葛粉中葛根素的高效液相色谱分析
提要：目的：测定葛粉中葛根素的含量。方法：用HPLC法测定，以MeOH －H2O－HAc（30：70：0.5）为流动相，250nm为检测波长。结果：葛根素呈良好的线性关系，平均回收率为98.6%, RSD为1.76%。结论：该法简单、快速、准确。
关键词：葛粉;葛根素;HPLC
Study 0fPueraria in Pueraria Powder by Reversed-phase High Performance Liquid Chromatography
LI Hong-yu,DAI Shi-wen, SHOU Dian ,ZHANG Jian-min,YU Zhong-ming
(Zhejiang Academy of Traditional Chinese Medicine, Hangzhou 310017,China)
Abstract:Object:Determination of Pueraria in Pueraria Powder Methods: Puerariawere determined by HPLC.The mobile phase was MeOH－H2O－HAc（30：70：0.5）.Detection wavelength was at 250nm.Results: Pueraria showed a good linear relationship.The average recovery was 98.6% and RSD was 1.76%.Conclusion:This method was simple,quick and accurate.
Key words: Pueraria Powder ; Pueraria ;HPLC
葛根为豆科植物野葛Pueraria lobata (Willd.) Ohwi的干燥根,是常用中药材,具有解肌退热，生津，透疹，升阳止泻功效，用于外感发热头痛、项背强痛，口渴，消渴，麻疹不透，热痢，泄泻，高血压颈项强痛等[1]。现代研究证实，葛根中的主要有效成分为葛根素等异黄酮类化合物，具有抗炎解热、扩张冠状动脉血管、增加冠状动脉血流量的作用，同时也有降低血压的作用。有关葛根中葛根素等异黄酮的含量测定研究已有不少报道[2-5]，但对葛粉中葛根素含量测定报道不多。本文对葛粉中葛根素的提取条件和测试条件等进行比较研究,并采用高效液相色谱法对葛粉样品进行了定量分析, 结果令人满意。
1 实验部分
1.1 仪器与试剂
岛津LC－10Atvp高效液相色谱仪；SPD－10 Avp紫外检测器；岛津UV－265紫外分光光度仪，多功能榨汁机/搅拌机SG300－I（上海科骏电器有限公司）。甲醇（色谱纯），水（二次蒸馏），其余均为分析纯。葛根素对照品（中国药品生物制品检定所）；鲜葛（浙江省永嘉县潘坑乡）。
1.2 色谱条件
高效液相色谱实验报告 一、实验目的 1了解液相色谱的发展历史及最新进展 2 学习液相色谱的基本构造及原理 3 掌握液相色谱的操作方法和分析方法，能够通过HPLC分离测定来对目标化合物的分析鉴定。 二、实验原理 液相色谱法采用液体作为流动相，利用物质在两相中的吸附或分配系数的微小差异达到分离的目的。当两相做相对移动时，被测物质在两相之间进行反复多次的质量交换，使溶质间微小的性质差异产生放大的效果，达到分离分析和测定的目的。液相色谱与气相色谱相比，最大的优点是可以分离不可挥发而具有一定溶解性的物质或受热后不稳定的物质，这类物质在已知化合物中占有相当大的比例，这也确定了液相色谱在应用领域中的地位。 高效液相色谱可分析低分子量、低沸点的有机化合物，更多适用于分析中、高分子量、高沸点及热稳定性差的有机化合物。80%的有机化合物都可以用高效液相色谱分析，目前以已经广泛应用于生物工程、制药工程、食品工业、环境检测、石油化工等行业。 三、高效液相色谱的分类 吸附色谱法、分配色谱法、空间排阻色谱法、离子交换色谱法、亲和色谱法、化学键合相色谱法 四、高效液相色谱仪的基本构造 高效液相色谱至少包括输液系统、进样器、分离柱、检测器和数据处理系统等几部分。 1 输液系统： 包括贮液及脱气装置、高压输液泵和梯度洗脱装置。贮液装置用于存贮足够量、符合HPLC要求的流动相。高效液相色谱柱填料颗粒比较小，通过柱子的流动相受到的流动阻力很大，因此需要高压泵输送流动相。 2 进样系统： 将待测的样品引入到色谱柱的装置。液相色谱进样装置需要满足重复性好、死体积小、保证柱中心进样、进样时引起的流量波动小、便于实现自动化等多项要求。进样系统包括取样、进样两项功能。 3 分离柱： 色谱柱是色谱仪的心脏、柱效高、选择性好、分析速度快是对色谱柱的一般要求。商品化的HPLC微粒填料，如硅胶和以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球（包括离子交换树脂）等的粒度通常在3μm、5μm、7μm、以及10μm。采用的固定相粒度甚至可以达到1μm，而制备色谱所采用的固定相粒度通常大于10μm。HPLC填充柱效的理论值可以达到50000/m～160000/m理论板，一般采用100-300mm的柱长可满足大多数样品的分析的需要。由于柱效内、外多种因素的影响，因此为使色谱柱达到其应有的效率。应尽量的减小系统的死体积。 4 检测系统： HPLC检测器分为通用型检测器和专用型检测器两类。通用型检测器可连续测量色谱柱流出物（包括流动相和样品组分）的全部特性变化。这类检测仪器包括示差折光检测器、介
