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摘要：通过将组成生物系统的各类单元模块化、标准化，合成生物学希望达成一种新的生物技术发展模式：即从主要开发里欧那个天然生物系统既有功能，变为用人工设计合成的生物系统来完成天然系统不能完成或者完成效率低的功能。合成生物学通过开展生物元件或者器件、生物途径等多个层次的工程化研究来实现上述目标。
◆综述:
1.Boyle PM,Silver PA.2009. Harnessing nature’s toolbox: regulatory elements for
synthetic biology. J R Soc Interface, doi；10.1098.rsif.f8.0521.focus
2.McArthur IV GH，Fong SS.2010. Toward engineering synthetic microbial
metabolism. J Biomed Biotechnol,doi:10.1155/2010/459760。
综述了元器件工程（components engineering）、和途径工程（pathway engineering）的进展。
3.Andrianantoandro E,Basu S,Karig D,et al.2006.Synthetic biology:new engineering
rules for an emerging discipline. Mol Syst Biol,2:14-27。
◆合成生物学元器件工程：
利用不同调控机制的人工调控器件:
4.Boyle PM,Silver PA.2009. Harnessing nature’s toolbox: regulatory elements for
synthetic biology. J R Soc Interface, doi；10.1098.rsif.f8.0521.focus。
系统的综述了国际上相关工作研究:细胞中的转录调控、RNA调控、蛋白质信号转导等生物调控机制都已经被成功的用于构建合成生物调控元件。
转录调控
5.Elowitz MB，Leibler S.2000. Asynthetic oscillatory network of transcriptional
regulators. Nature,403:335。
基于转录调控的合成调控器件：基因振荡器
6.Stricker J,Cookson S,Bennett MR, et al.2008. A fast, robust and tunable
synthetic gene oscillator. Mature 456：
基因振荡器
7.Ajo-Franklin CM, Drubin DA, Eskin JA, et al. 2007.Rational design of memory in
eukaryotic cells. Genes Dev,21:2271-2276。
对输入信号具有永久“记忆”功能的转录调节单元。
8.Friedlland AE,Lu TK et al.2009. Synthetic gene networks that count.
Science,324:1199-1202。
计数器
RNA的调控：
9.Isaacs FJ,Dwyer DJ,Collins JJ.2006. RNA Synthetic biology. Nat
biotechnol,24:545-554。
位于5‘非翻译区（UTR）的Riboswitch可作为小分子感受器，用于小分子信号调控蛋白质的翻译。
10.Win MN, Smolke CD.2008. Higher-order cellular information processing with
synthetic RNA devices. Science 322:456-460。
Riboswitch区域还可以和核酶相连，通过小分子控制核酶的催化功能。11.Bayer TS,Smoke CD.2005. Programmable ligandcontrolled riboregulators of
eukaryotic gene expression. Nat Biotechnol,23:337。
利用Riboswitch可设计感受单种小分子信号的“翻译开关”，在特定小分子存在时候实现（或解除）对特定mRNA的翻译机制，还可以实现用多种小分
子信号的组合输入来调控蛋白质表达水平。
12.Rinaudo K，Bleris L，Maddamsetti R，et al.2007. A universal RNAi-based logic
evaluator that operates in mammalian cells. Nat Biotechnol,25。
设计验证了小干扰RNA（siRNA）的组合逻辑调控能力，同一阻遏蛋白由两种具有不同UTR区的mRNA编码，只有当良好总相应的siRNA同时存在时候，其下游基因的抑制才能被解除。
13.Swinburne IA, Miguez DG, Landgraf D,et al.2008. Intron length increases
oscillatory periods of gene expression in animal cells. Genes Dev,22；2342。
在高等真核生物中，内含子也可以是mRNA层次调节的重要途径。内含子可能调控的机制之一，是增长mRNA的成熟时间，延长蛋白质表达。Swinburne 等用一个内含子和自抑制回路的人工基因器件验证了该器件能够产生脉冲式的基因表达，并且脉冲的频率依赖于内含子的长度。
信号转导蛋白调控：
14.Moglich A, Ayers RA，Moffat K.2009. Design and signaling mechanism of
light-regulated histidine kinases. J Mol Biol, 358:1433-1444。
Moglich等用感光的LOV结构域（PAS结构域的一个亚家族）替换了一种天然组氨酸激酶中感受氧分压的LOV结构域，成功合成了一种人造感光信号蛋白。
15.Koide S.2009. Generation of new protein functions by nonhomologous
combinations and rearrangements of domains and modules. Curr Opin Biotechnol,20。
综述了近年来通过结构域重排获得新的功能的蛋白质，特别是新的结合蛋白、分子开关蛋白的研究进展。
元器件的模块化、通用性、多样化:
16.Skerker JM, Perchuk BS, et al.2008. Rewiring the specificity of two-component
signal transduction systems. Cell,133:1043-
等用细菌双组分系统，展示了仅仅通过两个界面残基的突变，就能改变上游组氨酸激酶和下游效应分子的连接特异性，从而改变了信号通路。但不破坏相应的调节、调控或者催化功能。
17.Bhattacharyya RP,Remenyi A,Yeh BJ,et al.2006. Domains,motifs,and scaffolds:the
role of modular interactions in the evolution and wiring of cell signaling circuits.
