一、无菌的概念（复习）
根据控制作用的效果分类
灭菌（sterilization）: 凡是能够杀死或消除材料或物体上全部微生物的方法；
消毒(disinfection): 能够杀死、消除或降低材料或物体上的病原微生物，使之不致引起疾病的方法；
防腐(antisepsis): 能够防止或抑制微生物生长，但不能杀死微生物群体的方法。
二、灭菌的方法(复习) 根据控制作用原理、方式和方法分类
物理控制方
化学控制方法两大类
一，物理控制方法
(一) 高温灭菌
1、干热灭菌法
干热灭菌：1500C～1700C下处理1-2小时。
适用于玻璃器皿、金属用具等耐热物品的灭菌。
优点：可保持物品的干燥
火焰灭菌（灼烧灭菌）：常用于金属性接种工具、
污染物品及实验材料等废弃物的处理
火焰灭菌（灼烧灭菌）：常用于金属性接种工具、污染物品及实验材料等废弃物的处理
湿热灭菌是利用热蒸汽灭菌在相同温度下，湿热的效力比干热灭菌好
2、湿热灭菌
煮沸消毒、高压蒸汽灭菌、间歇加热灭菌、巴氏消毒、实罐灭菌煮沸消毒：水，1000C处理15min以上。
高压蒸汽灭菌(autoclave): 应用最广泛的灭菌方法。将待灭菌的微生物放置在有少量水的加压蒸汽灭菌锅内。将锅内的水加热煮沸，并将其中的空气彻底驱尽后将锅封闭。再持续加热就会使锅内的蒸汽压逐渐上升，从而使温度达1000C以上。为达到良好的灭菌效果，一般要求温度应达到1210C（压力为1kg/cm2或15磅/平方英寸）, 时间维持15～20分钟，也可采取较低温度（1150C,压力为0.7kg/cm2或10磅/平方英寸）维持35分钟的方法。使用于一切微生物学实验，医疗结构或发酵工厂中对培养基等多种器材、物料的灭菌。
该法不是利用高压来杀死微生物，而是利用提高压力使水的
沸点升高，以提高水蒸汽的温度，更加有效地杀灭微生物。
间隙灭菌法：用流通蒸汽反复多次处理的灭菌法。
巴氏消毒法(pasteurization): 低温消毒法，一般在
630C ,30min或 720C ,15min。用于牛奶，啤酒，果酒，酱油等不能进行高温灭菌的液体可杀死其中的病原菌如结核杆菌、伤寒杆菌等，同时又不损害营养与风味。
。实罐灭菌
是指将配制好的培养基放入发酵罐或其他装置中，通入蒸汽将培养基和所用设备加热至灭菌温度后维持一定时间，再冷却到接种温度，也叫间歇灭菌、分批灭菌。
实罐灭菌无需专门的灭菌设备，灭菌效果可靠，对灭菌用蒸汽要求低（0.2~0.3MPa）。但同时，实罐灭菌温度低、时间长而对培养基成份破坏较大，在工业生产中难以实现自动控制。实罐（二）低温抑菌1．冷藏法
2．冷冻法
(三)干燥和高渗抑菌
干燥或调节溶液渗透压都是通过降低微生物可利用水的数量或活度而抑制微生物的生长。
1.干燥
干燥是使物品或培养物脱水的方法。干燥并不一定杀死微生物，但因使细胞造成代谢停止而抑制微生物生长，有时也可引起某些微生物细胞的死亡。
2.渗透压
增加渗透压是另一种通过限制微生物可利用水而控制其生长的方法。高渗环境中，水从细胞中流出，使细胞脱水。像盐腌制咸肉或咸鱼，糖浸果脯或蜜饯等均是这一方法在食品保存中的应用。
（四）辐射杀菌
有四种类型的辐射作用: 紫外光、电离辐射、某种条件下的强可见光、微波等，可用作控制微生物的生长和保存食品。
(五)过滤除菌，控制液体中微生物的群体可以通过将微生物从液体中移走而不是杀死的方法来实现。
二、化学控制方法
化学控制方法主要是指利用各种化学药剂控制微生物生长的方法。
抗微生物的化学试剂
物理状态不同：
液态的、气态的和固态的
杀菌效果和对人体或动物体影响不同：
消毒剂、防腐剂、化学治疗剂
（一）消毒剂和防腐剂
消毒剂是指那些可抑制或杀灭微生物，但对人体也可能产生有害作用的化学试剂。主要用于抑制或杀灭物体表面、器械、排泄物和周围环境中的微生物。
防腐剂是指那些可以抑制微生物生长，但对人体或动物体的毒性较低的化学试剂。可用于机体表面，如皮肤、粘膜、伤口等处防止感染，也有的用于食品、饮料、药品的防腐作用
(二)化学治疗剂
化学治疗剂是指那些能够特异性地作用于某些微生物并具有选择性的化学药剂，它们与非特异性的化学药剂相比对人体几乎没有什么毒性或毒性很小，可用作治疗微生物引起的疾病。
1、抗代谢药物
是指一类在化学结构上与细胞内必要代谢物的结构相似，并可干扰正常代谢活动的化学物质。
最常用的是磺胺类药物
2、抗生素
定义：抗生素是一类由微生物或其它生物生命活动过程中合成的次生代谢产物或其人工衍生物，它们在很低浓度时就能抑制或干扰它种生物（包括病原菌、病毒、癌细胞等）的生命活动，因而可用作优良的化学治疗剂。
三、灭菌在工业生产中的应用
（一）培养基的灭菌
（二）发酵设备及管道和附属设备的灭菌
（三）空气除菌
无菌操作室及无菌操作技术
（一）无菌操作室的设计要求
1.标准接种室设计要求：
（1）接种室6~8平方米，缓冲间2~3平方米，高度2~2.2米
（2）使用推拉门，室内结构要有利于清洁和消毒处理
（3）接种室和缓冲间要安装紫外灯及日光灯各一盏
二）无菌操作室（或接种箱）的消毒（1）薰蒸法（2）照射法（3）喷雾法
四、微生物的转接种技术
接种和分离工具（1.接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒6.接种圈 7.接种锄 8.小解剖刀
第二节培养基及其制备
培养基(medium，culture medium)：是一种人工配制的、适合微生物生长繁殖或产生代谢产物用的混合养料。
一、培养基的成分及来源
1、碳源
2、氮源
3、无机盐和微量元素
4、生长因子
5、水
6、产物形成的前提、促进剂、抑制剂
二、选择和配制培养基的原则和方法
培养基在实验室培养微生物是需要的，在微生物鉴定，水质鉴定，食品的分析中都需要分离特定的微生物，因此，为了不同的目的常需要不同的培养基。
（一）四个原则
1、目的明确（根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基）
培养什么微生物、获得什么产物、用
2、营养协调
营养协调(注意营养物的浓度和配比，特别是碳氮比C/N比)
C/N比: 微生物培养基中所含的碳源中的碳原子与氮源中氮原子的摩尔数之比。不是简单的某碳源的重量与氮源的重量之比。因为，不同种类的碳源和氮源，其中含碳量和含氮量差别很大。
3、物理化学条件适宜:
pH：微生物有最佳生长pH
放线菌：pH7.0 ~8.5
细菌: pH7.0~8.0
酵母菌: pH3.8~6.0
霉菌： pH4.0~6.0
微生物在生长过程中培养基pH值可能发生的变化：
在含糖基质上生长,会产酸而使pH下降，
在分解蛋白质和氨基酸时, 会产NH3而使pH上升，
以 (NH4)2SO4 作N 源 , 会过剩 SO4 2-, 而使pH下降，
分解利用阳离子化合物如：NaNO3, 会过剩 Na+ 而使
pH 上升。
渗透压(osmotic pressure): 高浓度溶液向低浓度溶液渗透时，其溶质分
子所产生的压力
高渗溶液会导致微生物细胞发生质壁分离