葛根素临床作用及疗效观察 发表时间：2012-03-23T14:48:01.303Z 来源：《中外健康文摘》2012年第4期供稿作者：苏艳颖[导读] 近年来通过药理实验研究，证明我国常用的中草药之一的葛根中含有多种活性药理成分。 苏艳颖 (辽宁省阜新市中医院西药局 123000) 【中图分类号】R96【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）4-0283-02 【摘要】近年来通过药理实验研究，证明我国常用的中草药之一的葛根中含有多种活性药理成分。主要有效成分为葛根素，化学名为4’7-二羟基-8-β-D-葡萄糖异黄酮。1其药理作用为治疗头晕头痛，高血压，心绞痛和突发性耳聋等疾患。具有减慢心率，降低心肌耗氧量，抗心率 失常，降血糖，降血脂，益智，解酒，抑制血小板聚集，改善微循环及抗肿瘤等作用。【关键词】葛根素化学成分药理作用临床用途葛根素其多种药理作用应用于临床，现将其临床用途如下： 1 心血管系统治疗作用 1.1治疗冠心病心绞痛 对90例冠心病心绞痛患者随机分为两组。治疗组50例。男30例，女20例。年龄35—70岁。对照组40例，男22例，女18例。年龄为38—75岁。两组均口服肠溶阿司匹林50mg，1次/d；消心痛10mg。3次/d。治疗组在常规基础上用葛根素400mg加人5%葡萄糖注射液250ml 静滴，结果葛根素治疗组的疗效较对照组有明显改善。另有报道，葛根素能抑制肾上腺素对腺苷酸环化酶的激活作用。 1.2治疗脑梗塞 将脑梗塞患者60例随机分为对照组和治疗组两组。对照组30例，治疗组30例。治疗组中用葛根素400mg加入5%葡萄糖注射液中静脉滴注，1次/d，共14d。结果治疗组总有效率为97.9%，对照组为63.7%（P<0.05）,凝血酶原时间，纤维蛋白原，血细胞比容均比对照组有显著改善（P0.05），无继发出血等副反应，葛根素注射液能显著提高急性缺血性脑中风血NO含量，降低ET含量，可能为其治疗急性缺血性脑中风的作用机理之一。由此证明，葛根素具有改善脑循环，抑制血小板聚集的作用，适用于脑梗塞的治疗。 2 治疗突发性耳聋 随机抽取突发性耳聋患者60例分为3组，每组20例。1组为葛根素组，2组为星状神经节阻滞组，3组为联合组（1+2组）。这3个组年龄、性别、发病至就诊时间及其伴随症状无明显差异（P>0.05）。1组用葛根素注射液200mg加入0.9%氯化钠注射液稀释后静脉滴注，1次/d；2组以1%利多卡因10ml加维生素B12注射液500μg星状神经节阻滞，1次/d；3组使用1组和2组方法联合治疗。每组均为10d一个疗程。结果：1组痊愈5例，显效5例，好转4例，无效6例，总有效率为70%；2组痊愈6例，显效5例，好转4例，无效5例，总有效率为75%；3组痊愈12例，显效3例，好转2例，无效3例，总有效率为85%。 3 治疗糖尿病及其并发症 治疗糖尿病 将70例2型糖尿病患者随机分为治疗组和对照组两组，患者在治疗期间，降糖药物和饮食控制与治疗前保持不变。治疗组给予葛根素400mg加入0.9%氯化钠注射液中，1次/d，一共3周，对照组给予口服降糖药。结果经过比较，治疗组取得良好疗效。 4 治疗慢性呼吸性衰竭 对于符合慢阻肺、慢性呼吸衰竭70例随机分为两组。治疗组39例，男性30例，女性9例，年龄53—75岁。对照组31例，男性23例，女性8例，年龄54—76岁。在吸氧、抗炎、止咳、化痰，改善心肺功能等综合治疗基础上，治疗组用葛根素400mg加5%葡萄糖注射液250ml 中静脉滴注，1次/d，14d为一疗程。对咳嗽、咳痰、气促、血液流变等指标、动脉血气指标进行观察、测定、比较。结果：治疗组显效10例，有效16例，无效3例，总有效率为89.1%；对照组显效7例，有效17例，无效7例，总有效率为71%。 5 不良反应 主要不良反应为发热、过敏反应、过敏性休克、喉头水肿、溶血反应、丙氨酸转氨酶升高、肾绞痛、一次性血红蛋白尿以及头晕、腹胀、恶心等症状，其中以发热最为多见。 6 前景 葛根素所含的Pue对心血管系统具有增加心肌血流量、改善心肌供氧、降低血小板聚集和血液黏改变心肌细胞自律延长不应改善失常心率等重要作用，我们应改进葛根素的制剂工艺，设计合理剂型，避免不良反应。充分发挥葛根素在体内分布快、消除快、毒性低等特点，进一步拓展其在临床上的用途。参考文献 [1]杨林静,等.葛根的药理学研究及临床进展.武警医学院学报，2002（2）：138. [2]张德清.王广生急性脑梗死应用速避凝葛根素的疗效分析[J].中西医结合心脑血管病杂志，2005，3（11）:982. [3]任力杰，葛朝莉，韩漫夫，等.粒细胞集落刺激因子与葛根素治疗急性脑梗死的临床对照研究［J］.中西医结合心脑血管病杂志，2005，3（11）：969.
