNA为模板，以四种三磷酸核苷为底物，转录的方式
是不对称的，RNA链的延长方向是5?→3?的连续合成，需要Mg2+或Mn2+，RNA聚合酶缺乏
3?→5?外切酶活性，不需要引物。
5.核心酶：细菌全酶由六个亚基组成，去掉δ亚基的部分称为核心酶（α2ββ?ω）
6.启动子：RNA聚合酶起始RNA合成所特异结合的DNA序列，位于转录起始点上游。
7.Rho因子：是分子质量为2.0xl05的六聚体蛋白，它是ATP酶，它通过催化ATP的水解促使新
生RNA链从三元转录复合物中解离出来，从而终止转录。依赖于Rho因子的转录终止区DNA
序列无共性，Rho因子不能识别这些终止位点。RNA合成起始以后，Rho因子即附着在新生的
RNA链上，靠A TP水解产生的能量，沿着5?→3?方向朝RNA聚合酶移动，到达RNA的3…-OH
端后取代了暂停在终止位点上的RNA聚合酶，使之从模板DNA上释放出来，同时释放mRNA，完成转录过程。
8.核心启动子元件(core promoter element ,CPE)指RNA聚合酶起始转录所必需的最小的DNA序
列。
9.上游启动子元件(upstream promoter element ,UPE)或称上游激活序列（upstream activating
sequence, UAS)：包括通常位于－70bp附近的CAA T盒和GC盒、以及距转录起始点更远的上游
元件。
10.翻译：是指将mRNA链上的核苷酸从一个特定的起始位点开始，按每3个核苷酸代表一个氨基
酸的原则，依次合成一条多肽链的过程。这3个核苷酸称为密码，也叫三联子密码（codon）。
11.开放阅读框（open reading frame）：是结构基因的正常核苷酸序列，从起始密码子到终止密
码子的阅读框可编码完整的多肽链，其间不存在使翻译中断的终止密码子。
12.密码的简并性（degeneracy）：由一种以上密码子编码同一个氨基酸的现象称为简并
（degeneracy），对应于同一种氨基酸的几个密码子称为同义密码子。
13.摆动假说（wobble hypothesis）：在密码子与反密码子的配对中，前两对严格遵守碱基配对原则，
第三对碱基有一定的自由度，可以“摆动”，因而使某些tRNA可以识别1个以上的密码子。反密
码子第一位为A或C时只能识别1种密码子，为G或U时可以识别2种密码子，为I时可识别
3种密码子。
14.起始tRNA和延伸tRNA：能特异地识别mRNA模板上起始密码子的一类tRNA叫起始tRNA，
其他tRNA统称为延伸tRNA。原核生物起始tRNA携带甲酰甲硫氨酸(fMet)，即fMet－
tRNAfMet 。真核生物起始tRNA携带甲硫氨酸(Met)，即Met－tRNAiMet 。
15.同工tRNA：一种氨基酸可能有多个密码子，代表一种氨基酸的多个tRNA以不同的反密码子为
特征，识别mRNA上代表一种氨基酸的多个密码子。几个代表相同氨基酸的tRNA称为同工
tRNA。
16.无义突变：在蛋白质的结构基因中，一个核苷酸的改变使代表某个氨基酸的密码子变成终止密
码子(UAG、UGA、UAA)，使蛋白质合成提前终止，合成无功能的或无意义的多肽，这种突变称为无义突变(nonsense mutation)。无义突变的校正tRNA可通过改变其反密码子区校正无义突变。
17.错义突变（missense mutation）：是由于结构基因中某个核苷酸的变化使一种氨基酸的密码变成
另一种氨基酸的密码。错义突变的校正tRNA通过反密码子区的改变把正确的氨基酸加到肽链上，合成正常的蛋白质。
18.氨酰-tRNA合成酶：是一类催化氨基酸与tRNA结合的特异性酶。其反应包括两步：氨基酸＋
ATP-E —→氨基酰-AMP-E ＋PPi ；氨基酰-AMP-E ＋tRNA —→氨基酰-tRNA ＋AMP ＋E。氨基酰-tRNA合成酶对底物氨基酸和tRNA都有高度特异性。存在20种以上具有氨基酸专一性的氨酰－tRNA合成酶。氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性。
19.释放因子：Ⅰ类释放因子识别终止密码子，催化多肽链从P位点的tRNA中水解释放出来。
RF1：识别终止密码子UAA和UAG
RF2：识别终止密码子UAA和UGA
Ⅱ类释放因子在多肽链释放后刺激Ⅰ类释放因子从核糖体中解离出来。RF3：具GTP 酶活性，协助肽链的释放和RF1、RF2的解离。
20.分子伴侣（molecular chaperone）：细胞内辅助新生肽链正确折叠的蛋白质。一类序列上没有相
关性但有共同功能的保守蛋白。
21.热休克蛋白：应激反应性蛋白，广泛存在于原核和真核细胞中。三者协同作用，促使某些能自
发折叠的蛋白质正确折叠。
22.伴侣素（chaperonin）：为非自发性折叠蛋白提供能折叠成天然构象的微环境。
23.翻译转运同步机制：蛋白质的合成和运转同时发生。
24.翻译后转运机制：蛋白质从核糖体上释放后才发生运转。
25.信号肽：常指新合成多肽链中用于指导蛋白质跨膜转移的N-末端氨基酸序列（有时不一定在N
端）。一般带有10-15个疏水氨基酸，N-端常常有1个或数个带正电荷的氨基酸，C-末端靠近蛋白酶切割位点处常常带有数个极性氨基酸。
26.信号肽假说：在起始密码之后紧接着大部分是疏水氨基酸的信号肽，信号肽开始从核糖体的大
亚基露出，便与内质网膜上的特定受体相互作用，产生通道，允许多肽在延长的同时穿过膜结构。信号肽过膜后被内质网腔的信号肽酶水解，新生肽随之通过蛋白孔道穿越疏水的双层磷脂。
当核糖体移到mRNA的"终止"密码子，蛋白质合成即告完成，翻译体系解散，膜上的蛋白孔道消失，核糖体重新处于自由状态。
27.cDNA：是指互补于mRNA的DNA分子（complementary DNA）。cDNA是由RNA经一种称为
逆转录酶的DNA聚合酶催化产生的。
28.增强子: 位于真核基因中远离转录起始点，能明显增强启动子转录效率的特殊DNA序列。它可
位于被增强的转录基因的上游或下游，也可相距靶基因较远。
29.衰减子：在色氨酸操纵子中的一个区域，此区域以形成不同二级结构的方式，利用原核生物转
录与翻译的偶联对转录进行调节。此区域只存在于原核生物合成代谢的操纵子中。
30.减色效应：变性DNA复性后,在260nm的吸收值减少的现象称为减色效应。
31.增色效应：当核酸变性后,其260nm的紫外吸收增加的现象。
32.复制子：含有一个起点的复制单位。其长度等于相邻两个复制起点间的距离。
33.C值：真核生物单倍体基因组所包含的全部DNA量称为该物种的C值。
34.终止因子：协助RNA聚合酶识别终止信号的蛋白因子称为终止因子。
35.操纵基因：编码合成那些参与基因表达调控的RNA和蛋白质的特异DNA序列。
36.阻遏蛋白：阻遏蛋白是负调控系统中由调解基因编码的调解蛋白，它本身或与辅阻遏物一起结
合于操纵基因，阻遏操纵子结构基因的转录。
37.启动子：是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列。
38.顺式作用元件:是指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的特
异DNA序列。包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和一些反应元件等。
39.反式作用因子:是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接结合顺式作用元件而调节基因转
录活性的蛋白质因子。
40.SSCP:单链构象多态性检测是一种基于DNA构象差别来检测点突变的方法。相同长度的单链
DNA，如果碱基序列不同，形成的构象就不同，这样就形成了单链构象多态性。
41.SD序列:转录出的mRNA要进入核糖体上进行翻译，需要一段富含嘌呤的核苷酸序列与大肠杆
菌16S rRNA3，末端富含嘧啶的序列互补，是核糖体的识别位点。
42.CAP:是大肠杆菌分解代谢物基因活化蛋白，这种蛋白可将葡萄糖饥饿信号传递个许多操纵子，
使细菌在缺乏葡萄糖时可以利用其他碳源。
43.顺反子:原核生物DNA序列功能相关的RNA和蛋白质基因，集中在基因组的一个或者几个特定
的部分形成的功能单位或者转录单位。
44.分子伴侣：使一些蛋白质装备或者恰当折叠所需的蛋白质，但是这种蛋白质并不是目标复合物
的成分。
45.阻遏蛋白：与DNA 或RNA结合来阻止转录或者翻译的蛋白质。
46.限制性图谱：DNA上能够被很多不同限制性酶切割的位点排列。
47.干扰RNA: 一些小的双链RNA可以高效、特异的阻断体内特定基因表达，促使mRNA降解，诱
使细胞表现出特定基因缺失的表型。
大题：
DNA复制
1.2个关键的底物：（1）4种脱氧核苷三磷酸—dGTP、dCTP、dATP、dTTP。
（2）引物：与模板互补，比模板短的一小段序列，暴露的3?-OH。
2.复制方向：5?-3?
