·论著·多囊卵巢综合征患者高糖负荷后
胰高血糖素样肽1的变化
岳峰许娟李秀莲高云张铁
【摘要】目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者糖负荷后胰高血糖素样肽1(GLP-1)的变化。
方法2013年6月至2014年8月选择33例PCOS患者及30例年龄、体质指数相匹配的健康志愿者作
为研究对象，行75g口服葡萄糖耐量试验，观察血糖、胰岛素及GLP-1变化。计算稳态模型胰岛素
抵抗指数(HOMA-IR)，血糖曲线下面积(AUCGLU)、胰岛素曲线下面积(AUCINS)、GLP-1曲线下面积(AUCGLP)、糖负荷后30min葡萄糖净增值(?GLU30)、胰岛素净增值(?INS30)和GLP-1净增值
(?GLP30)。组间均数比较采用t检验，计量资料的多因素分析采用多元逐步回归分析。结果两组
间年龄、体质指数差异无统计学意义(t=0.280、1.375，均P>0.05)。PCOS组空腹及糖负荷后1h血糖及
胰岛素水平均显著高于对照组[血糖0h:(5.3±0.6)比(5.0±0.5)mmol/L，1h：(7.8±2.0)比(7.0+1.0)mmol/L；
胰岛素0h：(20±14)对(13±6)mU/L，1h：(144±56)比(114±50)mU/L；t=2.709、2.079、2.457、2.283，均P<
0.05]；而空腹GLP-1水平较对照组显著降低[(5.0±2.4)比(6.6±3.0)pmol/L，t=-2.309，P<0.05]。PCOS组
HOMA-IR、糖负荷后GLUAUC及?GLP30均明显高于对照组(t=2.712、2.290、2.557，均P<0.05)。PCOS
患者空腹GLP-1水平与空腹血糖及胰岛素均呈负相关(r=-0.355、-0.552，均P<0.05)。多元逐步回归分
析显示空腹GLP-1与睾酮水平独立相关(β=0.191，P=0.027)。结论PCOS患者存在GLP-1分泌缺陷，
主要是空腹GLP-1分泌不足，与胰岛素抵抗及糖代谢紊乱的发生相关，与睾酮水平间有重要联系。
【关键词】多囊卵巢综合征；胰高血糖素样肽1；口服葡萄糖耐量试验
Glucagon-like peptide-1levels in patients with polycystic ovary syndrome after glucose load
Yue Feng,Xu Juan,Li Xiulian,Gao Yun,Zhang Tie.Department of Endocrinology,Tai'an Central Hospital,
Tai′an271000,China
Corresponding author:Zhang Tie,Email:yue78feng@http://www.doczj.com/doc/84949c32cbaedd3383c4bb4cf7ec4afe04a1b133.html
【Abstract】Objective To explore the levels of glucagon-like peptide-1(GLP-1)after oral glucose
tolerance test(OGTT)in patients with polycystic ovary syndrome(PCOS).Methods From June2013to
August2014,33cases of PCOS patients and30healthy women with matched age and body mass index
(BMI)were enrolled in this study.The levels of glucose,insulin and GLP-1were evaluated,the values of homeostasis model assessment for insulin resistance(HOMA-IR),glucose area under curve(AUCGLU),insulin
area under curve(AUCINS),GLP-1area under curve(AUCGLP),early phase glucose change(?GLU30),