Annu Rev Biochem,75。
新的相互作用特异性还可以通过在上下游分子中分别引入的“插座”
（adaptor）结构域、能够被adaptor特异性识别的配体结构域实现。Lim等用这一策略改造了MAPK激酶信号传导通路中脚手架蛋白的adaptor结构域，实现了真核细胞中信号通路的重连接。
18.Ellis T,Wang X,2009. Diversity-based，modelguided construction of sysnthesic
gene networks with predicted functions. Nature Biotechnol,27。
除了相互作用的特异性以外，相互连接的上下游部件之间的输入输出强度不匹配，也是部件之间不能协同工作的原因，Ellis等通过构建启动子文库，获得一系列有不同定量特性（转录活性）的启动子，实现对其定量测试。在后续设计的调控网络中，依据数学模型，直接选择使用具有所要求的定量特性的启动子元件。这一工作很好的战士了合成生物学通过序列变化产生有多样化定量特性的同类功能元件，以及模块化构建复杂生物系统的研究策略。
人工器件的设计与筛选
19.Koide S.2009. Generation of new protein functions by nonhomologous
combinations and rearrangements of domains and modules. Curr Opin Biotechnol,20。
在相关天然蛋白结构序列数据较为充分的情况下，合理设计有可能把对连接片段的筛选范围缩小至数十种，对结构域界面的筛选范围缩小到数个氨基酸为点突变。
20.Mandell DJ，Kortemme T.2009. Computer-aided design of functional protein
interactions. Nat Chem Biol,5:797
目前，在蛋白质天然结构框架上从头设计新的相互作用尽管已经取得很大的进展，但很大程度上还受到理论模型精度不足的限制。对一些蛋白质家族，如细菌双组份信号转导蛋白、DNA结合结构域等，对其序列、结构、进化信息的分析有可能让我们判别其像话作用界面剂界面上对像话作用特异性有决定性影响的残基。对这些位置的序列进行设计或者有限的随机突变可获得新的相互作用特异性。
人工调控元件用于研究天然调控系统
21.Kornmann B，Currie E，Collins SR，et al.2009. An ER-Mitochondria tethering
complex revealed by a synthetic biology screen. Science,325。
用人工构建的、包含线粒体膜结合结构与和内质网膜结合结构域的人工蛋白导入酵母细胞，用遗传互补的方法发现了内源线粒体-内质网系连复合物。
◆合成生物学途径工程
途径设计
22.Prather KLJ, Martin CH.2008. De novo biosynthetic pathways: rational design of
microbial chemical factories. Curr Opin Biotechnol,19:468。
提出，可用三种不同的策略在一种细胞中引入新的生物合成途径。首先，可从不同来源物种独立获得途径中的各个部分，置于同一宿主中。例如：23.Nakamura CE, Whited GM.2003. Metabolic engineering for the microbial
production of 1,3-propanediol. Curr Opin Biotechnol,14。
第一种：在大肠杆菌中的1，3-丙二醇合成途径，就是用分别来源于肺炎克氏杆菌和酿酒酵母的部分代谢途径组装的。又如Keasling等在酵母菌中构建的青蒿素合成途径，就是利用了青蒿中的部分代谢途径（amorphadiene 合成酶）。
24.De Boer AL,Schmidt-Dannert C.2003. Recent efforts in engineering microbial
cells to produce new chemical compounds. Curr Opin Chem Biol,7
第二种：可对宿现有途径中的酶进行修饰改造，改变其底物专一性，让其作用于新的代谢中间体或者产物。最后一种：上述两种方法结合起来，利用独立来源的各部分形成新的代谢途径，对其中的酶进行改造甚至涉及新的催化分子，形成真正的“全新”的生物合成途径。不过目前为止，例子很少，因为理论上可能生物转化途径很多，但要从自然界中找到适于催化预设的生物转化过程的酶并不容易，能够针对特定生物转化目标，涉及转化路径并从大量天然酶中挑选适于催化个步骤的候选酶的工具已经出现。
25.Chou CH,Chang WC,Chiu CM,et al.2009. FMM:a web server for metabolic
pathway reconstruction and comparative analysis. Nuc Acids Res,37。
互联网工具From Metabolite to Metabolite(FMM)能够根据用户输入的代谢反应物和终产物，构建由已知酶催化步骤组成的可能途径。
26.Prather KLJ, Martin CH.2008. De novo biosynthetic pathways: rational design of
microbial chemical factories. Curr Opin Biotechnol,19:468。
Retro-Biosynthesis Tool(ReBiT)提供了能够催化不同类型官能团转化的酶促过程的数据库及相应的检索工具。
途径合成
27.Czar MJ,Anderson JC, Bader JS,et al.2009. Gene synthesis demystified. Trends
Biotechnol,27:63-72。
综述了目前的基因合成策略。
28.Engler C，Gruetzner R，Kandzia R，et al.2009. Golden gate shuffling: a one-pot
DNA shuffling method based on typeⅡrestriction enzymes. PLoS ONE,4:e5553。Golden gate shuffling利用第二类限制性内切酶，可以一步将多个组件连接到一起。
29.Shetty RP, Endy D, Knight Jr TF.2008. Engineering BioBrick vectors from BioBrick
parts. J Biol Eng，2: article 5。
设计了一种标准的拼接方法，简化了元器件的组装过程：每一个元件DNA 都带有韩特定酶切位点的前缀序列和后缀序列，前后两个元件拼接后形成的新的组合序列保留原来的前缀序列和后缀序列。标准的3A BioBricks 组装方法可将两条带标准前缀序列和后缀序列的序列连接并插入到质粒，而无需额外的酶切片段分离等步骤。
30.Quan J, Tian J.2009. Circular polymerase extension cloning of complex gene
libraries and pathways. PLoS ONE，4:e6441.
CPEC完全利用质粒和组件之间的重叠片段，完全借助聚合酶链式反应进行拼装，避免了酶切、连接等步骤。他提供了一种将多包含多个积阴德长片段克隆到质粒上，或者构建多个组件组合的质粒文库的高效方法。
途经分析与调控:
目的是将细胞内代谢流最大限度的引导到目标生物转化过程，同时尽可能的减少外源人工途径对细胞的不利影响。
31.Ro DK, Paradise TM, Ouellet M,et al. 2006. Prodution of the antimalarial drug
precursor artemisinic acid in engineered yeast. Nature,440；940。
Keasling 等在酵母中导入amorphadiene合成酶后酵母就可以产生青蒿素，但产率很低。通过调节法呢基焦磷酸合成途径中多个基因的表达水平，Keasling 等将酵母中青蒿素的合成产率提高了500倍。
32.Varma A,Palsson.1994. Stoichiometric fulx balance models quantitatively
predict growh and metabolic by-product secretion in wide-type Escherichia coli W3110. Appl Environ Microbiol，60:。
流量平衡分析（FBA）是一种能够在基因组水平研究流量分布于代谢网络结构关系的模拟工具。
33.Fell DA.1997. Understanding control of metabolism. London,UK:Portland Press
代谢控制分析（MCA）是分析代谢网络的另一个工具。MCA需要用到网络中
所有酶的动力学参数，能够用控制系数来代表途径中每个酶对总体流量的控制力的大小，缺点是缺乏多数酶的动力学参数，无法应用于基因组水平的代谢分析。
34.Ajo-Franklin CM, Drubin DA, Eskin JA, et al. 2007.Rational design of memory in
eukaryotic cells. Genes Dev,21:2271-2276.