3.焦磷酸水解是DNA合成的驱动力
4.过程：1．DNA双螺旋的解旋
DNA在复制时，其双链首先解开，形成复制叉，而复制叉的形成则是由多种蛋白
质及酶参与的较复杂的复制过程
（1）单链DNA结合蛋白（SSB）
SSB是较牢固的结合在单链DNA上的蛋白质。原核生物SSB与DNA结合时表现出协同效应：若第1个SSB结合到DNA上去能力为1，第2个的结合能力
可高达103；真核生物细胞中的SSB与单链DNA结合时则不表现上述效应。SSB
的作用是保证解旋酶解开的单链在复制完成前能保持单链结构，它以四聚体的形式
存在于复制叉处，待单链复制后才脱下来，重新循环。所以，SSB只保持单链的存
在，不起解旋作用。
（2）DNA解链酶（DNA helicase）
DNA解链酶能通过水解A TP获得能量以解开双链DNA。这种解链酶分解AT 的活性依赖于单链DNA的存在。如果双链DNA中有单链末端或切口，则DNA
解链酶可以首先结合在这一部分，然后逐步向双链方向移动。复制时，大部分DNA
解旋酶可沿滞后模板的5?—〉3?方向并随着复制叉的前进而移动。
（3）DNA解链过程
DNA在复制前不仅是双螺旋而且处于超螺旋状态，而超螺旋状态的存在是解链前的必须结构状态，参与解链的除解链酶外还有一些特定蛋白质，如大肠杆菌中
的Dna蛋白等。一旦DNA局部双链解开，就必须有SSB以稳定解开的单链，保
证此局部不会恢复成双链。
2．复制的引发、延伸和终止
DNA复制时，往往先由RNA聚合酶在DNA模板上合成一段RNA引物，再由聚合酶从RNA引物3?端开始合成新的DNA链。对于前导链来说，这一引发过程比
较简单，只要有一段RNA引物，DNA聚合酶就能以此为起点，一直合成下去。对
于后随链，引发过程较为复杂，需要多种蛋白质和酶参与。后随链的引发过程由引
发体来完成。引发体由6种蛋白质构成，预引体或引体前体把这6种蛋白质结合在
一起并和引发酶或引物过程酶进一步组装形成引发体。引发体似火车头一样在后随
链分叉的方向前进，并在模板上断断续续的引发生成滞后链的引物RNA短链，再由
DNA聚合酶III 作用合成DNA，直至遇到下一个引物或冈崎片段为止。由RNA酶
H降解RNA引物并由DNA聚合酶I 将缺口补齐，再由DNA连接酶将每两个冈崎
片段连在一起形成大分子DNA.。
●PCR
1.原理：类似于DNA的体内复制。首先待扩增DNA模板加热变性解链，随之将反应混合物冷
却至某一温度，这一温度可使引物与它的靶序列发生退火，再将温度升高使退火引物在
DNA聚合酶作用下得以延伸。这种热变性-复性-延伸的过程就是一个PCR循环，PCR就
是在合适条件下的这种循环的不断重复。
经不断重复循环之后，反应混合物中所含有的双链DNA分子数，即两条引物结合位点之
间的DNA区段的拷贝数，理论上的最高值应是2n,实得1.8n.
2.体外PCR扩增与体内DNA复制之间的关系：
PCR扩增过程和体内DNA复制过程最大的不同就是：PCR扩增中2条单链完全解开，分别同时以5一3方向连续合成；而DNA复制边解旋边复制，出现前导链和滞后链，在滞后链形成冈崎片段。
3.实际应用中的优化：优化引物、镁离子、模板DNA、热稳定DNA聚合酶及dNTP的浓度，
控制变性温度和时间。
引物：如果引物二聚体过量，应用降落PCR和热启动PCR；若问题仍然存在，重新设计合成引物通过建立两个引物不同浓度的PCR系列试验，从中发现两个引物的最适浓
度，要特别注意引物3?末端的序列。
镁离子：通过建立降落PCR系列试验，摸索最佳镁离子浓度的水平。
模板DNA:检查模板DNA序列内是否具有高度重复序列存在。如存在，降低模板DNA 的量。
变性不完全：增加变性的时间或者设置更高的变性温度。
两个引物之间的距离太大：应用那些能够扩增大DNA片段的热稳定DNA聚合酶。
●凝胶电泳
原理：生理条件下，核酸分子中的磷酸基团呈离子化状态，所以，DNA和RNA又被称为多聚阴
离子，在电场中向正电极的方向迁移。由于糖-磷酸骨架在结构上的重复性质，相同数量的双链DNA 几乎具有等量的净电荷，因此它们能以同样的速度向正电极方向迁移。在一定的电场强度下，DNA 分子的这种迁移速度，即电泳的迁移率，取决于核酸分子本身的大小和构型。当用低浓度的荧光嵌入染料溴化乙啶染色,在紫外光下呈橘黄色,从而可以确定DNA片段在凝胶中的位置。
常用的凝胶电泳包括琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。琼脂糖凝胶分辨DNA片段的范围为0.2~50kb之间。聚丙烯酰胺凝胶的分辨范围为1到1000个碱基对之间。凝胶浓度的高低影响凝胶介质孔隙的大小，浓度越高，孔隙越小，其分辨能力就越强。
琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品，如大分子核酸、病毒等，一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。琼脂糖凝胶约可区分相差100bp的DNA片段，其分辨率虽比聚丙烯酰胺凝胶低，但它制备容易，分离范围广，尤其适于分离大片段DNA。普通琼脂糖凝胶分离DNA的范围为0.2-20kb，利用脉冲电场凝胶电泳，可分离高达107bp的DNA片段。
●核酸分子杂交
基本原理：是具有一定同源性的两条核酸单链在一定条件下（适宜的温度及离子强度等）可按碱基互补原则形成双链，此杂交过程是高度特异的。杂交的双方是待测核酸及探针。探针以放射核素或非放射性核素标记，以利于杂交信号的检测。分子杂交的实质是DNA的变性和复性过程。
DNA的变性解链是杂交成功的关键, DNA受酸、碱、热等处理均能发生变性，但强酸会使核酸降解。碱变性可避免DNA的降解、热变性要在低DNA浓度（100μg/ml）和低盐浓度（0.1 SSC 15mmol/L NaOH，1.5mmol/L柠檬酸三钠，pH7.0)下进行。DNA变性可用OD260增加（约30-40%）来检测，变性DNA醇沉淀呈雪样，完全失去纤维状沉淀。
核酸探针是指能与特定核酸序列发生特异性互补的已知核酸片段。一般而言，核酸探针带有特殊的标记物。常用的核酸探针：（1）双链cDNA （2）单链cDNA；（3）合成寡核苷酸；（4）单链cRNA。
Southern印迹杂交的基本方法：将DNA标本用限制性内切酶消化后，经琼脂糖凝胶电泳分离各酶解片段，然后经碱变性，Tris缓冲液中和和高盐下通过毛吸作用将DNA从凝胶中转印至硝酸纤维素膜上、烘干固定后即可用于杂交。凝胶中DNA片段的相对位置在DNA片段转移到滤膜的过程中继续保持着，附着在滤膜上的DNA与32P标记的探针杂交，利用放射自显影术确立探针互补的每一条DNA带的位置，从而可以确定在众多消化产物中含某一特定序列的DNA片段的位置和大小。
Northern印迹杂交（Northern blot）：原理是RNA经过变性琼脂糖凝胶电泳分离后，转移到硝酸纤维膜或尼龙膜上，经过杂交，分析mRNA的大小及含量。应用：半定量分析mRNA的含量；确定mRNA分子的大小。方法：提取组织细胞总RNA→RNA定量→变性胶电泳→转膜→干膜→预杂交→杂交→洗膜→压片→洗片→图像分析。
原位杂交（Tissue in situ hybridization）：含有互补顺序的标记DNA或RNA片段（探针），在适宜的条件下与细胞内特定的DNA或RNA形成稳定的杂交体。可用来观察目的基因或mRNA 在细胞中的定位；半定量分析其含量变化。
斑点杂交（Dot blot）：是将被检标本点到膜上，烘烤固定。这种方法耗时短，可做半定量分析。一张膜上可同时检测多个样品，为使点样准确方便，市售有多种多管吸印仪，它们有许多孔，样品加到孔中，在负压下就会流到膜上呈斑点状或狭缝状。反复冲洗进样孔，取出膜烤干或紫外线照射以固定标本，这时的膜就可以进行杂交。基本过程:首先变性DNA样品，然后直接点样于硝酸纤维素薄膜上使之成为斑点，然后与探针杂交。
●特定基因片段的获取
1.DNA克隆/重组
定义：构建重组DNA分子并在细胞中保存和扩增这些分子。即应用酶学的方法，在体外将各种来源的遗传物质与载体DNA相结合成一具有自我复制能力的DNA分子——复制子，继而通过转化或转染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化子细胞，再进行扩增、提取获得
大量同一DNA分子，即DNA克隆。
过程：a．载体的选择和制备——分；
载体要素：自我复制能力；携带外源基因片段大小；插入位点多少；易于鉴定
识别程度。
大肠杆菌pSC101质粒载体：低拷贝数严紧型复制控制的大肠杆菌质粒载体，
平均每个寄主细胞仅有1~2个拷贝。
pBR322质粒载体：优点是具有较小的分子量，其长度为4 363bp。不仅易于纯
化，而且即使携带上一段6-8kb的外源DNA片段，操作起来仍较为便利。具
有两种抗生素抗性基因以用作转化子的选择记号。有较高的拷贝数，若经过氯
