实验二、黑曲霉发酵生产纤维素酶大实验
一、实验目的
1、了解纤维素酶的生产工艺和原理
2、掌握液体发酵和固体发酵工艺
3、学会DNS法测定还原糖含量的方法和原理
二、实验原理
纤维素酶可以用于一切含纤维素的生物质的降解，具有广阔的应用前景。高产纤维素酶的微生物主要有木霉属、曲霉属、根霉属，黑曲霉所产的纤维素酶中β-葡萄糖苷酶活力高，能避免酶解产物纤维二糖的阻遏作用，而且安全无毒，故而成为生产纤维素酶的主要菌种之一。纤维素酶是诱导酶，故发酵生产时需有纤维素物质作诱导剂。
以羧甲基纤维素钠作底物，用发酵所得纤维素酶对底物进行酶解，测定酶解液中的还原糖含量（以葡萄糖计），可以计算酶活力高低。还原糖与DNS反应形成棕色物质，颜色深浅与糖含量成正比。
三、材料与试剂配制
1、生产菌种：黑曲霉
2、斜面（活化）培养基：酵母膏0.4%，蛋白胨0.6%，可溶性淀粉1%，葡萄糖0.9%，马玲薯浸出液7%，琼脂2%，陈海水（或人工海水）配制，pH7.0-7.4。
3、人工海水：NaCl = 24 g/L ;MgSO
4·7H
2
O = 7.0 g/L ;NH
4
NO
3
= 1 g/L ;KCl = 0.7 g/
L ; NaH
2PO
4
= 2.0 g/ L ;Na
2
HPO
4
=3.0 g/ L ,pH7.4。
4、微量元素液：FeSO
4·7H
2
O 5.0mg/L，MnSO
4
·H
2
O 1.6mg/L，ZnSO
4
· 7H
2
O 1.4mg/L，
CoCl
2
2.0mg/L，加蒸馏水200ml使之溶解。
5、液体发酵产酶培养基：麸皮作碳源3 g，氯化铵或硫酸铵作无机氮源1 g，蛋白胨0.05g作有机氮源，人工海水100 ml（含1%微量元素液），自然pH值。
6、固体发酵产酶培养基：麸皮：稻草粉=2：1作碳源5 g，人工海水12 ml（含1%微量元素液，1%氯化铵或硫酸铵，0.05%蛋白胨），自然pH值。
7、6% DNS试剂：称取酒石酸钾钠182g溶于500ml水中，加热溶解，于热溶液中依次加入3,5-二硝基水杨酸6g，20.8gNaOH,5g苯酚，5g无水亚硫酸钠，加热搅拌溶解，冷却后定容至1000ml。储存在棕色瓶中放置一周后使用。（提前配制）
8、0.1 mol/L 柠檬酸钠一柠檬酸缓冲液（pH 4.8）
0.1mol/L柠檬酸钠溶液100mL:称2.941克柠檬酸钠(柠檬酸钠的分子量为294.12)，约20L蒸馏水溶解后，转入100mL溶量瓶，定容至刻度。
0.1mol/L柠檬酸溶液100mL:称2.101克柠檬酸(柠檬酸的分子量为210.14)，约20L 蒸馏水溶解后，转入100mL溶量瓶，定容至刻度。
pH4.8的柠檬酸钠—柠檬酸缓冲液100mL:量取0.1mol/L柠檬酸钠溶液54mL和0.1mol/L柠檬酸溶液46mL混合摇匀。
9 1%CMC-Na溶液
称取1.0克羧甲基纤维素纳，用pH 4.8的柠檬酸钠—柠檬酸缓冲液加热溶解。
10 1mg.mL-1标准葡萄糖溶液
1mg/mL葡萄糖溶液250mL: 准确称取无水葡萄糖250mg，溶解定容到250ml。
11、主要仪器：恒温培养箱，摇床培养箱，可见光分光光度计、冷冻离心机、电子天平等。
四、实验步骤
1、培养基配制
分别按上述方法配制液体发酵培养基和固体发酵培养基，121℃灭菌20分钟。
2、孢子悬液的制备：将斜面培养基上的曲霉孢子用少量无菌人工海水洗下，利用玻璃珠在磁力搅拌下搅拌15~20分钟，充分打散孢子，稀释成5x107个/ml左右的孢子悬液。
2、液体发酵产酶试验
按6%（v/v ）接种量将浓度约为5×10 7 个/ml的菌株孢子悬液接入已灭菌的液体发酵培养基（100 ml 锥瓶装液30 ml），于35℃、180r/min条件下摇床培养6天。发酵液4℃、5000 r/min离心15 min，上清液稀释10倍，测定发酵液中的酶活力。
3、固体发酵产酶试验
100 ml三角烧瓶装5g已灭菌的固体发酵培养基，按1:3(v/w)接种量将浓度约为5×10 7 个/ml的菌株孢子悬液，于35℃恒温培养箱中培养，接种48小时后隔天翻曲一次，第四或第五天补充无菌水保持基质水分。培养6天后，取发酵成熟曲1g，加蒸馏水10ml，搅拌均匀，30℃，浸提lh，双层纱布过滤，滤液经4℃，5000rmp离心15min，上清为粗酶液。测定时适在0.2~1.0范围。
当分级稀释，使OD
540
4、酶活力测定及酶活力定义
（！）葡萄糖标准曲线绘制
准确称取无水葡萄糖250mg,溶解定容到250ml 。分别吸取此液1.0, 2.0, 3.0, 4.0, 5.0 ml 至5个25ml 的比色管中，用蒸馏水定容到25ml(即加水24, 23, 22, 21, 20ml)
再分别吸取上溶液各2.5ml 于比色管中（糖液分别含糖量为0.1,0.2,0.3,0.4,0.5mg ），各加2.5mlDNS 试剂，煮沸5min 。（对照管2.5ml 水代替糖液，冷却，测定OD 540。
表1 葡萄糖标准曲线绘制加样表
管号 1 2 3 4 5 6 蒸馏水（mL ） 2.5 - - - - - 标准葡萄糖（mL ） - 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 DNS （mL ） 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 含糖量（mg ）
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 OD 540
以糖含量为横坐标，A 540为纵坐标，（或反过来）绘制标准曲线。
（1）内切葡聚糖酶 (CMCase) 酶活：取适当稀释的酶液0.5 ml ，加入2.0 ml 1％ (W/V) 的CMC-Na 溶液(溶于0.1 mol/L 柠檬酸钠一柠檬酸缓冲液，pH 4.8)，60℃ 反应30 min ，加入2.5 ml DNS 终止反应，沸水浴显色5 min ，测定 OD 540。以灭活酶液作对照。
（2）滤纸酶 (FPA) 酶活：取50 mg (1Χ 6 cm) 新华滤纸，加入酶液0.5 ml ，再加入pH 4.8的柠檬酸钠一柠檬酸缓冲液2.5 ml ，50℃反应l h ，其它同前。
酶活力定义：在上述反应条件下，每分钟催化底物水解生成1 μmol 葡萄糖所需的酶量为 1个酶活力单位 (U)。
酶活力=180
5.0301000
???A 式中A 为由标准曲线查得或回归方程算得的还原糖含
量，mg 。 五、实验记录
1.固体培养基：
6月20日接种 6月21日15点00分无现象 6月22日16点05分出现白色菌丝体 6月24日10点出现大量白色菌丝体和少量黑色孢子 6月25日8点出现大量黑色孢子，白色菌丝体比前天少些
2.液体培养基：
6月20日接种 6月21日15点00分无现象 6月22日16点05分液体颜色变深了 6月24
日10点液体变稠、变黑、出现少量黑色孢子 6月25日8点出现大量黑色孢子
六、实验数据
1.葡萄糖标准曲线OD数据
管号 1 2 3 4 5 6 蒸馏水（mL） 2.5 - - - - - 标准葡萄糖（mL）- 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 DNS（mL） 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 含糖量（mg）0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 OD5400.000 0.041 0.370 0.677 1.013 1.152
2.酶活力测定OD数据
七、数据处理
实验数据：CMCase: OD540液体培养基=1.091 OD540固体培养基=0.497
FPA: OD540液体培养基=0.623 OD540固体培养基=0.695
又由y=2.5689x-0.0997 得x=(y+0.0997)/2.5689 解得：CMCase ：x 液体=0.463mg x 固体=0.232mg FPA ： x 液体=0.281mg x 固体=0.309mg 因为酶活力=
180
5.0301000
???A 则：
CMCase ：液体酶活力=
ml
U A /7148.11805.030/101000463.010180
5.0301000
=????=????
