原核表达系统是目前使用最广泛、最完善的重组蛋白表达系统，具有遗传背景清晰、表达周期快、表达量高、成本低等优势，缺点是无法进行蛋白的翻译后修饰，得到具有生物活性蛋白的几率较小。原核表达系统适用于表达原核来源的蛋白或不需要翻译后修饰的真核来源蛋白。
在原核蛋白表达过程中，需要综合考虑表达菌株、质粒载体、表达条件三大因素，以获得最满意的表达效果。下面为大家一一介绍这三大因素的选择和优化。
1. 表达菌株
菌株的选择往往是大家最容易忽视的，大多数人会选择使用自己实验室有的或用过的表达菌株。当蛋白表达效果不佳时，大多会在质粒载体或表达条件上找原因，而不会考虑菌株的选择是否合适。但作为表达宿主，菌株一定会对外源基因表达蛋白产生影响。
图1 大肠杆菌
原核表达系统常用的菌株包括大肠杆菌、芽孢杆菌和链霉菌。其中运用最为广泛的就是大肠杆菌表达系统。以下为大家列出了一些常用的大肠杆菌表达菌株，可根据不同的需求进行选择。
2. 质粒载体
质粒表达载体上的重要元件包括启动子，多克隆位点，终止子，复制子，信号肽，融合标签，筛选标记等。根据载体上这些元件的特性，有多种质粒可供选择。
图2 大肠杆菌表达质粒pET-22b(+)图谱
启动子：根据启动子的强弱考虑，强启动子可以提高蛋白表达量；弱启动子可以降低本底表达、增加可溶表达、表达小量伴侣蛋白等。根据启动子的作用方式考虑，组成型启动子使宿主不停的表达重组蛋白；诱导型启动子使宿主在特定诱导条件下表达重组蛋白。
终止子：终止子的作用在于保护mRNA在核外不被降解，延长mRNA的寿命，以提高重组蛋白表达量。对于T7系统来说，由于T7 RNA聚合酶效率非常高，保证一直有充足的mRNA提供翻译，所以终止子对其影响不大，只有一些自身带有起始密码子的外源基因需要终止子。
复制子：复制子决定质粒载体拷贝数，拷贝数越高，重组蛋白表达量就越高。表达载体通常会选用高拷贝的复制子，但过高的拷贝数会影响质粒稳定性和宿主生长。常用的高拷贝复制子包括pCoE1，pMBI(pUC)等。
融合标签：融合标签是与目的蛋白共同表达的一段多肽。较小的融合标签（如His-tag）一般不影响重组蛋白的结构和功能；较大的融合标签（如GST）可以帮助蛋白表达和折叠，提高蛋白溶解度。N端标签自身带有启动子和宿主偏好密码子，可以提高蛋白表达量，但提前中止的蛋白片段也会一并被纯化；C端标签则可保证只有完整的蛋白得到纯化。标签位置
还应该避免位于蛋白重要功能区末端。
筛选标记：在没有压力的培养环境下，宿主中的外源质粒常随着复制而丢失。为了稳定质粒表达，需要在质粒载体中加入筛选标记，使宿主在压力环境下生长。常用的抗生素筛选标记有：青霉素抗性、卡那霉素抗性、氯霉素抗性和四环素抗性等。需要根据不同的菌株和培养环境，选择合适的筛选标记。
3. 优化表达条件
新建的重组蛋白表达系统常常会出现蛋白不表达、或表达量不理想等情况。为了提高重组蛋白表达量、改善蛋白质量，一般都需要对表达条件进行优化。原核表达条件的优化主要从以下几方面考虑：
蛋白不表达：如果重组蛋白不表达，首先检查cDNA和质粒是否正确，然后尝试更换菌株、质粒载体、标签等。通常原核来源的蛋白不能表达的情况很少见，如果是真核蛋白不能表达，还可以更换表达系统，尝试酵母或昆虫细胞表达系统。
蛋白表达量低：宿主菌蛋白的密码子使用频率一般是不同的，有最佳密码子、偏好密码子、稀有密码子和利用率最低的密码子。检查目的蛋白的密码子构成，使其适应宿主菌的密码子偏好。如果重组蛋白N端存在大量集中稀有密码子，会降低mRNA的稳定性，显著降低翻译速度，引起翻译提前中止，将这些稀有密码子突变成宿主偏好的密码子，能够显著提高蛋白表达水平。另一种方法，还可以将菌株更换为提供稀有密码子tRNAs的菌株（如Rosetta）。此外，高GC含量、回文结构和相距较近的两个起始密码子都会阻碍转录启动。
可溶表达低：如果重组蛋白可溶表达低，可尝试降低诱导后培养温度，引导重组蛋白降低表达速度，提高正确折叠率，一般25-30℃就能明显改善蛋白折叠。重组蛋白在所有细胞中表达水平相当时，减少诱导剂可明显增加蛋白可溶表达量。使用M9ZB和NZCYM培养基，可增加细菌的拷贝数；使用LB培养基，可提高外源蛋白的表达量。
高毒性蛋白：宿主菌的生长会受到外源基因表达的影响。经过改造的宿主在很大程度上能够容忍重组蛋白，重组蛋白可以占到细胞总蛋白量的50%以上。但少数高毒性蛋白的本底表达会杀伤宿主，导致质粒丢失，所以需要降低重组蛋白的本底表达量。采用的方法包括在培养基中加入1%的葡萄糖、使用严格启动和低拷贝数的载体、选择可表达T7溶菌酶的宿主等。除此之外，还可以通过共表达重组蛋白抑制剂、提高抗生素浓度等方法提高重组蛋白
表达量。
包涵体表达：过量表达的重组蛋白会在大肠杆菌细胞内凝聚，形成无活性的包涵体沉淀。包涵体蛋白的优势在于能够轻松获得超高表达量，不可溶蛋白不会被宿主蛋白酶降解，重组蛋白毒性被大大抑制，蛋白纯度高且易纯化；其缺点在于包涵体蛋白折叠混乱、二硫键配对混乱、没有生物活性、需要变复性。提高培养温度、延长培养时间、加大菌密度都有利于诱导包涵体形成。
和谐分工福利 ——构建人类理想社会的三大要素 杨晓松 摘要：本文从人类发展史上先贤哲人对理想世界、大同之世的渴望与探索出发，深入发掘他们思想中的精华，并结合近现代空想社会主义、科学社会主义关于构建理想社会的思想，分析并总结出他们对人类理想社会设计中最核心的三大要素是“和谐、分工、福利”，深入分析这三大要素的内涵、意义、作用和基本要求，得出这三大要素对我们的和谐社会建设有十分重要的意义的结论。在以上分析的基础上，紧密联系现实条件下胡锦涛总书记提出的建立和谐社会的奋斗目标，对我国现代化条件下和谐社会建设应着重解决的问题进行粗线条的分析，从四大方面提出自己对我国进行社会主义和谐社会建设的工作重点的认识，给出了自己的解决方法。 关键词：理想社会和谐分工福利政治秩序性 Abstract：The history of human development from the ancient sage philosophers of the ideal world, the who Datong desire starting with the exploration, and they explore in depth the essence, and in the context of modern utopian socialism, scientific socialism on an ideal
