激酶检测：PKC蛋白激酶活性检测实验服务案例
实验试剂：琼脂糖（Promega公司，V3125）；其他常备试剂购自sigma公司；PKC活性检测试剂盒（Promega公司， V5330）
实验仪器：电泳仪（北京六一厂，112-0640）；水平电泳槽（北京六一厂，122-3146）；电热恒温培养箱（碧云天生物，EBI025）；电热恒温水浴锅（江苏省金坛市环宇科学仪器厂，HH-8）
基本原理：分离PKC蛋白（磷酸化蛋白及非磷酸化蛋白），利用试剂盒组分将2种蛋白分离并加以区分，利用电泳琼脂糖凝胶技术显示2种不同的蛋白，利用分析软件将显示的不同蛋白定量并加以比较，以磷酸化PKC非磷酸化PKC灰度值IOD的比值显示PKC活性（PKC
活化度）。
操作步骤：
1．用预冷的匀浆器把细胞匀浆。
2．在4℃，用14000 × g 离心裂解液5 分钟，保存上清。
3．用PKC 抽提液预平衡1ml 的DEAE 纤维素柱，再把第2 步中得到的上清过柱。用5ml的PKC 抽提液洗柱子，然后用5ml 含有200mM NaCl 的PKC 抽提液洗脱含有PKC 的组分。4．用PKC 稀释液（PKC dilution buffer）将少量蛋白激酶C（Promtein Kinase C）稀释到
2.5ug/ml。随试剂盒所附的产品信息中标有这个酶的初始浓度。
5．用探头超声波破碎仪超声处理PKC Activator Solution 20-30 秒，或直到溶液变温暖。6．对每一个样品，按照下面所列顺序在0.5ml 小离心管中混合PepTag? PKC 5×BufferPepTag? C1 Peptide，超声过的PKC Activator 5X Solution，和水。在样品加入之前，小离心管一直要放在冰上。阴性对照将用于对反应进行定量时确定其摩尔吸收值（说明书第IV.部分）。
标准PKC检测
PepTag? PKC Reaction 5X Buffer，5ul
PepTag? C1 Peptide (0.4ug/ul)，5ul
PKC Activator 5X Solution 超声处理的，5ul
短肽保护液（非必须），1ul
样品， 9ul
去离子水使终体积为，25ul
PKC阳性对照检测
PepTag? PKC Reaction 5X Buffer，5ul
PepTag? C1 Peptide (0.4ug/ul) ，5ul
PKC Activator 5XSolution 超声处理的，5ul
短肽保护液（非必须），1ul
Protein Kinase C (2.5ug/ml 溶于 PKC dilution buffer），4ul
去离子水使终体积为，25ul
PKC阴性对照检测（不加PKC）
PepTag? PKC Reaction 5X Buffer，5ul
PepTag? C1 Peptide (0.4ug/ul) ，5ul
PKC Activator 5XSolution 超声处理的，5ul
短肽保护液（非必须），1ul
去离子水使终体积为，25ul
7．在0 时间点，把一支管子从冰上移到30℃水浴中孵育2 分钟。然后加入样品或蛋白激酶C 在30℃再孵育30 分钟。
8．把管子放进开水浴或95℃加热块10 分钟以终止反应。在凝胶电泳前把样品一直避光存放在4℃或-20℃。
9．把样品上样到胶上之前，往每个样品中加进1ul 的80％甘油，以确保样品保留在上样孔中（说明书第III.F 部分）。
10．每孔点样10ul，在0.8% 琼脂糖凝胶上以100V电泳15分钟分开样品，拍照。
检测结果：
说明：后面2组泳道“阳性(PC)”和“阴性(NC)”为试剂盒自带系统对照。
注：阳性条带以Gel pro4 版凝胶光密度分析软件进行分析，测其IOD（integrated optical density）累积光密度参考值。按照百分比例计算PKC活性百分比
（以阳性对照IOD值为100，其余各组的PKC+ p-PKC总和为100分配IOD数值）
Lanes:Lane 1Lane 2Lane 3Lane 4Lane 5Lane 6Lane PC
Rows( % )( % )( % )( % )( % )( % )( % ) PKC77.08275.61688.9866.97577.9374.645100 p-PKC22.91824.38411.0233.02522.0725.3550
Sum100100100100100100100 p-
0.297320.3224710.1238480.4930940.2832030.3396740 PKC:PKC
样本#1#2#3#4#5#6PC
肌酸激酶（CK）测定及意义 肌酸激酶（Creatine Kinase, CK ）通常存在于动物的心脏、肌肉以及脑等组织的细胞浆和线粒体中，是一个与细胞内能量运 转、肌肉收缩、ATP再生有直接关系的重要激酶，它可逆地催化肌酸与ATP之间的转磷酰基反应。肌酸激酶有四种同功酶形式：肌肉型（MM）脑型（BB）、杂化型（MB）和线粒体型（MiMi）。MM型主要存在于各种肌肉细胞中，BB型主要存在于脑细胞中，MB型主要存在于心肌细胞中，MiMi 型主要存在于心肌和骨骼肌线粒体中。在临床上主要用于诊断心肌梗塞。心肌梗塞患者发病后2－4 小时，血液中此酶活动即开始升高。比血清中谷草转酸酶和乳酸脱氢酶的活力变化都出现得早。1．正常参考值： 健康成年男性：38-174 U/L ； 健康成年女性：26-140 U/L 。 2．临床意义： （1）心脏疾病：此酶是继转氨酶后至今临床上最重要的酶，特别是在诊断心肌梗死上有较高价值。和常用的谷草转氨酶、乳酸脱氢酶相比，有下列优点：在这几个酶中肌酸激酶最先升高，疼痛出现后 4 小时肌酸激酶急剧上升，最高可达正常上限的10?12倍，是目前最敏感的酶试验。因肝中肌酸激酶含量很少，心脏疾病伴有肝郁血或肝损伤时，谷丙转氨酶、谷草转氨酶和乳酸脱氨酶往往升高而肌酸激酶无变化，特异性较强。红细胞中此酶活力很低，溶血标本对此酶测定干扰较谷草转氨酶和乳酸脱氢酶小，已成为临床化学方面常用酶之一，每年全