Genes Dev,21:2271-2276。在FBA的指导下删除某些内源基因，也可达到增大目标代谢流量的目的。
35.Alper H,Jin YS,Moxley JF,et al.2005. Identifying gene targets for the metabolic
engineering of lycopene biosynthesis in Escherichia coli. Metab Eng,7:155-164。Alper等将这一策略应用于大肠杆菌产生番茄红素。
计算一分子硬脂酸彻底氧化成CO2和H2O，产生的ATP分子数，并计算每克硬脂酸彻底氧化产生的自由能. [答] （1）一分子硬脂酸需要经过8轮β氧化，生成9个乙酰CoA，8个FADH2 和8NADH，9个乙酰CoA可生成ATP：10×9=90个；8个FADH2可生成ATP ：1.5×8=12个；8个NADH可生成ATP：2.5×8=20个；以上总计为122个ATP，但是硬脂酸活化为硬脂酰CoA时消耗了两个高能磷酸键，一分子硬脂肪酸净生成120个ATP。（2）120个ATP水解的标准自由能为120×（－ 30.54）KJ=－3664.8KJ，硬脂肪酸的相对分子质量为256。故 1克硬脂肪酸彻底氧化产生的自由能为－3664.8/256=－ 13.5KJ。 详解： 硬脂酸活化为硬脂酰CoA时把一个ATP转化成为AMP，消耗了两个高能磷酸键，长链脂酰CoA和肉毒碱反应转移进线立体时没有耗能，在β-氧化的反应过程中第一步脱氢：脂酰CoA在脂酰基CoA脱氢酶的催化下，其烃链的α、β位碳上各脱去一个氢原子，生成α、β烯脂酰CoA（trans-y-enoyl CoA），脱下的两个氢原子由该酶的辅酶FAD接受生成FAD.2H.后者经电子传递链传递给氧而生成水，同时伴有两分子ATP的生成。第二步加水没有能量损失，c 再脱氢：β-羟脂酰CoA在β-羟脂酰CoA脱氢酶（L-βhydroxy acyl CoAdehydrogenase）催
化下，脱去β碳上的2个氢原子生成β-酮脂酰CoA，脱下的氢由该酶的辅酶NAD+接受，生成NADH＋H+ .后者经电子传递链氧化生成水及3分子ATP. d 硫解：β-酮脂酰CoA在β-酮脂酰CoA在硫解酶中无能量损失，1分子软脂酸含16个碳原子，靠7次β氧化生成7分子NADH+H+，7分子FADH2，8分子乙酰CoA，而所有脂肪酸活化均需耗去2分子ATP.故1分子软脂酸彻底氧化共生成：7×2+7×3+8×12-2＝129分子 ⒏试说明“酮尿症”的生化机制。 泛指一个系统中，各元素之间的相互作用的过程和功能。机制一定是经过实践检验有效的方式方法，并进行一定的加工，使之系统化、理论化，这样才能有效地指导实践。泛指一个复杂的工作系统和某些自然现象的物理、化学规律等等。 生化机制：常常是指在某些生物体内的某些化学物通过一定的化学反应生成一定的化学物，这个过程使得完成某项生理功能或现象。 是在生物化学这个角度，各个元素相互作用的过程并行使其功能。 计算一分子硬脂酸彻底氧化成CO2和H2O，产生的ATP分子数，并计算每克硬脂酸彻底氧化产生的自由能
生物化学各章练习题及答案
生化练习题 一、填空题： 1、加入高浓度的中性盐，当达到一定的盐饱和度时，可使蛋白质的溶解度__________并__________,这种现象称为 __________。 2、核酸的基本结构单位是_____________。 3、____RNA 分子指导蛋白质合成，_____RNA 分子用作蛋白质合成中活化氨基酸的载体。 4、根据维生素的溶解性质，可将维生素分为两类，即 ____________和____________。 5、___________是碳水化合物在植物体内运输的主要方式。 6、糖酵解在细胞的_____________中进行 7、糖类除了作为能源之外，它还与生物大分子间识别有关，也是合成__________，___________，_____________等的碳骨架的共体。 8、脂肪是动物和许多植物主要的能源贮存形式，是由甘油与3分子_____________酯化而成的。 9、基因有两条链，作为模板指导转录的那条链称 _____________链。 10、以RNA 为模板合成DNA 称_____________。 二、名词解释 1、蛋白质的一级结构： 2、糖的有氧氧化： 3、必需脂肪酸： 4、半保留复制： 三、问答题 1、蛋白质有哪些重要功能？
1、蛋白质的一级结构：指蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序，以及二硫键的位置。 2、糖的有氧氧化：糖的有氧氧化指葡萄糖或糖原在有氧条件下氧化成水和二氧化碳的过程。是糖氧化的主要方式。 3、必需脂肪酸：为人体生长所必需但有不能自身合成，必须从事物中摄取的脂肪酸。在脂肪中有三种脂肪酸是人体所必需的，即亚油酸，亚麻酸，花生四烯酸。 4、半保留复制：双链DNA 的复制方式，其中亲代链分离，每一子代DNA 分子由一条亲代链和一条新合成的链组成。 三、问答题 2、DNA 分子二级结构有哪些特点？ 答：按Watson-Crick 模型，DNA 的结构特点有：两条反相平行的多核苷酸链围绕同一中心轴互绕；碱基位于结构的内侧，而亲水的糖磷酸主链位于螺旋的外侧，通过磷酸二酯键相连，形成核酸的骨架；碱基平面与轴垂直，糖环平面则与轴平行。两条链皆为右手螺旋；双螺旋的直径为2nm，碱基堆积距离为0.34nm，两核酸之间的夹角是36°，每对螺旋由10 对碱基组成；碱基按A=T，G=C 配对互补，彼此以氢键相连系。维持DNA 结构稳定的力量主要是碱基堆积力；双螺旋结构表面有两条螺形凹沟，一大一小。 3、怎样证明酶是蛋白质？ 答：（1）酶能被酸、碱及蛋白酶水解，水解的最终产物都是氨基酸，证明酶是由氨基酸组成的。 （2）酶具有蛋白质所具有的颜色反应，如双缩脲反应、茚三酮反应、米伦反应、乙醛酸反应。 （3）一切能使蛋白质变性的因素，如热、酸碱、紫外线等，同样可以使酶变性失活。
Application of α-amylase and Research α-amylase to be widely distributed throughout microorganisms to higher plants. The International Enzyme classification number is EC. 3.2.1.1, acting on the starch from the starch molecules within the random cut α a 1,4 glycosidic bond to produce dextrin and reducing sugar, because the end product of carbon residues as Α configuration configuration, it is called α-amylase. Now refers to α-amylase were cut from the starch molecules within the α-1,4 glycosidic bond