霉素扩增，每个细胞中可累积1000~3000个拷贝，为重组体DNA的制备提供
了极大的方便。
b．制备目的基因片段——切；
化学合成法；基因组DNA（限制性内切酶）；cDNA；PCR
c．DNA片段的重组连接——接；（DNA连接酶）
d．重组DNA导入受体细胞——转；
e．转化子的筛选——筛；（导入外源DNA分子后能稳定存在的宿主细胞称转化子）
f．重组子的筛选——筛；（导入的外源DNA为重组DNA的转化子）
①根据载体的性状变化进行筛选：根据载体的抗药性标记进行筛选；根据载体
抗药性插入失活筛选。
②根据外源性DNA片段性状进行筛选：根据外源基因可能表达的蛋白质对缺
乏该蛋白的细菌的影响。
③根据重组DNA的结构特征进行筛选：根据重组DNA和载体DNA大小的差
别进行电泳分离判断；限制性内切酶图谱分析。
g．重组子的鉴定——鉴；
h．克隆扩增或表达——扩/表达；
应用：基因文库（最大的应用）
用重组体DNA技术将某种生物细胞中的染色体基因组DNA或cDNA 的所有片段随机的连接到载体上，然后转移到适当的寄主细胞中，通过细胞增殖而构成各个片段的无性
繁殖系，当其数目多到可以覆盖某生物的全部DNA或cDNA时，这一组克隆称为某种生
物的基因文库。
基因组文库：用基因组DNA制作的基因文库。
cDNA文库:用某一组织细胞的全部mRNA反转录形成总cDNA然后制成的基因文库。
2.PCR扩增（同上）
●RT-PCR
定义：逆/反转录PCR，是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中，一条RNA链被逆转录成为互补DNA，再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。
原理：提取组织细胞总RNA，以其中的mRNA为模板，采用olig-dT或随机引物，在逆转录酶的作用下反转录成cDNA。再以cDNA作为模板，通过特异性引物，PCR扩增目的基因。
方法：提取组织或细胞总RNA→紫外定量→逆转录合成cDNA→PCR扩增→电泳→摄像→光密度扫描→图像分析
应用：用于测定基因表达的强度和鉴定已转录序列是否发生突变,呈现mRNA多态性,克隆mRNA 的5’和3’末端序列,以及从非常少量的mRNA样品构建大容量的cDNA文库。
●RNA分析方法（见课件）
●蛋白质的研究技术（见课件）
●基因表达分析——原核表达系统——大肠杆菌表达系统
一、原核生物细胞表达的特点
(1)原核生物只有一种RNA聚合酶识别原核细胞的启动子，催化所有RNA的合成。
(2)原核生物的表达是以操纵子为单位的。操纵子是数个相关的结构基因及其调控区的结合，是一
个基因表达的协同单位。
(3)原核生物的转录与翻译是偶联的，也是连续进行的。每个核糖体可独立完成一条多肽链的合
成，即这种多核糖体可以同时在一条mRNA链上合成多条肽链，大大提高了翻译效率。
(4)原核细胞中缺乏真核细胞的转录后加工系统。因此当克隆的含有内含子的真核基因在原核细胞
中转录成mRNA前体后，其中内含子部分不能被切除。
(5)原核生物基因的控制主要在转录水平，这种控制要比对基因产物直接控制要慢。对RNA合成
的控制有2种方式：一是起始控制(启动子控制)，二是终止控制(衰减子控制)。
(6)在大肠杆菌mRNA的核糖体结合位点上，含有一个翻译起始密码子及同16S RNA 3’末端碱基
互补的序列，即SD序列。
二、外源基因在原核细胞中表达具备条件
(1)通过表达载体将外源基因导入宿主菌，并指导宿主菌的酶系统合成外源蛋白。
(2)外源基因不能带有间隔顺序(内含子)，因而必须用cDNA或全化学合成基因，而不能用基因组
DNA。
(3)必须利用原核细胞的强启动子和SD序列等调控元件控制外源基因的表达。
(4)外源基因与表达载体连接后，必须形成正确的开放阅读框架(ORF)。
ORF(open reading frame)：起始于AUG、止于UAA、UGA、UAG的连续的密码子区域，是潜在的编码区。
(5)利用宿主菌的调控系统，调节外源基因的表达，防止外源基因的表达产物对宿主菌的毒害。
三、大肠杆菌表达系统
1、大肠杆菌基因表达载体
大肠杆菌基因表达载体的构建，应包括这些基因元件：复制子、启动子、终止子、核糖体结合位点、密码子、选择标记等。
2、宿主菌
大肠杆菌基因表达系统的基因一般都是异源基因，某些甚至是真核生物基因，而在细胞内积累大量的异源蛋白极易被降解。造成重组异源蛋白在大肠杆菌中不稳定的原因包括：大肠杆菌缺乏复杂翻译后加工和蛋白质折叠系统；大肠杆菌不具备类似真核细胞的亚细胞结构和表达产物的稳定因子；
大量的异源重组蛋白在大肠杆菌细胞中形成高浓度微环境，导致蛋白质分子之间的作用增强。为了使外源基因高效表达，必须构建作为基因表达受体菌的大肠杆菌工程菌株。
3、常见的大肠杆菌基因表达系统
目前较为广泛应用的表达系统包括以下几种：Lac和Tac表达系统、PL和PR表达系统、T7表达系统等。
四、提高克隆基因在大肠杆菌中表达效率的途径
1、优化表达载体的设计
(1)提高启动子的转录效率
有效的转录起始是外源基因能否在宿主细胞中高效表达的关键步骤之一，转录起始的速率是基因表达的主要限速步骤。因此，选择强的可调控启动子及相关的调控序列，是组建一个高效表达载体首先要考虑的问题。
最理想的可调控启动子:
发酵早期阶段表达载体的启动子被紧紧地阻遏，这样可以避免出现表达载体不稳定、细胞生长缓慢或由于产物表达而引起细胞死亡等问题。当细胞数目达到一定的密度，通过多种诱导(如温度、药物等)使阻遏物失活，RNA聚合酶快速起始转录。
(2)保证核糖体结合位点的有效性
SD序列是指原核细胞mRNA 5`端非翻译区同16S rRNA 3`端的互补序列。按统计学的原则，一般SD
序列至少含AGGAGG序列中4个碱基。SD序列存在对原核细胞mRNA翻译起始至关重要。
(3)提供有效的转录终止区
在基因的3’端除了终止密码子之外，还要有一段富含A/T区域和一段富含G/C区域，G/C的区域又具有迴文结构，这段终止子转录后，形成的RNA具有茎环结构。这样可以防止由于克隆的外源基因表达干扰了载体系统的稳定性。
2、增加表达质粒的拷贝数和稳定性
多数情况下，目标基因的扩增程度同基因表达成正比，对于原核和酵母表达体系而言，选择高拷贝数的质粒，以其为基础，组建表达载体, 可以获得较高水平的表达。
表达载体的稳定性是维持基因表达的必需条件，而表达载体的稳定性不但同表达载体自身特性有关，也与受体细胞的特性密切相关。所以在实际运用时，尽量减少表达载体的大小、通过建立可整合到染色体中去的载体等方式，可以增加表达质粒的稳定性。
3、提高翻译水平的效率
(1)SD序列与起始密码子之间距离以9±3碱基为适宜。
(2)尽量避免使用罕用密码子如：AGG、AGA(Arg)、CUA(Leu)等，使用高频率的密码子。
(3)增加mRNA的稳定性。在外源基因的下游插入“大肠杆菌的重复性基因外迴文序列”或其他具有反
转重复顺序的DNA片段可起到稳定mRNA，提高表达水平作用。
4、减轻细胞的代谢负荷
外源基因在细菌中高效表达，必然影响宿主的生长和代谢，而细胞代谢的损伤，又必然影响外源基因的表达。合理地调节好宿主细胞的代谢负荷与外源基因高效表达的关系，是提高外源基因表达水平不可缺少的一个环节。
<1>诱导表达使细菌的生长与外源基因的表达分开成2个阶段。比如pET系列表达载体。
<2>表达载体的诱导复制将宿主菌的生长和表达质粒的复制分开。如pCI101是温度控制诱导DNA
复制的，其转化细菌后，25℃时宿主中仅有此质粒10拷贝，宿主细菌大量生长，但当温度升高至37℃时，质粒大量复制，每个细胞中质粒拷贝数可达1000个，结果外源基因的表达水平得到大大提高。5、提高表达蛋白的稳定性某些外源基因的表达产物会被宿主细胞的蛋白水解酶识别而降解。如果表达的外源蛋白具有相同或类似于宿主细胞天然蛋白的构象，则被降解的可能就会大大降低。
五、外源基因在大肠杆菌系统中表达应注意的问题有哪些？
答：启动子：探测启动子的最佳距离，采用鸟枪法筛选启动子，将合适大小的DNA片段克隆到启动子探针质粒上。
终止子：外源基因在强的启动子的控制下表达，容易发生转录过头现象，即RNA聚合酶滑过终止子结构继续转录质粒上邻近的DNA序列，形成长短不一的mRNA混合物，过长的转录物的产生在很大程度上会影响外源基因的表达，因此要选择和使用强的终止子。目前外源基因表达质粒中常用的终止子是来自大肠杆菌rRNA操纵子上的rrnT1T2以及T7噬菌体DNA上的T￠。对于一些终止作用较弱的终止子，通常可以采用二聚体终止子串联的特殊结构，以增强其转录终止作用。终止子也可以象启动子那样，通过特殊的探针质粒从细菌或噬菌体基因组DNA中克隆筛选。