世界约进行一亿次肌酸激酶测定。在心肌梗死病程中，如肌酸激酶活力再次升高，往往说明心肌再次梗死。但此酶活力增高持续时间短，2?4天后就可恢复正常。所以如用此酶诊断心肌梗死，一定要注意病程时间。发病时间较长的病例，应测定能较长维持增高的酶活力的 乳酸脱氢酶，此时肌酸激酶活性正常并不能否定心肌梗死诊断。 （2）在骨骼肌损伤时，甚至在肌注某些药物如青霉素、氯丙嗪时，以及在进行一些心脏疾病治疗，如心导管、电复律时均可引起肌酸激酶活力升高，也就是虽然肌酸激酶同工酶诊断心肌梗死阳性率可高达98 ％，但特异性只有85 ％。目前公认测定肌酸激酶同工酶（主要为 C K －M B）是特异性更高的酶试验。 （3）有学者提出连续观察肌酸激酶动态变化，根据一些常数进行公式计算，可推测心肌梗死的大小，从而有助于判断病人预后。此法需频繁抽血，各学者对所用常数也有不同意见，用于临床可能还需要一段时间。 （4）国内资料表明：病毒性心肌炎时此酶活性明显升高，对心肌炎诊断和预后有参考价值。 （5）肌肉疾病：在Duchenne 肌萎缩患者血中，肌酸激酶极度增高，甚至可高出正常值上限50 倍，而后随病程延长下降。此病是和性染色体有关的遗传病，在无症状的女性，隐性携带者约 75 ％肌酸激酶也高于正常。其他类型的原发性肌萎缩患者肌酸激酶 也有不同程度的升高，这可用于区别继发性肌病如神经性或废用性肌萎缩，此时肌酸激酶活力往往正常。
第三方物流案例精选 Company Document number：WTUT-WT88Y-W8BBGB-BWYTT-19998
第三方物流案例 案例1 宝供物流企业集团的成功之路 21世纪是物流挂帅的世纪。“第三方物流”作为一种先进的物流服务形态，以知识化、科技化、服务综合化与个性化为主要特征，在中国蓬勃发展，方兴末艾，成为21世纪物流业发展的主流。 宝供物流企业集团，是国内第一家注册成立的物流企业集团，以其超前的物流服务理念、遍布全国的运作网络、一流的质量保证体系、全程的信息服务优势、先进的物流管理模式、丰富的物流实践经验以及强大的学习型、知识型物流人才队伍，为40多家跨国公司和十几家国内大型企业提供优质、高效的专业化物流服务，一跃成为中国第三方物流的“璀璨之星”。 宝供物流企业集团的成功之路必将成为中国第三方物流企业发展模式研究的重要案例。它的发展轨迹，或许会为那些依然在茫茫迷雾中探索的国内新兴物流企业解释许多心存以久的困惑…… 就这样走出“七个第一” 鲁迅先生曾经说过：“这世上本没有路，走的人多了便成了路。”宝供的成长经历就是从脚下还是一片“杂草丛生”的土地开始的。一个小小的转运站就是宝供物流企业集团茁壮成
长的起点。在8年这样一个不长不短的时间里，迈出一步，刷新一步，宝供的路，渐渐清晰了，明亮了，宽阔了。 刘武——现任宝供物流企业集团总裁，1985年到汕头供销储运公司工作。在近10年的工作中，他深刻感受到计划经济模式下的传统储运存在许多要改进的地方，比如说：一项简单的物流业务，往往要好几个供应商承担才能完成，铁路只管发运，车队只管运输，仓库只管收发货，相互之间既没有信息沟通，又没有统一的操作规范和标准。这种状态便客户涉及许多供应商，中国环节繁琐，有了问题相互推诿责任，不利于运作和管理，也很难适应市场经济的需求。 1992年，刘武在广州承包了一个铁路货物转运站，以“质量第一、顾客至上、24小时服务”的经营特色，为客户提供“门到门”的服务，独立承担风险和责任，避免或减少许多中国环节，极大地提高了运作和管理的效率，便转运站在全国都有了一定的知名度和良好的商业信誉。 转运站独特的运作模式和良好的质量服务保证，也吸引了国外企业的极大关注。1994年，美国宝洁公司进军中国市场，首先选择了拥有良好声誉的货物转运站，开始第一次合作。转运站按照严格的GMP质量管理标准和SOP运作管理程序，将宝洁的产品快速、准确、及时地送往全国各地的销售网点。用刘武的话说：“我们像照料婴儿一样细心呵护每一件产品。”宝洁的
细胞增殖及细胞活力检测方法 目前主要有两种用于检测细胞增殖能力的方法。一种是直接的方法，通过直接测定进行分裂的细胞数来评价细胞的增殖能力。另一种是间接的方法，即细胞活力（cell viability）检测方法，通过检测样品中健康细胞的数目来评价细胞的增殖能力。显然，细胞活力检测法并不能最终证明检测样品中的细胞是否在增殖。如细胞在某一培养条件下会自发启动凋亡程序，但药物的干扰可抑制凋亡的发生；这时若采用细胞活力检测法，显然可以区分两种条件下的细胞数量，但我们并不能从药物干扰组细胞数大于对照组的事实说明药物可促进细胞增殖的结论。所以最直接的证据应该采用方法一。 用于检测细胞增殖能力最经典的方法是用氚标记的胸腺嘧啶核苷处理细胞，再检测DNA链中氚含量。若细胞具有增殖能力，DNA合成过程中将会采用氚标记的胸腺嘧啶核苷作为合成原料，因此检测细胞DNA链内标记核苷酸的量可判断细胞是否进行DNA 的合成。 但更为常用的方法是BrdU检测法。用BrdU预处理的细胞中，BrdU可代替胸腺嘧啶核苷插入复制的DNA双链中，而且这种置换可以稳定存在，并带到子代细胞中。细胞经过固定和变性处理后，可用免疫学方法检测DNA中BrdU的含量（如采用鼠抗BrdU单克隆抗体特异识别BrdU,再采用辣根过氧化酶标记的山羊抗鼠IgG二抗标记，最后用比色法或荧光的方法进行定量测定），从而判断细胞的增殖能力。Calbiochem/EMD公司提供一种BrdU检测试剂盒，以微孔板的形式，合并所有清洗、固定、变性的步骤以单一试剂当中。比色检测在一抗二抗标记后在450nm下读数，