society's thinking, analysis and summed up their ideal society on human design of the three core elements of a "harmonious, division of labour and welfare." and in-depth analysis of the three major elements of the content, significance, role and the basic demands of these three elements come to our harmonious society is very important building conclusions. On the basis of the above analysis, the reality of conditions in close contact General Secretary Hu Jintao put forward a harmonious social objectives, the conditions of our modern building harmonious society should focus on resolving issues seem analysis from the four aspects of our own socialist harmonious society for building awareness of the focus of the work, and given their own solutions. Key words：Ideal society Harmony Division Welfare Political Order 人是社会动物，从进化诞生的那一刻起就处在群居的生活当中。在与自然斗争的岁月里，人类始终互相依存，互相扶助，为争取一个美好的生存和生活环境而共同努力。回溯人类的演进史，深深的烙着集体和社会的印迹。根据马克思的社会学说，人类集结而成的社会迄今经历了原始社会、奴隶社会、封建社会、资本主义社会和社会主义社会
浅谈原核表达的技巧 摘要：原核表达是表达外源基因常用的方法，具有操作简单、快捷，需时较短，表达产量高，适合工业化等优点。本文作者根据自己的实践经验，总结了原核表达的一些技巧。 关键词：原核表达表达载体限制性内切酶 将植物、动物、微生物等的目的基因插入合适载体后导入大肠杆菌用于表达大量蛋白质的方法一般称为原核表达。这种方法在蛋白纯化、定位及功能分析等方面都有应用。大肠杆菌用于表达重组蛋白有以下优点：易于生长和控制；易于培养，实验耗费少；可选择多种大肠杆菌菌株及与之匹配的具各种特性的质粒。原核表达是近年来表达外源蛋白常用的方法，本文根据自己的实践经验，着重谈谈对原核表达中的技巧问题。 一、原核表达一般程序 表达前准备-获得目的基因-构建含目的片段的表达载体（测序验证）-转化表达宿主菌-诱导靶蛋白的表达-表达蛋白的分析。 二、原核表达中各操作步骤的关键因素及技巧 1.表达前的准备要素：原核表达注重表达前对目的片段、表达载体及表达菌株的分析、选择。正所谓“磨刀不误砍柴功”，经过细致、周全的分析、准备、设计可带来较为顺当的实验，可免去许多不必要的麻烦。 （1）对表达载体的分析 载体的选择：同样的载体，同样的系统，很可能表达这个蛋白表达量起高，但另外一个就是做不出来，所以表达载体的选择非常重要，没有万能的载体。选择载体通常我们关心质粒上的几个功能组件及所带来的问题：是否为诱导表达型载体，启动子的强弱、多克隆位点、限制性内切酶的位置、终止密码子的有无及位置，融合Tag的有无，筛选报告基因的位置等。所选载体一定要保持原来的遗传背景（有些载体经过多次交换已变异）。选择表达载体时，要根据所表达蛋白的最终应用考虑，如果为了方便纯化，可选择融合表达；如果为了获得天然蛋白，可选择非融合表达。融合表达时在选择外源DNA同载体分子连接反应时，对转录和转译过程中密码结构的阅读不能发生干扰。 翻译的起始位点：要表达目的蛋白，在该基因的5’端必须有一起始位点，现在大部分的表达载体都提供起始位点，起始密码子与核糖体结合位点的距离都已被优化，一般情况下不需要自己再加，实际操作时要留意载体图谱上是否注明有起始密码子和终止密码子，如无，还得根据自己的实际情况加上。 在起始密码子附近的mRNA二级结构：外源基因其始转录后，保持mRNA的有效延伸、终止及稳定存在是外源基因有效表达的关键，尤其是在起始密码子附近的mRNA二级结构可能会抑制翻译的起始或者造成翻译暂停从而产生不完全的蛋白。如果利用Primer Premier软件分析DNA或RNA结构上有柄（stem）结构，并且结合长度超过8个碱基，这种结构会因为位点专一突变等因素而变得不稳定，影响正常的翻译。 （2）对目的片段的分析 基因（或蛋白）的大小：原核表达的成功与否与所要表达的蛋白（或基因）大小有关，一般说来小于5kD或者大于100kD的蛋白都是难以表达的。蛋白越小，越容易被内源蛋白水解酶所降解。在这种情况下可以采取串联表达，在每个表达单位（即单体蛋白）间设计蛋白水解或者是化学断裂位点。如果蛋白较小，那么加入融合标签GST、Trx、MBP或者其它较大的促进融合的蛋白标签就较有可能使蛋白正确折叠，并以融合形式表达。如果蛋白较大，大于60kD的蛋白建议使用较小的标签（如6×组氨酸标签）。对于结构研究较清楚的蛋白可以采取截取表达。当然表达时要根据目的进行截取，如果是要进行抗体制备而截取，那么一定要保证截取的部位抗原性较强。对于抗原性也可以利用软件分析，比如Vector NIT Suite或者一些在线软件，不过在分析之余也要认识到这是一种资料统计的结论，
原核表达遇到瓶颈怎么 办 TPMK standardization office【 TPMK5AB- TPMK08- TPMK2C- TPMK18】
