阿司匹林含量测定方法综述
一、阿司匹林原料药的含量测定
（1）酸碱滴定法
1、直接滴定法
2、水解后剩余滴定
3、两步滴定法
（2）仪器法
4、反相高效液相色谱法
5、薄层色谱法
6、紫外分光光度法
二、阿司匹林制剂的含量测定
1、两步滴定法
光谱法：
2、比色法
3、双波长紫外分光光度法
4、双波比值光谱法
5、同步扫描荧光光谱
6、萃取-火焰原子吸收光谱法
7、紫外分光光度法
8、分光光度法
9、荧光光度法
10、差示分光光度法
11、紫外褶合光谱法
12、近红外漫反射法
色谱法：
13、高效液相色谱法
14、反相高效液相色谱法
15、离子抑制-反相高效液相色谱法
16、气相色谱法
17、大口毛细管气相色谱法
18、胶束薄层色谱法
电泳法：
19、非水毛细管电泳法
20、反向高效毛细管电泳法
其他法：
21、动力学光度法测定痕量乙酰水杨酸
23、电极法
24、柱分配色谱-紫外分光光度法
25、阻尼最小二乘法
26、线性扫描伏安法测定阿司匹林
27、百分吸收系数法
摘要：阿司匹林是水杨酸类解热镇痛药物，临床上主要用于治疗感冒发烧、牙痛等慢性疼痛，现在的研究发现小剂量的阿司匹林也可用于预防恶性肿瘤，对多种疾病有治疗作用。阿司匹林含量的测定方法很多，有容量分析法，紫外分光光度法，HPLC法，薄层色谱法，气相色谱法等方法，现对其含量测定和鉴别方法作一综述。
关键词：阿司匹林含量测定
阿司匹林是市场上常见的水杨酸类药物，其化学式为：
理化性质：
（1）本品为白色结晶或结晶性粉末；无臭或微带醋酸臭，味微酸；遇湿气即缓慢水解。
（2）本品在乙醇中易溶，在三氯甲烷或乙醚中溶解，在水或无水乙醚中微溶。（3）结构中具有羧基具有酸性。
（4）结构中有酯键，在氢氧化钠溶液或碳酸钠溶液中溶解，但同时分解。
（5）苯环具有紫外吸收。
《中国药典》收载的品种有阿司匹林片、阿司匹林肠溶片、阿司匹林肠溶胶囊、阿司匹林泡腾片和阿司匹林栓，以及国家食品药品地标收载的小剂量的阿司匹林肠溶片，这些药品成分相同，作用类似，市场应用广范。临床上主要用于治疗感冒发烧，牙痛、肌肉痛及神经痛等慢性疼痛，急、慢性风湿病及类风湿病等，是风湿、类风湿关节炎治疗的常用药物。本品主要的副作用是引起幽门痉挛及刺激胃黏膜的胃肠道反应长期服用导致胃肠出血。随着科学技术的进步，各种仪器设备、新方法的应用，形成了阿司匹林鉴别和含量测定方法的各异性。阿司匹林的含量测定
一、原料药：
（1）酸碱滴定法
1、直接滴定法[16]：原理：结构中具有羧基，显酸性，可用碱中和，利用中和反应测
定其含量。
?方法：取本品0。4g，精密称定，加中性乙醇20ml，溶解，加酚酞指示液3d，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/l）滴定。每1ml滴定液相当于18.02mg 的C9H8O4。
《中国药典》(2010年版)二部采用此法。
计算公式：
NaOH滴定度T=0.1×180.16×(1/1)=18.02（mg/ml）
F=M（实际）/M(规定)
含量（%）=（V×T×F）/W×100%
（V为滴定液体积（ml）；T为氢氧化钠的滴定度，W为供试品称样量（g）；F为
滴定液浓度校正因子（F=滴定液实际浓度/滴定液规定浓度））
?优点：简便、快速。
?缺点：1.酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定）。2.酸性杂质干扰（如水杨酸）。
?适用范围：不能用于含水杨酸过高或制剂分析，只能用于合格原料药的含量测定。
2、水解后剩余滴定[2]：原理：利用阿司匹林酯结构在碱性溶液中易于水解的特性，加入
定量过量的氢氧化钠滴定液，加热使酯键水解后，再用硫酸滴定液回滴定剩余的氢氧化钠滴定液。
?方法：取本品1.5g，精密称定加氢氧化钠滴（0.5mol/l）50.0ml，混合，缓缓煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mol/l）滴定剩余的氢氧化钠。
计算公式：硫酸标准液与阿司匹林的摩尔比为1∶1。
硫酸的T=0.25×（1/1）×180.16=45.04(mg/ml)
含量（%）=﹝（V0-V）×F×T﹞/W×100%
（V0为空白试验消耗硫酸滴定液的体积（ml）；V为样品测定时消耗硫酸滴定液的
体积（ml）；W为阿司匹林样品的称取量（g）；F为硫酸的浓度校正因数；T为硫
酸溶液的滴定度）
?优点：消除了酯键水解的干扰
?缺点：酸性杂质干扰
3、两步滴定法[16] [3]：原理：两步滴定法系指测定过程分两步进行：第一步中和制剂中的酸性水解产物和酸性稳定剂（同时中和阿司匹林的游离羧基），以消除其干扰；第二步水解与滴定，即水解后剩余量滴定法。Chp2005曾收载两步滴定法测定阿司匹林片和肠溶片的含量。
中和：
水解与滴定：
?方法：
?A、中和：取本品10片，精密称定，研细，精密称取片粉适量（约相当于阿司匹林
0.3g ），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示剂显中性）20ml ，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/ml ）至溶液显粉红色。此时中和了供试品中存在的游离酸，阿司匹林也同时成为钠盐。
? B 、水解与滴定：在中和后的供试品溶液中，精密加氢氧化钠滴定液（0.1mol/ml ）
40ml ，置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（0.05mol/ml ）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。
? 计算公式：
从上述反应式可知：阿司匹林与硫酸的摩尔比为2：1
硫酸的T=0.05×（2/1）×180.16=18.02（mg/ml ）
标示量%=﹝（V0-V ）×F ×T ×W(平均)﹞/（W ×标示量）×100%
（V0为空白试验消耗硫酸滴定液的体积（ml ）；V 为样品测定时消耗硫酸滴定液的体积（ml ）；F 为硫酸滴定液的浓度校正因数；T 为硫酸的滴定度（mg/ml ）；W 为供试品片粉的取样量（g ）；W （平均）为供试品的平均片重（g ）；标示量为片剂的规格 （mg/片））
? 优点：消除了酸性物质的干扰
4、反相高效液相色谱法]1[
（1）阿司匹林对照品溶液的制备：精密称取阿司匹林对照品150mg ，置50ml 量瓶中，加乙腈适量使溶解并稀释至刻度；精密量取10ml ，置25ml 量瓶中，用乙腈稀释至刻度，制成含阿司匹林1200ug/ml 的对照品溶液。
（2）部分降解供试品溶液的制备：精密称取阿司匹林样品150mg ，平铺于50ml 烧杯内，然后置于恒温恒湿箱（75℃、80%相对湿度）中加速其降解，一定时间后取出样品，按（1）项下方法制成部分降解的供试品溶液。
（3）含量测定：精密称取不同批样品150mg ，置50ml 量瓶中，加乙腈适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，取15ul 注入液相色谱仪，记录峰面积。另取（1）项下方法制成的对照品溶液（含阿司匹林1200ul/ml ）15ul ，同法测定，按外标法计算阿司匹林含量。 优选：直接滴定法，原料药的纯度较高，可用容量分析法直接测定其含量，不用重新提纯和精制，本法所用仪器价廉易得，操作简便、快速；方法耐用性高；测定结果准确，相对误差在0.2%以下。
5、薄层色谱法
6、紫外分光光度法
二、制剂含量测定
1、两步滴定法]3[ 原理：因片剂中可能加入酒石酸或枸橼酸作稳定剂，也可能有水解酸性产物水杨酸，醋酸等，不能用直接滴定法，而是先中和共存的酸，再水解其目的物质。
A ．中和：
B ．水解：
C ．剩余滴定：2NaOH （过量）＋H 2SO 4 ＝Na 2SO 4＋2H 2O
反应摩尔比为0.5∶1
COONa
OCOCH 3+COONa OH +CH 3COONa
(定量过量） 酒石酸
枸橼酸
水杨酸
醋酸
++H 2O
2、比色法[21]
原理：利用阿司匹林在碱性条件下能定量水解成水杨酸的特性，采用比色法即水杨酸遇硫酸铁铵指示液显紫色并在530nm±1nm处测定其吸收度，求得水杨酸的量再折算成阿司匹林的量。
高革、王福慧将阿司匹林锌用0.1mol/L NaOH溶液定量水解后，用比色法测定了其中阿司匹林的含量。[21]
【对照液的制备】精密称取水杨酸适量置1000mL容量瓶中，加水溶解后，加冰醋酸1mL，再加水稀释至刻度，摇匀，配成100μg/mL的对照液。
【供试品溶液的制备】取阿司匹林锌约0.4g，精密称定，加水20mL，再加0.1mol/L NaOH 液25mL，煮沸并保温30min，放冷后移至250mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀、滤过，弃去初液，精密量取续滤液10mL,置100mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。
【样品测定】取本品约0.4g，精密称定，加乙醚4mL，不断搅拌。用乙醚润湿滤纸，滤过，滤A样=渣用乙醚洗涤3次，每次约2mL，滤渣及滤纸全部移至烧瓶中，加水20mL，再加0.1mol/L NaOH液25mL，煮沸并保温30min，放冷后移至250mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液10mL置100mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。分别量取对照液及样品液10mL，置25mL量瓶中，分别各加入0.01mol/L HCl 溶液2.0mL，硫酸铁铵指示剂2.0mL，再加水稀释至刻度，摇匀。在530nm分别测定其吸收度。
【计算】样品%
100%?D/W?C对照?A对照
A样、A对照分别为样品和对照品的吸收度，C对照为对照液的浓度，D为稀释倍数，W为样品取样量。
【讨论】样品液浓度与光吸收值呈简单的线性关系，测定结果相对偏差小，重现性好。样品水解时加碱量及显色时加酸量一定要足够，否则结果偏低或偏高。原料中的游离水杨酸可用乙醚提出后再进行测定。
3、双波长紫外分光光度法[6]
池秀珍采用双波长紫外分光光度法（测定波长为276nm和322nm），测定了阿司匹林肠溶片的含量，可消除水解产物水杨酸的干扰。
【标准曲线的绘制】精密称取阿司匹林对照品适量，用乙醇溶解使成1000μg/mL的溶液。精密吸取1.0、1.5、2.0、2.5和3.0mL，分置于25mL量瓶中，加乙醇至刻度，分别制成40、60、80、100和120μg/mL的对照品溶液，以乙醇为空白，分别在276nm、322nm波长处测定吸收度，以浓度C对△A进行线性回归，得回归方程：C=3.8×10-4+1.5403×10-1△A，r=0.9999（n=5）
【样品测定】取阿司匹林肠溶片10片（小剂量20片），精密称定，研细。精密称取约相当于阿司匹林50 mg于50mL量瓶中，加乙醇适量，振摇使溶解并定容，摇匀，滤过。精密量取续滤液2mL于25mL量瓶中，加乙醇至刻度，以乙醇为空白，分别在276、322nm波长处测定吸收度，用回归方程计算阿司匹林的含量。
