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微生物

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1、细菌的大小、基本形态

细菌的大小以微米作为测量单位,有球菌、杆菌、螺菌。(衰老型、多形型)

2、菌落的概念及意义

菌落:在固体培养基中,有一个细菌经过无限增殖而形成肉眼可见的细菌细胞群体

意义:用于细菌的鉴定

3、细菌的基本结构和特殊结构

细菌的基本结构:细胞壁、细胞质、核体

细菌的特殊结构:荚膜、S层、鞭毛、菌毛、芽孢

4、比较革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的细胞壁的异同

革兰氏阳性菌细胞壁:其化学成份主要是肽聚糖,是细菌细胞壁所特有的物质,由聚糖链支架、四肽侧链和五肽交联桥三部分组成的复杂聚合物。磷壁酸是革兰氏阳性菌特有的成份,此外还有多糖、蛋白质。

革兰氏阴性菌细胞壁:其结构和成份较复杂,由外膜和周质间隙组成,外膜由脂多糖、磷脂、蛋白质和脂蛋白等复合构成,周质间隙氏一层薄的肽聚糖,脂多糖为革兰氏阴性菌所特有的,由类脂A、核心多糖和侧链多糖三部分组成。

5、细菌脂多糖的组成和功能

类脂A:内毒素的主要毒性成分,无种属特异性

侧链多糖:有种型特异性

核心多糖:有属特异性

6、细菌的遗传物质

细菌具有不成形的核,无核膜、核仁遗传物质称为核质或拟核,负载遗传信息。

7、细菌荚膜的概念及主要功能

荚膜:某些细菌在其细胞壁外包绕一层粘液性物质,用理论方法去除后并不影响细菌的生命活动。

功能:(1)抗吞噬作用:荚膜具有抵抗宿主吞噬细胞的作用,因而荚膜是病原菌的重要独立因子。(2)抗有害物质的损伤作用:荚膜处于细胞的最外层,有保护菌体避免和减少受有害物质的损伤作用。(3)营养物质的贮存场所与废物排除之地。

8、细菌芽胞的特点及意义

特点:(1)对高温、干燥、辐射、化学物质有强大的抵抗力。(2)含水量低、壁厚而较密、通透性较差、不易着色、折光性强。(3)芽孢内新陈代谢几乎停止,处于休眠状态,但保持潜在萌发力。(4)不是生殖器官,一个芽孢萌发只产生一个营养状态的细胞。

意义:芽孢的抵抗力强,可在自然界中存活多年,是重要的传染源,但芽孢并不直接引起疾病,只有发芽成为繁殖体后,才能迅速大量繁殖致病。芽孢的抵抗力强,故应以杀灭芽孢作为可靠的灭菌标准。

9、致病性与毒力的概念

致病性:一定种类病原菌在一定条件下,能在宿主体内引起感染的能力称为致病性。致病性是细菌种的特征之一。

毒力:病原菌致病力的强弱程度。是量的概念,同一细菌的不同菌株,其毒力不一样。因此,毒力是菌株的特征。

10、经典的柯赫法则的内容

柯赫法则的内容:(1)特殊的病原菌应在同一疾病中查见,在健康者不存在。(2)此病原菌能被分离培养而得到纯种。(3)此纯培养物接种易感动物,能导致同样病症。(4)自实验室感染的动物体内能重新获得该病原菌的纯培养。

11、LD50的概念

半数致死量(LD50):能使接种的实验动物在感染后一定时限内死亡一半所需的微生物量或毒素量。12、何为内化作用?其意义又何在?

内化作用:某些细菌粘附与细胞表面后,能进入吞噬细胞或非吞噬细胞内部的过程。

意义:宿主细胞为进入其内的细菌提供了一个增殖的环境和庇护所。使细菌逃避宿主免疫机制,也可随吞噬细胞的游走和扩散至其他部位,造成广泛病变。

13、外毒素和内毒素的区别

种类内毒素外毒素

来源革兰氏阴性菌革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌(少数)