低渗溶液会导致微生物细胞吸水膨胀甚至破裂
三、培养基类型
依对培养基成分的了解
天然培养基优点： 取材方便、营养丰富、种类多样、配制方便
组合培养基(defined medium) ，或称合成培养基较昂贵，一般用于研究工作（代谢、遗传分析）。优点：组份精确、重复性好
半合成培养基
按培养基外观的物理状态：固体、半固体、液体
依功能不同：
选择培养基，功能：混合菌中劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选效率。
鉴别培养基用途：细菌学检验遗传研究，
（鉴别肠道细菌的伊红美蓝乳糖培养基，EMB(Eosin Methylene Blue)培养基中培养大肠杆菌，因其强烈分解乳糖而产生大量的混合酸，菌体带H+,故可染上酸性染料伊红，又因伊红与美蓝结合，使菌落呈深紫色。从菌落表面反光还可看到绿色金属闪光。而产酸弱的菌株的菌落呈棕色。不发酵乳酸的菌落无色透明）
培养基制备的一般过程：
1．称量和溶化
2.调节pH值：1N的盐酸或1N的氢氧化钠溶液调节酸碱度
3.过滤：用双层纱布。没特殊要求可不过滤。
4.分装：分装于三角瓶的，不超过其容量的一半；制备斜面培养基的，分装于试管不超过其管长的1/5。
5.加棉塞并包扎：方法见后示范
6.灭菌：121℃维持20—30分钟
7. 摆斜面或倒平板培养（将已灭菌的培养基倒入已灭菌的培养皿中
第三节微生物的分离培养
一、微生物纯培养的分离
自然环境如土壤和水中，通常栖息着的是许多不同微生物混杂在一起的群体。哪怕是一粒砂或尘土，也常含有多种细菌及其它微生物。
研究微生物生长通常采用微生物纯培养。
微生物学中将在实验条件下从一个单细胞繁殖得到的后代称为纯培养。
用固体培养基分离
1. 稀释倒平板法
2. 涂布平板法
3. 平板划线法
4. 厌氧微生物的分离
用液体培养基分离
单细胞（孢子）分离
选择培养分离（如鉴别肠道细菌的伊红美蓝乳糖培养基）二、微生物的培养方法
根据氧气的需要与否分为两大类：
好氧培养
厌氧培养
根据培养基的物理特性分为两大类：固体培养和液体培养
三、微生物个体生长的测定方法
细菌个体细胞一般太小，通常采用电子显微镜观测，但无法观测到整个生长的动态过程。
真菌细胞相对体积较大，可采用显微镜观测和记录活细胞的整个生长过程，如使用微分—干涉相差显微镜、相差显微镜和荧光显微镜等进行。
四、微生物群体生长的测定方法。
? 测定群体微生物细胞数目的增加和测定群体微生物细胞物质量
的增加
微生物工业对大规模生产用菌的要求原则：
1）所需培养基易得，价格低廉；
（2）培养和发酵条件温和（糖浓度、温度、pH、溶解氧、渗透压等）
（3）生长速度和反应速度较快，发酵周期短
（4）单产高（选择野生型、营养缺陷型或调节突变株）
5）抗病毒能力强
（6）菌种纯粹，不易变异退化，稳定性好
（7）菌体不是病源菌，不产生任何有害的生物活性物质和毒素（包括抗生素、激素和毒素），保证安全
2、酵母菌种类：酒精酵母、啤酒酵母、假丝酵母红酵母、面包酵母应用：生产酒精、啤酒、石油发酵脱蜡和制取蛋白质、生产脂肪
第四节种子扩大培养
一、优良种子应具备的条件
1、菌种细胞的生长活力强，转种至发酵罐后能迅速生长，延迟期短。
2、菌种生理状态稳定，如菌丝形态、菌丝生长速率和种子培养液的
特性等符合要求
3菌体浓度及总量能满足大容量发酵罐接种量的要求
4、无杂菌污染，保证纯种发酵
5、菌种适应性强，能保持稳定的生产能力
二、种子扩大培养的任务和培养类型
1、任务：获得大量的活力强的种子，以便在发酵罐的发酵
培养过程中尽可能地缩短迟滞期。
根据菌种生长速度快慢来决定扩大培养的级数；
放线菌（生产抗生素）三级放大，（其中链霉素须四级扩
大）；细菌生长较快，用二级放大培养（斜面菌种→一级种
子摇床培养→二级种子罐培养→发酵罐）
生产用菌种的保藏及选育
（一）菌种保藏
1、目的：提高菌种存活率，减少菌种的变异，保持原来优良的生产性能。
2、原理：根据菌种的生物生理、生化特点，人工地创造条件，使菌种的代谢活动处于不活泼状态，生长繁殖处于休眠状态。
保藏时首先要挑选优良纯种，最好是它们的休眠体（孢子、芽孢等），其次是要创造一个最有利于休眠的环境，如低温、干燥、缺氧和缺乏营养物质等，以达到降低其代谢活动，延长保存期的目的。
三、种子质量的控制措施
菌种选育
1、选育的目的
改善菌种的特性，使产量提高，改进质量、降低成本、改革工艺、方便管理及综合利用等
2、选育的方法：
A、自然选育；
B、生产选育；
菌种退化：菌种的发酵能力降低、繁殖能力降低、发酵产品的得率降低
1、衰退的可能原因
（1）基因突，（2）分离现象
2、防止菌种衰退的方法
A、从菌种选育方面考虑
B、尽量减少传代次数
C、创造良好的培养条件
D、利用不易衰退的细胞传代
E、采用有效的菌种保藏方法
3.菌种复壮方法
①纯种分离法；
②淘汰已衰退的个体
③采用其它方法：诱变因素处理，再进行单菌落分离；选择
合适的培养基
三、发酵的中间控制
1、培养基：
主要是碳源、氮源、无机盐、生长素和水等。
选用原则：组分简单，来源丰富，价格便宜，取材方便
等。种子培养基是培养菌体的（以菌体增殖为主要目的），
应该是糖份少而氮源多些。
在种子罐与发酵罐培养基成分趋于一致时，可缩短发酵生产的周期，但在各成分的数量（原料配比上），应根据培养目的而定。
2、种龄与接种量
3、斜面冷藏时间
4、温度：温度直接影响生长和酶的合成；
5、pH值：对微生物有明显的影响
各种微生物都有生长和合成酶的最适pH。培养基pH值在发
酵时要受菌体代谢的影响。
调节方法（使之保持适当的pH值）有三种方法：用酸碱溶液中和法；使用缓冲溶液法；使用生理缓冲剂；
6、通气搅拌：
（溶解氧的作用：参与菌体呼吸作用）
搅拌：促进氧的溶解与营养物质及代谢产物的分散。
通气量的多少以溶解氧的多少来衡定（溶解氧浓度应不低于
临界溶氧浓度）。
通气过程中，影响溶解氧的因素：菌种（丝状影响最大）；
培养基性质；培养阶段；发酵罐的结构；
7、泡沫
危害：影响微生物对氧的吸收；妨碍CO2的排除；减少设备
利用率（有效容积减少）；造成跑料，导致染菌；
消泡方法：
（1）消泡剂：天然动植物油、石油化工矿物油；改性油，
表面活性剂（有机硅聚合物）；
（2）机械消泡：
（3）改变培养基成分：
四、发酵生产中的杂菌与防治
染菌的控制
染菌原因：设备、管道、阀门漏损、发酵罐结构“死角”、灭菌不彻底、空气净化不好、无菌操作不严、菌种不纯；
发酵产物分离纯化的一般流程
1) 培养液（发酵液）的预处理和固液分离；
2) 初步纯化（提取）；
3) 高度纯化（精制）；
成品加工。
