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生物技术制药试题库完整

名词解释

1、生物技术制药：即采用现代生物技术,借助某些微生物、植物、动物生产医药品。

2、基因工程制药：指利用重组DNA技术生产蛋白质或多肽类药物。

3、细胞工程制药：是利用动、植物细胞培养生产药物的技术。

4、酶工程制药：是将酶或活细胞固定化后用于药品生产的技术。

5、发酵工程制药：指利用微生物代谢过程生产药物的技术。

6、抗体工程制药：利用抗原和抗体的特异性结合性质生产药物的技术。

7、先导化合物：通过优化药用、减少毒性和副作用可以使其转变为一种新药的化合物。

8、生物药物的定义：是指运用微生物学、生物学、医学、生物化学等的研究成果.从生物体、生物组织、细胞、体液等.综合利用微生物学、化学、生物化学、生物技术、药学等学科的原理和方法制造的一类用于预防、治疗和诊断的制品。

9贴壁细胞：生长须有贴附的支持物表面.依靠贴附因子生长。

10、悬浮细胞：生长不依赖支持物表面.在培养液中呈悬浮状态生长。如血液淋巴细胞、

生产干扰素的Namalwa(那马瓦)细胞。

11、兼性贴壁细胞：生长不严格依赖支持物。如中国地仓鼠卵巢细胞.小鼠L929细胞。

12牛痘病毒：构建多价疫苗腺病毒、

逆转录病毒：用于基因治疗

杆状病毒：用于外源基因表达

13、生物碱：含氮有机化合物

14、生理活性物质：对细胞内生化代谢和生理活动起着调节作用。

15、植物抗毒素（phy toalexins）是指在植物防御系统内能对抗微生物进攻的某些次级代谢产物.有些时候连续合成.有些时候在被刺激下才会产生抗毒素.或仅在被诱导下其产量才能增加。

16、生物转化定义（biotransformation,bioconversion）：也称生物催化（biocatalysis）,是指利用生物离体培养细胞.固定化的植物（或微生物）细胞或从这些有机体中分离得到的酶等.对外源底物进行结构修饰而获得更有价值产物的一种技术。

17、抗体（antibody.Ab）：是B细胞在抗原的刺激下分化为浆细胞.产生具有与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白。

18、免疫球蛋白（immunoglobulin.Ig）：具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白统称为免疫球蛋白。

19、多克隆抗体：由多个克隆细胞产生的针对多种抗原决定簇的混合抗体制剂。也称第一代人工抗体

20、基因工程抗体：是利用DNA重组技术.通过对抗体分子基因结构与功能了解.有目的地在基因水平上对抗体分子进行切割、拼接或修饰.或者直接合成基因序列.再将基因导入细胞表达产生的一类抗体.也称第三代抗体

21、药用酶：指可用于预防和治疗疾病的酶。

22、酶法制药：指利用酶的催化作用而将前体物质转化为具有药用功效的物质的过程。

23、自然选育：在生产过程中.不经过人工诱变处理.根据菌种的

自发突变而进行菌种筛选的过程.叫做自然选育或

自然分离。

填空

1、生物药物原料以天然的生物材料为主.包括人体、动物、植物、微生物和各种海洋生物等。

2 、注射用药要求.对药品制剂的均一性、安全性、稳定性、有效性等

;..

3、检验上的特殊性由于生物药物具有特殊的生理功能.（生物药物的活性检验）

4、蛋白质类药物的分离纯化方法：（1）沉淀法蛋白质、酶的初步纯化往往用沉淀法。其原理是使蛋白质胶体颗粒破碎.从而沉淀蛋白质。常用的有盐析法、有机溶剂沉淀法、等电点沉淀法、与靶物质结合沉淀法（如抗原—抗体）等。（2）按分子大小分离的方法有超滤法和透析法（即膜分离法）、凝胶层析法、超速离心法等。其中膜分离法可用于生物大分子的浓缩、分级和脱盐。（3）按分子所带电荷进行分离的方法氨基酸、多肽、蛋白质、酶均为两性电解质。根据它们的等电点不同.调节pH值进行交换、电泳、等电聚焦法等。（4）亲和层析法大部分生物活性物质都有其作用的靶物质.如酶与底物（或抑制剂）、抗原与抗体、激素与受体等。

5、核酸类药物的分离纯化方法：提取法和发酵法

6、糖类药物的分离纯化方法：非降解法、降解法。分离方法：沉淀法和离子交换层析法

7、脂类药物的分离纯化方法：沉淀法和离子交换层析法

8、氨基酸的生产方法：蛋白质水解法、发酵法、化学合成与酶促合成法

9、氨基酸的分离方法：沉淀法、吸附法和离子交换法。

10、基因工程菌的培养方式：分批培养、补料分批培养、连续培养、透析培养（利用膜的半

透性）、固定化培养（对分泌型菌有利）

基因工程菌培养原则

11、⑴细胞收集：离心法、膜分离法。⑵细胞破碎：机械破碎法、非机械破碎法物理、化

学和生物学法

12、贴壁细胞两种形态：成纤维细胞型、上皮细胞型

13、真核细胞基因表达载体种类：病毒载体、质粒载体

14、培养基的种类：天然培养基、合成培养基、无血清培养基

15、诱导子分类：内源性诱导子、外源性诱导子

16、免疫法包括：体内免疫法、体外免疫法、脾内免疫法

17突变分为：点突变和染色体畸变。

点突变分为：碱基对置换和编码组错位突变（发生一个基因范围内）

染色体畸变（染色体结构的变化）包括缺失、倒位、重复、易位和染色体数目变化等结构变化.通过分离筛选.可获得具有优良性状的变异菌株。嘧啶与嘌呤嘧啶与嘧啶

简答

1、基因工程制药研究内容：

答：（1）药物品种的开发

（2）基因工程疫苗

（3）基因工程抗体

（4）基因诊断与基因治疗

（5）建立新药的筛选模型

（6）改良菌种以产生新的微生物药物

（7）改进药物生产工艺

（8）转基因动、植物生产蛋白质类药物

2、生物技术制药的特征

答：1、高技术2、高投入3、长周期4、高风险5、高收益

3、药理学特性

（1）治疗的针对性强治疗的生理、生化机制合理.疗效可靠。如细胞色素c为呼吸链的一个重要成员.用它治疗因组织缺氧所引起的一系列疾病.效果显著。

;..

（2）药理活性高生物药物是精制出来的高活性物质.因此具有高效的药理活性

（3）毒副作用小.营养价值高（4）生物副作用常有发生 (5)用量少.价值高

4、生物药物按药物的化学本质和化学特性来分；

答：（1）氨基酸及其衍生物类药物（2）多肽和蛋白质类药物（3）酶和辅酶类药物（4）核酸及其降解物和衍生物类药物（5）糖类药物（6）脂类药物（7）细胞生长因子类（8）生物制品类5、生物药物按原料的来源分类

答：（1）人体组织来源的生物药物：（2）动物组织来源的生物药物：（3）植物组织来源的生物药物（4）微生物来源的药物（5）海洋生物来源的药物；

6、生物药物按生理功能和用途分类

答：（1）治疗药物（2）预防药物（3）诊断药物（4）其它生物医药用品

7、生物药物原料选择选择原则主要为

答：有效成分含量高、原料来源丰富.易得；原料中杂质含量少；原料成本低等；另外植物原料采收具有季节性、微生物原料要注意微生物生长的对数期、动物原料有的要注意动物的年龄与性别。