我想表达遇到的第一个瓶颈估计就是为什么我的外源片段插到载体里面，PCR鉴定没问题，双酶切也OK，可是就是不见表达。一般我们是如何判断没有表达呢？大多都是首先进行SDS-PAGE。在跑胶的时候一定要设对照，比较严谨的电泳对照，应该是：Marker，标准品阳性对照（如果有，且打算做Western的话），以及空白载体（诱导）和重组载体（不诱导）2个阴性对照，再加上诱导不同时间的表达结果。Marker用于判断条带大小，标准品用于判断Western体系包括抗体显色剂和操作的可靠性，以及精确判断大小；空白载体（诱导）负对照有助于判断在非诱导条件下的本底表达；而重组载体（不诱导）负对照则有助于判断诱导的效果以及排除诱导剂对宿主菌潜在的干扰，或者是区分细菌内源和外源表达产物——偷懒可不是好习惯，会影响结果判断。注意，接种表达和接种做感受态都类似，一定要用挑单克隆、加足量抗生素、过夜培养的新鲜菌液转种最好，在筛选压力下生长旺盛的种子液远比经过4℃保存的菌液要好得多，也许是因为保存时间长会导致抗生素失效部分细菌丢失质粒或者其他变化。反正就是一种经验做法。 跑SDS-PAGE的话可以用考马斯亮兰染，它灵敏度在100ng左右；但是不能跟着做Western了。银染的灵敏度在0.1～1 ng；有钱还可以用Sypro Red，灵敏度高还可以继续做Western。WesternBlot是蛋白质定性和半定量的最通用的技术，具体细节可参考生物通WesternBlot技术专题，我们有详细介绍的。 在做过Western Blot仍没有检测到表达带，那么就要开始进行下一步的分析了。首先，看看载体的多克隆位点和片断插入的序列，是否有因为酶切连接而意外引入了转录终止信号。有时载体几经多个实验人员的周转，反复插入片断，或者是粘端
5．气象台及时通过报纸、广播、电视、互联网等媒体，发布了台风“珍珠”将要登陆的消息，使得台风造成的损失降到了最低。这体现了信息的（）。07会考 ①时效性②载体依附性③价值性 A．①②③ B．①③ C．②③ D．①② 3．得知小曼被困的消息后，救援人员及时赶到现场施救，使小曼得以及时获救。这主要体现了信息的（）。08会考 A．时效性 B．共享性 C．载体依附性 D．可压缩性 1、物质、能量和（）是构成世界的三大要素。 A、能源 B、信息 C、资源 D、通讯 3、在windows98以上版本中，使用下列（）命令启动DOS操作界面。 A、DIR B、PING C、CD D、COMMAND 2、从猿进化到人的重要标志是（）。 A、语言的使用 B、文字的创造 C、汉字的使用 D、印刷技术的发明1．对于信息特征的理解，以下说法正确的是 A、信息一旦共享就会消失 B、信息可以不依附于载体存在 C、信息的价值是会改变的 D、信息是固定不变的，不能被处理 5、下列关于信息的表述不正确的一项是（）。 A 信息是事物的运动状态及其状态变化的方式。 B 信息可以不依赖于载体而独立存在 C 不同的载体可以表达出相同的信息 D 相同的载体能表达出不同的信息 6、物质、能量、和（）构成了世界的三大要素。 A、知识 B、信息技术 C、信息 D、知识经济 13、“你有一种思想，我有一种思想，彼此交换，每人至少有两种思想”这体现了什么？( ) A、信息的依附性 B、信息的时效性 C、信息的价值性 D、信息的共享性 17、不属于信息的主要特征（）。 A、可开发、存储 B、不可利用、不能增值 C、可传递、共享、可压缩 D、可处理、再生 1、对于信息，下列说法错误的是（）。 A、信息是可以处理的 B、信息是可以传递的 C、信息是可以共享的 D、信息可以不依附于某种载体而存在 2、天气预报、市场信息都会随时间的推移而变化，这主要体现了信息的（）。 A、共享性 B、时效性 C、载体依附性 D、可以存储
1.将已经成功转有重组表达载体pET-28a-CYP83A1的表达菌 E. coli.BL21(DE3)在LB固体培养基（50μg/mL Kan）上划线接种培 2.挑取单菌落，接种于5mL的LB液体培养基(50μg/mL Kan)中，37℃，180r/min振荡培养过夜。 3.取500μL过夜培养的菌液转接入100mL新的LB液体培养基(50μg/mL Kan)中，37℃，190r/min振荡培养到菌液OD600 =0.6~0.8。 4.分组培养：实验组加入终浓度为1mmol/L的IPTG，对照组不加IPTG，37℃，190r/min诱导培养6h。 5.8000r/min离心2min，收集细菌，用1×PBS(0.01mol/L)缓冲液悬浮。 6.冰上超声波破碎，功率30w，工作5s，间歇5s，总时间2min。 7.4℃、12000r/min离心10min，分离上清与沉淀，取100μL上清与等体积的2×上样缓冲液混合；用200μL1×上样缓冲液悬浮沉淀，沸水浴5min后，对上清和沉淀进行SDS-PAGE检测。
重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达及SDS-PAGE分析 挑测序正确的单克隆接种到3mLLB（50μg·mL-1Kan）培养基中，振荡培养12h后，将菌液按1﹕100的比例加入到300mL LB（50μg·mL-1Kan）培养基中200r/min37℃振荡培养至OD600为0.5—0.6时，加入IPTG（使终浓度为1mmol·L-1）进行诱导表达，分别在37℃诱导4h，4℃保存备用。未加IPTG诱导的pET-28a-CsFOMT收集作为阴性对照。诱导全部完成后，各取50mL 菌液离心收集细菌，加入SDS上样缓冲液，悬浮混匀，100℃3min，12000r/min离心1min，取上清4℃保存备用。另取50mL菌液离心收集菌体后用1×PBS（PH7.4）将沉菌悬起，经过超声波细胞破碎（20mm的变幅杆，400W，超声2s，间隔5s，重复60次），10000r/min离心10min分离上清和沉淀，上清和沉淀样品中分别加入SDS上样缓冲液，混匀，沸水浴，取上清和沉淀分别进行SDS-PAGE（5%浓缩胶，12%分离胶），然后分析蛋白表达结果