【计算】将样品在276和322nm处的得的吸收度计算得的△A，代入标准曲线，求得样品中阿司匹林的浓度。
100%?C实际测得的含量C标示量=样品%
4、双波比值光谱法[22]
孙增先等应用双波长比值光谱法测定了复方乙酰水杨酸片中阿司匹林、非那西丁、咖啡因三种组分的含量，结果显示阿司匹林（A）在5~20μg/mL，非那西丁（P）在2~10μg/mL，咖啡因（C）在μg/mL浓度范围内线性关系良好，平均回收率分别为100.3%，100.23%，99.96%。
优点：该方法适用于吸收光谱严重重叠，组分间互相干扰的复方制剂，测定波长少，计算简单，对仪器的要求不高。
5、同步扫描荧光光谱[20]
①原理：
荧光光度计同步扫描时, 得到两组分互不干扰的荧光峰, 借此分别测定两组分的含量。
②溶液的配制：
对照液：精密称取阿司匹林对照品适量，置100ml量瓶，用乙醇定容。精密量取2ml置100ml 量瓶，用乙醇定容，即得。
供试品：精密称取阿司匹林注射液适量，置100ml量瓶，用乙醇定容。精密量取2ml置100ml 量瓶，用乙醇定容，即得。
③测定方法：
用对照品溶液测定荧光强度与浓度的线性关系后，再在每次测定前，用一定浓度的对照品溶液校正仪器的灵敏度；然后再相同的条件下，分别读取对照品溶液及其试剂空白的荧光强度与供试品溶液及其空白的荧光强度
④计算公式：
CX =（RX—RXb）/（Rr—Rrb）×Cr
（CX和Cr为供试品溶液、对照品溶液的浓度，RX供试品溶液荧光强度，RXb供试品溶液试剂空白的荧光强度，Rr对照品溶液的荧光强度，Rrb为对照品溶液的试剂的空白荧光强度）
6、萃取-火焰原子吸收光谱法[24]
朱铿等以火焰法测定有机相中铜的原子吸收信号，间接求的阿司匹林的含量，建立了一种原子吸收光谱法间接测定阿司匹林的新方法，并用于实际样品正痛片（锦州制药厂生产）中阿司匹林的含量测定。
【原理】在一定条件下，阿司匹林与新铜试剂-铜形成离子对，它可被甲基异丁基甲酮萃取，测定有机相中铜离子的浓度，间接求得阿司匹林的含量。
【火焰原子吸收测定条件】光谱通带0.5nm；波长324.8nm；灯电流2mA；燃烧器高度20mm；空气流量8.0L/min；乙炔气流量1.6L/min；积分时间2s。
【溶液配制】
阿司匹林标准溶液：准确称取阿司匹林纯品0.9008g，加入分析纯（95%）乙醇20mL溶解，于500mL容量瓶中以水定容，使其浓度为1.00×10mol/L,使用时逐级稀释。
新铜试剂—铜溶液：称取分析纯新铜试剂2.300g加入50mL分析纯(95%)乙醇溶解；再加入分析纯CuSO4·5H2O 1.250g，使其完全溶解，于500mL容量瓶中以水定容。新铜试剂-铜溶液浓度为0.01mol/L。
硫脲溶液：称取分析纯（NH2）2CS 0.95g，溶解定容于500mL容量瓶中，使其浓度为0.025mol/L。
缓冲溶液：由KH2PO4和K2HPO4配制。
【方法】在10.0mL磨口具塞刻度试管中，分别依次加入1.0mL新铜试剂—铜溶液，l.0mL (NH2)2CS溶液，5.0mL缓冲溶液及1.0mL阿司匹林标准溶液(或试样溶液)。准确加入
2.0mL甲基异丁基甲酮（MIBK），手摇1min，离心分离。测定有机相中铜的吸收信号（即响应于阿司匹林的铜的吸光度），以未加阿司匹林溶液的MIBK提取溶液为空白。
【计算】将阿司匹林标准溶液按本法操作，用计算机计算得阿司匹林标准工作曲线，得回归方程：A=bC+a，将样品的测的A值带入方程，求得C。
【讨论】本方具有法线性范围宽、重现性好、环境污染小、简便、快速等特点，但对仪器和试剂有一定的要求
7、紫外分光光度法[4]
原理：结构中具有苯环，具有紫外吸收的特性。精密称取在105℃干燥至恒重的阿司匹林对照品32.08mg, 置25ml量瓶中, 加0.1mol/LNaOH溶解并稀释至刻度, 摇匀, 作为贮备液。精密吸取上述储备液1.5,2.0,2.5,3.0,3.5ml, 分别置100ml量瓶中, 用0.1mol/LNaOH 稀释至刻度, 摇匀, 照分光光度法, 在297nm处测定吸出度A,以A值对浓度C回归, 得回
归方程为A=1.839×102-C+1.5896×102-,r=0.9998(n=5)。
结果表明：在19.2-44.9ug/ml浓度范围内线性关系良好。适用于阿司匹林片、阿司匹林肠溶片等。
8、分光光度法[5]
原理：阿司匹林肠溶片的主要成分为乙酰水杨酸, 分子中酯基在碱性溶液中可与羟胺反应生成羟肟酸; 后者在酸性条件下与三氯化铁形成酒红色的羟肟酸铁, 最大吸收波长为520nm,在一定浓度范围内, 吸光度呈线性关系, 可测出阿司匹林药片中乙酰水杨酸的含量。
方法：a、标准溶液系列和样品溶液的配制
分别取0. 5g/L乙酰水杨酸标准溶液0. 00ml( 空白溶液) , 0. 50ml, 1. 00ml, 1. 50ml, 2. 00ml和阿司匹林样品溶液1. 00ml 置于25ml 容量瓶中, 分别加入7% 盐酸羟胺乙醇液1. 00ml, 2 mol/L NaOH 1. 00ml, 放置3 分钟, 再分别加入4 mol/L HCl和10%FeCl3 各
1. 00ml, 加水至刻度, 摇匀。
b、标准曲线的绘制：
标准溶液系列和样品溶液放置10 分钟后, 用空白溶液做对照, 在520nm 处测定吸光度。以吸光度为纵坐标, 标准溶液浓度为横坐标作图, 绘制出标准曲线。
9、荧光光度法[7]
原理：为将阿司匹林配置成一定量的稀溶液，然后A=ECL可以计算出，小剂量阿司匹林的含量。适用于小剂量阿司匹林片的含量测定。
10、差示分光光度法[8]
在波长297 nm 处, 阿司匹林以其在0. 1mol/l盐酸溶液为参比液, 测得其在0.1mol/l氢氧化钠溶液中的差示吸收值。结果:阿司匹林浓度在10. 29-30. 87 mol/l范围内A与溶液浓度呈良好线性关系( r= 0. 9998),平均回收率为99. 84% ( n = 6), RSD为0. 51%。
优点:该法简便、快速、准确。适用于阿司匹林肠溶片的含量测定。
11、紫外褶合光谱法[9]
原理：褶合曲线分析法是一种数学变换办法，根据谐波分析原理，将光谱吸收曲线看作是多个数学分量加权而成，由于它提供的信息量大，可以显示曲线的细微差异，以减少相似组分的数学相关性，所以在混合物定量方面具有明显的优点。
小儿退热灵的主要成分为阿司匹林和苯巴比妥，侯巍等]9[经褶合光谱仪采集其245～295 nm
波长范围吸收度信息，产生褶合光谱，冉利用计算机信息处理技术的褶合曲线分析法对阿司匹林和苯巴比妥进行同时测定，获得了满意的结果。
12、近红外漫反射法[14]
原理：近红外漫反射法技术是随计算机和化学计量学的发展而迅速发展起来的一门新型光谱
技术。近红外谱区范围一般为4 000～10 000 cm1-，该谱区主要是含氢基团的倍频及合频吸
收。近红外谱区谱峰重叠严重，定量分析需要一个待测成分已知的标准样品集，根据标样中样品的近红外光谱，运用化学计量学方法建立光谱特征值与待测成分之间的数学关系。样品
可以不经预处理，通过求解光谱矩阵来建立数学模型，进行定量。
乔梁]14[等采用此法对精氨酸阿司匹林片剂进行了含量测定。精氨酸阿司匹林主要含N—H键，故选取 6 000～7 000cm1-和4 500～5 000 cm1-这两个主要是N—H键振动的频率区间作为
分析区间，取得了较好的效果。
优选：两步滴定法，方法所用仪器少，操作简单、快速，方法耐用性高，测定结果准确。
13、高效液相色谱法[15]
A、色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水（20：5：5：70）为流动相；检测波长为276nm。理论板数按阿司匹林峰计算不低于3000，阿司匹林峰与水杨酸峰的分离度应符合要求。
B、测定法：取本品20片，精密称定，充分研细，精密称取细粉适量（约相当于阿司匹林10mg），置100ml量瓶中，用1%冰醋酸的甲醇溶液强烈振摇使阿司匹林溶解，并用1%冰醋酸的甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，滤膜滤过，精密量取续滤液10ul，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取阿司匹林对照品，精密称定，加1%冰醋酸的甲醇溶液振摇使溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。（《中国药典》(2010年版)二部采用此法）。适用于阿司匹林片、阿司匹林胶囊等各种剂型。
14、反相高效液相色谱法[1]
（1）阿司匹林对照品溶液的制备：精密称取阿司匹林对照品150mg，置50ml量瓶中，加乙腈适量使溶解并稀释至刻度；精密量取10ml，置25ml量瓶中，用乙腈稀释至刻度，制成含阿司匹林1200ug/ml的对照品溶液。
（2）部分降解供试品溶液的制备：精密称取阿司匹林样品150mg，平铺于50ml烧杯内，然后置于恒温恒湿箱（75℃、80%相对湿度）中加速其降解，一定时间后取出样品，按（1）项下方法制成部分降解的供试品溶液。
（3）含量测定：精密称取不同批样品150mg，置50ml量瓶中，加乙腈适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，取15ul注入液相色谱仪，记录峰面积。另取（1）项下方法制成的对照品溶液（含阿司匹林1200ul/ml）15ul，同法测定，按外标法计算阿司匹林含量。优选：直接滴定法，原料药的纯度较高，可用容量分析法直接测定其含量，不用重新提纯和精制，本法所用仪器价廉易得，操作简便、快速；方法耐用性高；测定结果准确，相对误差在0.2%以下。
15、离子抑制-反相高效液相色谱法
典型芳酸类非甾体抗炎药物制剂大多采用离子抑制-反相高效液相色谱法测定，用外标法计算含量。以阿司匹林栓的含量测定为例，方法如下：
①色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水（20：5：5：70）为流动相；检测波长为276nm。理论板数按阿司匹林峰计算不低于3000，阿司匹林峰与水杨酸峰的分离度应符合要求。
②测定方法：取本品5粒，精密称定，置小烧杯中，在40~50℃水浴上微温熔融，在不断搅拌下冷却至室温，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.1g），置50ml量瓶中，加1%冰醋酸的甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，置冰浴中冷却1小时，取出，迅速滤过，取续滤液作为供试品贮备液。精密量取供试品贮备液5ml，置100ml量瓶中，用1%冰醋酸的甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，精密量取1ul，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取阿司匹林对照品，精密称定，加1%冰醋酸的甲醇溶液振摇使溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。
16、气相色谱法[10]