核糖体结合位点：外源基因在大肠杆菌细胞中的表达不仅取决于转录启动的频率，而且在很大程度上还与mRNA的翻译起始效率密切相关。而mRNA的翻译起始效率主要由其5‘端的结构序列所决定，即核糖体结合位点（RBS）。目前广泛用于外源基因表达的大肠杆菌表达型质粒上，均含有与启动子来源相同的核糖体结合位点序列，序列和间隔是最佳的。
密码子：由于原核生物和真核生物基因组中密码子的使用频率具有较大程度的差异性，因此外源基因尤其是高等哺乳动物基因在大肠杆菌中高效翻译的一个重要因素是密码子的正确选择。一般而言，有两种策略可以使外源基因上的密码子在大肠杆菌细胞中获得表达：外源基因全合成；同步表达相关tRNA编码基因。
质粒拷贝数：质粒分子的过度增殖以及其后目的基因的高效表达势必会影响手提细胞的生长代谢，进而导致重组质粒的不稳定性以及目的基因宏观表达水平的下降，解决上述难题的一种有效策略是将重组质粒的扩增纳入可控制的轨道。
2014年9月，我迈入了人生中的一个崭新的阶段，开始在人生之书中写下属于自己的研究生的篇章。弹指间，八个月已然悄悄逝去，紧接着就即将迎来实习、毕业论文等毕业准备工作，因此有必要在现阶段对之前的学习生活进行总结，发现自己的不足之处，既是对自己的鞭策，也有助于对未来进行初步的规划。 一、思想方面 在思想方面，我一直对自己有较高的要求。大学时期我已递交入党申请书并成为入党积极分子，始终高标准要求自己。我注意学习先进的政治理论，关心国内国际大事，积极拥护党和国家的各项路线、方针、政策，自觉遵守法律、法规和学校的各项规章制度切实地提高了自己的思想认识，同时注重加强对外界时政的了解，通过学习，提高了自己的政治敏锐性和鉴别能力。 二、学习方面 经过慎重的斟酌，在第一学期初我选择了自己兴趣较为浓厚的财务管理方向为自己的学习研究方向，在此基础上我努力学习专业课程，并阅读了大量与本专业相关的书籍和论文，这既让我开阔了视野，也使我对自己研究方向的内容以及整个学科的结构有了进一步的认识。总体上，会计专业硕士研究生的课程学习并不是很重，但是老师的宽松对我来说就像是无形的压力，让我认识到自己还存在着太多太多知识上的盲区，有好多东西需要学习，同时身边每一位同学的优秀都使我不敢放松自己的学习，希望在有限的学生生涯中更多地学到更多东西。 除此之外，上研究生一来在学习方面我最大的感触就是学知识不再像大学里那样只明白是什么，怎样做就可以了，对于一个研究生来说这些都是远远不够的，我们要学会自己去思考为什么，学会分析，思维不能在局限于微观，而应该学会发散，从大局、整体、多角度思考问题。 三、社会实践及工作 我们终将都要走出校门，步入社会，而更早的接触工作，接触社会，不仅能够将自己所学的知识学以致用，并且能够帮助自己更好地认识现实的需要，认识自身的缺陷从而有机会弥补改正，而由于各种原因，在寒假期间我并未参加相关实习工作，这是使我感到十分遗憾的一件事。 四、未来规划 关于近期的未来规划，主要有一下几点： 首先，在毕业前争取成为预备党员，实现思想先入党，为建设中国特色社会主义社会贡献自己的力量； 其次，在学习方面，不仅要扩宽自己的知识面，也要学会在某一领域进行深入学习，多看中外文献，提升自身专业素养。同时，也要积极准备注册会计师考试，争取在毕业前可以通过两科； 最后，要踊跃参加学校举办的各种实践活动，提升自己的综合能力。 研究生的时光对我们来说只有一次.因此,我希望我的研究生生活应当这样度过:当我在毕业回首往事时,不因虚度年华而悔人最宝贵的恨,也不因碌碌无为而羞愧！
现代分子生物学 复习提纲 第一章绪论 第一节分子生物学的基本含义及主要研究内容 1 分子生物学Molecular Biology的基本含义 ?广义的分子生物学：以核酸和蛋白质等生物大分子的结构及其在遗传信息和细胞信息传递中的作用为研究 对象，从分子水平阐明生命现象和生物学规律。 ?狭义的分子生物学：偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或DNA的复制、转录、表达和调控 等过程，也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 1.1 分子生物学的三大原则 1) 构成生物大分子的单体是相同的 2) 生物遗传信息表达的中心法则相同 3) 生物大分子单体的排列（核苷酸、氨基酸）的不同 1.3 分子生物学的研究内容 ●DNA重组技术（基因工程） ●基因的表达调控 ●生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学） ●基因组、功能基因组与生物信息学研究 第二节分子生物学发展简史 1 准备和酝酿阶段 ?时间：19世纪后期到20世纪50年代初。 ?确定了生物遗传的物质基础是DNA。 DNA是遗传物质的证明实验一：肺炎双球菌转化实验 DNA是遗传物质的证明实验二：噬菌体感染大肠杆菌实验 RNA也是重要的遗传物质-----烟草花叶病毒的感染和繁殖过程 2 建立和发展阶段 ?1953年Watson和Crick的DNA双螺旋结构模型作为现代分子生物学诞生的里程碑。 ?主要进展包括： ?遗传信息传递中心法则的建立 3 发展阶段 ?基因工程技术作为新的里程碑，标志着人类深入认识生命本质并能动改造生命的新时期开始。 ? 第三节分子生物学与其他学科的关系 思考 ?证明DNA是遗传物质的实验有哪些？ ?分子生物学的主要研究内容。 ?列举5～10位获诺贝尔奖的科学家，简要说明其贡献。
结合着下载的资料复习吧~~~~ 绪论 分子生物学的发展简史 Schleiden和Schwann提出“细胞学说” 孟德尔提出了“遗传因子”的概念、分离定律、独立分配规律 Miescher首次从莱茵河鲑鱼精子中分离出DNA Morgan基因存在于染色体上、连锁遗传规律 Avery证明基因就是DNA分子，提出DNA是遗传信息的载体 McClintock首次提出转座子或跳跃基因概念 Watson和Crick提出DNA双螺旋模型 Crick提出了“中心法则” Meselson与Stah用N重同位素证明了DNA复制是一种半保留复制 Jacob和Monod提出了著名的乳糖操纵子模型 Arber首次发现DNA限制性内切酶的存在 Temin和Baltimore发现在病毒中存在以RNA为模板，逆转录成DNA的逆转录酶 哪几种经典实验证明了DNA是遗传物质? (Avery等进行的肺炎双球菌转化实验、Hershey 利用放射性同位素35S和32P分别标记T2噬菌体的蛋白质外壳和DNA) 第二章染色体与DNA 第一节染色体 一、真核细胞染色体的组成 DNA：组蛋白：非组蛋白：RNA = 1：1：(1-1.5)：0.05 （一）蛋白质（组蛋白、非组蛋白） （1）组蛋白：H1、H2A、H2B、H3、H4 功能：①核小体组蛋白（H2A、H2B、H3、H4）作用是将DNA分子盘绕成核小体
②不参加核小体组建的组蛋白H1，在构成核小体时起连接作用 （2）非组蛋白：包括以DNA为底物的酶、作用于组蛋白的酶、RNA聚合酶等。常见的有（HMG蛋白、DNA结合蛋白） 二、染色质 染色体：分裂期由染色质聚缩形成。 染色质：线性复合结构，间期遗传物质存在形式。 常染色质（着色浅） 具间期染色质形态特征和着色特征染色质 异染色质（着色深） 结构性异染色质兼性异染色质 （在整个细胞周期内都处于凝集状态）（特定时期处于凝集状态）三、核小体 由H2A、H2B、H3、H4各2 分子组成的八聚体和绕在八聚体外的DNA、一分 子H1组成。八聚体在中央，DNA分子盘绕在外，由此形成核心颗粒。,H1结合在核心颗粒外侧DNA双链的进出口端，如搭扣将绕在八聚体外DNA链固定，核心颗粒之间的连接部分为连接DNA。 核小体的定位对转录有促进作用
研究生自我总结10篇 研究生是高等教育的一种学历，一般由拥有硕士点、博士点的普通高等学校和研究生培养资格的科研机构开展，以研究生为最高学历，研究生毕业后，也可称研究生，含义为具有研究生学历的人。下面是小编为您收集整理的研究生自我总结，希望可以帮到您~ 篇一：研究生自我总结时光荏苒，岁月如梭。转眼之间我已经是一名研二的学生了。回望过去的这一年，不禁让我感慨万千，这一年时光不但充实了自我，而且也结交了许多良师益友，年华虽易逝，却带不走我的美好回忆。在这里对自己过去一年的学习、生活、科研等做一个小结，目的是总结经验，发现不足之处，以利于今后继续发扬优点，弥补不足，为将来适应社会做好准备，把自己的人生道路走得更稳、更好，更快成材以服务于祖国、人民和社会。 政治思想方面，虽然我还没有加入党组织，但是我始终以党员的标准要求自己，并积极向党组织靠拢。我注意学习先进的政治理论，关心国内国际大事，积极拥护党和国家的各项路线、方针、政策，自觉遵守法律、法规和学校的各项规章制度。同时，我清醒地意识到自己所担负的社会责任。对个人的人生理想和发展目标，我也有了相对成熟的认识和定位。 在学习方面，我努力学习专业课程，阅读了大量与本专业相关的书籍和论文，根据自身研究方向的要求，有针对性的认真研读了有关