所有操作在3小时内结束。而且该试剂盒的灵敏度与市场上其他同类产品相比是最强的。1000个细胞以上水平的检测只需用BrdU预孵育2小时，100个细胞则采用过夜预孵育，即可检测细胞的增殖能力。 BrdU法的一个缺点是需要固定和变性等破坏DNA的处理。有些情况下，研究者可能希望在测定细胞增殖能力的同时检测细胞的总DNA含量，然而，在变性条件下，DNA 的双链结构将被破坏，DAPI和Hoechest 33342等核酸标记探针就不再能识别DNA，因而也无法估计DNA总量。Molecular Probes公司的Click-iT EdU检测试剂盒可以解决这个问题。这种方法不需要变性步骤，因为荧光探针标记的叠氮化物小分子，而不是庞大的抗体分子，可以很轻易的识别并结合未变性DNA双链中的EdU分子。采用BrdU方法时，你必须非常小心的去对DNA进行变性，才能一方面使BrdU抗体进入细胞，另一方面又保留足够的双链DNA分子来进行细胞周期的分析。有了EdU 后则不同，由于你不再需要变性，这一切都很简单了；另外，常常用于DNA变性的HCl，可能破细胞内坏蛋白的抗原识别位点，因而限制了BrdU检测法中同时检测其他蛋白的应用，但这种情况在EdU法中不存在。 图1：EdU及BrdU原理示意图（摘至invitrogen说明书） 在一些情况下，细胞活力的检测相当于细胞增殖能力的测定。用于细胞活力检测的方法又很多，这些方法主要采用特殊的试剂来测定细胞的代谢活力，Alamar Blue，MTT及其他四唑盐。它们通过检测细胞的氧化还原活性来检测细胞增殖能力，所以这是一种间接的方法。 Calbiochem的快速细胞增殖试剂盒，或者，严格来说，叫细胞活力试剂盒，采用一
服务管理运作、战略的四大经典案例 案例 1 无处不在的小曲奇饼店铺巧克力薄曲奇饼是一种很漂亮的长条形东西——有面粉、糖、油脂、整块巧克力薄片，再没有别的了。于开始是一件很不起眼的事，他们也许很难想象1992年的那一次轰动全国的争论。我们指的当然是那次有关芭芭拉·布什和希拉里·克林顿谁的曲奇饼烤得更好的争论。这些迷人的夫人无疑做出了令学生们的午餐盒大为增色的东西。然而，巧克力曲奇饼上的重大革命却使她们的努力大为失色。这场革命是一个年轻女人德比·菲娅·菲尔兹发起的，她烤制巧克力薄饼的历史可以追溯到她幼时为家人和朋友烤饼的年代。菲尔兹夫人1977年在加利福尼亚和夏威夷北部的其他城市建立了分店。在这个发展过程中，她始终亲自参与其中并保持控制，她的成功是因为她的曲奇饼的质
量，也因为她和顾客的良好关系以及她天生的经营头脑。当她在这个国家的其他地方开始发展时，显然她希望的那种亲自参与日常操作和控制的传统方法在这种广泛生产的情况下已不适用了。当时，她觉得对于她来说，赋予某种特许权，例如授权给别人并相应减少在质量和服务上的控制是不可接受的，因此，这个挑战就变成如何建立一个适合菲尔兹夫人要求的组织和运营结构。菲尔兹先生加入了。兰迪·菲尔兹是一个经济学家，菲尔兹夫妇一起发展了他们的事业。据一位公司发言人说，在1993年2月，在国内就已建立了348家菲尔兹夫人曲奇饼店，另外还有36家国际曲奇饼店。在当时苛刻的经济环境下，还有34家特许经销店。菲尔兹夫妇通过发展一种扁平的组织结构和有效的信息系统解决了保持对广泛的业务进行直接控制的问题。组织结构每家饼店只有一名管理人员，即饼店经理。一个地区经理(DSM)监督几个饼店经理
附件3： 案例编号： 案例类型： 2013年度气象服务典型案例 分析评价报告 案例名称：2013年6月7日暴雨天气过程服务分析评价报告所在部门： 负责人： 入库日期： 中国气象局公共气象服务中心制 二Ο一三年四月
索引 —2—
2013年6月7日安徽省暴雨天气过程 气象服务分析评价报告 姓名1 姓名2 姓名3（宋体、五号字、单倍行距、居中） （单位1；单位2；单位；城市邮编）（宋体、小五号字、单倍行距、居中） 摘要 2013年6月6日午后起，大别山区和沿江江南出现强降雨，强降雨中心位于安庆、池州、黄山等地，464个乡镇达100毫米以上，14个乡镇超过250毫米，安徽省气象局发布今年以来首个暴雨红色预警信号。受强降水影响，安庆、池州、黄山、宣城、铜陵5市21个县（市、区）不同程度受灾。此次暴雨过程，安徽省气象局预报准确，预警信息发布及时，暴雨天气过程前后，气象部门通过手机短信、电视节目、声讯电话、网站等渠道及时发布了各类预警预报信息，水利、电力等行业部门积极配合，引起社会的高度关注，为公众和水利、电力等行业部门提供了有效的准备时间，为减少灾害影响做出了较大的贡献。另外，此番强降水过程恰逢高考，省气象局采取多种服务手段，接受考生及家长的咨询，提供贴心服务为莘莘学子护航。 1. 概述 2. 灾情及影响 3. 致灾因子分析 4. 预报预警 4.1 预报预警准确性 4.2 预报预警及时性 4.3 预报预警发布传播 5. 气象服务特点分析 6. 社会反馈 6.1 决策服务效果 —3—
6.2 公众评价 6.3 媒体评价 7. 思考与启示 —4—
连锁物流教学软件 实施案例 上海同振信息技术有限公司 二OO五年十二月
目录
连锁物流企业案例操作一 案例一、（基本框架资料） 目的：详细了解并录入管理系统--参与连锁物流活动中的物流提供企业、仓库、物流客户、运输企业、车辆、驾驶员等所有人和物的信息。 连锁物流企业（中央总部）：（简称上海腾飞物流） 名称：上海腾飞物流集团有限公司 地址：上海吴中路1700号 管辖仓库： 吴中仓库上海吴中路1700号 仓库分5个仓间 车辆管理 所属单位：腾飞物流 沪B12345，驾驶员朱一、，解放牌15吨卡车，车长15000cm，宽4000 cm，高2500 cm 沪B23456，驾驶员刘二，解放牌10吨卡车，车长12500cm，宽3500 cm，高2000 cm
高1800 cm 沪B45678，驾驶员庄四，解放牌5吨卡车，车长8000cm，宽2800 cm，高1600 cm 驾驶员朱一 A照空闲内部员工身份证31 驾驶员刘二 A照空闲内部员工身份证311号 驾驶员陈三 A照休假内部员工身份证312 上海南京路12号 驾驶员庄四 B照空闲临时工身份证313 上海南京路13号 下属山东分公司（区域总部）：（简称山东腾飞物流） 名称：山东腾飞物流有限公司 地址：山东青岛中华路500号 管辖仓库： 青岛仓库山东青岛中华路500号 仓库分3个仓间 车辆管理 所属单位：山东腾飞物流