原理：利用要分离的各组分在流动相和固定相两相间的分配差异，当两相作相对运动时，这些组分在两相间的分配反复进行，可以分离出组分，从而进行含量测定。
色谱条件：色谱柱： 3％SE一3O+3% Carbonwax20M，Chromosorb WAWDMCS60~80目，不锈钢桂长2m ，内径3 mm。气体流速及温度：载气：氨气流速30ml/min，氢气流速65ml ／min ，空气流速425ml／min，柱温230℃，检测器温度240℃，进样器温度280℃， 1ul 进样器。
含量测定：准确称取阿斯匹林0．2g，于50ml烧杯中，加少量氮仿：乙醇(1：1)溶剂移至100ml容量瓶中。稀释至射度，摇匀。以上述色谱条件进样3次，每次0．5gl 以烽面积法分别计算含量。适用于阿司匹林片、阿司匹林肠溶片等。
17、大口毛细管气相色谱法[26]
【色谱条件】色谱柱：HP-1(5m×0．53mm×2．65μm)石英毛细管柱；
汽化室温度：230℃；
检测器温度：260℃；
柱温采取程序升温：起始180℃( 1 min)
载气(高纯N2)流速：1．0mL/min，分流比1：10；
空气流速：350mL/min，氢气流速：35mL/min，
【标准溶液配制】取阿司匹林适量，加冰醋酸2mL，然后用氯仿/乙醇（体积1：1，简称混合溶剂）配成浓度分别为40mg/L、20 mg/L、8 mg/L、5 mg/L标准溶液。
【内标物溶液配制】移取适量正十六烷置于50mL的容量瓶中，用混合溶剂定容至刻度，配成20mg/L内标溶液。
【样品处理】称取一定量药分（约相当于阿司匹林226.8mg）置25mL容量瓶中，加2mL 乙酸和适量混合溶剂溶解，超声振荡15min，并用混合溶剂定容至刻度。待药物完全溶解后过滤，弃去10mL前滤液，取10mL中间滤液用混合溶剂稀释至所需浓度。取1mL一定浓度中间滤液，加5mL内标溶液用混合溶剂定容至10mL，摇匀。
【测定】精密吸取对照品溶液和供试品溶液各1μL，分别注入液相色谱中，记录峰面积，计算供试品溶液的含量。230℃(2 min)；
18、胶束薄层色谱法[25]
传统的薄层色谱法采用有机溶剂作为展开剂，一般可以得到很好的分离效果，但是有机溶剂有毒、易燃、易挥发，尤其采用混合溶剂作为展开剂时，由于展开剂各组成挥发性的差异，实验结果重复性差。胶束色谱因用含量高于临界胶束浓度的表面活性剂作流动相，可以克服上述缺点，并有较好的分离选择性。
【方法】在聚酰胺薄膜上，以2% SDS：乙腈：PH8 NaAc-Na2HPO4·12H2O（3：1：1 ）为展开剂，测定波长273nm，单波长反射法锯齿扫描。
【标准溶液的配制】精密称取对照品阿司匹林约0.220g，置25mL量瓶中，分别加入内标物间二苯酚约0.150g，用CHCl3-MeOH（1：1）溶解，并稀释至刻度，摇匀。
【样品溶液的配制】精密称取粉末适量，置50mL量瓶中，加入10mLCHCl3-MeOH （1：1）溶解，超声10 min，静置10min。将上清液滤纸25mL量瓶中（瓶中预先加入内标物间苯二酚约0.150g，精密称定），用溶剂洗涤滤渣，并补充至刻度，摇匀。
19、非水毛细管电泳法[27]
毛细管电泳分离通常是在水溶液中完成，要求被分析物有一定的亲水性。水溶液中溶解度很小的被分析物通常在毛细管壁上的吸附非常明显。与水介质系统分离相比，非水毛细管电泳法（NACE）具有更高的分离效率和分析灵敏度，能增加疏水性样品的溶解度，减少疏
水性分析物对毛细管壁的吸附以及减少毛细管中的焦耳热等优点。而水杨酸类药物均溶于水，它们易吸附在毛细管壁上，导致峰形严重拖尾，使柱效和分离度降低。
NACE中有机溶剂的选择，需要考虑挥发性引起的毒性和实验数据的重现性以及介电常数、粘度等多种因素的综合影响，其中溶剂挥发性是NACE中有机溶剂选择的重要指标之一。韦寿莲、莫金垣建立了谁和非水毛细管电泳法-电导法分离检测水杨酸类药物。
【仪器与试剂】
仪器：毛细管电导检测系统为中山大学分析组自组装，包括CZE30PN10／MCNZ2型高压电源(美国HighVoltageElectronicsCorp．)，石英毛细管柱(55cm×50μm，河北永年光导纤维厂)，
DDS-11A型电导率仪(上海第二分析仪器厂，经改装)，毛细管电泳数据工作站(CES98中山大学化学系)，毛细管电泳仪装置。pHS一3C精密酸度计(上海电光器件厂)。
试剂：三羟甲基氨基甲烷(Tris，分析纯，上海试剂三厂)；硼酸(H3BO3，分析纯，广州化学试剂厂)；水杨酸(sA)、乙酰水杨酸(ASA)(广州药品检验所)，磺基水杨酸(SSA，分析纯，上海试剂一厂)；阿斯匹林肠溶片(批号：010801；010101；010501；50mg／片，桂林制药厂)；其余试剂均为分析纯，水为二次重蒸水。
分别制备0．1mol·LTris和HBO贮备液，各取适量以水或乙醇为溶剂制备不同酸度不同浓度的运行缓冲液。
SA，ASA和SSA均用运行缓冲液配成500mg/L的贮备液，其他不同浓度的对照溶液用缓冲液稀释得到。
【实验方法】毛细管使用前依次用0.1mo1/LNaOH溶液、蒸馏水和缓冲溶液各冲洗约5min。检测电极用超声波进行冲洗，更换缓冲溶液或每进样2次后按上述步骤清洗毛细管和电极。用重力进样方式，进样高度差为20cm，时间为10s，操作电压24kV。电导率仪的输出信号经数据工作站采集到微机中进行实时数据处理、图形显示和数据文件存储。实验在恒温(25℃)、恒湿(相对湿度65％)条件下进行。
【条件选择】
（1）水介质分离条件：选择PH8.0的10mmol/L Tris-H3BO3为运行缓冲液,以24kV作为分离电压，用虹吸进样（高度差20cm），进样时间10s。
（2）非水介质分离条件：选用乙醇作为有机溶剂，仍用分离电压24kV，进样时间10S，运行缓冲液为10mmol/L Tris-H3BO3。
20、反向高效毛细管电泳法[13]
①原理：阿司匹林水解后带电荷，能通过电泳计算其含量。
②方法：以十六烷基三甲基溴化铵为电渗流改向剂, 建立了适合乙酰水杨酸制剂优化分离与定量分析的反向高效毛细管电泳法。
电泳分离条件: 熔融石英毛细管40 cm×50 Lm, uncoat ed( 河北永年) , 缓冲液组成为0. 05mol/ L 磷酸盐溶液( pH 5. 0) , 含0. 5 m mol/ L 电渗流改向剂和5. 0 mmol/ L B-环糊精, 运行电压11 kV( - ) →( + ) , 柱上检测UV 210 nm, 0. 02 aufs。以磺基水杨酸为内标, 测得乙酰水杨酸浓度在0. 05～0. 25 m g/ ml 范围内与样品峰面积比的线性关系良好, 相关系数r= 0. 9994, 平均回收率为97. 22%, 日内RSD 低于0. 96%, 日间RSD 低于2. 6%。
21、动力学光度法测定痕量乙酰水杨酸[17]
原理：碘对Ce4+和As的氧化还原反应有明显的催化作用，乙酰水杨酸和碘容易发生取代反应，使碘的浓度降低，导致碘的催化作用减弱，由此建立动力学光度法测定痕量乙配水杨酸的新方法。
优选：直接滴定法，操作简单、快速，方法耐用性高，测定结果准确。
23、电极法[11]
原理：以三苄基锡辛酸酯为活性物质, 制备具有良好的电位响应性能和选择性能的PVC 膜水杨酸根离子敏感电极，该电极应用于阿司匹林制剂的含量测定。阿司匹林易水解得到水杨酸根离子, 且反应定量。因此, 通过对水杨酸根离子的测定即可得出样品中的阿司匹林含量。
①待测样品的处理
将适量阿司匹林片药品( 10 片) 研制成粉状，精密称取1～1. 5 g ，在0. 5 mol/ L NaOH 溶液25 ml 中加热回流1 h 后过滤，定容至250 ml。吸取10ml 滤液，用稀硫酸调至pH 5. 5，再用pH 5. 5的磷酸盐缓冲液定容至100 ml 作为待测液。
②测定方法：
使用该电极通过标准溶液法和样品加入法, 分别测定药品经前述处理后所得试样中的水杨酸根离子浓度, 通过换算得出药剂中阿司匹林的含量。
优点：与酸碱滴定相比，电极法测量除了具有更加简单、快速的特点外，对待测样品的要求较低，待测样品的颜色、浊度等对测试结果均不会产生明显的影响。该电极不仅适用于药物含量测定，还可以用于血、尿中水杨酸根离子的含量测定，对研究阿司匹林在生物体内的吸收、作用、代谢过程有较大的价值。可用于阿司匹林片、阿司匹林肠溶片、阿司匹林胶囊等各种剂型。
24、柱分配色谱-紫外分光光度法[12]
色谱柱的制备：于玻璃柱（20cm×2.5cm）下端塞入少量玻璃棉，装入硅藻土3g和新制碳酸氢钠液（1→12）2ml的混合填充剂。
对照品溶液的制备：取阿司匹林对照品约50mg，精密称定，置50ml量瓶中，加冰醋酸0.5mol，加三氯甲烷溶解并稀释至刻度，混匀。精密量取5ml，置100ml量瓶中，用冰醋酸三氯甲烷溶液（1→100）稀释至刻度，混匀。制成每1ml中约含50ug的溶液。
供试品溶液的制备：取本品20粒，精密称定，研细，混匀；取细粉适量（约相当于阿司匹林50mg），精密称定，置50ml量瓶中，加盐酸甲醇溶液（1→50）1ml，加三氯甲烷稀释至刻度，混匀。精密量取5ml，移至色谱柱填充剂上，用三氯甲烷5ml、25ml相继洗涤，弃去洗液，用冰醋酸三氯甲烷溶液（1→50）10ml洗涤后，再用冰醋酸三氯甲烷溶液（1→100）85ml洗脱，收集洗脱液于100ml量瓶中，并用冰醋酸三氯甲烷溶液（1→100）稀释至刻度，混匀。
测定法：用1cm吸收池，以三氯甲烷为空白，立即于最大吸收波长280nm处测定对照溶液和供
试品溶液的吸光度，用下式计算所取得胶囊内容物细粉中含阿司匹林（C
9H
8
O
4
）的量（mg）:
阿司匹林（mg）=C
R （A
X
×A
R
）
式中，C
R 为阿司匹林对照品溶液浓度（ug/ml）；A
X
和A
R
分别为供试品溶液和对照品溶液
的吸光度。适用于阿司匹林片、阿司匹林肠溶片等。
25、阻尼最小二乘法[18]
原理：CPA矩阵阻尼最小二乘算法(DLS)，确定P系数矩阵对引入阻尼因子d,从而降低了其病态程度或对误差的敏感程度,将此法用于多组分复方药物分析如复方阿司匹林片含量测定,操作简便,平均回收率99.6%-101.1%（0.51%-0.4%）。适用于复方阿司匹林片中三组分（含阿司匹林）的含量测定。
26、线性扫描伏安法测定阿司匹林[19]
以玻碳电极为指示电极, 用线性扫描伏安法测定水杨酸, 从而间接测定阿司匹林。
①原理：
在硫酸- 硫酸钾底液中,阿司匹林的水解产物水杨酸在玻碳电极上产生一灵敏的氧化峰, 峰
电位为1. 16 V; 在4. 0×10- 5mol/ L～8. 0×10- 3mol/ L 浓度范围内水杨酸与峰电流呈良好线性关系, 最低检测浓度为2. 0×10- 5 mol/ L。
②溶液的配制：
0. 1 mol/ L NaOH 溶液: 称取4g NaOH 于100 ml烧杯,用水溶解并转移到1 000 ml容量瓶中, 用水定容。
0.01mol/ L 水杨酸标准溶液: 称取0. 138 2 g分析纯水杨酸, 用0. 1 mol/ L NaOH 溶液溶解并定容到100ml, 放置阴凉处保存。
5 mol/ L硫酸溶液: 于720 ml水中徐徐加入280 ml浓硫酸, 同时用玻璃棒搅拌。
0. 5 mol/ L 硫酸钾溶液: 称取8. 713 g 硫酸钾于100 ml烧杯中, 用水溶解并转移到100 ml 容量瓶中, 用水定容。
所用水均为去离子水.
