1移动基因：又叫转位因子（transposable elements）,由于它可以在染色体基因组上移动，甚至
可在不同染色体间跃迁，故又称跳跃基因（jumping gene）。
2断裂基因：真核细胞的结构基因，其核苷酸序列中含有与氨基酸编码无关的DNA间隔区段，
从而被分割成不连续的若干区域。将这种编码序列不连续，有间隔区段的DNA片断称为断裂基
因
3重叠基因：不同基因的核苷酸序列有时为相邻两个基因共用，将核苷酸彼此重叠的两个基因
称为重叠基因（overlapping genes）。
4假基因：在珠蛋白基因簇（gene cluster）各片断核苷酸序列分析时发现，除了有正常的功能基
因之外，还有功能失活的特殊序列片断，它不能行使表达功能。该类无表达功能的畸变核苷酸
基因序列片断，称为假基
5同尾酶：有一些限制性核酸内切酶识别的碱基顺序不完全恒定，即识别顺序不同，但酶切后
产生同样黏性末端的两种酶称为同尾酶，如BamHⅠ和Bgl Ⅱ。
6质粒：细菌存在于细胞质中的一种独立于染色体以外的遗传成分，是由环状的DNA分子组成
的复制子。质粒有我复制和调控系统，可以在胞浆内自主复制，把携带的遗传信息通过自我复
制的子代质粒，可随细菌分裂而进入子代菌体中。
7COS质粒，粘性质粒（Cosmid）带有λ噬菌体的Cos位点和整个pBR322的DNA顺序。经感
染进入细菌细胞以后，它就好象质粒那样在细胞中进行复制。易环化和扩增。分子量小，可包
装30-45kb外源基因，可由Ampr抗性筛选，常用于构建基因文库。
8Cos位点（Cohesive-end site）：λDNA为线状双链分子，两端各有几个碱基的单链互补粘性末端，通过粘性末端的互补作用形成双链环形DNA。这种由粘末端结合形成的双链区段即Cos位点。
9.COS细胞：用一个复制起始部位缺失的SV40突变种感染猴细胞，由于病毒DNA不能自主复
制，便整合到宿主染色体DNA中，病毒DAN?,早期基因表达产生功能性的T抗原，这样的细
胞就叫COS细胞。
10基因组文库：分离真核生物中某种DNA成分, 通常是分离供体细胞中的染色体DNA，酶切
后，将这些染色体DNA片段与某种载体相接，而后转入大肠杆菌，建立包含有真核细胞染色体
DNA片断的克隆株, 这种克隆株群体称基因组文库。
11cDNA文库：以mRNA为模板在反转录酶的作用下将形成的互补DNA（cDNA ）建立基因文
库（gene library）
12转染：病毒（含噬菌体）DNA及其重组子DNA导入宿主细胞（或细菌）的过程称转染。
13转导：以噬菌体为媒介，将外源DNA导入细菌的过程称转导。
14 转化：以质粒作为克隆载体将目的基因导入宿主细胞。使原来细胞的遗传基因和遗传性发生
15启动子：是位于结构基因上游，转录起始调控所必需的一段DNA序列，内含-35区（与σ因
子结合）和-10区（和核心酶结合）的保守序列。当启动子与全酶结合后可在+1转录起始点开
始转录。
16 终止子：位于一个基因编码区下游提供终止信号的DNA序列，可以被RNA聚合酶识别并
发出停止mRNA合成的信号。
17起始密码子：编码多肽链的第一位氨基酸的密码子AUG（或A TG），编码甲硫氨酸（蛋氨酸）。
在细菌中也有罕见的其实密码子GUG，编码缬氨酸。其起始表达作用AUG＞GUG。
18终止密码子：有三个密码子（UAA, UAG，UGA），为终止密码子，只表示链的终止，不表
达氨基酸。
19 锌指结构：由两个半胱氨酸残基和两个组氨酸残基通过位于中心的锌离子结合成一个稳定的
指状结构，表面暴露的碱基及其极性氨基酸与DNA结合有关。
20粘性末端：是指DNA分子在限制酶切割后产生一条链多出几个碱基的互补对称的突出末端，
若5’突出称5’粘性末端，他们能够通过碱基间的配对而重新环化起来，若平末端的DNA片段
则不易重新环化。
21PCR：聚合酶链反应，以DNA变性复制的某些特性为原理，以目的DNA片段为模板, 利用
酶促反应（Taq酶），在特定引物的引导下，将加入的4种dNTP由引物沿模板从5’→3’按碱基
配对原则, 形成与模板DNA互补的半保留复制链, 新合成的链又可作为下一轮循环的模板。经
25-30个循环产物呈2n指数扩增，由pg—μg（紫外可见），可获得基因片段。
22Genomic DNA：基因组DNA，组成生物基因组的所有DNA，包含是一个生物体的全部遗传
信息，即DNA的全部核苷酸序列。
23Intron：即间隔子（内含子），与原核的蛋白质编码基因相比，真核蛋白质编码基因最主要的
特点是其转录区的编码序列是间断的不连续的，其中非编码序列叫间隔子。它是转录物被剪除
掉的相应DNA分子。
24Exon：即表达子（编码序列），与原核的蛋白质编码基因相比，真核蛋白质编码基因最主要
的特点是其转录区的编码序列是间断的不联系的，其中编码氨基酸的序列叫表达子。它是转录
物经加工后被保留的相应的DNA分子。
25转录（transcription）:遗生物体以DNA为合成RNA的过程称为转录。RNA聚合酶通过与一
系列组分构成动态复合体，并以DNA序列为遗传信息模板，催化合成序列互补的RNA，包括
转录起始、延伸、终止等过程。
26翻译(t ranslation): 在多种因子辅助下，细胞内以mRNA模板，通过tRNA识别该mRNA的三
联体密码子和转移相应氨基酸，进而按照模板mRNA信息依次连续合成蛋白质肽链的过程。
27顺式作用元件：顺式作用元件为一些能与DBP结合的特定序列DNA片段,位于真核基因上游,
含有特有的相似或一致序列,决定转录起始位点和RNA聚合酶的转录效应。按功能可分为启动
子、增强子、沉默子、衰减子、终止子等DNA序列片段。
28反式作用因子：反式作用因子是一组能直接或间接地与DNA的顺式作用元件特定序列结合，
发挥调节作用的核内非组蛋白，即DNA结合蛋白（DBP），DBP又称转录因子（transcription
factor,TF）分通用转录因子及转录调节因子两大类。基因表达的组织特异性及细胞周期特异性受
上述元件和因子的相互作用所决定。
29转录因子，能够结合在某基因上游特异核苷酸序列上的蛋白质，活化后从胞质转位至胞核，通过识别和结合基因启动子区的顺式作用元件,启动和调控基因表达
30瞬时表达：外源基因进入宿主细胞后，不整合到受体细胞染色体而立即转录，出现基因产
物，它只在细胞内进行暂时性表达，不能随细胞传代，随后逐渐降低或消失。
31稳定表达：外源基因进入真核细胞后，可将基因整合到细胞染色体上，可随细胞转录表达
和传代。
32tk基因：胸苷激酶基因？胸腺嘧啶核苷激酶简称胸苷激酶（thymidine Kinase,TK）在所有真
核细胞中都有表达, 是嘧啶生物合成补救代谢途径中的一个关键酶, 它可催化胸苷磷酸化转变
成为dTMP, 继续磷酸化生成dTTP, 参与DNA的生物合成。
33亮氨酸拉链：存在与蛋白C末端，为两组走向平行.带亮氨酸的α—螺旋形成的对称二聚体，
约为30个氨基酸，每两个亮氨酸之间隔有六个氨基酸，于是每两圈螺旋就有一个亮氨酸，排成
一排，从而在2个α-螺旋的蛋白分子之间形成一条拉链。
34基因突变：是基因组DNA分子在结构上发生碱基对组成或排列顺序的改变（通常它只涉及
基因中部分序列的变化），并引起个体表型的改变, 而使生物体发生遗传性变异。
35同义突变：是指碱基被替代后, 没有改变产物氨基酸序列, 这是与密码子的简并性相关, 如
CTT、CTC、CTA、CTG的第3位碱基互相替代后其编码表达的产物均为亮氨酸,因此这种突变
不产生突变效应。
36错义突变：是指碱基序列的改变引起了产物氨基酸的序列改变。有些错义突变严重影响到蛋
白质活性甚至完全失去活性，从而影响了表型。如果该基因是必需基因，则该突变为致死突变。
37.无义突变：某个碱基的改变可使某种氨基酸的密码子突变为终止密码子。如赖氨酸的密码子
AAG突变为终止密码子TAG,使肽链合成过早终止, 因而蛋白质产物一般没有活性。若是发生在
基因DNA的3’末端处, 它所表达产生的多肽常有一定活性或有部分活性, 这种突变又称为渗漏
变型（leaky mutation）。
38限制性核酸内切酶：是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列，并由此切割
DNA双链结构的核酸内切酶
39基因拼接：将有共同限制性内切酶切点的基因连接起来形成多种基因杂合体，这个过程称为
基因拼接。此外，也可根据需要将具有协同效应的不同基因进行接拼。
40基因缺失：将原基因中的非功能区域的编码子人为地使之缺失的过程称为基因缺失，所表达
的产物相对分子质量虽然小了，但有时可提高表达效率，有时还可降低一些毒性作用。
41重组病毒载体：以SV40病毒为基础，经设计改造后的克隆载体。主要由两种类型：取代型
的重组病毒载体和重组的病毒-质粒载体。
42重组质粒型载体：即重组病毒-质粒载体，这类载体只取病毒基因组中维持在哺乳动物中进行复制的有关序列，使它与一个细菌质粒融合，这样的重组体也能够在大肠杆菌中进行复制和增殖，不过这种载体（重组体）不能够被包装成病毒颗粒，不能出现裂解感染的情况，它实际上是一种类似于质粒的DNA分子载体。
43基因工程多肽疫苗：使微生物对人体具保护作用的抗原基因经体外重组表达后所制备的生物
活性多肽类疫苗称基因工程多肽或亚单位疫苗。其表达系统可以是酵母，也可以是哺乳动物细
胞，若无需糖基化的多肽疫苗甚至可在大肠杆菌等原核细胞中表达。
44基因置换(g ene reptacement)：是指将致病基因整个地被有功能的正常基因所置换，使致病基
因永久地得到更正。但操作难度大，有伦理学问题。
45基因修正(g ene correction)是指将致病基因的突变碱基序列得以纠正，而正常序列部分予以保
留，使突变的致病基因恢复正常功能。即使致病基因的突变序列纠正为正常序列（用碱基点突
变技术）。
46基因修饰(gene augmentation)则是指将目的基因导入缺陷细胞或其它细胞，目的基因的表达产