insulin change(?INS30)and GLP-1change(?GLP30)were calculated by OGTT in all the subjects.Data were compared with t test between the two groups.Multiple stepwise regression analysis was used to analysize
multiple factors of measurement data.Results There was no significant difference in age and BMI between
the two groups(t=0.280,1.375,both P>0.05).The fasting glucose and insulin and the levels of1hour after
OGTT were significantly higher in PCOS group than those in control(GLU0h:(5.3±0.6）vs（5.0±0.5)mmol/L,
1h:(7.8±2.0）vs（7.0±1.0)mmol/L;INS0h:(20±14）vs（13±6)mU/L,1h:(144±56）vs（114±50)mU/L;t=
2.709,2.079,2.457,2.283,all P<0.05),while,the fasting GLP-1levels of PCOS group was significantly
lower than that in control((5.0±2.4)vs(6.6±3.0)pmol/L,t=-2.309,P<0.05).There was no significant difference in GLP-1levels after OGTT between the two groups.The values of HOMA-IR and AUCGLU,
?GLP30after glucose load were all significantly higher in PCOS group than those in the control(t=2.712,
2.290,2.557,all P<0.05).The fasting GLP-1was positively correlated with fasting glucose and insulin
(r=-0.355,-0.552,P<0.05).Multiple regression analysis suggested that the fasting GLP-1was an important
DOI：10.3760/cma.j.issn.1674-5809.2016.02.010
作者单位：271000山东省泰安市中心医院内分泌一科
通信作者：张铁，Email：yue78feng@http://www.doczj.com/doc/84949c32cbaedd3383c4bb4cf7ec4afe04a1b133.html
多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)是导致育龄期女性不孕的常见疾病之一。由于相当一部分PCOS患者存在高胰岛素血症、肥胖及胰岛β细胞功能异常，有30%～40%的PCOS患者存在糖代谢异常，且约10%的患者合并糖尿病[1-3]，因此部分学者认为PCOS患者是糖尿病前期状态。胰高血糖素样肽1(GLP-1)能有效改善胰岛素抵抗及β细胞功能，且具有良好的减重作用，被广泛应用于2型糖尿病及肥胖的治疗。国外有研究表明，PCOS患者应用GLP-1激动剂也能有效改善胰岛素抵抗，并促进排卵，提示PCOS患者存在肠促胰素代谢异常[4]。但关于PCOS患者GLP-1水平变化的研究较少，因此本研究拟观察口服葡萄糖刺激下PCOS患者GLP-1水平的变化，探讨GLP-1与PCOS 的可能联系。
资料与方法
一、研究对象
选择2013年6月至2014年8月在我院门诊就诊的育龄期PCOS患者33例作为研究对象，年龄23～33岁。PCOS诊断均符合2003年鹿特丹会议标准，即符合下列三项中两项即可诊断：(1)稀发排卵或无排卵；(2)高雄激素的临床表现和高雄激素血症；(3)卵巢多囊性改变，B超检查见一侧或双侧卵巢直径2～9mm的卵泡≥12个和(或)卵巢体积≥10cm3。另选择年龄和体质指数(BMI)相匹配的来我院女性健康志愿者30名作为对照组。所有研究对象均排除糖尿病、甲状腺、肾上腺等内分泌疾病，且近3个月内未应用激素类药物。该研究经泰安市中心医院伦理委员会同意[(2013)伦审第(11)号]，所有受试者均签署书面知情同意书。