自然界中细菌真菌的分布 1.罐头食品在很长时间内不会腐败变质，这主要是因为（ C ） A．罐头密封很严，细菌无法侵入 B．罐头密封很严，细菌无法呼吸 C．罐头在封罐前经过高温高压灭菌，封罐后罐内没有细菌 D．罐头在封罐前经过高温高压灭菌，封罐后罐内细菌无法生存 2.通常用来作为菌种鉴定的重要依据是（ A ） A．菌落B．细菌形态C．细菌体积D．细菌结构 3.霉菌在下列哪种环境中最容易出现（ B ） A．潮湿的沙土地B．潮湿的粮食 C．干燥的衣物D．煮沸的牛肉汁 4.腌肉长时间不易腐烂，主要原因是（ C ） A．气温低，不利于细菌的生长和繁殖 B．空气中没有飘浮着的细菌 C．盐分多，不利于细菌的生长和繁殖 D．大多细菌是对人类有益的，不会使肉腐烂 5.细菌和真菌的生存需要一定的条件，如______适宜温度____、______有机物____、____一定水分____、_____适宜的酸碱度___。 6.细菌、真菌培养的一般方法是： （1）配制含有营养物质的__培养基__； （2）__接种_：将少量细菌或真菌放在培养基上的过程； （3）把接种后的培养皿放在恒温环境或温暖的地方进行___恒温培养___。 7.细菌和真菌是___生物圈__中广泛分布的生物，但不同细菌需要的生存条件____不同_____，如好气性芽孢杆菌需要___有氧___的环境，而乳酸菌需要___无氧__的环境，生活在极端环境中的有________________。在经过严格的_灭菌___的环境中不可能有细菌和真菌。 细菌 1.细菌的发现者是（ A ） A．荷兰人列文虎克B．英国人罗伯特·虎克 C．法国人路易斯·巴斯德D．沃森 2.下列各项中，不属于细菌细胞特点的是（ C ） A．个体是单细胞的B．细胞有细胞壁、细胞膜、细胞质 C．细胞中有成形的细胞核D．细胞中没有成形的细胞核 3.芽孢是细菌的（ B ） A．分泌物B．休眠体C．后代D．生殖细胞 4.外科手术器械和罐头食品的消毒，都要以能够杀死________为标准（ D ） A．球菌B．杆菌C．螺旋菌D．芽孢 5.下列关于细菌的说法正确的是（ C ） A．都有鞭毛，生活在水中 B．都有荚膜，都能形成芽孢 C．肺炎双球菌是多细胞的生物体 D．金黄色葡萄球菌菌落中的每个细菌都是独立生活的 6.细菌有三种基本形态，例如能引发咽喉炎的金黄色葡萄球菌呈__球状___，大肠杆菌呈_______杆状____，小螺菌呈___螺旋状_____。 7.用罐头来保存食物是根据________的实验发明的（ C ） A．达尔文B．列文虎克C．巴斯德D．弗莱明 8.细菌的以下特点与它们的广泛分布有关： （1）细菌的个体___为单细胞状态__，极易为各种媒介携带； （2）进行___分裂__生殖，速度快，数量多； （3）能形成休眠体___芽孢__，对不良环境有较强的抵抗力，而且还能四处飘散，落在适宜的环境中，又能萌发成____细菌____。 真菌 第1页（共6页）第2页（共6页）
第一章原核生物的形态、构造和功能 选择题（每题1分，共60题，60分） 1.芽孢细菌的繁殖是依靠（ B ）正确 A. 芽孢 B. 裂殖 C. 出芽 D. 藻殖段 2.放线菌的菌体呈分枝丝状体, 因此它是一种（ C ）正确 A. 多细胞的真核微生物 B. 单细胞真核微生物 C. 多核的原核微生物 D. 无壁的原核微生物 3.自养细菌中固定CO2的场所是（ B ）正确 A. 类囊体 B. 羧酶体 C. 异染粒 D. 淀粉粒 4.原核生物（ C ）。错误正确答案：D A. 有细胞核 B. 有有丝分裂 C. 有线粒体 D. 有细胞壁 5.没有细胞壁的原核微生物是（ B ）。正确 A. 立克次氏体 B. 支原体 C. 衣原体 D. 螺旋体 6.中介体是由细菌哪种结构衍生的（ B ）正确 A.细胞壁 B.细胞膜 C.细胞浆 D.核质 7.属于细菌细胞基本结构的为（ B ）正确 A.荚膜 B.细胞壁 C.芽孢 D.鞭毛
— 8.微生物在固体斜面上生长的群体称（ B ）正确 A.菌落 B.菌苔 C.菌膜 D.凝絮 9.革兰氏染色的关键操作步骤是（ C ）正确 A. 结晶紫染色 B. 碘液固定 C. 酒精脱色 D. 复染 10.下列微生物中，（ A ）属于革兰氏阴性菌。正确 A. 大肠杆菌 B. 金黄色葡萄球菌 C. 巨大芽孢杆菌 D. 肺炎双球菌 11.下列微生物中能通过细菌滤器，并营专性寄生的是：（ C ）正确 A. 苏云金杆菌 B. 蛭弧菌 C. 衣原体 D. 类菌体 12.在下列原核生物分类中，属古细菌类的细菌是：（ D ）正确 A. 大肠杆菌 B. 枝原体 C. 放线菌 D. 产甲烷细菌 13.在放线菌发育过程中,吸收水分和营养的器官为（ A ）正确 A.基内菌丝 B.气生菌丝 C.孢子丝 D.孢子 14.大肠杆菌经革兰氏染色后,菌体应呈（ B ）正确 A.无色 B.红色 C.黑色 D.紫色 15.细菌的繁殖主要靠：（ A ）正确 A. 二分分裂 B. 纵裂
微生物在农业中的应用 （课程论文） 姓名：艾孜提艾力?阿卜力克木 班级：农学091班 学号：093131112 2012-5-14
微生物农业中的应用 人类在农业生产中对微生物资源的利用已经有四五千年的历史, 如酿酒、制醋等。近代, 随着现代生物技术的不断进步, 微生物作为一种重要的资源, 由于其生长周期短, 易于大规模培养等优点, 已经被运用于农业生产的方方面面, 随之出现了被称为“白色农业”的微生物产业化的工业型新农业。我国是一个传统的农业大国, 在农业现代化进程中, 对农业微生物资源的开发利用尤为重要。近年来, 以微生物饲料、微生物肥料、微生物农药、微生物食品、微生物能源等为代表的新型农业生产技术的研究和开发利用取得了长足进步。 1微生物饲料 能够用于微生物饲料的生产及调制的微生物, 主要有细菌、酵母菌、担子菌及部分单细胞藻类微生物等。其主要产品是: 单细胞蛋白(SC P ) , 发酵饲料, 微生物添加剂, 酶制剂, 赖氨酸等。乳酸菌广泛用作微生物饲料添加剂及饲料发酵剂, 它是动物肠道内寄生的一类正常有益菌, 在动物肠道内和饲料中, 乳酸本身既是营养物质, 又有抑制其他致病性微生物和腐败微生物的作用。SC P 不但蛋白质含量丰富, 而且还含有脂肪、糖、核酸、维生素和无机元素, 因此是一种具有较高价值的多功能食品或饲料, 在饲料生产中, 主要由微型藻类及一些富含蛋白质的微生物产生。但是由于SCP 核酸含量较高, 核酸在畜体内消化后形成尿酸, 而家畜无尿酸酶, 尿酸不能分解, 随血液循环在家畜的关节处沉淀或结晶, 引起痛风症或风湿性关节炎。为此应发展脱核酸技术, 生产脱核酸SCP , 未脱核酸
word格式 第一章原核生物的形态、构造和功能习题A部分 一、选择题 1.Bacillus subtilis 在生长发育的一定时期能形成：（） A.孢囊 B.芽孢 C.伴孢晶体 D.子实体 2.细菌的繁殖首先开始于：（） A.膜的分裂 B.壁的分裂 C. DNA的复制 3.细菌的繁殖主要靠：（） A.二分分裂 B.纵裂 C.出芽 4.下列微生物属于原核微生物的是：（） A.细菌 B.霉菌D.酵母菌D.单细胞藻类 5.自然界中分离到的细菌，形态各种各样，其中种类最多的是：（） A.球菌 B.螺旋菌 C.放线菌 D.杆菌 6.原核细胞中特有的C源贮藏颗粒是：（） A.异染粒 B.肝糖粒 C.淀粉粒 D.聚-3 -羟基丁酸 7.放线菌的菌体呈分枝丝状体，因此它是一种：（） A.多细胞的真核微生物 B.单细胞真核微生物 C.多核的原核微生物 D. 无壁的原核微生物 8.在细菌细胞中能量代谢场所是：（） A.细胞膜 B.线粒体 C.核蛋白体 D.质粒 9.细菌芽孢抗热性强是因为含有：（） A.聚-?-羟基丁酸 B. 2,6- 吡啶二羧酸 C.氨基酸 D.胞壁酸