物可修饰和改变缺陷细胞的功能或使原有的功能得到加强。
47基因失活(gene inactivation)就是应用反义技术(antisense technology)特异封闭某些基因的表达，
以达到抑制或阻止某些有害基因的表达。SiRNA的基因干扰可造成靶基因（异常基因）的失活
（或沉默）。
48转基因动物：就是把外源性目的基因导入动物的受精卵或其囊胚细胞中，后改用注入受精卵的任何一个前核，并在细胞基因组中稳定整合，再将合格的重组受精卵或囊胚细胞筛选出来，采用借腹怀孕法寄养在雌性动物（foster mother）的子宫内, 使之发育成具表达目的基因的胚胎动物, 并能传给下一代。这样，生育的动物为转基因动物。这类动物由于外源性目的基因的稳定存在而赋于子代动物个体。
49动物克隆：动物克隆是一种通过核移植过程进行无性繁殖的技术。发育早期的动物胚胎细胞，
或成年动物的体细胞，经显微手术移植到去掉细胞核的卵母细胞中之后，在适当的条件下，可
以重新发育成正常胚胎。这种胚胎被移植到生殖周期相近的母体之中，可以发育成为正常动物
个体。经过核移植而产生的动物，其遗传结构与细胞核供体完全相同。这种不经过有性生殖过
程，而是通过核移植生产遗传结构与细胞核供体相同动物个体的技术，就叫做动物克隆。
50基因敲除：是向正常生物个体内引入某个突变基因位点而选择性地使某特定基因功能失活的
技术，可培养出靶向性剔除某基因的小鼠，而导致行为特性改变。
51 ES细胞：胚胎肝细胞，不仅具有全能分化能力，而且可以在体外培养建立细胞株
52基因组：表示某物种单倍体的总DNA。对于二倍体高等生物其配子的DNA总和即为一组基
因组不同生物基因组数目不同。
53基因表达：是目的基因DNA在导入的细胞内转录成mRNA, 再以mRNA指导翻译成蛋白质。
54RT-PCR：即逆转录PCR，先在逆转录酶的作用下以mRNA为模板合成DNA,再以cDNA为
模板进行PCR反应。这样低浓度的mRNA被扩增放大易于检测。是一种快速、简便且敏感性
极高的检测RNA的方法，可用于分析基因的转录产物、克隆cDNA及合成cDNA探针、改造
cDNA序列等。
55载体可以插入核酸片段、能携带外源核酸进入宿主细胞，并在其中进行独立和稳定的自我复制的核酸分子
56基因基因就是指编码有功能蛋白质多肽链或RNA分子所必须的全部核酸序列。
1 什么叫做基因？何谓基因的新概念？基因的主要功能是什么?答：基因就是指编码有功能蛋白
质多肽链或RNA分子所必须的全部核酸序列。所谓基因的新概念是随着近年分子生物实验技术
的发展从分子水平上研究基因的结构和功能，提出的移动基因，断裂基因，重叠基因，假基因
等基因的新概念。功能：编码蛋白质或者RNA分子基本遗传信息的基本遗传单位，是构成DNA
的功能单位。
2真核细胞基因组中的基因常有内含子存在，能否在原核细胞中表达？能，为什么？不
能，为什么？
不能，因为原核细胞缺乏对真核基因中内含子的剪接功能和转录后加工系统。原核生物
必须有相应的原核RNA聚合酶可识别原核细胞的启动子, 以催化RNA的合成。
基因表达是以操纵子为单位，操纵子由数个相关的结构基因和调控功能的部位组成的。
因此在构建原核表达载体时必须有1个强的原核启动子及其两侧的调控序列。
3试述DNA分子的结构及其意义。
答：DNA是一反向平行的互补双链结构，DNA是右手螺旋结构。
DNA双螺旋结构的稳定横向靠两条链间互补碱基的氢键维系，纵向则靠碱基平面的疏水
性堆积力维持。意义：双链碱基互补特点揭示了DNA复制时两条链可分别作为模板生成
新的子代互补链，从而形成遗传信息稳定传递的半保留复制的机制。
4 构建cDNA文库的意义？常用载体及构建过程如何？
答：意义：通过构建cDNA文库能直接分离到生命活动过程中的一些调控基因及了解这些基因所
编码的蛋白质的相互作用关系．因此cDNA文库的构建是基因克隆的重要方法之一，从cDNA文
库中可以筛选到所需的目的基因，并直接用于该目的基因的表达。它是发现新基因和研究基因
功能的工具。常用载体是质粒（λ噬菌体）。过程：1.制备mRNA 1)取材：mRNA约占总RNA
的1－5％，所以应选用目的基因mRNA表达最丰富的组织细胞为材料来源，如获胰岛素基因，
由应以胰岛β细胞为原始生物材料，细胞因子基因应选用经抗原或丝裂原刺激培养的淋巴细胞
为材料；2)从总的RNA中分离mRNA：将提取的mRNA在寡聚脱氧胸苷酸[ oligo(dT) ] 纤维素
中进行亲和层析 2.第一股cDNA合成1）以Oligo(dT) 为引物：从模板3’末端开始，沿模板
的3’→5’方向合成, 对于较长的mRNA分子很难得到全长cDNA ；2）随机引物：以6～8个核
苷酸为随机引物，从mRNA的不同结合点合成全长cDNA第一链（RNA-DNA）3.第二股cDNA
的合成⑴自身引导法；⑵置换合成法；⑶外加引物合成法 4.cDNA与载体连接和导入宿主
细胞
5构建基因组文库的意义及构建过程如何？
答：意义：提供全套遗传信息, 即完整的基因组DNA,可以研究基因组中5’端控制基因转录的调
控序列, 内含子的分布和作用, 以及重复序列的数量分布及大小
过程：⑴分离纯化基因组DNA,提取哺乳动物细胞染色体DNA；⑵制备全部基因组的DNA
片断。①机械断裂法:用超声波或高速搅拌DNA溶液断裂片段两端没有与克隆载体匹配的粘末
端，因此插入载体之前还需要进行修饰加工，少用②限制性内切酶降解（鸟枪法）过去用EcoR
Ⅰ,现在用Sau3A断裂片段两端有与克隆载体匹配的粘末端，可以直接与处理过的载体连接。⑶
DNA片断与载体的连接包装常用载体：粘性质粒λ噬菌体酵母人工染色体
①基因组DNA +粘性质粒——重组DNA——转化细菌——菌落
②基因组DNA +λ噬菌体——重组DNA—包装成噬菌体——感染细菌——噬菌斑
1个克隆含有基因组的某个片段，整个克隆群体就包含基因组的全部基因片段总和。
6什么是限制性核酸内切酶？
限制性核酸内切酶是可以识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的
一类内切酶，简称限制酶。根据限制酶的结构,辅因子的需求切位与作用方式，可将限
制酶分为三种类型，分别是第一型（Type I）、第二型（Type II）及第三型（Type III）。
Ⅰ型限制性内切酶既能催化宿主DNA的甲基化，又催化非甲基化的DNA的水解；而Ⅱ型
限制性内切酶只催化非甲基化的DNA的水解。III型限制性内切酶同时具有修饰及认知
切割的作用
7.链终止DNA测序法基本原理是，聚丙烯酰胺凝胶能把长度只差一个核苷酸的单链DNA
分子区分开，这意味着在长10-1500个核苷酸的范围内，所有分子经电泳后可成为一系
列可分辨的条带，单链DNA分子的序列由与之互补的多核苷酸链的酶促合成来判定，互
补链在某一特定的核苷酸位置即加入双脱氧核苷酸的位置终止。又称Sanger（桑
格）双脱氧链终止法。是Sanger于1975年发明的。测序过程需要先做一个PCR反应。
PCR过程中，双脱氧核糖核酸可能随机的被加入到正在合成中的DNA片段里。由于双脱
氧核糖核酸多脱了一个氧原子，一旦它被加入到DNA链上，这个DNA链就不能继续增加
长度。最终的结果是获得所有可能获得的、不同长度的DNA片段。目前最普遍最先进的
方法，是将双脱氧核糖核酸进行不同荧光标记。将PCR反应获得的总DNA通过毛细管电
泳分离，跑到最末端的DNA就可以在激光的作用下发出荧光。由于ddATP, ddGTP, ddCTP,
ddTTP（4种双脱氧核糖核酸）荧光标记不同，计算机可以自动根据颜色判断该位置上碱
基究竟是A，T，G，C中的哪一个。
8试绘图并说明大引物PCR定点诱变法的过程。
答：图在P183页
预先设计一个含有突变序列的引物2，第一轮以引物2和引物3扩增出短片段DNA 。
待PCR产物分离纯化后除去原来的引物，将PCR扩增产物作为大引物，并与引物1一起
再对靶基因进行第二轮扩增，其PCR产物即为突变的DNA。
9.何谓基因工程的四大里程碑和三大技术发明？答：四大里程碑：1944年Oswald报道肺炎球菌转化实验，明确遗传物质是DNA；1953年James waston和Francis Crick阐明了DNA双螺旋结构(半保留复制及其中心法则)；遗传密码子的破译；基因转移载体的发现。三大技术发明：工具酶的发明（内切酶、合成酶、连接酶）；基因合成和测序（合成仪、测序仪）；PCR技术（PCR扩增仪）。：
10 基因重组是常用哪几种载体？其共同特点如何？答：常用载体的种类：质粒、噬菌体衍生
物（COS、M13）、动物病毒；共同特征：①自主复制②易于扩增分离纯化③有非必需区④有单
一酶切位点（多克隆位点）单一酶切位点：一种酶在一个载体上只有一个酶切位点；多克隆位
点：一个载体上的某一个区域含有多个单一酶切位点⑤有选择标记基因⑥表达载体还应有表达
调控元件（启动子、增强子、终止子,SD序列）
11作为理想的质粒载体有哪些基本条件？
答：作为理想的质粒载体，应具备以下几个条件（1）能自主复制，即本身是复制子（2）具有
一种或多种限制酶的单一切割位点，并在此位点中插入外源基因片段，不影响本身的复制功能；
（3）在基因组中有1-2个筛选标记，为寄主细胞提供易于检测的表型特征，（4）分子量要小，
多拷贝，易于操作。
12什么叫插入失活，举例说明之？P104
答：在含某个基因的载体中，将目的基因DNA片段插入该基因，导致该基因的功能失活。
（4分）如：抗性基因的插入失活筛选，含Tetr和Ampr基因的载体，若将目的基因插
入Tetr基因，导致Tetr基因失活，形成重组质粒Tets和Ampr。
13如何从所克隆到的基因重组体载体中鉴定基因的存在和正确性？
