·综述·
多肽修饰脂质体靶向药物递送系统研究进展
吴学萍，王驰*(重庆医科大学药学院药物化学教研室，重庆 400016)
摘要：目的介绍近年来多肽修饰脂质体靶向药物递送系统的研究进展。方法查阅和归纳总结近几年相关文献。结果阐述了精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)多肽、丙氨酸-脯氨酸-精氨酸-脯氨酸-甘氨酸(APRPG)多肽、细胞穿透肽(CPP)、血管活性肠肽(VIP)等修饰脂质体的研究进展。多肽修饰的包载药物的脂质体可以增加药物在体内的选择性，减少药物毒副作用，提高药物治疗指数。结论多肽分子是机体内一类重要的生物活性物质，将其作为导向物以配体-受体特异性结合的方式应用于靶向药物递送系统，具有良好的研究价值和应用前景。
关键词：多肽；脂质体；靶向药物递送系统；配体；受体
中图分类号：R945 文献标志码：A 文章编号：1007-7693(2010)08-0681-05
Advances in Peptide-Modified Liposome Targeted Drug Delivery System
WU Xueping, WANG Chi*(Department of Pharmaceutical Chemistry, College of Pharmacy, Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China)
ABSTRACT: OBJECTIVE To introduce the advances of peptide-modified liposome targeted drug delivery system. METHODS The relevant literatures in recent years were referred and summarized. RESULTS The advances of liposomes modified by arginine-glycine-aspartic (RGD) peptide, alanine-proline-arginine-proline-glycine (APRPG) peptide, cell-penetrating peptide (CPP), vasoactive intestinal peptide (VIP) were elaborated. Peptide-modified drug-loaded liposomes may increase the selectivity of drugs in vivo and reduce side effects of drugs to improve their therapeutic index. CONCLUSION Peptide molecules are a class of important bioactive substances to the body, which are applied in targeted drug delivery system by specific-combination of ligand-receptor with good values and application prospects.
KEY WORDS: peptide; liposome; targeted drug delivery system; ligand; receptor
主动靶向药物传递是指利用特定的生物过程，如特异性的配体-受体识别和相互作用，来提高特定部位的药物浓度。主动靶向系统以抗体、多肽、糖类、维生素、糖蛋白等作为配体与靶细胞受体进行专属性作用。其中，多肽分子是机体内一类重要的生物活性物质，具有良好的生物相容性、靶向性、无免疫原性、低毒性等优点，将其作为配体应用于靶向药物递送系统(targeted drug delivery system，TDDS)，得到越来越广泛的关注。随着对肿瘤细胞的研究深入到分子水平，在肿瘤细胞表面或肿瘤相关血管表面发现一系列受体与肿瘤生长增殖密切相关，并在肿瘤组织中过度表达。受体与其配体的结合具有特异性、选择性和饱和性，且亲和力强、生物效应明显。利用多肽配体为药物载体，通过受体的介导作用，可以增加病灶区的药物浓度，提高疗效，降低不良反应，从而达到靶向治疗的目的。
脂质体是一种定向药物载体，具有一定的被动靶向作用，在许多疾病尤其是癌症的治疗中显示了明显的优越性。在脂质双层中掺入对特定细胞具有选择性和亲和性的配体，利用细胞受体对配体的识别作用可以实现主动靶向释放药物。例如，多肽修饰的靶向脂质体借助受体与多肽配体的特异性相互作用可将脂质体靶向到含有配体特异性受体的器官、组织或细胞，同时受体与配体结合可促进脂质体内化进入细胞内，增加药物选择性，减少药物毒副作用，提高药物治疗指数，显示了良好的研究价值和应用前景。本文综述了多肽作为配体修饰的载药脂质体这种主动靶向药物递送系统的应用研究进展。
作者简介：吴学萍，女，硕士生 Tel: (023)68485578 E-mail: xuepingw.8503@https://www.doczj.com/doc/615836781.html,*通信作者：王驰，男，博士，副教授Tel: (023)68485578 E-mail: wchi639@https://www.doczj.com/doc/615836781.html,
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1 精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)多肽修饰的脂质体
RGD是由精氨酸(Arg)、甘氨酸(Gly)、天冬氨酸(Asp) 3个氨基酸组成的序列肽，是近几年来发现的具有高生物活性的短肽序列之一。RGD肽作为整合素和其配体相互作用的识别位点，介导细胞与细胞外基质(extra cellular matrix，ECM)及细胞间的黏附作用，同时具有信号传导功能。由于RGD肽无免疫原性、无毒副作用，因此成为抑制肿瘤转移研究的一个热点。