from the liquefaction of a class of enzymes. α-amylase is an important enzyme, a large number of used food processing, food industry, brewing, fermentation, textile industry and pharmaceutical industries, which account for the enzyme about 25% market share. Currently, both industrial production to large-scale production by fermentation α-amylase. α-amylase in industrial applications 1.1 The bread baking industry, as a preservative enzymes used in baking industry, production of high quality products have been hundreds of years old. In recent decades, malt and microbial α-amylase, α-amylase is widely used in baking industry. The enzymes used for making bread, so that these products are much larger, better colors, more soft particles. Even today, baking industry have been α-amylase from barley malt and bacterial, fungal leaf extract. Since 1955 and after 1963 in the UK GRAS level validation, fungal amylase, has served as a bread additive. Now, they are used in different areas. Modern continuous baking process, add in f lour α-amylase can not only increase the fermentation rate and reduce dough viscosity (improving product volume and texture) to increase the sugar content in the dough, improved bread texture, skin color and baking quality, but also to extend the preservation time for baked goods. In the storage process, the bread particles become dry, hard, not crisp skin, resulting in deterioration of the taste of bread. These changes collectively referred to as degenerate. Each year simply because the losses caused by deterioration of bread more than 100 million U.S. dollars. A variety of traditional food additives are used to prevent deterioration and improve the texture and taste of baked goods. Recently, people started to pay attention enzyme as a preservative, preservative agent in improving the role of the dough, as amylopectin, amylase enzyme and a match can be effectively used as a preservative. However, excessive amylase causes a sticky bread too. Therefore, the recent trend is the use of temperature stability (ITS) α a amylase activity are high in starch liquefaction, but the baking process is completed before the inactivation. Despite the large number of microbes have been found to produce α-amylase, but with the temperature stability of the nature of the α-amylase only been found in several microorganisms. 1.2 starch liquefaction and saccharification of the main α-amylase starch hydrolysis product market, such as glucose and fructose. Starch is converted into high fructose corn syrup (HFCS). Because of their high sweetness, are used in the soft drink beverage industry sweeteners. The liquefaction process is used in thermal stability at high temperature α-amylase. α-amylase in starch liquefaction of