高效液相色谱法在药物分析中的应用与进展 摘要：主要介绍了高效液相色谱法在药物鉴别、药物杂质检查、药物含量测定等方面具体应用以及展望了高效液相色谱法在药物分析中的应用前景。 关键词：高效液相色谱法；HPLC；药物分析；联用技术 Abstract:Mainly introduced the high performance liquid chromatography in drug discrimination, drug impurity test, determination of the content and concrete application and the prospect of the high performance liquid chromatography in pharmaceutical analysis application prospect. Keywords: high performance liquid chromatography，HPLC ,pharmaceutical analysis，hyphenated techniques 引言： 高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。HPLC在国内和国外的药物分析领域的应用范围很广，发展速度也很快，尤其在我国，近十几年来HPLC方法越来越受到重视。HPLC 在药物的分析中的应用主要是鉴别、有关物质的检查、有效成分及含量的测定[1]；本文对高效液相色谱法（HPLC）技术在药物分析中的应用进行概述并展望其应用前景。 1 在药物分析中的应用 1.1 在药物鉴别中的应用 在HPLC 法中，药物组分的保留时间与其结构和性质有着直接的关系，不同的药物由于结构和性质的差异在色谱图上的出峰顺序不同，是定性的重要参数，
高效液相色谱法简介 “色谱”一词是由俄国科学家斯威特提出的。色谱法是基于补充物质在相对运动物的两相之间分布时，物理或物理化学性质的微小的差异而使混合物相互分离的一类分离或分析方法。发展与上世纪初，飞速发展于五十年代，有超过30位科学家家因为它而获得诺贝尔奖，其有自己的理论和研究方法，同时也有众多的应用领域。 色谱法常见的方法有：柱色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等。 柱色谱：柱色谱法是最原始的色谱方法，这种方法将固定相注入下端塞有棉花或滤纸的玻璃管中，将被样品饱和的固定相粉末摊铺在玻璃管顶端，以流动相洗脱。常见的洗脱方式有两种，一种是自上而下依靠溶剂本身的重力洗脱，一种是自下而上依靠毛细作用洗脱。收集分离后的纯净组分也有两种不同的方法，一种方法是在柱尾直接接受流出的溶液，另一种方法是烘干固定相后用机械方法分开各个色带，以合适的溶剂浸泡固定相提取组分分子。柱色谱法被广泛应用于混合物的分离，包括对有机合成产物、天然提取物以及生物大分子的分离。 薄层色谱：薄层色谱法是应用非常广泛的色谱方法，这种色谱方法将固定相图布在金属或玻璃薄板上形成薄层，用毛细管、钢笔或者其他工具将样品点染于薄板一端，之后将点样端浸入流动相中，依靠毛细作用令流动相溶剂沿薄板上行展开样品。薄层色谱法成本低廉操作简单，被用于对样品的粗测、对有机合成反应进程的检测等用途。
气相色谱：GC主要是利用物质的沸点、极性及吸附性质的差异来实现混合物的分离。待分析样品在汽化室汽化后被惰性气体（即载气，也叫流动相）带入色谱柱，柱内含有液体或固体流动相，由于样品中各组分的沸点、极性或吸附性能不同，每种组分都倾向于在流动相和固定相之间形成分配或吸附平衡。但由于载气是流动的，这种平衡实际上很难建立起来。也正是由于载气的流动，使样品组分在运动中进行反复多次的分配或吸附/解吸附，结果是在载气中浓度大的组分先流出色谱柱，而在固定相中分配浓度大的组分后流出。当组分流出色谱柱后，立即进入检测器。检测器能够将样品组分的与否转变为电信号，而电信号的大小与被测组分的量或浓度成正比。当将这些信号放大并记录下来时，就是气相色谱图了。气相色谱被广泛应用于小分子量复杂组分物质的定量分析。 高效液相色谱：高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送（最高输送压力可达4.9-107Pa）;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱（每米塔板数可达几万或几十万）；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。高效液相色谱（HPLC）是目前应用最多的色谱分析方法，高效液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成，其整体组成类似于气相色谱，但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳；进样系统要求进样便利切换严密；由于液体流动相粘度远远高于气体，为了减低柱压高效
功效与作用及食用方法 一、葛根的功效： 葛根性味甘辛凉，归脾、胃、肺经。具有解肌退热，生津止渴，透疹，升阳止泻，通经活络，解酒毒。用于外感发热头痛，项背强痛，口渴，消渴，麻疹不透，热痢，泄泻，眩晕头痛，中风偏瘫，胸痹心痛，酒毒伤中。此外还具有明显的降血压作用。 二、葛根的作用： 现代医学研究表明：葛根中含有葛根素、、花生酸、氨基酸、蛋白质、多种维生素、有机钙等多种成分，葛根素、大豆黄酮是葛根的主要活性成分。此外，葛根中还含有葛根素木糖苷、β-谷甾醇和花生酸等多种生理活性物质以及微量元素硒、锌、锰、锗等。葛根素对高血压、高血脂、高血糖和心脑血管疾病有一定疗效。另外，葛根黄酮还具有防癌抗癌和雌激素样作用，可促进女性养颜，尤其对中年妇女和绝经期妇女养颜保健作用明显。 对症治疗，副作用极小。 1 对平滑肌的作用 葛根中的大豆甙元具有抗乙酰胆碱作用，能够明显收缩平滑肌，被认为是葛根解痉作用的主要成分。 2 对冠状循环的作用 葛根水煎剂、醇浸膏、总黄酮和葛根素均有明显的扩张冠状血管