果发现RGD-MCLs可以诱导该细胞黏附，构建细胞支架，表达纤连蛋白。这项研究表明，应用RGD-MCLs构建细胞将会成为组织工程学和细胞生物学研究中很有前景的一种方法。
ZHAO等[6]制备了RGD修饰的包载紫杉醇(paclitaxel，PTX)的立体稳定脂质体(RGD-SSL -PTX)，考察了其体外细胞毒性及细胞内摄取情况，并评价了其对接种人卵巢癌细胞SKOV-3的裸鼠的体内抗肿瘤活性。结果表明，与SSL-PTX对照组相比，RGD-SSL-PTX对SKOV-3细胞具有显著的细胞毒性，脂质体的细胞内摄取量增加了6.21倍。与SSL-PTX和紫杉醇注射液对照组相比较，RGD -SSL-PTX对接种了SKOV-3细胞的裸鼠具有更强的体内抗肿瘤活性，可能是由于RGD-SSL -PTX与肿瘤细胞上过表达的整合素受体结合增加了对肿瘤的靶向性。RGD-SSL-PTX是一种很有前景的药物递送系统，可以增加药物递送的选择性，提高治疗效果。
2 丙氨酸-脯氨酸-精氨酸-脯氨酸-甘氨酸(APRPG)多肽修饰的脂质体
APRPG(Ala-Pro-Arg-Pro-Gly)，即丙氨酸-脯氨酸-精氨酸-脯氨酸-甘氨酸序列，能够特异性作用于肿瘤的新生血管部位，可以作为探针主动靶向于新生血管。APRPG修饰的脂质体有利于将包裹的药物递送到血管生成脉管系统。
Maeda等[7]分离出了APRPG五肽，它能够特异性结合于肿瘤新生血管部位。体内实验表明，APRPG修饰的包载DOX的脂质体可以高度特异性地积聚在肿瘤组织，显著抑制肿瘤生长，延长存活时间(达到74 d)，具有显著的抗肿瘤活性。用APRPG修饰的脂质体稳定，大小在120~ 170 nm且近中性，在血中无明显聚集。采用荧光标记的磷脂分子N-4-硝基苯并-2-乙二酸-1，3-二唑磷脂酰乙醇胺(N-4-Nitrobenzo-2-Oxa-1，3-Diazole Phosphatidylethanolamine，简称为NBD-PE)检测APRPG修饰的脂质体的细胞亲和力。结果显示：APRPG修饰的脂质体对血管内皮生长因子高表达的人脐静脉内皮细胞具有显著的亲和力，NBD-PE 的量为58 ng；而对于不表达血管内皮生长因子的结肠癌细胞C26 NL17则几乎没有亲和力，NBD-PE 的量仅为6 ng。肿瘤新生血管是肿瘤生长、增殖、转移的关键性因素，应用APRPG修饰的脂质体针对肿瘤新生血管进行的抗肿瘤血管新生疗法几乎
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可以主动靶向到所有的实体瘤，而且不会产生药物耐受，是一种新型、高效的抗肿瘤方法。
Katanasaka等[8]利用噬菌体展示肽程序库鉴定出一种血管生成复位肽APRPG，设计并确认了APRPG-聚乙二醇(polyethylene glycol，PEG)修饰的脂质体血管生成抑制剂。将一种血管内皮生长因子受体(vascular endothelial growth factor receptors，VEGFR)酪氨酸激酶抑制剂SU1498包裹于脂质体中，制备得到了APRPG-PEG修饰脂质体化的SU1498(APRPG-PEG-Lip-SU1498)。结果发现APRPG-PEG-Lip-SU1498不仅能够抑制体外由VEGF刺激引起的的内皮细胞增殖，而且能显著降低患有结肠癌的小鼠体内Colon26 NL-17细胞肿瘤微血管的密度，延长小鼠存活时间。实验结果表明，APRPG-PEG-Lip-SU1498可以将SU1498有效地递送到肿瘤血管生成内皮细胞，进而抑制肿瘤诱导的血管生成。因此，靶向于肿瘤新生血管的脂质体可以作为血管生成抑制剂的有效载体，应用于抗肿瘤血管新生疗法。
Asai等[9]制备了化疗药物2′-C-氰基-2′-脱氧-1 -β-D-阿拉伯-戊呋喃糖基胞嘧啶(2′-C-cyano-2′- deoxy-1-β-D-arabino-pentofuranosylcytosine，CNDAC)的磷脂衍生物DPP-CNDAC脂质体，用APRPG和PEG进行修饰，得到APRPG-PEG修饰的DPP -CNDAC脂质体(LipCNDAC/APRPG-PEG)。激光扫描显微观测结果显示，LipCNDAC/APRPG-PEG 可以大幅度诱导肿瘤细胞凋亡，而PEG修饰的DPP-CNDAC脂质体(LipCNDAC/PEG)却无此作用。与LipCNDAC/PEG相比，LipCNDAC/APRPG -PEG能更有效地抑制肿瘤生长，从而延长小鼠的寿命。该研究表明，APRPG修饰的脂质体可以作为一种有效的主动药物递送系统应用于抗肿瘤血管新生疗法。
3 细胞穿透肽(CPP)修饰的脂质体
细胞穿透肽(cel1-penetrating peptide，CPP)，也称为蛋白转导域(protein transduction domain，PTD)，是一类少于30个氨基酸的小肽片段，能携带大分子物质进入细胞，其穿膜能力不依赖经典的胞吞作用。CPP是带有正电荷的肽段，它通过共价健与多种大分子物质结合且高效地跨越细胞膜，并能运送多种不同的物质至细胞质和细胞核，包括多肽，蛋白质，DNA，siRNA，电中性的核酸类似物PNA(peptide nucleo acid)，噬菌体颗粒，磁性纳米颗粒，脂质体以及其他小分子化合物等，这一性质为其成为靶向药物的良好载体提供了可能。目前已经发现了3种天然存在的CPP，分别来自HIV-1和猴免疫缺损病毒(SIV)-2、-3的TAT，果蝇同源异型转录因子ANTP和单纯疱疹病毒(HSV)-1的VP22转录因子[10]。
Torchilin等[11]在脂质体膜上及其内部用荧光进行标记，然后将其与TAT-PTD肽段结合。荧光显微镜观察发现，TAT-PTD-脂质体复合物可以进入细胞内，在刚穿透细胞膜进入细胞的2 h内，该复合物保持完整性，2 h后脂质体开始缓慢移向细胞核，9 h左右脂质体与内部标记物完全分离开。该研究表明，TAT-PTD-脂质体复合物是一种很具前景的运载工具，可以将药物和DNA运至细胞内部。
4 血管活性肠肽(VIP)修饰的脂质体