Southern杂交: 是体外分析特异DNA序列的方法，操作时先用限制性内切酶将核DNA或线粒体DNA切成DNA片段，经凝胶电泳分离后，转移到醋酸纤维薄膜上，再用探针杂交，通过放射自显影，即可辨认出与探针互补的特殊核苷序列。 将RNA转移到薄膜上，用探针杂交，则称为Northern杂交。 RNAi技术: 是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA（double-stranded RNA，dsRNA）诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。由于使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达，所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的基因治疗领域。可以利用siRNA或siRNA表达载体快速、经济、简便的以序列特异方式剔除目的基因表达，所以现在已经成为探索基因功能的重要研究手段。 Southern杂交一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的含量]。 扫描电镜技术：是用一束极细的电子束扫描样品，在样品表面激发出次级电子，次级电子的多少与样品表面结构有关，次级电子由探测器收集，信号经放大用来调制荧光屏上电子束的强度，显示出与电子束同步的扫描图像。 细胞显微分光光度计：用来描述薄膜、涂层厚度超过1微米的物件的光学性能的显微技术。 免疫荧光技术：将免疫学方法(抗原抗体特异结合)与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出，从而可对抗原进行细胞定位。 电镜超薄切片技术：超薄切片是为电镜观察提供极薄的切片样品的专门技术。用当代较好的超薄切片机，大多数生物材料，如果固定、包埋处理得合适，可以切成50-100微米的超薄切片。 Northern印迹杂交（Northern blot）。这是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。 放射自显影技术：放射自显影技术是利用放射性同位素的电离辐射对乳胶（含AgBr或AgCl）的感光作用，对细胞内生物大分子进行定性、定位与半定量研究的一种细胞化学技术。放射自显影技术（radioautography；autoradiography）用于研究标记化合物在机体、组织和细胞中的分布、定位、排出以及合成、更新、作用机理、作用部位等等。其原理是将放射性同位素（如14C和3H）标记的化合物导入生物体内，经过一段时间后，将标本制成切片或涂片，涂上卤化银乳胶，经一定时间的放射性曝光，组织中的放射性即可使乳胶感光。 核磁共振技术：可以直接研究溶液和活细胞中相对分子质量较小(20，000 道尔顿以下)的蛋白质、核酸以及其它分子的结构，而不损伤细胞。 DNA序列分析：在获得一个基因序列后，需要对其进行生物信息学分析，从中尽量发掘信
12．扼要解释为什么大多数球状蛋白质在溶液中具有下列性质。 (1)在低pH时沉淀。 (2)当离子强度从零逐渐增加时，其溶解度开始增加，然后下降，最后出现沉淀。 (3)在一定的离子强度下，达到等电点pH值时，表现出最小的溶解度。 (4)加热时沉淀。 (5)加入一种可和水混溶的非极性溶剂减小其介质的介电常数，而导致溶解度的减小。 (6)如果加入一种非极性强的溶剂，使介电常数大大地下降会导致变性。 （1）在低pH时，羧基质子化，这样蛋白质分子带有大量的净正电荷，分子内正电荷相斥使许多蛋白质变性，并随着蛋白质分 子内部疏水基团向外暴露使蛋白质溶解度降低，因而产生沉 淀。 （2）加入少量盐时，对稳定带电基团有利，增加了蛋白质的溶解度。 但是随着盐离子 浓度的增加，盐离子夺取了与蛋白质结合的水分子，降低了蛋白质的水合程度，使蛋白质水化层破坏，而使蛋白质沉淀。 （3）在等电点时，蛋白质分子之间的静电斥力最小，所以其溶解度最小。 （4）加热会使蛋白质变性，蛋白质内部的疏水基团被暴露，溶解度降低。从而引起蛋白质沉淀。 （5）非极性溶剂减少了表面极性基团的溶剂化作用，促使蛋白质分子之间形成氢键，从而取代了蛋白质分子与水之间的氢键。（6）介电常数的下降对暴露在溶剂中的非极性基团有稳定作用，结果促使蛋白质肽链展开而导致变性。 22．何谓蛋白质的变性？哪些因素会导致蛋白质的变性？蛋白质变性的机理是什么？变性蛋白质有何特征？举例说明蛋白质变性的应用。蛋白质变性作用是指天然的蛋白质在一些物理或化学因素的影响下，使其失去原有的生物学活性，并伴随着其物理、化学性质的改变称为蛋白质的变性。
使蛋白质变性的因素有： （1）物理因素：加热、剧烈的机械搅拌、辐射、超声波处理等；（2）化学因素：强酸、强碱、重金属、盐酸胍、尿素、表面活性剂等。 蛋白质变性的机理：维持蛋白质高级结构的次级键破坏，二级以上的结构破坏，蛋白质从天然的紧密有序的状态变成松散无序的状态，但一级结构保持不变。 蛋白质变性后会发生以下几方面的变化： （1）生物活性丧失；（2）理化性质的改变，包括：溶解度降低，结晶能力丧失；粘度增加；光学性质发生改变，如旋光性改变、紫外吸收增加；（3）侧链反应增强；（4）对酶作用敏感，易被蛋白酶水解。 蛋白质变性的应用： （1）加热煮熟食物时食物蛋白质变性既有利于食物蛋白质的消化吸收，也可使食物中的致病菌中的蛋白质变性使其失去原有的生物学活性达到消毒灭菌的目的，使食物安全可靠； （2）酒精消毒也是微生物蛋白质在酒精作用下产生变性； （3）剧烈地搅打蛋清，蛋清变稠也是由于蛋清蛋白发生变性；（4）面团在搓揉过程中面筋蛋白质发生变性，体积增加，易混入气体使面团变得松软有弹性等。 试述磺胺类药物抗菌的作用原理
生物化学各章节习题集锦 －－第一章蛋白质化学测试题－－ 一、单项选择题 1．测得某一蛋白质样品的氮含量为0．40g，此样品约含蛋白质多少？ A．2．00g B．2．50g C．6．40g D．3．00g E．6．25g 2．下列含有两个羧基的氨基酸是： A．精氨酸B．赖氨酸C．甘氨酸 D．色氨酸 E．谷氨酸 3．维持蛋白质二级结构的主要化学键是： A．盐键 B．疏水键 C．肽键D．氢键 E．二硫键 4．关于蛋白质分子三级结构的描述，其中错误的是： A．天然蛋白质分子均有的这种结构B．具有三级结构的多肽链都具有生物学活性 C．三级结构的稳定性主要是次级键维系D．亲水基团聚集在三级结构的表面biooo E．决定盘曲折叠的因素是氨基酸残基 5．具有四级结构的蛋白质特征是： A．分子中必定含有辅基B．在两条或两条以上具有三级结构多肽链的基础上，肽链进一步折叠，盘曲形成C．每条多肽链都具有独立的生物学活性D．依赖肽键维系四级结构的稳定性 E．由两条或两条以上具在三级结构的多肽链组成 6．蛋白质所形成的胶体颗粒，在下列哪种条件下不稳定： A．溶液pH值大于pIB．溶液pH值小于pIC．溶液pH值等于pI D．溶液pH值等于7．4E．在水溶液中 7．蛋白质变性是由于：biooo A．氨基酸排列顺序的改变B．氨基酸组成的改变C．肽键的断裂D．蛋白质空间构象的破坏E．蛋白质的水解 8．变性蛋白质的主要特点是： A．粘度下降B．溶解度增加C．不易被蛋白酶水解 D．生物学活性丧失 E．容易被盐析出现沉淀 9．若用重金属沉淀pI为8的蛋白质时，该溶液的pH值应为： A．8 B．＞8 C．＜8 D．≤8 E．≥8 10．蛋白质分子组成中不含有下列哪种氨基酸？ A．半胱氨酸 B．蛋氨酸 C．胱氨酸 D．丝氨酸 E．瓜氨酸 二、多项选择题 （在备选答案中有二个或二个以上是正确的，错选或未选全的均不给分） 1．含硫氨基酸包括： A．蛋氨酸 B．苏氨酸 C．组氨酸D．半胖氨酸 2．下列哪些是碱性氨基酸： A．组氨酸B．蛋氨酸C．精氨酸D．赖氨酸 3．芳香族氨基酸是： A．苯丙氨酸 B．酪氨酸 C．色氨酸 D．脯氨酸 4．关于α-螺旋正确的是： A．螺旋中每3．6个氨基酸残基为一周B．为右手螺旋结构 C．两螺旋之间借二硫键维持其稳定 D．氨基酸侧链R基团分布在螺旋外侧 5．蛋白质的二级结构包括： A．α-螺旋 B．β-片层C．β-转角 D．无规卷曲 6．下列关于β-片层结构的论述哪些是正确的： A．是一种伸展的肽链结构 B．肽键平面折叠成锯齿状