高2000 cm 鲁B54321，驾驶员孙六，东风牌5吨卡车，车长10000cm，宽3000 cm，高1800 cm 驾驶员赵五：A照空闲内部员工身份证350 青岛江苏路10号 驾驶员孙六：A 青岛江苏路11号 物流企业的客户1：（简称上海申美） 名称：上海申美饮料销售公司 地址：上海申美路500号 物流企业的客户1的商品： 商品规格：250ml瓶装饮料、500ml瓶装饮料 包装数量：250ml：24/箱，500ml：12/箱 物流企业的客户1的供应商：（简称江阴可口可乐） 名称：江阴可口可乐饮料有限公司 地址：江阴市人民路2010号 物流企业的客户1的客户1（商家）：（简称上海联华）
《酒店服务与管理》 国家精品案例教材 几声道歉几多缺憾 华中地区某大城市的一家中型宾馆里，住进一个才20来人的旅游团队。他们来自南美洲，成员都是退休了的蓝领阶层。 他们白天游览几个著名景点之后，回到宾馆已是不午5点光景，各自进房梳洗一番，因为离晚餐还有半个小时，于是结伴一起来到商场。 宾馆商场的面积不大，但布置十分豪华，颇具欧洲风格。商品种类不少，且大多有着精美的外包装。南美客人一个个柜台浏览过去，站在柜台内的4名服务员，从他们快速移动脚步这一点判断出：他们没有发现可买的商品。 客人很快便走遍了商场，正怏怏地朝门口走去时，一位口齿伶俐的服务员用英语询问客人是否需要帮助。一位略胖的太太说他们想带几套有关当地名胜的明信片回去，但走遍了商场却没有找到。 “很对不起，”服务员坦诚的告诉客人，“商场里没有明信片出售。” 另一位头发已经花白、颇具绅士风度的客人告诉服务员，他想买几件具有浓郁地方特色的玩具送给孙子、孙女。服务员听后又是一副无可奈何的神色：“十分抱歉，我们商场主要出售南方出产的玩具，还有一些香港产的电动玩具……”
“听说这儿木雕工艺水平很高，可是我在商场没有找到，是不是……”这是一位高个子太太提的问题。 “对不起，我们工艺品柜台供应油画、国画以及苏州的刺绣、无锡的泥娃娃、贵州的蜡染服务等。”服务员感到阵阵内疚。 南美客人怀着满肚子的无奈，离开了商场。 点评： 涉外酒店的功能渐趋齐全，旅游客人的吃、住、行、购物、娱乐等活动在酒店里已经能够获得很大程度的满足。近来新建酒店以及更新改造的老酒店一般都把商场建设作为主要项目之一来抓，商场的营业在整个酒店中已占有一定的地位。 本例中的商场，由于不能供应客人所需要的商品而失去了几笔可能是很可观的生意。这里酒店商场出售什么“的问题了。解决这个问题的关键是把自己的立足点放到客人那一边去。 商场布置得豪华典雅全些，这是酒店发展的必然，是旅游客人的需求。商场内供应一部分世界品牌商品或国内各地名特产品也是应该的，但是千万不可搞成千人一面。商品无特色是目前酒店商场的通病。客人抵达一处，常有顺便购些当地特产的欲望。本例中的那家商场尽管服务员工作做得很细致，态度主动热情，但终究因为满足不了客人的购物需求而造成服务质量问题。因此，酒店商场在提高服务素质和技能技巧的同量，还必须进行市场调查，专设特色商品柜，让客人购到满意的商品。 只为少说了一句话
肌酸激酶（CK） 主要存在于骨骼肌、脑和心肌组织中。增高可见于心肌损伤坏死、脑血管疾病、急性脑外伤、酒精中毒、全身性惊厥、癫痫发作时血清CK的水平增高；甲状腺功能减退出现黏液性水肿和脑梗死时CK水平亦可增高。手术后、心导管、冠状动脉造影、运动试验、反复肌注、剧烈运动，肌酸激酶可以过性增高。意见建议：建议你去三级医院心血管内科就诊，明确诊断后，再对症下药进行治疗 磷酸肌酸激酶增高。在心肌或骨骼肌受损时，此酶会增高，但您无相应的病史和症状，您若体检前有较剧烈的运动此酶也会增高。 中文名称：血清磷酸肌酸激酶 英文名称：CPK 化验介绍：磷酸肌酸激酶（CPK），主要存在于骨骼肌和心肌，在脑组织中也存在，是参与体内的能量代谢的一种酶。在临床上主要用于诊断心肌梗塞。心肌梗塞患者发病后2－4小时，血液中此酶活动即开始升高。比血清中谷草转酸酶和乳酸脱氢酶的活力变化都出现得早。临床意义： （1）心肌梗塞后，CPK较谷草转氨酶和乳酸脱氢酶特异性高，但持续时间短，2－4天恢复正常。 （2）病毒性心肌炎，CPK也可升高，对诊断及预后有参考价值。（3）进行性肌营养不良、多发性肌炎以及肌肉损伤时CPK也可升高。（4）严重的心绞痛、心包炎、房颤、脑血管意外、脑膜炎以及心脏手术等，CPK可见升高。
正常值：无机磷法：0－200U/dL 比色法：M（男）：0．55－7．5U/dL F（女）：1．45－4．0U/dL 肌酸磷酸激酶及其同功酶的升高是急性心肌梗死的一个重要诊断指标。肌酸磷酸肌酶是一种酶，并证实主要存在骨骼肌、心肌和脑组织中，而胃肠道、子宫、肾和膀胱只有微量的浓度。血清中的肌酸磷酸激酶升高，说明组织中有细胞坏死，这些酶有两个组成部分，肌肉部分和脑部分。血浆中证实有3种同功酶，BB-CPK、MM-CPK和MB-CPK。MB-CPK主要存在心肌组织中，可用免疫学或电泳测定的方法测得结果。 酸磷酸激酶（CPK）过高，说明你的心血管不好，需要注意身体了 尽量不要抽烟，喝酒，少吃胆固醇过高的食品 建议：磷酸肌酸激酶（CPK），主要存在于骨骼肌和心肌，在脑组织中也存在，是参与体内的能量代谢的一种酶。在临床上主要用于诊断心肌梗塞。心肌梗塞患者发病后2－4小时，血液中此酶活动即开始升高。比血清中谷草转酸酶和乳酸脱氢酶的活力变化都出现得早。 临床意义： （1）心肌梗塞后，CPK较谷草转氨酶和乳酸脱氢酶特异性高，但持续时间短，2－4天恢复正常。 （2）病毒性心肌炎，CPK也可升高，对诊断及预后有参考价值。（3）进行性肌营养不良、多发性肌炎以及肌肉损伤时CPK也可升高。（4）严重的心绞痛、心包炎、房颤、脑血管意外、脑膜炎以及心脏