8、原料的保存方法主要有

答：（1）冷冻法（2）有机溶剂脱水法（3）防腐剂保鲜法

9、生物药物的提取方法

答：（1）是磨切法.（2）是压力法.（3）是反复冻融.（4）是超声波振荡破碎法.（5）是自溶法或酶解法

10、人类来源的其它原料的利用

答：人胎盘的应用：人胎盘丙种球蛋白、人胎盘白蛋白、人胎盘RNA酶抑制剂

；人尿的综合利用：

11、人血浆白蛋白制备工艺要点：

答：（1）络合（利凡诺（雷佛奴尔;利凡诺;乳酸依沙吖啶沉淀））：血浆在搅拌下用NaHCO3调节pH至8.6.加入等体积的2%利凡诺溶液.充分搅拌后静置2~4h.分离上清与络合物沉淀。

（2）解离：在沉淀中加灭菌蒸馏水。用0.5mol/LHCl调节pH至弱酸性.加NaCl至0.15%~0.2%.搅拌下解离。加热去杂蛋白：充分解离后.65℃恒温1h.离心分离出上清液。

（3）热处理（60 ℃.10h）：灭活病毒

（4）检验方法：冻干品为白色疏松物体。白蛋白含量占95 %以上.水分<1%.水溶后pH为6.6~7.2.硫酸铵残留量<0.01%.细菌学和热源质检测合格。

12、动物来源药物的特点

答：1、具有生物药物的共同特点.2、来源丰富3、种属间差异的考虑

13、植物来源药物的特点

答：1种类多2结构复杂3小分子4大分子

14、生物技术在海洋药物研究与发展中的重要作用。

答：1、细胞工程、基因工程、酶工程

2、开发海洋生物基因工程药物

3、开发海洋生物细胞工程药物

4、加强海洋微生物药物的开发

5、住研究内容：用基因工程技术研究抗肿瘤药物。

15、基因工程药物的发展趋势

答： 1、研发新型生物药物的新模式

2、人类基因组计划与基因工程新药的研发

;..

3、药物靶标天然配基的发现和新药的研发

4、构建生物分子库以发现新药

5、蛋白质工程与新药研究

6、糖基化工程与新药研究

7、代谢工程—组合生物学与新药研发

8、新型生物药物制剂的研究

16：利用基因工程技术生产药物的优点：

答：1、大量生产过去难以获得的生理活性蛋白和多肽.为临床使用提供有效的保障；

2、可以提供足够数量的生理活性物质.以便对其生理、生化和结构进行深入的研究.从而扩大这些物质的应用范围；

3、可以发现、挖掘更多的内源性生理活性物质；

4、内源生理活性物质在作为药物使用时存在的不足之处.可通过基因工程和蛋白质工程进行改造和去除

5、可获得新型化合物.扩大药物筛选来源。

17：集落刺激因子临床应用

答：1肿瘤化疗辅助治疗2骨髓移植3骨髓异常增生综合症及再生障碍性贫血4艾滋病

18：表皮生长因子临床应用：

答：1消化管溃疡和烧伤的治疗；

2增加皮肤和牙齿生长

3角膜移植、角膜损伤修复、白内障外科手术

4伤口愈合及皮肤溃疡

19：心钠素及利钠多肽家族作用；

答：1使血液向血管外移动.降低心脏的负荷2增加肾血流量3协调中枢神经系统和外周的活动

20：基因工程药物制药的主要程序

答：⒈目的基因的克隆

⒉构建DAN重组体

⒊DAN重组体转入宿主菌

⒋构建工程菌

⒌工程菌发酵

⒍表达产物的分离纯化

⒎产品的检验等

21、最佳的基因表达体系：

答：1.目的基因的表达产量高2.表达产物稳定3.生物活性高4.表达产物容易分离纯化

22、表达特点

答：1不存在信号肽.多为胞内产物.提取困难2分泌能力不足.常形成不溶性的包含体3蛋白质不能糖基化4产物蛋白质氮端多一个甲硫氨酸残基5 内毒素及蛋白酶的破坏6表达水平高7 培养周期短 8抗污染能力强

23、影响目的基因在酵母菌中表达的因素

答：（1）外源基因的拷贝数（2）外源基因的表达效率—启动子（3）外源蛋白的糖基化（4）宿主菌株的影响

24、质粒不稳定产生的原因

答：⑴含质粒菌产生不含质粒子代菌的频率和质粒丢失率⑵这两种菌比生长速率差异的大小。;..

25、提高质粒稳定性的方法

答：1、选择合适的宿主菌2、选择合适的载体3、选择压力抗菌素抑制质粒丢失菌的生长.提高质粒稳定性。4、分阶段控制培养5、控制培养条件温度、pH、培养基组分和溶解氧浓度6、固定化

26、重组工程菌培养过程包括:

答：⑴摇瓶操作基因工程菌生长的基础条件。⑵培养罐操作确定培养参数和控制方案以及顺序。

27、影响发酵的主要因素：

答：⒈培养基的影响⒉接种量的影响⒊温度的影响⒋溶解氧的影响⒌诱导时机的影响⒍

pH的影响

28、基因工程药物的分离纯化特点：

答：①表达产物在初始料中含量较低；②含有大量细胞及代谢产物；③表达产物稳定性差.易失活变性；④表达产物的种类繁多、结构不一、活性各异；⑤对其质量要求纯度高、无菌、无热原。

29、建立分离纯化工艺需了解的各种因素

答：1、含目的产物的起始料的特点

包括：①菌种的类型及其代谢特性。②原材料培养基的来源及其质量。③生产工艺及条件。④初始物料的物理、化学和生物学特性。

⒉物料中杂质的种类和性质⒊目的产物特性⒋产品质量的要求

30、基因工程药物的质量控制理化性质鉴定

答：（1）非特异性鉴别（2）特异性鉴别（3）相对分子质量测定（4）等电点测定（5）肽图分析（6）氨基酸组成分析（7）部分氨基酸序列分析（8）蛋白质二硫键分析

31、杂质检测

答：（1）蛋白质杂质（2）非蛋白类杂质

32、动物细胞的生理特点

答：⒈细胞的分裂周期长⒉细胞生长需贴附于基质,并有接触抑制现象。⒊正常二倍体细胞的生长寿命是有限的⒋动物细胞对周围环境十分敏感⒌动物细胞对培养基要求高⒍动物细胞蛋白质的合成途径和修饰功能与细菌不同。

33、病毒作为载体的优点：

答：①双链DNA.易重组②插入7～8kb DNA不影响正常病毒粒子的形成。③多角体蛋白和病毒粒子的形成无直接关系④多角体蛋白基因有非常强的启动子⑤用光学显微镜可看到多角体.可以此作为标记物.选阳性克隆。⑥如用家蚕杆状病毒.还可在蚕体表达外源基因

34、小牛血清的作用

答：⑴提供生长因子和激素

⑵提供贴附因子和伸展因子

⑶提供结合蛋白

⑷提供必需脂肪酸和微量元素

35、无血清培养基优点

答:①提高重复性②减少微生物污染③供应充足稳定④产品易纯化⑤避免血清因素对细胞的毒性

⑥减少血清中蛋白对生物测定的干扰

36、细胞体外培养基本条件:

答：①无菌②营养充足,防止有害物质③氧气④随时清除代谢有害物质⑤良好的生存外环境

pH :7.2-7.4 渗透压:290-300mOsm/Kg（毫渗透摩尔）温度:37+0.5℃⑥及时分种

37、植物组织培养过程再分化

;..