A/O法活性污泥中氨氧化菌群落的动态与分布 摘要: 我们研究了在厌氧—好氧序批式反应器（SBR)中氨氧化菌群落(AOB)和亚硝酸盐氧化菌群落(NOB)的结构活性和分布。在研究过程中,分子生物技术和微型技术被用于识别和鉴定这些微生物。污泥微粒中的氨氧化菌群落结构大体上与初始的接种污泥中的结构不同。与颗粒形成一起，由于过程条件中生物选择的压力,AOＢ的多样性下降了。DGGE测序表明，亚硝化菌依然存在,这是因为它们能迅速的适应固定以对抗洗涤行为。DGGE更进一步的分析揭露了较大的微粒对更多的AOB种类在反应器中的生存有好处。在SＢR反应器中有很多大小不一的微粒共存，颗粒的直径影响这AＯB和NOB的分布。中小微粒（直径<0．6ｍm）不能限制氧在所有污泥空间的传输。大颗粒(直径>０．9mm）可以使含氧量降低从而限制NＯB的生长。所有这些研究提供了未来对ＡOB微粒系统机制可能性研究的支持。 关键词:氨氧化菌(AＯB），污泥微粒,菌落发展，微粒大小,硝化菌分布，发育多样性 ?简介 在浓度足够高的条件下，氨在水环境中对水生生物有毒，并且对富营养化有贡献。因此,废水中氨的生物降解和去除是废水处理工程的基本功能。硝化反应,将氨通过硝化转化为硝酸盐,是去除氨的一个重要途径。这是分两步组成的，由氨氧化和亚硝酸盐氧化细菌完成。好氧氨氧化一般是第一步,硝化反应的限制步骤:然而,这是废水中氨去除的本质。对16S ｒRNA的对比分析显示，大多数活性污泥里的氨氧化菌系统的跟?-变形菌有关联。然而，一系列的研究表明,在氨氧化菌的不同代和不同系有生理和生态区别,而且环境因素例如处理常量,溶解氧，盐度,pH，自由氨例子浓度会影响氨氧化菌的种类。因此,废水处理中氨氧化菌的生理活动和平衡对废水处理系统的设计和运行是至关重要的。由于这个原因,对氨氧化菌生态和微生物学更深一层的了解对加强处理效果是必须的。当今,有几个进阶技术在废水生物处理系统中被用作鉴别、刻画微生物种类的有价值的工具。目前,分子生物技术的应用能提供氨氧化菌群落的详细分类说明。
名词解释 增色效应减色效应DNA的熔解温度（Tm）核酸的变性与复性 判断题 1. DNA的Tm值随（A+T）/（G+C）比值的增加而减少。（） 2. 原核细胞和真核细胞中许多mRNA都是多顺反子转录产物。（） 3. 脱氧核糖核苷中的糖环3′位没有羟基。（） 4. 若双链DNA中的一条链碱基顺序为：pCpTpGpGpApC,则另一条链的碱基顺序为：pGpApCpCpTpG。（） 5. 若种属A的DNA Tm值低于种属B，则种属A的DNA比种属B含有更多的A-T碱基对。（） 6. 生物体内，天然存在的DNA分子多为负超螺旋。（） 7. tRNA的二级结构中的额外环是tRNA分类的重要指标。（） 8. 目前为止发现的修饰核苷酸大多存在于tRNA中。（） 9. 核酸变性或降解时，出现减色效应。（） 选择题 1. 在右图中，哪一点代表双链DNA的Tm值？ A.A B.B C.C D.D E.都不对 2. Watson和Crick的DNA双股螺旋中，螺旋每上升一圈的碱基对和距离分别是： A. 11bp， 2.8nm B. 10bp， 3.4nm C. 9.3bp， 3.1nm D. 12bp， 4.5nm 3. 含有稀有碱基比例较多的核酸是： A. 胞核DNA B. rRNA C. tRNA D. mRNA 4. DNA复性的重要标志是: A. 溶解度降低 B. 溶液粘度降低 C. 紫外吸收增大 D. 紫外吸收降低 填空题 1. 核酸的基本结构单元是__ 2. 核酸对紫外光有吸收，核酸的最大吸收波长是nm。 3.写出下列英文缩写符号的中文名称 mRNA；FAD；cAMP；dCMP
模式生物 生物学家通过对选定的生物物种进行科学研究，用于揭示某种具有普遍规律的生命现象。此时，这种被选定的生物物种就是模式生物。比如：孟德尔在揭示生物界遗传规律时选用豌豆作为实验材料，而摩尔根选用果蝇作为实验材料，在他们的研究中，豌豆和果蝇就是研究生物体遗传规律的模式生物。由于进化的原因，许多生命活动的基本方式在地球上的各种生物物种中是保守的，这是模式生物研究策略能够成功的基本基础。选择什么样的生物作为模式生物首先依赖于研究者要解决什么科学问题，然后寻找能最有利于解决这个问题的物种。19世纪末20世纪初，人们就发现，如果把关注的焦点集中在相对简单的生物上则发育现象的难题可以得到部分解答。因为这些生物更容易被观察和实验操作，因此，除了在遗传学研究外，模式生物研究策略在发育生物学中获得了非常广泛的应用，一些物种被大家公认为优良的模式生物，如线虫、果蝇、非洲爪蟾、蝾螈、小鼠等。 随着人类基因组计划的完成和后基因组研究时代的到来，模式生物研究策略得到了更加的重视；基因的结构和功能可以在其它合适的生物中去研究，同样人类的生理和病理过程也可以选择合适的生物来模拟。 目前在人口与健康领域应用最广的模式生物包括，噬菌体、大肠杆菌、酿酒酵母、秀丽隐杆线虫、海胆、果蝇、斑马鱼、爪蟾和小鼠。在植物学研究中比较常用的有，拟南芥、水稻等。随着生命科学研究的发展，还会有新的物种被人们用来作为模式生物。但它们会有一些基本共同点： 1）有利于回答研究者关注的问题，能够代表生物界的某一大类群； 2）对人体和环境无害，容易获得并易于在实验室内饲养和繁殖； 3）世代短、子代多、遗传背景清楚； 4）容易进行实验操作，特别是具有遗传操作的手段和表型分析的方法。 背景 早在20世纪最初的20年中，甚至更早到19世纪，人们就发现，如果把关注的焦点集中在相对简单的生物上则发育的现象难题可以得到部分解答。因为这些生物的细胞数量更少，分布相对单一，变化也较好观察。由于进化的原因，细胞生命在发育的基本模式方面具有相当大的同一性，所以利用位于生物复杂性阶梯较低级位置上的物种来研究发育共通规律是可能的。尤其是当在有不同发育特点的生物中发现共同形态形成和变化特征时，发育的普