固体酶活力=g U A /5926.81805.030/10101000232.01010180
5.0301000
=?????=?????
FPA ：液体酶活力=ml
U A /5204.01805.030/51000281.05180
5.0301000
=????=????
固体酶活力=g U A /4444.111805.030/10101000309.01010180
5.0301000
=?????=?????
八、结果分析
从实验整体看，实验还是成功的，不过还有不少方面存在问题：
1.由标准曲线中，R 2=0.9715小于0.99，相关性较弱，可能在各种试剂配制不够准确以及实验操作不够规范。分析原因有：葡萄糖标准溶液定容操作出现失误，DNS 的加入各个管存在误差，缓冲液配制不精确，测OD 值实验操作不严谨。
2.为使固体发酵培养得菌种充分利用培养基需及时翻曲，能使其能在培养基的其他部位也长出菌落，提高酶产量。由于翻曲不充分，菌种只在培养基上部生长。
3.液体发酵培养时需在摇床上摇荡培养，菌体生长时能更有效率的利用营养物质，从培养结果看，菌种生长状况良好。
生物发酵工程实验 实验一................................ 利用酵母富集培养基分离酵母菌 实验二... ......................... 分离纯化酵母菌 实验三... ......................... 酵母菌的保藏 实验四............................... 大肠杆菌生长曲线测定及pH对生长曲线 的影响 实验五.............................. 发酵罐的构造及操作 实验六.............................. 发酵罐实灌灭菌操作 实验七.............................. 利用7L发酵罐对地衣芽孢杆菌进行补 料分批发酵培养 实验八..............................淀粉酶生成曲线的测定
实验一、利用酵母富集培养基分离酵母菌 一实验目的 1、通过本实验加深理解酵母富集培养基的原理和应用； 2、掌握涂布分离技术； 3、熟悉从自然样品土壤中分离酵母菌的具体操作方法 二实验原理 酵母菌主要分布于含糖高和酸度较高的自然环境中，在果园表土和浆果、蔬菜、花蜜和蜜饯等的表面很容易找到它们。在土壤中，由于各种微生物混杂在一起且酵母菌的数量相对比较少，故可以利用酵母菌富集培养基进行富集培养，该培养基含有较高的葡萄糖（5%）和较酸（pH为4.5）的环境，以及能抑制多种杂菌（许多细菌、放线菌和快速生长霉菌）的孟加拉红（玫瑰红），故十分有利于酵母菌的增值。 三实验材料 土壤（标注采集地点） 培养基：酵母富集培养基（5%葡萄糖、0.1%尿素、0.1%硫化铵、0.25%磷酸二氢钾、0.05%磷酸氢二钠、0.1%七水合硫酸镁、0.01%七水合硫酸铁、0.05%酵母膏、0.003%孟加拉红、1.9%琼脂 pH4.5） 移液枪、培养皿、天平、涂布棒、棉绳、250ml三角瓶、75%酒精棉花、摇床等 四实验步骤 1、采集土样：采集葡萄园或其他果园、菜地等的土壤若干（要求：先铲去2~3cm 的表土，再采集土样）适当研碎。 2、称取1g土样装入准备好的30/250ml蒸馏水中震荡均匀。 3、准备平板：将酵母菌富集培养基加热融化，待冷却至50℃左右后，倒2个平板，冷却待用。 4、用移液枪吸取200ul样品，用涂布法分离菌种。 5、恒温培养：将培养皿倒置后防于37℃恒温培养箱中培养2d。 五结果记录 将土壤来源，平板上得到的菌落特征和菌落数做表记录 六思考题 酵母菌富集培养基中为什么要加孟加拉红
流体力学 实验指导书与报告 静力学实验 雷诺实验 中国矿业大学能源与动力实验中心
学生实验守则 一、学生进入实验室必须遵守实验室规章制度，遵守课堂纪律，衣着整洁，保持安静，不得迟到早退，严禁喧哗、吸烟、吃零食和随地吐痰。如有违犯，指导教师有权停止基实验。 二、实验课前，要认真阅读教材，作好实验预习，根据不同科目要求写出预习报告，明确实验目的、要求和注意事项。 三、实验课上必须专心听讲，服从指导教师的安排和指导，遵守操作规程，认真操作，正确读数，不得草率敷衍，拼凑数据。 四、预习报告和实验报告必须独自完成，不得互相抄袭。 五、因故缺课的学生，可向指导教师申请一次补做机会，不补做的，该试验以零分计算，作为总成绩的一部分，累计三次者，该课实验以不及格论处，不能参加该门课程的考试。 六、在使用大型精密仪器设备前，必须接受技术培训，经考核合格后方可使用，使用中要严格遵守操作规程，并详细填写使用记录。 七、爱护仪器设备，不准动用与本实验无关的仪器设备。要节约水、电、试剂药品、元器件、材料等。如发生仪器、设备损坏要及时向指导教师报告，属责任事故的，应按有关文件规定赔偿。 八、注意实验安全，遵守安全规定，防止人身和仪器设备事故发生。一旦发生事故，要立即向指导教师报告，采取正确的应急措施，防止事故扩大，保护人身安全和财产安全。重大事故要同时保护好现场，迅速向有关部门报告，事故后尽快写出书面报告交上级有关部门，不得隐瞒事实真相。 九、试验完毕要做好整理工作，将试剂、药品、工具、材料及公用仪器等放回原处。洗刷器皿，清扫试验场地，切断电源、气源、水源，经指导教师检查合格后方可离开。 十、各类实验室可根据自身特点，制定出切实可行的实验守则，报经系(院)主管领导同意后执行，并送实验室管理科备案。 1984年5月制定 2014年4月再修订 中国矿业大学能源与动力实验中心
2020 实验报告发酵现象实验报告范文 _0613 EDUCATION WORD
实验报告发酵现象实验报告范文_0613 前言语料：温馨提醒，教育，就是实现上述社会功能的最重要的一个独立出来的过程。其目的，就是把之前无数个人有价值的观察、体验、思考中的精华，以浓缩、系统化、易于理解记忆掌握的方式，传递给当下的无数个人，让个人从中获益，丰富自己的人生体验，也支撑整个社会的运作和发展。 本文内容如下：【下载该文档后使用Word打开】 澄清的石灰水可以检测气体中有二氧化碳，重铬酸钾溶液遇到酒精由橙色变为灰绿色。实验操作： 1.将（100ml）40℃温水倒入锥形瓶，再用汤匙将一大勺糖及适量干酵母加进来，搅拌均匀后，将锥形瓶放在大烧杯中水浴保温温度保持在30―40℃左右。（先让酵母菌进行有氧呼吸，是酵母菌迅速繁殖，并把葡萄糖分解成二氧化碳和水。） 2.观察到酵母菌培养液有气泡产生，塞上橡胶塞（这样做既可以避免气体散失，影响后面实验效果，也为酒精的产生提供保障）。过一段时间后就可看到干瘪的气球慢慢膨胀起来了。（酵母菌的无氧呼吸） 3.将夹子打开，挤压气球，使瓶内产生的气体徐徐通过胶管导入试管内的澄清石灰水中，石灰水变浑浊了(检测气体中有二氧化碳。原理：二氧化碳遇石灰水，石灰水变浑浊)。