答：离体的植物器官、组织或细胞脱分化愈伤组织再分化根、芽

植物体

38、影响植物次级代谢产物累积的因素

答; 1、生物条件：外植体、季节、休眠、分化等；2、物理条件：温度、光（光照时间、光强、光质）、通气（氧气）、酸度和渗透压；3、化学条件：无机盐、碳源、物质生长调节剂、维生素、氨基酸、核酸、抗生素、天然物质和前体等4、工业培养条件：培养罐类型、通气、搅拌和培养方式。

39、诱导子的作用机制

答：1、膜脂超氧化和膜结构功能的改变2、形成和积累抗微生物的低相对分子质量植保素

3、蛋白酶抑制物的积累保护机体

4、合成和分泌降解微生物细胞壁的酶.从而抑制微生物生长40、植物生物转化的意义

答：（1）在植物细胞培养中.一些重要的次生代谢产物并不形成和累积。但是.这样的培养物却保留了将外源底物转化为有用产物的能力。

（2）生物转化既可产生新的化合物、又可改造已有的化合物、增加目标产物的产量以及克服化学合成的缺点。

（3）植物细胞和器官培养由于催化多步反应常常会产生中间体代谢产物.有助于我们阐明化合物的生物合成途径。

（4）催化反应可以在比较温和环境下进行.副产物较少、耗能少.安全以及减少开支等。

（5）植物生物转化系统可以与有机合成结合使用而相得益彰。

41、抗体药物的特异性

答：1、与相关抗原的特异性结合

2、对肿瘤靶细胞的选择性杀伤作用

3、在动物体内的靶向性分布

4、对相关的肿瘤显示更强的疗效

5、在临床使用取得确定的疗效

42、抗体作为治疗剂的作用

答：(1)直接使抗原失去活性

(2)使免疫效应细胞将其吞噬并加以破坏

(3)使抗原表面弱化而易于受补体破坏

43、单克隆抗体特点

答：高特异性: 均一性:来源稳定：

44、药用酶生产细胞的选择

答：1、选择条件：

（1）酶的产量高.可通过筛选、诱变、或采用基因工程、细胞工程等技术获得。

（2）容易培养和管理（3）产酶稳定性好（4）有利于酶的分离纯化（5）安全可靠

2、生产菌的来源

（1）菌种保藏机构和有关部门获得（2）自然界筛选.土壤、深海、温泉、火山、森林等菌种采集地

3、产酶菌的筛选

（1）菌种采集（2）菌种的分离初筛（3）纯化（4）复筛（5）生产性能鉴定等

45、菌种选育目的

答：1防止菌种退化2 解决生产实际问题 3提高生产能力 4提高产品质量 5 开发新产品46、自然选育的目的：

;..

答：1淘汰衰弱菌；2 保存优良菌； 3 可纯化菌种；4防止菌种衰退； 5 稳定生产和提高产量；

47、种子扩培的目的

答：1接种量的需要；2菌种的驯化；3缩短发酵时间；4保证生产水平。

48、种子的选取条件

答：1菌种细胞的生长活力强.移种至发酵罐后能迅速生长.迟缓期短； 2生理形状稳定；

3菌体总量及浓度能满足大容量发酵罐的要求；4无杂菌污染；5保持稳定的生产能力。49、工业微生物的培养类型

答：①酶制剂两步：

生物技术制药试卷A-答案

生物技术制药试卷A 一、名词解释：（本题共10小题，每小题5分，共计50分） 1、生物药物：是指利用各种生物材料，综合采用各种生物技术的原理和方法制造的一类用于预防、治疗和诊断的制品。 2、抗生素：由微生物产生，在低浓度下能杀灭和抑制病原体，但对宿主不会产生严重的副作用的物质，或使用化学方法半合成的衍生物和全合成的仿制品。广义的抗生素还包括一些抗肿瘤药、杀虫剂和除草剂。 3、补料分批发酵：是指将种子接入发酵反应器进行培养，经过一段时间之后，间歇式地、或者连续地补加新鲜培养基，使菌体进一步生长的方法。 4、限制性内切酶：生物体内能识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶。它是可以将外来的DNA切断的酶，即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力，但对自己的DNA却无损害作用，这样可以保护细胞原有的遗传信息。由于这种切割作用是在DNA 分子内部进行的，故名限制性内切酶。 5、载体：将外源目的DNA导入受体细胞，并能自我复制和增殖的工具。 6、转化细胞系：正常细胞经过某个转化过程，失去正常细胞的特点而获得无限增殖能力的细胞系。 7、微载体培养：将细胞吸附于微载体表面，再在培养液中进行悬浮培养，使细胞在微载体表面生长成单层的方法称为微载体培养法。 8、毛状根：受到发根农杆菌感染后形成的根组织，易于培养，改变了植物的次生代谢。毛状根生长快速和次级代谢产物含量高，特别适用于从木本植物和难于培养的植物中得到较高含量的次级代谢产物。

9、气升式反应器：没有搅拌，气体通过喷管进入剪切力更小，主要用于悬浮细胞的分批式培养，近年开发用于贴壁细胞的微载体培养，并进行半连续、连续和灌流式培养。 10. 酶固定化：指经物理或化学方法处理，使酶（细胞）限制或固定于特定空间位置，使之不但能连续发挥催化作用，而且反应后酶又可以反复利用的技术。二、简答题（本题共5小题，每小题8分，共40分） 1. 简述生物药物新药的研发流程。答：新药研究和开发的主要过程： (1)确定研究计划； (2) 准备候选菌株； (3) 选择合适药理模型初筛（摇瓶）、复筛（小型发酵）体外试验、细胞试验； (4) 提纯有效成分进行化学分析； (5) 精制样品（中型发酵）； (6) 临床前Ⅱ期(Preclinical Ⅱ) ； (7) Ⅰ期临床(Preclinical I)； (8) Ⅱ期临床(Preclinical Ⅱ)； (9) Ⅲ期临床(Preclinical Ⅲ)； (10) 注册申请上市、试生产； (11) 售后监测(Post－marketing surveillance)。 2.简述生物药物的优点和缺点。答：生物药物是指利用各种生物材料，综合采用各种生物技术的原理和方法制造的一类用于预防、治疗和诊断的制品。优点：