. word格式 10.Bacillus thuringiensis 在形成芽孢同时，还能形成一种菱形或正方形的物质，称之为：（ ） A.孢囊 B.伴孢晶体 C.核蛋白质 D.附加体
word格式 11.G*细菌细胞壁的结构为一层，含有的特有成分是:（） A.脂多糖 B.脂蛋白 C.磷壁酸 D.核蛋白 12.革兰氏阴性细菌细胞壁中的特有成分是：（） A.肽聚糖 B.磷壁酸 C.脂蛋白 D.脂多糖 13.细菌的芽孢是：（） A. 一种繁殖方式 B.细菌生长发育的一个阶段 C. 一种运动器官 D. 一种细菌接合的通道 14.枝原体的细胞特点是：（） A.去除细胞壁后的细菌 B. 有细胞壁的原核微生物 C.无细胞壁的原核微生物 D. 呈分枝丝状体的原核微生物 15.蓝细菌中进行光合作用的场所是：（） A.羧酶体 B.类囊体 C.藻胆蛋白体 16.E.coli肽聚糖双糖亚单位交联间的肽间桥为：（） A.氢键 B.肽键 C.甘氨酸五肽 17.Staphylococcus aureus 肽聚糖双糖亚单位交联间的肽间桥为：（） A.肽键 B.甘氨酸五肽 C.氢键 18.下列微生物中能通过细菌滤器，并营专性寄生的是：（） A.苏云金杆菌 B.蛭弧菌 C.衣原体 D.类菌体 19.在下列原核生物分类中，属古细菌类的细菌是：（） A.大肠杆菌 B.枝原体 C.放线菌 D.产甲烷细菌 20.细菌的细胞核是：（） A.裸露的DNA分子 B. DNA与组蛋白结合的无核膜包围的染色体 C. RNA与组蛋白结合的无核膜包围的染色体
微生物在自然界的分布 1. 内容 1.土壤中的微生物 由于土壤具备了各种微生物生长发育所需要的营养、水分、空气、酸碱度、渗透压和温度等条件，所以成了微生物生活的良好环境。可以说，土壤是微生物的“天然培养基”，也是它们的大本营，土壤微生物通过其代谢活动可改变土壤的理化性质，进行物质转化，因此，土壤微生物是构成土壤肥力的重要因素。土壤中微生物数量最大，类型最多，是人类最丰富的“菌种资源库”。 2.水体中的微生物 水是一种良好的溶剂，水中溶解或悬浮着多种无机和有机物质，能供给微生物营养而使其生长繁殖，水体是微生物栖息的第二天然场所。 ?淡水微生物 淡水中的微生物多来自于土壤、空气、污水或动植物尸体等，尤其是土壤中的微生物，常随土壤被雨水冲刷进入江河、湖泊中。来自土壤中的微生物，一部分生活在营养稀薄的水中，一部分附着在悬浮于水体中的有机物上，一部分随着泥沙或较大的有机物残体沉淀到湖底淤泥中，成不水体中的栖息者，另外也有很多微生物因不能适应水体环境而死亡。因此，水体中的微生物数量和种类一般要比土壤中的少。 水中微生物的含量和种类对该水源的饮用价值影响很大。在饮用水的微生物学检验中，不仅要检查其总菌数，还要检查其中所含的病原菌数。由于水中病原菌数比较少，所以通常采用与其有相同来源的大肠菌群的数量作为指标，来判断水源被人、畜粪便污染的程度，从而间接推测其他病原菌存在的概率。 我国卫生部门规定的饮用水标准是：1ml自来水中的细菌总数不可超过100个（37℃，培养24h），而1000ml自来水中的大肠菌群数则不能超过3个（37℃，48h）。 ?海水微生物 海洋是地球上最大的水体，咸水占地球总水量的97.5%。一般海水的含盐量为3%左右，所以海洋中土著微生物必须生活在含盐量为2%～4%的环境中，尤以3.3%～3.5%为最适盐度。海水中的土著微生物种类主要是一些藻类以及细菌中的芽孢杆菌属、假单胞菌属、弧菌属和一些发光细菌等。 3.空气中的微生物 空气中并不含微生物生长繁殖所必需的营养物、充足的水分和其他条件，相反，日光中的紫外线还有强烈的杀菌作用，因此，它不适宜微生物的生存。然而，空气中还是含有一定数量来自土壤、生物和水体等的微生物，它是以尘埃、微粒等方式由气流带来的。因此，微生物的分布是世界性的。但微生物在空气中的分布是很不均匀的。凡含尘埃越多或越贴近地面的空气，其中的微生物含量就越高。在医院及公共场所的空气中，病原菌特别是耐药菌的种类多、数量大，对免疫力低下的人群十分有害。
【第一章原核微生物】一、填空题 1.革兰氏阳性细菌的细胞壁成分为----------和-----------；革兰氏阴性细菌细胞壁分内外两层，内层成 分是----------，外层称外膜，成分为----------、----------和----------。 革兰氏阳性细菌的细胞壁成分为肽聚糖和磷壁酸；革兰氏阴性细菌细胞壁分内外两层，内层成分是肽聚糖，外层称外膜，成分为脂多糖、磷脂和脂蛋白。 2.在革兰氏阳性细菌细胞壁的肽聚糖成分中，肽包括----------和----------两种，聚糖则包括---------- 和----------两种糖。 在革兰氏阳性细菌细胞壁的肽聚糖成分中，肽包括四肽尾和肽桥两种，聚糖则包括N-乙酰葡糖胺和N-乙酰胞壁酸两种糖。 3.肽聚糖中的双糖是由----------连接的，它可被----------水解，从而形成无细胞壁的原生质体。 肽聚糖中的双糖是由β-1,4-糖苷键连接的，它可被溶菌酶水解，从而形成无细胞壁的原生质体 4. E. coli的肽聚糖单体结构与Staphylococcus aureus的基本相同，所不同的是①----------，②----------。 E. coli的肽聚糖单体结构与Staphylococcus aureus的基本相同，所不同的是前者①四肽尾第3个氨基酸是m-DAP，②无五肽桥 5.G+细菌细胞壁的特有成分是----------，G－细菌的则是----------。 G+细菌细胞壁的特有成分是磷壁酸，G－细菌的则是脂多糖 6.脂多糖(LPS)是革兰氏阴性细菌细胞壁外膜的主要成分，由----------------、----------------和 ----------------三部分构成，在LPS上镶嵌着多种外膜蛋白，例如----------------等。 脂多糖(LPS)是革兰氏阴性细菌细胞壁外膜的主要成分，由脂质A、核心多糖和O-特异侧链三部分构成，在LPS上镶嵌着多种外膜蛋白，例如孔蛋白等 7.在G－细菌细胞壁的外膜与细胞膜间有一狭窄空间，称为----------------。其中含有多种周质蛋白， 如----------------、----------------和----------------等。 在G－细菌细胞壁的外膜与细胞膜间有一狭窄空间，称为周质空间。其中含有多种周质蛋白，如水解酶类、合成酶类和运输蛋白等