（一）信息及其特征 1．现代社会中，人们把（B）称为构成世界的三大要素。 A．物质、能量、知识B．信息、物质、能量 C．财富、能量、知识D．精神、物质、知识 2、盲人摸象体现了信息交流的重要性，信息可以交流说明了信息具有（D） A．价值性B．时效性C．载体依附性D．共享性 4、网络上的信息被人下载和利用，这正说明信息具有（A） A．价值性B．时效性C．载体依附性D．可转换性 5、（B）不属于信息的主要特征 A．时效性B．不可能增值C．可传递、共享D．依附性 6、下面哪一个不属于信息的一般特征？（D） A．载体依附性B．价值性C．时效性D．独享性 7、天气预报、市场信息都会随时间的推移而变化，这体现了信息的（C） A．载体依附性B．共享性C．时效性D必要性 B、交通信号灯能同时被行人接收，说明信息具有（B ） A．依附性B．共享性C．价值性D．时效性 9、关于信息特征，下列说法正确的是（B） A．信息能够独立存在B．信息需要依附于一定的载体 C．信息不能分享D．信息反映的是时间永久状态 10、下面对信息特征的理解，错误的（B） A．天气预报、情报等引出信息有时效性 B．信息不会随时间的推移而变化 C．刻在甲骨文上的文字说明信息的依附性 D．盲人摸象引出信息具有不完全性 11、在朝鲜战争即将爆发的时候，蓝德公司向美国政局高价兜售一份调查报告没被理会，战后美国政府分文未花就得到该报告，这体现了信息的：(D) A．价值性B．可伪性C．具有可传递性D．具有失效性 12、关于信息共享与物质的共享的差别，以下说法正确的是：（C） A．信息一方使用时另一方就不能使用 B．信息使用后就会损耗 C．信息可无限复制、传播或分配给众多的使用者 D．信息可以有限的使用 13、将几副相互无关联的图像通过图像处理软件（如Photoshop）的加工后，形成一副富有创意，有实际用途的图像，这体现了信息是（C） A．可以共享的 B．需依附一定载体的 C．可以增值的 D．具有实效性 16、下面有关对信息作用事例的理解，错误的是（D） A．许多历史事件以文字的形式记载在书上，体现信息的依附性。 B．交通信号灯被许多行人接收，体现信息的共享性。 C．天气预报、股市行情体现信息的有价值性 D．身边的信息体现了信息的不完全性 （二）信息技术与社会 17、我们常说的“IT”是（A）的简称
原核表达 一、原理 1、E . coli 表达系统 E . coli 是重要的原核表达体系。在重组基因转化入E . coli 菌株以后，通过温度的控制，诱导其在宿主菌内表达目的蛋白质，将表达样品进行SDS-PAGE 以检测表达蛋白质。 2、外源基因的诱导表达 提高外源基因表达水平的基本手段之一，就是将宿主菌的生长与外源基因的表达分成两个阶段，以减轻宿主菌的负荷。常用的有温度诱导和药物诱导。本实验采用异丙基硫代-β-D-半乳糖昔（IPTG）诱导外源基因表达。 不同的表达质粒表达方法并不完全相同，因启动子不同，诱导表达要根据具体情况而定。 二、材料 1、诱导表达材料 ( 1 ) LB （Luria—Bertani）)培养基 酵母膏(Yeast extract) 5g 蛋白胨(Peptone) 10g NaCl 10g 琼脂(Agar) 1-2% 蒸馏水(Distilled water) 1000ml pH 7.0 适用范围：大肠杆菌 ( 2 ) IPTG 贮备液：2 g IPTG溶于10 mL 蒸馏水中，0 . 22 μm 滤膜过滤除菌，分装成1 mL /份，－20 ℃保存。 ( 3 ) l×凝胶电泳加样缓冲液： 50 mmol / L Tris -CI ( pH 6 . 8 ) 50 mmol / L DTT 2 % SDS （电泳级） 0.1 ％溴酚蓝 10 ％甘油 2、大肠杆菌包涵体的分离与蛋白纯化材料 1 ）酶溶法 （1）裂解缓冲液： 50 mmol / L Tris-CI ( pH 8 . 0 ) 1 mmol / L EDTA 100 mmol / LNaCI （2）50 mmol / L 苯甲基磺酰氟（PMSF ）。 （3）10 mg / mL 溶菌酶。 （4）脱氧胆酸。 （5）1 mg / mL DNase I。 2 ）超声破碎法 ( 1 ) TE 缓冲液。 ( 2 ) 2×SDS -PAGE 凝胶电泳加样缓冲液： 100 mmol / L Tris-HCI ( pH 8 . 0 ) 100 mmol / L DTT 4 %SDS 0.2 ％溴酚蓝 20 ％甘油
真核细胞表达系统的类型与常用真核细胞表达载体 标签：真核细胞酵母表达系统细胞表达载体真核表达系统昆虫表达系统动物表达系统 摘要: 原核表达系统是常被用来研究基因功能的成熟系统，由于原核表达系统具有包涵体蛋白不易纯化、蛋白修饰不完整等缺陷，人们也开始利用真核细胞表达系统来研究基因。 原核表达系统是常被用来研究基因功能的成熟系统，由于原核表达系统具有包涵体蛋白不易纯化、蛋白修饰不完整等缺陷，人们也开始利用真核细胞表达系统来研究基因。 自上世纪70年代基因工程技术诞生以来，基因表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。并随着人类基因组计划实施的进行，在技术方法上得到了很大发展，时至今日已取得令人瞩目的成就。随着人类基因组计划的完成，越来越多的基因被发现，其中多数基因功能不明。利用表达系统在哺乳动物细胞内表达目的基因是研究基因功能及其相互作用的重要手段。 在各种表达系统中，最早被采用进行研究的是原核表达系统，这也是目前掌握最为成熟的表达系统。该项技术的主要方法是将已克隆入目的基因DNA段的载体(一般为质粒)转化细菌(通常选用的是大肠杆菌)，通过iptg诱导并最终纯化获得所需的目的蛋白。其优点在于能够在较短时间内获得基因表达产物，而且所需的成本相对比较低廉。但与此同时原核表达系统还存在许多难以克服的缺点：如通常使用的表达系统无法对表达时间及表达水平进行调控，有些基因的持续表达可能会对宿主细胞产生毒害作用，过量表达可能导致非生理反应，目的蛋白常以包涵体形式表达，导致产物纯化困难;而且原核表达系统翻译后加工修饰体系不完善，表达产物的生物活性较低。 为克服上述不足，许多学者将原核基因调控系统引入真核基因调控领域，其优点是： ①根据原核生物蛋白与靶DNA间作用的高度特异性设计，而靶DNA与真核基因调控序列基本无同源性，故不存在基因的非特异性激活或抑制; ②能诱导基因高效表达，可达105倍，为其他系统所不及; ③能严格调控基因表达，即不仅可控制基因表达的“开关”，还可人为地调控基因表达量。 因此，利用真核表达系统来表达目的蛋白越来越受到重视。目前，基因工程研究中常用的真核表达系统有酵母表达系统、昆虫细胞表达系统和哺乳动物细胞表达系统。 1.酵母表达系统 最早应用于基因工程的酵母是酿酒酵母，后来人们又相继开发了裂殖酵母、克鲁维酸酵母、甲醇酵母等，其中，甲醇酵母表达系统是目前应用最广泛的酵母表达系统。目前甲醇酵母主要有H Polymorpha，Candida Bodini，Pichia Pastris3种。以Pichia Pastoris应用最多。