生物技术制药复习资料

第二章生物药物概论一、生物药物生产原料选择的主要原则、生物药物的特性及种类。主要原则：有效成分含量高，原料新鲜；来源丰富，易得；原料产地较近；杂质含量少；原料成本低；易提取。特性：（1）药理学特性：治疗的针对性强；药理学活性高；毒副作用小，营养价值高；生理副作用常有发生。（2）生产、制备中的特殊性：原料中的有效物质含量低；稳定性差；易腐败；注射用药有特殊要求。（3）检验上的特殊性：要有理化检验指标，和生物活性检验指标。分类：按药物化学本质和化学特性分类：（1）氨基酸及基衍生物类（2）多肽和蛋白质类（3）酶和辅酶类（4）核酸及其降解物和衍生物类（5）糖类（6）脂类（7）细胞生长因子类（8）生物制品类（9）小动物制剂（10）动物器官或组织制剂。按原料来源分类：（1）人体组织（2）动物组织（3）植物组织（4）微生物（5）海洋生物来源的药物。按生理功能和用途分类：（1）治疗药物（2）预防药物（3）诊断药物（4）其他。二、生物药物提取分离制备方法的工艺过程。在对生物药物进行提取操作时，选择提取试剂需注意的问题。工艺流程：1、生物药物原料的选择、预处理与保存（保存方法：冷冻法，-40℃；②有机溶剂脱水法；③防腐剂保鲜，多用于液体）。 2、生物药物的提取：（1）生物组织与细胞破碎：磨切法，压力法，反复冻融法，超声波震荡破碎法，自溶法，酶溶法（2）选择合适的溶剂进行提取（考虑提取剂的用量、提取时间、提取次数，注意温度、变性剂等因素）。 3、生物药物的分离纯化：（1）蛋白质类药物的分离纯化：沉淀法，亲和层析法，疏水层析法（2）核酸类药物的分离纯化：提取法，发酵法（3）糖类：沉淀法，离子交换层析法（4）脂类：沉淀法，吸附层析法，离子交换层析法（5）氨基酸类：沉淀法，吸附法，离子交换法。试剂的选择：1、对所需要提取的活性成分溶出度较高，对杂质较低。2、不破坏活性成分。 3、利于后续预处理。 4、对环境影响较小，有利于回收和处理。 5、对设备要求不高。 6、成本较低。 7、最好对人体无害。第三章基因工程制药一、基因工程制药的主要工艺过程。获得目的基因→组建重组质粒→构建基因工程菌（或细胞）→培养工程菌→产物的分离纯化→质量控制→产品检验包装二、什么是目的基因？有几种获取方法？用于构建基因工程菌的目的基因应该达到什么要求？目的基因既是人们所需要的特定基因，一般也是接受目的基因的细胞或个体原本没有的基因。获取方法：（1）直接从生物体中提取总DNA，构建基因文库，从中调用目的基因；（2）以mRNA为模板，反转录合成互补的DNA片段；（3）利用聚合酶链式反应（PCR）特异性地扩增所需要的目的基因片段（4）化学合成法；⑸逆转录（RT）-PCR法合成cDNA。基本要求:不含多余干扰成分，纯度高；片段大小适合重组操作；结构、序列正确，达到一定数量。

(完整版)生物技术制药考试题复习

一：选择题 1、酶的主要来源是( C) A、生物体中分离纯化 B、化学合成 C、微生物生产 D、动/ 植物细胞与组织培养 2、所谓“第三代生物技术”是指(A) A、海洋生物技术 B、细胞融合技术 C、单克隆技术 D、干细胞技术 3、菌体生长所需能量与菌体有氧代谢所能提供的能量在什么情况下，菌体往往会产生代谢副产物乙酸：(A) A、大于 B、等于 C、小于 D、无关 4、促红细胞生长素( EPO)基因能在大肠杆菌中表达，但却不能用大肠杆菌的基因工程菌生产人的促红细胞生长素，这是因为：( E) A、人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用 B、人促红细胞生长素基因在大肠杆菌中极不稳定 C、大肠杆菌内毒素与人的促红细胞生长素特异性结合并使其灭活 D、人的促红细胞生长素对大肠杆菌蛋白水解酶极为敏感 E、大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化 5、目前基因治疗最常用的载体是：(B) A、腺病毒 B、反转录病毒 C、腺相关病毒 D、痘苗病毒 E、疱疹病毒 6、cDNA第一链合成所需的引物是：( D) A、Poly A B、Poly C C、Poly G D、Poly T E、发夹结构 7、为了减轻工程菌的代谢负荷，提高外源基因的表达水平，可以采取的措施有：(A) A将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段 B、在宿主细胞快速生长的同时诱导基因表达 C、当宿主细胞快速生长时抑制重组质粒的表达 D、当宿主细胞快速生长时诱导重组质粒的复制 8、基因工程制药在选择基因表达系统时，首先应考虑的是：(A) A、表达产物的功能B、表达产物的产量 C.表达产物的稳定性 D.表达产物分离纯化的难易 9、疫苗出产前需进行理化鉴定、效力鉴定和(安全性鉴定)。 10、基因工程药物的化学本质属于：(C) A. 糖类 B.脂类 C.蛋白质和多肽类 D.氨基酸类 11、用聚二乙醇( PEG)诱导细胞融合时，下列错误的是：(C) A、PEG的相对分子量大，促进融合率高B、PEG的浓度高，促进融合率高C、PEG 的相对分子量小，促进融合率高D、PEG的最佳相对分子量为 4000 12、以大肠杆菌为目的基因的表达体系，下列正确的是：(C) A、表达产物为糖基化蛋白质B、表达产物存在的部位是在菌体内 C、容易培养，产物提纯简单 D 、表达产物为天然产物 13、人类第一个基因工程药物是：(A) A、人胰岛素 B、重组链激酶 C、促红细胞生成素 D、乙型肝炎疫苗 14、下列不属于加工改造后的抗体是：(C) A、人-鼠嵌合抗体 B、单链抗体C 、鼠源性单克隆抗体D、单域抗体 15、动物细胞培养的条件中，不正确的是：(D)

生物技术制药

1. 生物技术制药：采用现代生物技术人为地创造一些条件，借助某些微生物、植物或动物来生产所需的医药品。 2. 抗体：能与相应抗原特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 3.疫苗：是指将病原微生物(细菌、病毒、真菌、立克次氏体、支原体、衣原体等)及其代谢产物，经过人工减毒、灭火或利用基因工程等方法制成的用于预防传染病的免疫制剂。 4.反义核酸：包括反义DNA分子，或由部分RNA和部分DNA形成的RNA-DNA 嵌合分子，以及经高度化学修饰的寡聚核酸类似物。 5.载体分为：质粒载体和λ噬菌体载体。①质粒载体涉及三个要素：复制子、选择标记、多克隆位点、几种质粒载体（克隆载体、表达载体、突变载体、报告载体）②λ噬菌体载体：常用于构建基因组文库和cDNA 文库。λ噬菌体载体通常分为插入型载体和置换型载体，插入型载体是指载体中一个酶切位点用于外源DNA的插入，置换型载体是指外源DNA通过置换载体上非必需序列插入载体。 6.目的基因常用的制备方法：化学合成法、PCR法、基因文库法、cDNA 文库法。 7.基因工程药物制造程序：获得目的基因→构建基因工程菌→工程菌大规模培养→产物分离纯化→除菌过滤→半成品检测→成品加工→成品检测。 8.基因工程菌的培养过程:（1）摇瓶操作：了解工程菌生长的基础条件（温度、pH、培养基组分及C/N），分析表达产物的合成、积累对受体细胞的影响。（2）培养罐操作：确定培养参数、控制方案及顺序。基因工程菌的培养方式:（1）补料分批培养：将种子接入发酵反应器中进行培养，经过一段时间后，间歇或连续地补加新鲜培养基，使菌体进一步生长的培养方式。（2)连续培养：将种子接入发酵反应器中，搅拌培养至一定浓度后,开动进料和出料的蠕动泵，以控制一定稀释率进行不间断的培养。两阶段连续培养，控制和优化诱导水平、稀释率、细胞比生长速率。（3）透析培养：利用膜的半透性原理使代谢产物和培养基分离，通过去除培养液中的代谢产物来解除其生产菌的不利影响。（4）固定化培养：维持质粒稳定性(5）分批培养:DO-Stat 法：调节搅拌转速和通气速率控制溶氧在 20%，补料的流加速率是关键。Balanced DO-Stat 法：控制溶氧、搅拌转速、糖的流加速率，使乙酸维持在低浓度。控制菌体比生长速率的方法：在最优表达水平获得高密度、高表达。9.基因工程菌发酵工艺的影响因素:（1）培养基的影响（2）接种量的影响（3）温度的影响（4）溶解氧的影响（5）诱导时机的影响（温度、氧、营养）（6）pH的影响（细胞生长期、外蛋白表达期）（7）诱

2018年生物技术制药习题及答案

2018年生物技术制药习题及答案一、选择填空题 1. 酶的主要来源是什么? 微生物生产。 2. 第三代生物技术是什么? 基因组时代。 3. 基因治疗最常用的载体是什么? 质粒载体和λ噬菌体载体。 4. 促红细胞生长素基因可在大肠杆菌中表达。但不能用大肠杆菌工程菌生产人的促红细胞生产素为什么? 因为大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化, 人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用。 5. 菌体生存所需能量已菌有氧代谢所需能量在什么情况下产生代谢产物乙酸?