农业环境的微生物修复技术研究与应用 摘要：对于农业环境的修复，应采用以微生物修复为主，物理修复及化学修复 为辅的方式，从而使其能够得到更好的修复效果。该文就农业环境的微生物修复 研究进展与应用进行分析，总结出农业环境的微生物修复的主要研究方向及现阶 段的研究进展与相关的应用措施。 关键词：农业环境；环境修复；微生物；修复；研究进展 近年来，农业环境污染问题的日益加剧，使农业环境修复势在必行，选择适 宜的农业环境修复技术是是问题的关键所在。现有的物理修复技术及化学修复技 术对生态环境影响较大，同时难以在短期内进行大规模应用，使其难以在现代社 会发展中得以有效应用。在此时代背景下，将微生物修复技术广泛应用于农业环 境修复中，是确保农业环境得到有效修复的重要举措。 一、中国农业环境现状 1、农业环境存在的问题 中国现阶段主要的农业污染问题均集中在水源及土壤方面，部分地区的水源 供给不足及严重的水源污染，使农田无法在生产期得到良好的灌溉，大量的农作 物在幼苗期干枯而死，不仅造成严重的经济损失，同时也对农业发展造成一定的 打击，使农业用地的土壤肥沃程度不断下降。久而久之，更多的林业用地被强行 开垦，进行农作物种植，导致土壤沙化与盐碱化严重，各地区的自然灾害频发， 洪水及沙尘暴等成为农业发展的又一重大威胁。 2、农业环境问题所造成的后果 食品安全问题即农业环境所带来最为严重的问题。动植物在吸收有害物质后，被人所食用，而后经过消化系统的转化，使更多的有害物质转移至各内脏器官中，从而引起严重的疾病及相关器官的衰竭，对人的生命安全构成严重威胁。 3、农业环境的问题处理与修复 目前，世界较为主流的农业环境修复技术主要以物理修复、化学修复及微生 物修复为主。物理修复的主要优势在于对生态系统的影响较小，同时修复安全性 高可靠性更强，适宜长期发展与应用，但短期内见效慢，所需的时间过长。化学 修复则具有见效快、修复面积广等特点，但存在着对环境影响较为严重的问题， 同时在安全性方面，也不具有较好的保障性。微生物修复是近阶段较的主要修复 技术，该技术介于以上两者之间，不仅在修复时间上有所提升，同时安全性也优 于物理修复，在各方面就均具有较为良好的优势。 二、农业环境问题的微生物修复研究 1、农业环境有机物污染的微生物修复 （1）可用于修复的微生物种类 由于各地区实际情况有所不同，所以微生物种类较多，目前主要食用的微生 物种类主要以拟革盖菌属、链核盘菌属、平革菌属、多孔菌属、希瓦氏菌属、分 支杆菌属及寡养食单胞菌等为主。 （2）微生物修复机制 1）微生物直接作用于靶标物质 该机制主要通过与酶的化学反应进行降解，降解产物为CO2，而后通过吸收 其余无机物及有机物的养分来进行生长[1]。 2）共代谢 该机制的降解效果并不完全，通常需要采用间接降解的方式，如能获得碳源
【第一章原核微生物】 一、填空题 1.革兰氏阳性细菌的细胞壁成分为----------和-----------；革兰氏阴性细菌细胞壁分外两层，层成分是 ----------，外层称外膜，成分为----------、----------和----------。 革兰氏阳性细菌的细胞壁成分为肽聚糖和磷壁酸；革兰氏阴性细菌细胞壁分外两层，层成分是肽聚糖，外层称外膜，成分为脂多糖、磷脂和脂蛋白。 2.在革兰氏阳性细菌细胞壁的肽聚糖成分中，肽包括----------和----------两种，聚糖则包括---------- 和----------两种糖。 在革兰氏阳性细菌细胞壁的肽聚糖成分中，肽包括四肽尾和肽桥两种，聚糖则包括N-乙酰葡糖胺和N-乙酰胞壁酸两种糖。 3.肽聚糖中的双糖是由----------连接的，它可被----------水解，从而形成无细胞壁的原生质体。 肽聚糖中的双糖是由β-1,4-糖苷键连接的，它可被溶菌酶水解，从而形成无细胞壁的原生质体 4. E. coli的肽聚糖单体结构与Staphylococcus aureus的基本相同，所不同的是①----------，②----------。 E. coli的肽聚糖单体结构与Staphylococcus aureus的基本相同，所不同的是前者①四肽尾第3个氨基酸是m-DAP，②无五肽桥 5.G+细菌细胞壁的特有成分是----------，G－细菌的则是----------。 G+细菌细胞壁的特有成分是磷壁酸，G－细菌的则是脂多糖 6.脂多糖(LPS)是革兰氏阴性细菌细胞壁外膜的主要成分，由----------------、----------------和 ----------------三部分构成，在LPS上镶嵌着多种外膜蛋白，例如----------------等。 脂多糖(LPS)是革兰氏阴性细菌细胞壁外膜的主要成分，由脂质A、核心多糖和O-特异侧链三部分构成，在LPS上镶嵌着多种外膜蛋白，例如孔蛋白等 7.在G－细菌细胞壁的外膜与细胞膜间有一狭窄空间，称为----------------。其中含有多种周质蛋白， 如----------------、----------------和----------------等。 在G－细菌细胞壁的外膜与细胞膜间有一狭窄空间，称为周质空间。其中含有多种周质蛋白，如水解酶类、合成酶类和运输蛋白等 8.人为去尽细胞壁的细菌称为-----------，未除尽壁的细菌常称为-----------，在实验室中发生自发缺 壁突变的细菌被称为-----------，而自然界中存在的稳定型无壁原核微生物则是-----------。 人为去尽细胞壁的细菌称为原生质体，未除尽壁的细菌常称为球状体，在实验室中发生自发缺壁突变的细菌被称为L型细菌，而自然界中存在的稳定型无壁原核微生物则是支原体
1 放线菌属于(d ) 答案 A. 真菌界 B. 病毒界 C. 原生生物界 D. 原核生物界 2 细菌在哪一类食品上最容易生长(b ) 答案 A. 苹果 B. 鲜鱼和鲜肉 C. 谷物 D. 脱水蔬菜 3 所的细菌的细胞壁中都含有肽聚糖。 4放线菌具吸收营养和排泄代谢产物功能的菌丝是( ) 答案 A. 孢子 B. 基内菌丝 C. 孢子丝 D. 气生菌丝 5 革兰氏阴性菌细胞壁特有的成分是( ) 答案 A. 几丁质 B. 脂多糖 C. 磷壁酸 D. 肽聚糖 6 放线菌适宜生长的pH范围为( ) 答案 A. 6.5～8.0 B. ＜4.0 C. 7.5～8.5 D. 4.0～6.0 7 革兰氏阴性菌的细胞壁不含有( ) 答案 A. 磷壁酸 B. 脂多糖 C. 肽聚糖 D. 脂蛋白 8 蓝细菌中的藻青素属于氮源类储藏物。 9脂多糖是革兰氏阳性细菌特有的成份。 10细菌的鞭毛是通过“挥鞭”方式而推动细菌运动的。 11蓝细菌的异形胞均有繁殖作用。 12自然界长期进化形成的缺壁细菌是( d) 答案 A. L型细菌 B. 原生质体 C. 原生质球 D. 支原体 13放线菌是一类陆生性较强的原核生物，它们产生的孢子都是不长鞭毛的。 14 原核细胞细胞壁上特有的成分是( )