Chi l 原核表达基本试验步骤 将克隆化基因插入合适载体后导入大肠杆菌用于表达大量蛋白质的方法一般称为原核表达。这种方法在蛋白纯化、定位及功能分析等方面都有应用。大肠杆菌用于表达重组蛋白有以下特点：易于生长和控制；用于细菌培养的材料不及哺乳动物细胞系统的材料昂贵；有各种各样的大肠杆菌菌株及与之匹配的具各种特性的质粒可供选择。但是，在大肠杆菌中表达的蛋白由于缺少修饰和糖基化、磷酸化等翻译后加工，常形成包涵体而影响表达蛋白的生物学活性及构象。 表达载体在基因工程中具有十分重要的作用，原核表达载体通常为质粒，典型的表达载体应具有以下几种元件： （1）选择标志的编码序列； （2）可控转录的启动子； （3）转录调控序列(转录终止子，核糖体结合位点)； （4）一个多限制酶切位点接头； （5）宿主体内自主复制的序列。 原核表达一般程序如下：获得目的基因－准备表达载体－将目的基因插入表达载体中（测序验证）－转化表达宿主菌－诱导靶蛋白的表达－表达蛋白的分析－扩增、纯化、进一步检测，其中包括： 一、试剂准备 （1）LB培养基。 （2）1M IPTG（异丙基硫代-β-D-半乳糖苷）：2.38g IPTG溶于10ml ddH2O
中,0.22μm滤膜抽滤，-20℃保存。 CCY的IPTG是1M的，用时进行1000倍稀释。 二、操作步骤 （一）获得目的基因 1、通过PCR方法：以含目的基因的克隆质粒为模板，按基因序列设计一对引物（在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点），PCR循环获得所需基因片段。 2、通过RT-PCR方法：用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA，以mRNA 为模板，逆转录形成cDNA第一链，以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。 （二）构建重组表达载体 1、载体酶切：将表达质粒用限制性内切酶（同引物的酶切位点）进行双酶切，酶切产物行琼脂糖电泳后，用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。 2、PCR产物双酶切后回收，在T4DNA连接酶作用下连接入载体。我们用Soultion I连接。 （三）获得含重组表达质粒的表达菌种 1、将连接产物转化大肠杆菌BL21，根据重组载体的标志（抗Amp或蓝白斑）作筛选，挑取单斑，碱裂解法小量抽提质粒，双酶切初步鉴定。 2、测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确,进入下步操作。否则应筛选更多克隆，重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点。 3、以此重组质粒DNA转化表达宿主菌的感受态细胞。
江南大学现代远程教育2016年上半年考试大作业 考试科目:《马克思主义基本原理概论》 一、大作业题目（内容）： 1 、如何理解科学技术在社会发展中的作用？结合当代新科技革命的发展谈谈你 的认识。 答：1、如何理解科学技术在社会发展中的作用？ 科学技术革命是社会动力体系中的一种重要动力，“是一种在历史上起推动 作用的、革命的力量”。科技革命主要是通过促进人们的生产方式、生活方式和 思维方式的变革来推动社会发展。现代科学技术革命对人类社会发展的影响更加 深远，更加强烈。主要表现在： 第一，现代科技革命推动生产方式的变革。首先，现代科技革命使生产力的 构成要素发生了质的变革，从而极大地推动了社会生产力的发展。劳动资料、劳动对象越来越成为科技的物化，劳动者“智化”程度越来越高。其次，它导致了 产业结构的重大调整，传统产业在技术改造中面目一新，新的“知识产业”迅速 兴起。再次，它推动了生产关系的调整。 第二，现代科技革命推动生活方式的变革。现代科技革命直接或间接地作用 于人们生活方式的四个基本要素，即生活主体、生活资料、生活时间和生活空间， 从而引起现代生活方式发生新的变革。 第三，现代科技革命推动思维方式的变革。爱因斯坦说过：“科学对于人类 事务的影响有两种方式。第一种方式是大家熟悉的，科学直接地，并且在更大程 度上间接地生产出完全改变了人类生活的工具。第二种方式是教育性质的，它作用于心灵。尽管草率看来，这种方式不大明显，但至少同第一种方式一样锐利。” 现代科技革命使思维方式具有系统性、整体性、开放性、动态性、创造性等特征，并使认识活动出现数学化、模型化、形式化的趋势。 现代科技革命有力地推动了生产方式、生活方式和思维方式的变革，充分展 现出科学技术全方位的社会功能。它用最新的事实印证着马克思所认为的科学