4.将重铬酸钾试剂分别滴在比色板的凹槽内，并分别标注1号、2号（作对照）、3号。在3号试剂上滴1滴酒精，在1号试剂上滴1滴酵母菌发酵液。发现1号和3号都由橙色变成了灰绿色。 通过上述实验，让我们对酵母菌“发酵现象”所需要的原料、条件及产生的物质都有了较直观的感受，比较容易理解课本上阐述的“酵母菌可以把葡萄糖转化为酒精和二氧化碳”等有关内容，而且印象深刻。使我们养成很好的节约意识。 1.闻到了发酵后特殊的甜酒的芳香气味。 2.详见【实验操作4】 3.澄清的石灰水变浑浊 实验一摇瓶发酵法制备糖化酶 （1）掌握摇床发酵法制备糖化酶的工艺流程及操作方法 （2）了解利用黑曲霉菌菌种发酵时的生长条件及注意事项 （3）熟练掌握实验过程中的无菌操作和培养条件的选择 菌种：黑曲霉 仪器：锥形瓶（500ml)、移液管、恒温水浴锅、秒表、50mL 比色管、牛皮纸、纱布（8层）、pH计。 药品：三水乙酸钠、冰醋酸、硫代硫酸钠、碘、氢氧化钠、硫酸、可溶性淀粉、玉米粉、豆饼粉、麸皮
湘祁牌微生物饲料发酵剂——发酵饲料首选品牌 发酵原料的选择https://www.doczj.com/doc/7712585247.html,/ 发酵饲料时应选择将一些需要蒸煮的（豆渣、潲水、木薯渣、甘薯等）有轻微霉变，不能直接作饲料使用的（严重霉变的不能制作发酵饲料）粗纤维含量高，饲料本身营养可消化吸收率极低的（米糠、统糠、玉米秸秆、花生秆、黄豆秆等）饲料原料含有毒素成份，不宜直接作饲料使用的（菜饼、棉粕、芝麻饼等）抗营养因子含量较高易引起小猪营养性腹泻的（豆粕、花生饼、血粉等）上述原料经过发酵不仅可达到免蒸煮省燃料，降解脱除饲料中的抗营养因子及毒素成份，大幅度提高饲料营养的可消化吸收率，还能生成一些只用经过发酵才能生成的特殊营养成份，如微生物菌体蛋白、生物酶、有机酸、生物多肽、B族维生素及未知生长因子等特殊营养促长和保健成份，采用发酵饲料喂养畜禽，可充分利用各类粗廉副质资源，降低养殖成本，增加养殖经济效益。 各类干物质饲料发酵操作方法https://www.doczj.com/doc/7712585247.html,/ 1. 发酵剂母料配制：玉米粉5斤、生态宝1包、食盐0.5公斤、磷酸氢钙2公斤（没 有可用石粉代替，也可不添加）将各种原料按量混拌均匀备用。注：1.2.后述所用干、湿饲料发酵量均以此母料发酵剂量设计 2.发酵饲料主料配方： 1) 米糠150公斤、菜饼（花生饼）25公斤 2) 统糠80公斤、油糠70公斤、杂饼25公斤 3) 玉米秸秆150公斤、杂饼30公斤 4) 黄豆秆、叶160公斤、杂饼20公斤 5) 花生秆、叶160公斤、杂饼20公斤 6) 干啤酒渣150公斤、麦麸30公斤 7) 米糠150公斤、杂饼30公斤 配料说明：https://www.doczj.com/doc/7712585247.html,/ 1）各类秸秆应晒干粉碎，长期雨淋霉变的原料不可采用。 2）杂粕指菜饼、棉粕、花生饼、芝麻饼、葵籽饼等含蛋白量较高的非常规蛋白饲料原料，可任选一种，也可二至三种杂饼混合按量配料，如没有杂粕可改用等量的豆粕。 3}各类粗料之所以都有一定量的杂粕配量，是因为考虑发酵饲料的能量与蛋白营养的平衡。4）按配方配制的发酵料，在投喂时，只需在干粉料补充相应量的预混料即可作全价的饲料使用。 1.发酵操作方法：https://www.doczj.com/doc/7712585247.html,/ 先将发酵主料倒在水泥地板上摊平，然后散入拌匀的发酵剂添加料，用拌料铲翻拌使主料与添加聊混拌均匀，随即加入130—140公斤水，边加水边翻拌，待料水充分搅拌均匀即可装入大塑料桶中（缸、池均可）装料时应逐层轻压实（不要压得太紧），料装至容器边沿抹平稍压紧用薄膜覆盖（选用无破损的厚膜，膜的长宽应超过容器边沿15公分），外用橡皮筋扎紧密封发酵2-5天后即可配料饲喂。 发酵饲料在养猪中的应用：发酵饲料宜喂15公斤以上的肉猪及20月龄后的家禽
馒头发酵方法与过程实验报告 馒头的发酵方法很多，有老面发酵法、酒曲发酵法、化学膨松剂发酵法、酵母发酵法等等。实验证明无论从食品营养的角度，还是从操作的角度，酵母发面都有很强的优势。用酵母发面不仅适合家庭和工业化生产线，也适合小型作坊式馒头房，特别是对于要求不增加成本的用户也是非常合适的。酵母发酵是馒头生产中最关键的环节，它对于馒头质量的好坏有着直接的关系。 一．常见的酵母发酵工艺 酵母的发酵原理是利用面粉中的糖份与其他营养物质，在适宜的生长条件下繁殖产生大量的二氧化碳气体，使面团膨胀成海绵状结构。 在酵母馒头的生产中，常见的发酵工艺简单的归纳起来主要有以下两种： 1．一次发酵法 原辅料: 和面、压面、成型、发酵、汽蒸 （1）操作方法： 和面: 将所有的原辅料一次加入和成面团，干酵母用量0.3%，鲜酵母用量为1%左右，加水量38-40%，和好的面团温度一般应控制在28℃。 成型: 馒头成型由馒头成型机来完成，家庭制作由手工完成，根据需要制成各种形状和大小的馒头坯。 发酵: 在温度30-32℃，湿度为75-80%的条件下让面团发酵35分钟。没有恒温恒湿条件的，也可以采取其它相应的保温措施。 蒸煮: 面团发酵完成以后，沸水上笼蒸20分钟。 （2）发酵特点： 用一次发酵法生产馒头，具有工艺线路短，生产周期短，生产效率高劳动强度低等许多优点，并且生产出来的馒头有很好的咀嚼感。因此该方法被许多馒头厂家广泛使用。 2．二次发酵法 部分原辅料：第一次和面、第一次发酵、第二次和面 压面、成型、第二次发酵、汽蒸 （1）操作方法： 第一次和面取30%左右的面粉加入所需的干酵母（添加量以第一次所加面粉量的0.16%计）再加上50%左右的水（加水量以第一次所加面粉量计），和成面团。 第一次发酵和好的面团在温度26-28℃，湿度70-80%的条件或温暖的自然条件下发酵8-12小时。发酵时间也可以根据自己生产的实际情况通过调整酵母的用量、两次和面时面粉的配比以及发酵温度、湿度来灵活调节。