③工作曲线制作：
按选定实验条件对不同浓度水杨酸标准溶液进行线性扫描伏安测定, 结果表明水杨酸在4. 0×10- 5mol/L～8. 0×10- 3mol/ L 浓度范围内与峰电流呈良好线性关系, 最低检测浓度为2. 0×10- 5mol/ L. 工作曲线回归方程为I p= - 7. 336 2C- 4. 687 6, 相关系数R= 0. 9941.
③精密称取10 片阿司匹林药片, 均匀研细, 再从中准确称取相当于一片重量的样品, 用0. 1 mol/ L NaOH溶液溶解, 放置10 min, 再用0. 1 mol/ L NaOH 溶液定容至50 ml。从中移取1. 00 ml至25. 00 ml容量瓶, 加入5 mol/ L 硫酸2. 5 ml, 0. 5 mol/ L 硫酸钾溶液2. 5 ml, 用去离子水稀释至刻度, 摇匀, 按实验方法进行测定, 由工作曲线计算样品中阿司匹林的含量C 样。
④计算公式：
标示量（%）=( C样×D×W（平均）) /（W×标示量）×100%
（D为稀释倍数；W（平均）为样品的平均片重（g）；W为样品片粉的取样量（g）
27、百分吸收系数法
①供试品：
精密称取阿司匹林注射液适量，置100ml量瓶，用乙醇定容。精密量取2ml置100ml量瓶，用乙醇定容，即得。
②含量测定：
在276nm下测定A
③计算公式：
（A= E1%cm×C×L）
C= A / E1%cm
样品% = A / E1%cm ×F/W
（F = 稀释倍数和浓度换算因子W = 取样量）
参考文献：
[1] 李琳丽，詹先成，何宁等.反相高效液相色谱法测定降解过程中阿司匹林的含量[J].药物分析杂志，2007，27（04）：603-606.
[2] 孟哲, 张冬亭, 王力川. 返滴定阿司匹林片剂中乙酰水杨酸含量的实验改进[J]. 邢台学院学报，2006，21（4）：110-111
[3]梅文君，陈晓文，顾方.阿司匹林的质量检测手段和含量测定方法[J]. 上海医药，2011，32（9）：453-454
[4] 盖柯，郑阿利，荔瑞琴，等. 紫外分光光度法测定小剂量阿司匹林肠溶片的含量[J].
中国药师2006，9（7）：643-644
[5] 陈兴荣，董光平，赖林. 分光光度法测定阿司匹林肠溶片的含量[J].数理医药学杂志，2010，23（4）：478-479
[6] 池秀珍. 双波长紫外分光光度法测定阿司匹林肠溶片含量[J]. 海峡药学,2002,14(1)：27-28
[7] 康志健,哈永红,宋英姬.荧光光度法测定小剂量阿司匹林片的含量[J]. 药物分析杂志，1998，18（增刊）：106-107
[8] 张宏祥，刘燕.差示分光光度法测定阿司匹林肠溶片的含量[J]. 安徽医药,2010,14(8):901-902
[9] 侯巍，高金波，丁立新，等．小儿退热灵片中两组分的紫外褶合光谱测定[J]．中国医药工业杂志，2004，35(3)：162—163．
[10] 淳于家龙，张欲非.气相色谱法测定复方阿斯匹林主要成分的含量[J].佳木斯医学院学报，1989，12（4）：344-345
[11] 刘冬，陈文灿，俞汝勤. 阿司匹林制剂的电极法测定［J］．中国医药工业杂志，1997，28(11) ：512.
[12] 杭太俊.药物分析.2011（7）：215-216
[13] 林梅，范国荣，冯敏，等. 反向高效毛细管电泳法测定乙酰水杨酸制剂含量[J]. 中国药科大学学报，1998，29（2）：121-122
[14] 乔梁，赵环环．应用近红外漫反射技术测定精氨酸阿司匹林的含量[J]．药物分析杂志，1998，l8(5)：297～298
[15] 中华人民共和国药典，2010
[16]杭太俊.药物分析.第七版.北京:人民卫生出版社,2011
[17] 杨军，动力学光度法测定痕量乙酰水杨酸，新乡师范高等专科学校学报，2001，15（2）：77
[18] 邱细敏 . 蔡美芳. 肖锋.王明科. 阻尼最小二乘法求算复方阿司匹林片中三组分的含量西北药学杂志2001, 16(3)
[19] 蔡卓黄富嵘周文丽赵静.线性扫描伏安法测定阿司匹林《山西大学学报(自然科学版)》 2008年02期
[20] 魏永锋 . 李小花 . 马冬梅同步扫描荧光光谱法同时测定阿司匹林和水杨酸. 光谱学与光谱分析2005, 25(4)
[21]高革，王福慧.比色法测定阿司匹林锌中阿司匹林的含量[J].现代应用药学，1997，2（14）：39-40
[22]孙增先，张骞峰，周金玉.双波长比值光谱法测定复方乙酰水杨酸片中三组分含量[J].光谱学与光谱分析，2004，7（24）：883-886
[24]朱铿，迟锡增.萃取-火焰原子吸收光谱法测定阿斯匹林[J].北京师范大学学报（自然科学版），1993，4（29）：517-520
[25]赵怀氰，王学亚，杨丽等.胶束薄层色谱法同时测定APC中3组分含量[J].沈阳药科大学学报，5（18）：338-340
[26]姚如新，许庆琴，杜黎明.大口径毛细管气相色谱法直接测定复方阿司匹林制剂[J].分析科学学报，2007，3（23）：295-298
[27]韦寿莲，莫金垣.水和非水毛细管电泳-电导检测法分离测定水杨酸类药物[J].药学学报，2003，38（3）：207-210
阿司匹林含量测定 摘要：阿司匹林是一种常见的非甾体解热镇痛药，现在也用于心血管疾病的治疗，由于其历史悠久，所以至今已经有许多对于阿司匹林含量的测定，例如酸碱滴定法，紫外分光光度法，高效液相色谱法等。2010版中中国药典中主要记载的方法主要有直接滴定法和高效液相色谱法。 关键词：阿司匹林，含量，体内，体外 正文： 一. 阿司匹林原料药的含量测定： 1. 体外： 1.1 直接滴定法： 取阿司匹林原料药约0.4g，精密称定，加入中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml振摇，完全溶解后，加3滴酚酞指示剂，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）直接滴定。氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）的滴定度T为18.02mg/ml，即每1ml 的氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于18.02mg的C9H8O4。滴定至溶液从无色变成淡粉红色即为滴定终点。记录滴定液的消耗量V。 含量（%）=（V*T/W）*100% = （V*18.02/（0.4*1000）)*100% 1.2 水解后剩余滴定法：[1] 取阿司匹林原料药约1.5g，精密称定，加氢氧化钠滴定液（0.5mol/L）50.0ml 混合，缓缓煮沸10分钟，放冷，加酚酞指示剂，用硫酸滴定液（0.25mol/L）滴定，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的氢氧化钠滴定液（0.5mol/L）相当于45.04mg的C9H8O4。 含量（%）=（V0—V）*F*T/W*100% =（V0—V）*F*18.02/（0.4*1000）*100% （V0为空白实验消耗的硫酸滴定液的体积（ml）；V为样品测定时消耗硫酸滴定液的体积（ml）；W为阿司匹林样品的取样量（g）；F为硫酸滴定液的浓度的校正因素；T为氢氧化钠滴定液的滴定度。） 1.3 HPLC法测定阿司匹林原料药含量 以C18柱（150mm*4.6mm，5μm）为色谱柱，0.2%庚烷磺酸钠—乙腈（85：15）（用冰醋酸调PH至 3.4）为流动相；检测波长为280nm；柱温30℃；流速；
实验三阿司匹林的 含 量测定-两步滴定法
阿司匹林片的含量测定 一.实验目的 1. 掌握酸碱滴定法测定药物含量的基本方法及有关计算; 2. 熟悉两步滴定法测定阿司匹林片的原理 3. 了解片剂分析的基本操作技术。 二.实验原理 《中国药典》现行版采用两步酸碱滴定翻测定阿司匹林片的含量。 程式如下: INciOHM SO. -^Xa SO +H0 二、实验药品及仪器 实验药品：阿司匹林片10片，中性乙醇，酚酞指示液（取酚酞 100mL使溶解），氢氧化钠滴定液，硫酸滴定液； 具体反应方 (jtOHJCOOH C OOH ^H a COON* + 3NaOH —> 3H-O^- 用返滴定法测定时; + NaOH 0.2g，加乙醇 C7I.COOII+ NMH t CH. COONa+ IL O nr K i3OCOCHs
实验仪器：移液管，研钵，分析天平、锥形瓶、称量纸、玻璃棒、酸式滴定 管、碱式滴定管，水浴锅。 四?试验内容及步骤 1. 取阿司匹林片10片，精密称定，研细，精密称取适量0.3g-0.4g,置锥形瓶中； 2. 加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20mL，振摇，使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）至溶液显粉红色； 3. 再精密加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）40mL，置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定至红色消失为终点。 4. 并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml氢氧化钠滴定液（O.1mol/L）相当于18.02mg 的C9H8O4。 五?操作注意事项 1.加中性乙醇20mL振摇使阿司匹林溶解，由于片剂中赋形剂的存在，溶液仍显白色混浊。 2.第一次中和应迅速，但不可剧烈摇荡，否则引起酯键水解， 影响测定结果。近终点时，应轻轻震荡中和至溶液呈粉红色并持续15秒不退色为准。长时间震荡由于空气中二氧化碳的影响，红色又消失。 3.实验温度应保持在98~100摄氏度。水浴温度不够或加热时间短均可因水解反应不完全而使含量偏低。 六?实验数据记录及含量的计算
阿司匹林含量测定 摘要:阿司匹林是一种常见的非甾体解热镇痛药，现在也用于心血管疾病的治疗，由于其历史悠久，所以至今已经有许多对于阿司匹林含量的测定，例如酸碱滴定法，紫外分光光度法，高效液相色谱法等。2010版中中国药典中主要记载的方法主要有直接滴定法和高效液相色谱法。 关键词:阿司匹林，含量，体内，体外 正文: 一. 阿司匹林原料药的含量测定: 1. 体外: 1.1 直接滴定法: 取阿司匹林原料药约0.4g，精密称定，加入中性乙醇(对酚酞指示液显中性) 酚酞指示剂，用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)20ml振摇，完全溶解后，加3滴直接滴定。氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)的滴定度T为18.02mg/ml，即每1ml的氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于18.02mg的C9H8O4。滴定至溶液从无色变成淡粉红色即为滴定终点。记录滴定液的消耗量V。 含量(%)=(V*T/W)*100% = (V*18.02/(0.4*1000))*100% 1.2 水解后剩余滴定法:[1] 取阿司匹林原料药约1.5g，精密称定，加氢氧化钠滴定液(0.5mol/L)50.0ml 混合，缓缓煮沸10分钟，放冷，加酚酞指示剂，用硫酸滴定液(0.25mol/L)滴定，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的氢氧化钠滴定液(0.5mol/L)相当于 45.04mg的C9H8O4。 含量(%)=(V0—V)*F*T/W*100%