答：（1）重组子大小鉴别筛选：重组子中装有一段较大分子量的外源性基因，其分子量明显比原载体大很多，因此可将提取的重组载体和原载体，用一种限制性内切酶消化后，直接进行凝胶电泳，从而据其电泳特性而初步筛选重组子中是否插入外源基因片段。（2）酶切鉴定：对于筛选出的具有重组子的菌株，经小量培养后，再分别提取原载体或重组载体DNA，根据已知重组时外源基因两端的酶切位点，用相应的两种内切酶进行酶解，经琼脂糖电泳后，就可以看出载体中是否含有目的基因片段，以及有DNAmarker条带对比分析可得知插入基因片段的大小。（3）PCR筛选法：利用能与插入基因片段两端互补的特异引物，以少量抽提的重组子DNA为模板进行PCR分析，能扩增出特异片段的转化子为携有目的基因的重组子（4）原位杂交：在培养基平板上的菌落或噬菌斑按照其原来的位置原位不变的转移到滤膜上，并在原位溶菌裂解，DNA变性和用特异探针进行杂交，从而鉴定出含有重组子的菌落或噬菌斑。
14、质粒单酶切点的基因连接如何降低本底和防止自我环化和提高连接效率？
克服这一缺点的方法是：用细菌的或小牛肠的碱性磷酸酶（BAP或CAP），预先处理线性的载体DNA分子，以移去其末端的5/-P基团，于是在连接反应中，它自己的两个末端就再也不能被连接酶共价连接起来了。这样形成的杂种DNA分子的每一个连接位点中，载体DNA都只有一条链是外源DNA连接上的，而另外一条链由于失去了5/-P基团，不能作此连接，故留下一个具有3/-OH和5/-OH的缺口，尽管如此，这样的DNA分子仍然可以导入细菌细胞，并在寄主细胞内完成缺口的修复工作。
15如何利用抗体标记基因筛选阳性克隆？
答：大多数质粒载体均带有抗生素抗性基因，常见的有抗氨苄西林基因，抗四环素基因等，当带有完整抗性基因的载体转化抗性细胞后，所有转入载体的细菌都获得了抗性，被转化的阳性克隆菌能在相应抗生素的琼脂平板上生长，并形成菌落，而未被转化的原宿主菌则不能生长，据此可筛选携带外源基因的重组DNA转化子。在含有两个抗性基因的载体中，如果目的基因DNA片段插入其中一个抗性基因，就会导致该抗性基因的功能失活，用两个分别含不同抗生素药物的平板进行对照筛选，可筛选出阳性重组子克隆菌体。
16真核表达调控的顺式作用元件有哪些？其作用特点是什么？答：顺式作用元件有：启动子，增强子，沉默子，衰减子，终止子。作用特点：是能够与DNA结合蛋白质结合的特定序列的DNA片段，决定转录起始位点和RNA聚合酶的转录效应。
真核表达调控的反式作用因子有哪些？其作用特点？答：反式作用元件：主要分为通用转录因子和转录调节因子两大类。作用特点：一，同一DNA序列可被不同蛋白质识别；二：同一蛋白质因子可与多种不同DNA序列发生联系，多通过蛋白质-蛋白质先结合再影响DNA。三：蛋白质-蛋白质或蛋白质-DNA的结合，导致构象上细微的改变，从而发挥调控作用。四：反式作用元件在合成过程中有相当大的可变性和可塑性。
17、目的基因表达系统有哪几种？其特点如何？
1）细菌表达系统：采用大肠杆菌。表达水平高，约占菌体总蛋白的10％－40％，不能糖基化，产物稳定性较差，表达产物不具有天然蛋白质构型，大多聚积在细菌包涵体中，分离纯化较复杂；2）酵母表达系统：采用啤酒酵母或毕氏酵母。表达水平介于细菌与哺乳动物细胞之间，表达产物接近天然蛋白构型，虽能糖基化，但糖基化结构和数量有一定差异，多数能分泌到胞外培养液内，分离纯化较简易，无需进行复性加工；3）昆虫细胞多角体病毒表达系统：采用对昆虫细胞敏感的多角体病毒DNA。表达水平1－500mg/L,具有良好的翻译后修饰功能，表达产物接近天然的蛋白构型，糖基化结构和数量稍有差异。4）哺乳动物细胞表达系统：常用中国仓鼠卵巢细胞为表达系统。表达水平仅为细菌表达量的5％，表达产物更接近天然蛋白构型，有正确糖基化结构与数量，通常分泌于胞外培养液内，分离纯化较简易，无需进行复性加工可获得
高活性生物活性产品。
18基因工程疫苗研究开发常用的技术途径有哪些？
19基因治疗展望和应用如何？
答：展望：尽管基因治疗目前还存在很多问题，但它是人类治疗疑难疾病的新方法，新技术，随着研究和应用的不断发展，不断深入，技术不断完善成熟，基因治疗将会在人类常见病和多发病及疑难病的有效治疗中发挥巨大作用，许多原来视为“不治之症”的疾病将应用这先进技术得到治愈，其应用前景极为广阔。应用：1，现在已有部分基因的基因治疗计划在执行标记或治疗。2，基因治疗人体试验，到目前为止，已有部分经批准或经实施。3，有部分人体基因治疗计划将开始进行。基因治疗的临床应用
（一）遗传性疾病的基因治疗
（二）肿瘤的基因治疗（1）抑癌基因转移的基因治疗
（2）反义寡核苷酸的原癌基因失活疗法
（3）药物自杀基因在肿瘤基因治疗中的应用
（4）癌抗原基因转移的肿瘤基因治疗如打破原先的肿瘤免疫的耐受，建立肿瘤特异免疫
（5）多重耐药性基因转移的肿瘤基因治疗
（三）抗病毒的基因治疗①阻止病毒复制策略、②使感染HIV细胞死亡的方法、③降解策略
20有哪几种反义核苷酸基因失活疗法？简述其原理。
答：1，将特异的反义基因重组到表达载体上，导入靶细胞中转录出反义RNA，形成双链RNA,阻碍基因的翻译。2，人口合成寡聚脱氧核糖核酸经过化学修饰导入细胞，与mRNA 与 DNA结合，形成RNA/DNA杂链或DNA核苷酸三聚体，影响基因的翻译或转录。3，特异性的核酸，根据癌基因设计出特异的“锤头”或“发夹”结构，它能够催化切割，降解异常表达基因的mRNA而影响基因的翻译。
原理：反义RNA是一种与mRNA互补的RNA分子，它是双链DNA中无意义链转录的RNA，因此肿瘤癌基因活化表达的mRNA的起始翻译部位就会被相应的反义RNA互补结合形成RNA/RNA双链体，进而就阻止了核糖体与后动子结合，或阻止核糖体mRNA上移，以抑制mRNA的翻译，起到了抑癌基因过高表达癌蛋白的效果。
21何谓“动物克隆技术”？有何应用价值？
答：动物克隆是一种通过核移植过程进行无性繁殖的技术。发育早期的动物胚胎细胞，或成年动物的体细胞，经显微手术移植到去掉细胞核的卵母细胞中之后，在适当的条件下，可以重新发育成正常胚胎。这种胚胎被移植到生殖周期相近的母体之中，可以发育成为正常动物个体。经过核移植而产生的动物，其遗传结构与细胞核供体完全相同。这种不经过有性生殖过程，而是通过核移植生产遗传结构与细胞核供体相同动物个体的技
术，就叫做动物克隆。和转基因动物的技术不同，动物克隆技术是核移植的一种无性繁殖法。动物克隆技术不仅理论上有重大突破，无需有性繁殖即可生产动物，而且可利用克隆羊技术来克隆人体器官，有医学价值，还可使难以生殖或即将灭种的动物（如熊猫）采用无性繁殖方式来繁殖后代，因此引起全世界关注。现又有克隆牛、克隆猪、克隆羊的问世，现在正在克隆熊猫。
22 PCR基本原理
PCR是在试管中进行的DNA复制反应，基本原理是依据细胞内DNA半保留复制的机理，以及体外DNA分子于不同温度下双链和单链可以互相转变的性质，人为地控制体外合成系统的温度，以促使双链DNA变成单链，单链DNA与人工合成的引物退火，然后耐热DNA 聚合酶以dNTP为原料使引物沿着单链模板延伸为双链DNA。PCR全过程每一步的转换是通过温度的改变来控制的。需要重复进行DNA模板解链、引物与模板DNA结合、DNA聚合酶催化新生DNA的合成，即高温变性、低温退火、中温延伸３个步骤构成PCR反应的一个循环，此循环的反复进行，就可使目的DNA得以迅速扩增。DNA模板变性：模板双链DNA 单链DNA，94℃。退火：引物＋单链DNA 杂交链，引物的Tm值。引物的延伸：温度至70 ℃左右， Taq DNA聚合酶以４种dNTP为原料，以目的DNA为模板，催化以引物３’末端为起点的5’→3’DNA链延伸反应，形成新生DNA链。新合成的引物延伸链经过变性后又可作为下一轮循环反应的模板PCR，就是如此反复循环，使目的DNA得到高效快速扩增。
23.试述RT-PCR的原理及过程
即逆转录PCR，先在逆转录酶的作用下以mRNA为模板合成DNA,再以cDNA为模板进行PCR 反应。这样低浓度的mRNA被扩增放大易于检测。是一种快速、简便且敏感性极高的检测RNA 的方法，可用于分析基因的转录产物、克隆cDNA及合成cDNA探针、改造cDNA序列等。24试述肿瘤的发生机理。
1癌基因的异常表达2 抑癌基因的失活，会对癌基因的异常表达失去抑制作用3细胞在增值过程由于某些因素使DNA在复制过程中产生碱基错配的基因，由于细胞DNA修复功能的丧失得到校正4肿瘤转移基因和肿瘤转移抑制基因相互制约的关系发生失调5肿瘤细胞免疫功能的强弱也与肿瘤的发生相关
25试述细胞周期调控异常与恶性肿瘤发生的相关性。
答：细胞周期素和CDK等细胞周期相关蛋白过表达或者缺陷，特别是那些决定细胞有G1进入S期的蛋白若表达异常，，使细胞周期进程超越或突破细胞周期的控制点，细胞不能正常发生细胞自发产生的细胞死亡，衰老或分化，从而造成细胞恶化增生，形成恶性肿瘤。P53，Rb等抑癌基因的突变或缺失，与许多恶性肿瘤的发生进展和不良预后相关，如某些生长因子及其受体的高表达与癌基因异常激活有关，特别是一些与信号转导有关的蛋白酶的异常活化，以抑制细胞凋亡基因的异常表达，均与细胞的恶性变相关。
26试述p53对肿瘤的作用及其机理.
p53是一种肿瘤抑制基因，p53是一个重要的抗癌基因使癌细胞自杀，防止癌变；还具有帮助细胞基因修复缺陷的功能。P53基因产物及功能
1. 阻滞细胞周期
2. 促进细胞调亡
3. 维持基因组稳定
4. 抑制肿瘤血管生成
P53正常功能的丧失，最主要的方式是基因突变,可以导致肿瘤的发生
27. 试述基因工程的原理和过程？
所谓基因工程是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术。是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内，使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作。它是用人为的方法将所需要的某一供体生物的遗传物质——DNA大分子提取出来，在离体条件下用适当的工具酶进