食用菌实验三实验报告 【实验目的】 1、学习平菇的栽培方法基本操作步骤 2、掌握平菇的栽培方法难点及关键技术 3、通过平菇的栽培实验掌握食用菌袋料栽培的一般方法和栽培管理技术。 【实验原理】 袋式栽培是目前国内应用最为普遍的一种栽培方法。按照培养料的不同处理方式，可分为生料、发酵料、熟料、发酵熟料4种袋式栽培法。与床式栽培相比，袋式栽培在封闭条件下发菌，能有效地控制杂菌污染，提高栽培成功率；菌袋可立体堆码，能大量节约做菇床和栽培架的开支。 【实验材料】 1、食用菌品种：平菇夏灰1号菌种 2、平菇配方：木屑1.5框、棉籽壳65斤、麦麸20斤、轻钙1斤、磷肥1斤。即棉籽壳60%、木屑20%、麸皮18%、轻钙1%、石灰粉1%、硫酸镁0.3%，另外加o.1%多菌灵。 3、仪器或其他用具： 75%酒精、棉球、酒精灯、接种镊子、聚丙烯塑料袋、颈圈、高压蒸气灭菌锅等。 【实验步骤】 1、菇房建设与消毒，平菇喜温，一般采用温室培养，菇房要保证具
有保温、加湿和通风便利。在菇房使用前，都要打扫干净，并进行彻底消毒火菌，主要用甲醛熏蒸法消毒（①每立方米空间用10ml甲醛，将甲醛与高锰酸钾混合后，氧化还原反应放热，产生大量甲醛蒸气，对密闭的空间进行杀菌消毒。②无菌室经甲醛熏蒸后，经24h人才能进入室内工作。③如还有刺激鼻眼的气味，应消除残余的甲醛气体。方法是用浓度25-28%的氨水，在室内熏蒸或喷雾，经10-30min，氨与空气中的甲醛结合，可消除残存的甲醛气体。 2、食用菌研究所已准备好塑料袋、堆制发酵好原料。 3、装袋灭菌，将发酵料装入塑料袋内.边装边压，松紧适度(手按略有弹性)，用木棒在培养料中打一洞，然后直接套塑料颈圈(直径 4~5cm，可用包装塑料带焊制)，外加塑料薄膜封口。料袋装好后，进行高压(O 147MPa，126℃)蒸汽灭菌。在灭菌锅内摆放时，料袋间应留钉空隙。高压灭菌时间为1.5~2h。灭菌结束后，缓慢排放蒸汽，以防料袋胀裂。 4、接种，菌种的选择至关重要，从外观看，一般选用绝对无杂菌、爬壁力强、生民健壮、洁自浓密、菌龄小的种类作菌种。接种前需按常规消毒方法对接种室进行紫外线消毒，用75%酒精对双手及接种工具和塑料袋消毒，之后用石碳酸喷雾消毒1次，最好在酒精灯火焰上方接种。接种时料内温度应低于30℃。接种过程应迅速，以防污染，接种完成后立刻封紧袋口。接种量应尽量大，尽量放满培养料袋的洞中，保证菌丝布满培养料表面，可有效防比杂菌污染。 5、菌丝培养，培养室温度以25℃为最宜，料内温度不能超过30℃。
开放性实验报告干红葡萄酒的酿造 专业： 班级： 学号： 姓名： 2016年 11 月 12 日
学习葡萄酒的酿造原理，掌握干红葡萄酒的酿制工艺 二实验原理 葡萄酒+果糖→酒精+CO2(条件：人工酵母或天然酵母)（酒精发酵） 高级醇+脂肪酸+挥发酸+酯类（陈酿） 色素+单宁+有机酸+果香物质+无机盐（葡萄酒原料） 三实验材料和仪器设备 （1）材料：新鲜葡萄、活性酵母、果胶酶、偏重亚硫酸钾、白砂糖、纱布、明胶； （2）仪器设备：分柄天平、烧杯、量筒、玻璃棒、称量纸、水浴锅、温度计、比重计、3L发酵瓶、纱布袋、漏斗、干净瓶子。 四实验操作步骤 （1）清洗容器或仪器，冷开水清洗。 （2）分选和清洗葡萄：剔除生的，有破损的，发霉的果实。清洗过后的葡萄自然晾干（为节约时间也可以用吹风机冷风吹干） （3）手工去梗，将葡萄的蒂部微微捏破，直接放入发酵瓶中。 （4）装瓶:装量不超过容量的75%，同时加入克的偏重亚硫酸钾搅匀，并加入克果胶酶，搅匀。 （5）酵母复水活化：称取7克冰糖溶解于少量冷开水定容100ml，加入2克酵母，混匀，放置于水浴锅30℃静置3小时活化，每10分钟搅拌一次，活化结束后直接加入葡萄醪中发酵。 （6）酒精发酵：酵母菌活化结束后取15ml加入发酵罐搅匀，当有酒帽形式时，加入25克白砂糖，每天测量一次比重、温度，并定期挥帽。 （7）当比重降至—时，酒精发酵结束。使用纱布袋与漏斗过滤皮渣，酒液用干净的瓶子装瓶，满瓶。 （8）陈酿：在装入干净的瓶子的同时加入克偏重亚硫酸钾摇匀，在适宜的温度下放置。
1 整理干红葡萄酒发酵实验过程中，每天测量发酵温度和比重的结果，作出发酵 第二天葡萄酒温度较高，可能是受室温影响，总的来看，发酵较为正常。 2整理葡萄酒酿造过程中的相片，从气泡产生的多少、葡萄皮的浮沉、葡萄汁和葡萄籽的位置等参数的变化进行描述。 气泡由一开始的无气泡，到后来发酵搅拌时产生气泡。 葡萄皮由一开始挤入时的分布不均，到最后的悬浮在上层。 葡萄汁由一开始的堆积在下层，到最后的中层，位于沉淀之上。
实验报告 实验名称实验室平菇栽培法班组 姓名学号日期 成绩教师签名 一、实验目的 1.掌握平菇基本栽培方法及其原理。 2.掌握平菇栽培中器械和培养基的灭菌方法及原理，如高压蒸汽灭菌法、干热灭菌、灼烧灭菌和紫外灯灭菌法等。 3.了解食用菌母种扩大繁殖生产的基本原理,掌握斜面母种的接种和培养方法。 4.掌握平菇栽培中原种、栽培种培养基的制备方法。 5.培养学生自行设计出菇的方案。 二、基本原理 1.平菇是木质腐生菌，生长发育所需各种营养物质均从木屑、棉籽壳、稻草等培养料中获得。平菇生长周期短，从播种到第一批采收一般为30天到40天，栽培方法简便，成功率高。本实验在实验室条件下，用袋装方法出菇。 2.食用菌生产中，培养基、器皿及接种工具的消毒灭菌，是防止杂菌污染，提高食用菌产量的关键措施，灭菌和消毒法主要有物理方法（高温灭菌和紫外线灭菌）、化学灭菌法。 干热灭菌是在保持恒温的电烘箱中进行的,适用于各种耐热的玻璃器皿、棉塞、滤纸、以及不能与蒸汽充分接触的液体的灭菌.一般
在160摄氏度持续1.5—2小时,就可达到灭菌的目的.灼烧灭菌可直接在酒精灯外火焰灼烧灭菌,酒精灯所用的酒精浓度要在百分之95 以上. 紫外灯灭菌是接种室(箱)最常用的方法之一,每次在使用前开灯20—30分钟.紫外线可导致细胞内核酸和酶发生变化而使细胞死亡,还可使空气中氧气产生臭氧,臭氧也具有杀菌作用.因其透射力差只 适用于空气及物体表面的灭菌,有效距离为1.5—2米,以1.2米内为最好. 3.食用菌母种培养基和分离菌种时用斜面培养基，适用于一般食用菌的母种分离与培养用的培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基（即PDA培养基），配成后用加压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。 4.食用菌菌种生产一般按母种——原种——栽培种进行。母种数量少，要进行试管移接扩大培养才能进行生产。 5.原种由母种繁殖而成，由原种扩大培养成栽培种。原种和栽培种生产一般包括配料——装瓶（袋）——灭菌——接种——培养等流程。一般用瓶装或塑料袋装，灭菌压力和时间相应延长。 三、实验器材 1.材料：马铃薯、葡萄糖（或蔗糖）、磷酸二氢钾、硫酸镁、琼脂、75%乙醇溶液、麦粒、棉籽壳、石膏粉、碳酸钙、麦麸 2.器具：锥形瓶、棉塞、超净工作台、烧杯、量筒、漏斗、天平、铁架台、纱布、药匙、PH实纸、接种铲、酒精灯、聚丙烯塑料袋、小试管、牛皮纸、高压蒸汽灭菌锅等
