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高效液相色谱法检测酱油中的苯甲酸钠1．原理
酱油样品经酸化后，用乙醚提取苯甲酸，定容过滤后进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，根据保留时间定性和峰面积定量。2．试剂
2.1甲醇:分析纯，经滤膜（HF 0.5）过滤；
2.2无水乙醚：分析纯；
2.3无水乙醇：分析纯；
2.46N盐酸：取36~38%的盐酸500ml，定容至1000ml；
2.54%氯化钠溶液：称取40.0g氯化钠,定容至1000ml；
2.60.02M乙酸铵溶液：1.54g乙酸铵定容至1000ml,溶解后经滤膜(HA 0.45)过滤；
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2.7苯甲酸标准储备液：称取苯甲酸0.1000g加2%碳酸氢钠溶液1ml,搅拌溶解,加水定容到100ml，苯甲酸浓度为1mg/ml；
2.8苯甲酸标准使用液：取苯甲酸标准储备液10ml，放入100ml容量瓶中，定容至刻度，苯甲酸浓度为0.1mg/ml。
3．高效液相色谱条件
3.1Spectra-Physics 高效液相色谱仪；
3.2色谱柱：Spherisorb ODS1Ф
4.6mm 200mm；
3.3检测器：紫外检测器，波长230nm，灵敏度0.2 AUFS；
3.4流动相：甲醇:0.02M乙酸铵（5：95）；
3.5流速：1ml/min；
3.6进样量：10l；
3.7允许差：相对误差≤10%。
4．操作方法：
4.1样品预处理：
称取均匀的酱油样品5.0g放入125ml的分液漏斗中，加入6N 盐酸1ml酸化，用15﹑10ml无水乙醚萃取两次，合并乙醚放入125ml分液漏斗中，用4%的氯化钠溶液约10ml分别洗涤两次，将洗涤后的乙醚移入80ml蒸发皿中，温水浴挥干，分别用10ml无水乙醇洗涤蒸发皿两次，放入100ml容量瓶中，再用蒸馏水洗涤蒸发皿两次，并入上容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，用0.45（HA）滤膜过滤，供高效液相色谱测定用。
4.2测定操作：
开机预热30min并对流动相进行脱气操作，待流动相流速恒定及检测器稳定后，用25l微量进样器吸取供试液进样，绘图积分，得供试样品的吸