细胞共培养实验的步骤及方法
一、技术简介
细胞共培养是指不同的细胞共同培养。共培养体系主要用于诱导细胞向另一种细胞分化，诱导细胞自身分化，维持细胞功能和活力，对细胞增殖进行调控等。细胞共培养体系包括直接共培养体系和间接共培养体系。直接共培养体系，即将2种或2种以上的细胞同时或分别接种于同一孔中，不同种类的细胞之间直接接触，研究分泌的细胞因子或直接接触等相互作用方式对细胞的影响；间接共培养体系，即将2种或2种以上的细胞分别接种于不同的载体上，然后将这两种载体置于同一培养环境之中，使不同种类的细胞共用同一种培养体系而不直接接触，从而研究细胞分泌和代谢产生的物质对另一种细胞的影响。
Transwell共培养可实现非接触性共培养，主要是运用一种特殊的共培养工具进行细胞共培养研究，探讨两种细胞的相互作用情况。transwell小室放入培养板中，小室内称为上室，培养板内称为下室，上下层有一张有通透性的聚碳酸酯膜，这层膜带有微孔，孔径最大为12.0 μm，最小为0.1 μm，小于3.0 μm孔径条件下，细胞不会迁徙通过，使得培养的两细胞不能相互接触。
二、实验流程
A．直接共培养
1. 制备细胞悬液：消化细胞，终止消化后离心弃去培养液，用PBS洗1-2遍，
用含BSA的无血清培养基重悬，调整细胞密度。
2. 将两种细胞按照一定比例在同一培养皿中共同培养。
3. 显微镜下观察细胞形态变化和增殖情况。
4. 结果统计分析。
B．Transwell共培养
1. 制备细胞悬液：消化细胞，终止消化后离心弃去培养液，用PBS洗1-2遍，
用含BSA的无血清培养基重悬，调整细胞密度。
2. 接种细胞：Transwell上下室分别接种细胞A和细胞B悬液。
3. 显微镜下观察上下室细胞形态变化，必要时可进行相关的染色鉴定。
4. 结果统计分析。