=(V0—V)*F*18.02/(0.4*1000)*100% (V0为空白实验消耗的硫酸滴定液的体积(ml);V为样品测定时消耗硫酸滴定液的体积(ml);W为阿司匹林样品的取样量(g);F 为硫酸滴定液的浓度的校正因素;T为氢氧化钠滴定液的滴定度。) 1.3 HPLC法测定阿司匹林原料药含量 以C18柱(150mm*4.6mm，5μm)为色谱柱，0.2%庚烷磺酸钠—乙腈(85:15)(用冰醋酸调PH至3.4)为流动相;检测波长为280nm;柱温30?;流速; 1.0ml/min ;理论塔板数按阿司匹林峰计算应不低于3000。 取阿司匹林样品30mg精密称定，置于50ml的容量瓶中，用稀释液(乙腈——甲酸(99:1))溶解超声并稀释至刻度，混合均匀。精密量取10μl，注入液相色谱仪中，记录色谱图;另称取阿司匹林对照品约25mg，精密称定，置于50ml容量瓶中，用稀释液溶解并稀释至刻度，混合均匀。精密量取10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得: C=A*Co*D/Ao C为样品浓度(mg/ml);A和Ao分别为样品和对照品溶液的峰面积;D为稀释倍数(ml)。 二. 阿司匹林制剂的含量测定 1. 体内: 1.1 HPLC-MS/MS法[3] 色谱条件:色谱柱为C18柱(4.6mm*100mm，5μm);流动相0.05%甲酸的乙腈溶液-10mmol/L甲酸铵溶液(PH3.5)(40:60);流速1.5ml/min(分流比为1:9);柱温40?;进样量10μl。 质谱条件:扫描方式选择多反应监测(MRM)，离子化方式选择电喷雾(ESI) ASA(阿司匹林)、AS、4-ABS(内标物)的母/离子源;电离模式选择负离子;。 子离子对的质荷比(m/z)分别为;178.9?136.8,136.9?92.8和162.9?118.9. 标准品和样品的制备:取含氟化钠5mg/ml的空白人血浆，加入ASA标准溶
标准文档 2013-2014(2) 基础化学开放实验（有机化学） ——阿司匹林的合成及含量测定 姓名\学号: 专业班级: 指导老师：赵超王凤艳
目录 摘要 (3) 关键词 (3) 第一章前言（概述） 1.1理化性质 (4) 1.2水杨酸的性质及应用 (4) 1.3阿司匹林的功效 (4) 第二章实验部分及数据处理 2.1阿司匹林的合成 2.1.1仪器及试剂 (4) 2.1.2实验步骤 (5) 2.1.3实验结果 (5) 2.2阿司匹林的含量测定 2.2.1实验仪器和试剂 (5) 2.2.2实验步骤 (5) 2.2.3实验结果及数据处理 (5)
2,3阿司匹林的熔点测定 2.3.1实验仪器和试剂 (6) 2.3.2实验步骤 (6) 2.3.3实验结果及数据处理 (6) 第三章结果及讨论（含结论） (6) 参考文献 (7) 摘要： 阿司匹林又称乙酰水杨酸，是由水杨酸和乙酸酐酯化反应合成的白色晶体。这反应涉及到水杨酸的酚基在浓硫酸为催化剂条件下的乙酰化。通过实验学习制备阿司匹林的原理和方法，进而了解乙酰水杨酸的应用价值。采用酸碱直接滴定法测定实验合成的阿司匹林的纯度及产率，并且学会用熔点法鉴定阿司匹林。 关键词：阿司匹林重结晶浓硫酸直接滴定法熔点鉴定
第一章前言 阿司匹林，化学名称为乙酰水杨酸，英文名称: 2-ethanoylhydroxybenzoic acid，其中文俗名有：醋柳酸、巴米尔、力爽、塞宁、东青等。是一种历史悠久的解热镇痛药，诞生于1899年3月6日。用于治感冒、发热、头痛、牙痛、关节痛、风湿病，还能抑制血小板聚集，用于预防和治疗缺血性心脏病、心绞痛、心肺梗塞、脑血栓形成，也可提高植物的出芽率，应用于血管形成术及旁路移植术也有效。 1.1理化性质 阿司匹林色、态、味：白色结晶性粉末,无臭,味先微苦后转辛。 阿司匹林分子式：C 7H 6 O 3 结构式：C 6H 4 OHCOOH 分子量 138.12 相对密度：1.44， 熔沸点：熔点157-159℃,在光照下逐渐京变色,沸点约211℃/2.67kPa易溶于乙醇，溶于氯仿和乙醚，微溶于水，性质不稳定，在潮湿空气中可缓缓分解成水杨酸和醋酸而略带酸臭味，故贮藏时应置于密闭，干燥处，以防分解。 1.2水杨酸的性质及应用 水杨酸是重要的精细化工原料。在医药工业中,水杨酸本身就是一种用途极广的消毒防腐剂。作为医药中间体。水杨酸是一种白色的结晶粉状物，存在于自然界的柳树皮、白珠树叶及甜桦树中。Salicylic取自拉丁文Salix，即柳树的拉丁文植物名。水杨酸具有优秀的去角质、清理毛孔能力，安全性高，且对皮肤的刺激效较果酸更低，因而成为保养品新宠儿。水杨酸可以淡化色素斑、缩小毛孔、去除细小皱纹及改善日晒引起的老化等效果 1.3阿司匹林的功效 阿司匹林具有解热镇痛，抗炎，抗血栓形成这些主要功效。所以它适合用于疼痛，而伴有炎症的疼痛效果又会更好，例如头痛和短暂的骨骼肌肉疼痛或者是牙疼关节疼之类的。还有就是对提问过高或者持续性发热有减低体温的作用。同时它还可以使急性风湿热患者短时间（两天内）内退热，关节红肿疼痛减缓。还用于预防血栓的形成。
实验十三阿司匹林含量的测定—中与滴定法 一. 实验目的 学习药品乙酰水杨酸含量的测定方法,了解该药的纯品(即原料药)与片剂分析方法的差异。 二. 实验原理 乙酰水杨酸(阿司匹林)就是最常用的药物之一。它就是有机弱酸(pKa=3、0),结构为 摩尔质量为180、16g·mol-1,微溶于水,易溶于乙醇。在NaOH或Na2CO3等强碱性溶液中溶解并分解为水杨酸(即邻羟基苯甲酸)与乙酸盐: 由于它的pKa较小,可以作为一元酸用NaOH溶液直接滴定,以酚酞为指示剂。为了防止乙酰基水解,应在10 C以下的中性冷乙醇介质中进行滴定,滴定反应为: 直接滴定法适用于乙酰水杨酸纯品的测定,而药片中一般都混有淀粉等不溶物,在冷乙醇中不易溶解完全,不宜直接滴定,可以利用上述水解反应,采用反滴定法进行测定。药片研磨成粉状后加入过量的NaOH标准溶液,加热一定时间使乙酰基水解完全,再用HCI标准溶液回滴过量的NaOH,以酚酞的粉红色刚刚消失为终点。并将滴定的结果用空白试验校正,根据滴定液使用量,计算阿司匹林的含量。 三.仪器与试剂 仪器:瓷研钵,碱式滴定管,酸式滴定管,移液管,容量瓶 试剂:阿司匹林药片,HCl溶液:0、1 mol·L-1,NaOH溶液:0、1 mol·L-1,无水乙醇,酚酞指示液(取酚酞0、2g,加乙醇100mL使溶解) 四、实验步骤 1、取供试品10片,精密称定,研细,精密称取阿司匹林0、3～0、4g,置锥形瓶中; 2、加中性乙醇(对酚酞指示液显中性)20mL,振摇使阿司匹林完全溶解后,加酚酞指示液3滴,滴加氢氧化钠滴定液(0、1mol/L)至溶液显粉红色,记录下所用氢氧化钠的体积数V1 、
应用化学实验二准备实验卡
实验 容 1．乙酰水酸的合成 在干燥的100 mL锥形瓶中加入3.2 g干燥的水酸，8mL新蒸的乙酸酐和5滴浓H2SO4，旋摇锥形瓶使水酸全部溶解后，在水浴上加热5～10min，控制水浴温度在85～90o C，冷至室温， 即有乙酰水酸结晶析出。如不结晶，可用玻璃棒磨擦瓶壁并将反应物置于冰水中冷却使结晶 产生。加入50mL H2O，混合物继续在冰水中冷却使结晶完全。减压过滤，用滤液反复淋洗锥 形瓶，直至所有晶体被收集到布氏漏斗，用少量冷H2O洗涤结晶，继续抽气将溶剂尽量抽干， 称量，粗产物约2.8g。 将粗产物转移到150mL烧杯中，在搅拌下加入25mL NaHCO3饱和溶液，加完后继续搅拌几分钟，直至无CO2气泡产生。抽滤，副产物聚合物应被滤出，用5～10 mL H2O冲洗漏斗， 合并滤液，倒入预先盛有5 mL浓HCl和10mL H2O配成溶液的烧杯中，搅拌均匀，即有乙酰 水酸沉淀析出。将烧杯置于冰水浴中冷却，使结晶完全，抽滤，再用少量冷H2O洗涤2次， 压干，将结晶移到表面皿上，取少量晶体放入100℃烘箱中干燥30分钟。后取几粒结晶加入 盛有5 mL H2O的试管中，加入1～2滴1％FeCl3溶液，观察有无颜色反应。若出现颜色反应， 须再进行精制。 2．产物中乙酰水酸含量的测定紫外光谱法 产物用稀NaOH溶液溶解，乙酰水酸水解生成水酸二钠。该溶液在296.5 nm左右有个吸收峰，测定稀释成一定浓度乙酰水酸的NaOH水溶液的吸光度值，并用已知浓度的水酸的NaOH 水溶液作一条标准曲线，则可从标准曲线上求出相当于乙酰水酸的含量。根据两者的相对分 子质量，即可求出产物中乙酰水酸的浓度 板书 设计 一、实验原理 COOH OH +(CH3CO)2O H2SO4 △ COOH OCCH3 O +CH3COOH 二、实验步骤及方法 （一）乙酰水酸的制备及鉴定 1.乙酰水酸的制备 2.粗产物纯化 3.乙酰水酸的精制及鉴定 （二）产物中乙酰水酸含量的测定 1.绘制标准溶液曲线 2.测量及计算乙酰水酸含量 三、实验观察与结果 四、思考题
实验三阿司匹林肠溶片的鉴别、检查与含量测定 一、目的要求 1．复习并掌握比色法检查阿司匹林片剂中游离水杨酸的实验原理。 2．复习并掌握两步滴定法测定阿司匹林片剂含量的实验原理。 3．掌握水杨酸类药物的鉴别、检查与含量测定的操作方法。 二、基本原理 （一）鉴别（三氯化铁反应） 阿司匹林为水杨酸酯类药物，加热水解后产生水杨酸，水杨酸及其盐在中性或弱酸性条件下（适宜pH为4.0~6.0），会与三氯化铁试液反应，生成紫堇色的铁配位化合物。 （二）检查——游离水杨酸 阿司匹林为水杨酸酯，不能直接与高铁盐作用，而其杂质游离水杨酸含酚羟基，可与高铁盐反应显紫堇色，因此，将适量阿司匹林供试品溶液与一定量水杨酸对照品溶液生成的色泽对比，即可控制阿司匹林中游离水杨酸的含量。（三）含量测定——两步滴定法 片剂中除了加入少量酒石酸或枸橼酸稳定剂外，制剂工艺过程中又可能有水解产物（水杨酸、醋酸）产生，因此不能采用直接滴定法，而采用先中和供试品共存的酸，再将阿司匹林在碱性条件下水解后测定的两步滴定法。 第一步为中和： COOH O O CH3+NaOH COONa O O CH3 +H2O 第二步为水解与测定 +NaOH COONa OH +CH3COONa COONa O O CH3 2NaOH + H2SO4 →Na2SO4 + 2H2O （剩余）