第三方物流经营人的法律地位 一、基本概念 第一方：卖方、托运人 第二方：买方、收货人 第三方：根据第一方、第二方的委托提供所需服务，本人并不拥有任何商品，但为客户提供运输、存储、加工、包装等服务的人，并收取费用。 二、三方关系 1、第三方充当承运人 主要是船公司、无船承运人、陆路承运人 2、客户代理人 接受第一方、第二方的委托为其提供服务的人 3、仓储经营人 4、法律关系的界定 1）由第一方与第三方物流经营人订立服务合同，双方均为合同当事人 2）由第二方与第三方物流经营人订立服务合同，双方均为合同当事人 3）第三方同时与第一、第二方订立服务合同，同时受制于两份合同，而第一方、第二方之间不存在合同关系。 因此，在处理具体案例时，必须要了解第三方对外是以何种身份从事法律活动的。
三、国际货运代理人充当第三方物流经营人 1、根据和客户签订的合同，作为客户的代理人对外从事物流活动。这时候，一切责任归客户承担，除非货代滥用代理权或从事超出代理范围的活动。 2、作为承运人完成或组织完成货物运输并承担责任。 3、作为经营人完成或组织完成货物运输，但不承担运输责任。（这是指由他人签发全程货运单证，或委托他人完成或组织完成货物运输）了解货代在物流活动中所扮演的角色，是在具体案例分析中划分责任的重要依据。 4、货代充当承运人时与其他当事人的关系图示
相关案例 案例1：某客户委托物流公司出运一批干木耳，委托书中指示：由物流公司安排订舱、装船出运、并代为报关、检验。由于这批货未能在信用证装运期内出运，客户要求船公司倒签提单，但船公司不接受倒签提单的签发，于是物流公司出具自己的提单给客户办理结汇，再由船公司出具提单给物流公司。在装船过程中，对集装箱外表状况各方均未异议。在集装箱运抵卸货港时，收货人也未对集装箱外表状况提出异议。但收货人在将集装箱运到仓库拆箱时发现木耳受潮，后经检验，检验报告证明干木耳受潮系箱子顶部漏水，而且是淡水导致的。请问收货人应当向谁索赔？ 分析： 相关名词： 信用证是银行用以保证买方或进口方有支付能力的凭证。 在国际贸易活动中，买卖双方可能互不信任，买方担心预付款后，卖方不按合同要求发货；卖方也担心在发货或提交货运单据后买方不付款。因此需要两家银行做为买卖双方的保证人，代为收款交单，以银行信用代替商业信用。银行在这一活动中所使用的工具就是信用证。 倒签提单是指承运人应托运人的要求在货物装船后，提单签发的日期早于实际装船完毕日期的提单。 在现代国际贸易中，采用跟单信用证方式付款是最常见、最主要的支付方式。在采用这种付款方式的情形下，开证银行应买方的请求开
龙源期刊网 https://www.doczj.com/doc/694901458.html, 重要天气过程气象预报服务在农业中的成功案例分析 作者：许永姿 来源：《农民致富之友》2015年第18期 [摘要] 2014年7月23日-25日灵璧县遭遇当年第10号台风“麦德姆”，受其影响，灵璧县大部分乡镇都出现了短时强降水和雷雨大风等强对流天气，气象部门针对此次台风过程的预报、预警等方面的整体服务较全面、细致，基本做到了预报及时准确，取得了较好的社会评价，也大大的降低了农业生产中的损失，是一次较成功的服务典型事例。 [关键词] 台风重要天气过程气象服务案例分析 [中图分类号] S165 [文献标识码] A [文章编号] 1003-1650 （2015）09-0293-01 灵璧县是受强对流灾害性天气影响较为严重的地区之一，出现的强对流天气主要包括雷雨大风、冰雹、暴雨、龙卷等，历史上受台风影响并造成强对流天气的次数不多，2014年7月23日-25日灵璧县遭遇当年第10号台风“麦德姆”，产生了强对流天气。近几年来，随着气象预报预警技术的不断发展和提高，强对流重要天气过程的气象预报预警越来越准确及时，多渠道、多方位的预报预警取得了较好社会效益和经济效益，但气象预报服务成功案例的分析做的比较少，特别是本地针对台风的预报预测服务较成功的更少，本文主要针对2014年7月23-25日强对流天气过程的气象预报服务进行总结和分析。并总结出此次气象服务过程的成功经验和不足之处，为今后提高气象预报服务水平积累经验。 1 天气实况和灾情 1.1 天气实况 受今年第10号台风“麦德姆”影响，23日傍晚起淮北东部和沿淮淮河以南大部分地区有降水，雨量分布不均。24日傍晚至夜里，强降水主要位于江淮之间东部，25日8时后我省降水明显减弱。23日16时～25日08时累计降雨量：大于50毫米的降水覆盖面积有4.98万平方公里，100毫米以上的降水覆盖面积有1.56万平方公里，有7个乡镇超过200毫米。淮北东部和沿淮淮河以南大部分地区有7-8级阵风，最大石台27米/秒（10级）。 23日15时开始灵璧县灵城镇、娄庄镇、虞姬乡、浍沟乡均出现了短时强降水和雷雨大风强对流天气，最大雨量在58.1毫米，虞姬乡高速公路23日17时出现11级大风，灵城在23日16时42分出现9级大风，其余乡镇也均出现了5-7级大风。 2 气象服务的组织实施情况
第三方物流应用案例分析 现在，人类已经迈入到二十一世纪，世界经济呈现出快速发展态势，现代科学技术更是突飞猛进，新技术、新产品不断涌现，引发了生产、生活、工作和学习等诸多方面的变革。 物流作为一个新思维、新技术的代表，业已发展成为一个新兴产业，并在全球范围内迅速发展壮大。目前，在国际上，物流产业已经被普遍认作是国民经济和社会发展的动脉，是关系到国计民生的基础性产业，是衡量一个国家现代化水平和综合国力的重要标志之一，被喻为促进经济发展的"加速器"。 从上个世纪八十年代起至今，我国经历了由计划经济向市场经济转型的过程。企业作为市场运营的主体，花费比以往更多的精力来投入到自身的核心业务中，最大程度地利用社会分工来提高企业的生产效率、效益和效能，以适应日益加剧的行业竞争。物流特别是第三方物流，正是顺应现代经济发展要求而产生、发展壮大起来的。 现在，第三方物流在我国企业中应用的实际案例很多，经营第三方物流的单位也在日益增加。下面，结合上海某物流公司的第三方物流实际操作情况，分析我国第三方物流实施过程中产生的经济效益以及出现的诸多问题，探讨第三方物流在我国的实际应用情况。 企业概况 该物流公司的上级主管公司是一家中外合资的股份制公司，是由国有集团和国外投资方共同合资成立的物流企业，并以国有公司为主要股东。 