二、研究方法及观察指标
1.研究方法：受试者于月经周期第3～5天，空腹采集血液标本，专人测量身高、体重，计算BMI。行75g口服葡萄糖耐量试验，于服糖后30、60、120min 采集静脉血送检。
2.生化指标检测：血糖用氧化酶法测定；放射免疫分析法测定血胰岛素及性激素指标，包括卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)和睾酮。
3.血清GLP-1水平测定：取5ml静脉血置于干燥肝素试管，立即加入20μl二肽基肽酶Ⅳ(DPP-4)抑制剂，于-4℃3000r/min离心10min（离心半径10cm），取上层血清采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定(美国RD公司，严格按照说明书进行)。
4.葡萄糖曲线下面积(AUCGLU)、胰岛素曲线下面积(AUCINS)和GLP-1曲线下面积(AUCGLP)计算公式为：AUCGLU=(GLU0+GLU120)/2+GLU30+ GLU60，AUCINS=(INS0+INS120)/2+INS30+INS60，AUCGLP=(GLP0+GLP120)/2+GLP30+GLP60，式中GLU0～GLU120、INS0～INS120、GLP0～GLP120分别为OGTT试验后0、30、60、120min血糖、胰岛素及GLP-1水平。
5.糖负荷后30min葡萄糖净增值(?GLU30)、胰岛素净增值(?INS30)、GLP-1净增值(?GLP30)：计算公式GLU30=GLU30-GLU0、?INS30=INS30-INS0、?GLP30=GLP30-GLP0。
6.胰岛素抵抗指数计算：稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)=空腹血糖(FPG，mmol/L)×空腹胰岛素(FINS，mU/L)/22.5。
三、统计学方法
统计分析采用SPSS17.0软件进行，计量数据采用xˉ±s表示。组间均数比较采用t检验，计量资料的多因素分析采用多元逐步回归分析。以P< 0.05为差异有统计学意义。
结果
一、研究对象一般情况
入选了33例PCOS患者及30例年龄、BMI相匹配的育龄期女性作为研究对象，PCOS组LH、LH/ FSH及睾酮水平均显著高于对照组[(12.5±5.7)比(8.1±2.7)U/L、2.06±1.01比0.87±0.28，(2.26±0.85)比(0.78±0.16)nmol/L，t=4.008、6.485、9.749，均P< 0.01］，而FSH水平显著低于对照组(t=-6.943，P<
0.01)，两组间年龄、BMI无统计学差异(t=0.280、
1.375，均P>0.05，表1)。
二、糖负荷后血清葡萄糖、胰岛素及GLP-1水平的变化
OGTT中对照组及PCOS组的血清葡萄糖、胰
influencing factor of testosterone level(β=0.191,P=0.027).Conclusion Abnormal secretion of GLP-1occurrs in PCOS patients,maily lower in fasting GLP-1,which is associated with insulin resistance,glucose metabolism disorder and testosterone level.
【Key words】Polycystic ovary syndrome;Glucagon-like peptide-1;Oral glucose tolerance test
岛素及GLP -1水平均呈现抛物线型变化，PCOS 组空腹及糖负荷后1h 血糖及胰岛素水平均显著高于对照组，差别有统计学意义[血糖0h:(5.3±0.6)比(5.0±0.5)mmol/L ，1h ：(7.8±2.0)比(7.0+1.0)mmol/L ；胰岛素0h ：(20±14)比(13±6)mU/L ，1h ：(144±56)比(114±50)mU/L ；t=2.709、2.079、2.457、2.283，均P<0.05]；PCOS 组血清空腹GLP -1水平较对照组显著