答案 A. 脂多糖 B. 磷壁酸 C. 几丁质 D. 肽聚糖 15G+杆菌去除细胞壁后，菌体呈何种形状？若进行革兰氏染色后镜检，呈何种颜色？ 答案 A. 杆状，紫色 B. 球状，紫色 C. 球状，红色 D. 杆状，红色 16科赫对微生物学的重要贡献是( ) 答案 A. 首次观察细菌的人 B. 首次证明微生物引起疾病的人 C. 首次给细菌命名的人 D. 首次发现青霉素的人 17苏云金芽孢杆菌可制成有效的生物杀虫剂，其杀虫物质是一种称为γ-内毒素的毒蛋白。18溶菌酶水解肽聚糖的作用位点是（） 答案 A. N-乙酰胞壁酸与N-乙酰葡糖胺之间的β-1, 3糖苷键 B. 四肽短链与N-乙酰胞壁酸之间的酰胺键 C. 不同多糖链之间的肽桥 D. N-乙酰葡糖胺与N-乙酰胞壁酸之间的β-1, 4糖苷键 19原核细胞特有的碳源储藏颗粒是( ) 答案 A. 藻青素 B. PHB C. 异染粒 D. DAP 20下列着生鞭毛最多的菌为( ) 答案 A. 假菌丝 B. 杆菌 C. 球菌 D. 螺旋菌 21革兰氏染色结果中，革兰氏阳性菌应为( ) 答案 A. 红色 B. 紫色 C. 无色 D. 黄色 22蓝细菌的光合作用部位是( ) 答案 A. 链丝段 B. 异形胞 C. 静息孢子 D. 类囊体
第一章：原核生物的形态构造和功能 一，选择题: 1，能产生大量分枝和气生菌丝的放线菌菌落，与培养培养基的结合，往往具有如下特征：A．较松，极易挑取；B。较松，不易挑取； C．较紧，容易挑取；D。较紧，易不挑取； 答：（）2，由于形成放线菌菌落的气生菌丝之间存在以下状况，故菌落表面干燥： A．含有大量的水；B。含有少量的水； C．一般不存在毛细管水；D。以上答案都不对。 答：（）3，与细菌相比，放线菌菌落的特征是： A．光滑，湿润，较大，透明，易挑取；B。光滑，干燥，较大，不透明，不易挑取； B．湿润，较小，皱褶，透明，不易挑取；D。干燥，紧密，较小，不透明，不易挑取； 答：（）4，细菌细胞膜是一个重要的代谢中心，因此，细菌细胞： A．可以没有细胞壁，绝不能没有细胞膜；B。既不能无壁也不能无膜； C．可以无膜但不能无壁；D。以上答案都不对。 答：（）5，为在光学显微镜下能见到细菌荚膜，通常使用以下某种物质对其进行负染色： A。孔雀绿；B。结晶紫—碘液；C。硝酸银；D。碳酸墨水（或中国墨） 答：（）6，创立医学上外科消毒术的著名学者是： A．巴斯德；B。科赫；C。弗莱明；D。李斯特； 答：（）7，工业发酵生产抗生素时，放线菌主要借助哪种方式以产生新的菌丝体： A．有性孢子；B。无性孢子； C．菌丝体断裂；D。有性接合； 答：（）8，电子显微镜观察研究表明：放线菌分生孢子的形成可通过两条途径实现： A．细胞膜内陷和细胞壁，细胞膜同时内陷；B。细胞膜内陷和细胞壁内陷； C．细胞质凝聚和细胞壁内陷；D。细胞质凝聚和细胞壁，细胞膜同时内陷； 答：（）9，在分类学上，各菌株DNA 的同源性在70%以上时，其分类水平应属于： A．色较浅，直径较粗；B。色较浅，直径较细； C．色较深，直径较细；D。色较深，直径较粗； 答：（）10．原核微生物主要有6类，它们是： A．细菌，放线菌，蓝细菌，立克次氏体，衣原体和螺旋体； B．细菌，放线菌，蓝细菌，粘菌，立克次氏体和衣原体： C．细菌，放线菌，蓝细菌，粘细菌，支原体和立克次氏体； B。细菌，放线菌，蓝细菌，立克次氏体，支原体和衣原体； 答：（）
微生物肥料生产新技术 Company Document number：WTUT-WT88Y-W8BBGB-BWYTT-19998
微生物肥料生产新技术 一、微生物肥料生产新工艺及流程 一般传统的微生物肥料生产工艺是：保藏菌种→斜面菌种培养活化→摇瓶扩大培养→发酵罐液体发酵→按一定的比例用草炭吸附后包装或按一定的比例稀释后直接包装。建立这样的生产企业需要建立大面积的无菌培养室、购置发酵罐、空压机、过滤器等设备，而且培养、发酵条件不易控制，菌种质量难以保证，投资大、成本高。 河北省生物工程技术公司针对众多微生物肥料生产企业中存在的上述难题，联合河北农业大学、河北大学、河北省科学院微生物研究所等单位微生物专家，经多年研究攻关、多次实验，开发出微生物肥料生产新工艺，成功解决了上述难题，非常适合中小微生物肥料生产企业采用，尤其是特别适合现有的复混肥料、有机肥料生产企业生产生物有机无机肥料、生物有机肥料，作为其产品功能更新、升级或提高应用效果而添加。 河北省生物工程技术公司微生物肥料新的生产工艺是：使用公司新开发出的高活性、高含量微生物菌粉按一定比例直接加入或包衣到有机肥或复混肥料中，即可生产出符合国家农业部登记标准要求的微生物菌剂、生物有机肥、复合微生物肥料、微生物冲施肥、拌冲剂等产品。 具体工艺流程为： （1）微生物菌剂工艺： 草炭或其他吸附剂 + 菌粉微生物固体菌剂或颗粒肥包装 （2）生物有机肥工艺： 有机肥粉状或颗粒 + 菌粉生物有机肥包装 （3）复合微生物肥料（生物复混肥）：
化肥（N、P、K）配料→混合→造粒→烘干冷却→筛分→ 包装 菌粉 （4）微生物冲施肥微生物拌种剂 和其他辅料配比制成微生物冲施肥及拌种挤 上述新工艺，实际上相当于将微生物肥料生产中投资大、工艺复杂、技术难度大、质量要求高、用量少的菌剂生产环节交给我们来完成，由我们统一规模化生产提供给每个企业。这样将使微生物肥料的生产变得简便、高效、低成本。就象手机市场研发出强大的手机芯片，从而使手机生产变得简化进而出现山寨手机一样，高活性的菌粉就是这种“芯片”，只需嫁接到你的产品中，即可生产出各种成分、含量的微生物肥料。所不同的是：高活性菌粉中的有效菌是国家已认可、明确用于农业生产的菌种，用于生产出来的各种微生物肥料均可获得农业部的微生物肥料登记证。 河北省生物工程技术公司提供的菌粉产品，采用现代化的生产设备，在工业化发酵生产生物肥料的基础上，将菌剂进一步浓缩低温脱水精制而成，实现了菌剂生产的规模化、现代化，保证了菌剂的质量，降低了成本。 二、高活性菌粉技术指标： 含（胶质芽孢杆菌）活性芽孢100亿/克个以上，有效期24个月 三、在微生物肥料生产中使用高活性菌粉的特点及优势 1、生产投资成本低
第一章微生物的概述 一.微生物是一群个体微小，结构简单，肉眼不能直接看见的微小生物的总称，必须借助显微镜。 二．微生物类型非细胞型微生物；这类微生物无细胞结构，可由一种核酸和蛋白质衣壳组成，有的仅为一种核酸或仅有蛋白质而没有核酸，它们必须寄生于活的易感细胞中生长繁殖。此类微生物如病毒，类病毒，阮病毒。 原核细胞型微生物；这类微生物由单细胞组成，细胞核分化程度低，无核膜，核仁，染色体为裸露的DNA分子，胞浆中缺乏完整的细胞器。此类微生物包括古菌，细菌，蓝细菌，放线菌，支原体，衣原体，立克次体和螺旋体。除古菌外，其他原 核细胞型微生物由于它们细胞水平的结构和组成相近，故被列入广义的细菌范畴。 真核细胞型微生物；这类微生物细胞核分化程度高，有核膜，核仁和染色体，胞浆内有完整的细胞器。此类微生物有真菌，单细胞藻类和原核生物 三．17世纪列文虎克发明了显微镜巴斯德微生物之父巴氏消毒法Florey分离青霉素 第二章微生物的生理与代谢 一.微生物的化学组成；固体物质是由氢，氧，氮，磷，硫，钾，钙，镁，铁等主要化学元素组成，其中碳，氢，氧，氮是组成有机物的四大元素，占90％-97％.