核心课程。在导师的指导下，积极参与各项科研活动，在活动过程中，认真阅读教材、查阅学术资料和参考书籍，增强自己的实践动手能力。通过对研究方向的深入钻研，对专业领域的应用背景、科学前沿以及整个学科的结构都有了宏观、深入的认识，使自己具备了自我学习，认真思考、善于钻研的能力，为自己的科研工作打下扎实基础。在平时生活中，我能做到尊敬师长，团结同学，为人处世和善热情，和同学关系融洽，并积极参与各项集体活动。 今后，我将再接再厉，在以后的工作和学习中，不断地完善自我，相信这些经历和积累都将成为我人生道路上的宝贵财富。我将继续保持并发扬严谨治学的作风，努力成为一名优秀的工作者，做一个全面发展的社会主义建设者，做一个对国家、对社会有用的人。 篇二：研究生自我总结本人自XX年考取xx大学的研究生以来，经过两年的成长，使我在思想、学习、工作以及生活等各方都有了较大的进步： 在思想觉悟上，自从踏进校门那一刻起，我就对自己提出了明确的的要求。坚持用科学的思想来认识社会，进行教育探索和研究。并清醒地意识到自己身上所担负的责任，明确了新时期自己的人生理想和发展目标，并持有坚定的信心和勇气。 在专业课程的学习上，结合原来的学科背景和研究兴趣，我很快地确定了自己的研究方向和领域，并有针对性的认真研读了有关书籍杂志，学习了相关的必修与选修课程。为自己的科研工作打下扎实基础，在此期间，各门课程都取得了优异的成绩。在期末综合成绩排名
Section A 细胞与大分子 简述复杂大分子的生物学功能及与人类健康的关系。 Section C 核酸的性质 1.DNA的超螺旋结构的特点有哪些？ A 发生在闭环双链DNA分子上 B DNA双链轴线高卷曲，与简单的环状相比，连接数发生变化 C 当DNA扭曲方向与双螺旋方向相同时，DNA变得紧绷，为正超螺旋，反之变得松弛为负超螺旋。自然界几乎所有DNA分子超螺旋都为负的，因为能量最低。 2.简述核酸的性质。 A 核酸的稳定性：由于核酸中碱基对的疏水效应以及电荷偶极作用而趋于稳定 B 酸效应：在强酸和高温条件下，核酸完全水解，而在稀酸条件下，DNA的核苷键被选择性地断裂生成脱嘌呤核酸 C 碱效应：当PH超出生理范围时（7-8），碱基的互变异构态发生变化 D 化学变性：一些化学物质如尿素，甲酰胺能破坏DNA和RNA二级结构中的 而使核酸变性。 E 粘性：DNA的粘性是由其形态决定的，DNA分子细长，称为高轴比，可被机械力和超声波剪切而粘性下降。 F 浮力密度：1.7g/cm^3,因此可利用高浓度分子质量的盐溶液进行纯化和分析 G 紫外线吸收：核酸中的芳香族碱基在269nm 处有最大光吸收 H 减色性，热变性，复性。 思考题：提取细菌的质粒依据是核酸的哪些性质？ 质粒是抗性基因，，在基因组或者质粒DNA中用碱提取法。 Sectio C 课前提问 1.在1.5mL的离心管中有500μL，取出10 μL稀释至1000 μL后进行检测，测得A260=0.15。 问（1）：试管中的DNA浓度是多少？ 问（2）：如果测得A280=0.078, .A260/A280=？说明什么问题？ (1)稀释前的浓度：0.15/20=0.0075 稀释后的浓度：0.0075/100=0.75ug/ml （2）0.15/0.078=1.92〉1.8，说明DNA中混有RNA样品。 2.解释以下两幅图
研究生期末学习总结 时光飞逝，日月如梭。转眼之间我已经是一名研二的学生了。在过去的一年时间里，我在思想、学习、生活都有很大的收获。 在思想方面，我一直对自己有较高的要求。虽然我还没有加入党组织，但是我始终以共产党员的标准要求自己。我注意学习先进的政治理论，关心国内国际大事，积极拥护党和国家的各项路线、方针、政策，自觉遵守法律、法规和学校的各项规章制度。同时，我清醒地意识到自己所担负的社会责任。对个人的人生理想和发展目标，我也有了相对成熟的认识和定位。 在学习方面，我努力学习专业课程，并阅读了大量与本专业相关的书籍和论文，这既让我开阔了视野，也使我对自己研究方向的内容以及整个学科的结构有了进一步的认识。在英语学习方面，我顺利通过了大学英语六级考试，具备了较强的英语听、说、读、写能力。 在生活方面，我尊敬师长，团结同学，并积极参加学校各种文体活动。刚入学时，我就加入了校研究生会并在文艺部担任副部长职务，热情为同学们服务，认真完成各项工作。除此之外，我还加入了学校研究生舞蹈队和学院的舞蹈队，并参加各种文艺演出。 接下来的的日子，我应该更加努力学习，认真钻研专业知识，争取更好的成绩。 党员年终工作总结范文 回顾一年来的经历，有收获也有不足。思想上有了一定的进步，学习上也比较刻苦努力，现将我一年来的思想、工作和学习等方面的情况作一个总结性的汇报。
一、自觉加强理论学习，组织纪律性强 加强理论学习，首先是从思想上重视。理论源于实践，又高于实践。在过去的一年中，我主动加强对政治理论知识的学习，主要包括继续深入领会“三个代表”重要思想并配合支部的组织生活计划，切实地提高了自己的思想认识，同时注重加强对外界时政的了解，通过学习，提高了自己的政治敏锐性和鉴别能力，坚定了立场，坚定了信念，在大是大非问题面前，能够始终保持清醒的头脑。 今年我顺利转正，成为一名中共正式党员，这给了我无限的信心的同时也有更多的压力。时刻提醒着我注意，什么是一个党员该做的，什么是不该做的，更促进了我的进步。首先，我深刻而清楚地认识到自己的缺点和不足，并在生活中循序渐进地改善，一个人改正错误和缺点的过程我想不会再一朝一夕。所以我做好了充分的心理准备。尤其，在组织生活会上，同志们再次提出了我的不足之处，这使我感到自己还有很多路要走还有很多是要学，当然自己的努力是少不了的。我有信心明年总结的时候可以完全改正一些不足和缺点。因为我是一名党员了，就应该拿出吃苦耐劳的精神，如果连自己的缺点都不能克服还谈什么先锋模范作用。这一年里，我积极响应学校组织的多次党员活动，配合当前的理论前沿，为自己补充新鲜血液。 当然，加强理论学习仍将是今后工作和生活中的一项主要的内容。不断加强学习，以适应社会发展的需要，不断的提高自己的政治理论素质，以适应社会经济发展的客观要求。 二、学习刻苦，积极参加各种活动 作为新世纪的高等学府的学子，我很骄傲，当然压力也从来没有离开过。研究生的课程学习并不是很重，但是老师的宽松对我来说就像是无形的压力。突然感觉自己好像有好多东西需要学习，所以我不敢放松学习，希望在有限的学生生涯中更多地学到点东西,为将来能更好地为人民服务作准备。所以，我从来不旷课，课上也是认真听讲，当然学习之余也应该劳逸结合。 在今年学校的运动会上，我报名参加了舞蹈队的表演，从这次活动中，不但认识了不少同学，也给了我一个锻炼自己交际能力的场所，增加了自己的群众基础。自己从这次活动中收获不少，就是从这次活动中，我知道了，只要有决心，没有做不到的事。 三、严格要求自己，养成良好的生活习惯 进入研究生的学习和生活，相对来说环境比较宽松，我刚开始也放松了对自己的要求，直接的表现就是早上起床经常不叠被了。在一次学习马祖光院士的活动中，我受到了深深的震撼，一位院士有着如此节俭的生活，对一件事可以几十年如一日的坚持完成，多么伟大的人格啊!这使我反省自己，连起码的生活礼仪都不注意，在关键时刻也许想注意都难了。从那一天起，我就再也没有不叠被，感觉自己从那时起，就有了生活原则，有了自我监督机制，每天都会想想今天还
现代分子生物学总结(朱玉贤、最新版)
一、绪论 两个经典实验 1、肺炎球菌在老鼠体内的毒性实验：先将光滑型致病菌（S型）烧煮杀活性以后、以及活的粗糙型细菌（R型）分别侵染小鼠发现这些细菌自然丧失了治病能力；当他们将经烧煮杀死的S型细菌和活的R型细菌混合再感染小鼠时，实验小鼠每次都死亡。解剖死鼠，发现有大量活的S型细菌。实验表明，死细菌DNA 进行了可遗传的转化，从而导致小鼠死亡。 2、T2噬菌体感染大肠杆菌：当细菌培养基中分别带有35S或32P标记的氨基酸或核苷酸，子代噬菌体就相应含有35S标记的蛋白质或32P标记的核酸。分别用这些噬菌体感染没有放射性标记的细菌，经过1~2个噬菌体DNA 复制周期后进行检测，子代噬菌体中几乎不含带35S标记的蛋白质，但含30%以上的32P 标记。说明在噬菌体传代过程中发挥作用的可能是DNA而不是蛋白质。 基因的概念：基因是产生一条多肽链或功能RNA分子所必需的全部核苷酸序列。
二、染色体与DNA 嘌呤嘧啶 腺嘌呤鸟嘌呤胞嘧啶尿嘧啶胸腺嘧啶 染色体 性质：1、分子结构相对稳定；2、能够自我复制，使亲、子代之间保持连续性；3、能指导蛋白质的合成，从而控制生命过程；4、能产生可遗传的变异。 组蛋白一般特性：1、进化上极端保守，特别是H3、H4；2、无组织特异性；3、肽链上氨基酸分布的不对称性；4、存在较普遍的修饰作用；5、富含赖氨酸的组蛋白H5 非组蛋白：HMG蛋白；DNA结合蛋白；A24非组蛋白