降低[(6.6±3)比(5.0±2.4)pmol/L ，t=-2.309，P=0.024]，糖负荷后血清GLP -1水平变化两组间比较差异无统计学意义(图1)。
三、两组间HOMA -IR 及糖负荷后各指标曲线下面积及30分钟净增值比较
PCOS 组HOMA -IR 及糖负荷后AUCGLU 显著
高于对照组(4.9±3.8比3.0±1.4、22.3±4.1比20.4±
2.3，t=2.712、2.290；P 均<0.05)，两组间AUCINS 及AUCGLP 差别无统计学意义。PCOS 组的?GLP30显著高于对照组(6.7±
3.2比
4.8±2.6，t=2.557，P<0.05)，
?LU30及?INS30组间比较无统计学差异(表2)。
四、Pearson 相关分析
PCOS 组空腹GLP -1与空腹血糖、胰岛素及性激素的相关分析显示：空腹GLP -1水平与空腹血糖及胰岛素呈负相关(r=-0.355、-0.552，均P<0.05)，与睾酮间呈负相关趋势，但未达统计学意义(r=-0.303，P=0.087)。
五、GLP -1对睾酮影响的多元逐步回归分析
以睾酮为因变量，年龄、BMI 、空腹血糖、胰岛素及GLP -1为自变量，采用多元逐步回归分析。最终进入方程的是年龄、BMI 及GLP -1，β=-0.087、0.221、0.191，均P<0.05，R 2=0.491，F=9.309(表3)。
讨
论
GLP -1是由小肠L 细胞分泌的一种肽类激素，
研究表明糖尿病前期如糖耐量异常及肥胖人群已经存在GLP -1分泌缺陷。PCOS 也是糖尿病前期人群之一，但目前关于PCOS 患者GLP -1水平变化的研究较少，1996年，Gama 等[5]观察了7例偏低体重
的PCOS 患者75g OGTT 后血GLP -1水平的变化，显示与对照组相比未见统计学差异。2008年，意大利的一项纳入21例低体重PCOS 患者(BMI<22kg/m 2)的研究显示，GLP -1水平在OGTT 180min 时显著下降[6]。2014年Aydin 等[7]的研究则提示与对照组相比PCOS 患者空腹及餐后GLP -1水平均显著降低。
表1
研究对象一般情况比较（x ˉ±s ）
组别NC 组PCOS 组t 值P 值
例数3033
年龄(岁)26.1±2.826.3±2.80.2800.780
BMI(kg/m 2)24.1±3.025.4±4.21.3750.174
LH(U/L)8.1±2.7
12.5±5.74.008<0.001FSH(U/L)9.4±1.86.4±1.6-6.943<0.001
LH/FSH
0.87±0.282.06±1.016.485<0.001雌激素(μg/L)31±1033±120.8010.426
睾酮(nmol/L)0.78±0.162.26±0.859.749
<0.001注：NC ：对照组；PCOS ：多囊卵巢综合征组；BMI ：体质指数；LH ：黄体生成素；FSH ：
卵巢刺激素
注：NC ：对照组；PCOS ：多囊卵巢综合征组;组间比较a P<0.05图1
两组受试者口服葡萄糖耐量试验中血糖(GLU)、血清胰岛素(INS)、胰高血糖素样肽1(GLP -1)随时间变化曲线
但目前的研究均为小样本研究，结果不尽一致，国内尚未见相关报道，因此我们认为有进一步研究的必要。
表3胰高血糖素样肽1对睾酮影响的多元逐步
回归分析
变量FPG(mmol/L) FINS(mU/L)年龄(岁) BMI(kg/m2) GLP-1(pmol/L)偏回归系数
-
-
-0.087
0.221
0.191
标准化回归
系数
-
-
-0.287
1.090
0.543
t值
0.861
-1.122
-2.097
4.595
2.326
P值
0.397
0.272
0.045
<0.001
0.027
注：FPG：空腹血糖；FINS：空腹胰岛素；BMI：体质指数；GLP-1：胰高血糖素样肽1；-：无数据
本研究发现，与年龄及BMI相匹配的健康女性相比，PCOS患者空腹及糖负荷后1h血糖及胰岛素水平均显著升高，且AUCGLU和胰岛素抵抗指数显著高于对照组，提示PCOS患者存在糖代谢异常及胰岛素抵抗。目前大量研究发现，无论有无肥胖，