发酵实验报告四甜酒酿 的制作 集团档案编码：[YTTR-YTPT28-YTNTL98-UYTYNN08]
发酵工程学实验报告实验四、甜酒酿的制作 学院生命科学学院 专业应用生物教育 班级12应生A班 姓名李顺昌 学号124120218 实验课程甜酒酿的制作 指导教师许波 开课学期2014—2015学年下学期
实验四、甜酒酿的制作小组合作：是小组成员：李顺昌、李媛媛、方淑萍、周玉坤一、实验目的 学习并掌握甜酒酿的酿制方法 二、实验设备与材料 1.设备：天平、灭菌锅、盆、容器（口缸）、保鲜膜、培养箱等 2.材料：糯米（约400g/人）、市售甜酒药、冷开水 三、实验原理 1、将蒸熟的米饭经接种酒酿种曲后，在适宜的培养条件下，让种曲中的根霉孢子萌发菌丝体，大量繁殖后通过淀粉酶等的作用，将淀粉转化为葡萄糖，从而使甜酒酿具有独特的甜醇口味。 2、从微生物的观点来看，酿制的关键在于： 要有优质的酒酿种曲，即种曲中应含有糖化率很高的优质根霉孢子或菌丝体；应选择优质的糯米作原料；严格无菌操作规程，尽量避免杂菌污染；制作甜酒酿的器具都要清洗干净；合理控制酿制条件等。 四、实验方法步骤 浸米→蒸饭→淋饭→拌酒药→搭窝→保温培养 1、蒸饭：将滤干水分的糯米，扎紧纱布口后放入灭菌锅；于115-121℃灭菌20~25min，到米饭熟透为止。 2、淋饭：加少许冷开水淋洗糯米饭，边淋边拌，使米饭迅速冷却至35℃左右。 3、拌酒药（接种）：按干糯米的重量换算接种量( 0.35% ) ；将酒药均匀地撒在冷却的糯米饭中（稍微留下一点点酒曲最后用），拌匀。 4、搭窝：将拌好酒药的米饭装入容器后（不能压太紧），将饭粒搭成中心下陷的凹窝（中间低、周围高）；饭面和凹窝中均匀撒上少许酒药，倒入少量的冷开水，盖上盖子或保鲜膜； 5、保温培养：28℃培养约24-48小时，待凹窝内有少许液体渗出即可食用
（一）实验结果 1．详细描述枯草芽孢杆菌固态培养物（外观、气味、培养物状态等） 答：枯草芽孢杆菌淡黄色，中间色深，表面较平整，无光泽，边缘不整齐，形成的菌落为圆形。培养基中的枯草芽孢杆菌有腥臭味，长势良好，观察培养基，无明显染菌现象。 2．记录个人活菌测定中各平行数据，计算最终平均值。 答：平行试验中，其他几个由于菌落连成一片，无法计数。只有如图一个平板中大约有100 个透明圈，因为是稀释了5亿倍，所以600亿\克。 （二）思考题： 在枯草芽孢杆菌固态培养过程中，为了防止霉菌与酵母的污染，可采用什么方法？ 答：可以加入抗真菌制剂。 （三）注意事项 1. 实验所用稻壳应尽量剪碎，使固体发酵培养基混合均匀 2. 无菌水高压灭菌时，应向三角瓶中加入玻璃珠防止暴沸。 3. 使用涂布器时，注意使用用酒精灯灭菌，待涂布器冷却后再进行涂布，以免杀死菌体。
（一）实验结果 1、详细记录实验过程中各参数及数据。 结果记录如表： 糖化后，加入可乐瓶中的上清：400ml, 活化的酵母种液：10ml ，置于28℃的培养箱中静置培养36h左右。 2、对实验结果的判断与分析。 实验结果检验：○1二氧化碳生成的检验培养约48h后，观察瓶中混合液，淀粉大部分沉降在瓶底，上清浓度较稀，靠瓶壁边缘有一连串微小气泡 ○2酒精生成的检验打开瓶塞，闻到有浓重酒精气味。取发酵液5ml, 加10%硫酸2ml,加1%K2Cr2O7溶液10-20滴，颜色由黄色变为黄绿色，稍加热后现象产生更快，更明显。 图示：酒精生成的检验结果左侧：蒸馏水5ml,颜色偏黄，透明度高右侧：发酵液5ml,黄绿色，与对照管有明显差异 1、思考题：现有3株不同来源的酒精酵母，请设计实验判断哪株酵母发酵酒精能力最强？
2010级发酵大实验（1） 实验报告 任课老师： 姓名： 专业：生物技术 班级： 学号： 日期：2013年6月
实验报告 一、目的要求： 了解筛菌的基本操作，包括：培养基配制，灭菌，接种，涂板，摇菌，紫外分光光度计的使用等。 二、实验材料 1、菌种来源：英语公园葡萄树下土壤和生物学院院楼门口土样。 2、培养基： （1）淀粉液体培养基：可溶性淀粉1%、蛋白胨1% 、葡萄糖0. 5%、NaCl 0. 5%、牛肉膏0. 5% （2）淀粉固体培养基: 可溶性淀粉1%、蛋白胨1% 、葡萄糖0. 5%、NaCl 0. 5%、牛肉膏0. 5%、琼脂粉1.5% 。 3、器皿：试管，量筒，烧杯，移液管，培养皿，洗耳球，玻璃棒，酒精灯，接菌环，三角瓶，玻璃棒等。 4、仪器：高压蒸汽灭菌锅，水浴锅，恒温培养箱，摇床，天平、紫外可见分光光度计等。 5、试剂：1%碘液、1M NaOH、DNS、pH 5.6 0.05M 乙酸/乙酸钠缓冲液、1%淀粉溶液、1mg/mL的麦芽糖，结晶紫溶液。 6、其他：封口膜、纱布，棉花，试管架等。 三、实验步骤： 1、初筛： （1）配制培养基：按照上述培养基成分及数量称取各物质，放入三角瓶中，加水到100ml，包扎。和包扎好的试管、移液管、涂布器、培养皿等一起放入灭菌锅中121℃高压灭菌20min。然后干燥后使用。 （2）倒平板：把培养基置于无菌工作台上，待冷却到55℃左右后，倒入灭菌后的平板中，每个平板中约15-20ml，之后待冷却凝固。 （3）菌悬液制备：我们组分别从英语公园的葡萄树下和生物学院院楼门口采集土样，各称取10g，放入装有90mL无菌水的三角瓶中，震荡20min后静置5min。（4）浓度稀释：在无菌试验台上进行浓度梯度稀释,把土样摇匀，从中吸取1ml 置于事先灭好菌的试管中，再加入9 ml无菌水，再从该试管中吸取1ml土样置
实验报告实验名称实验室平菇栽培法班组 姓名学号日期 成绩教师签名 一、实验目的 1.掌握平菇基本栽培方法及其原理。 2.掌握平菇栽培中器械和培养基的灭菌方法及原理，如高压蒸汽灭菌法、干热灭菌、灼烧灭菌和紫外灯灭菌法等。 3.了解食用菌母种扩大繁殖生产的基本原理,掌握斜面母种的接种和培养方法。 4.掌握平菇栽培中原种、栽培种培养基的制备方法。 5.培养学生自行设计出菇的方案。 二、基本原理 1.平菇是木质腐生菌，生长发育所需各种营养物质均从木屑、棉籽壳、稻草等培养料中获得。平菇生长周期短，从播种到第一批采收一般为30天到40天，栽培方法简便，成功率高。本实验在实验室条件下，用袋装方法出菇。 2.食用菌生产中，培养基、器皿及接种工具的消毒灭菌，是防止杂菌污染，提高食用菌产量的关键措施，灭菌和消毒法主要有物理方法（高温灭菌和紫外线灭菌）、化学灭菌法。 干热灭菌是在保持恒温的电烘箱中进行的,适用于各种耐热的玻璃器皿、棉塞、滤纸、以及不能与蒸汽充分接触的液体的灭菌.一般在160摄氏度持续—2小时,就可达到灭菌的目的.灼烧灭菌可直接在酒精灯外火焰灼烧