血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide，VIP)是由14种28个氨基酸残基组成的碱性多肽，属于胰泌素/VIP 族的胃肠肽类激素，在机体内分布十分广泛，在胃肠道以及中枢神经、外周神经末梢中含量很高，且具有广泛的生理作用。近年来研究表明，VIP 对肿瘤的发生、增殖和分化起双重调节作用。某些肿瘤细胞(如胰腺癌、小细胞肺癌)既能合成、分泌VIP，又能表达VIP 受体，具有VIP 的自分泌调节作用。VIP受体在乳腺、胃肠道、胰腺、前列腺肿瘤上都有大量的表达。
VIP受体在人乳腺癌细胞中的表达量是正常乳腺细胞的5倍。Dagar等[12]制备了VIP肽修饰的立体稳定脂质体(VIP-SSL)，应用放射性核素锝-六甲基叉胺肟(Tc99m-HMPAO)标记VIP-SSL和SSL，考察它们对人乳腺癌细胞的显像能力。结果显示，Tc99m-HMPAO标记的VIP-SSL在肿瘤组织与正常组织累积量的的比值明显大于Tc99m-HMPAO标记的SSL，这表明VIP-SSL的主动靶向性很可能是因为脂质体化的VIP肽与乳腺癌细胞上的VIP受体之间的相互作用。此外，Tc99m-HMPAO标记的VIP-SSL在乳腺癌细胞中的累积量显著高于SSL，证明经过VIP修饰的脂质体确实被主动靶向到了乳腺癌细胞中。体内实验结果表明，通过VIP肽将Tc99m-HMPAO标记的脂质体靶向到肿瘤细胞，提高了对大鼠体内乳腺癌细胞的抑制率。因此，VIP 受体有望成为乳腺癌的主动靶向载体，用于乳腺癌的有效诊断和治疗。Torchilin[13]用放射性核素标记法得到了相同的结果。
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5 甘氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸(GRGDS)多肽修饰的脂质体
甘氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸(glycine-arginine-glycine-aspartic acid-serine, GRGDS)是一种含RGD序列的五肽，在监测肿瘤组织周围血管生成方面有重要作用，可用于抗癌药物靶向递送系统的设计。
ZHAO等[14]成功制备了GRGDS修饰的紫杉醇长循环脂质体(GRGDS-SSL-PTX)，对其体外理化性质进行了考察，并且评价了该脂质体对人卵巢癌细胞SKOV-3和乳腺癌细胞MCF-7的体外靶向性。体外细胞毒实验结果表明，GRGDS-SSL-PTX这两种细胞株生长抑制作用均有显著程度的增强，分别为SSL-PTX的1.42倍和2.12倍。GRGDS对SSL-PTX的修饰并不影响脂质体的理化特征，但却增加了紫杉醇脂质体对肿瘤细胞的靶向性，进而增加了细胞毒性。这一结果提示，GRGDS修饰的脂质体可以用作抗癌药物的载体靶向到肿瘤细胞，为肿瘤的靶向治疗提供了新的思路。
6 其它多肽修饰的脂质体
6.1 YIGSR多肽修饰的脂质体
YIGSR(Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg)(酪氨酸-异亮氨酸-甘氨酸-丝氨酸-精氨酸)是来源于层粘连蛋白(laminin，LN)分子β1链的序列，能干扰肿瘤细胞膜黏附分子与基底膜和细胞外基质的黏附，可有效抑制纤维肉瘤和黑素瘤的生长和转移。YIGSR肽具有抗肿瘤血管生成的作用，不但可以抑制肿瘤转移灶，而且可以抑制肿瘤原发灶的生长。将YIGSR 肽连接到脂质体表面，用脂质体作为YIGSR肽的载体，在体内可减少酶对YIGSR肽的破坏，增强抗转移效果，有效地抑制实验性肺转移和自发性肺转移，表明YIGSR多肽脂质体很有可能成为临床上有效的抗转移剂。
6.2 NGR多肽修饰的脂质体
氨肽酶N是血管生成内皮细胞优先表达的一种蛋白酶，NGR序列片段可促进肽与氨肽酶N的结合。Pastorino等[15]将NGR序列片段连接到包载DOX的SSL表面，首先以免疫缺陷性小鼠的常位神经母细胞瘤细胞为模型，结果发现与普通SSL相比，NGR肽靶向的脂质体在肿瘤部位的积聚提高了10倍；再以肾上腺肿瘤细胞为模型研究NGR肽修饰的DOX脂质体的抗肿瘤活性，发现多次低剂量给药后可以消除肿瘤。6.3 SP94多肽修饰的脂质体
Albert等[16]通过噬菌体展示技术鉴定出一种新肽SP94，它可与肝癌细胞特异性结合。研究表明，将SP94多肽与DOX脂质体结合形成的化合物SP94-Lipo-Dox不仅可以通过维持白细胞总数来降低血液毒性，而且可以通过促进肿瘤细胞凋亡和减少肿瘤血管生成来提高抗肝癌药物的疗效。提示SP94多肽具有重要的临床用途，可用于治疗早期肝癌患者的系统治疗。
7 结语与展望
多肽具有良好的生物相容性、靶向性、无免疫原性、低毒性、可降解性等优点，这使其在主动靶向药物递送系统中的作用备受关注，并取得了快速的研究进展。多肽修饰的脂质体可以增加药物在体内的选择性，减少药物的毒副作用，提高药物的治疗指数，显示了良好的研究价值和应用前景。目前国际上抗肿瘤多肽的研究还处于起步阶段，在TDDS方面的发展也存在着一些制约因素：肽类难以预料的翻译后修饰及前体肽剪切位点的不确定性；化学药物与肽类载体需要通过化学键进行结合，有的还需要“间隔臂”结构作为桥梁间接参与；肿瘤细胞表面受体表达的复杂性和多样性；等等。影响多肽修饰的脂质体疗效的关键因素是其靶向性，因此如何将研究重心由创新药物转移至识别特定疾病的独特靶点也是未来研究所面临的一大挑战。
REFERENCES
[1] XIONG X B, HUANG Y, LU W L, et al. Intracellular delivery
of doxorubicin with RGD-modified sterically stabilized
liposomes for an improved antitumor efficacy: in vitro and in
vivo [J]. J Pharm Sci, 2005, 94(8): 1782-1793.