菌体生长所需能量 (大于) 菌体有氧代谢所能提供的能量时, 菌体往往会产生代谢副产物乙酸。 6.cDNA 第一链所合成所需的引物是什么? cDNA 第一条链合成所需引物为 PolyT 。 7. 基因工程制药在选择基因表达系统时首先考虑什么? 表达产物的功能。 8. 为了减轻工程菌代谢负荷,提高外源基因表达水平可采取什么措施? 将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段。 9. 根据中国生物制品规定要求,疫苗出厂需要经过哪些检验? 理化检定、安全检定、效力检定。 10. 基因工程药物化学本质是什么? 蛋白质。

11.PEG 诱导细胞融合? PEG 可能与可能与临近膜的水分相结合, 使细胞之间只有微笑空间的水分被 PEG 取代, 从而降低了细胞表面的极性,导致双脂层的不稳定,使细胞膜发生融合。 12. 以大肠杆菌为目的基因表达系统的表达产物,产物位置是什么? 胞内、周质、胞外。 13. 人类第一个基因工程药物是什么? 重组胰岛素。 14. 动物细胞培养的条件是什么? 温度 :哺乳类 37昆虫 25~28, ph7.2~7.4,通氧量:使 co2培养箱,不同动物比例不同。防止污染, 基本营养物质:三大营养物质维生素, 激素, 促细胞生长因子, 渗透压:大多数 260~320。 15. 不属于加工改造抗体的是什么? 单域抗体。 16. 第三代抗体是什么?

生物技术制药试题及答案(二)

生物技术制药试题及答案 1.论述生物技术在食品工业中的作用？答：（1）开辟新的食品资源：利用微生物菌体发酵生产单细胞蛋白；应用微生物酶工程生产高果糖浆、饴糖、麦芽糖、高麦芽糖浆、麦芽糊精、偶联糖等淀粉糖产品。（2）提高食品品质：利用发酵工程、酶工程技术生产酸味剂、甜味剂和鲜味剂等食品添加剂。在肉类和鱼类加工中应用酶来改善组织，嫩化肉类和转化废弃蛋白质。在乳品加工中应用酶进行干酪生产、分解乳糖和黄油增香。在果蔬加工中应用酶进行柑橘脱苦、果汁澄清和果蔬保藏等。在饮料、酿酒工业中应用酶发酵生产各种饮料。在焙烤食品生产中应用淀粉酶和蛋白酶来提高焙烤品质和增加香味。（3）食品卫生检测：酶免疫分析法、放射免疫分析法、单克隆抗体法和DNA 探针法用于检测食品中的沙门氏杆菌等。（4）食品脱毒：利用发酵法、酶解法等对食品中的有毒糖苷类物质（硫代葡萄糖苷）、寡糖（β-半乳糖苷）和棉酚等进行处理，以脱除有毒物质。 2.试论述生物技术与医药卫生的关系？答：（1）疫苗生产：病原体减毒或弱化疫苗、基因工程疫苗和核酸疫苗。病原体减毒和弱化疫苗是利用微生物的纯种培养技术以及减毒疫苗的制备技术来生产的，是以减毒或弱化的病原体作为疫苗。基因工程疫苗是将病原体的抗原基因克隆在细菌或真核细胞内，利用细菌或细胞生产病原体的抗原，利用抗原作为疫苗。而核酸疫苗则是将含有编码蛋白质基因序列的质粒载体，经肌肉注射或微弹轰击等方法导入体内，通过宿主细胞表达系统表达抗原蛋白质，诱导宿主产生对抗该抗原蛋白的免疫应答，以达到预防和治疗疾病的目的。（2）疾病诊断：单克隆抗体与ELISA技术用于诊断传染性疾病、检测肿瘤相关基因、确定激素水平、检验血液中的药物含量及鉴定微生物病原体。DNA诊断技术可用于诊断遗传性疾病、肿瘤和传染性疾病。（3）生物制药与基因工程药物：利用微生物发酵可生产各种抗生素。利用植物细胞大规模培养技术可生产天然药物，如紫草宁、紫杉醇、人参皂苷、强心苷、胡萝卜素等。利用单克隆抗体制备技术可制备用于肿瘤治疗的“生物导弹”。利

生物技术制药第二版课后习题(全)..

生物技术制药试题及重点

第一章绪论填空题 1. 生物技术制药的特征 _高技术、高投入、高风险、高收益、长周期。 2. 生物药物广泛应用于医学各领域，按功能用途可分为三类，分别是_治疗药物、预防药物、诊断药物。 3. 现代生物药物已形成四大类型：一是应用DNA重组技术制造的基因重组多肽、蛋白质类治疗剂；二是基因药物_______________ ；三是来自动物植物和微生物的天然生物药物；四是合成与部分合成的生物药物； 4. 生物技术的发展按其技术特征来看，可分为三个不同的发展阶段，传统生物技术阶段；近代生物技术阶段；现代生物技术阶段。 5. 生物技术所含的主要技术范畴有基因工程; 细胞工程；酶工程；发酵工程；蛋白质核酸工程和生化工程；选择题 1?生物技术的核心和关键是（A ） A细胞工程B蛋白质工程C酶工程D 基因工程 2. 第三代生物技术（A ）的出现，大大扩大了现在生物技术的研究范围 A基因工程技术B蛋白质工程技术C海洋生物技术D细胞工程技术 3. 下列哪个产品不是用生物技术生产的（D）A青霉素B淀粉酶C乙醇D氯化钠 4. 下列哪组描述（A ）符合是生物技术制药的特征 A高技术、高投入、高风险、高收益、长周期B 高技术、高投入、低风险、高收益、长周期 C高技术、低投入、高风险、高收益、长周期 D高技术、高投入、高风险、低收益、短周期 5. 我国科学家承担了人类基因组计划（C ）的测序工作 A10% B5% C 1% D 7% 名词解释（2）近代生物技术阶段的技术特征是微生物发酵技术，所得产品的类型多，不但有菌体的初级代谢产物、次级代谢产物，还有生物转化和酶反应等的产品，生产技术要求高、规模巨大，技术发展速度快。代表产品有青霉素，链霉素，红霉素等抗生素，氨基酸，工业酶制剂等。（3）现代生物技术阶段的技术特征是DNA 重组技术。所得的产品结构复杂，治疗针对性强，疗效高，不足之处是稳定性差，分离纯化工艺更复杂。代表产品有胰岛素，干扰素和疫苗等。 3. 生物技术在制药中有那些应用？生物技术应用于制药工业可大量生产廉价的防治人类重大疾病及疑难症的新型药物，具体体现在以下几个方面：（1）基因工程制药，利用基因工程技术可生产岀具有生理活性的肽类和蛋白质类药物，基因工程疫苗和抗体，还可建立更有效的药物筛选模型，改良现有发酵菌种，改进生产工艺，提供更准确的诊断技术和更有效的治疗技术等。随着基因技术的发展，应用前景会更广阔。（2）细胞工程和酶工程制药该技术的发展为现代制药技术提供了更强大的技术手段，使人类可控制或干预生物体初次生代谢产物和生物转化等过程，使动植物能更有效的满足人类健康方面的需求。（3）发酵工程制药发酵工程制药的发展主要体现在对传统工艺的改进，新药的研制和高效菌株的筛选和改造等。第二章基因工程制药填空题 1. 基因工程药物制造的主要步骤是：目的基因的获得；构建DNA重组体;构建工程菌；目的基因的表达；产物的分离纯化; 产品的检验。 1. 生物技术制药采用现代生物技术可以人为的创造一些条件，借助某些微生物、植物或动物来生产所需的医学药品，称为生物技术制药。 2. 生物技术药物一般说来，采用DNA重组技术或其它生物新技术研制的蛋白质或核酸来药物称为生物技术药物。 3. 生物药物生物技术药物是重组产品概念在医药领域的扩大应用，并与天然药物、微生物药物、海洋药物和生物制品一起归类为生物生物药物。简答题 1.生物技术药物的特性是什么？生物技术药物的特征是：（1）分子结构复杂（2）具有种属差异特异性（3）治疗针对性强、疗效高（4）稳定性差（5）免疫原性（6）基因稳定性（7）体内半衰期短（8）受体效应（9）多效应和网络效应（10）检验特殊性 2.简述生物技术发展的不同阶段的技术特征和代表产品？（1）传统生物技术的技术特征是酿造技术，所得产品的结构较为简单，属于微生物的初级代谢产物。代表产品如酒、醋、乙醇，乳酸，柠檬酸等。