的作用，能使冠血流量增加，血管阻力降低。 3 对心肌梗塞和心律失常的作用 葛根醇浸膏、大豆甙元和葛根素均有明显的对抗乌头碱和氯化钡诱发的心律失常作用，葛根素还能明显缩短氯彷、肾上腺素诱发的家兔心律失常时间，葛根素能明显缩小心肌梗塞范围，被认为是一种β-肾上腺素受体阻滞剂。 4 对心脏功能和心肌代谢的影响 葛根总黄酮和葛根素能减慢心率，降低心脏总外周阻力，减少心肌耗氧量；提高心肌工作效率.葛根素还能明显减少缺血引起的心肌乳酸的产生，改善梗塞心肌的代谢。 5 对血压和外周血管的作用 葛根总葛酮和葛根素能使血浆肾素活性和血管紧张素显著降低，血压下降.葛根素对微循环障碍有明显的改善作用，主要表现为增加微血管运动的振幅和提高局部微血流量；葛根总黄酮具有明显扩张脑血管的作用，改善脑微循环和外周循环.据报道，葛根素还能改善视网膜血管末稍单位的阻滞状态，从而提高视功能。 6 抑制血小板聚集作用 葛根素能抑制二磷酸腺苷(ADP)诱导和5-HT(5-羟色胺)与ADP联合诱导的人和动物的血小板聚集；另外，葛根素还能明显抑制由凝血酶诱导的血小板中5-HT的释放，具有抗血栓形成作用。 7 降血糖的作用 葛根素能对抗肾上腺素的升血糖作用，具有一定的降血糖能力。
高效液相色谱分析中异常峰的分析与处理 龚时琼 (华中科技大学化学与化工学院,湖北武汉 430074) 摘 要:高效液相色谱(hig h perf ormance liquid chr omato gr aphy ,H PL C)在高等院校、医药卫生、食品、环保等多个领域的应用越来越广泛。叙述了高效液相色谱仪的工作原理,针对高效液相色谱分析中的异常峰问题进行了分析,并提出了相应的处理方法。关键词:高效液相色谱仪;异常峰;缓冲液 中图分类号:O 657.7 文献标志码:B 文章编号:1002-4956(2010)06-0037-02 Analysis and treatment of unusual peaks in analysis of high performance liquid chromatography Gong Shiqiong (School of Chemistry and Chemica l Eng ineering.H uazhong U niversit y of Science and T echnolog y,Wuhan 430074,China) Abstract:T he hig h perfo rmance liquid chro matog raphy (H PL C)is increasing ly w ide in application,for ex am -ple,colleges and universit ies,medicine health,fo od,env iro nmental pro tect ion,and so o n.T he buffer solution was cho sen and unusual questio ns w ere pro cessed. Key words:hig h per for mance liquid chr omato gr aphy(H PL C);unusual peak;buffer solution 收稿日期:2009-06-17 作者简介:龚时琼(1969)),女,湖北省仙桃市人,工程师,主要从事大 型仪器设备的使用、研发与管理维护. E -mail:370749606@https://www.doczj.com/doc/8d5574988.html,;gongs hiqiong@https://www.doczj.com/doc/8d5574988.html, 高效液相色谱(H PLC)具有分离效率高、分析速度快和应用范围广等特点,特别适合于高沸点、大分 子、强极性和热稳定性差的化合物的分离、分析。自20世纪60年代后期发展以来,是现代分离测定的重要手段[1] 。目前高效液相色谱已成为化学、生化、医学、工业、农业、环保、商检和法检等领域中重要的分离技术,是分析化学和生物化学等用于解决各种实际分析和分离课题必不可少的工具之一。但在高效液相色谱分析中因各种原因会经常出现异常峰形,严重影响对结果的分析。 1 高效液相色谱仪工作原理 高效液相色谱仪是由溶剂贮液器、高压泵、进样器、色谱分离柱、检测器和数据处理系统等部分组成。 高压泵从溶液贮液器中抽走流动相,流经整个仪器系统,形成密闭的液体流路。样品通过进样系统注入色谱分离柱,在柱内进行分离。柱流出液进入检测 器,使已被分离的组分逐一被检测器收集,并将响应值转变为电信号后经放大被数据处理系统记录色谱峰,通过数据处理系统对记录的峰值进行存储和计算,从而完成整个分析过程 [2] 。 2 异常峰分析 异常的色谱峰指的是色谱图中的无峰或出现负峰、宽峰、双峰、肩峰、峰形不对称等情况。异常峰是色谱实验工作中最棘手的问题。这些峰严重影响色谱分析的结果。色谱图中不可能有纯正的高斯对称峰,轻微的拖尾是正常的,这是由分离系统所决定的。在此仅对其中几种异常峰进行分析。2.1 峰前或峰后有小峰的分析 某个单组分样品的大峰附近带小峰,如图1中的第3个峰右下的小峰以及图2中第2个峰左下的小峰。产生原因大致分为以下几种情形,针对不同情况可采取具体的措施是完全可以解决此种异常峰的。 (1)样品不纯。可改变不同的流动相和色谱柱,对样品进行分离比较,选择合适的分离条件。(2)分析柱或保护柱柱头塌陷。此情况较常见,可更换分析柱或保护柱后对峰形进行比较。柱头塌陷时往往所有的峰都会出现峰分裂[3] 。对色谱柱再生和 ISS N 1002-4956 CN11-2034/T 实 验 技 术 与 管 理 Ex perim ental Technology and M anagem ent 第27卷 第6期 2010年6月Vol.27 No.6 Ju n.2010
葛根素综述 一、绪言 葛根素是由中药葛根里面提取出来的有效成分，其结构式为： 葛根现在在药品市场已得到广泛应用。葛根被国家卫生部认定为药、食两用植物，我国古代药物学专著《神农本草经》、《本草纲目》对葛根的功用均有记载。此外，利用高新生物技术，葛根还可生产系列食品：葛根低聚糖、营养葛奶、葛根黄酮茶等。葛根集药用、食用、生态、绿化等功能于一，市场前景美好，开发潜力巨大。一吨葛根素（折纯）在市场上的售价可高达1200 万人民币/吨，纯利润大概在200-230 万左右。基本上它的投资回报数在40%到50%之间。很多研究机构也在对葛根素进行研究，开发其价值，所以葛根素的潜力也非常大。 二、原理 因为葛根素是异黄酮结构，故其水溶性和脂溶性都比较差，生物利用度低。因而限制了其更广泛的应用。目前，临床应用的葛根素注射液大多需要加入PVP和高浓度的丙二醇才能达到该注射液要求的浓度，这样使药物的粘度较大，才给大规模生产造成过滤上的麻烦，