极微的硼，锌，钼，钴，碘，镍，钒等微量元素。 二．原核原核微生物；肽聚糖，磷壁酸，D型氨基酸，二氨基庚二酸，吡啶二羧酸。 三.微生物的营养物质；水，碳源，氮源，无机盐，生长因子。 四.微生物的生长繁殖条件；1.水，碳源，氮源，无机盐，生长因子 2.最适ph为7.2-7.6 3.最适的生长温度为37度。 4.需氧气和二氧化碳，有的需要氮。 五.细菌以二分裂方式进行无性繁殖，大多数细菌20-30分钟即可繁殖一代。 六.细菌的生长曲线 1.迟缓期 2.对数期意义1此时期菌种比较健壮，增殖噬菌体的最适年龄，生产 上用于接种的最佳菌龄。2发酵工业上尽量延长该期，以达到较高的菌体密度。3是生理代谢及遗传研究的最 佳时期。4观察研究细菌的性状，均应选用该期的细菌以获得准确的结果。 3.稳定期意义1发酵生产产物形成的重要时期，产物积累达到最高，生产上应尽量通过补充营养物质，调节温度和ph等措施， 延长稳定期，以提高产量。2.活细胞数目稳定，用于计数细菌的最大生长量。 4.衰亡期 七．病毒，立克次体，衣原体等必需在活细胞内才能增殖，所以实验室分离培养这类微生物主要用动物接种，鸡胚培养法，细胞培养法。 八．细菌的合成代谢产物包括热原质，毒素和侵袭物质，细菌素，色素，抗生素以及维生素 1.热原质又称致热原，是细菌合成的一种注入人体或动物体内能引起发热反应的物质。 2.抗生素是由某些微生物在代谢过程中产生的一类能抑制或杀死某些病原微生物和肿瘤细胞的物质。 第三章微生物的分布与控制 一.人类体表与外界相通的腔道，如上呼吸道，口腔，泌尿生殖道存在不同种类和数量的微 生物，这些微生物通常对人体无害，成为人体的正常微生物群，称正常菌群。 二.正常菌群的作用；1.生物屏障与拮抗作用。2免疫作用。3营养作用。4.抗衰老作用。5.抗肿瘤作用。 三.但在一定条件下，正常菌群与宿主之间的生态平衡被打破，原来不致病的正常菌群也可引起疾病，这种在通常情况下不致病，但在一定条件下能引起疾病的菌群，称条件致病菌。 四.引起机会性感染的条件；1寄居部位改变。2免疫功能低下。3菌群失调。 五.医院感染；又称为医院内感染，系指包括医院内各类人群所获得的感染。 六.消毒；杀死物体中的病原微生物，但不一定杀死芽孢和部分非病原微生物的方法，称消毒。用于消灭化学药品为消毒剂。 七．灭菌；杀死物体上所有微生物，包括芽孢与繁殖体，病原菌与非病原菌的方法称为灭菌。 八.无菌操作；在特定条件下，防止微生物进入操作对象的操作方法称为无菌操作。进行微生物实验时，外科手术和制备无菌制剂时，必须严格进行无菌操作。 九.巴氏消毒法；1 63度，加热30分钟。2高温瞬时法，即72度加热15-30秒。
第一章原核微生物的形态、结构与功能 一、填空题 1、细菌是单细胞原核生物，按其基本形态可分为_______、_______和_______三类。 2、球菌按分裂后产生的新细胞的排列方式可分为_______、_______、_______、_______、_______和_______。 3、细菌的基本结构包括_______、_______、_______和_______等四部分。 4、根据革兰氏染色技术可将细菌细胞壁分为两种类型，即_______和_______。 5、芽孢耐高温的原因是由于芽孢形成时可同时形成_______所致。 6、细菌的主要繁殖方式是_______。 7、放线菌是具多核的单细胞原核生物，革兰氏染色呈_______；典型的放线菌除发达的基质丝外，还有发达的_______和_______。 8、_______繁殖是放线菌的主要繁殖方式。 9、细菌的繁殖主要靠_______，放线菌的繁殖主要靠_______， 10、单个或多个微生物的细胞在适宜固体培养基上形成的群体称为_______。细 菌和酵母菌的菌落表面_______，放线菌和霉菌菌落表面_______。 二、判断是非 1、细菌荚膜都是由多糖组成。（） 2、所有细菌都有细胞壁。（） 3、微生物的芽胞或孢子含水量较多，抗干燥能力较强。（） 4、革兰氏阳性菌和阴性菌的差异在于细胞壁的构造和成分的不同。（） 5、磷壁酸是革兰氏阴性细菌细胞壁中的特有成分。（） 6、细菌的荚膜主要由多糖和果胶类物质组成，也有少数细菌的荚膜成分是纤维 素。（） 7、脂多糖是革兰氏阳性细菌特有的成份。（） 8、所的细菌的细胞壁中都含有肽聚糖。（） 9、鞭毛是鞭毛细菌的运动器官。（） 10、菌落的大小以厘米表示，记录时直接按菌落直径大小记录。（） 三、名词解释 1、原生质：指在人为条件下，用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素抑制新生细 胞壁合成后，所得到的细胞膜包裹的圆球状渗透敏感细胞。 2、PHB ：聚—β—羟丁酸，是一种存在于许多细菌细胞质内属于类脂性质的炭 源类贮藏物，不溶水，而溶于氯仿，可用尼罗蓝或苏丹黑染色，具有贮藏能量、炭源和降低细胞内渗透压等作用。 3、衰颓形：由于培养时间过长，营养缺乏，代谢的排泄物浓度积累过高等使细 胞衰老而引起的异常形态。 4、质粒：凡游离于原核生物核基因组以外，具有独立复制能力的小型共价闭合 环状的dsDNA分子，即cccDNA。
微生物在环境保护中的应用 随着人类的物质文明和健康的需要，对环境要求越来越高，为了达到提高空气质量和水环境质量的要求，环境工程除用常规的处理设备和构筑物处理污废水外，还与天然的湿地组合处理；后来又发展到用人工湿地处理污废水，或用处理设备，构筑物与人工湿地组合对污废水进行深度处理。顺应趋势，微生物也逐渐应用到环境保护中。它与物理，化学法相比，具有经济，高效的优点，更重要的是可基本达到无害化。现在浅谈微生物在环境工程中处理废水，废物，废气的应用： 微生物在废水处理中的应用： 生物处理根据其处理过程中氧的状况，可分为好氧处理系统与厌氧处理系统。 好氧处理系统 微生物在有氧条件下，吸附环境中的有机物，并将其氧化分解成无机物，使污水得到净化，同时合成细胞物质。微生物在污水净化过程，以活性污泥和生物膜的主要成分等形式存在。 活性污泥法：又称曝气法，是利用含有好氧微生物的活性污泥，在通气下使污水净化的生物学方法。此法是现今处理有机废水的最主要的方法。它是利用某些微生物在生长繁殖过程中形成表面积较大的菌胶团来大量絮凝和吸附污水中的有机物，并在氧的作用下，将这些物质同化为菌体的成分，或将其分解为CO2、水等物质，从而达到降低污水中有机污染物的目的。所谓活性污泥是指由菌胶团形成菌、原生动物、有机和无机胶体及悬浮物组成的絮状体。在污水处理过程中，它具有很强的吸附、氧化分解有机物或毒物的能力。在静止状态时，又具有良好沉降性能。活性污泥中的微生物主要是细菌，占微生物总数的90%～95%。,并多以菌胶团的形式存在，具有很强的去除有机物的能力，原生动物起间接净化作用。 活性污泥法根据曝气方式不同，分多种方法，目前最常用的是完全混合曝气法。污水进入曝气池后，活性污泥中的细菌等微生物大量繁殖，形成菌胶团絮状体，构成活性污泥骨架，原生动物附着其上，丝状细菌和真菌交织在一起，形成一个个颗粒状的活跃的微生物群体。