真核细胞常见表达载体 真核细胞, 表达载体 1、pCMVp-NEO-BAN载体 特点:该真核细胞表达载体分子量为6600碱基对，主要由CMVp启动子、兔β-球蛋白基因内含子、聚腺嘌呤、氨青霉素抗性基因和抗neo基因以及pBR322骨架构成，在大多数真核细胞内都能高水平稳定地表达外源目的基因。更重要的是，由于该真核细胞表达载体中抗neo基因存在，转染细胞后，用G418筛选，可建立稳定的、高表达目的基因的细胞株。 插入外源基因的克隆位点包括Sal1、BamH1和EcoR1位点。注意在此载体中有二个EcoR1位点存在。 2、pEGFP, 增强型绦色荧光蛋白表达载体(Enhanced Fluorecent Protein V ector) 特点: pEGFP表达载体中含有绿色荧光蛋白，在PCMV启动子驱动下，在真核细胞中高水平表达。载体骨架中的SV40origin使该载体在任何表达SV40 T抗原的真核细胞内进行复制。Neo抗性盒由SV40早期启动子、Tn5的neomycin/kanamycin抗性基因以及HSV-TK基因的聚腺嘌呤信号组成，能应用G418筛选稳定转染的真核细胞株。此外，载体中的pUC origin 能保证该载体在大肠杆菌中的复制，而位于此表达盒上游的细菌启动子能驱动kanamycin抗性基因在大肠杆菌中的表达。 用途: 该表达载体EGFP上游有Nde1、Eco47111和Age1克隆位点，将外源基因扦入这些位点，将合成外源基因和EGFP的融合基因。借此可确定外源基因在细胞内的表达和/或组织中的定位。 亦可用于检测克隆的启动子活性(取代CMV启动子,Acet1-Nhe1)。 3、pEGFT-Actin, 增强型绿色荧光蛋白/人肌动蛋白表达载体 特点:pEGFP-Actin表达载体中含有绿色荧光蛋白和人胞浆β-肌动蛋白基因，在PCMV启动子驱动下，在真核细胞中高水平表达。载体骨架中的SV40origin使该载体在任何表达SV40 T抗原的真核细胞内进行复制。Neo抗性盒由SV40早期启动子、Tn5的neomycin/kanamycin 抗性基因以及HSV-TK基因的聚腺嘌呤信号组成，能应用G418筛选稳定转染的真核细胞株。此外，载体中的pUC origin 能保证该载体在大肠杆菌中的复制，而位于此表达盒上游的细菌启动子能驱动kanamycin抗性基因在大肠杆菌中的表达。 用途: pEGFP-Actin载体在真核细胞表达EGFP-Actin融合蛋白，该蛋白能整合到胞内正在生的肌动蛋白，因而在活细胞和固定细胞中观察到细胞内含肌动蛋白的亚细胞结构。 4、pSV2表达载体 特点：该表达质粒是以病责SV40启动子驱动在真核细胞目的基因进行表达的，克隆位点为Hind111。SV40启动子具有组织/细胞的选择特异性。此载体不含neo基因，故不能用来筛选、建立稳定的表达细胞株。 5、CMV4 表达载体 特点:该真核细胞表达载体由CMV启动子驱动，多克隆区域酶切位点选择性较多。含有氨苄青霉素抗性基因和生长基因片段以及SV40复制原点和fl单链复制原点。但值得注意的是，该表达载体不含有neo基因，转染細胞后不能用G418筛选稳定的表达细胞株。 其他常用克隆Vector： pBluscript II KS DNA 15 ug pUC18 DNA 25 ug pUC19 DNA 25 ug 说明: pBluescript II kS、pUC18 &Puc19载体适合于DNA片段的克隆、DNA测序和对外源基因进行表达等。这些载体由于在lacZ基因中含有多克隆位点，当外源DNA片段扦入，转化lacZ基因缺乏细胞，并在含有IPTG和X-gal的培养基上培养时，含有外源DNA载体的细胞
原核表达步骤
Chi l 原核表达基本试验步骤 将克隆化基因插入合适载体后导入大肠杆菌用于表达大量蛋白质的方法一般称为原核表达。这种方法在蛋白纯化、定位及功能分析等方面都有应用。大肠杆菌用于表达重组蛋白有以下特点：易于生长和控制；用于细菌培养的材料不及哺乳动物细胞系统的材料昂贵；有各种各样的大肠杆菌菌株及与之匹配的具各种特性的质粒可供选择。但是，在大肠杆菌中表达的蛋白由于缺少修饰和糖基化、磷酸化等翻译后加工，常形成包涵体而影响表达蛋白的生物学活性及构象。 表达载体在基因工程中具有十分重要的作用，原核表达载体通常为质粒，典型的表达载体应具有以下几种元件： （1）选择标志的编码序列； （2）可控转录的启动子； （3）转录调控序列(转录终止子，核糖体结合位点)； （4）一个多限制酶切位点接头； （5）宿主体内自主复制的序列。 原核表达一般程序如下：获得目的基因－准备表达载体－将目的基因插入表达载体中（测序验证）－转化表达宿主菌－诱导靶蛋白的表达－表达蛋白的分析－扩增、纯化、进一步检测，其中包括： 一、试剂准备 （1）LB培养基。 （2）1M IPTG（异丙基硫代-β-D-半乳糖苷）：2.38g IPTG溶于10ml ddH2O
中,0.22μm滤膜抽滤，-20℃保存。 CCY的IPTG是1M的，用时进行1000倍稀释。 二、操作步骤 （一）获得目的基因 1、通过PCR方法：以含目的基因的克隆质粒为模板，按基因序列设计一对引物（在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点），PCR循环获得所需基因片段。 2、通过RT-PCR方法：用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA，以mRNA 为模板，逆转录形成cDNA第一链，以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。 （二）构建重组表达载体 1、载体酶切：将表达质粒用限制性内切酶（同引物的酶切位点）进行双酶切，酶切产物行琼脂糖电泳后，用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。 2、PCR产物双酶切后回收，在T4DNA连接酶作用下连接入载体。我们用Soultion I连接。 （三）获得含重组表达质粒的表达菌种 1、将连接产物转化大肠杆菌BL21，根据重组载体的标志（抗Amp或蓝白斑）作筛选，挑取单斑，碱裂解法小量抽提质粒，双酶切初步鉴定。 2、测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确,进入下步操作。否则应筛选更多克隆，重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点。 3、以此重组质粒DNA转化表达宿主菌的感受态细胞。