成本增加。因此，通过结构修饰改善脂溶性和水溶性及增强药理活性已成为葛根素近年来研究的热点。 三、结构修饰进展 1、药理作用及临床应用 葛根素具β肾上腺素受体阻滞作用，可增强心肌收缩力，保护心肌细胞；扩张血管，降低血压及眼内压，改善微循环；保护红细胞的变形能力，增强造血系统功能；抗血小板聚集，增加纤洛活性，降低血黏度；对肾炎、肾病肾衰模型均有保护作用；对非特异性免疫、体液免疫、细胞免疫有明显的调节作用；可促进正常人和肿瘤病人的淋巴细胞转化；对干扰素系统有明显的刺激和诱生作用；对抗D-半乳糖的致老化作用，增强学习记忆能力；清除氧自由基和抗氧化性损伤；抑制蛋白非酶糖化；对抗星形胶质细胞肿胀及脑水肿；降低血浆中儿茶酚胺及内皮素的含量；调节—氧化氮合酶（NOS）活性，升高体内NO水平。目前葛根素在临床上已被广泛应用于心脑血管系统疾病。糖尿病、眼底疾病突发性耳聋、急性酒精中毒、拟菊酯类农药中毒及肿瘤的治疗。 2、剂型研究 葛根素在水中的溶解度较低，其临床使用的注射剂中需加入助溶剂，以提高溶解度。目前临床应用的葛根素注射液大多需加入高浓度丙二醇作为助溶剂，不仅增加了成本，也因为药液黏度过大，给生产造成过滤上的麻烦。研究发现，赖氨酸、精氨酸、组氨酸、烟酰胺、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）能使葛根素在水中的溶解度增加1～2倍，可作为葛根素注射液处方中的助溶添加剂。 近年来，将天然活性成分与磷脂在一定条件下进行复合从而获得天然活性成分磷脂复合物的研究已受到国内外学者的关注。这种复合
异常峰分析 异常的色谱峰指的是色谱图中的无峰或出现负峰、宽峰、双峰、肩峰、峰形不对称等情况。异常峰是色谱实验工作中最棘手的问题。这些峰严重影响色谱分析的结果。色谱图中不可能有纯正的高斯对称峰 , 轻微的拖尾是正常的 , 这是由分离系统所决定的。在此仅对几种异常峰进行分析。 1.峰前或峰后有小峰的分析 产生原因大致分为以下几种情形 (1) 样品不纯。可改变不同的流动相和色谱柱 ,对样品进行分离比较 , 选择合适的分离条件。 (2) 分析柱或保护柱柱头塌陷。此情况较常见 ,可更换分析柱或保护柱后对峰形进行比较。柱头塌陷时往往所有的峰都会出现峰分裂。对色谱柱再生和清洗可以改善分离效果。
(3) 色谱柱柱容量下降。当长时间使用后 , 有一些强保留组分吸附在柱子中 , 不大的进样量往往就会出现峰分裂。用强洗脱能力的溶剂清洗色谱柱 , 或更换色谱柱可使问题得到改善。 (4) 样品溶剂与流动相不匹配或进样体积过大。当样品溶剂比流动相极性大时 , 有时即使进样体积很小 , 也容易出现峰变形和裂分现象。建议用流动相溶解样品。 (5) 流动相不恰当。此情况较罕见 , 有些样品在特定的色谱条件下可能存在结构的动态平衡 , 而出双峰 , 这种双峰是无法分离完全的 , 改变色谱条件尤其是p H 值会使峰形正常。 (6) 样品分解。不稳定的样品在色谱分离过程中变成其他物质而出现双峰。这时需改变样品处理方法或色谱分离条件。 2.负峰分析 在色谱分析中有时会出现负峰或倒峰 , 如图 3 中的大峰的左下就有一负峰。出现这种现象可能是由以下几种原因引起的 , 可针对不同情况进行排除 , 进而使问题得到解决。 (1) 流动相吸收本底值过高。此时可适当改变检测波长。 (2) 进样过程中进入空气。进行排气处理 , 直到基线平稳再进样。 (3) 样品组分的吸收低于流动相。可改变流动相或改变检测波长。 (4) 配制样品的溶液与流动相不一样。重新配制样品 , 用与流动相一样的溶剂配制或稀释样品。 3.前沿、拖尾峰分析 拖尾：1 干扰峰，优化条件分离；2 色谱柱塌陷，更换色谱柱； 3 流动相pH 不合适，调节pH值；4 管路没有接好，存在较大的死体积，可以重新接一下。 前沿：1 溶剂选择不合适，选择合适的溶剂；2 样品过载，降低进样量； 3 柱温太低，升高柱温；4 色谱柱损坏，更换色谱柱； 图谱前沿和拖尾的原因主要是流动相选择不合适，可以相应调整流动相的极性，或者适当加入酸来调整，可以得到较好的改善。一般来讲，酸碱在流动相中对于前沿和拖尾影响较大。柱前沿是可能因为柱超载，拖尾是可能因为样品被污染，选择合适的流动相，调节好PH能够改善这以情况。 前辈们总是会告诉我们，拖尾峰与柱子有关，可能是过载，稀释样品再做，或换新柱做。有时候托尾峰往往是有机性相近杂质没有分开，此时，可以优化分析方法，或更换柱子试一试；也可能由于柱子使用时间太久柱效下降出现塌陷等原
龙源期刊网 https://www.doczj.com/doc/8d5574988.html, 葛根素药理研究现状 作者：钟保恒 来源：《中国民族民间医药杂志》2009年第05期 广西柳州食品药品检验所,广西柳州 545001 【摘要】:目的:对葛根素的药理研究现状进行分析,为进一步开发利用葛根素提供参考?方法:对近几年以来国内外关于葛根素的药理研究文献进行综述?结果:葛根素可通过抗交感样作用?钙拮抗作用及广泛的β受体阻滞作用,可显著扩张冠状动脉和脑血管,具有降血糖?抗氧化?保护脑神经以及治疗骨质疏松等多种活性,广泛应用于临床?结论:葛根素具有多种药理作用,其活性强,药效明确,安全低毒,并且葛根资源丰富,值得临床深入开发应用? 【关键词】:葛根素;药理作用;综述 【中图分类号】R963 【文献标识码】B 【文章编号】1007-8517(2009)03(上)-0016-03 葛根素(puerarin,商品名普乐林)是从豆科植物野葛(Pueraria lobata)?甘葛藤(Puerarin thomsonii)根中提取的一种黄酮苷,化学名为4,7-羟基-8-β-D葡萄糖异黄酮,其分子式为 C21H20O9?现代医学证明葛根素可通过抗交感样作用?钙拮抗作用及广泛的β受体阻滞作用,可显著扩张冠状动脉和脑血管,具有降血糖?抗氧化?保护脑神经以及治疗骨质疏松等多种活性而 广泛用于临床,且不良反应少?近年来对葛根素的药理研究取得了许多新进展,现综述如下: 1 对心血管系统的作用 1.1 抗心律失常作用 葛根素能明显对抗乌头碱?氯化钡和结扎冠状动脉所致心律失常,但对氯化钡和氯仿所致心室纤颤无明显影响,提示葛根素抗心律失常的作用机制可能是通过影响细胞膜对钾?钠?钙离子 的通透性而降低心肌兴奋性[1]?采用内面向外膜片钳单通道记录技术观察发现,葛根素不同浓度对豚鼠单个心室肌细胞钾离子通道的开放概率有抑制作用,在80μmol/L时与用药前相比有显著差异,提示抑制心肌细胞钾离子通道可能是葛根素抗心率失常的分子机制[2]?不同浓度的葛根素