行切割后，把它与作为载体的DNA分子连接起来，然后与载体一起导入某一更易生长、繁殖的受体细胞中，以让外源物质在其中“安家落户”，进行正常的复制和表达，从而获得新物种的一种崭新技术。基本操作步骤：
1提取目的基因2目的基因与运载体结合3将目的基因导入受体细胞4目的基因的检测和表达欲验证某基因的功能，设计实验方案
分子生物学试题及答案 一、名词解释 1．cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2．标准折叠单位：蛋白质二级结构单元α－螺旋与β－折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。 3．CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ） 4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。 5．micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可抑制mRNA的翻译。 6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7．模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8．信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。 9．弱化子：在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。 10．魔斑：当细菌生长过程中，遇到氨基酸全面缺乏时，细菌将会产生一个应急反应，停止全部基因的表达。产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸（pppGpp）。PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子，而是影响一大批，所以称他们是超级调控子或称为魔斑。 11．上游启动子元件：是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列，-10区的TATA、-35区的TGACA 及增强子，弱化子等。 12．DNA探针：是带有标记的一段已知序列DNA，用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。13．SD序列：是核糖体与mRNA结合序列，对翻译起到调控作用。 14．单克隆抗体：只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。 15．考斯质粒：是经过人工构建的一种外源DNA载体，保留噬菌体两端的COS区，与质粒连接构成。16．蓝-白斑筛选：含LacZ基因（编码β半乳糖苷酶）该酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)产生蓝色，从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后，LacZ基因不能表达，菌株呈白色，以此来筛选重组细菌。称之为蓝-白斑筛选。 17．顺式作用元件：在DNA中一段特殊的碱基序列，对基因的表达起到调控作用的基因元件。18．Klenow酶：DNA聚合酶I大片段，只是从DNA聚合酶I全酶中去除了5’→3’外切酶活性 19．锚定PCR：用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20．融合蛋白：真核蛋白的基因与外源基因连接，同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1． DNA的物理图谱是DNA分子的（限制性内切酶酶解）片段的排列顺序。 2． RNA酶的剪切分为（自体催化）、（异体催化）两种类型。 3．原核生物中有三种起始因子分别是（IF-1）、（IF-2）和（IF-3）。 4．蛋白质的跨膜需要（信号肽）的引导，蛋白伴侣的作用是（辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质）。5．启动子中的元件通常可以分为两种：（核心启动子元件）和（上游启动子元件）。 6．分子生物学的研究内容主要包含（结构分子生物学）、（基因表达与调控）、（DNA重组技术）三部分。7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（肺炎球菌感染小鼠）、（ T2噬菌体感染大肠杆菌）这两个实验中主要的论点证据是：（生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接，）、 （mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA3′末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴）。 9．蛋白质多亚基形式的优点是（亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法）、（可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响）、（活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭）。 10．蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括（成核）、（结构充实）、（最后重排）。 11．半乳糖对细菌有双重作用；一方面（可以作为碳源供细胞生长）；另一方面（它又是细胞壁的成分）。所以需要一个不依赖于cAMP—CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于cAMP—CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从（ S2）开始，无G时转录从（ S1）开
现代分子生物学复习题
现代分子生物学 一.填空题 1.DNA的物理图谱是DNA分子的限制性内切酶酶解片段的排列顺序。 2.核酶按底物可划分为自体催化、异体催化两种类型。 3.原核生物中有三种起始因子分别是IF-1、 IF-2 和IF-3 。 4.蛋白质的跨膜需要信号肽的引导，蛋白伴侣的作用是辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质。 5.真核生物启动子中的元件通常可以分为两种：核心启动子元件和上游启动子元件。 6.分子生物学的研究内容主要包含结构分子生物学、基因表达与调控、DNA重组技术三部分。 7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是肺炎球菌感染 小鼠、T2噬菌体感染大肠杆菌这两个实验中主要的论点证据是：生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能。 8.hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点： hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接、 mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA3′ 东隅已逝 2 桑榆非晚！
末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴。 9.蛋白质多亚基形式的优点是亚基对DNA的利用来说是一 种经济的方法、可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响、活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭。 10.质粒DNA具有三种不同的构型分别是： SC构型、 oc 构型、 L构型。在电泳中最前面的是SC构型。 11.哺乳类RNA聚合酶Ⅱ启动子中常见的元件TATA、GC、 CAAT所对应的反式作用蛋白因子分别是TFIID 、SP-1 和 CTF/NF1 。 12.与DNA结合的转录因子大多以二聚体形式起作用，转 录因子与DNA结合的功能域常见有以下几种螺旋-转角-螺旋、锌指模体、碱性-亮氨酸拉链模体。 13.转基因动物常用的方法有：逆转录病毒感染法、DNA 显微注射法、胚胎干细胞法。 14.RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子有、TFⅡ-A、TFⅡ-B、 TFII-D、TFⅡ-E他们的结合顺序是： D、A、B、E 。 其中TFII-D的功能是与TATA盒结合。 15.酵母DNA按摩尔计含有32.8%的T,则A为_32.8%_,G 为_17.2%_和C为_17.2%__。 16.操纵子包括_调控基因、调控蛋白结合位点和结构基因。 17.DNA合成仪合成DNA片段时，用的原料是模板DNA 东隅已逝 3 桑榆非晚！