存在部位细胞壁成分,细菌裂解后释出活菌分泌或细菌溶解后散出

化学组成脂多糖蛋白质

稳定性好,160℃,2-4h破坏差,60-80℃,30分钟破坏

毒性作用较弱,各种内毒素作用大致相同,引

起休克、发热等。强,对机体组织器官有选择性,引起特殊临床表现

抗原性弱,能刺激机体形成抗体,但无中和

作用。甲醛处理后不能形成类毒素。强,能刺激机体形成抗毒素,经甲醛脱毒后形成类毒素。

14、金黄色葡萄球菌可产生的毒素、酶及其致病作用

(1)α毒素:损伤细胞膜的毒素,对多种哺乳动物红细胞有溶血作用,对白细胞、血小板、肝细胞、成纤维细胞、血管和平滑肌等均有损伤作用。

(2)肠毒素:按抗原性不同分为A、B、C1、C2、C3、D和E7个血清型,均可引起急性胃肠炎,即呕吐为主要症状的食物中毒。

(3)凝固酶:能结合含有抗凝剂的人或兔血浆发生凝集的酶类物质。有助于致病菌株抵抗吞噬细胞和杀菌物质。

①游离凝固酶:是液态纤维蛋白原变成固态纤维蛋白。

②结合凝固酶:使纤维蛋白原与菌体交联而致细菌凝聚。

15、链球菌产生的毒素、酶及其致病作用

脂磷壁酸:重要的粘附素。

M蛋白:抗吞噬作用。

一旦病菌大量繁殖则产生链球菌溶血素、致热外毒素等毒性物质。透明质酸酶、链激酶、DNA酶等侵袭性物质,引起多种动物疾病。

16、链球菌在血液琼脂培养基上的溶血表现

(1)α型溶血:菌落周围有不透明溶血环,多为条件性致病菌。

(2)Β型溶血:菌落周围形成完全透明的无色溶血环,致病力强。

(3)Γ型溶血:不产生溶血素,菌落周围无溶血环,无致病性。

17、链球菌的兰氏分群

兰氏用温热的稀盐酸浸出C抗原与特异性血清作沉淀反应,将链球菌分为20个血清型。

18、如何从污染的病料组织中分离致病性葡萄球菌

化脓性病灶采取浓汁渗出液;败血症采取血液,脑膜炎采取脑脊液。

19、细菌命名与书写的基本原则

细菌的命名依据“国际细菌命名法规”的规定,学名用拉丁文,遵循双名法,所谓“双名法”是指每一种细菌的拉丁文名称由属名和种名两部分组成,属名的第一个字母必须大写,其余均应小写整个属名和种名在出版物中应为斜体。

20、细菌的分类方法

双歧检索条目分类法:将生物的基本特性分为主要和次要,根据主次顺序编制双歧图和检索表。

数值分类法:生化特征“等重要原则”,选择至少50个生理生化特征,比较结果相似系数或相似百分数表示。

21、细菌分类鉴定的标准

(一)表型特征:菌体形态、结构、染色性、动力、菌落、生理生化特性、抗原性等。

(二)种系发生关系(C+G)%

核酸分子杂交:DNA—DNA/DNA—RAN,70%以上为同一种。

16S rRNA寡核苷酸编目

22、炭疽杆菌的主要培养特性有哪些?

(1)需氧或兼性厌氧,最适生长温度30-37℃,营养要求不高,普通培养基中即能生长良好。

(2)在血琼脂上一般不溶血,但个别菌株也可轻微溶血。

(3)液体培养基中呈絮状沉淀生长。

(4)明胶穿刺培养呈倒松树状,表面液化成漏斗状。

(5)在含青霉素培养基中,可形成串珠反应,与其他需氧芽孢杆菌区别。

23、如何进行炭疽病的微生物学诊断?

1、细菌学检查

(1)可疑病畜尸体严禁剖检,防止芽孢形成。镜检:若见有荚膜大杆菌,两端截平、竹节状。

(2)分离培养:用普通琼脂或血琼脂

(3)纯培养:镜检、串珠实验、生化实验

(4)动物实验:将实验材料制成悬液或纯培养物给小鼠注射,24-36h小鼠死于败血症。

2、血清学检查

(1)Ascoli沉淀反应:用加热抽提待检炭疽杆菌体多糖抗原与已知抗体进行沉淀反应。

(2)协同凝集实验、间接凝血实验

24、产气荚膜梭菌的主要生化特点。

本菌最突出的生化特性是对牛乳培养基的“暴烈发酵”。

25、产气荚膜梭菌分型及其对动物的致病性。

A:人气性坏疽和食物中毒B:羔羊痢疾C:绵羊猝疽

D:牛场毒血症E:犊牛、羔羊肠毒血症

26、破伤风梭菌的主要生物特性。

革兰氏阴性菌、两端钝圆、细长的杆菌,无荚膜,多具周边毛,而能运动,在动物体内外均能形成芽孢。严格厌氧菌。

27、多杀性巴氏杆菌的形态染色及培养方面有何特征?如何进行微生物学诊断?