真核生物基因组DNA 真核细胞基因组最大特点是它含有大量的重复序列，而且功能DNA序列大多被不编码蛋白质的非功能蛋白质所隔开。人们把一种生物单倍体基因组DNA的总量称为C值，在真核生物中C 值一般是随着生物进化而增加的，高等生物的C 值一般大于低等动物，但某些两栖类的C值甚至比哺乳动物还大，这就是著名的C值反常现象。真核细胞DNA序列可被分为3类：不重复序列、中度重复序列、高度重复序列。 真核生物基因组的特点：1、真核生物基因组庞大，一般都远大于原核生物的基因组；2、真核基因组存在大量的的重复序列；3、真核基因组的大部分为非编码序列，占整个基因组序列的90%以上，这是真核生物与细菌和病毒之间的最主要的区别；4、真核基因组的转录产物为单顺反之；5、真核基因组是断裂基因，有内含子结构；6、真核基因组存在大量的顺式元件，包括启动子、增强子、沉默子等；7、真核基因组中存在大量的DNA多态性；8、真核基因组具有端粒结构。
分子生物学 第一章绪论 分子生物学研究内容有哪些方面？ 1、结构分子生物学； 2、基因表达的调节与控制； 3、DNA重组技术及其应用； 4、结构基因组学、功能基因组学、生物信息学、系统生物学 第二章DNA and Chromosome 1、DNA的变性：在某些理化因素作用下，DNA双链解开成两条单链的过程。 2、DNA复性：变性DNA在适当条件下，分开的两条单链分子按照碱基互补原则重新恢复天然的双螺旋构象的现象。 3、Tm(熔链温度)：DNA加热变性时，紫外吸收达到最大值的一半时的温度，即DNA分子内50%的双链结构被解开成单链分子时的温度） 4、退火：热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，称为退火 5、假基因：基因组中存在的一段与正常基因非常相似但不能表达的DNA序列。以Ψ来表示。 6、C值矛盾或C值悖论:C值的大小与生物的复杂度和进化的地位并不一致，称为C值矛盾或C值悖论(C-Value Paradox)。 7、转座：可移动因子介导的遗传物质的重排现象。 8、转座子：染色体、质粒或噬菌体上可以转移位置的遗传成分 9、DNA二级结构的特点：1）DNA分子是由两条相互平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成；2）DNA分子中的脱氧核苷酸和磷酸交替连接，排在外侧，构成基本骨架，碱基排列在外侧；3）DNA分子表面有大沟和小沟；4）两条链间存在碱基互补，通过氢键连系，且A=T、G ≡ C（碱基互补原则）；5）螺旋的螺距为3.4nm，直径为2nm，相邻两个碱基对之间的垂直距离为0.34nm，每圈螺旋包含10个碱基对；6）碱基平面与螺旋纵轴接近垂直，糖环平面接近平行 10、真核生物基因组结构：编码蛋白质或RNA的编码序列和非编码序列，包括编码区两侧的调控序列和编码序列间的间隔序列。 特点：1）真核基因组结构庞大哺乳类生物大于2X109bp；2）单顺反子（单顺反子：一个基因单独转录，一个基因一条mRNA，翻译成一条多肽链；）3）基因不连续性断裂基因（interrupted gene）、内含子(intron)、外显子(exon)；4）非编码区较多，多于编码序列(9:1) 5）含有大量重复序列 11、Histon(组蛋白)特点：极端保守性、无组织特异性、氨基酸分布的不对称性、可修饰作用、富含Lys的H5 12、核小体组成：由组蛋白和200bp DNA组成 13、转座的机制：转座时发生的插入作用有一个普遍的特征，那就是受体分子中有一段很短的被称为靶序列的DNA会被复制，使插入的转座子位于两个重复的靶序列之间。 复制型转座：整个转座子被复制，所移动和转位的仅为原转座子的拷贝。 非复制型转座：原始转座子作为一个可移动的实体直接被移位。 第三章DNA Replication and repair 1、半保留复制：DNA生物合成时，母链DNA解开为两股单链，各自作为模板(template)按碱
第一章绪论 2.写出DNA和RNA的英文全称。 答：脱氧核糖核酸（DNA, Deoxyribonucleic acid），核糖核酸（RNA, Ribonucleic acid）4.早期主要有哪些实验证实DNA是遗传物质？写出这些实验的主要步骤。 答：一，肺炎双球菌感染实验，1，R型菌落粗糙，菌体无多糖荚膜，无毒，注入小鼠体内后，小鼠不死亡。2，S型菌落光滑，菌体有多糖荚膜，有毒，注入到小鼠体内可以使小鼠患病死亡。3，用加热的方法杀死S型细菌后注入到小鼠体内，小鼠不死亡； 二，噬菌体侵染细菌的实验：1，噬菌体侵染细菌的实验过程：吸附→侵入→复制→组装→释放。2，DNA中P的含量多，蛋白质中P的含量少；蛋白质中有S而DNA中没有S，所以用放射性同位素35S标记一部分噬菌体的蛋白质，用放射性同位素32P标记另一部分噬菌体的DNA。用35P标记蛋白质的噬菌体侵染后，细菌体内无放射性，即表明噬菌体的蛋白质没有进入细菌内部；而用32P标记DNA的噬菌体侵染细菌后，细菌体内有放射性，即表明噬菌体的DNA进入了细菌体内。 三，烟草TMV的重建实验：1957年，Fraenkel-Conrat等人，将两个不同的TMV株系（S株系和HR株系）的蛋白质和RNA分别提取出来，然后相互对换，将S株系的蛋白质和HR株系的RNA，或反过来将HR株系的蛋白质和S株系的RNA放在一起，重建形成两种杂种病毒，去感染烟草叶片。 6.说出分子生物学的主要研究内容。 答：1，DNA重组技术；2，基因表达调控研究；3，生物大分子的结构功能研究----结构分子生物学；4，基因组、功能基因组与生物信息学研究。 第二章染色体与DNA 3.简述真核生物染色体的组成及组装过程 真核生物染色体除了性细胞外全是二倍体，DNA以及大量蛋白质及核膜构成的核小体是染色体结构的最基本单位。核小体的核心是由4种组蛋白（H2A、H2B、H3和H4）构成的扁球状8聚体。 蛋白质包括组蛋白与非组蛋白。组蛋白是染色体的结构蛋白，它与DNA组成核小体，含有大量赖氨酸核精氨酸。非组蛋白包括酶类与细胞分裂有关的蛋白等，他们也有可能是染色体的结构成分 由DNA和组蛋白组成的染色体纤维细丝是许多核小体连成的念珠状结构。 1.由DNA与组蛋白包装成核小体，在组蛋白H1的介导下核小体彼此连接形成直径约10nm的核小体串珠结构，这是染色质包装的一级结构。 2.在有组蛋白H1存在的情况下，由直径10nm的核小体串珠结构螺旋盘绕，每圈6个核小体，形成外径为30nm，内径10nm，螺距11nm的螺线管，这是染色质包装的二级结构。 3.由螺线管进一步螺旋化形成直径为0.4μm的圆筒状结构，称为超螺线管，这是染色
分子生物学总结完整版 1、结构分子生物学； 2、基因表达的调节与控制； 3、DNA重组技术及其应用； 4、结构基因组学、功能基因组学、生物信息学、系统生物学 第二章DNA and Chromosome 1、DNA的变性：在某些理化因素作用下，DNA双链解开成两条单链的过程。 2、 DNA复性：变性DNA在适当条件下，分开的两条单链分子按照碱基互补原则重新恢复天然的双螺旋构象的现象。 3、 Tm(熔链温度)： DNA加热变性时，紫外吸收达到最大值的一半时的温度，即DNA分子内50%的双链结构被解开成单链分子时的温度） 4、退火：热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，称为退火 5、假基因：基因组中存在的一段与正常基因非常相似但不能表达的DNA序列。以Ψ来表示。 6、 C值矛盾或C值悖论:C值的大小与生物的复杂度和进化的地位并不一致，称为C值矛盾或C值悖论(C-Value Paradox)。 7、转座：可移动因子介导的遗传物质的重排现象。 8、转座子：染色体、质粒或噬菌体上可以转移位置的遗传成分
9、 DNA二级结构的特点：1）DNA分子是由两条相互平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成；2）DNA分子中的脱氧核苷酸和磷酸交替连接，排在外侧，构成基本骨架，碱基排列在外侧；3）DNA分子表面有大沟和小沟；4）两条链间存在碱基互补，通过氢键连系，且A=T、G ≡ C（碱基互补原则）；5）螺旋的螺距为 3、4nm，直径为2nm，相邻两个碱基对之间的垂直距离为0、34nm，每圈螺旋包含10个碱基对；6）碱基平面与螺旋纵轴接近垂直，糖环平面接近平行 10、真核生物基因组结构：编码蛋白质或RNA的编码序列和非编码序列，包括编码区两侧的调控序列和编码序列间的间隔序列。特点：1）真核基因组结构庞大哺乳类生物大于2X109bp；2）单顺反子（单顺反子：一个基因单独转录，一个基因一条mRNA，翻译成一条多肽链；）3）基因不连续性断裂基因（interrupted gene）、内含子(intron)、外显子(exon)；4）非编码区较多，多于编码序列(9:1) 5）含有大量重复序列1 1、Histon(组蛋白)特点：极端保守性、无组织特异性、氨基酸分布的不对称性、可修饰作用、富含Lys的H5 12、核小体组成： 由组蛋白和200bp DNA组成 13、转座的机制：转座时发生的插入作用有一个普遍的特征，那就是受体分子中有一段很短的被称为靶序列的DNA会被复