三、仪器及试药 电热恒温干燥箱，万分之一分析天平，托盘天平(精度0．01g)，称量瓶，称量纸，药匙，量筒(10ml、50m1、100m1)，电炉，研钵，烧杯(25m1)，胶头滴管，容量瓶(100 m1)，玻璃漏斗，滤纸，纳氏比色管(50m1)，锥形瓶(250m1)，酸滴定管，碱式滴定管，水浴锅，温度计，阿司匹林肠溶片，纯化水，乙醇(分析纯)，水杨酸(分析纯)，酒石酸(分析纯)，中性乙醇(分析纯)，三氯化铁(分析纯)，盐酸(分析纯)，硫酸铁铵(分析纯)，酚酞(分析纯)，氢氧化钠(分析纯)，邻苯二甲酸氢钾(基准试剂)，硫酸(分析纯)，无水碳酸钠(基准试剂)，甲基红(分析纯)，溴甲酚绿(分析纯) 四、实验内容与方法 （一）鉴别（三氯化铁反应） 取本品的细粉适量（约相当于阿司匹林0.1g），加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。 （二）检查——游离水杨酸 取本品5片，研细，用乙醇30ml分次研磨，并移入100ml容量瓶中，充分振摇，用水稀释至刻度，摇匀，立即滤过，精密量取滤液6ml，置50ml纳氏比色管中，用水稀释至50ml，立即加新制的稀硫酸铁铵溶液3ml，摇匀，30秒内如显色，与对照液（精密量取0.01%水杨酸溶液4.5ml，加乙醇3ml，0.05％酒石酸溶液1ml，用水稀释至50ml，再加上述新制的稀硫酸铁铵溶液3ml，摇匀）比较，不得更深。 （三）含量测定——两步滴定法 取本品30片，研细，用中性乙醇70ml分数次研磨，并移入100ml容量瓶中，充分振摇，再用水适量洗涤研钵数次，洗液合并于100ml容量瓶中，再用水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取滤液10ml(约相当于阿司匹林0．3g)，置锥形瓶中，加中性乙醇20mL，振摇，使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液(0.1 mol/L)至溶液显粉红色，再精密加氢氧化钠滴定液(0.1 mol/L)40mL。置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液(0.05 mol／L)滴定，并将滴定结果用空白实验校正。每l ml氢氧化钠滴定液(0.1 mol／L)相当于18.02mg的C9H804。
荧光光度法测定阿司匹林中乙酰水杨酸的含量 一、实验目的 1.掌握用荧光法测定药物中的乙酰水杨酸含量的方法。 2.掌握970CRT 型荧光分光光度计的操作方法。 3.加深对荧光光度法原理的理解。 二、实验原理 1.荧光光度法原理 （1）常温下，处于基态的分子吸收一定的紫外可见光的辐射能成为激发态分子，激发态分子通过无辐射跃迁至第一激发态的最低振动能级，再以辐射跃迁的形式回到基态，发出比吸收光波长长的光而产生荧光。在稀溶液中，当实验条件一定时，荧光强度I F 与物质的浓度c 成线性关系： 即Kc I F （这是荧光光谱法定量分析的理论依据）。 （2）荧光光谱 激发光谱：固定测量波长(选最大发射波长)，化合物发射的荧光强度与照射光波长的关系曲线。激发光谱曲线的最高处，处于激发态的分子最多，荧光强度最大。 荧 光强度 波长
发射光谱：固定激发光波长(选最大激发波长), 化合物发射的荧光强度与发射光波长关系曲线。 固定发射光波长进行激发光波长扫描，找出最大激发光波长，然后固定激发光波长进行荧光发射波长扫描，找出最大荧光发射波长。激发光波长和发射荧光波长的选择是本实验的关键。 2. 荧光光度法测定阿司匹林中乙酰水杨酸的含量 通常称为ASA 的乙酰水杨酸（阿司匹林）水解即生成水杨酸（SA ）（如下式）。而在阿司匹林中或多或少存在一些水杨酸，用醋酸—氯仿作为溶剂，然后用荧光法可以分别测定其含量，少许醋酸还可以增加二者的荧光强度（本次实验只测定阿司匹林中乙酰水杨酸的含量）。在1%的乙酸—氯仿中乙酰水杨酸的激发光谱和荧光光谱如图所示：（为了消除药片之间的差异，可以取几片一起研磨，然后取部分由代表性的样品进行分析） 三、仪器与试剂： 仪器：970CRT 型荧光分光光度计及附件；容量瓶：1000mL 2只，100 mL 2只，50mL 8只；l0mL 吸管2支；铁架台；研钵；称量瓶；玻璃棒；烧杯；定量滤纸；电子天平。 试剂：冰醋酸；氯仿；乙酰水杨酸；阿司匹林；丙酮。 四、实验步骤： 1. 接通电源，打开氙灯，再打开主机，然后打开计算机启动工作站并初始化仪器，预热30min 左右。 (CH 3CO)2O H 2O (ASA) (SA)
阿斯匹林含量的测定（方法比较实验） 一、关于开设比较两种实验方法的实验的说明 分析化学实验课是分析化学课程的重要组成部分，它与理论课教学密切配合，教给学生分析化学的基本理论、基本知识和基本实验技能。现有的分析化学实验在测定方法、实验原理等方面与理论课中各章对应的原理有很好的配合。但是如何将数据处理一章的有些内容与实验结合起来，加深学生对这部分内容的理解是实验教材中应该加以考虑的。但至今实验内容中基本是以测定样品中组分含量为目的的，能涉及到数据处理的很少。特别是数据的检验部分。为此，我们认为适当安排一些能进行数据检验的实验很有必要。这样通过分析实验学生既学习了实验原理和基本操作技能，又学会运用数据检验的方法，这种实验能拓宽分析化学实验的应用面，也能增强学生的分析化学理论和实验的必备素质。这里，我们选择的实验是“阿斯匹林（乙酰水杨酸）含量的测定方法的比较” 二、阿斯匹林含量的测定（方法比较实验） 阿斯匹林是一种常用药，因为它是一种有机弱酸（pKa=3.5），近年来多种实验教材都选它为酸碱滴定的测试对象。据我们所知可以用 一种直接滴定法和两种返滴定法进行测定。这些都是在实际中应用的方法，方法间是否有差异，学生可以通过实验加以比较。 1、实验原理 阿斯匹林是解热镇痛药，即乙酰水杨酸，它属于芳香酯类药物，由于分子结构中含有羧基，在溶液中解离出一个H+，故可作为一元酸（pKa=3.5），用NaOH 标液直接滴定测其含量，用酚酞为指示剂，其反应为： COOH OCOCH 3+ NaOH 10O C 以下COONa OCOCH 3+O H 2 由于阿斯匹林的乙酰基很易水解生成醋酸和水杨酸（pKa1=3.0，pKa2=13.45）， +COONa OCOCH 3+ O H 2COOH OH CH 3COOH 所以用NaOH 滴定时分析结果将偏高。但阿斯匹林微溶于水，易溶于乙醇，为防止乙酰基水解，直接滴定时需控制温度在10℃以下，在中性乙醇中用NaOH 标液滴定。 由于阿斯匹林中乙酰基在NaOH 或碳酸钠等碱性溶液中能够定量水解： COOH OCOCH 3 ++ COO- O-CH 3COO —+2H 2O 3OH — 所以也可以先中和羧酸的H +后，定量加入过量的NaOH 标液，加热使其水解，冷却后用标准 HCl 滴定剩余的NaOH ，通过测乙酰基的量测定阿斯匹林的量。 除此之外，也可以通过返滴定阿斯匹林的羧基和乙酰基的含量，此时阿斯匹林与NaOH 反应为1：2关系。即直接向试样中加过量NaOH 标液，加热反应完全，冷却后用标准盐酸滴定剩余的NaOH 。 以上3种方法均为测定阿斯匹林含量的常用方法。但有些文献[1]上认为直接滴定只适用 于纯乙酰水杨酸（晶体），而阿斯匹林片剂由于其中混有淀粉等不溶物，在冷乙醇中不易溶
分析化学实验报告：实验__ 实验日期________年____月____日 实验4-6 设计性实验 学院/专业/班级：实验序号： 姓名：教师评定：____________ 合作者： 【所选实验题目】 阿司匹林片剂中乙酰水杨酸含量的测定 【实验要求】 ①由学生自行选做上述的一个实验题目（但保持每个实验题目的选作人数基本相等），然后由学生根据本课程的理论及实验知识，查阅相关文献，独立设计实验方案，由教师审阅通过后进行实验，并完成实验报告； ②在实验设计时应遵循以下原则：（1）首先确定分析方法及滴定方式；（2）根据所测样品的大概含量（教师提供），自己确定如何称取试样；（3）要考虑到实验中干扰因素及排除方法；（4）试剂及指示剂尽量选择实验室提供的试剂；（5）在保证实验准确度要求的前提下，要尽量节约使用试剂及试样； ③在考虑上述几点后，与实验前完成预习报告，包括（1）分析方法及简单原理；（2）所需试剂；（3）具体实验步骤；（4）实验注意事项；（5）参考资料；（6）数据记录及处理的表格及相关计算公式； ④教师审阅通过后，学生自行完成实验及实验报告，并对自己设计的实验方案进行评价及问题讨论，如果实验中的实际做法与预习报告有差异，以加以说明或重新写过。 【分析方法及简单原理】 乙酰水杨酸（阿司匹林）是最常用的解热镇疼药之一，是有机弱酸（pKa=3.0），摩尔质量为180.16 g/mol，微溶于水，易溶于乙醇；干燥中稳定，遇潮水解。阿司匹林片剂在强碱性溶液中溶解并分解[乙酰水杨酸中的酯结构在碱性溶液中很容易水解为水杨酸（邻羟基苯甲酸）和乙酸盐]， 水杨酸（邻羟基苯甲酸）易升华，随水蒸气一同挥发。水杨酸的酸性较苯甲酸强，与 Na2CO3 或 NaHCO3 中和去羧基上的氢，与 NaOH 中和去羟基上的氢。由于药片中一般都添加一定量的赋形剂如硬脂酸镁、淀粉等不溶物（不溶于乙醇），不宜直接滴定。因此其含量的测定经常采用返滴定法（误差：无事先中和去游离酸，乙酰水杨酸片剂中由于含有少量稳定剂酒石酸和枸橼酸，制剂工艺过程中又可能水解产生水杨酸和醋酸，）。将药片研磨成粉状后加入过量的 NaOH 标准溶液，加热一段时间使乙酰基水解完全。再用 HCl 标准溶液回滴过量的NaOH（碱液在受热是易吸收CO2，用酸回滴定时会影响测定结果，故需要在同样条件下进行空白校正）滴定至溶液由红色变为接近无色（或恰褪至无色）即为终点。此时，PH=7-8。
实验四阿司匹林片的分析 【实验目的】 ⒈了解溶出度测定的方法与原理； ⒉熟悉片剂分析的项目与方法; ⒊掌握阿司匹林鉴定试验的原理及与药物结构的关系; ⒋掌握本实验中药物特殊杂质的来源和检查原理； ⒌掌握两步滴定法测定阿司匹林片含量的原理与操作，及容量分析法测定片剂含量的计算 方法。 【实验原理】 1.药物 O H O O O CH 3 本品为白色片；遇湿气易变质。本品含阿司匹林应为标示量的95.0%~105.0%。 2.原理： ⑴鉴别 ①三氯化铁反应：水杨酸及其盐在中性或弱酸性条件下，与三氯化铁试液反应，生成紫 堇色配位化合物。阿司匹林加热水解生成水杨酸，可用三氯化铁反应鉴别。 ②水解反应：阿司匹林与碳酸钠试液加热，酯健水解，得水杨酸钠和醋酸钠，加过量稀 硫酸酸化后，生成白色水杨酸沉淀，并发生醋酸的臭气，因此可用水解反应鉴别。 ⑵检查 阿司匹林中游离水杨酸的检查 a.杂质来源游离水杨酸为阿司匹林生产中未反应的原料或贮存过程中的水解产物。 b.检查方法阿司匹林无游离酚羟基，不与高铁盐溶液作用，而水杨酸则可与之反应生 成紫堇色，此种方法称之对照法，极为灵敏，可检出1ug的游离水杨酸。 ⑵含量测定 阿司匹林分子结构中有酯健，易水解生成水杨酸和醋酸，片剂中为防止酯健水解加入少量酒石酸或枸橼酸做稳定剂，因此在片剂中有酸性杂质，含量测定时为消除酸性杂质干扰，采用两步滴定法。 第一步中和，消除酸性杂质〔酸性附加剂和降解产物〕的干扰