早在我国还在计划经济时期，该上级主管公司就已经在仓储、运输和配给等方面建立起良好的基础条件，拥有诸如仓库、堆场、车队、专业管理和操作人员等硬件和软件资源储备。 随着我国市场经济的推广和深化，该上级主管公司的工作重点开始倾向于专业领域的进出口业务发展。但是，在企业发展过程中，公司深深感到，虽然原有的资源在新的发展环境中曾发挥出很大的作用，但终因人力、物力的有限而跟不上进出口业务量日趋增长的需求。特别是我国成功加入世界经济贸易组织以后，这种矛盾变得更加激化，亟待解决。在这种情况下，公司经过慎重考虑，决定进行资产重组，将公司内部原有的物流部门从公司整体中分离出来，充分利用成型的设备设施、优良的交通地理位置等优势资源、同时引进了外资和专业的技术人员，成立一家专门的物流公司（即该物流公司），主营第三方物流业务。 1．节省了企业仓储环节。生产企业可以直接将产品从加工工厂中发出，通过车队的运送，存放在该物流公司的仓库或堆场，等待销售指令。这种操作流程，既节省了自身设立仓库的费用，同时也避免了管理经营的风险；
细胞增殖及细胞活力检 测方法 Document number：NOCG-YUNOO-BUYTT-UU986-1986UT
细胞增殖及细胞活力检测方法 目前主要有两种用于检测细胞增殖能力的方法。一种是直接的方法，通过直接测定进行分裂的细胞数来评价细胞的增殖能力。另一种是间接的方法，即细胞活力（cell viability）检测方法，通过检测样品中健康细胞的数目来评价细胞的增殖能力。显然，细胞活力检测法并不能最终证明检测样品中的细胞是否在增殖。如细胞在某一培养条件下会自发启动凋亡程序，但药物的干扰可抑制凋亡的发生；这时若采用细胞活力检测法，显然可以区分两种条件下的细胞数量，但我们并不能从药物干扰组细胞数大于对照组的事实说明药物可促进细胞增殖的结论。所以最直接的证据应该采用方法一。 用于检测细胞增殖能力最经典的方法是用氚标记的胸腺嘧啶核苷处理细胞，再检测DNA 链中氚含量。若细胞具有增殖能力，DNA合成过程中将会采用氚标记的胸腺嘧啶核苷作为合成原料，因此检测细胞DNA链内标记核苷酸的量可判断细胞是否进行DNA的合成。 但更为常用的方法是BrdU检测法。用BrdU预处理的细胞中，BrdU可代替胸腺嘧啶核苷插入复制的DNA双链中，而且这种置换可以稳定存在，并带到子代细胞中。细胞经过固定和变性处理后，可用免疫学方法检测DNA中BrdU的含量（如采用鼠抗BrdU单克隆抗体特异识别BrdU,再采用辣根过氧化酶标记的山羊抗鼠IgG二抗标记，最后用比色法或荧光的方法进行定量测定），从而判断细胞的增殖能力。 Calbiochem/EMD公司提供一种BrdU检测试剂盒，以微孔板的形式，合并所有清洗、固定、变性的步骤以单一试剂当中。比色检测在一抗二抗标记后在450nm下读数，所有操作在3小时内结束。而且该试剂盒的灵敏度与市场上其他同类产品相比是最强的。1000个细胞以上水平的检测只需用BrdU预孵育2小时，100个细胞则采用过夜预孵育，即可检测细胞的增殖能力。 BrdU法的一个缺点是需要固定和变性等破坏DNA的处理。有些情况下，研究者可能希望在测定细胞增殖能力的同时检测细胞的总DNA含量，然而，在变性条件下，DNA的双链结构将被破坏，DAPI和Hoechest 33342等核酸标记探针就不再能识别DNA，因而也无法估计DNA总量。Molecular Probes公司的Click-iT EdU检测试剂盒可以解决这个问题。这种方法不需要变性步骤，因为荧光探针标记的叠氮化物小分子，而不是庞大的抗体分子，可以很轻易的识别并结合未变性DNA双链中的EdU分子。 采用BrdU方法时，你必须非常小心的去对DNA进行变性，才能一方面使BrdU抗体进入细胞，另一方面又保留足够的双链DNA分子来进行细胞周期的分析。有了EdU后则不同，由于你不再需要变性，这一切都很简单了；另外，常常用于DNA变性的HCl，可能破细胞内坏蛋白的抗原识别位点，因而限制了BrdU检测法中同时检测其他蛋白的应用，但这种情况在EdU法中不存在。
国家教育部认证金奖课程 《餐厅服务与管理》 授课案例部分 餐前服务环节（预订 / 准备） 1 、叫出客人的名字 一位美国客人住进了北京建国饭店。中午的餐厅进餐，接待他的是一位刚上岗不久的男服务员。这位服务员一边问候客人一边心中暗暗着急，他怎么也想不起这位客人的名字。他仔细观察，忽然看到客人放在桌边的房间钥匙牌，想出了办法。当他去取热水时，利用这个空隙向总台查询了客人姓名，等回到桌前为客人服务时，就亲切称呼客人名字了。客人十分惊讶，原来他是第一次住进这家饭店。客人得知了服务员的用心后，非常高兴，倍感亲切和温馨。 [ 案例评析 ] 本例中这位新员工想方设法叫出客人的名字，给客人带来惊喜与亲切，是具有强烈服务意识的体现。现代酒店的营销专家十分推崇” 姓名辨认” ，认为酒店员工如果在第二次或者第三次见到客人时，能在先生或小姐之前冠以姓氏，将会使客人感到异常亲切，这是一种人情味极浓的服务。 2 、客人的“预定” 一天中午，一位客人打电话到餐厅消费，并说明要吃一个“Ｔ骨牛扒”，希望餐厅能为其预留位置。当时，接电话的预定员正准备去用午餐，考虑到客人要半小时后才能过来，而这段时间餐厅生意都不旺，肯定有空位，且自己用餐时间不用半个小时，于是她在未向其他同事交待的情况下便吃饭去了。大约一刻钟后，客人来到餐厅，询问另一名当值的服务员，刚才已打电话来预定，午餐是否准备好？当值的服务员称没有接到客人电话，不知此事。客人听后非常生气，于是向餐厅经理投诉。 [ 案例评析 ] 准确的沟通是酒店服务之魂，没有沟通就没有服务。案例中存在 3 个方面的问题需要引起注意：