《分子生物学》期末试卷（C） 一、术语解释（20分，每题2分） 1、操纵子 2、增强子 3、启动子 4、内含子 5、外显子 6、顺式作用元件 7、反式作用因子 8、转录因子 9、单顺反子mRNA 10、多顺反子mRNA 二、选择题（20分） 1.指导合成蛋白质的结构基因大多数为: ( ) A.单考贝顺序 B.回文顺序 C.高度重复顺序 D.中度重复顺序 2. 下列有关Shine-Dalgarno顺序(SD-顺序)的叙述中错误的是: ( ) A.在mRNA分子的起始密码子上游7-12个核苷酸处的顺序 B.在mRNA分子通过 SD序列与核糖体大亚基的16s rRNA结合 C.SD序列与16s rRNA 3'端的一段富含嘧啶的序列互补 D. SD序列是mRNA分子结合核糖体的序列 3.原核生物中起始氨基酰-tRNA是: ( ) A.fMet-tRNA B.Met-tRNA C.Arg-tRNA D.leu-tRNA 4.下列有关TATA盒 (Hognessbox)的叙述,哪个是错误的: ( ) A. 保守序列为TATAAT B.它能和RNA聚合酶紧密结合 C. 它参与形成开放转录起始复合体 D.它和提供了RNA聚合酶全酶识别的信号 5. 一个mRNA的部分顺序和密码的编号是 140 141 142 143 144 145 146 CAG CUC UAU CGG UAG AAC UGA 以此mRNA为模板,经翻译生成多肽链含有的氨基酸为: ( ) A.141 B.142 C.143 D.144 6. DNA双螺旋结构模型的描述中哪一条不正确：( ) A.腺嘌呤的克分子数等于胸腺嘧啶的克分子数 B.同种生物体不同组织中的DNA碱基组成极为相似 C.DNA双螺旋中碱基对位于外侧 D. 维持双螺旋稳定的主要因素是氢键和碱基堆集力。 7． DNA聚合酶III的描述中哪条不对：( ) A.需要四种三磷酸脱氧核苷酸作底物 B.具有5′→3′外切酶活性 C. 具有5′→3′聚合活性 D. 是DNA复制中链延长反应中的主导DNA聚合酶
生命科学系本科2010-2011学年第1学期试题分子生物学（A）答案及评分标准 一、选择题，选择一个最佳答案（每小题1分，共15分） 1、1953年Watson和Crick提出（A ） A、多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋 B、DNA的复制是半保留的，常常形成亲本——子代双螺旋杂合链 C、三个连续的核苷酸代表一个遗传密码 D、遗传物质通常是DNA而非RNA 2、基因组是（D ） A、一个生物体内所有基因的分子总量 B、一个二倍体细胞中的染色体数 C、遗传单位 D、生物体的一个特定细胞内所有基因的分子总量 3、下面关于DNA复制的说法正确的是（D ） A、按全保留机制进行 B、按3＇→5＇方向进行 C、需要4种NTP加入 D、需要DNA聚合酶的作用 4、当过量的RNA与限量的DNA杂交时（A ） A、所有的DNA均杂交 B、所有的RNA均杂交 C、50%的DNA杂交 D、50%的RNA杂交 5、以下有关大肠杆菌转录的叙述，哪一个是正确的？（B ） A、-35区和-10区序列间的间隔序列是保守的 B、-35区和-10区序列距离对转录效率非常重要 C、转录起始位点后的序列对于转录效率不重要 D、-10区序列通常正好位于转录起始位点上游10bp处 6、真核生物mRNA转录后加工不包括（A ） A、加CCA—OH B、5＇端“帽子”结构 C、3＇端poly（A）尾巴 D、内含子的剪接 7、翻译后的加工过程不包括（C ） A、N端fMet或Met的切除 B、二硫键的形成 C、3＇末端加poly（A）尾 D、特定氨基酸的修饰
8、有关肽链合成的终止，错误的是（C ） A、释放因子RF具有GTP酶活性 B、真核细胞中只有一个终止因子 C、只要有RF因子存在，蛋白质的合成就会自动终止 D、细菌细胞内存在3种不同的终止因子：RF1、RF2、RF3 9、酵母双杂交体系被用来研究（C ） A、哺乳动物功能基因的表型分析 B、酵母细胞的功能基因 C、蛋白质的相互作用 D、基因的表达调控 10、用于分子生物学和基因工程研究的载体必须具备两个条件（B ） A、含有复制原点，抗性选择基因 B、含有复制原点，合适的酶切位点 C、抗性基因，合适的酶切位点 11、原核生物基因表达调控的意义是（D ） A、调节生长与分化 B、调节发育与分化 C、调节生长、发育与分化 D、调节代谢，适应环境 E、维持细胞特性和调节生长 12、乳糖、色氨酸等小分子物质在基因表达调控中作用的共同特点是（E ） A、与DNA结合影响模板活性 B、与启动子结合 C、与操纵基因结合 D、与RNA聚合酶结合影响其活性 E、与蛋白质结合影响该蛋白质结合DNA 13、Lac阻遏蛋白由（D ）编码 A、Z基因 B、Y基因 C、A基因 D、I基因 14、紫外线照射引起DNA损伤时，细菌DNA修复酶基因表达反应性增强，这种现象称为（A ） A、诱导 B、阻遏 C、正反馈 D、负反馈 15、ppGpp在何种情况下被合成？（A ） A、细菌缺乏氮源时 B、细菌缺乏碳源时 C、细菌在环境温度太高时 D、细菌在环境温度太低时 E、细菌在环境中氨基酸含量过高时
一、名词解释 1、广义分子生物学：在分子水平上研究生命本质的科学，其研究对象是生物大分子的结构和功能。2 2、狭义分子生物学：即核酸（基因）的分子生物学，研究基因的结构和功能、复制、转录、翻译、表达调控、重组、修复等过程，以及其中涉及到与过程相关的蛋白质和酶的结构与功能 3、基因：遗传信息的基本单位。编码蛋白质或RNA等具有特定功能产物的遗传信息的基本单位，是染色体或基因组的一段DNA序列(对以RNA作为遗传信息载体的RNA病毒而言则是RNA序列)。 4、基因：基因是含有特定遗传信息的一段核苷酸序列，包含产生一条多肽链或功能RNA 所必需的全部核苷酸序列。 5、功能基因组学：是依附于对DNA序列的了解，应用基因组学的知识和工具去了解影响发育和整个生物体的特定序列表达谱。 6、蛋白质组学：是以蛋白质组为研究对象，研究细胞内所有蛋白质及其动态变化规律的科学。 7、生物信息学：对DNA和蛋白质序列资料中各种类型信息进行识别、存储、分析、模拟和转输 8、蛋白质组：指的是由一个基因组表达的全部蛋白质 9、功能蛋白质组学：是指研究在特定时间、特定环境和实验条件下细胞内表达的全部蛋白质。 10、单细胞蛋白：也叫微生物蛋白，它是用许多工农业废料及石油废料人工培养的微生物菌体。因而，单细胞蛋白不是一种纯蛋白质，而是由蛋白质、脂肪、碳水化合物、核酸及不是蛋白质的含氮化合物、维生素和无机化合物等混合物组成的细胞质团。 11、基因组：指生物体或细胞一套完整单倍体的遗传物质总和。 12、C值：指生物单倍体基因组的全部DNA的含量，单位以pg或Mb表示。 13、C值矛盾：C值和生物结构或组成的复杂性不一致的现象。 14、重叠基因：共有同一段DNA序列的两个或多个基因。 15、基因重叠：同一段核酸序列参与了不同基因编码的现象。 16、单拷贝序列：单拷贝顺序在单倍体基因组中只出现一次，因而复性速度很慢。单拷贝顺序中储存了巨大的遗传信息，编码各种不同功能的蛋白质。 17、低度重复序列：低度重复序列是指在基因组中含有2～10个拷贝的序列 18、中度重复序列：中度重复序列大致指在真核基因组中重复数十至数万（<105）次的重复顺序。其复性速度快于单拷贝顺序，但慢于高度重复顺序。 19、高度重复序列：基因组中有数千个到几百万个拷贝的DNA序列。这些重复序列的长度为6~200碱基对。 20、基因家族：真核生物基因组中来源相同、结构相似、功能相关的一组基因，可能由某一共同祖先基因经重复和突变产生。 21、基因簇：基因家族的各成员紧密成簇排列成大段的串联重复单位，定位于染色体的特殊区域。 22、超基因家族：由基因家族和单基因组成的大基因家族，各成员序列同源性低，但编码的产物功能相似。如免疫球蛋白家族。 23、假基因：一种类似于基因序列，其核苷酸序列同其相应的正常功能基因基本相同、但却不能合成功能蛋白的失活基因。 24、复制：是指以原来DNA（母链）为模板合成新DNA（子链）的过程。或生物体以DNA/RNA
选择题 1．证明DNA 是遗传物质的两个关键性实验是：肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2 噬菌体感染大肠杆菌。这两个实验中主要的论点证据是（C ）。 A．从被感染的生物体内重新分离得到DNA 作为疾病的致病剂 B．DNA 突变导致毒性丧失 C．生物体吸收的外源DNA（而并非蛋白质）改变了其遗传潜能 D．DNA 是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子 E．真核心生物、原核生物、病毒的DNA 能相互混合并彼此替代 2.1953 年Watson 和Crick 提出（A ）。 A．多核苷酸DNA 链通过氢键连接成一个双螺旋 B．DNA 的复制是半保留的，常常形成亲本-子代双螺旋杂合链 C．三个连续的核苷酸代表一个遗传密码 D．遗传物质通常是DNA 而非RNA E．分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变 3．DNA 双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键，并因此改变了它们的光吸收特性。以下哪些是对DNA 的解链温度的正确描述？（C,D ） A．哺乳动物DNA 约为45℃，因此发烧时体温高于42℃是十分危险的 B．依赖于A-T 含量，因为A-T 含量越高则双链分开所需要的能量越少 C．是双链DNA 中两条单链分开过程中温度变化范围的中间值 D．可通过碱基在260nm 的特征吸收峰的改变来确定 E．就是单链发生断裂（磷酸二酯键断裂）时的温度 4．Watson和Crick提出的经典DNA双螺旋结构属于(B) A．A型B．B型C．Z型 5．多种密码子编码一个氨基酸的现象，称为密码子的(B) A．连续性B．简并性C．通用性D．摆动性 6．真核基因经常被断开（B,D,E ）。 A．反映了真核生物的mRNA 是多顺反子 B．因为编码序列外显子被非编码序列内含子所分隔 C．因为真核生物的DNA 为线性而且被分开在各个染色体上，所以同一个基因的不同部分可能分布于不同的染色体上 D. 表明初始转录产物必须被加工后才可被翻译 E．表明真核基因可能有多种表达产物，因为它有可能在mRNA 加工的过程中采用不同的外显子重组方式 7．选出下列所有正确的叙述。（A,C ） A．外显子以相同顺序存在于基因组和cDNA 中 B．内含子经常可以被翻译 C．人体内所有的细胞具有相同的一套基因 D．人体内所有的细胞表达相同的一套基因 E．人体内所有的细胞以相同的方式剪接每个基因的mRNA 8．下列哪些基因以典型的串联形式存在于真核生物 基因组？（B,C ） A．珠蛋白基因B．组蛋白基因 C．rRNA 基因D．肌动蛋白基因 9．细胞器基因组（ A ）。