[2] XIONG X B, HUANG Y, LU W L, et al. Enhanced
intracellular uptake of sterically stabilized liposomal
Doxorubicin in vitro resulting in improved antitumor activity
in vivo [J]. Pharm Res, 2005, 22(6): 933-939.
[3] SCHIFFELERS R M, GERT S. Liposomal nanomedicines as
anticancer therapeutics: beyond targeting tumor cells [J]. Int J
Pharm, 2008, 364(2): 258-264.
[4] PATTILLO C B, SARI-SARRAF F, NALLAMOTHU R, et al.
Targeting of the antivascular drug combretastatin to irradiated
tumors results in tumor growth delay [J]. Pharm Res, 2005,
22(7): 1117-1120.
[5] ITO A, AKIYAMA H, KAWABE Y, et al. Magnetic
force-based cell patterning using Arg-Gly-Asp (RGD)
peptide-conjugated magnetite cationic liposomes [J]. J Biosci
Bioeng, 2007, 104(4): 288-293.
[6] ZHAO H, WANG J C, SUN Q S, et al. RGD-based strategies
for improving antitumor activity of paclitaxel-loaded
liposomes in nude mice xenografted with human ovarian
cancer [J]. J Drug Target, 2009, 17(1): 10-18.
·684· Chin JMAP, 2010 August, V ol.27 No.8 中国现代应用药学2010年8月第27卷第8期
[7] MAEDA N, TAKEUCHI Y, TAKADA M, et al.
Anti-neovascular therapy by use of tumor neovasculature-
targeted long-circulating liposome [J]. J Control Release, 2004,
100(1): 41-52.
[8] KATANASAKAA Y, IDAA T, ASAIA T, et al. Effective
delivery of an angiogenesis inhibitor by neovessel-targeted
liposomes [J]. Inter J Pharm, 2008, 360(1/2): 219-224.
[9] ASAI T, MIYAZAWA S, MAEDA N, et al. Antineovascular
therapy with angiogenic vesseltargeted polyethyleneglycol-
shielded liposomal DPP-CNDAC [J]. Cancer Sci, 2008, 99(5):
1029-1033.
[10] YAN S R, WANG L L, QIU F C. Advances in cell-penetrating
peptides [J]. Letters In Biotechnology(生物技术通讯), 2006,
17(5): 796-798.
[11] TORCHILIN V P, LEVCHENKO T S. TAT-liposomes: a
novel intracellular drug carrier [J]. Cur Protein Pept Sci, 2003,
4(2): 133-140. [12] DAGAR S, KRISHNADAS A, RUBINSTEIN I, et al. VIP
grafted sterically stabilized liposomes for targeted imaging of
breast cancer: in vivo studies [J]. J Control Release, 2003,
91(1/2): 123-133.
[13] TORCHILIN V P. Targeted pharmaceutical nanocarriers for
cancer therapy and imaging [J]. AAPS J, 2007, 9(2): 128-147. [14] ZHAO H, WANG J C, LUO C L, et al. In vitro evaluation of
GRGDS peptide modified liposomes containing paclitaxel [J].
Chin J New Drugs(中国新药杂志), 2008, 17(23): 2034-2038. [15] PASTORINO F, BRIGNOLE C, MARIMPIETRI D, et al.
Vascular damage and anti-angiogenic effects of tumor vessel-targeted liposomal chemotherapy [J]. Cancer Res, 2003,
63(21): 7400-7409.
[16] LO A, LIN C T, WU H C. Hepatocellular carcinoma
cell-specific peptide ligand for targeted drug delivery [J]. Mol
Cancer Ther, 2008, 7(3): 579-589.