2005年生物化学下册考试题（B） 一、名词解释(20) 1、乙醛酸循环（2分） 是某些植物，细菌和酵母中柠檬酸循环的修改形式，通过该循环可以收乙乙酰CoA经草酰乙酸净生成葡萄糖。乙醛酸循环绕过了柠檬酸循环中生成两个CO2的步骤。 2、无效循环（futile cycle）（2分） 也称为底物循环。一对酶催化的循环反应，该循环通过A TP的水解导致热能的释放。Eg葡萄糖+A TP=葡萄糖6-磷酸+ADP与葡萄糖6-磷酸+H2O=葡萄糖+P i反应组成的循环反应，其净反应实际上是ＡＴＰ＋Ｈ２Ｏ＝ＡＤＰ＋Ｐi。 3、糖异生作用（2分） 由简单的非糖前体转变为糖的过程。糖异生不是糖酵解的简单逆转。虽然由丙酮酸开始的糖异生利用了糖酵解中的七步进似平衡反应的逆反应，但还必需利用另外四步酵解中不曾出现的酶促反应，绕过酵解过程中不可逆的三个反应 4、Lesch-Nyhan综合症（Lesch-Nyhan syndrome）（2分） 也称为自毁容貌症，是由于次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶的遗传缺陷引起的。缺乏该酶使得次黄嘌呤和鸟嘌呤不能转换为IMP和GMP，而是降解为尿酸，过量尿酸将导致Lesch-Nyhan综合症。 5、Klenow片段（Klenow fragment）（2分） E.coli DNA聚合酶I经部分水解生成的C末端605个氨基酸残基片段。该片段保留了DNA 聚合酶I的5ˊ-3ˊ聚合酶和3ˊ-5ˊ外切酶活性，但缺少完整酶的5ˊ-3ˊ外切酶活性。6、错配修复（mismatch repair）（2分） 在含有错配碱基的DNA分子中，使正常核苷酸序列恢复的修复方式。这种修复方式的过程是：识别出下正确地链，切除掉不正确链的部分，然后通过DNA聚合酶和DNA连接酶的作用，合成正确配对的双链DNA。 7、外显子（exon）（2分） 既存在于最初的转录产物中，也存在于成熟的RNA分子中的核苷酸序列。术语外显子也指编码相应RNA内含子的DNA中的区域。 8、（密码子）摆动（wobble）（2分） 处于密码子3ˊ端的碱基与之互补的反密码子5ˊ端的碱基（也称为摆动位置），例如I可
(文档含英文原文和中文翻译) 中英文对照外文翻译文献 Biological effects of the Magnetic Stimulation on the T oad Heart Abstract-W e stimulated the exposed toad heart by a low frequency and high energy magnetic. By analyze the data of this experiment, it shows that the pulsating of the weak toad heart would make change after stimulated by magnetic. W eak heartbeat strengthened, the single peak curve would become the two peaks curve with atria wave and ventricle wave after the magnetic stimulation. But the cycling of rhythmic pulsatile curve of toad doesn't change. I. INTRODUTION All life forms have magnetism. All kinds of magnetic field would have some effects on the configuration and activities of life forms that whichever environmental magnetic, additional magnetic or inside magnetic of organism. The biologic effects are related to the characteristics and
生物化学 练习一 1、以下哪一种氨基酸不具备不对称碳原子 A、甘氨酸 B、丝氨酸 C、半胱氨酸 D、苏氨酸 2、侧链是环状结构的氨基酸是（） A、Lys B、Tyr C、Val D、Ile E、Asp 3、天然蛋白质中不存在的氨基酸是[ ] A、半胱氧酸 B、瓜氨酸 C、蛋氨酸 D、丝氨酸 3、分离鉴定氨基酸的纸层析属于（）。 A、亲和层析 B、吸附层析 C、离子交换层析 D、分配层析 4、有一混合蛋白质溶液，各种蛋白质的pI分别为4.6、5.0、5.3、6.7、7.3。电泳时欲使其中4种泳向正极，缓冲液的pH应该是：（） A、5.0 B、4.0 C、6.0 D、7.0 E、8.0 5、某蛋白质PI为7.5，在PH=6.0的缓冲液中进行自由界面电泳，其泳动方向为（） A、原点不动 B、向正极泳动 C、向负极泳动 6、某一氨基酸混合液含有四种氨基酸，成分如下，在PH=6.0时最容易析出氨基酸的是（） A、谷氨酸（PI=3.22） B、丙氨酸（PI=6.0） C、赖氨酸（PI=9.74） D、脯氨酸（PI=6.30） 7、下列（）侧链基团的pKa值最接近于生理pH值。 A 、半胱氨酸 B、谷氨酸 C、谷氨酰胺 D、组氨酸 8、某一种蛋白质在pH5.0时，向阴极移动，则其等电点是（） A、>5.0 B、＝5.0 C、<5.0 D、不确定 9、甘氨酸的 34 .2 = CO OH pK ， 60 .9 2 = NH pK ，故它的pI为 A、11.94 B、7.26 C、5.97 D、3.63 E、2.34 10.赖氨酸的pK1为2.18，pK2为8.95，pK3为10.53，其pI是 [ ] A. 9.74 B. 8.35
硕士研究生入学考试生物化学经典习题及答案 第二章蛋白质的结构与功能 自测题 一、单项选择题 1. 构成蛋白质的氨基酸属于下列哪种氨基酸？（ A ）。 A. L-α氨基酸 B. L-β氨基酸 C. D-α氨基酸 D. D-β氨基酸 A 组成人体蛋白质的编码氨基酸共有20种，均属L-α氨基酸（甘氨酸除外） 2. 280nm波长处有吸收峰的氨基酸为（ B ）。 A.精氨酸 B.色氨酸 C.丝氨酸 D.谷氨酸 B 根据氨基酸的吸收光谱，色氨酸、酪氨酸的最大吸收峰在280nm处。 3. 有关蛋白质三级结构描述，错误的是（ A ）。 A.具有三级结构的多肽链都有生物学活性 B.三级结构是单体蛋白质或亚基的空间结构 C.三级结构的稳定性由次级键维持 D.亲水基团多位于三级结构的表面 具有三级结构的单体蛋白质有生物学活性，而组成四级结构的亚基同样具有三级结构，当其单独存在时不具备生物学活性。 4. 关于蛋白质四级结构的正确叙述是（ D ）。 A.蛋白质四级结构的稳定性由二硫键维系 B.四级结构是蛋白质保持生物学活性的必要条件 C.蛋白质都有四级结构 D.蛋白质亚基间由非共价键聚合 蛋白质的四级结构指蛋白质分子中各亚基的空间排布及亚基的聚合和相互作用；维持蛋白质空间结构的化学键主要是一些次级键，如氢键、
疏水键、盐键等。 二、多项选择题 1. 蛋白质结构域（ A B C ）。 A.都有特定的功能 B.折叠得较为紧密的区域 C.属于三级结构 D.存在每一种蛋白质中 结构域指有些肽链的某一部分折叠得很紧密，明显区别其他部位，并有一定的功能。 2. 空间构象包括（ A B C D ）。 A. β-折叠 B.结构域 C.亚基 D.模序 蛋白质分子结构分为一级、二级、三级、四级结构4个层次，后三者统称为高级结构或空间结构。β-折叠、模序属于二级结构；.结构域属于三级结构；亚基属于四级结构。 三、名词解释 1. 蛋白质等电点 2. 蛋白质三级结构 3. 蛋白质变性 4. 模序 蛋白质等电点：蛋白质净电荷等于零时溶液的pH值称为该蛋白质的等电点。 蛋白质三级结构：蛋白质三级结构指整条多肽链中全部氨基酸残基的相对空间位置。 蛋白质变性：蛋白质在某些理化因素作用下，其特定的空间结构被破坏，从而导致其理化性质的改变和生物学活性的丧失，称为蛋白质变性。模序：由二个或三个具有二级结构的肽段，在空间上相互接近，形成一个具有特殊功能的空间结构称为模序。一个模序总有其特征性的氨基酸序列，并发挥特殊功能。