信息技术学业水平测试卷 1．现代社会中，人们把（）称为构成世界的三大要素。 A．物质、能量、知识B．信息、物质、能量 C．财富、能量、知识D．精神、物质、知识 2、盲人摸象体现了信息交流的重要性，信息可以交流说明了信息具有（） A．价值性B．时效性C．载体依附性D．共享性 3、下列叙述中。其中（）是错误的 A．信息可以被多个信息接收者接收并且多次使用 B．信息具有时效性特征 C．同一个信息可以依附于不同的载体 D．获取了一个信息后，它的价值将永远存在 4、网络上的信息被人下载和利用，这正说明信息具有（） A．价值性B．时效性C．载体依附性D．可转换性 5、（）不属于信息的主要特征 A．时效性B．不可能增值C．可传递、共享D．依附性 6、下面哪一个不属于信息的一般特征？（） A．载体依附性B．价值性C．时效性D．独享性 7、天气预报、市场信息都会随时间的推移而变化，这体现了信息的（） A．载体依附性B．共享性C．时效性D必要性 B、交通信号灯能同时被行人接收，说明信息具有（） A．依附性B．共享性C．价值性D．时效性 9、关于信息特征，下列说法正确的是（） A．信息能够独立存在B．信息需要依附于一定的载体 C．信息不能分享D．信息反映的是时间永久状态 10、下面对信息特征的理解，错误的（） A．天气预报、情报等引出信息有时效性 B．信息不会随时间的推移而变化 C．刻在甲骨文上的文字说明信息的依附性 D．盲人摸象引出信息具有不完全性11、在朝鲜战争即将爆发的时候，蓝德公司向美国政局高价兜售一份调查报告没被理会，战后美国政府分文未花就得到该报告，这体现了信息的：( ) A．价值性B．可伪性C．具有可传递性D．具有失效性 12、关于信息共享与物质的共享的差别，以下说法正确的是：（） A．信息一方使用时另一方就不能使用 B．信息使用后就会损耗 C．信息可无限复制、传播或分配给众多的使用者 D．信息可以有限的使用 13、将几副相互无关联的图像通过图像处理软件（如Photoshop）的加工后，形成一副富有创意，有实际用途的图像，这体现了信息是（） A．可以共享的 B．需依附一定载体的 C．可以增值的 D．具有实效性 14、武王伐封作为中国历史上的重大事件，却没有甲骨文资料记载其确切年代。现代考古工作者根据历史传说中的“天象”，利用天文知识成功地完成该时间的判定。这说明信息具有（）特征 A、可传递性B．时效性C．载体依附的可转换性 D、价值性 15、某次语文测验成绩已经按学号顺序录入到Excel表中，对语文成结在100分以上的学生筛选，得出相应的名单，这体现了信息（）的特征 A、可以共享的 B、可以增值的 C、需依附一定载体 D、具有时效性 16、下面有关对信息作用事例的理解，错误的是（） A．许多历史事件以文字的形式记载在书上，体现信息的依附性。 B．交通信号灯被许多行人接收，体现信息的共享性。 C．天气预报、股市行情体现信息的有价值性 D．身边的信息体现了信息的不完全性 17、我们常说的“IT”是（）的简称 A．信息技术B．因特网C．输入设各D手写板 18、总体来说，一切与信息的获取、加工、表达、( )、管理、应用等有关的技术，都可以称之为信息技术 A．识别B．显示C．交换D．交流19、下面哪句话是正确的（） A．现代的通信和计算机技术的发展产生了信息技术 B． 21世纪人类进入信息社会，信息、信息技术就相应产生了
如何做原核表达 人们合成与生物相关的物质是从尿素开始的，1828年，德国化学家维勒人工合成了存在于生物体的这种有机物。在1960年我国科学家采用化学方法首次成功地合成了具有生物活性的蛋白质——胰岛素。随着内切酶的发现和基因工程技术的发展，人们发现用各种不同的载体在原核、真核系统中进行蛋白表达更为行之有效。而这其中大肠杆菌表达系统发展得最为迅速、成熟。原核表达具有操作方便、快捷，需时较短，表达量大，适合工业化生产等优点。虽然也有缺少糖基化和表达后加工等问题，当有了其它多种表达系统后，原核系统仍是我们合成外源蛋白的首选。 在网上看到有人把原核表达技术分成四个等级：初次尝试扫盲、乱棍打枣入门、系统优化中级和自成一体高手，觉得十分有意思。但是根据笔者自己的经验以及耳闻目睹的一些经历告诉我：做表达？那是谋事在人，成事在天。有时候你把克隆做出来了，双酶切鉴定没问题，测序没问题，可是就是看不到表达带。原因当然可以分析，实验也是可以改进，但是窜改一下戈尔泰的话：“成功的实验都是一样的，失败的实验各有各的不幸。”在实验遇到瓶颈的时候要如何进行分析，找到问题的症结是我们的实验关键所在。在准备进行原核表达的时候需要考虑的因素很多，市面上可供选择的载体、菌株也很多，要如何进行正确的选择，找到适合自己的载体是十分重要的。所以，现在要对目前常用的一些载体进行介绍，让我们对其相关产品及其表达原理进行了解，以方便实验设计。 首先来一些大肠杆菌表达的基本概念：一个完整的表达系统通常包括配套的表达载体和表达菌株，如果是特殊的诱导表达还包括诱导剂，如果是融合表达还包括纯化系统或者Tag检测等等。选择表达系统通常要根据实验目的来考虑，比如表达量高低，目标蛋白的活性，表达产物的
标签：真核细胞酵母表达系统细胞表达载体真核表达系统昆虫表达系统动物表达系统 摘要 : 原核表达系统是常被用来研究基因功能的成熟系统，由于原核表达系统具有包涵体蛋白不易纯化、蛋白修饰不完整等缺陷，人们也开始利用真核细胞表达系统来研究基因。 原核表达系统是常被用来研究基因功能的成熟系统，由于原核表达系统具有包涵体蛋白不易纯化、蛋白修饰不完整等缺陷，人们也开始利用真核细胞表达系统来研究基因。 自上世纪70年代基因工程技术诞生以来，基因表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。并随着人类基因组计划实施的进行，在技术方法上得到了很大发展，时至今日已取得令人瞩目的成就。随着人类基因组计划的完成，越来越多的基因被发现，其中多数基因功能不明。利用表达系统在哺乳动物细胞内表达目的基因是研究基因功能及其相互作用的重要手段。 在各种表达系统中，最早被采用进行研究的是原核表达系统，这也是目前掌握最为成熟的表达系统。该项技术的主要方法是将已克隆入目的基因DNA段的载体(一般为质粒)转化细菌(通常选用的是大肠杆菌)，通过iptg诱导并最终纯化获得所需的目的蛋白。其优点在于能够在较短时间内获得基因表达产物，而且所需的成本相对比较低廉。