1、分子生物学的定义。 从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学，主要指遗传信息的传递（复制）、保持（损伤和修复）、基因的表达（转录和翻译）与调控。 2、简述分子生物学的主要研究内容。 a.DNA重组技术（基因工程） （1）可被用于大量生产某些在正常细胞代谢中产量很低的多肽 ; （2）可用于定向改造某些生物的基因组结构 ; （3）可被用来进行基础研究 b.基因的表达调控 在个体生长发育过程中生物遗传信息的表达按一定时序发生变化（时序调节），并随着内外环境的变化而不断加以修正（环境调控）。 c.生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学） 一个生物大分子，无论是核酸、蛋白质或多糖，在发挥生物学功能时，必须具备两个前提： (1)拥有特定的空间结构（三维结构）； (2)发挥生物学功能的过程中必定存在着结构和构象的变化。 结构分子生物学就是研究生物大分子特定的空间结构及结构的运动变化与其生物学功能关系的科学。它包括3个主要研究方向： (1) 结构的测定 (2) 结构运动变化规律的探索 (3) 结构与功能相互关系 d.基因组、功能基因组与生物信息学研究 3、谈谈你对分子生物学未来发展的看法？ (1)分子生物学的发展揭示了生命本质的高度有序性和一致性，是人类认识论上的重大飞跃。生命活动的一致性，决定了二十一世纪的生物学将是真正的系统生物学，是生物学范围内所有学科在分子水平上的统一。 (2)分子生物学是目前自然学科中进展最迅速、最具活力和生气的领域，也是新世纪的带头学科。
(3)分子生物学是由生物化学、生物物理学、遗传学、微生物学、细胞学、以及信息科学等多学科相互渗透、综合融会而产生并发展起来的，同时也推动这些学科的发展。 (4)分子生物学涉及认识生命的本质，它也就自然广泛的渗透到医学、药学各学科领域中，成为现代医药学重要的基础。 1、DNA双螺旋模型是哪年、由谁提出的?简述其基本内容。 DNA双螺旋模型在1953年由Watson和Crick提出的。 基本内容： (1) 两条反向平行的多核苷酸链围绕同一中心轴相互缠绕，两条链均为右手双螺旋。 (2) 嘌呤与嘧啶碱位于双螺旋的内侧，3′,5′- 磷酸与核糖在外侧，彼此通过磷酸二酯键相连接，形成DNA分子的骨架。 (3) 双螺旋的平均直径为2nm,两个相邻碱基对之间相距的高度即碱基堆积距离 为0.34nm,两个核苷酸之间的夹角为36。。 (4) 两条核苷酸链依靠彼此碱基之间形成的氢键相连系而结合在一起，A与T相配对形成两个氢键，G与C相配对形成3个氢键。 (5) 碱基在一条链上的排列顺序不受任何限制，但根据碱基互补配对原则，当一条多核苷酸的序列被确定后，即可决定另一条互补链的序列。
分子生物学试题（一） 一.填空题(,每题1分,共20分) 一.填空题(每题选一个最佳答案,每题1分,共20分) 1. DNA的物理图谱是DNA分子的（）片段的排列顺序。 2. 核酶按底物可划分为（）、（）两种类型。 3．原核生物中有三种起始因子分别是（）、（）和（）。 4．蛋白质的跨膜需要（）的引导，蛋白伴侣的作用是（）。5．真核生物启动子中的元件通常可以分为两种：（）和（）。6．分子生物学的研究内容主要包含（）、（）、（）三部分。 7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（）、（）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（）、（）。 9．蛋白质多亚基形式的优点是（）、（）、（）。 10.蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括（成核）、（结构充实）、（最后重排）。 11.半乳糖对细菌有双重作用；一方面（可以作为碳源供细胞生长）；另一方面（它又是细胞壁的成分）。所以需要一个不依赖于cAMP-CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于cAMP-CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从（S2 ）开始，无G时转录从（S1 ）开始。 12．DNA重组技术也称为（基因克隆）或（分子克隆）。最终目的是（把一个生物体中的遗传信息DNA转入另一个生物体）。典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤： ①提取供体生物的目的基因（或称外源基因），酶接连接到另一DNA分子上（克隆载体），形一个新的重组DNA分子。 ②将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存，这个过程称为转化。 ③对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。 ④对含有重组DNA的细胞进行大量培养，检测外援基因是否表达。 13、质粒的复制类型有两种：受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的称为（严紧型质粒），不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为（松弛型质粒）。 14．PCR的反应体系要具有以下条件： a、被分离的目的基因两条链各一端序列相互补的 DNA引物（约20个碱基左右）。 b、具有热稳定性的酶如：TagDNA聚合酶。 c、dNTP d、作为模板的目的DNA序列 15．PCR的基本反应过程包括：（变性）、（退火）、（延伸）三个阶段。 16、转基因动物的基本过程通常包括： ①将克隆的外源基因导入到一个受精卵或胚胎干细胞的细胞核中； ②接种后的受精卵或胚胎干细胞移植到雌性的子宫；
一. 名词解释 1. C值及C值反常反应：所谓C值，通常是指一种生物单倍体基因组DNA的总量。真核细胞基因的最大特点是它含有大量的重复序列，而且功能DNA序列大多被不编码蛋白质的非功能DNA所隔开，这就是C值反常现象。 2. 半保留复制：DNA生物合成时，母链DNA解开分为两股单链，各自为模板按碱基互补规律，合成与模板互补的子链。子代细胞的DNA，一股从亲本完全接受过来，另一股则完全从新合成。两个子细胞的DNA碱基序列一致。 3 半不连续复制：前导链连续复制而随从链不连续复制，就是复制的半不连续性。 4 引发体：复制的起始含有解螺旋酶.DNA C蛋白.引物酶和DNA复制起始区域的复合结构称为引发体。 5. DNA损伤：在复制过程中发生的DNA突变体称为DNA损伤。 6 转座子：是存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。 7. 中心法则：通过DNA的复制把遗传信息由亲代传递给子代，遗传信息由DNA传递到RNA，最后翻译成特异的蛋白质.RNA还以逆转录的方式将遗传信息体传递给DNA分子。这种遗传信息的流向称为中心法则。 8 编码链：双链DNA中，不能进行转录的那一条DNA链，该链的核苷酸序列与转录生成的RNA的序列一致，又称意义链。 9. 转录因子：能直接或间接辨认和结合转录上游区段DNA的蛋白质，称反式作用因子。在反式作用因子中，直接或间接结合DNA聚合酶的，则称为转录因子。 10 RNA编辑：是某些RNA，特别是mRNA前体的一种加工方式，如插入，删除或取代一些核苷酸残基，导致DNA所编码的遗传信息发生改变，因为经过编辑mRNA序列发生了不同于模板DNA的变化。 11 cDNA：互补DNA，是以mRNA为模板，按碱基互补规律，合成与mRNA互补的DNA 单链。 12 RNA选择性剪接：是指不同的剪切方式从一个mRNA前体产生不同的mRNA剪接异构体的过程。 13 GU-AG法则：多数细胞核mRNA前体中内含子的5’边界序列为GU，3’边界，序列为AG。因此，GU表示供体先借点的5’端，AG代表接纳体衔接点3’端序列。习惯上，这种保守序列模式称为GU-AG法则。 14. 顺反子：遗传学上将编码一个多肽链的遗传单位，称为顺反子。真核mRNA只编码一种蛋白质，为单顺反子。 15. 翻译：以mRNA为模板，氨酰-tRNA为原料直接供体，在多种蛋白质因子和酶的参与下，在核糖体上将mRNA分子上的核苷酸顺序表达为有特定氨基酸顺序的蛋白质的过程。 16. 摆动假说：Crick为解释反密码子中某些稀有成分的配对以及许多氨基酸有2个以上的密码子的问题而提出的假说。 17. 氨酰-tRNA合成酶：是一类催化氨基酸和tRNA相结合的特异性酶。 18. SD序列：早在1974年，Shine就发现，几种细菌小亚基rRNA3’末端顺序为：5’—ACCUCCUA—3’，它可以和mRNA中离AUG顺序5’侧约9-13个碱基处有一段富含嘌呤碱基AGGA或GAGG互补，后来称此区域为SD。 19. 多核糖体：mRNA同时与若干个核糖体结合形成的念珠转结构，称为多核糖体。 20 核定位序列：蛋白质中的一种常见的结构域，通常为一短的氨基酸序列，它能与核载体相互作用，将蛋白质运进细胞核内。 21. 基因打靶：是指通过DNA定点同源重组，改变基因组中的某一特定基因，从而在生物活体内研究此基因的功能。