一是第一位服务员对客人的理解有误。客人称半小时后进餐，其实是客人希望餐厅马上准备好食物，呆会来餐厅就可以吃到预定的午餐，因为他可能有事情要办而赶时间或是不愿意在餐厅等待，而不是半小时后再来餐厅点菜。 二是沟通的方式问题。作为餐厅服务人员，要注意客人口头承诺的随意性，比如该客人说半小时后来进餐，却在一刻钟后就来了。所以无论遇到什么情况，服务人员都要尽快做完自己手中的服务项目，而不要根据客人口头所说来安排自己的工作。脱岗时则一定要将工作及时移交同事，避免出现服务真空或盲点。 三是当值服务员与客人的沟通问题。在未弄清情况时，餐厅服务员随便对客人说“不”。要知道，把责任推给客人是很容易引起客人不满和投诉的。 3 、微笑——化解矛盾的润滑剂 一个阳光普照，风和日丽的星期六，山房生意兴隆，人潮涌涌。这时，“果房”餐厅，迎来了一位西装革履、红光满面、戴墨镜的中年先生。见到这种客人，谁都不敢怠慢，服务员快步上前，微笑迎宾，问位开茶。可是，这位客人却不领情，一脸不高兴地问道：“我两天前就已在这里预定了一桌酒席，怎么看上去你们没什么准备似的？”“不会的，如果有预定，我们都会提早准备的，请问是不是搞错了？”服务员连想都没想就回答了那位客人。可能是酒席的意义重大，客人听了解释后，更是大发雷霆，并跑到营业部与营业员争执起来。营业部经理刘小姐闻讯赶来，刚开口要解释，客人又把她作为泄怒的新目标，指着她出言不逊的呵斥起来。当时，刘小姐头脑非常清醒，她明白，在这种情况下，做任何的解释都是毫无意义的，反而会招惹客人情绪更加激动。于是就采取冷处理的办法让他尽情发泄，自己则默默地看者他“洗耳恭听”，脸上则始终保持一种亲切友好的微笑。一直等到客人把话说完，平静下来后，刘小姐才心平气和地告诉他山房的有关预定程序，并对刚才发生的事表示歉意。客人接受了她的劝说，并诚恳的表示：“你的微笑和耐心征服了我，我刚才情绪那么冲动，很不应该，希望下次还讷讷感来到贵山房尖刀你亲切的微笑。”一阵暴风雨过去了，雨过天晴，山房的服务空气也更加清新了。 [ 案例评析 ] 本例的症结在于实习员工质疑客人“如有预定，我们都会提早准备的，请问是不是搞错了？”的言语，他应向客人说明“您等等，我去帮您查对一下好吗？”这样做，既可以避免发生客人大发雷霆、与营业员争执起来的尴尬局面，又是一次促销行为，争取机会为酒店多做生意。 在酒店的服务工作中，有许多细枝末节的琐碎事情，然而正是这些事才构成了酒店的服务质量。在整个服务中需要服务员的细心和周到，容不得任何环节上出现闪失。为确保旧点优质服务的好名声，酒店各部门、各岗位都必须竭尽全力演好本角色的“戏”，哪怕只有一句很简单的“台词”，或仅有一个很不起眼的动作都容不得马虎。
肌酸激酶文献综述 摘要：本文从肌酸激酶的在体内的分布，及其临床意义，对肌酸激酶的现状进行说明，并对其未来的发展趋势进行阐述。 关键词：肌酸激酶、研究现状、发展趋势 1、肌酸激酶（Creatinekinase，CK）旧称为肌酸磷酸激酶（Creatinephosphokinase，CPK），但现在不叫CPK。CK分子量为81000，由两个亚基组成。通常存在于动物的心脏、肌肉以及脑等组织的细胞浆和线粒体中，是一个与细胞内能量运转、肌肉收缩、ATP再生有直接关系的重要激酶【1,2】，它可逆地催化肌酸与ATP之间的转磷酰基反应。 CK在ATP参与下催化肌酸磷酸化，生成ATP(供给肌肉能量的来源)和磷酸肌酸。这种酶催化反应是可逆的。肌酸激酶有四种同功酶形式：肌肉型(CK-MM)、脑型(CK-BB)、杂化型(CK-MB)和线粒体型(CK-MiMi)。CK-MM型主要存在于各种肌肉细胞中，CK-BB型主要存在于脑细胞中，CK-MB型主要存在于心肌细胞中，CK-MiMi型主要存在于心肌和骨骼肌线粒体中。临床上测定的血清CK指的是总的活性。 2、生理结构 天然的肌酸激酶分子是一个紧密的球状结构。肌酸激酶有四种同功酶形式：肌肉型(MM)、脑型(BB)、杂化型(MB)和线粒体型(MiMi)。根据目前已经测定的兔、人、鸡、鼠肌酸激酶的一级结构，M型亚基由387个氨基酸残基组成，分子量为43 KDa左右，分子内有8个巯基，但无二硫键。大熊猫肌肉型肌酸激酶也是二聚体酶，每个亚基由376个氨基酸残基组成，分子量为42 KDa近来关于肌酸激酶构象变化和活力变化关系的研究显示了酶分子活性部位构象的柔性，即酶分子活性部位的微区构象在变性剂作用下易发生改变而导致酶分子快速失活，此时酶分子整体构象尚未发生明显变化。周海梦等人用荧光探针标记兔肌肌酸激酶的活性部位，监测了荧光衍生物微区构象变化与相应酶活力丧失速度，发现二者几乎一致，为酶活性部位柔性的假说提供了有力的证据。 CK分布：分布于骨骼肌、心肌、脑、甲状腺、肺组织、胃肠平滑肌中，以骨骼肌含量最高，其次为心肌，再其次为脑和胃肠平滑肌。在肌纤维中主要集中于亚细胞结构的上清部分，也少量含于线粒体、微粒体部分。正常情况下，细胞外液的CK浓度仅是细胞内液的1/1000-1/10000。因此，血清中肌酸激酶升高一般提示含有CK的组织细胞的通透性增强或组织细胞的破坏。 正常人的CK变动： 参考值：
* 物流案例分析及答案 案例1：某新成立的第三方物流企业拥有3吨普通卡车50辆，10吨普通卡车30辆，高级无梁仓库20000平方米，层高14米，地处上海市的莘庄南部，邻近沪闵路和莘松公路，请比较以下四种市场定位中哪一种最适合于该企业，为什么 (1)上海西部地区的国际货运代理; (2)企业的第三方物流企业; (3)车辆外包，仓库出租; (4)省际运输仓储企业。 ￥ 答：最适合的市场定位应当是：(2)闵行地区外商投资企业的第三方物流企业。 (1)要成为国际货运代理企业，需要外经贸部批准，手续繁琐。更重要的是国际货运代理企业主要处理集装箱业务，车辆最好是集装箱卡车，而本企业只有普通卡车，不
具备条件，因而不予考虑。 (2)闵行地区是上海最早的经济技术开发区，外商投资企业较多，并且具有较长的历史，更往西部的松江经济开发区也有许多外商投资企业。这些货主企业，对于采购第三方物流早有需求。只要掌握了他们的物流需求，并充分结合自己的能力，就有可能提供令人满意的服务。 (3)车辆外包、仓库出租尽管可以极大程度地调动司机和仓库地工作积极性，但是不能发挥企业的规模优势，与物流的整合资源的理念也是截然对立的。 (4)省际运输仓储业的定位是基于传统方式，面向公众的服务方式，并没有凸现物流企业的特点。 ： 案例2:甲公司要从位于S市的工厂直接装运500台电视机送往位于T市的一个批发心。 这票货物价值为150万元。T市的批发