COOH OCOCH 3 NaOH COONa OCOCH 3 H 2 O 第二步水解后剩余滴定 COONa OCOCH3 NaOH COONa OH CH COONa 3 2NaOH H SO 2 4 Na SO 242H O 2 【实验仪器与试剂】 ㈠仪器 试管，纳氏比色管，溶出度测定仪，紫外-可见分光光度计，10~25ml注射器，0.8um微孔 滤膜，酸式滴定管，容量瓶，移液管，漏斗。
阿司匹林含量测定的综述 【结构】 【性状】本品为白色结晶或结晶性粉末；无臭或微带醋酸臭，味微酸；遇湿气即缓缓水解。本品在乙醇中易溶，在三氯甲烷或乙醚中溶解，在水或无水乙醚中微溶；在氢氧化钠溶液或碳酸钠溶液中溶解，但同时分解。 【鉴别】(1)取本品约0.1g，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。 (2)取本品约0.5g，加碳酸钠试液10ml，煮沸2分钟后，放冷，加过量的稀硫酸，即析出白色沉淀，并发生醋酸的臭气。 (3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集209图）一致。 【检查】（1）溶液的澄清度取本品0.50g，加温热至约45℃的碳酸钠试液10ml溶解后，溶液应澄清。 （2）游离水杨酸取本品0.10g，加乙醇1ml溶解后，加冷水适量使成50ml，立即加新制的稀硫酸铁铵溶液〔取盐酸溶液(9→100)1ml，加硫酸铁铵指示液2ml后，再加水适量使成100ml〕1ml，摇匀；30秒钟内如显色，与对照液（精密称取水杨酸0.1g，加水溶解后，加冰醋酸1ml，摇匀，再加水使成1000ml，摇匀，精密量取1ml，加乙醇1ml、水48ml与上述新制的稀硫酸铁铵溶液1ml，摇匀）比较，不得更深(0.1％)。 （3）易炭化物取本品0.5g，依法检查（附录ⅧK），与对照液（取比色用氯化钴液0.25ml、比色用重铬酸钾液0.25ml、比色用硫酸铜液0.40ml，加水使成5ml）比较，不得更深。 （4）炽灼残渣不得过0.1％（附录ⅧN）。
（5）重金属取本品1.0g，加乙醇23ml溶解后，加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml，依法检查（附录ⅧH第一法），含重金属不得过百万分之十。 【含量测定】 1.直接碱滴定法 取本品约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml 溶解后，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml 氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于18.02mg的C9H8O4。 参考文献：2005年版《中国药典》二部－283 阿司匹林肠溶胶囊－阿司匹林－高效液相色谱法 应用范围：本方法采用高效液相色谱法测定阿司匹林肠溶胶囊中阿司匹林的含量。 方法原理：供试品经1%冰醋酸无水甲醇溶液溶解并稀释，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长280nm处检测阿司匹林的峰面积，计算出其含量。 试剂：1. 1%冰醋酸溶液2. 甲醇3. 1%冰醋酸无水甲醇溶液仪器设备：1. 仪器1.1 高效液相色谱仪1.2 色谱柱十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按阿司匹林峰计算应不低于1500。1.3 紫外吸收检测器 2.色谱条件2.1 流动相：1%冰醋酸溶液：甲醇=50 ：50 2.2 检测波长：280nm 2.3 柱温：室温 试样制备：1. 对照品溶液的制备精密称取阿司匹林对照品适量，用1%冰醋酸无水甲醇溶液溶解并定量稀释制成每1mL中约含50µg的溶液，即为对照品溶液。
实验四 阿司匹林片的含量测定 一、实验目的 1、掌握酸碱滴定法测定药物含量的方法及有关计算 2、熟悉两步滴定法测定阿司匹林片的原理 3、了解片剂分析的基本操作技术 二、实验原理 利用乙酰水杨酸的羟基酯结构在碱性溶液中易水解的性质，加入一定量过量的氢氧化钠溶液，加热使酯水解，剩余碱液以标准酸液回滴。 为消除阿司匹林水解产物水杨酸，醋酸及稳定剂枸椽酸、酒石酸对含量测定的影响故采用两步滴定法。 第一次滴定：CH 3COOH ＋NaOH →CH 3COONa ＋H 2O COOH OH + NaOH COONa OH + H 2O COOH OCOCH 3 + NaOH COONa OCOCH 3 + H 2O C CH 2COOH CH 2COOH HO COOH +3NaOH C CH 2COONa CH 2COONa HO COONa +3H 2 O 第二次滴定： COONa OCOCH 3 +N aOH COONa OH + C H 3C OON a 标示量（%）()%10010 3 0??????-= - -S m W F T V V 本品含乙酰水杨酸（C 9H 8O 4）应为标示量的95.0～105.0%。 三、实验仪器和试剂
1. 仪器 容量瓶、移液管、锥形瓶、碱式滴定管 2. 试剂 0.1mol·L-1NaOH标准溶液、0.2%酚酞、阿司匹林片（25mg） 四、实验内容 取本品10（15片）片，精密称定，研细，精密称出适量（约相当于乙酰水杨酸0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml，振摇，使乙酰水杨酸溶解，加酚酞水溶液3滴，滴加氢氧化钠液（0.1mol/L）至溶液显粉红色，再精密加入氢氧化钠液（0.1mol/L）40ml，置水浴上加热15分钟并时时震摇，迅速放冷至室温，用硫酸液（0.05mol/L）滴定至红色消失，并将滴定结果用空白实验校正，即得。每1ml的氢氧化钠液（0.1mol/L）相当于18.02mg的C9H8O4。 五、实验结果与讨论 根据计算出的阿司匹林的标示量的数值，与规定的95.0～105.0%范围比较，若在此范围，药物合格，否则不合格。 六、注意事项 空白实验和试样实验应采用相同的条件，遵循平行原则。 七、思考题
-.实验目的 1 ?学习阿司匹林药片中乙酰水杨酸含量的测定; 2?学习利用滴定法分析药品。 .实验原理 Q COOH 阿司匹林的主要成分是乙酰水杨酸。 乙酰水杨酸食有机弱酸(K a 1 10 3 )，结构式 1 M r 180.16g?mol ，微溶于水，易溶于乙醇。在强碱性溶液中溶解并水解为水杨酸和乙酸盐，反应 式如下: 由于药片中一般都添加一定量的赋形剂如硬脂酸镁、淀粉等不溶物，不宜直接滴定，可采用返滴定法 进行测定。将药片研磨成粉末状后加入过量的 NaOH 标准溶液，加热一段时间使乙酰基水解完全，再用 HCI 标准溶液回滴过量的 NaOH ，滴定至溶液由红色边为接近无色即为终点。在这一滴定反应中， 1mol 乙酰水杨酸消耗 2moINaOH 。 三.仪器试剂 酸式滴定管，移液管，容量瓶等 1mol ?L 1NaOH 溶液，0.1moI?L Sci 溶液，酚酞指示剂，甲基红指示剂, 硼砂Na2B4O7H2O Na 2B 4O 7 ?10H 2O 基准试剂，阿司匹林药片等 四.实验步骤 1 1. 0.1mol ?L HCl 溶液的标定 用差减法准确称取 0.4-0.6g 硼砂，置于250mL 锥形瓶中，加水50mL 溶解，滴加2滴甲基红指示剂, COOH + 30H- + CH 3C0O- + 2H a 0
用0.1mol?L 1HCI溶液滴定至溶液由黄色变为浅红色即为终点。计算O.lmol ?L 1HCl溶液的浓度，平 行滴定5-7份，各次相对偏差在0.2%之内。 2 ?药片中乙酰水杨酸含量的测定 将阿司匹林药片研成粉末后，准确称量约0.5g左右药粉，于干燥小烧杯中，用移液管准确加入 1 20.00mL 1mol ?L NaOH标准溶液，加入30mL水，盖上表面皿，轻摇几下，水浴加热15min，迅速用流水冷却，将烧杯中的溶液定量转移到100mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。 准确移取上述溶液10.00mL于250mL锥形瓶中，加水20-30mL，加入2-3滴酚酞指示剂，用 0.1mol ?L 1HCI标准溶液滴定至终点。根据所消耗的HCI溶液的体积计算药片中乙酰水杨酸的质量分数及每片药片(75mg/片)中乙酰水杨酸的质量。 3. NaOH标准溶液与HCI标准溶液体积比的测定 用移液管准确移取20.00mL 1 mol ?L 1NaOH标准溶液于小烧杯中，在与测定药粉相同的实验条件下进 行加热，冷却后，定量转移至100mL容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。在250mL锥形瓶中加入10.00mL 上述NaOH溶液，加水20-30mL，加入2-3滴酚酞指示剂，用0.1mol ?L 1HCl标准溶液滴定至终点，平衡测定2-3份，计算V(NaOH)/V( HCl)的值。 五?数据记录与处理 1 1. 0.1mol ?L HCl溶液的标定
阿司匹林片的质量检测 阿司匹林含量的测定—中和滴定法 一．实验目的 学习药品乙酰水杨酸含量的测定方法，了解该药的纯品（即原料药）与片剂分析方法的差异。二．实验原理 乙酰水杨酸（阿司匹林）是最常用的药物之一。它是有机弱酸(pKa=3.0)，结构为 摩尔质量为180.16g·mol-1，微溶于水，易溶于乙醇。在NaOH或Na2CO3等强碱性溶液中溶解并分解为水杨酸（即邻羟基苯甲酸）和乙酸盐： 由于它的pKa较小，可以作为一元酸用NaOH溶液直接滴定，以酚酞为指示剂。为了防止乙酰基水解，应在10 C以下的中性冷乙醇介质中进行滴定，滴定反应为： 直接滴定法适用于乙酰水杨酸纯品的测定，而药片中一般都混有淀粉等不溶物，在冷乙醇中不易溶解完全，不宜直接滴定，可以利用上述水解反应，采用反滴定法进行测定。药片研磨成粉状后加入过量的NaOH标准溶液，加热一定时间使乙酰基水解完全，再用HCI标准溶液回滴过量的NaOH，以酚酞的粉红色刚刚消失为终点。并将滴定的结果用空白试验校正，根据滴定液使用量，计算阿司匹林的含量。 三．仪器和试剂 仪器：瓷研钵，碱式滴定管，酸式滴定管，移液管，容量瓶 试剂：阿司匹林药片，HCl溶液：0.1 mol·L-1，NaOH溶液：0.1 mol·L-1，无水乙醇，酚酞指示液（取酚酞0.2g，加乙醇100mL使溶解） 四. 实验步骤 1. 取供试品10片，精密称定，研细，精密称取阿司匹林0.3～0.4g，置锥形瓶中； 2. 加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20mL，振摇使阿司匹林完全溶解后，加酚酞指示液3滴，滴 加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）至溶液显粉红色，记录下所用氢氧化钠的体积数V1 .