一、名词解释 分子生物学：包括对蛋白质和核酸等生物大分子的结构与功能，以及从分子水平研究生命活动 RNA 组学：RNA 组学研究细胞中 snmRNAs 的种类、结构和 功能。同一生物体内不同种类的细胞、同一细胞在不同时间、不同状态下 snmRNAs 的表达具有时间和空间特异性。增色 效应: DNA 变性时其溶液 OD260增高的现象。 减色效应: DNA 复性时其溶液 OD260降低的现象。 T m:变性是在一个相当窄的温度范围内完成，在这一范围内，紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为 DNA 的 解链温度，又称融解温度(melting temperature, Tm)。其 大小与 G+C 含量成正比。 解链曲线：如果在连续加热 DNA 的过程中以温度对 A260 （absorbance，A，A260代表溶液在260nm 处的吸光率） 值作图，所得的曲线称为解链曲线。 DNA 复性：在适当条件下，变性 DNA 的两条互补链可恢复天然的双螺旋构象，这一现象称为复性。 核酸分子杂交：在 DNA 变性后的复性过程中，如果将不同 种类的 DNA 单链分子或 RNA 分子放在同一溶液中，只要两 种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系，在适宜 的条件（温度及离子强度）下，就可以在不同的分子间形 成杂化双链，这种现象称为核酸分子杂交。 基因：广义是指原核生物、真核生物以及病毒的 DNA 和RNA 分子中具有遗传效应的核苷酸序列，是遗传的基本单位。狭义指能产生一个特定蛋白质的 DNA 序列。 断裂基因：不连续的基因称为断裂基因，指基因的编码序列在 DNA 上不连续排列而被不编码的序列所隔开。 重叠基因：核苷酸序列彼此重叠的2个基因为重叠基因， 或称嵌套基因。 致死基因：删除后可导致机体死亡的基因。 基因冗余：由于一基因在个体中有若干份拷贝，当删除其中一个时，个体的表型不发生明显变化。 DNA 重组：DNA 分子内或分子间发生遗传信息的重新组合，又称为遗传重组或基因重排。 同源重组：发生在同源序列间的重组称为同源重组，又称基本重组。 接合作用：当细胞与细胞、或细菌通过菌毛相互接触时，质粒 DNA 从一个细胞（细菌）转移至另一细胞（细菌） 的DNA 转移称为接合作用(conjugation)。 转化作用：通过自动获取或人为地供给外源 DNA，使细胞或培养的受体细胞获得新的遗传表型，称为转化作用(transformation)。 转导作用：当病毒从被感染的（供体）细胞释放出来、再次感染另一（供体）细胞时，发生在供体细胞与受体细胞之间的 DNA 转移及基因重组即为转导作用 位点特异重组：位点特异重组(site-specific recombination) 是由整合酶催化，在两个 DNA 序列的特异位点间发生的整合。 12-23规则：重组发生在间隔为12bp 到23bp 的不同信号序列之间，称为12-23规则。 转座子：（transposon）在基因中可以移动的一段 DNA 序列。 转座：由插入序列和转座子介导的基因移位或重排称为转座(transposition)。 克隆：来自同一始祖的相同副本或拷贝的集合。 DNA 克隆：应用酶学的方法，在体外将各种来源的遗传物质（同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工的DNA）与载体DNA 接合成一具有自我复制能力的DNA 分子——复制子(replicon)，继而通过转化或转染宿主细胞，筛选出含有目的基因的转化子细胞，再进行扩增提取获得大量同一 DNA 分子，也称基因克隆或重组 DNA (recombinant DNA)。 基因工程：(genetic engineering)实现基因克隆所用的方法及相关的工作称基因工程，又称重组DNA 工艺学。限制性核酸内切酶：(restriction endonuclease, RE) 是识别DNA 的特异序列, 并在识别位点或其周围切割双链 DNA 的一类内切酶。 同功异源酶：来源不同的限制酶，但能识别和切割同一位点，这些酶称同功异源酶。 同尾酶：有些限制性内切酶虽然识别序列不完全相同，但切割 DNA 后，产生相同的粘性末端，称为同尾酶。 载体：为携带目的基因，实现其无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采用的一些 DNA 分子。 复制：(replication)是指遗传物质的传代，以母链 DNA 为模板合成子链 DNA 的过程。 半保留复制：（semi-conservative replication）DNA 生物合成时，母链 DNA 解开为两股单链，各自作为模板(template)按碱基配对规律，合成与模板互补的子链。子代细胞的 DNA，一股单链从亲代完整地接受过来，另一股单链则完全从新合成。两个子细胞的 DNA 都和亲代 DNA 碱基序列一致。这种复制方式称为半保留复制。 复制子：（replicon）DNA 分子中能独立进行复制的单位称为复制子。习惯上把两个相邻起始点之间的距离定为一个复制子。 复制眼：（replication eye）DAN 正在复制的部分在电镜下观察起来犹如一只眼睛，称为复制眼。 复制叉：（replication fork）复制一开始，复制起始点要形成一个特殊的叉型结构，是复制有关的酶和蛋白质组
绪论 思考题：（P9） 1.从广义和狭义上写出分子生物学的定义？ 广义上讲的分子生物学包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究，以及从分子水平上阐明生命的现象和生物学规律。 狭义的概念，即将分子生物学的范畴偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或DNA结构与功能、复制、转录、表达和调节控制等过程。其中也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 2、现代分子生物学研究的主要内容有哪几个方面？什么是反向生物学？什么是 后基因组时代？ 研究内容： DNA的复制、转录和翻译；基因表达调控的研究；DNA重组技术和结构分子生物学。 反向生物学：是指利用重组DNA技术和离体定向诱变的方法研究已知结构的基因相应的功能，在体外使基因突变，再导入体内，检测突变的遗传效应，即以表型来探索基因结构。 后基因组时代：研究细胞全部基因的表达图式和全部蛋白质图式，人类基因组研究由结构向功能转移。 3、写出三个分子生物写学展的主要大事件（年代、发明者、简要内容） 1953年Watson和Click发表了?脱氧核糖核苷酸的结构?的著名论文，提出了DNA的双螺旋结构模型。 1972~1973年，重组DNA时代的到来。H.Boyer和P.Berg等发展了重组DNA 技术，并完成了第一个细菌基因的克隆，开创了基因工程新纪元。 1990~2003年美、日、英、法、俄、中六国完成人类基因组计划。解读人类遗传密码。 4、21世纪分子生物学的发展趋势是怎样的？ 随着基因组计划的完成，人类已经掌握了模式生物的所有遗传密码。又迎来了后基因组时代，人类基因组的研究重点由结构向功能转移。相关学说理论相应诞生，如功能基因组学、蛋白质组学和生物信息学。生命科学又进入了一个全新的时代。 第四章 思考题：（P130） 1、基因的概念如何？基因的研究分为几个发展阶段？ 概念：基因是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列，是遗传的基本单位和突变单位以及控制形状的功能单位。 发展阶段：○120世纪50年代以前，主要从细胞的染色体水平上进行研究，属于基因的染色体遗传学阶段。 ○220世纪50年代以后，主要从DNA大分子水平上进行研究，属于分
第一章绪论练习题 请就你感兴趣的分子生物学发展史上的重大事件或重要人物或重要理论作以相关论述？ 第二章染色体与DNA练习题1 一、【单选题】 1.生物遗传信息传递中心法则是【】 A.DNA→RNA→蛋白质 B.RNA→DNA→蛋白质 C.DNA→蛋白质→RNA D.RNA→蛋白质→DNA 2.关于DNA复制的叙述，下列哪项是错误的【】 A.为半保留复制 B.为不对称复制 C.为半不连续复制 D.新链合成的方向均为3'→5' 3.合成DNA的原料有【】 A.dAMP dGMP dCMP dTMP B.dADP dGDP dCDP dTDP C.dATP dGTP dCTP dTTP D.AMP UMP CMP GMP 4.DNA合成时碱基互补规律是【】 A.A－UC－G B.T－AC－G C.A－GC－U D.A－GC－T 5.关于DNA的复制错误的【】： A包括一个双螺旋中两条子链的合成 B遵循新的子链与其亲本链相配对的原则 C依赖于物种特异的遗传密码 D是碱基错配最主要的来源 6.一个复制子是：【】 A细胞分裂期间复制产物被分离之后的DNA片段 B复制的DNA片段和在此过程中所需的酶和蛋白 C任何自发复制的DNA序列(它与复制起始点相连) D任何给定的复制机制的产物(如：单环) E复制起点和复制叉之间的DNA片段 7.真核生物复制子有下列特征，它们：【】 A比原核生物复制子短得多，因为有末端序列的存在 B比原核生物复制子长得多，因为有较大的基因组 C通常是双向复制且能融合 D全部立即启动，以确保染色体在S期完成复制 E不是全部立即启动，在任何给定的时间只有大约15％是有活性的 8.下述特征是所有(原核生物、真核生物和病毒)复制起始位点都共有的是：【】 A起始位点是包括多个短重复序列的独特DNA片段 B起始位点是形成稳定二级结构的回文序列 C多聚体DNA结合蛋白专一性识别这些短的重复序列 D起始位点旁侧序列是A-T丰富的，能使DNA螺旋解开 E起始位点旁侧序列是G-C丰富的，能稳定起始复合物 9.