灭菌,酒精灯所用的酒精浓度要在百分之95以上. 紫外灯灭菌是接种室(箱)最常用的方法之一,每次在使用前开灯20—30分钟.紫外线可导致细胞内核酸和酶发生变化而使细胞死亡,还可使空气中 氧气产生臭氧,臭氧也具有杀菌作用.因其透射力差只适用于空气及物体表 面的灭菌,有效距离为—2米,以米内为最好. 3.食用菌母种培养基和分离菌种时用斜面培养基，适用于一般食用菌的母种分离与培养用的培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基（即PDA培养基），配成后用加压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。 4.食用菌菌种生产一般按母种——原种——栽培种进行。母种数量少，要进行试管移接扩大培养才能进行生产。 5.原种由母种繁殖而成，由原种扩大培养成栽培种。原种和栽培种生产一般包括配料——装瓶（袋）——灭菌——接种——培养等流程。一般用瓶装或塑料袋装，灭菌压力和时间相应延长。 三、实验器材 1.材料：马铃薯、葡萄糖（或蔗糖）、磷酸二氢钾、硫酸镁、琼脂、75%乙醇溶液、麦粒、棉籽壳、石膏粉、碳酸钙、麦麸 2.器具：锥形瓶、棉塞、超净工作台、烧杯、量筒、漏斗、天平、铁架台、纱布、药匙、PH实纸、接种铲、酒精灯、聚丙烯塑料袋、小试管、牛皮纸、高压蒸汽灭菌锅等 四、实验过程 1、10月7日 ①准备干净的一只试管和一个锥形瓶，贴上标签并制作两个与试管和锥形瓶
酸奶制作实验报告 一、实验目的 通过实验使同学们对酸奶从原材料到成品生产的全过程以及生产组织管理等知识，在生产现场将科学的原理知识加以验证、深化、巩固和充实。并培养学生进行调查、研究、分析和解决工程实际问题的能力。激发学生向实践学习和探索的积极性，为今后的学习和将从事的技术工作打下坚实的基础。 二、实验原理 酸奶是以乳为原料(或加入蔗糖)，杀菌后经乳酸发酵而制成，且具有细腻的凝块和特别芳香风味的乳制品，也叫酸凝乳或酸牛奶，是发酵乳制品。酸奶可以是牛乳在自然状态下进行发酵，也可以经巴氏杀菌或超高温瞬时灭菌后，加入乳酸菌发酵而成。现在生产中采用将原料乳灭菌后加入乳酸菌的方法生产酸奶。因为在自然状态下进行发酵会有杂菌污染，造成酸奶出现异味或发酵失败。 酸奶发酵过程中，原料乳中的乳糖在乳酸菌的作用下转化成乳酸，随着乳酸的形成，溶液的pH逐渐达到酪蛋白的等电点(酪蛋白是乳中的一种蛋白质，等电点时pH为4.64.7)，使酪蛋白聚集沉降，从而形成半固体状态的凝胶体物质。 三、实验材料 纯牛奶、盒装酸奶、白糖、勺子、一次性杯子、保鲜膜、筷子、恒温箱、水浴锅 四、实验步骤
①消毒。将容器（一次性杯子等）、搅拌的工具(勺或筷子)放在超净工作台上，用紫外线对其进行杀菌消毒。牛奶如果是新开封的，本身已消毒得很好，可以不用煮开消毒，可直接放在40℃的水浴锅中预热。若是鲜奶一定要先煮沸消毒，待温度降到40℃左右以不烫手为宜。 ②接种。将温牛奶从水浴锅中拿出，在超净工作台接种。准备工作完成后（用酒精对手进行消毒处理），先将100毫升纯牛奶倒入一次性杯子中，再在往其中加入酸奶（一般比例为5:1-10:1），最后加入6克白糖。原料加完后用筷子搅拌均匀，用保鲜膜将杯子全面封紧。 ③前发酵。放恒温箱中(40℃左右)。一般发酵8一10小时即可，可以根据自己的口味来调整发酵时间，发酵时间越长酸度越大。 ④后发酵。刚做好的酸奶酸味比较淡，口感不够好，应将其放入冰箱冷藏。8一12 h以后即可食用，口感较好，酸甜适中。品尝时还可酌情加入蜂蜜或糖、各种水果。 五、实验结果 牛奶中有乳糖，生物的无氧呼吸可以把糖类分解成乳酸;酸奶制作需要的菌种主要是乳酸菌，由于操作不是在无菌条件下，所以实验前要将器具消毒，保证乳酸菌为优势种;带盖子的瓶子或盒子要拧紧、盖严目的是创造无氧环境。 学生制作的酸奶感觉酸度够，甜度不够，因是加糖比较少。生加糖量以中等大小勺子为单位调节用糖量，因为学生不愿意用天平称蔗糖，觉得那是在做实验而不是食物。
篇一：中药炮制毕业实验报告 实验报告 实习时间： 实习地点： 指导老师： 实习课目： 实习主要内容：清炒、炙法的炮制方法 实验一清炒法 一、实验目的 (1)了解清炒的目的和意义。 (2)掌握炒黄、炒焦和炒炭的基本方法和质量标准。 (3)掌握三种炒法的不同火候，炒后药性的变化及炒炭“存性”的总义。 二、实验原理 炒分清炒和加辅料炒两种。根据妙的火候不同，清炒又分为炒黄、炒焦和炒炭。炒黄多用“文火”，炒焦多用“中火，炒炭多用“武火”。炒制的目的是为了改变药性，提高疗效，降低毒性和减少副代用，矫味、矫臭以及便于制剂等等。 三、实验内容 1．炒黄酸枣仁、王不留行、牵牛子、冬瓜子、薏苡仁。 2．炒焦山楂、槟榔、麦芽、栀子。 3．炒炭蒲黄、槐米、荆芥。 四、实验器材 炉子、铁锅、铁铲、瓷盆、筛子、温度计、天平、竹匾等。 五、实验方法 （一）炒黄 1．酸枣仁取净酸枣仁，称重，置热锅内，用文火炒至鼓起微有爆裂声，颜色微变深，并嗅到药香气时，出锅放凉，称重。 成品性状：本品呈紫红色，鼓起，有裂纹，无焦斑，手捻种皮易脱落。具香气。 2．王不留行取净王不留行，称重，置热锅内，用中火加热，不断翻炒至大部分爆成白花，迅速出锅放凉，称重。 成品性状：本品炒后种皮炸裂，80％以上爆成白花，体轻质脆。 3．牵牛子取净牵牛子，称重，置热锅内，用文火加热，不断翻炒至鼓起，有炸裂声，并逸出香气，取出放凉，称重。用时捣碎。 成品性状：本品炒后色泽加深，鼓起，有裂隙，微具香气。 4．冬瓜子取净冬瓜子，称重，置热锅内，用文火加热，炒至表面略呈黄白色稍有焦斑，香气逸出时，取出放凉，称重。用时捣碎。 成品性状：本品炒后呈黄白色，鼓起，有裂口，微有焦斑。具香气。 5．薏苡仁取净薏苡仁，称重，置热锅内，用文火加热，炒至微黄色，鼓起，微有香气时，取出放凉。称重。 成品性状：本晶呈黄色，略具焦斑，有香气。(二)炒焦 1．山楂取净山楂，称重，分档置热锅内，先用中火后用武火加热，不断翻炒至表面 焦褐色，内部焦黄色，有焦香气逸出时，取出放凉。筛去碎屑，称重。 成品性状：本品表面呈焦褐色，具焦斑，内部焦黄色。具焦香气，酸味减弱。 2．槟榔取净槟榔片，称重，分档，置热锅内，用文火加热，不断翻炒至焦黄色， 焦斑，取出放凉。筛去碎屑，称重。