一、选择题 1、蛋白质一级结构的主要化学键是( E ) A、氢键 B、疏水键 C、盐键 D、二硫键 E、肽键 2、蛋白质变性后可出现下列哪种变化( D ) A、一级结构发生改变 B、构型发生改变 C、分子量变小 D、构象发生改变 E、溶解度变大 3、下列没有高能键的化合物是( B ) A、磷酸肌酸 B、谷氨酰胺 C、ADP D、1，3一二磷酸甘油酸 E、磷酸烯醇式丙酮酸 4、嘌呤核苷酸从头合成中，首先合成的是( A ) A、IMP B、AMP C、GMP D、XMP E、ATP 6、体氨基酸脱氨基最主要的方式是( B ) A、氧化脱氨基作用 B、联合脱氨基作用 C、转氨基作用 D、非氧化脱氨基作用 E、脱水脱氨基作用 7、关于三羧酸循环，下列的叙述哪条不正确( D ) A、产生NADH和FADH2 B、有GTP生成 C、氧化乙酰COA D、提供草酰乙酸净合成 E、在无氧条件下不能运转 8、胆固醇生物合成的限速酶是( C ) A、HMG COA合成酶 B、HMG COA裂解酶 C、HMG COA还原酶 D、乙酰乙酰COA脱氢酶 E、硫激酶 9、下列何种酶是酵解过程中的限速酶( D ) A、醛缩酶 B、烯醇化酶 C、乳酸脱氢酶 D、磷酸果糖激酶 E、3一磷酸甘油脱氢酶
10、DNA二级结构模型是( B ) A、α一螺旋 B、走向相反的右手双螺旋 C、三股螺旋 D、走向相反的左手双螺旋 E、走向相同的右手双螺旋 11、下列维生素中参与转氨基作用的是( D ) A、硫胺素 B、尼克酸 C、核黄素 D、磷酸吡哆醛 E、泛酸 12、人体嘌呤分解代的终产物是( B ) A、尿素 B、尿酸 C、氨 D、β—丙氨酸 E、β—氨基异丁酸 13、蛋白质生物合成的起始信号是( D ) A、UAG B、UAA C、UGA D、AUG E、AGU 14、非蛋白氮中含量最多的物质是( D ) A、氨基酸 B、尿酸 C、肌酸 D、尿素 E、胆红素 15、脱氧核糖核苷酸生成的方式是( B ) A、在一磷酸核苷水平上还原 B、在二磷酸核苷水平上还原 C、在三磷酸核苷水平上还原 D、在核苷水平上还原 16、妨碍胆道钙吸收的物质是( E ) A、乳酸 B、氨基酸 C、抗坏血酸 D、柠檬酸 E、草酸盐 17、下列哪种途径在线粒体中进行( E ) A、糖的无氧酵介 B、糖元的分解 C、糖元的合成 D、糖的磷酸戊糖途径 E、三羧酸循环 18、关于DNA复制，下列哪项是错误的( D ) A、真核细胞DNA有多个复制起始点 B、为半保留复制 C、亲代DNA双链都可作为模板 D、子代DNA的合是连续进行的 E、子代与亲代DNA分子核苷酸序列完全相同
科学探究专题复习 成都石室蜀都中学刘玮琦 一．教学目标 1.知识目标：掌握科学探究及其基本方法。 2.能力目标：能够提出问题，作出假设，设计实验以及得出结论。 3.情感目标：体会实事求是、严谨求实的科学态度，确立关爱生命、关爱环境的情感意识。 二．教学重难点 1.教学重点：掌握科学探究的基本步骤 2.教学难点：掌握科学探究的基本步骤 三．教学准备 收集相关资料，整理科学探究相关考题。 四．教学过程 (一)复习要点： 1、尝试书面表达问题：尝试根据日常生活、资料信息发现问题、提出问题、表达问题。其中的提出问题要紧扣题目，采用一般疑问句，并应考虑是否可以开展。 2、应用已有的知识，对问题的答案提出可能的设想——即作出假设。作出假设要紧扣问题，可有正面或反面(肯定或否定)两种截然不同的假设。 3、拟定探究计划，列出所需要的材料与用具，选出控制变量，设计对照实验。⑴要使实验结果具有说服力，关键是要设置对照实验。而一组对照实验应包括一个实验组和一个对照组，凡是没有设置对照实验的实验设计都是不合理的。⑵设计对照实验时，实验组与对照组控制的变量(即实验组与对照组不同的条件)只允许一个(即注意控制单一变量)，而控制的变量往往在题干或提出的问题中有体现。如要“探究光对叶绿素形成的影响”，该实验控制的变量就是光(或光照)。在控制变量的过程中，变量要相对立，而且要尖锐(如光照充足与黑暗、适温与低温、有水与无水等)，对照实验中，除变量外，其它因素(条件)要完全相同(即等量原则)。⑶为排除偶然性，减少实验误差，使实验结果更真实，还要考虑设置重复实验。重复实验可进行多次实验过程；也可用多只动物、多粒种子(或多棵生长情况相同的幼苗)等进行一次实验。以上①②③三点是我们改正实验设计的有关不足之处的原理和依据。 4、描述现象，处理数据，得出结论。科学探究中的描述现象与得出结论是不相同的：描述现象是把实验组与对照组产生的现象用文字(或用表格数据统计)形式描述出来。其中的实验结果预测(或预测实验结果)和描述实验现象往往是一样的。而得出结论是必须经过有关数据的处理、有关现象分析讨论后得出的该探究活动最终的实验结论，该结论往往与假设相同或相反。 （二）经典中考题目点拨 《科学探究》专题复习 1.实验“验证绿叶在光下合成淀粉” 知识背景： (1)实验前2一3天，把盆栽的天竺葵放于暗处。（目的：消耗掉叶片中的淀粉） (2)在经过黑暗处理的实验材料上选1-2片生长 健壮的
答案 1 常用的ALP化学发光底物为 C．AMPPD 2 ELISA双抗体夹心法是 A. 酶标记特异抗体用于抗原 3 目前ELISA中应用最广泛的底物是 B. TMB 4 间接法荧光抗体染色与直接法相比，优点为E. 检测不同的抗原，只需制 5 最适合于时间分辨荧光免疫测定的荧光物质E．镧系稀土元素(Eu) 6 AIDS是由HIV侵犯下列哪种细胞引起的继发性A．CD4+T细胞 7 AIDS的免疫缺陷特征指标是 C．CD4＋↓，CD8＋不变，CD 8 AIDS的主要传播途径是 A．性接触、血液途径、母婴 9 AFP升高可见于下列哪种疾病 E．以上都是 10 下列哪项指标对前列腺癌的诊断价值最大 E. t-PSA/f-PSA 11 血清中IgE 含量升高，常见于下列哪种情况C．SLE 12 抗原抗体反应比例不合适出现的沉淀物减少C．带现象 13 由于抗原过量导致抗原抗体结合物减少的现B．后带 14 免疫应答反应的过程是 E．识别、活化和效应阶段
可非特异直接杀伤靶细胞的是 A．NK 细胞 16 介导ADCC的主要细胞是 C．NK 细胞 17 人类B细胞分化发育成熟的器官是 A．骨髓 18 较长时间(4-5年)保存抗体，通常采用E．真空干燥保存 19 第二次免疫接种后,免疫接种的间隔时间最好B．7～10 天 20 捕获法主要用于何种物质的测定 A. IgM 21 电化学发光免疫分析中，电化学反应进行在C．电极表面上 22 活化的Th1细胞主要产生的细胞因子是A．IFN-r 23 正常血清中,补体含量最高的是 C. C3 24 由于Rh抗原不合引起的新生儿溶血常见于Ｄ.Rh-孕妇第二次妊娠Rh+胎 25 下列哪种疾病与HLA-B27抗原相关性最明显 D. 强直性脊柱炎 26 NSE常作为何种肿瘤的标志物 A．小细胞肺癌 27 正常成人每日通过肾小球滤过的原尿约 D. 180L 28 正常情况下，能被肾小管几乎完全重吸收的 E. 葡萄糖 29 尿妊娠试验最佳标本是