研究生学习心得体会 篇一：研究生学习心得体会 研究生学习心得体会 时光荏苒，岁月如梭，三年的研究生学习生涯即将过半，对自己这一年半的学习情况做一个系统的整理，既是对之前的总结，也是对后面三个学期的展望。 XX年9月开始了自己的河北大学行政管理专业的研究生涯，第一个学期的课程安排比较全面，既有专业课程的传授，也有政治理论课程的熏陶，还有公共英语的学习。按照专业课老师们给的书单，自己阅读了一些专科课方面的论文以及学术著作；此外，自己还阅读了几部二战时期的人物传记，比如丘吉尔、罗斯福和戴高乐等。研一下学期则进入了全面的专业课程授课阶段，四门专业课加一门公共外语，结合四门专业课的内容以及写结课论文的过程，自己阅读了约翰洛克的《政府论》、阎照祥的《英国政治制度史》、托克维尔《论美国的民主》等著作以及一些中西方民主方面的学术论文，对自己这个学期专业课程的学习提供了很多的帮助和知识的补充，受益颇多的一个学期。 一年的时间很快，已经来到了研究生阶段的第二个年头，研二的这个学期也是研究生阶段最后一个安排课程的学期，显得格外珍惜，自己这学期做到了全勤，好好珍惜自己二十年学生生涯的最后一个学期，当然了，这也与这个学期的2
门课程的吸引力程度呈正相关，一门课是人力资源管理的课程，一门是专业外语，都是自己本科时的老师，均是很有个人魅力的老师，所以同学们的出勤率显得格外的高；而自己还有一个原因，自己的毕业论文方向选的是人力资源管理，所以每节课都在很认真的听课，记笔记。按照老师给出的书单，正在读HR方面的著作，目前已经读过了美国学者罗纳德与约翰共同写就得《公共部门人力资源管理：系统与战略》，以及即将读完的李宝元老师的《现代公共人力资源开发与管理通论》，都是很有内涵的著作，使自己对HR方面的理解更加的深入与通透，也对自己的毕业论文的思路提供了很大的帮助。 以上基本就是自己这一年半研究生总共三个学期的专业课程学习情况的概况，知识来自于生活的各个方面，而不仅仅在课堂，生活中处处可以有收获，通过与人的交流，通过一次旅行，通过发生在身边的一件小事，而自己在学校的这一年半的时间里，除了上课时与读专业著作所获得的知识以外，还通过其他的一些途径获得了许多有益的知识。 首先，便是与自己朝夕相处的同学们，进入研究生阶段，同学们都经历了大学时期的洗礼，变的更加成熟与理性，大家相互之间交流起来显得更加的从容与方便，本科时大家学的专业各不相同，交流之余也会了解到同学所学专业方面的的知识内容，比如同学有学习经济学的，可以通过他了解经
第一章、基因的结构和功能实体及基因组 1、基因定义 基因（遗传因子）是遗传的物质基础，是DNA（脱氧核糖核酸）分子上具有遗传信息的特定核苷酸序列的总称，携带有遗传信息的DNA序列，是具有遗传效应的DNA分子片段，是控制性状的基本遗传单位，通过指导蛋白质的合成来表达自己所携带的遗传信息，从而控制生物个体的性状表现。 2、DNA修复 DNA修复（DNA repairing）是细胞对DNA受损伤后的一种反应，这种反应可能使DNA结构恢复原样，重新能执行它原来的功能；但有时并非能完全消除DNA的损伤，只是使细胞能够耐受这DNA的损伤而能继续生存。也许这未能完全修复而存留下来的损伤会在适合的条件下显示出来（如细胞的癌变等），但如果细胞不具备这修复功能，就无法对付经常在发生的DNA损伤事件，就不能生存。对不同的DNA损伤，细胞可以有不同的修复反应。3、DNA损伤 DNA损伤是复制过程中发生的DNA核苷酸序列永久性改变，并导致遗传特征改变的现象。情况分为：substitutation （替换）deletion （删除）insertion （插入）exon skipping （外显子跳跃）。 DNA损伤的改变类型：a、点突变：指DNA上单一碱基的变异。嘌呤替代嘌呤（A与G之间的相互替代）、嘧啶替代嘧啶（C与T之间的替代）称为转换（transition）；嘌呤变嘧啶或嘧啶变嘌呤则称为颠换（transvertion）。b、缺失：指DNA链上一个或一段核苷酸的消失。c、插入：指一个或一段核苷酸插入到DNA链中。在为蛋白质编码的序列中如缺失及插入的核苷酸数不是3的整倍数，则发生读框移动（reading frame shift），使其后所译读的氨基酸序列全部混乱，称为移码突变（frame-shift mutaion）。d、倒位或转位：（transposition）指DNA链重组使其中一段核苷酸链方向倒置、或从一处迁移到另一处。 e、双链断裂：对单倍体细胞一个双链断裂就是致死性事件。 4、同源重组 同源重组，（Homologus Recombination)是指发生在姐妹染色单体（sister chromatin) 之间或同一染色体上含有同源序列的DNA分子之间或分子之内的重新组合。同源重组需要一系列的蛋白质催化，如原核生物细胞内的RecA、RecBCD、RecF、RecO、RecR等；以及真核生物细胞内的Rad51、Mre11-Rad50等等。同源重组反应通常根据交叉分子或holiday 结构（Holiday Juncture Structure) 的形成和拆分分为三个阶段，即前联会体阶段、联会体形成和Holiday 结构的拆分。 a、基因敲除 基因敲除（geneknockout），是指对一个结构已知但功能未知的基因，从分子水平上设计实验，将该基因去除，或用其它顺序相近基因取代，然后从整体观察实验动物，推测相应基因的功能。这与早期生理学研究中常用的切除部分-观察整体-推测功能的三部曲思想相似。基因敲除除可中止某一基因的表达外，还包括引入新基因及引入定点突变。既可以是用突变基因或其它基因敲除相应的正常基因，也可以用正常基因敲除相应的突变基因。 b、因转移法 同源重组(homologousrecombination)是将外源基因定位导人受体细胞染色体上的方法，因为在该座位有与导人基因同源的序列，通过单一或双交换，新基因片段可替换有缺陷的基因片段，达到修正缺陷基因的目的。位点特异性重组是发生在两条DNA链特异位点上的重组，重组的发生需一段同源序列即特异性位点(又称附着点；attachmentsite，att)和位点特异性的蛋白因子即重组酶参与催化。重组酶仅能催化特异性位点间的重组，因而重组具有特异性和高度保守性。
研究生心得体会 篇一：研究生学习心得体会 研究生学习心得体会 时光荏苒，岁月如梭，三年的研究生学习生涯即将过半，对自己这一年半的学习情况做一个系统的整理，既是对之前的总结，也是对后面三个学期的展望。 XX年9月开始了自己的河北大学行政管理专业的研究生涯，第一个学期的课程安排比较全面，既有专业课程的传授，也有政治理论课程的熏陶，还有公共英语的学习。按照专业课老师们给的书单，自己阅读了一些专科课方面的论文以及学术著作；此外，自己还阅读了几部二战时期的人物传记，比如丘吉尔、罗斯福和戴高乐等。研一下学期则进入了全面的专业课程授课阶段，四门专业课加一门公共外语，结合四门专业课的内容以及写结课论文的过程，自己阅读了约翰洛克的《政府论》、阎照祥的《英国政治制度史》、托克维尔《论美国的民主》等著作以及一些中西方民主方面的学术论文，对自己这个学期专业课程的学习提供了很多的帮助和知识的补充，受益颇多的一个学期。 一年的时间很快，已经来到了研究生阶段的第二个年头，研二的这个学期也是研究生阶段最后一个安排课程的学期，显得格外珍惜，自己这学期做到了全勤，好好珍惜自己二十年学生生涯的最后一个学期，当然了，这也与这个学期的2
门课程的吸引力程度呈正相关，一门课是人力资源管理的课程，一门是专业外语，都是自己本科时的老师，均是很有个人魅力的老师，所以同学们的出勤率显得格外的高；而自己还有一个原因，自己的毕业论文方向选的是人力资源管理，所以每节课都在很认真的听课，记笔记。按照老师给出的书单，正在读HR方面的著作，目前已经读过了美国学者罗纳德与约翰共同写就得《公共部门人力资源管理：系统与战略》，以及即将读完的李宝元老师的《现代公共人力资源开发与管理通论》，都是很有内涵的著作，使自己对HR方面的理解更加的深入与通透，也对自己的毕业论文的思路提供了很大的帮助。 以上基本就是自己这一年半研究生总共三个学期的专业课程学习情况的概况，知识来自于生活的各个方面，而不仅仅在课堂，生活中处处可以有收获，通过与人的交流，通过一次旅行，通过发生在身边的一件小事，而自己在学校的这一年半的时间里，除了上课时与读专业著作所获得的知识以外，还通过其他的一些途径获得了许多有益的知识。 首先，便是与自己朝夕相处的同学们，进入研究生阶段，同学们都经历了大学时期的洗礼，变的更加成熟与理性，大家相互之间交流起来显得更加的从容与方便，本科时大家学的专业各不相同，交流之余也会了解到同学所学专业方面的的知识内容，比如同学有学习经济学的，可以通过他了解经