2016年南方医科大学医学微生物学实验报告 日期 2016年5月22号 一、实验目的 1、掌握培养基制备的原则和一般方法。 2、掌握病原菌的分离与培养方法。 3、掌握油镜的正确使用、细菌涂片标本的制备、革兰氏染色法，熟悉细菌基本形态。 4、熟悉几种常用的细菌生化反应的名称、原理、方法、结果分析及用途。 5、掌握血浆凝固酶试验的原理、方法及用途。 6、熟悉药物敏感性试验方法的种类、原理及应用，掌握纸片扩散法。 7、掌握玻片凝集试验的原理、方法、结果观察与判断。 二、实验器材 1、天平、称量纸、干粉培养基、锥形瓶、量筒、15支试管、试管架、试管筐、5ml 刻 度吸管、平皿、洗耳球、酒精灯 2、脓汁标本1支，粪便标本1支；伊红美兰平板2个，营养琼脂平板2个，伊红美蓝 平板2个，接种环，酒精灯 3、斜面4支、细菌分离培养物（上次实验平板） 题目 脓汁和粪便标本中病原菌的检测 成绩 实验者 作者：马浩楠 3140020007 参与者名字：马浩楠 丁超 王尧鑫 桂文茁 年级专业 2014级医学影像专业 指导老师 罗军
4、斜面培养物4支，营养肉汤4支，生理盐水2支，镜油瓶、拭镜纸1套，吸水纸1 本，载玻片4张，染色瓶，染色架 5、斜面培养物4支，营养肉汤培养物（菌液）4支，半固体琼脂4支，营养琼脂平板4 个，糖发酵管1套，抗菌素纸片1套，眼科镊子2把 6、半固体培养物4支，药敏试验培养物4个，微量发酵管培养物1套。 三、方法与步骤 1、培养基的制备： 培养基称量干粉培 养基(g) 水量(ml) 煮沸(次）分装(ml) 备注 营养琼脂11.4 300 3瓶，500ml 瓶，平板 营养琼脂 2.7 70 3 5 14支×3，中试管，斜面 营养肉汤 1.3 60 1 3 20支×2，小试管，肉汤 半固体琼脂 1.7 60 3 4 14支×3，小试管，高层 （1）营养琼脂培养基的制备：称量11.4g琼脂，置于三角烧瓶中，加入300ml蒸馏水，分2瓶装，用于倒平板。 （2）营养琼脂培养基的制备（用于制作斜面）：称量2.9g琼脂，置于三角烧瓶中，加入75ml蒸馏水，放在电炉上，先后煮沸3次，分15支中试管装，每支试管5ml。 （3）肉汤培养基的制备（用于制作液体培养基）：称量1.1g琼脂，置于三角烧瓶中，加入50ml蒸馏水，放在电炉上，煮沸1次，分15支小试管装，每支试管5ml。 （4）半固体琼脂培养基的制备：称量1.7g琼脂，置于三角烧瓶中，加入60ml蒸馏水，放在电炉上，先后煮沸3次，分15支中试管装，每支试管4ml。 2、细菌的分离培养 平板划线分离法
、目的 全校任选实验课《白酒和葡萄酒酿造与酒评》，是食品、生物工程类专业课。通过本课程的学习，使学生能运用基础课和专业基础课中学过的机械、化学和生物等学科的基础理论和专业知识，来认识与解决各类酿造过程中的具体生产技术问题，熟悉原料的特点和生产菌种的特性，选择合理的工艺流程和操作控制要点。通过本课程的学习，要求学生掌握米酒、黄酒、白酒、葡萄酒和白兰地的发酵工艺与新型白酒勾兑，以及培养学生通过用感官品评技术评价烈酒和葡萄酒酒质量，掌握品酒技能与评酒技术等。 本课程旨在培养学生能在酿酒行业、风味食品和调味品行业以及相关的食品发酵、 酶制剂行业从事技术、工艺和产品开发等研究工作。 本任选实验课专门提供学生酿制米酒、黄酒、小曲白酒、葡萄酒、白兰地酿造实验条件，以及提供白酒与葡萄酒品评实践条件，把酿造学的基本工艺与现代科学技术相结合，在弘扬祖国古代酒文化瑰宝的基础上，结合现代酿酒工艺及科学调酒勾兑方法，使学生能更深刻地体会到我国传统酿造工艺技术的博大精深，从而能利用所学知识不断提高我国酿造工艺技术水平的目的。 实验课共设7个实验项目和白酒香型分类实验，分别是：①米酒酿造②黄酒③小曲白酒酿造④葡萄酒酿造⑤白兰地酿造⑥新型白酒勾兑⑦烈酒和葡萄酒酒评与白酒香型分类。 二、原理与方案 1、米酒酿造原理 糯米（或者大米）含有丰富的淀粉，淀粉在根霉菌淀粉酶的作用下，先转化为麦芽糖，再转化为葡萄糖。受到酒曲里酒化酶的作用部分葡萄糖变为酒精。其味甘甜柔顺，所以称为甜酒。 2、小曲白酒酿造原理 用谷物、薯类或糖分等为原料，经糖化发酵、蒸馏、陈酿和勾兑制成的酒精浓度大于20%(V／V)的一种蒸馏酒。 小曲白酒的生产分为固态发酵法和半固态发酵法两种，半固态发酵法又分为先培菌糖化后发酵和边糖化边发酵两种典型的传统工艺。广东主要的方法是先培菌糖化后发酵工艺。此工艺特点是采用药小曲为糖化发酵剂，前期固态培菌糖化，后期半固态发酵，再经蒸馏、陈酿和勾兑而成。 3、葡萄酒酿造 葡萄酒是用新鲜的葡萄或葡萄汁经发酵酿成的酒精饮料。通常分红葡萄酒和白葡萄酒两种。前者以带皮的红葡萄为原料酿制而成；后者以不含色素的葡萄汁为原料酿制而成。 4、烈酒和葡萄酒酒评与白酒香型分类 4.1白酒品评 白酒是一种味觉品，它的色、香、味、格的形成不仅决定于各种理化成分的数量，还决定于各种成分之间的协调平衡、微量成分衬托等关系，而人们对白酒的感官检验，正是对白酒的色、香、味、格的综合性反映。这种反映是很复杂的，仅靠对理化成分的分析不可能全面地、准确地反映白酒的色、香、味、格的特点。因此，对白酒品质的鉴定，更多地是依靠感觉器官的尝评方法来弥补其不足。就现阶段的实际情况而言，任何精密仪器都代替不了人的味觉和嗅觉，用气相色谱仪分析白酒类微量香味成分对1/10万g含量的物质是可测定出来的，但超过这个极限则无法检测。而人的感官对1／100万g的含量的微量成分却能感觉出来，尤其有的感觉指标是不能用数据表示的。因此虽然现代的科学仪器能把白酒的微量成分分析出来，但是仍然不能准确地测定白酒内在质量，只能作为一种辅助