曝气池内不断充气、搅拌，形成泥水混合液，当废水与活性污泥接触时，废水中的有机物在很短时间内被吸附到活性污泥上，可溶性物质直接进入细胞内。大分子有机物通过细胞产生的胞外酶将其降解成为小分子物质后再渗入细胞内。进入细胞内的营养物质在细胞内酶的作用下，经一系列生化反应，使有机物转化为CO2、H2O等简单无机物，同时产生能量。微生物利用呼吸放出的能量和氧化过程中产生的中间产物合成细胞物质，使菌体大量繁殖。微生物不断进行生物氧化，环境中有机物不断减少，使污水得到净化。 生物膜法：生物膜法是模拟自然界中土壤自净的一种污水处理法，它是利用微生物群体附着在固体填料表面而形成的生物膜来处理污水的一种方法。因此，生物膜法又称为固定膜法。生物膜一般呈蓬松的絮状结构，微孔较多，表面积很大，有很强的吸附作用。废水中的有机物流入时，被膜上的微生物吸附，进行生物降解，从而使废水得到净化。生物膜随着微生物群体的生长增加而逐渐增厚，到一定程度时，它会由于受到水力的冲刷而不断剥落，同时又会不断地形成新的生物膜，而达到动态平衡。 生物膜的功能是分解水中的有机污染物，达到净化污水的目的。能分解糖被
微生物在农业领域的应用 自20世纪7O年代以来，微生物科学技术在中国农业中得到了普遍推广和应用。在农业生产中，中国研制出多种微生物制剂，以防治园林和蔬菜病虫害，改善作物品质：在农业环保中，中国利用微生物处理水污染，化学农药污染，固体废弃物以及利用微生物生产沼气，有效改善了农村环境，节约了能源。农业微生物资源的开发利用对促进农业生产的变革具有明显的现实意义和深远的历史意义，其必将成为世界各国政府和科技部门研究的重点。 农业微生物基因工程研究现状与前景概述 众所周知，微生物和农业的关系十分密切．索有“微生物大本营”之称的土壤中，微生物扮演质循环的主要角色，有着不可替代的作用．它们分解动植物的残体废物而将其转化成为腐殖质，促进土壤良好结构的形成．许多土壤微生物可固定空气中的氮素和转化各类有机物，不断为植物提供可有效利用的碳、氮、磷、钾、硫等各类营养元素．自然界还广泛存在昆虫的病原微生物和植物病菌的拮抗微生物，它们可用于植物病虫害的防治而部分替代化学农药．另外，通过微生物繁殖和发酵能生产有机酸、氨基酸、生长激素、抗生素、各类酶制剂等多种产品，可分别用作饲料添加剂、食品添加剂和农药等，应用日益广泛．然而地球上的农业微生物资源虽然极为丰富，人类对其利用也有久远的历史．但是，传统常规的微生物技术主要是筛选各类天然微生物菌株并加以利用，不仅效率低、周期妊、成本高，而且选出的菌株通常还存在种种缺陷和不足，因而使其广泛应用受到限制．基因工程技术能够迅速实现遗传物质在不同生物种之间的转移，因而已经农业微生物遗传改良的主要手段．对野生型菌株进行遗传改良，可以提高相关功能基因的表达量、延长表达时问、产生新的优良性能．固氮菌重组后的固氮效率可以大幅提高；一些具有杀虫和防病作用的菌株通过基因工程改造后，毒力效价提高，效力变得迅速和持久，防治对象范围扩大，应用更加广泛．有的土壤微生物具有降解化学工业污染物的能力，但当环境中污染物成分比较复杂时往往难以发挥作用，通过改造后这一缺陷就可克服．面对人口剧增、耕地锐减、资源枯竭、环境恶化等重大社会、经济问题的严峻挑战，农业微生物基因基因工程技术的进一步研究开发将成为实现农业可持续发展的有效途径．目前农业微生物基因工程已发展成为现代生物技术中最为活跃，最具创新性的前沿领域之一，并且取得了不少重大的进展． 微生物农药。微生物农药是指非化学合成、具有杀虫防病作用的微生物制剂，如微生物杀虫剂、杀菌剂、农用抗生素等．这一类微生物包括杀虫防病的细菌、病毒和真菌。微生物农药是利用微生物菌体或其代谢产物来防治植物病虫害的一种生物制剂，它是通过从自然界采集患病体，进行分类筛选病原体或病菌拮抗微生物，经人工培养、收集、提取而制成的。这些病原体和拮抗物及其产物为昆虫吞食、动植物接触感染后，由于微生物自身活动产生毒素，导致昆虫新陈代谢受阻，组织器官受到破坏，有害植物病毒细胞死亡，从而达到消灭病虫害的目的。 微生物激素微生物激素是一种植物生长调节剂，一般以极低的浓度促进植物细胞的发育，使植物茎杆伸长，叶面增大，刺激果实生，或者促进作物提前抽穗开花，提早成熟，也能打破种子休眠激素作用机理是在植物体内促进或抑制酶类、糖类合成，诱导植物细胞发育，达到促进增长的效果。现在使用普遍的有五大类植物激素：赤霉索、生长索、细胞分裂素、脱落酸、乙烯。其中，前三种为促进型激索，后两种为抑制型激素。激素生产一般用阎体发酵或r[业发酵进行。
微生物在环境保护中的作用 1生态系统中的清道夫—分解者 微生物的分解作用是地球上生命波浪式发展、螺旋式进化的原动力之一。 2微生物对污染物的抗性及降解———利用微生物进行环境保护的基础 2.1微生物抗毒微生物个体微小、繁殖迅速、数量巨大、代谢能力强速度快、易于突变,它们较其它生物更易适应环境。 2.2转化和降解许多微生物可以对生物外源性物质进行化学转化,使其转变成为毒性较小或易于被其它微生物所降解的化合物。如对杀虫剂DDT和对炸药TNT的转化。 3污染环境的废弃物的生物处理 生物处理(Biotreatment)也叫生化处理,是指利用处理系统中的生物,特别是微生物的代谢活动以及各种特性来处理各种废弃物的过程。 3?1城市垃圾生物处理技术 3?2污水生物处理技术活性污泥法 4被污染环境的生物修复 生物修复是利用微生物在自身的生产代谢吸收中，降低存在于环境中有毒有害物质的杭亮或使无毒化，从而使被污染的环境能够得到明显改善。 5利用微生物生产有益环境的产品 5?1生物杀虫剂 现在主要的产品是用苏云金芽孢杆菌制成的BT生物杀虫剂。 5?2可以被迅速分解的塑料—多聚羟基烷酸PHA 一类由微生物合成的化合物为聚β-羟基烷酸酯,简称PHA,它们是由许多个β-羟基化的饱 和脂肪酸聚合而成的。 6环境检测的重要指标 对水体中微生物的检测主要集中在病原微生物的检测上,如沙门氏菌属、霍乱弧菌及各类容易引起疾病的病毒。通常对饮用水来说,检测大肠杆菌的数量以确定水被粪便污染的程度。（1）污水中有机物的降解。 （2）废水中重金属的去除。真菌具有很高的生长速度,菌丝绵延,为重金属吸附提供较多的空间。 7. 大气污染治理中的应用。 微生物对污染物均用较强、较快的地适应，并可使废气得到降解和转化。同常规的废气处理方法相比，微生物法以其处理效果好、设备简单投资及运行费用低、安全性好、无二次污染、易于管理等优点，逐渐应用于空气污染控制中。 （1）煤炭中硫的脱除： 煤的生物脱硫是利用微生物代谢过程中的氧化还原反应，在常压低于100 ℃的生长条件下，达到脱硫的目的。 （2）二氧化碳的微生物固定 8.在水污染治理中的应用 废水生物处理是利用微生物生命活动过程对废水中污染物进行转移和转化作用,使废水得到净化的处理方法。 8.1污水中有机物的降解 生物处理去除污水中的有机物质是利用微生物的新陈代谢过程。 9. 微生物脱臭： 适宜的环境条件下，附着于生物填料上的微生物利用污染物中的臭味成分作为能源，维持生