收稿日期：2009-11-02
多肽类抗肿瘤药物研究进展 【摘要】目前，恶性肿瘤已严重威胁人类的健康，传统的手术、化疗、放疗等治疗手段不仅选择性低，毒副作用大，且易产生耐药性。而多肽具有良好的靶向性，且分子量小、来源广泛，具有低毒性、易于穿透肿瘤细胞且不产生耐药性的优点。抗肿瘤活性肽可特异性结合并作用于肿瘤组织，与肿瘤生长转移相关的信号转导分子相互作用，从而抑制肿瘤生长或促进肿瘤细胞发生凋亡。本文将从抗肿瘤多肽药物的来源、作用机制及发展现状进行概述。【关键词】多肽来源抗肿瘤作用机制 恶性肿瘤是一类严重威胁人类健康和生命的疾病，仅次于心血管疾病，每年死于癌症的患者约占总死亡人数的1/4，且中国占相当庞大的病例数。药物治疗是当今治疗肿瘤的主要手段之一，但目前的抗肿瘤药物不良反应较大。对此，寻找新型高效低毒的抗肿瘤药物一直是国内外医药研发的热点。随着免疫和分子生物学的发展，以及生物技术与多肽合成技术的成熟，人们发现多肽类药物不仅毒性低、活性高、易于吸收，还可以通过提高机体免疫功能抑制肿瘤的生长和转移，增强抗肿瘤作用，而且其广泛存在于动物、植物、微生物体内，因此，越来越多的多肽药物被开发并应用于临床。 抗肿瘤多肽的来源 天然来源的抗肿瘤活性肽 天然活性多肽是存在于动物、植物和微生物等生物体内的一类生物活性肽，可经过特殊提取分离工艺直接得到。近年来，对某些多肽经修饰加工后发现其具有显著的抗肿瘤作用，它们可针对肿瘤细胞发生、发展的不同环节，特异性杀伤、抑制肿瘤细胞，显示出极好的应用前景。 1.1微生物源抗肿瘤多肽 微生物源抗肿瘤多肽主要是指广泛存在于生物体内的一种小分子多肤，它们是非核糖体合成的抗菌肽，如多黏菌素(polymyxin)、杆菌肽(bacitracin)、短杆菌肽(gramicidin)等，主要是由细菌产生，并经结构修饰而获得，这类微生物产生的抗菌多肽的研究近年来取得了较大的进展。 细菌抗菌肽又称细菌素，是最常见的一类抗菌肽，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均可分泌。细菌中已发现杆菌肽、短杆菌肽S、多黏菌素E和乳链菌肽(Nisin) 4种类型抗菌肽，能特异性杀死竞争菌，而对宿主自身无害。例如[1]，枯草芽孢杆菌可以产生多种抗微生物物质，如表面活性素(surfactin)，该物质具有抗病毒、抗肿瘤、抗支原体、抗真菌活性和一定程度的抗细菌活性。除此之外，人们还发现某些抗菌肽对部分病毒、真菌和癌细胞等有杀灭作用，甚至能提高免疫力、加速伤口愈合。 1.2动物源抗肿瘤多肽 动物源多肽主要是指从哺乳动物、两栖动物、昆虫中分离提取出来的抗肿瘤多肽。如，有些哺乳动物来源的抗肿瘤多肽对淋巴瘤细胞有较强的抗肿瘤活性且免疫原性低；此外，还有Berge [2]等通过体内实验验证来源于牛科动物乳铁蛋白Lfcin B的9肽LTX-302 ( WKKWDipKKWK )的抗肿瘤效果，结果表明其对淋巴瘤细胞A20具有抗肿瘤活性，IC50为16 μmol·L￣1 。 多数研究表明，从天蚕中分离出的天蚕素Cecropins具有较强的抗肿瘤活性。Cecropin A和Cecropin B对膀胱癌细胞有选择性细胞毒作用，以剂量依赖的方式抑制膀胱癌细胞增殖，对所有膀胱癌细胞系的IC50为73.29~220.05 μmol·L￣1，它们的作用机制可能是破坏靶细胞膜导致不可逆的细胞溶解和细胞破坏[3]。 1.3植物源抗肿瘤多肽
靶向给药系统的研究进展纳米技术的应用 李天一 12级药学四班 2012515101
靶向给药系统的研究进展——纳米技术的应用 摘要：本文简介了靶向给药系统发展情况并对最新出现的靶向给药技术——磁性药物靶向，纳米生物机器人，纳米药物载体做了大体的介绍。 关键字：靶向给药系统纳米药物纳米机器人 近年来，科学技术迅速发展，同时新的技术也不断被应用到医药领域，出现了一大批新的药物制剂。这些新出现的药物制剂在质量和剂型上相比较以往产品有很大的优势。近年来，研究靶向给药系统的趋势大热。靶向给药系统(Drug delivery system)诞生于20世纪70年代，是一种新的制剂技术和工艺，是指药物通过局部或全身血液循环而浓集定位于靶组织，靶器官，靶细胞的给药系统。 在传统的药物递送系统里，常规化疗药物可以静脉注射，也可以口服。药物从被注射的地方或者经胃肠吸收进入血液循环，运动到心脏再到全身其他区域，对于药物要靶向的小区域来说，这个方法的效率非常低，想达到希望浓度就导致要使用大剂量化疗剂，化疗剂在杀伤癌细胞的同时，也产生了全身严重的毒副作用，比如贫血、呕吐、精神萎靡、脱发、溃疡以及白血球数量下降而引发的炎症等，迫使患者停止治疗间。因此迫切需要研究如何采用最有效的方法和途径使药物进入并作用到身体的希望靶点。药物靶向递送治疗可以有效解决这些问题，它通过将药物尽可能有选择地运送到靶部位，提高靶部位的药物浓度，减少药物对全身正常组织毒副作用，来改善癌症治疗的效果。 药物靶向递送有多种分类，目前主要采用按靶向作用方式分类: 被动靶向，对靶细胞无识别能力气，但可经血循环到达它们不能通过的毛细血管床，并在该部位释药; 主动靶向，表面经修饰的药物载体可以不被吞噬系统识别，或连接有特定的配体，与靶细胞的受体结合; 物理靶向，应用外加温度或磁场等将药物载体控制靶到特定部位。被动靶向和主动靶向都是按照药物在体内的沉积来完成的，在靶向精确性、药物浓度方面还存在很多不足。因此，用于把药物定向到靶点物理靶向是一个很有前途的方法。 磁性药物靶向治疗是物理靶向药物递送的一种。常用的一种方法是磁性纳米粒子表面涂覆高分子，与药物结合后静脉注射到动物体内，在外加磁场下通过纳米微粒的磁性导航，使其移向病变部位，达到定向治疗的目的。这就是磁性纳米粒子在药物学中应用的基本原理。单纯使用身体外部磁场只能对于浅表部位病