生物技术制药名词解释

一、名词解释：每个概念5分，共50分 1. 生物技术制药生物技术制药是指运用微生物学、生物学、医学、生物化学等的研究成果，从生物体、生物组织、细胞、体液等，综合利用微生物学、化学、生物化学、生物技术、药学等科学的原理和方法进行药物制造的技术。 2. 基因表达基因表达(gene expression)是指细胞在生命过程中,把储存在DNA顺序中遗传信息经过转录和翻译,转变成具有生物活性的蛋白质分子.生物体内的各种功能蛋白质和酶都是同相应的结构基因编码的。 3. 质粒的分裂不稳定通常将质粒不稳定性分为两类:一类是结构不稳定性,也就是质粒由于碱基突变、缺失、插入等引起的遗传信息变化;另一类是分离不稳定性,指在细胞分裂过程中质粒不能分配到子代细胞中,从而使部分子代细胞不带质粒(即P-细胞)。在连续和分批培养过程中均能观察到此两类现象发生。一般情况下具有质粒的细胞(即P ＋细胞)需要合成较多的DNA、RNA和蛋白质,因此其比生长速率低于P-细胞,从而P-细胞一旦形成能较快速地生长繁殖并占据培养物中的大多数。 4. 补料分批培养发酵培养基发酵培养基是供菌种生长、繁殖和合成产物之用。它既要使种子接种后能迅速生长，达到一定的菌丝浓度，又要使长好的菌体能迅速合成需产物。因此，发酵培养基的组成除有菌体生长所必需的元素和化合物外，还要有产物所需的特定元素、前体和促进剂等。但若因生长和生物合成产物需要的总的碳源、氮源、磷源等的浓度太高，或生长和合成两阶段各需的最佳条件要求不同时，则可考虑培养基用分批补料来加以满足。 5. 人-鼠嵌合抗体嵌合抗体（chimeric atibody ）是最早制备成功的基因工程抗体。它是由鼠源性抗体的V 区基因与人抗体的 C 区基因拼接为嵌合基因，然后插入载体，转染骨髓瘤组织表达的抗体分子。因其减少了鼠源成分，从而降低了鼠源性抗体引起的不良反应，并有助于提高疗效。 6. 悬浮培养非贴壁依赖性细胞的一种培养方式。细胞悬浮于培养基中生长或维持。某些贴壁依赖性细胞经过适应和选择也可用此方法培养。增加悬浮培养规模相对比较简单，只要增加体积就可以子。深度超过5mm，需要搅动培养基，超过10cm，还需要深层通入CO2和空气，以保证足够的气体交换。通过振荡或转动装置使细胞始终处于分散悬浮于培养液内的培养方法。 7. 贴壁培养也称为细胞贴壁，贴壁后的细胞呈单层生长，所以此法又叫单层细胞培养。大多数哺乳动物细胞的培养必须采用这种方法。 8. 固定化酶不溶于水的酶。是用物理的或化学的方法使酶与水不溶性大分子载体结合或把酶包埋在水不溶性凝胶或半透膜的微囊体中制成的。酶固定化后一般稳定性增加，易从反应系统中分离，且易于控制，能反复多次使用。便于运输和贮存，有利于自动化生产。 9. 双功能抗体将识别效应细胞的抗体和识别靶细胞的抗体联结在一起，制成双功能性抗体，称为双特异性抗体。如由识别肿瘤抗原的抗体和识别细胞毒性免疫效应细胞（CTL 细胞、NK 细胞、LAK 细胞）表面分子的抗体（CD3 抗体或CD16 抗体）制成的双特异性抗体，有利于免疫效应细胞发挥抗肿瘤作用。 10. 组织工程应用生命科学与工程学的原理与技术，在正确认识哺乳动物的正常及病理两种状态下的组织结构与功能关系的基础上，研究、开发用于修复、维护、促进人体各种组织或器官损伤后的功能和形态的生物替代物的一门新兴学科。 11抗体：由B细胞接受刺激后分化为浆细胞产生的能与相应抗原特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。

生物技术制药课后习题..

生物技术制药课后习题 by xx Yua n 1生物技术制药分为哪些类型？生物技术制药分为四大类：（1）应用重组DNA技术（包括基因工程技术、蛋白质工程技术）制造的基因重组多肽, 蛋白质类治疗剂。（2）基因药物，如基因治疗剂，基因疫苗，反义药物和核酶等（3）来自动物、植物和微生物的天然生物药物 4）合成与部分合成的生物药物2、生物技术制药具有什么特征? （1）分子结构复杂（2）具有种属特异性（3）治疗针对性强，疗效高（4）稳定性差（5）基因稳定性（6）免疫原性（7）体内的半衰期短（8）受体效应（9）多效性（10）检验的特殊性 3、生物技术制药中有哪些应用？应用主要有：（1）基因工程制药：包括基因工程药物品种的开发，基因工程疫苗，基因工程抗体，基因诊断与基因治疗，应用基因工程技术建立新药的筛选模型，应用基因工程技术改良菌种，产生新的微生物药物，基因工程技术在改进药物生产工艺中的应用，利用转基因动植物生产蛋白质类药物（2）细胞工程制药：包括单克隆抗体，动物细胞培养，植物细胞培养生产次生代谢产物（3）酶工程制药（4 ）发酵工程制药 4、基因工程药物制造的主要程序有哪些？基因工程药物制造的主要步骤有：目的基因的克隆，构造DNA重组体，构造工程菌，目的基因的表达，外源基因表达产物的分离纯化产品的检验 5、影响目的的基因在大肠杆菌中表达的因素有哪些? （1）外源基因的计量（2）外源基因的表达效率： a、启动子的强弱