下列关于DNA复制的说法是正确的有：【】 A按全保留机制进行 B接3’→5’方向进行 C需要4种dNMP的参与 D需要DNA连接酶的作用 E涉及RNA引物的形成 F需要DNA聚合酶Ⅰ 10.在原核生物复制子中以下哪种酶除去RNA引发体并加入脱氧核糖核苷酸? 【】 A DNA聚合酶III B DNA聚合酶II C DNA聚合酶I D外切核酸酶MFl E DNA连接酶【参考答案】1.A2.D3.C4.B5.C6.C7.C8.D9.D10.C 二、【多项选择题】 1.DNA聚合酶I的作用有【】 A.3’-5’外切酶的活性 B.修复酶的功能 C.在细菌中5’-3’外切酶活性是必要的 D.外切酶活性，可以降解RNA/DNA杂交体中的RNA引物 E.5’-3’聚合酶活性 2.下列关于大肠杆菌DNA聚合酶I的叙述哪些是正确的？【】 A.该酶能从3’羟基端逐步水解单链DNA B.该酶在双螺旋区具有5’-3’外切酶活性 C.该酶在DNA中需要游离的3’-OH D.该酶在DNA中需要游离的5’-OH E.有校对功能 3.下列有关DNA聚合酶I的描述，哪些是正确的？【】 A.催化形成3’-5’-磷酸二酯键 B.有3’-5’核酸外切酶作用 C.有5‘-3’核酸外切酶作用 D.是原核细胞DNA复制时的主要合成酶 E.是多功能酶 4.有关DNA复制时的引物的说法下列正确的有【】 A.一般引物是RNA B.催化引物合成的酶称引发酶 C.哺乳动物的引物是DNA D.引物有游离的3‘-OH，成为合成DNA的起点 E.引物有游离的5‘-OH 5.DNA聚合酶I的作用是【】 A.修复DNA的损伤与变异 B.去除复制过程中的引物 C.填补合成DNA片段间的空隙 D.将DNA片段连接起来 E.合成RNA片段 6.下列关于DNA复制的叙述哪些是正确的？ A.每条互补链的合成方向是5‘-3’ B.DNA聚合酶沿母链滑动方向从3‘-5’ C.两条链同时复制只有一个起点 D.真核细胞的每个染色体的复制合成原料是dNMP 7.下列有关DNA聚合酶作用的叙述哪些是正确的？ A.酶I在DNA损伤的修复中发挥作用 B.酶II是DNA复制的主要酶 C.酶III是DNA复制的主要酶 D.酶IV在DNA复制时有切除引物的作用 E.酶I切除RNA引物 8.DNA聚合酶I具有的酶活性包括 A.5’-3’外切酶活性 B.3’-5’外切酶活性 C.5’-3’聚合酶活性 D.3’-5’聚合酶活性 E.切酶活性 9.下列有关大肠杆菌DNA复制的叙述哪些是正确的？ A.双螺旋中一条链进行不连续合成 B.生成冈崎片断 C.需要RNA引物 D.单链结合蛋白可防止复制期间的螺旋解链 E.DNA聚合酶I是DNA复制最主要酶 10.DNA复制的特点是 A.半保留复制 B.半不连续 C.一般是定点开始，双向等速进行
分子生物学备选考题 名词解释: 1.功能基因组学 2.分子生物学 3.epigenetics 4.C值矛盾 5.基因簇 6.间隔基因 7.基因芯片 8.基序（Motifs） 9.CpG岛 10.染色体重建 11.Telomerase 12.足迹分析实验 13.RNA editing 14.RNA干涉（RNA interference） 15.反义RNA 16.启动子（Promoter） 17.SD序列(SD sequence) 18.碳末端结构域（carboxyl terminal domain，CTD） 19.single nucleotide polymorphism，SNP 20.切口平移（Nick translation） 21.原位杂交 22.Expressing vector 23.Multiple cloning sites 24.同源重组 25.转座 26.密码的摆动性 27.热休克蛋白嵌套基因 28.基因家族增强子 29.终止子 30.前导肽RNAi 31.分子伴侣 32.魔斑核苷酸 33.同源域 34.引物酶 35.多顺反子mRNA 36.物理图谱、 37.载体（vector） 38.位点特异性重组 39.原癌基因（oncogene） 40.重叠基因、 41.母源影响基因、
42.抑癌基因（anti-oncogene）、 43.回文序列（palindrome sequence）、 44.熔解温度（melting temperature, Tm） 45.DNA的呼吸作用（DNA respiration） 46..增色效应（hyperchromicity）、 47.C0t曲线（C0t curve）、 48.DNA的C值（C value） 49.超螺旋(superhelix) 、 50.拓扑异构酶（topoisomerase）、 51.引发酶(primase) 、 52.引发体(primosome) 53.转录激活(transcriptional activation) 54.dna基因(dna gene)、 55.从头起始(de novo initiation) 、 56.端粒（telomere） 57.酵母人工染色体（yeast artificial chromosome, YAC）、 58.SSB蛋白（single strand binding protein）、 59.复制叉(replication fork)、 60.保留复制(semiconservative replication) 61.滚环式复制(rolling circle replication)、 62.复制原点(replication origin)、 63.切口(nick) 64.居民DNA (resident DNA) 65.有义链(sense strand) 66.反义链(antisense strand) 67.操纵子(operon) 、 68.操纵基因(operator) 69.内含子(内元intron) 70.外显子(外元exon) 、 71.突变子(muton) 、 72.密码子（codon）、、 73.同义密码（synonymous codons）、 74.GC盒(GC box) 75.增强子(enhancer) 76.沉默子(silencer) 77.终止子(terminator) 78.弱化子（衰减子）(attenuator) 79.同位酶(isoschizomers) 、 80.同尾酶(isocandamers) 81.阻抑蛋白（阻遏蛋白）(repressor) 82.诱导物（inducer）、 83.CTD尾（carboxyl-terminal domain ） 84.载体（vector）、 85.转化体(transformant)
第一章 1、概念： 分子牛物学DNA重组技术结构分子牛物学“基因”的分子生物学定义：产生一条功能多肽链 或功能RNA所必需的全部核II?酸序列。 2、用你现有的知识解解DNA为什么是遗传信息的载体。 3、关注了解近儿年诺贝尔奖获得者及其科学发现。 第二章 名词解释： DNA的C值：C值是一?种牛物的单倍体基因组DNA的总量。 C值矛盾(C Value paradox)： C值一般随生物进化而增加，研究发现某些两栖类的C值其至比哺乳动物还大，而在两栖类中C值变化也很大，这种C值与生物进化(结构和组织的复杂性)矛盾的现彖称为C值矛盾。 冈崎片段 DNA的半保留复制(semi-conservative replication)：由亲代DNA牛成子代DNA时，每个新形成的子代DNA中，一条链來自亲代DNA,而另一条链则是新合成的，这种复制方式称半保留复制。半不连续复制(semi?conservative replication)： DNA复制时其屮一条子链的合成是连续的, 而另一条子链的合成是不连续的，故称半不连续复制。 复制子(Replicon)：从复制原点到终点，组成一个复制单位，叫复制子。转朋了(transposon):存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基木单位。 反转录转座了(rctrotransposon):指通过RNA为中介，反转录成DNA后进行转座的可动元件。单链结合蛋0(SSBP-single-strand binding protein)：在DNA复制过程中，稳定L1被解开的DNA 单链，阻止复性和保护单链不被核酸酶降解。 DNA连接酶：双链DNA中一条链有切口，一端是3 z -OH,另一端是5" ■磷酸基，连接酶可催化这两端形成磷酸二酯键，而使切口连接，不能将两条游离的DNA单链连接起來。在DNA复制、损伤修复、重组等过程中起重要作用。 拓扑界构酶(DNA Topisomerase): 拓扑异构酶I：使DNA —条链发主断裂和再连接，作用是松解(消除)负超螺旋。主要集屮在活性转录区，同转录有关。例：人肠杆菌屮的3蛋片。 拓扑异构酶II：该酚能暂时性地切断和重新连接双链DNA,作用是将负超螺旋引入DNA分子。同复制有关。例：大肠杆菌中的DNA旋转酶(gyrase)。 DNA解螺旋腮/解链酶(DNA helicase)： 通过水解ATP获得能量來解开双链DNAo E.coli屮的rep蛋口就是解螺旋酶，还有解螺旋酶I、II、HL rep蛋白沿前导链模板3 J5,移动,而解螺旋酶I、II、III沿滞后链模板5 ' —3,移动。 判断： DNA复制时在前导链上DNA沿5'?3'方向合成，在滞后链上则沿3'?5'方向合成。( ) 。 DNA的复制需耍DNA聚合酶和RNA聚合酚()。 基因组DNA复制时，先导链的引物是DNA,后随链的引物是RNA()。 rep蛋白沿前导链模板3,-5,移动，而解螺旋酶I、II、III沿滞后链模板5 移动()。大肠杆菌 DNA聚合酶I主要是对DNA损伤的修复；以及在DNA复制时切除RNA引物并填补其留下的空隙()o 人肠杆菌DNA聚合酶III是DNA复制的主要聚合酶，具有3,?5'外切酶的校对功能，提高