高效液相色谱法地分类及其分离原理 高效液相色谱法分为：液固色谱法、液液色谱法、离子交换色谱法、凝胶色谱法. .液固色谱法（液固吸附色谱法） 固定相是固体吸附剂，它是根据物质在固定相上地吸附作用不同来进行分配地. ①液固色谱法地作用机制 吸附剂：一些多孔地固体颗粒物质，其表面常存在分散地吸附中心点. 流动相中地溶质分子（液相）被流动相带入色谱柱后，在随载液流动地过程中，发生如下交换反应： （液相）（吸附）<>（吸附）（液相） 其作用机制是溶质分子（液相）和溶剂分子（液相）对吸附剂活性表面地竞争吸附. 吸附反应地平衡常数为： 值较小：溶剂分子吸附力很强，被吸附地溶质分子很少，先流出色谱柱. 值较大：表示该组分分子地吸附能力较强，后流出色谱柱. 发生在吸附剂表面上地吸附解吸平衡，就是液固色谱分离地基础.资料个人收集整理，勿做商业用途 ②液固色谱法地吸附剂和流动相 常用地液固色谱吸附剂：薄膜型硅胶、全多孔型硅胶、薄膜型氧化铝、全多孔型氧化铝、分子筛、聚酰胺等. 一般规律：对于固定相而言，非极性分子与极性吸附剂（如硅胶、氧化铜）之间地作用力很弱，分配比较小，保留时间较短；但极性分子与极性吸附剂之间地作用力很强，分配比大，保留时间长.资料个人收集整理，勿做商业用途 对流动相地基本要求： 试样要能够溶于流动相中 流动相粘度较小 流动相不能影响试样地检测 常用地流动相：甲醇、乙醚、苯、乙腈、乙酸乙酯、吡啶等. ③液固色谱法地应用 常用于分离极性不同地化合物、含有不同类型或不；数量官能团地有机化合物，以及有机化合物地不同地异构体；但液固色谱法不宜用于分离同系物，因为液固色谱对不同相对分子质量地同系物选择性不高.资料个人收集整理，勿做商业用途 .液液色谱法（液液分配色谱法） 将液体固定液涂渍在担体上作为固定相. ①液液色谱法地作用机制 溶质在两相间进行分配时，在固定液中溶解度较小地组分较难进入固定液，在色谱柱中向前迁移速度较快；在固定液中溶解度较大地组分容易进入固定液，在色谱柱中向前迁移速度较慢，从而达到分离地目地.资料个人收集整理，勿做商业用途 液液色谱法与液液萃取法地基本原理相同，均服从分配定律：固液 值大地组分，保留时间长，后流出色谱柱. ②正相色谱和反相色谱 正相分配色谱用极性物质作固定相，非极性溶剂（如苯、正己烷等）作流动相. 反相分配色谱用非极性物质作固定相，极性溶剂（如水、甲醇、己腈等）作流动相.
内容摘要： 【摘要】葛根素是由葛根提取制成，主要剂型有片剂、注射剂等，主要化学成份为皂苷类化合物葛根黄酮，具有提高免疫，增强心肌收缩力，保护心肌细胞，降低血压，抗血小板聚集等作用。 【摘要】葛根素是由葛根提取制成，主要剂型有片剂、注射剂等，主要化学成份为皂苷类化合物葛根黄酮，具有提高免疫，增强心肌收缩力，保护心肌细胞，降低血压，抗血小板聚集等作用。 【关键词】葛根素；应用价值 1葛根素扩张血管、降血压、血脂和血糖作用 葛根素通过扩张冠状动脉和脑血管，降低心肌耗氧量，改善微循环和抗血小板凝集，改善缺血区的供血，同时能有效减慢心率，降低血压。葛根素能使病人血压显著下降，左室质量指数较治疗前减低，舒张期末室间隔厚度和左心室后壁厚度变薄，左心室舒张末内径缩小，射血分数增加。与对照组比较，使冠心病患者的血浆胰岛素浓度减少。所以，葛根素在治疗高血压的同时，能逆转左心室肥厚，改善左心室舒张功能和胰岛素抵抗（ir）。葛根素亦具有降低胰岛素抵抗综合症大鼠血压和产生调节血脂的作用，并改善糖耐量，呈现一定的量效关系。葛根素通过提高胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞glut4蛋白表达水平，且能够改善其转位机制，从而加强葡萄糖的摄取和利用。 2葛根素对心脏的保护作用 葛根素对心血管系统的影响：葛根中的总黄酮能增加脑及冠状动脉的血流量。葛根素对动物和人体的脑循环以及外周循环有明显的促进作用。葛根总黄酮在改善高血压及冠心病患者的脑血管张力、弹性和博动性供因等方面均有温和的促进作用[2]。葛根素不仅改善人体的正常脑微循环，而且对微循环障碍也有明显的改善作用，主要表现为局部微血管血流和运动的幅度增加。葛根素对突发性耳聋患者的甲皱微循环也有改善作用，能加快微血管血流速度，清除血管袢淤血，提高患者的听力。葛根素对缺氧心肌具有保护作用，葛根素能明显降低缺血心肌的耗氧量，保护心脏免受缺血再港灌注所致的超微结构损伤。慢性缺氧损伤可导致心肌酶及超微结构的改变，并且与病情程度成正比，两者比较，心肌酶的改变比超微结构改变更敏感;而葛根素注射液具有保护心肌、显著减轻缺氧后心肌酶及超微结构的改变。葛根素注射液中的有效成分是黄酮苷，有扩张冠状动脉和脑血管作用，降低心肌耗氧量，改善微循环和抗血小板凝集作用，降低血液粘度，增强心肌收缩力，使心肌自律性降低，不应期延长，故在临床上有明显的抗心律失常作用。 3葛根素抑制组织细胞凋亡和对平滑肌的保护作用 葛根素具有较强的清除活性氧和显著降低血管平滑肌细胞凋亡的作用，同时也可减少凋亡细胞dna断裂以及平滑肌的坏死，故对缺血条件下的血管平滑肌具有保护作用，此作用至少部分是通过抑制胱冬肽酶-3（aspase-3）的表达而实现的[2]。 葛根素亦具有抗脑缺血性神经细胞调亡的作用，其作用可能是通过抑制脑缺血时细胞调亡，调控相关基因的表达来实现。应用葛根素注射液治疗小儿重症肺炎时，呈现临床症状改善快，治疗前后心肌酶谱、心脏血流参数变化及心功能等都有明显改善。