65%～80%的PCOS患者存在高胰岛素血症及胰岛素抵抗[8]，且与无胰岛素抵抗的PCOS患者相比更容易出现多毛、月经紊乱和无排卵等表现[9]，因此胰岛素抵抗是PCOS患者的重要病理生理特征，而PCOS患者的生殖功能障碍可能与由于卵巢局部的胰岛素抵抗相关[10-11]。
由于对胰岛素抵抗在PCOS发病中所起的关键作用的认识不断加深，PCOS的治疗也发生相应改变，胰岛素增敏剂如二甲双胍、吡格列酮等被推荐应用于PCOS患者。GLP-1受体激动剂是一种新型的具有胰岛素增敏作用的药物，被广泛用于2型糖尿病及肥胖的治疗，不仅能改善胰岛β细胞功能，还能减轻体重，改善胰岛素抵抗。近年来有学者将其与二甲双胍联用治疗PCOS患者均取得良好的效果。2008年Elkind-Hirsch等[4]探讨了GLP-1受体激动剂艾塞那肽与二甲双胍联用对肥胖PCOS患者的效果，结果显示与单用二甲双胍组相比，联合用药显著改善了PCOS患者的胰岛素抵抗及月经周期，增加了排卵率，并显著降低雄激素水平及体重。
2014年Kahal等[12]的研究同样证实GLP-1受体激动剂利拉鲁肽能显著改善PCOS患者的胰岛素抵抗，但其具体机制尚不明确。本研究显示PCOS患者空腹GLP-1水平明显降低，糖负荷后30min GLP-1水平峰值明显升高，考虑为代偿性分泌增加，但持续时间较短，相关分析显示PCOS患者的空腹GLP-1水平与空腹血糖及胰岛素均呈负相关，提示PCOS 患者存在GLP-1分泌水平异常，与PCOS患者的胰岛素抵抗及糖耐量异常的发生有关。糖负荷后1h PCOS患者的血糖及胰岛素水平均显著高于对照组，但GLP-1水平未同步升高，提示PCOS患者对高糖刺激的GLP-1分泌应答存在缺陷。这为GLP-1在PCOS患者中的应用提供了一定的依据。GLP-1与生殖间的关系目前研究较少，体外研究发现GLP-1能促进GnRH的释放，与生殖密切相关[13]，动物研究表明GLP-1能刺激啮齿类动物下丘脑LH的释放，提示GLP-1与生殖间存在一定联系[14]。本研究发现PCOS患者的睾酮水平及LH/FSH显著高于对照组，空腹GLP-1与睾酮水平间存在负相关趋势，但相关分析未达统计学差异(r=-0.303，P= 0.087)，可能与本研究样本量较小有关。多元逐步回归分析显示在校正了年龄、BMI、空腹血糖及空腹胰岛素后，空腹GLP-1与睾酮水平独立相关(β= 0.191，P=0.027)，提示GLP-1水平与睾酮水平间存在重要关系。最近的一项研究表明，静脉注射GLP-1能降低血中睾酮的水平，且其调节作用不依赖LH的释放[15]。
总之，PCOS仍是导致育龄女性不孕的重要原因之一，目前缺乏有效可靠的治疗手段。本研究提
表2多囊卵巢综合征（PCOS）组与对照组HOMA-IR及糖负荷后各指标比较（xˉ±s）
组别NC组PCOS组
t值
P值HOMR-IR
3.0±1.4
4.9±3.8
2.712
0.010
AUCGLU
20.4±2.3
22.3±4.1
2.290
0.026
AUCINS
287±120
348±131
1.912
0.061
AUCGLP
28±13
27±13
-0.321
0.749
ΔGLU30
3.0±0.5
3.2±1.6
0.655
0.516
ΔINS30
116±47
127±58
0.792
0.431
ΔGLP30
4.8±2.6
6.7±3.2
2.557
0.013
注：HOMR-IR：稳态模型胰岛素抵抗指数；GLUAUC：葡萄糖曲线下面积(mmol·h-1·L-1)；INSAUC：胰岛素曲线下面积(mU·h-1·L-1)；GLPAUC：胰高血糖素样肽1曲线下面积(pmol·h-1·L-1)；?GLU30：葡萄糖30min净增值(mmol/L)；?INS30：胰岛素30min净增值(mU/L)；?GLP30：胰高血糖素样肽130min净增值(pmol/L)
示，PCOS患者存在GLP-1分泌缺陷，因此应用GLP-1受体激动剂或类似物能改善GLP-1分泌缺陷从而取得良好的治疗效果。但本研究为小样本临床研究，存在一定局限性。关注PCOS患者的GLP-1水平变化，并进行相关大样本的临床研究，有望为PCOS患者的治疗提供新的思路和方法。
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(收稿日期：2015-02-23)
(本文编辑：霍永丰)
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