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 靶向抗肿瘤药物的研究进展 靶向抗肿瘤药物的研究进展近年来，随着肿瘤生物学及相关学科的飞速发展，人们逐渐认识到细胞癌变的本质是细胞信号转导通路的失调导致的细胞无限增生，随之而来的是抗肿瘤药物研发理念的重大转变。 研发焦点正从传统细胞毒药物向针对肿瘤发生发展过程中众多环节的新药方向发展，这些靶点新药针对正常细胞和肿瘤细胞之间的差异，可达到高选择性、低毒性的治疗效果，从而克服传统细胞毒药物的选择性差、毒副作用强、易产生耐药性等缺点，为此，肿瘤药物进入了一个崭新的研发阶段。 目前发现的药物靶点主要包括蛋白激酶、细胞周期和凋亡调节因子、法尼基转移酶(FTase) 等，现就针对这些靶点的研发药物做一综述。 1、蛋白激酶蛋白激酶是目前已知的最大的蛋白超家族。 蛋白激酶的过度表达可诱发多种肿瘤。 蛋白激酶主要包括丝氨酸/苏氨酸激酶和酪氨酸激酶，其中酪氨酸激酶主要与信号通路的转导有关，是细胞信号转导机制的中心。 蛋白激酶由于突变或重排，可引起信号转导过程障碍或出现异常，导致细胞生长、分化、代谢和生物学行为异常，引发肿瘤。 研究表明，近 80%的致癌基因都含有酪氨酸激酶编码。 1 / 22
抑制酪氨酸激酶受体可以有效控制下游信号的磷酸化，从而抑 制肿瘤细胞的生长。 酪氨酸激酶受体分为表皮生长因子受体(EGFR) 、血管内皮细胞 生长因子受体(VEGFR) 、血小板源生长因子受体(PDGFR) 等，针对各种受体的酪氨酸激酶抑制剂目前已开发上市的主要为表 皮生长因子受体酪氨酸激酶(EGFR-TK) 抑制剂、血管内皮 细胞生长因子受体酪氨酸激酶(VEGFR-TK) 抑制剂和血小板 源生长因子受体酪氨酸激酶(PDGFR-TK) 抑制剂等。 基于多靶点的酪氨酸激酶抑制剂目前已成为研究重点，具有广 阔的发展前景，其中，包括舒尼替尼和索拉芬尼在内的几个上市新 药均获得了良好的临床评价结果。 1. 1 EGFR-TK 抑制剂许多实质性肿瘤均高度表EGFR， EGFR-TK 抑制剂是目前抗肿瘤药研发的热点之一。 EGFR家族成员包括 EGFR、 ErbB2、 ErbB3、 ErbB4 等，其家 族受体酪氨酸激酶以单体形式存在，在结构上由胞外区、跨膜区、 胞内区 3 个部分组成，胞外区具有 2 个半胱氨酸丰富区，胞内区 有典型的 ATP 结合位点和酪氨酸激酶区，其酪氨酸激酶活性在调节 细胞增生及分化中起着至关重要的作用。 目前已有多个 EGFR-TK 抑制剂上市，且有不少品种处于研发后 期。 1. 1. 1 代表品种 1. 1. 1. 1 吉非替尼(易瑞沙) 本品是一种选择性 EGFR-TK 抑制剂，由阿斯利康公司开发。
摘要 脂质体作为药物载体具有很多优点, 但是其主动靶向性和稳定性较差, 为了克服上述缺点,近年来国内外研制出许多新型脂质体。通过检索近 20 年来国内外有关新型脂质体的相关文献, 对其进行综合分析和总结，提出脂质体在制剂中应用研究中存在的问题与建议，对新型脂质体如长循环脂质体、pH敏感脂质体、温度敏感脂质体、前体脂质体、磁性脂质体、免疫脂质体、膜融合脂质体、柔性脂质体等的研究及应用做一综述, 并展望了新型脂质体的发展前景。脂质体在制剂中应用是新剂型和新技术的现代化重要标志，也是国际化的需要，作为一种新型药物载体，研制出稳定的脂质体是脂质体作为药物载体走向实用的前提，因此具有十分重要的意义。 关键词：脂质体，药物载体，临床研究，综述
Abstract Liposome as drug delivery system has many advantages, but its less active targeting and stability, in order to overcome these shortcomings, both at home and abroad in recent years we have developed many novel liposome. By retrieved near 20 years to both at home and abroad about new fat mass body of related literature, on its for integrated analysis and summary, made fat mass body in preparations in the application research in the exists of problem and recommendations, on new fat mass body as long cycle fat mass body, and pH sensitive fat mass body, and