高效液相色谱仪简介 系统组成、工作原理 高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内, 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时, 经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程, 各组分在移动速度上产生较大的差别, 被分离成单个组分依次从柱内流出, 通过检测器时, 样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。 高效液相色谱 （high performance liquid chromatography, HPLC）也叫高压液相色谱（high pressure liquid chromatography）、高速液相色谱（high speed liquid chromatography）、高分离度液相色谱（high resolution liquid chromatography）等。是在经典液相色谱法的基础上，于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱。又因分析速度快而称为高速液相色谱。 高效液相色谱是目前应用最多的色谱分析方法，高效液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成，其整体组成类似于气相色谱，但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳；进样系统要求进样便利切换严密；由于液体流动相粘度远远高于气体，为了减低柱压高效液相色谱的色谱柱一般比较粗，长度也远小于气相色谱柱。HPLC应用非常广泛，几乎遍及定量定性分析的各个领域。 使用高效液相色谱时，液体待检测物被注入色谱柱，通过压力在固定相中移动，由于被测物种不同物质与固定相的相互作用不同，不同的物质顺序离开色谱柱，通过检测器得到不同的峰信号，最后通过分析比对这些信号来判断待侧物所含有的物质。高效液相色谱作为一种重要的分析方法，广泛的应用于化学和生化分析中。高效液相色谱从原理上与经典的液相色谱没有本质的差别，它的特点是采用了高压输液泵、高灵敏度检测器和高效微粒固定相，适于分析高沸点不易挥发、分子量大、不同极性的有机化合物。 发展历史
谈谈葛根素临床应用价值 摘要】葛根素是由葛根提取制成，主要剂型有片剂、注射剂等，主要化学成份 为皂苷类化合物葛根黄酮，具有提高免疫，增强心肌收缩力，保护心肌细胞，降 低血压，抗血小板聚集等作用。 【关键词】葛根素；应用价值 【中图分类号】R285.6【文献标识码】B【文章编号】1008-6455（2010）08-0244-01 葛根素是从豆科植物野葛的干燥根中提取的主要有效成分，其分子式为4，7-二羟基-8-β-D葡萄糖异黄酮。祖国医学认为葛根归脾、胃经，具有升阳、活血、 通络的作用。现代医学证明葛根素可通过抗交感样作用、钙拮抗作用及广泛的β 受体阻滞作用，显著改善冠心病患者心肌供血，治疗不稳定性心绞痛、室性期前 收缩；降低血糖、血脂、抗氧化、增加血液流动性，降低肺动脉高压，治疗糖尿 病性周围神经病变以及改善胰岛素抵抗等作用[1]，故广泛用于临床。笔者根据自 己多年研究，归纳总结如下。 1葛根素扩张血管、降血压、血脂和血糖作用 葛根素通过扩张冠状动脉和脑血管，降低心肌耗氧量，改善微循环和抗血小 板凝集，改善缺血区的供血，同时能有效减慢心率，降低血压。葛根素能使病人 血压显著下降，左室质量指数较治疗前减低，舒张期末室间隔厚度和左心室后壁 厚度变薄，左心室舒张末内径缩小，射血分数增加。与对照组比较，使冠心病患 者的血浆胰岛素浓度减少。所以，葛根素在治疗高血压的同时，能逆转左心室肥厚，改善左心室舒张功能和胰岛素抵抗（IR）。葛根素亦具有降低胰岛素抵抗综 合症大鼠血压和产生调节血脂的作用，并改善糖耐量，呈现一定的量效关系。葛 根素通过提高胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞GLUT4蛋白表达水平，且能够改善其转位 机制，从而加强葡萄糖的摄取和利用。 2葛根素对心脏的保护作用 葛根素对心血管系统的影响：葛根中的总黄酮能增加脑及冠状动脉的血流量。葛根素对动物和人体的脑循环以及外周循环有明显的促进作用。葛根总黄酮在改 善高血压及冠心病患者的脑血管张力、弹性和博动性供因等方面均有温和的促进 作用[2]。葛根素不仅改善人体的正常脑微循环，而且对微循环障碍也有明显的改 善作用，主要表现为局部微血管血流和运动的幅度增加。葛根素对突发性耳聋患 者的甲皱微循环也有改善作用，能加快微血管血流速度，清除血管袢淤血，提高 患者的听力。葛根素对缺氧心肌具有保护作用，葛根素能明显降低缺血心肌的耗 氧量，保护心脏免受缺血再港灌注所致的超微结构损伤。慢性缺氧损伤可导致心 肌酶及超微结构的改变，并且与病情程度成正比，两者比较，心肌酶的改变比超 微结构改变更敏感;而葛根素注射液具有保护心肌、显著减轻缺氧后心肌酶及超微 结构的改变。葛根素注射液中的有效成分是黄酮苷，有扩张冠状动脉和脑血管作用，降低心肌耗氧量，改善微循环和抗血小板凝集作用，降低血液粘度，增强心 肌收缩力，使心肌自律性降低，不应期延长，故在临床上有明显的抗心律失常作用。 3葛根素抑制组织细胞凋亡和对平滑肌的保护作用 葛根素具有较强的清除活性氧和显著降低血管平滑肌细胞凋亡的作用，同时 也可减少凋亡细胞DNA断裂以及平滑肌的坏死，故对缺血条件下的血管平滑肌具有保护作用，此作用至少部分是通过抑制胱冬肽酶-3（Aspase-3）的表达而实现