中心确定这批货物的标准运输时间为天，如果超出标准时间，每台电视机的每天的机会成本是30元。甲公司的物流经理设计了下述三个物流方案，请从成本角度评价这些运输方案的优劣。 (1)A公司是一家长途货物运输企业，可以按照优惠费率每公里元/台来运送这批电视机，装卸费为每台元。已知S市到T市的公路运输里程为1100公里，估计需要3天的时间才可以运到(因为货物装卸也需要时间)。 (2)B公司是一家水运企业，可以提供水陆联运服务，即先用汽车从甲公司的仓库将货物运至S市的码头(20公里)，再用船运至T市的码头(1200公里)，然后再用汽车从码头运至批发中心(17公里)。由于中转的过程中需要多次装卸，因此整个运输时间大约为5天。询价后得知，陆运运费为每公里元/台，装卸费为每台元，水运运费为每百台元。 (3)C公司是一家物流企业，可以提供全方位的物流服务，报价为22800元。它承诺
细胞活性测定方法 细胞活性指标通常包括细胞膜对核酸染料的通透性，代谢活性，膜电位等。核酸染料有多种，如EB带有单个自由正电荷，能通过完整细胞膜。而PI，TO—PRO—1，TO-PRO-3等等带一个有四铵基团和两个或两个以上正电荷的染料是不能通过完整细胞膜进入细胞内的。因而吸收了这些多电荷染料的细胞被认为是非活性的。另外，一些酸性染料，如上面提到的台盼兰，曙红等都是膜非通透性。 代谢活性是另一重要指标，它通过细胞内的酶的活性来判定。使用细胞某种酶的底物，它能通过（或是不能通过）完整细胞膜，在细胞内被酶切而产生荧光性，膜不通透性产物，能在细胞膜完好的细胞内存留，在细胞膜不完整的细胞内散失很快。通过检测荧光强度就可知细胞代谢活性。FDA(fluorescein diacetate)和CTC（5-cyano-2,3-ditolyl tetrazolium chloride）是常用的两种底物。前者虽然透过细胞膜的速度较慢，但它的产物基本不往外通透。后者经细胞内脱氢酶催化而具有荧光性，能提供细胞呼吸代谢系统活性和细胞膜完整性信息。 正常细胞的细胞膜两侧维持着一个胞内为负的膜电位为梯度，带正电的亲脂性染料，如Cyanines类能因电梯度而通过细胞的脂双层膜聚积在活细胞内，带负电的亲脂性染料如oxonols会被排除在外。不再维持着膜电位梯度的细胞里，则会吸收更多Oxonols类染料。 用流式细胞仪测量的方法优点是，灵敏，荧光强度精确定量，快速高通量的检测逐个细胞，可同时检测细胞的多个活性指标，提高可信度，结果具有统计意义。缺点是，实验较MTT等复杂，费用较高。 常用的细胞活性测定方法有台盼蓝染色法、克隆（集落）形成法、3H放射性同位素掺入法、MTT法等。其中MTT法以其快速简便，不需要特殊检测仪器、无放射性同位素、适合大批量检测的特点而得到广泛的应用。但MTT法形成的Formazan为水不溶性的，需要加有机溶剂溶解，由于在去上清操作时会有可能带走小部分的Formazan，故有时重复性略差。为了解决这个问题，研究人员又开发了很多种水溶性的四氮唑盐类：如XTT、CCK-8（WST-8）等。 1．MTT法 MTT：化学名：3-（4，5-二甲基噻唑-2）-2，5-二苯基四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝。检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲臜，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高、经济。 缺点：由于MTT经还原所产生的甲臜产物不溶于水，需被溶解后才能检测。这不仅使工作量增加，也会对实验结果的准确性产生影响，而且溶解甲臜的有机溶剂对实验者也有损害。
气象局的经费该不该全额拨款？ ——析论事业单位的经费供给1、分析气象产品的外部性问题 外部性是指某一个体的经济行为以价格机制以外的方式影响他人，即一个实体（个人或企业）的经济行为影响了其他个体（使之受损或受益），却没有为之给予相应的补偿或没有获得应有的报酬的现象。如果某个经济行为个体的活动使他人或社会受益，而受益者无须花费代价，我们称之为产生了正外部性；如果某个经济行为个体的活动使他人或社会受损，而造成外部不经济的人却没有为此承担成本，则产生了负外部性。负的外部经济性破坏了整体社会的最优化，因此要付出代价。 本例中的天气预报属于气象产品，气象产品不仅包括天气预报，而且包括未来气候预测以及人类活动对气候和环境影响的研究成果等。以前，我们只是将气象服务简单的认为对近期天气情况的预报问题，而如今，气象产品已经是全球性的产品。 当今，全球变暖日益加剧，自然环境遭到严重的破坏。导致我国空气污染的原因不仅仅在于工业废气和汽车尾气的排放，更在于治理污染的问题上市场失灵和政策缺位。市场失灵导致企业和个人无需为排污行为承担足够的成本。政策缺位则主要体现在我国的空气环保标准显著低于国际水平，同时“政府失灵”的问题也一直存在。以前的气象产品带给我们更多的是正外部性，清洁的空气，繁茂的树林，而现在的气象产品，就如现在一直存在的雾霾问题带给我们的则是负外部性，对我们的生活、工作以及整个经济的发展都造成了极大的伤害。 2、解决气象产品负外部性的措施 像雾霾等空气污染已经给我国经济造成严重损害，那我们该如何最大化的减少气象产品带给我们的负外部性呢？首先我们应该分析导致这些气象产品演变的原因。一方面，人类活动的加剧，大型工程及工业生产，工业废气和汽车尾气的排放都会导致气候的巨大变化；另一方面，资源的消耗和工业的制造方法以及消费者的习惯变得更加明显，由于气象方面的原因造成的损失日趋增加，而对气象产品的生产却不具效率。 我们明白，既有的增长模式难以持续，如果加大环保力度，虽然会抑制对重