(1)形态染色:两端钝圆,中央微凸的短杆菌,革兰氏阴性菌,单个存在,有时成双排列。病料涂片用瑞氏染色液或美蓝染色,可见典型的两极着色;培养物所做的涂片两极着色不明显。

(2)培养特性:对营养要求较严格,在普通培养基上生长贫瘠。

血液或血清培养基中生长良好,长成灰白色露珠状,针尖大小菌落,不溶血。

麦康凯培养基上不生长。

在血清肉汤中开始轻度混浊后明朗,管底出现黏稠沉淀,表面形成菌环。

(3)微生物诊断:涂片或触片镜检、染色(美蓝染色或瑞士染色,两极着色)

28、鸭疫里氏杆菌的微生物学诊断?

(1)涂片镜检:两极着色

(2)分离培养:巧克力培养

(3)生化试验:不发酵葡萄糖和蔗糖

29、嗜血杆菌为什么需要巧克力琼脂培养基进行分离培养?

嗜血杆菌的酶系统不完善,生长需供给X因子和V因子(细菌呼吸过程中起逆氢作用的两种脱氢辅酶)。

30、什么叫“卫星现象”?

当嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平板上共同孵育时,由于后者能结合较多的V因子,在金黄色葡萄球菌菌落周围生长的流感嗜血杆菌的菌落较大,离金黄色葡萄球菌菌落越远的越小。

31、致病性大肠杆菌的分类,毒力因子特征和致病机理?

(1)产肠毒素的大肠杆菌

(2)产类志贺毒素的大肠杆菌

(3)致病性大肠杆菌

(4)侵袭性大肠杆菌

(5)肠出血性大肠杆菌

(6)肠凝集性大肠杆菌

32、大肠杆菌和沙门菌的抗原结构是如何组成的,有时如何鉴定的?

大肠杆菌:细胞型O、荚膜K、鞭毛H、菌毛F

沙门氏菌:菌体抗原O、荚膜抗原K、鞭毛抗原H

33、大肠杆菌和沙门氏菌的鉴别诊断要点

被检材料

分离培养

普通琼脂斜面三糖铁琼脂斜面

涂片镜检

生化反应血清型鉴定

34、质粒有哪些主要特征?质粒可赋予宿主菌哪些主要特征?

(1)F质粒(致育质粒):与有性结合有关

(2)耐药质粒或R质粒:细菌对抗菌药物或对重金属盐类的抗性

(3)毒力质粒:编码细菌各种毒力因子

(4)细菌素质粒:控制细菌产生细菌素

(5)代谢质粒

35、细菌基因转移和重组的主要方式有哪些?

(1)转化

(2)结合

(3)转导

(4)溶源性转换

(5)原生质融合

(6)转染

36、研究基因变异有何实际意义?

(1)诊断疾病上的应用:要做出正确的诊断,不但要熟悉细菌的典型特性还要了解细菌变异的规律。(2)预防疾病上的应用:利用病原菌的减毒变异株制备活菌苗。

(3)治疗疾病上的应用:由于耐药菌株的增多要根据药毒测试指导临床用药。

(4)开展细菌流行病学研究:分子微生物学、追踪基因转移与散播、耐药质粒的散播。

37、基因工程的概念?

将所获得的基因经酶切,插入由病毒质粒或染色体DNA片段构建成的载体,将重组DNA转入微生物或动物、植物细胞,使其复制,由此获得的基因克隆或表达产物。

38、毒力岛

细菌的某个或某些毒为基因群,分子结构和功能有别于细菌染色体,但位于细菌染色体中,因此称“岛”。

39、质粒

细菌染色体外的遗传物质,编码细菌各种重要的生物学性状。

40、基因转移与重组

外源性的遗传物质,由供体菌转入受体菌细胞内的过程称为基因转移。

转移的基因与受体菌DNA整合在一起称为重组。

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