高效液相色谱法的计算方法 高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入柱内，在柱内各成分被分离后，依次进入检测器，色谱信号由记录仪或积分仪记录。 1、对仪器的一般要求 所用的仪器为高效液相色谱仪。色谱柱的填料和流动相的组分应按各品种项下的规定。常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用，辛基键合硅胶次之，氰基或氨基键合硅胶也有使用；离子交换填料，用于离子交换色谱；凝胶或玻璃微球等，用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外，柱温为室温，检测器为紫外吸收检测器。 在用紫外吸收检测器时，所用流动相应符合紫外分光光度法（附录ⅣA）项下对溶剂的要求。 正文中各品种项下规定的条件除固定相种类、流动相组分、检测器类型不得任意改变外，其余如色谱柱内径、长度、固定相牌号、载体粒度、流动相流速、混合流动相各组分的比例、柱温、进样量、检测器的灵敏度等，均可适当改变，以适应具体品种并达到系统适用性试验的要求。一般色谱图约于20分钟内记录完毕。 2、系统适用性试验 按各品种项下要求对仪器进行适用性试验，即用规定的对照品对仪器进行试验和调整，应达到规定的要求；或规定分析状态下色谱柱的最小理论板数、分离度和拖尾因子。 (1) 色谱柱的理论板数(N，用于定量表示色谱柱的分离效率，简称柱效)。 在选定的条件下，注入供试品溶液或各品种项下规定的内标物质溶液，记录色谱图，量出供试品主成分或内标物质峰的保留时间t R（以分钟或长度计，下同，但应取相同单位）和半高峰宽(W h/2)，按n＝5.54(t R/W h/2)2计算色谱柱的理论板数，如果测得理论板数低于各品种项下规定的最小理论板数，应改变色谱柱的某些条件（如柱长、载体性能、色谱柱充填的优劣等），使理论板数达到要求。 (2) 分离度(R)
联苯、甲苯、萘和菲以及它们混样的高效液相色谱分析 实验目的 1.熟练掌握高效液相色谱相关仪器的操作流程。 2.通过高效液相色谱的方法对已知物质进行分析 3.通过谱图分析，掌握运用谱图数据处理目标物质的方法。 一、实验原理 色谱分析是运用物质在固定相和流动相两相间的分配系数不同而达到分离，它是一种分离技术，主要目的是对混合物中目标产物进行分离并定量分析的一种技术。 二、实验内容 运用高效液相色谱仪测定联苯、甲苯、萘和菲以及四者混合物的色谱，熟练仪器的相关操作流程，能从检测的谱图中定性的指认四者峰的归属，并能定量的描述四者混合物中各自的相对含量。 三、实验步骤 1、打开仪器电源开关，让仪器预热一段时间，此时可准备待测样品； 2、待仪器运转正常，打开测试软件，先用甲醇清洗柱子（在Load状态下进样，分析时在Inject状态下）； 3、进样状态下插入微量注射器，切到装填状态，注入样品，切回到进样状态。 4、点击分析按钮，输入分析的样品名； 5、数据分析，通过软件查看积分面积。 五、实验结果
液相色谱图 （1）混样 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0min 0.01.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 mV(x100) Detector A:254nm 1.722/15606 3.034/1116886 3.383/709768 4.037/2542977 5.046/7069594 （2）联苯 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0min 0.00.51.0 1.5 2.02.5 3.03.5 4.04.5 5.05.5 6.06.5 mV(x100)Detector A:254nm 1.731 2.578 4.147 5.213
高效液相色谱涉及的数据处理基本公式解析 （宁波大学海洋学院赵百添） 1.保留时间t R 被分离样品组分从进样开始到柱后出现该组分浓度极大值时的时间，也即从进样开始到出现某组分色谱峰的顶点时为止所经历的时间，称为此组分的保留时间，用t R表示，常以分（min）为时间单位。 溶质通过色谱柱所需时间，即待测组分从进样到出现峰最大值所需的时间。 2.调整保留时间t'R 扣除死时间后的保留时间,也称折合保留时间。在实验条件（温度、固定相等）一定时，t'R只决定于组分的性质，因此，t'R（或t R）可用于定性分析。 反映了被分析的组分与色谱柱中固定相发生相互作用，而在色谱柱中滞留的时间，它更确切地表达了被分析组分的保留特性。 3.死时间t M 不被固定相滞留的组分，从进样到出现最大峰值所需的时间。 关系：t R=t'R+ t M 4.保留体积V R 从进样开始到某组分在柱后出现浓度极大值时流出溶剂的体积,又称为洗脱体积。 V R＝F × t R 5.死体积V M 不被固定相滞留的组分，从进样到出现最大峰值所需的流动相体积。 V M＝F × t M 6.调整保留体积V'R 扣除死体积后的保留体积。 V'R＝V R－V M或V'R＝F×t'R
7.分配系数K 指一定温度下,处于平衡状态时，组分在固定相中的浓度和在流动相中的浓度之比，以K表示。 分配系数反映了溶质在两相中的迁移能力及分离效能，是描述物质在两相中行为的重要物理化学特征参数。 分配系数与组分、流动相和固定相的热力学性质有关，也与温度、压力有关。 在条件（流动相、固定相、温度和压力等）一定，样品浓度很低时（Cs、Cm 很小）时，K只取决于组分的性质，而与浓度无关。这只是理想状态下的色谱条件，在这种条件下，得到的色谱峰为正常峰；在许多情况下，随着浓度的增大，K减小，这时色谱峰为拖尾峰；而有时随着溶质浓度增大，K也增大，这时色谱峰为前延峰。因此，只有尽可能减少进样量，使组分在柱内浓度降低，K恒定时，才能获得正常峰。 在同一色谱条件下，样品中K值大的组分在固定相中滞留时间长，后流出色谱柱；K 值小的组分则滞留时间短，先流出色谱柱。混合物中各组分的分配系数相差越大，越容易分离，因此混合物中各组分的分配系数不同是色谱分离的前提。 在HPLC中，固定相确定后，K主要受流动相的性质影响。实践中主要靠调整流动相的组成配比及pH值，以获得组分间的分配系数差异及适宜的保留时间，达到分离的目的。 8.容量因子K' “分配”平衡时，固定相中溶质量与流动相中溶质量之比，称为容量因子。 对于有效的色谱分离，色谱柱必须具有保留溶质的能力，而且还能使不同溶质之间达到足够大的分离。色谱柱的容量因子是溶质与色谱柱相互强度的直接量度。 K'=t'R/t M =V'R/V M 9.分离度R 色谱分析的目标就是将混合物中的各组分分离，两个相邻色谱峰的分离度定义为两峰保留时间差与两峰峰底宽平均值之商。