实验四 阿司匹林片中乙酰水杨酸含量测定 、实验目的： 1. 学习返滴定法的原理与操作。 2. 学习阿司匹林药片中乙酰水杨酸含量的测定方法。 3 ?通过实验学习设计酸碱标定步骤与酸碱体积比的步骤 4.学习利用滴定法分析药品。 二、实验原理： COOH 7 \ a 乙酰水杨酸（阿司匹林）是最常用的药物之一。它是有机弱酸 （pKa=3.0），结构为 OC0CH. 摩尔质量为180.16g mol -1，微溶于水，易溶于乙醇。 化学名称：（邻——乙酰氧基苯甲酸） 分子式 （C 9H 8O 4）,在NaOH 或Na 2CO 3等强碱性溶液中溶解并分解为水杨酸 （即邻羟基苯 甲酸）和乙酸盐： 直接滴定法适用于乙酰水杨酸纯品的测定， 而药片中一般都混有淀粉等不溶物， 在冷乙 醇中不易溶解完全，不宜直接滴定，可以利用上述水解反应，采用反滴定法进行测定。药片 研磨成粉状后加入过量的 NaOH 标准溶液，加热一定时间使乙酰基水解完全，再用 HCI 标 准溶液回滴过量的 NaOH ，以酚酞的粉红色刚刚消失为终点。在这一滴定中， 1 mol 乙酰水 杨酸消耗2 mol NaOH 。 乙酰水杨酸（阿司匹林）是最常用的解热镇疼药之一， 是有机弱酸，酸解离常数为 Ka=1 x 10-3 （pKa=3.0），摩尔质量为180.16 g/mol ，微溶于水，易溶于乙醇；干燥中稳定，遇 潮水解。 阿司匹林片剂在强碱性溶液中溶解并分解 [乙酰水杨酸中的酯结构在碱性溶液中很 容易水解为水杨酸（邻羟基苯甲酸）和乙酸盐 ],水杨酸（邻羟基苯甲酸）易升华，随水 蒸气一同挥发。水杨酸的酸性较苯甲酸强， 与Na z CO 或NaHCO 中和去羧基上的氢，与NaOH 中和 去羟基上的氢。 在这一滴定反应中，总的反应结果是 1mol 乙酰水杨酸消耗 2mol NaOH （酚羟基PKa 约 为10。NaOH 溶液中为钠盐，加酸， PH< 10时，酚又游离出） 三、主要试剂和仪器： 1. 烘箱、称量瓶、电炉、研钵、电子天平、水浴锅 2. 无水NazCQ 基准试剂、1mol ? L -1NaOH 溶液、酚酞指示剂（2g ? L -1乙醇溶液）、甲基橙 指 示剂、阿司匹林药片 L T y P8CH3 “ 2NaOH COONa OH ■+ CH 3COONa 由于它的pKa 酸解离常数 为了防止乙酰基水解，应在 较小，可以作为一元酸用 NaOH 溶液直接滴定，以酚酞为指示剂。 10 C 以下的中性冷乙醇介质中进行滴定，滴定反应为： COOH 4-0H c (xr OCOCHi OCOCHi
紫外分光光度法测定阿司匹林的含量 一、基本原理 阿司匹林制备样品用稀NaOH水溶液溶解，乙酰水杨酸水解成水杨酸钠进入水溶液，该提取液在295nm左右有一个吸收峰，测出稀释成一定浓度的提取液的吸光度值，并用已知浓度的水杨酸的NaOH水溶液做出一条标准曲线，则可从标准曲线上求出相当于乙酰水杨酸的含量。根据两者的分子量，即可求得APC 中乙酰水杨酸的含量。溶剂和其他成分不干扰测定。 COOH OC + COO CH 3 O+C3O C H O OH 3+H O22 二、仪器和试剂 仪器（略） 试剂 0.5000mg·mL-1水杨酸贮备液：称取0.5000g水杨酸先溶于少量0.10moL·L-1NaOH溶液中，然后用蒸馏水定容于1000mL容量瓶中；0.10moL·L-1 NaOH 溶液。 三、实验内容 1、将七个100mL容量瓶按0-6依次编号。分别移取水杨酸储备液0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL于相应编号容量瓶中，各加入2.0mL 0.10moL·L-1NaOH 溶液，先用蒸馏水稀释至30mL左右，80℃水浴加热10分钟，冷却至室温，稀释至刻度，摇匀。 2、称取一定量的阿司匹林样品于100mL烧杯中，加2.0mL0.10moL·L-1NaOH 溶液溶解，定量转移至100mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。 3、从100mL容量瓶中取一定量溶液至100mL容量瓶中，蒸馏水稀释至60mL 左右，80℃水浴加热10分钟，冷却至室温，稀释至刻度，摇匀。 4、在紫外分光光度计上对标样3进行扫描，波长范围是320—280nm，找出最大吸收波长，并在该波长下由低浓度到高浓度测定标准溶液的吸光度，最后测定未知液的吸光度。 四、思考题 1.实验中为什么要加热？ 2.引起误差的因素有哪些？如何减少误差？
阿司匹林含量测定方法综述 一、阿司匹林原料药的含量测定 （1）酸碱滴定法 1、直接滴定法 2、水解后剩余滴定 3、两步滴定法 （2）仪器法 4、反相高效液相色谱法 5、薄层色谱法 6、紫外分光光度法 二、阿司匹林制剂的含量测定 1、两步滴定法 光谱法： 2、比色法 3、双波长紫外分光光度法 4、双波比值光谱法 5、同步扫描荧光光谱 6、萃取-火焰原子吸收光谱法 7、紫外分光光度法 8、分光光度法 9、荧光光度法 10、差示分光光度法 11、紫外褶合光谱法 12、近红外漫反射法 色谱法： 13、高效液相色谱法 14、反相高效液相色谱法 15、离子抑制-反相高效液相色谱法 16、气相色谱法 17、大口毛细管气相色谱法 18、胶束薄层色谱法 电泳法： 19、非水毛细管电泳法 20、反向高效毛细管电泳法 其他法： 21、动力学光度法测定痕量乙酰水杨酸 23、电极法 24、柱分配色谱-紫外分光光度法 25、阻尼最小二乘法 26、线性扫描伏安法测定阿司匹林 27、百分吸收系数法
摘要：阿司匹林是水杨酸类解热镇痛药物，临床上主要用于治疗感冒发烧、牙痛等慢性疼痛，现在的研究发现小剂量的阿司匹林也可用于预防恶性肿瘤，对多种疾病有治疗作用。阿司匹林含量的测定方法很多，有容量分析法，紫外分光光度法，HPLC法，薄层色谱法，气相色谱法等方法，现对其含量测定和鉴别方法作一综述。 关键词：阿司匹林含量测定 阿司匹林是市场上常见的水杨酸类药物，其化学式为： 理化性质： （1）本品为白色结晶或结晶性粉末；无臭或微带醋酸臭，味微酸；遇湿气即缓慢水解。 （2）本品在乙醇中易溶，在三氯甲烷或乙醚中溶解，在水或无水乙醚中微溶。（3）结构中具有羧基具有酸性。 （4）结构中有酯键，在氢氧化钠溶液或碳酸钠溶液中溶解，但同时分解。 （5）苯环具有紫外吸收。 《中国药典》收载的品种有阿司匹林片、阿司匹林肠溶片、阿司匹林肠溶胶囊、阿司匹林泡腾片和阿司匹林栓，以及国家食品药品地标收载的小剂量的阿司匹林肠溶片，这些药品成分相同，作用类似，市场应用广范。临床上主要用于治疗感冒发烧，牙痛、肌肉痛及神经痛等慢性疼痛，急、慢性风湿病及类风湿病等，是风湿、类风湿关节炎治疗的常用药物。本品主要的副作用是引起幽门痉挛及刺激胃黏膜的胃肠道反应长期服用导致胃肠出血。随着科学技术的进步，各种仪器设备、新方法的应用，形成了阿司匹林鉴别和含量测定方法的各异性。阿司匹林的含量测定 一、原料药： （1）酸碱滴定法 1、直接滴定法[16]：原理：结构中具有羧基，显酸性，可用碱中和，利用中和反应测 定其含量。 ?方法：取本品0。4g，精密称定，加中性乙醇20ml，溶解，加酚酞指示液3d，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/l）滴定。每1ml滴定液相当于18.02mg 的C9H8O4。 《中国药典》(2010年版)二部采用此法。 计算公式： NaOH滴定度T=0.1×180.16×(1/1)=18.02（mg/ml） F=M（实际）/M(规定) 含量（%）=（V×T×F）/W×100% （V为滴定液体积（ml）；T为氢氧化钠的滴定度，W为供试品称样量（g）；F为