现代分子生物学考研复习资料整理 第一章绪论 分子生物学：是研究核酸、蛋白质等所有生物大分子的形态、结构及其重要性、规律性和相互关系的科学 分子生物学的主要研究内容 1、DNA重组技术 2、基因表达调控研究 3、生物大分子的结构功能研究——结构分子生物学 4、基因组、功能基因组与生物信息学研究 5、DNA的复制转录和翻译 第二章染色体与DNA 半保留复制：DNA在复制过程中碱基间的氢键首先断裂，双螺旋解旋并被分开，每条链分别作为模板合成新链，产生互补的两条链。这样新形成的两个DNA分子与原来DNA分子的碱基顺序完全一样，因此，每个子代分子的一条链来自亲代DNA，另一条链则是新合成的，所以这种复制方式被称为DNA半保留复制 DNA半不连续复制：DNA双螺旋的两条链反向平行，复制时，前导链DNA的合成以5′-3′方向，随着亲本双链体的解开而连续进行复制；后随链在合成过程中，一段亲本DNA单链首先暴露出来，然后以与复制叉移动相反的方向、按照5′-3′方向合成一系列的冈崎片段，然后再把它们连接成完整的后随链，这种前导链的连续复制和后随链的不连续复制称为DNA 的半不连续复制 原核生物基因组结构特点：1、基因组很小，大多只有一条染色体2、结构简练3、存在转录单元，多顺反子4、有重叠基因 真核生物基因组的结构特点：1、真核基因组庞大，一般都远大于原核生物的基因组2、真核基因组存在大量的重复序列3、真核基因组的大部分为非编码序列，占整个基因组序列的90％以上，该特点是真核生物与细菌和病毒之间最主要区别4、真核基因组的转录产物为单顺反子5、真核基因是断裂基因，有内含子结构6、真核基因组存在大量的顺式作用元件，包括启动子、增强子，沉默子等7、真核基因组中存在大量的DNA多态性8、真核基因组具有端粒结构 DNA转座（移位）是由可移位因子介导的遗传物质重排现象 DNA转座的遗传学效应：1、转座引入插入突变2、转座产生新的基因3、转座产生的染色体畸变4、转座引起生物进化 转座子分为插入序列和复合型转座子两大类 环状DNA复制方式：θ型、滚环型和D-环型 第三章生物信息的传递（上）从DNA到RNA 转录：指拷贝出一条与DNA链序列完全相同的RNA单链的过程 启动子：是一段位于结构基因5′段上游区的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之与模板DNA准确地结合并具有转录起始的特异性 原核生物启动子结构：存在位于-10bp处的TATA区和-35bp处的TTGACA区，其是RNA聚合酶与启动子的结合位点，能与σ因子相互识别而具有很高的亲和力 终止子：是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列（促进转录终止的DNA序列） 终止子的类型：不依赖于ρ因子和依赖于ρ因子 增强子：能增强或促进转录起始的序列 增强子的特点：1、远距离效应2、无方向性3、顺式调节4、无物种和基因的特异性5、具
第一章、基因的结构与功能实体及基因组 1、基因定义 基因(遗传因子)就是遗传的物质基础,就是DNA(脱氧核糖核酸)分子上具有遗传信息的特定核苷酸序列的总称,携带有遗传信息的DNA序列,就是具有遗传效应的DNA分子片段,就是控制性状的基本遗传单位,通过指导蛋白质的合成来表达自己所携带的遗传信息,从而控制生物个体的性状表现。 2、DNA修复 DNA修复(DNA repairing)就是细胞对DNA受损伤后的一种反应,这种反应可能使DNA结构恢复原样,重新能执行它原来的功能;但有时并非能完全消除DNA的损伤,只就是使细胞能够耐受这DNA的损伤而能继续生存。也许这未能完全修复而存留下来的损伤会在适合的条件下显示出来(如细胞的癌变等),但如果细胞不具备这修复功能,就无法对付经常在发生的DNA 损伤事件,就不能生存。对不同的DNA损伤,细胞可以有不同的修复反应。 3、DNA损伤 DNA损伤就是复制过程中发生的DNA核苷酸序列永久性改变,并导致遗传特征改变的现象。情况分为:substitutation (替换)deletion (删除)insertion (插入)exon skipping (外显子跳跃)。DNA损伤的改变类型:a、点突变:指DNA上单一碱基的变异。嘌呤替代嘌呤(A与G之间的相互替代)、嘧啶替代嘧啶(C与T之间的替代)称为转换(transition);嘌呤变嘧啶或嘧啶变嘌呤则称为颠换(transvertion)。b、缺失:指DNA链上一个或一段核苷酸的消失。c、插入:指一个或一段核苷酸插入到DNA链中。在为蛋白质编码的序列中如缺失及插入的核苷酸数不就是3的整倍数,则发生读框移动(reading frame shift),使其后所译读的氨基酸序列全部混乱,称为移码突变(frame-shift mutaion)。d、倒位或转位:(transposition) 指DNA链重组使其中一段核苷酸链方向倒置、或从一处迁移到另一处。e、双链断裂:对单倍体细胞一个双链断裂就就是致死性事件。 4、同源重组 同源重组,(Homologus Recombination)就是指发生在姐妹染色单体(sister chromatin) 之间或同一染色体上含有同源序列的DNA分子之间或分子之内的重新组合。同源重组需要一系列的蛋白质催化,如原核生物细胞内的RecA、RecBCD、RecF、RecO、RecR等;以及真核生物细胞内的Rad51、Mre11-Rad50等等。同源重组反应通常根据交叉分子或holiday结构(Holiday Juncture Structure) 的形成与拆分分为三个阶段,即前联会体阶段、联会体形成与Holiday 结构的拆分。 a、基因敲除 基因敲除(geneknockout),就是指对一个结构已知但功能未知的基因,从分子水平上设计实验,将该基因去除,或用其它顺序相近基因取代,然后从整体观察实验动物,推测相应基因的功能。这与早期生理学研究中常用的切除部分-观察整体-推测功能的三部曲思想相似。基因敲除除可中止某一基因的表达外,还包括引入新基因及引入定点突变。既可以就是用突变基因或其它基因敲除相应的正常基因,也可以用正常基因敲除相应的突变基因。 b、因转移法 同源重组(homologousrecombination)就是将外源基因定位导人受体细胞染色体上的方法,因为在该座位有与导人基因同源的序列,通过单一或双交换,新基因片段可替换有缺陷的基因片段,达到修正缺陷基因的目的。位点特异性重组就是发生在两条DNA链特异位点上的重组,重组的发生需一段同源序列即特异性位点(又称附着点;attachmentsite,att)与位点特异性的蛋白因子即重组酶参与催化。重组酶仅能催化特异性位点间的重组,因而重组具有特异性与高度保守性。 5、碱基错配对修复
分子生物学实习总结 三天的分子生物学实习，我能认真听老师的讲解和很好的按照老师的安排完成实验。期间，接触和学习到了很多有关分子生物学实验的方法、仪器的使用、技术，而且对分子生物学实验有一个大致的了解，学习到很多以前没有接触过的知识。 这几天来做的不足的地方有： 1.预习不够充分。只是浏览了实验报告上的原理、操作等内容，并没有深入了解每一个步骤的操作会对实验有什么的作用和影响。实验失败了，不能自主找到原因。 2.实验操作过程不够细心。实验要求十分细心，严谨和专注。实验中很多细小的地方还是没有很好的注意到。 3.遇到不懂的没有及时发问。实验就是一个让我们实操的过程，一边操作一边巩固书本上的知识。过程中，遇到不明白的地方应该及时问别人活着自己翻阅资料，力求把实验弄透彻。 但是我还是有很多收获的： 1.对分子生物学实验有了了解。例如实验的基本的流程和操作，常用的方法等基础知识已经有了一定了解，对以后的实验会有一定的帮助。 2.最基本的移液枪、离心机、涡旋器等的使用还有实验中的PCR仪、电泳等有一定的认。 3.学会了严谨和细心。实验所用的材料都是比较昂贵的，而且实验只要一步错了，就得重做。所以需要非常严谨。不仅仅是分子生物学实验，其他实验也要求，所以培养这个有点对以后的实验非常有好处。 4.学会了坚持。很多次因为实验做的时间很长，大家都会很累，但是，还是要坚持，一点点累都受不了是不能把实验做好的。开始慢慢了解到做科研的人员的辛酸，长时间整天呆在实验室做实验，这需要很大的毅力。 5.把握实验机会，让自己学得更多。实验过程中，只要有实操的机会，我都会去操作。因为说和做是不一样的。而且在操作中能加深巩固知识和学得更加深入。 三天的分子生物学实习虽然很累，因为要天天去院楼，而却实验时间都比较长。但是 还是很有意义的，因为学习到很到东西，收获了很多。 老师也为我们准备了很多的材料和准备，实验才做得那么快和顺利，其实，实验室简 化了很多了，而且我们所做的实验都是已经设计好的，按照操作做就行了。如果时间和资 金允许，应该设立一些自主完成的实验，这样可以培养我们更加多的能力，开阔知识面和 拓宽思维。