但与此同时原核表达系统还存在许多难以克服的缺点：如通常使用的表达系统无法对表达时间及表达水平进行调控，有些基因的持续表达可能会对宿主细胞产生毒害作用，过量表达可能导致非生理反应，目的蛋白常以包涵体形式表达，导致产物纯化困难;而且原核表达系统翻译后加工修饰体系不完善，表达产物的生物活性较低。 为克服上述不足，许多学者将原核基因调控系统引入真核基因调控领域，其优点是： ①根据原核生物蛋白与靶DNA间作用的高度特异性设计，而靶DNA与真核基因调控序列基本无同源性，故不存在基因的非特异性激活或抑制; ②能诱导基因高效表达，可达105倍，为其他系统所不及; ③能严格调控基因表达，即不仅可控制基因表达的“开关”，还可人为地调控基因表达量。 因此，利用真核表达系统来表达目的蛋白越来越受到重视。目前，基因工程研究中常用的真核表达系统有酵母表达系统、昆虫细胞表达系统和哺乳动物细胞表达系统。 1.酵母表达系统 最早应用于基因工程的酵母是酿酒酵母，后来人们又相继开发了裂殖酵母、克鲁维酸酵母、甲醇酵母等，其中，甲醇酵母表达系统是目前应用最广泛的酵母表达系统。目前甲醇酵母主要有H Polymorpha，Candida Bodini，Pichia Pastris3种。以Pichia Pastoris 应用最多。
原核表达详细步骤 PartⅠ选择表达的目的基因 一、基因序列 1. 得到靶基因DNA（cDNA）序列，有几种方式寻找正确的读码顺序: ①利用生物信息学在NCBI上blast同源基因，找到同源蛋白，再在DNA 的ORF中找到正确的读码。 ②实验方法，即得到蛋白，进行测序，然后在DNA上找到正确的读码。 ③利用mRNA的特征，找到启动子，编码区，终止子。在编码区中找到翻译起始密码子与终止密码子（cDNA）。 2. 注意事项： ①区别ORF和CDS→ORF一般在DNA上的定义，寻找原则是翻译起始密码子和终止密码子；CDS可以是DNA上的定义，也可以是mRNA上的定义，分为complete CDS和partial CDS,是从第一个核酸开始读，连续读下去，complete CDS读码是“M、、、、、、、、、＊”，partial CDS的读码是相应的AA ②在进行试验设计时，充分利用生物信息学的信息后，在进行试验设计。 二、抗原决定簇的预测 1、原理： 蛋白质表面部分可以使免疫系统产生抗体的区域叫抗原决定簇。一般抗原决定簇是由6－12 氨基酸或碳水基团组成，它可以是由连续序列（蛋白质一级结构）组成或由不连续的蛋白质三维结构组成。变性蛋白只是天然蛋白伸直的了产物，用来免疫动物具有更强的抗原性。只是天然蛋白中被包在内部的抗原决定簇也会暴露出来，如果用该变性抗原制备的抗体来检测变性抗原是可以的，如果用来检测天然蛋白，可能会有假阳性。做单抗也可以，同样道理，筛选出的单抗可能对抗的抗原决定簇处于天然抗原的内部，是否能用还要看将来该单抗用来干什么。 2、选择原则： （1）、亲水性：大部分抗原决定簇是亲水性的。
高中信息技术学业考试试题（必修部分） 主题一：信息技术与社会 （一）信息及其特征 1．现代社会中，人们把 ( ）称为构成世界的三大要素。 A．物质、能量、知识B．信息、物质、能量 C．财富、能量、知识D．精神、物质、知识 2、盲人摸象体现了信息交流的重要性，信息可以交流说明了信息具有（） A．价值性B．时效性C．载体依附性D．共享性 3、下列叙述中。其中（）是错误的 A．信息可以被多个信息接收者接收并且多次使用 B．信息具有时效性特征 C．同一个信息可以依附于不同的载体 D．获取了一个信息后，它的价值将永远存在 4、网络上的信息被人下载和利用，这正说明信息具有（） A．价值性B．时效性C．载体依附性D．可转换性 5、（）不属于信息的主要特征 A．时效性B．不可能增值C．可传递、共享D．依附性 6、下面哪一个不属于信息的一般特征？（） A．载体依附性B．价值性C．时效性D．独享性 7、天气预报、市场信息都会随时间的推移而变化，这体现了信息的（） A．载体依附性B．共享性C．时效性D必要性 8、交通信号灯能同时被行人接收，说明信息具有（） A．依附性B．共享性C．价值性D．时效性 9、关于信息特征，下列说法正确的是（） A．信息能够独立存在B．信息需要依附于一定的载体 C．信息不能分享D．信息反映的是时间永久状态 10、下面对信息特征的理解，错误的（） A．天气预报、情报等引出信息有时效性 B．信息不会随时间的推移而变化 C．刻在甲骨文上的文字说明信息的依附性 D．盲人摸象引出信息具有不完全性
11、在朝鲜战争即将爆发的时候，蓝德公司向美国政局高价兜售一份调查报告没被理会，战后美国政府分文未花就得到该报告，这体现了信息的：( ) A．价值性B．可伪性C．具有可传递性D．具有失效性 12、关于信息共享与物质的共享的差别，以下说法正确的是：（） A．信息一方使用时另一方就不能使用 B．信息使用后就会损耗 C．信息可无限复制、传播或分配给众多的使用者 D．信息可以有限的使用 13、将几副相互无关联的图像通过图像处理软件（如Photoshop）的加工后，形成一副富有创意，有实际用途的图像，这体现了信息是（） A．可以共享的 B．需依附一定载体的 C．可以增值的 D．具有实效性14、武王伐封作为中国历史上的重大事件，却没有甲骨文资料记载其确切年代。现代考古工作者根据历史传说中的“天象”，利用天文知识成功地完成该时间的判定。这说明信息具有（）特征 A、可传递性B．时效性C．载体依附的可转换性 D、价值性 15、某次语文测验成绩已经按学号顺序录入到Excel表中，对语文成结在100分以上的学生筛选，得出相应的名单，这体现了信息（）的特征 A、可以共享的 B、可以增值的 C、需依附一定载体 D、具有时效性 16、下面有关对信息作用事例的理解，错误的是（） A．许多历史事件以文字的形式记载在书上，体现信息的依附性。 B．交通信号灯被许多行人接收，体现信息的共享性。 C．天气预报、股市行情体现信息的有价值性 D．身边的信息体现了信息的不完全性 （二）信息技术与社会 1、我们常说的“IT”是（）的简称 A．信息技术B．因特网C．输入设各D手写板 2、总体来说，一切与信息的获取、加工、表达、( )、管理、应用等有关的技术，都可以称之为信息技术 A．识别B．显示C．交换D．交流 3、下面哪句话是正确的（）