b、核糖体的结合位点 c、S D序列和起始密码的间距 d、密码子组成（3）表达产物的稳定性（4）细胞的代谢付荷（5）工程菌的培养条件 6、质粒不稳定分为哪两类，如何解决质粒不稳定性？质粒不稳定分为分裂分为分裂不稳定和结构不稳定。质粒的分裂不稳定是指工程菌分裂时出现一定比例不含质粒的子代菌的现象；质粒的结构不稳定是DNA从质粒上丢失或碱基重排，缺失所致工程菌性能的改变。提高质粒稳定性的方法如下：（1）选择合适的宿主细菌 2）选择合适的载体（3）选择压力（4）分阶段控制培养（5）控制培养条件（6）固定化 7、影响基因工程菌发酵的因素有哪些？如何控制发酵的各种参数? 影响因素： (1)培养基 (2)接种量 (3)温度 (4) 溶解氧 (5) 诱导时机的影响 (6) 诱导表达程序 (7) PH值 &什么是高密度发酵？影响高密度发酵的因素有哪些？可采取哪些方法来实现高密度发酵？高密度发酵：是指培养液中工程菌的菌体浓度在50gDCW/L以上，理论上的最高值可达200gDCW/L 影响因素：（1）培养基（2）溶氧浓度（3）PH（4）温度（5）代谢副产物实现高密度发酵的方法：（1）改进发酵条件：a培养基b、建立流加式培养基c、提高供养能力（2）构建出产乙酸能力低的工程菌宿主菌：a阻断乙酸产生的主要途径b、对碳代谢流进行分流c、限制进入糖酵解途径的碳代谢流d、引入血红蛋白基因（3）构建蛋白水解酶活力低的工程化宿主菌 9、分离纯化常用的色谱分离方法有哪些？它们的原理是什么？方法有离子交换色谱、疏水色谱、反相色谱、亲和色谱、凝胶过滤色谱及高压液相色谱。（1）离子交换色谱IEC :是以离子交换剂为固定相，依据流动相中的组分离子与交换剂

生物技术制药要点

生物技术制药要点概括 1.现代生物技术发展大事记：年代主要发现和进展 1953 Watson和Crick阐明了DNA的双螺旋结构 1958 分离得到DNA聚合酶I，并在试管内制得人工DNA 1960 发现mRNA，并阐明了mRNA在蛋白质合成中的作用 1966 破译遗传密码 1967 分离得到DNA连接酶 1970 分离出第一个限制性内切酶 1971 第一次用限制性内切酶和连接酶获得重组DNA 1972 合成了完整了tRNA基因 1974 Boyer和Cohen建立了DNA重组技术 1975 Kohler和Milstein建立了单克隆抗体技术 1976 DNA测序技术诞生 1978 Genentech公司在大肠杆菌中表达出胰岛素 1981 第一个单克隆抗体诊断试剂盒在美国被批准使用 1981 第一台商业化生产DNA自动测序仪诞生 1982 用DNA重组技术生产的第一个动物疫苗在欧洲获得批准 1983 基因工程Ti质粒用于植物转化 1988 PCR（聚合酶链式反应）技术诞生 1990 美国批准第一个体细胞基因治疗方案 1997 英国培育出世界上第一只克隆羊多莉 1998 美国批准艾滋病疫苗进行人体实验 2001 人类基因组草图完成 2003 世界上第一个正式批准的基因治疗药物重组腺病毒-p53注射液在中国上市 2008 人类将表皮细胞激活为干细胞 2.生物技术药物（biopharmaceutics）:广义是是指所有以生物质为原料只去的各种生物活性物质及其人工合成类似物、以及通过现代生物技术制的的药物，狭义指利用生物体、生物组织、细胞及其成分，综合应用化学。生物学和医药学各学科原理和技术方法制得的用于预防、诊断、治疗和康复保健的制品，而这里特指采用DNA重组技术或其他现代生物技术研制的蛋白质或核算类药物。 3.生物技术药物的四大类型：基因重组药物、基因药物、天然药物、合成的半合成的生物技术药物。 4.生物技术药物的主要特点：剂量小，活性高；分子结构复杂，分子量一般较大；稳定性较差，易失活或分解，体内半衰期短；具有种属特异性；具有免疫原性；分析检验的特殊性。 5.生物技术药物与化学药物的区别：

生物技术制药第二版课后思考题及答案(全)

1. 生物技术制药分为哪些类型？生物技术制药分为四大类：（1）应用重组DNA技术(包括基因工程技术、蛋白质工程技术)制造的基因重组多肽，蛋白质类治疗剂。（2）基因药物，如基因治疗剂，基因疫苗，反义药物和核酶等（3）来自动物、植物和微生物的天然生物药物（4）合成与部分合成的生物药物 2．生物技术制药具有什么特征？（1）分子结构复杂（2）具有种属特异性（3）治疗针对性强，疗效高（4）稳定性差（5）基因稳定性（6）免疫原性（7）体内的半衰期短（8）受体效应（9）多效性（10）检验的特殊性 3.生物技术制药中有哪些应用？应用主要有：（1）基因工程制药：包括基因工程药物品种的开发，基因工程疫苗，基因工程抗体，基因诊断与基因治疗，应用基因工程技术建立新药的筛选模型，应用基因工程技术改良菌种，产生新的微生物药物，基因工程技术在改进药物生产工艺中的应用，利用转基因动植物生产蛋白质类药物（2）细胞工程制药：包括单克隆抗体，动物细胞培养，植物细胞培养生产次生代谢产物（3）酶工程制药（4）发酵工程制药 4.基因工程药物制造的主要程序有哪些？基因工程药物制造的主要步骤有：目的基因的克隆，构造DNA重组体，构造工程菌，目的基因的表达，外源基因表达产物的分离纯化产品的检验 5.影响目的的基因在大肠杆菌中表达的因素有哪些？（1）外源基因的计量（2）外源基因的表达效率：a、启动子的强弱 b、核糖体的结合位点 c、SD序列和起始密码的间距 d、密码子组成（3）表达产物的稳定性（4）细胞的代谢付荷（5）工程菌的培养条件 6.质粒不稳定分为哪两类，如何解决质粒不稳定性？质粒不稳定分为分裂分为分裂不稳定和结构不稳定。质粒的分裂不稳定是指工程菌分裂时出现一定比例不含质粒的子代菌的现象；质粒的结构不稳定是DNA从质粒上丢失或碱基重排，缺失所致工程菌性能的改变。提高质粒稳定性的方法如下：（1）选择合适的宿主细菌2）选择合适的载体（3）选择压力（4）分阶段控制培养（5）控制培养条件（6）固定化 7.影响基因工程菌发酵的因素有哪些？如何控制发酵的各种参数？影响因素：（1）培养基（2）接种量（3）温度（4）溶解氧（5）诱导时机的影响（6）诱导表达程序（7） PH值 8.什么是高密度发酵？影响高密度发酵的因素有哪些？可采取哪些方法来实现高密度发酵？高密度发酵：是指培养液中工程菌的菌体浓度在50gDCW/L以上，理论上的最高值可达200gDCW/L 影响因素：（1）培养基（2）溶氧浓度（3）PH (4)温度（5）代谢副产物实现高密度发酵的方法：（1）改进发酵条件：a、培养基 b、建立流加式培养基 c、提高供养能力（2）构建出产乙酸能力低的工程菌宿主菌：a、阻断乙酸产生的主要途径 b、对碳代谢流进行分流 c、限制进入糖酵解途径的碳代谢流 d、引入血红蛋白基因（3）构建蛋白水解酶活力低的工程化宿主菌