temperature sensitive fat mass body, and Qian body fat mass body, and magnetic fat mass body, and immune fat mass body, and film fusion fat mass body, and flexible fat mass body, of research and the application do a summary of, and prospect has new fat mass body of development prospects. Application in liposome preparation are important signs of modernization of new dosage forms and technologies, as well as international needs, as a novel drug delivery system, developed stable liposomes is towards practical premise of liposome as drug carriers, it has a very important significance. Keywords：Liposome ,Drug carrier ,Clinical research ,Overview
靶向给药系统的新进展 [摘要] 靶向给药系统是以药物能在疾病靶区浓集为主要特点的一大类制剂的总称，最突出的特点是能将治疗药物最大限度地运送到靶区，使治疗药物在靶区浓集超出传统的数倍乃至数百倍，治疗效果明显提高，同时减少药物的用量，降低药物不良反应，而且便于控制给药的速度和方式，达到高效低毒达到治疗效果。近年来靶向给药的研究取得了令人鼓舞的进展，本文针对近几年靶向给药系统新剂型及其在各脏器的研究进展进行综述，以了解靶向给药在各脏器的应用现状。 [关键词] 靶向给药系统；剂型；生物利用度 靶向给药系统（targeted drug delivery system,TDDS），又称靶向制剂，是指将药物通过局部或全身血液循环而浓集定位与病变组织、器官、细胞或细胞内的新型给药系统。TDDS 可利用载体将药物选择性地聚集于作用不为达到提高药物在作用部位的治疗浓度而降低毒副作用的目的，尤其是细胞毒素药物，被认为是抗癌药的适宜剂型。TDDS要求药物作用于靶组织、靶器官、靶细胞，甚至细胞内的结构，并要求有一定浓度的药物停留相当长的一段时间以便发挥治疗作用，故理想的TDDS应具备3个要素：定位蓄积、控制释药、可生物降解。TDDS已在多种临床疾病的防治中显示出优势，如肝病、胃结肠疾病、皮肤、脑病及眼部疾病等。 1．靶向给药系统的剂型 靶向给药系统可分为被动靶向、主动靶向和物理化学靶向3大类，剂型包括脂质体、脂质纳米粒（微乳、复乳、脂肪乳）、聚合物纳米粒（PLA、PLGA、壳聚糖、海藻酸等），微球、前体药物、结肠定位技术等。 1.1 脂质体 脂质体是目前研究较为成熟的靶向载体，具有优良的生物相容性和生物课降解性。 随着载体材料的改进和修饰，相继出现了多种类型的脂质体靶向制剂，如长循环脂质体、免疫脂质体、磁性脂质体、pH和热敏感脂质体等.pH、温度敏感脂质体结合抗体、受体介导技术和磁性定位技术，制备兼具生物靶向和物理靶向的复合脂质体，可极大提高脂质体的靶向性。[1，2] 前体脂质体（proliposomes）系将磷脂、药物及附加剂等以适宜方法制成的、不具备完整脂质双分子层囊泡结构的一种液态或固态制剂，经稀释或水化即能转化成脂质体。 根据制剂中磷脂的存在状态，前体脂质体可分为3大类（见表1）。前体脂质体可在一定程度上克服传统脂质体聚集、融合及药物渗漏等稳定性问题，且制备工艺简单，易于大生产。另外，前体脂质体不仅可直接给药，在体内自动水化形成脂质体；也可稀释或水化后用于静脉注射或其他途径给药[3-5]，是具有良好发展前景的靶向给药载体。 近年来，前体脂质体科研论文及专利申请比重日益上升，被广泛用于紫杉醇、多西他赛、环孢素A、孕酮、克霉唑、鲑降钙素等药物开发。 表1前体脂质体研究近况 类别磷脂状态形态辅料I 技术 混合胶束前体脂质体胶束态液态膜材和药物加入到含表面活 性剂（甘胆酸盐和去氧胆酸盐 等）的溶液中
新型药物载体免疫脂质体的研究进展 08药剂3班乔宇 20080702067 免疫脂质体(immunoliposomes)是单克隆抗体(monoclonal antibody，mAb，简称“单抗”)或其片段修饰的脂质体的简称，这种新型药物载体对靶细胞具有分子水平上的识别能力，具有很多优势，包括对肿瘤靶细胞呈现明显的选择性杀伤作用，且杀伤活性比游离药物、非特异抗体脂质体、单独单抗等更强；在荷瘤动物体内呈特异性分布，肿瘤病灶药物浓度升高，药物毒副作用较小；体内循环半衰期长及运载药物量大等。免疫脂质体发展至今经历了数代：第一代是抗体或抗体片断直接与脂质体的脂膜相连，但由于巨噬细胞的吞噬很快被血液清除；第二代在第一代的表面引入了聚乙二醇(PEG)等亲水性大分子，延长了在血液中的循环时间，但PEG长链对单抗的屏蔽使抗体与靶细胞的结合能力降低；第三代将抗体连接在PEG或其衍生物的末端，制成空问稳定性免疫脂质体(sterically stabilized immunoliposomes，SIL)，延长了包含药物的脂质体的血液循环时问，且单抗伸展至脂质体外部发挥寻靶作用。 