发酵工艺学实验内容 实验一红曲的生产（4学时） 一、实验目的要求 1、了解红曲色素的特点。 2、学习红曲生产的工艺技术。掌握红曲酱腐乳酿造工艺及控制要求。 二、实验原理 红曲霉是我国用来生产红曲色素的传统菌种，该菌产生的红曲色素由于安全性高，热稳定性强，色泽鲜亮已得到广泛的应用。以大米或其他粮食作物为原料的红曲霉培养物称红曲。红曲有杀菌和抑菌作用，将红曲应用在调味品生产中或鱼、肉腌制中，具有防腐作用。红曲霉的菌丝有横隔、多核。在麦芽汁琼脂培养基上，生成先白色后红色的扩展性菌落，子囊孢子数目甚多，一般不产生分生孢子，常用液体培养作扩大菌种。 三、实验材料与试剂 1、菌种紫红曲霉(Monascus sp.) 2、培养基 斜面培养基配方：7.2 g麦芽糖、可溶性淀粉5 g、蛋白胨3 g、冰醋酸0.2 mL、琼脂2~3g、水100 mL。 种子培养基配方：可溶性淀粉3 g、硝酸钠0.3 g、黄豆粉0.5 g、水100 mL。 发酵培养基配方：大米500 g、红曲霉0.5 g、冰醋酸（95%）1.5 g, 水适量。 3、仪器摇床、超净工作台、三角瓶、无菌水试管、灭菌锅、恒温培养箱等。 四、实验操作步骤 1、培养基的配制：按培养基的配方，配制斜面、液体、发酵培养基，并灭菌冷 却备用。 2、斜面菌种活化：用接种环挑取冰箱保存的红曲霉菌种一环，在新鲜斜面上划 线，于30 ℃培养箱内培养4～7 d，长满红色孢子为宜。 3、种子培养液的扩大培养：用接种针挑取1～3环活化的红曲霉于液体试管或 三角瓶中，30 ℃摇床培养3～5 d，菌丝球生长小而密。 4、三角瓶固体发酵：将扩大培养的液体种子接种于发酵培养基中，拌匀后于 30 ℃培养，每1 d 摇散菌丝，直至大米变成红色为止。 思考作业： 1、红曲有何功能？ 2、红曲制作过程中应注意的事项？
果酒制作的实验报告 组长： 组员： 一、实验目的： 掌握果酒发酵技术、澄清处理技术及产品分析。 二、实验内容： 1、葡萄酒酵母的扩大培养； 2、掌握果酒发酵技术； 3、果酒的澄清处理技术。 三、实验材料：新鲜葡萄一斤，玻璃瓶 4 个， 75% 酒精 四、原理： （1 ）用到的微生物是酵母菌，它的代谢类型是兼性厌氧。 ①有氧呼吸的反应式： C6H12O6+6O2+6H2O→ 6CO2+12H2O+能量 ②无氧呼吸的反应式： C6H12O6→2C2H5OH+2CO2+能量 （ 2 ）影响酒精发酵的主要环境条件有温度、氧气和pH 。 ①酵母菌生长的最适温度是20℃ ； 酒精发酵一般将温度控制在18～25℃ 。 ②酒精发酵过程中，要保持缺氧、酸性环境。 五、实验步骤： 1 、清洗消毒实验用具，先用温水反复冲洗几次, 再用体积分数为75% 的酒精擦拭消毒，晾干待用。 2 、取葡萄一斤，去除枝梗和腐烂的子粒。用清水冲洗葡萄 1 ～2 遍除去污物（注意不要反复多次冲洗）。
3 、将 1/ 4 左右的葡萄放入榨汁机中，榨汁。其余 3/4 的葡萄用手挤碎（手上套塑料布， 以防杂菌污染）。 4 、将其装瓶（但注意注入的果汁量不要超过塑料瓶总体积的 2/3 ），密封瓶口 六、 对照实验 ： 实验组 适宜温度（ 20 ℃），其 避光，其余条件正常 不与金属接触，其余条件正常 大瓶，其余 余条件正常 条件正常 室温 光照正常， 其与金属接触（对口感和质量均 小瓶，其余 （≤18 ℃）， 余条件正常 有影响），其余条件正常 条件正常 对照组 其余条件正常 七、 实验记录 ： 实验起止日期： 2013 年 5 月 7 日 ~2013 年 5 月 17 日 日期 正常 光照 匀浆（榨汁机） 小瓶 10 、 瓶中无气体，表面长毛 瓶内气体较多，表面长毛 液体内有气泡，但瓶内 瓶内有气体，酒味较浓 20 无气体，颜色较深，表 面长毛数最多。 10 、 瓶内无气体，有酒味 瓶内气体较多，有油漆味 颜色深，酒味最浓，表 瓶内有气体，有酒味 21 面长毛数最多 10 、 瓶中物质尚未分层，属 瓶内有较多的气体，瓶中 瓶内物质已分层， 1/3 瓶内中产生的气体的 22 于混合状态，毛几乎消 物质尚未分层，属于混合 固体 ,2/3 液体，表面长 含量最多，酒味最大， 失 状态，毛几乎消失，有油 毛，但毛变少 瓶内物质尚未分层，属 漆味 于混合状态。 10 、 瓶中葡萄皮上的色素部 颜色较深，酒味大，开始 颜色最深，酒味较大， 颜色不深，分层不明 23 分进入液体中， 为分层，分层，葡萄颗粒较完整 分层，毛较多（与 22 显，葡萄颗粒最明显 有酒味，葡萄粒较多 日相同） 10 、 颜色加深，有酒味，葡 颜色加深，酒味大 酒味中混有异味，毛较 酒味浓，与 23 日相同
发酵工艺实验—— 糯米甜酒发酵 xxxxxxxx xxx xxxxxxx 指导老师：xxx 一、实验目的 1、初步学会制作糯米甜酒。 2、学习糯米甜酒发酵的原理和方法。 3、学习糯米甜酒的鉴定、品评。 二、实验原理糯米甜酒是我国传统的发酵食品，其产热量高，酒度低，风味独特，具有良好的营养价值。由于酵母不能直接利用淀粉，因此大多数的甜酒酿是将糯米或大米经过蒸煮糊化，利用酒药中的根霉和米曲霉等微生物将糊化后的淀粉糖化，将蛋白质水解成氨基酸，然后酒药中的酵母菌利用糖化产物进行生长和繁殖，并通过糖酵解途径将糖转化成酒精，经长时间酿制而成的产品。三、实验材料 糯米1斤，酒曲酵母，蒸锅 1 个，多空蒸盘 1 个，托盘 1 个，纱布，筷子1双，试管 1 支，恒温箱，带盖玻璃瓶，pH 试纸，酒精计，温度计等 四、实验方法与步骤实验流程： 洗米，浸泡T蒸饭T摊冷T拌酒曲T落缸搭窝T培养成熟T检测 1、洗米，浸泡：称米、洗米至水清、泡米水高出水面10cm以上，浸泡12到16小时, 至可以 用手碾碎即可，沥干水分。 2、蒸饭：在蒸锅里放上水，蒸屉上垫一层白布，烧水沸腾至有蒸汽。将沥干的糯米放在布上 蒸熟，中间掏窝方便蒸汽上行，约 1 小时。自己尝一下就知道了。没有这层布，糯米会将蒸屉的孔堵死，蒸不熟。尝一尝糯米的口感，如果饭粒偏硬，就洒些水拌一下再蒸一会。 3、摊冷：将蒸好的糯米端离蒸锅，倒在托盘中冷却至室温。间或用筷子翻翻以加快冷却。在 冷却好的糯米上洒少许水，将酒曲均匀的拌在糯米中，用手将糯米弄散摊匀，用水要尽量少。 4、落缸搭窝：转入容器，压实，中间扒一个小窝，然后密封。 5、培养成熟：置于30C的恒温箱中培养，如果米饭变软，表示已糖化好；有水有酒 香味，表示已有酒精和乳酸，即可停止保温。扭松盖子放在约80C热水中烫10min , 杀死其中的微生物和酶，停止其活动。这样，甜酒酿就制作成功。 6、检测：测定酒精度，酸度，可溶性固形物含量，品评。 五、实验结果 (1)实测温度：21.0C； (2)酒精度：10.0； ( 3)可溶性固形物含量：35.1 ； ( 4) pH： 3.6 ； ( 5)品评结果：有黄酒应有的香气，有醇香，但不浓郁( 22 分)；甜美尚爽口，酒味较淡薄( 36 分)；具有本类黄酒的风格，成分较为协调( 12分)； 品评总分：70 分 六、结果分析 （1）糖的分析：大米中的淀粉转化成单糖和低聚糖，这更有利于它快速补充人体的能量，以及改变口味。主要的单糖和双糖有葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖、异麦芽糖。糯米酒甜度较淡，原因可能是加曲量略少。当淀粉被糖化越充分，它的糖度就越高，所以酒就越甜。还有可能在糯米拌酒药时不够均匀，导致糯米粒之间的水分含量不同，这些因素都会引起酒的糖度的变化。