生物技术制药考试题复习

生物技术制药考试题复习 Document number【980KGB-6898YT-769T8CB-246UT-18GG08】

一：选择题 1、酶的主要来源是（C） A、生物体中分离纯化 B、化学合成 C、微生物生产 D、动/植物细胞与组织培养 2、所谓“第三代生物技术”是指 (A) A、海洋生物技术 B、细胞融合技术 C、单克隆技术 D、干细胞技术 3、菌体生长所需能量与菌体有氧代谢所能提供的能量在什么情况下，菌体往往会产生代谢副产物乙酸：(A) A、大于 B、等于 C、小于 D、无关 4、促红细胞生长素（EPO）基因能在大肠杆菌中表达，但却不能用大肠杆菌的基因工程菌生产人的促红细胞生长素，这是因为：（E） A、人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用? B、人促红细胞生长素基因在大肠杆菌中极不稳定? C、大肠杆菌内毒素与人的促红细胞生长素特异性结合并使其灭活 D、人的促红细胞生长素对大肠杆菌蛋白水解酶极为敏感 E、大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化 5、目前基因治疗最常用的载体是：(B) A、腺病毒? B、反转录病毒 C、腺相关病毒 D、痘苗病毒 E、疱疹病毒 6、cDNA第一链合成所需的引物是：（D） A、Poly?A B、PolyC C、PolyG D、PolyT E、发夹结构 7、为了减轻工程菌的代谢负荷，提高外源基因的表达水平，可以采取的措施有：(A) A将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段 B、在宿主细胞快速生长的同时诱导基因表达? C、当宿主细胞快速生长时抑制重组质粒的表达? D、当宿主细胞快速生长时诱导重组质粒的复制 8、基因工程制药在选择基因表达系统时，首先应考虑的是：(A) A、表达产物的功能 B、表达产物的产量C.表达产物的稳定性 D.表达产物分离纯化的难易? 9、疫苗出产前需进行理化鉴定、效力鉴定和（安全性鉴定）。 10、基因工程药物的化学本质属于：(C) A.糖类 B.脂类 C.蛋白质和多肽类 D.氨基酸类 11、用聚二乙醇（PEG）诱导细胞融合时，下列错误的是：(C) A、PEG的相对分子量大，促进融合率高 B、PEG的浓度高，促进融合率高 C、PEG的相对分子量小，促进融合率高 D、PEG的最佳相对分子量为4000 12、以大肠杆菌为目的基因的表达体系，下列正确的是：(C) A、表达产物为糖基化蛋白质 B、表达产物存在的部位是在菌体内

生物技术制药习题修订稿

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第三章基因工程—工程技术一．填空 1、基因工程操作流程主要包括（）（）（）（）（）。 2、分离目的基因常采用（）从基因组DNA中扩增含目的具有的DNA片断，或者用分子杂交等方法从构建的（）或（）中获得含目的基因的克隆子。 3、克隆载体有（）和（）等，供不同实验要求选择使用。 4、在（）的作用下，含（）的DNA片断与（）连接成为重组 DNA 分子。二．判断 1、无论用哪种转化方法均可用PBR322作载体。（） 2、cDNA是以DNA为起始材料，经过复制得到的互补DNA。（） 3、只有粘性末端才可以被连接起来。（） 4、任何细胞都可用作受体细胞。（） 5、原核生物细胞是最理想的受体细胞。（） 6、Western杂交是DNA-RNA之间的杂交。（） 7、 DNA连接酶只能催化双链DNA片断互补黏性末端之间的连接。（）第四章细胞工程技术概论一．选择 1、植物体细胞杂交要先去除细胞壁的原因是（） A. 植物体细胞的结构组成中不包括细胞壁 B. 细胞壁使原生质体失去活力 C. 细胞壁阻碍了原生质体的融合? D. 细胞壁不是原生质的组成部分 2、动物细胞融合的说法不正确的是（） A. 细胞融合首先用酶解法（胰蛋白酶）分散成单个细胞 B. 细胞融合是个细胞识别过程

C. 融合细胞能表现出两个亲本的特点 D. 原生质体自然条件下常自发融合 3、单克隆抗体的生产方法中错误的是（） A. 发酵罐中培养 B. 小鼠的腹腔繁殖 C. 培养成组织移植到动物体内 D. 牛的体腔培养 4、不能人工诱导原生质体融合的方法是（） A. 高pH B. 电刺激 C. PEG（聚乙二醇）试剂 D. 重压 5、植物细胞融合常用的诱导剂是（） A. PEP B. PEG C. ATP D. 大肠杆菌质粒 6、目前有一种蔬菜新品种“白菜—甘蓝”,只是将两个来自不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞，并将其培养成新的植物体。这是利用了现代生物技术中的什么？ A.细胞工程 B.基因工程 C.蛋白质工程 D.酶工程二. 填空下图为植物体细胞杂交过程示意图。据图回答： (1)步骤?是_______________________，最常用的方法是_______________________。 (2)步骤?一般常用的化学试剂是_______________,目的是______________________。第六章发酵工程技术概论一．选择 1、发酵工程以培养微生物为主，所以又称为（）。 A．细胞工程B．微生物工程 C．细菌工程 2、发酵工程的主要内容包括（）。 A．生产菌种的选育B．发酵条件的优化与控制反应器的设计及产物的分离 C．提取与精制 D．以上都是 3、下列哪些是目前具有生产价值的发酵类型（）。 A．微生物菌体发酵 B．微生物菌体代谢产物发酵 C．微生物的转化发酵D．以上都是 4、下列哪些是发酵技术独有的特点（）。 A．多个反应不能在发酵设备中一次完成 B．条件温和、能耗少、设备简单 C．不容易产生高分子化合物D．发酵过程中不需要防止杂菌污染 5、发酵过程中，PH值取决于（）。 A．菌种B．培养基 C．培养条件D．以上都是 6、下列生产工艺属于固体发酵的是（）。 A．酿酒B．制酱C．天培（大豆发酵食品） D．以上都是 7、下列哪些是发酵的主要操作方式（）。 A．分批发酵B．连续发酵C．补料分批发酵D．全部都是 8、气升式发酵罐与搅拌式发酵罐相比，下列不属于前者特点的是（）。 A．发酵罐内没有搅拌装置，结构简单 B．发酵罐内有搅拌装置，混合速度快 C．耗能少，利于生产二、填空 1、根据搅拌的方式不同，好氧发酵设备又可分为（）、（）。 2、根据操作方式的不同，液体深层发酵主要有（）、（）、（）。 3、当前发酵工业所用的菌种总趋势是从野生菌转向（），从自然选育转向（），从诱发基因突变转向（）。

生物技术制药考试题复习修订稿

生物技术制药考试题复习内部编号：（YUUT-TBBY-MMUT-URRUY-UOOY-DBUYI-0128）

7、为了减轻工程菌的代谢负荷，提高外源基因的表达水平，可以采取的措施有：(A) A将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段 B、在宿主细胞快速生长的同时诱导基因表达? C、当宿主细胞快速生长时抑制重组质粒的表达? D、当宿主细胞快速生长时诱导重组质粒的复制 8、基因工程制药在选择基因表达系统时，首先应考虑的是：(A) A、表达产物的功能 B、表达产物的产量C.表达产物的稳定性 D.表达产物分离纯化的难易? 9、疫苗出产前需进行理化鉴定、效力鉴定和（安全性鉴定）。 10、基因工程药物的化学本质属于：(C) A.糖类 B.脂类 C.蛋白质和多肽类 D.氨基酸类 11、用聚二乙醇（PEG）诱导细胞融合时，下列错误的是：(C) A、PEG的相对分子量大，促进融合率高 B、PEG的浓度高，促进融合率高 C、PEG的相对分子量小，促进融合率高 D、PEG的最佳相对分子量为4000 12、以大肠杆菌为目的基因的表达体系，下列正确的是：(C) A、表达产物为糖基化蛋白质 B、表达产物存在的部位是在菌体内 C、容易培养，产物提纯简单 D、表达产物为天然产物? 13、人类第一个基因工程药物是：(A)

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