本文就免疫脂质体的分类、抗体连接脂质体的方法、临床应用及其发展现状进行综述。 1 免疫脂质体的分类 根据靶向特异性细胞和器官的原理可将免疫脂质体分为抗体介导和受体介导两类。 1．1 抗体介导的免疫脂质体 抗体介导的免疫脂质体是利用抗原一抗体特异性结合反应，将单抗与脂质体偶联。抗体有单克隆抗体和多克隆抗体之分，单抗因其专一性在抗体应用中占主导地位。现今，全世界已有超过1 50种单抗应用于临床或正处于临床研究阶段，且也已从原先的纯鼠单抗发展为人鼠嵌合抗体及人源化抗体，如已上市的人源化单抗Daclizumab、Palivizumab、Trastuzumab等；临床应用中，单抗从最初治疗器官移植排斥反应、降凝血发展到治疗癌症、HIV感染等疑难性疾病[2】。 1．1．1 两种抗体修饰的双靶向免疫脂质体 靶向物用两种不同的抗体修饰脂质体，可增加其结合特异性和细胞摄取率，并且抗体在靶向细胞时能产生协同作用【3】。Laginha等【4]假设脂质体通过抗体靶向到两种或多种受体时，由于受体密度增加，靶向效果会更好，并用荧光测定分析法验证了这一假设的正确性。这项实验中，分别制备了连接相同密度抗体的aCD19靶向脂质体、etCD20靶向脂质体、两种脂质体混合物(混合比例为1：1)及双靶向脂质体，证实了双靶向脂质体和混合脂质体较单个抗体修饰的脂质体和受体有更大的结合率和摄取率，且出现加和性；细胞毒性实验中，装载有阿霉素的双靶向脂质体较这两种脂质体混合物有更高的细胞毒性。Saul等【5]以阿霉素为模型药物，用叶酸和抗表皮生长因子的单抗修饰脂质体，同时靶向两种受体，使药物更多地聚集于肿瘤靶位，降低了对正常组织的毒性。 1．1．2 抗体片段修饰的免疫脂质体 虽然抗体对靶点具有高选择性，但持续给药时，患者往往会出现免疫反应，特别是应用外源性抗体f如鼠)时免疫反应加剧。而抗体片段Fab。(55kDa)、单链抗体可变区基因片段scFv(35kDa)产生的免疫原性比整个单抗低，且更易控制其性质
多肽类药物研究及应用进展 内容摘要：多肽是一类在氨基酸构成及其连接方式上与蛋白质相同,但在某些性质方面又有别于蛋白质的物 质,如其空间结构较简单、免疫原性较低或无免疫原性、生理活性强等。但多肽类物质自身固有的特点，如口服利用率较低、酶 降解性高以及半衰期极短等，使其作为药物开发应用受到诸多的局限。而导致多肽类药物不稳定的一个重要原因就是多肽特殊的分子结构。 本文重点从分子结构改造方面对多肽类药物的研究进展做一综述。 关键词：多肽药物结构改造化学修饰基因工程环肽 多肽作为药物，具有生理活性强、免疫原性低、疗效高等诸多优点，随着生物技术的不断发展，其在人类疾病治疗中的地位也日趋重要，目前已成为国际药学界研究的热点之一。但多肽类物质自身固有的特点，如口服利用率较低、酶降解性高以及半衰期极短等，使其作为药物开发应用受到诸多的局限。而导致多肽类药物不稳定的一个重要原因就是多肽特殊的分子结构，其中多肽主链氨基酸的降解和侧链氨基酸残基的结构变化是多肽结构不稳定的主要原因，因此从多肽类药物本身的分子结构进行改造，是改变其理化性质和药代动力学性质的根本。本文拟重点从分子结构改造方面对多肽类药物的研究进展做一综述。 1 化学修饰 化学修饰不仅是多肽类药物定向改造、提高稳定性的有力工具，也是研究多肽结构与功能的一种重要手段。对多肽的主链基团和侧链基团都可以进行化学修饰。主链基团修饰包括氨基酸肽链的延长、切除及氨基酸定位突变等；侧链基团修饰主要集中于氨基、巯基和羧基上。修饰剂主要有葡聚糖、多聚唾液酸、聚乙二醇、四硝基乙烷等。根据修饰剂与 多肽之间反应的性质，修饰反应可分为糖基化反应、酯化反应、酰化反应、取代反应、磷酸化反应、烷基化反应、氧化还原反应等。由于烷基化反应和氧化还原反应对多肽的活性影响较大，实际应用较少，而磷酸化反应对多肽稳定性的影响意义不大。现主要对前 4 种修饰反应进行重点介绍。 1.1 糖基化反应 糖基化是指多肽的氨基和单糖还原端的羰基在温和的条件下经过一系列变化成为较稳定的糖肽的过程，是一种较为理想的稳定多肽类药物的方式，糖链的存在及其结构的可变性、复杂性和多样性直接影响着糖肽在组织中的降解和在体内的寿命[1]，也使得糖肽成为药学研究的新热点。脑内的亮氨酸脑啡肽可特异性地与阿片受体结合，在机体内起着调控痛觉感受并调节心血管与胃肠功能的作用，但半衰期短。 1.2 酯化反应 酯化是指多肽的羧基和醇羟基形成较稳定的酯类化合物的反应。聚乙二醇（polyethylene glycol，PEG）是常用的酯化反应试剂，是一种线性、亲水、灵活而不带电的高分子聚合物。通常选择相对分子质量大于10 000 的PEG 在温和的条件下对多肽进行修饰，选择合适的修饰类型、修饰程度以及修饰位点有利于改善多肽类药物的活性并提高其稳定性。目前已有不少经PEG 修饰的多肽类药物如PEG-IL-2[2]、PEG-水蛭素[3]等已进入临床试验阶段。 1.3 酰化反应
发布日期20071127 栏目化药药物评价>>非临床安全性和有效性评价 标题合成多肽药物有关物质研究的几点考虑 作者审评五部 部门 正文内容 审评五部 有关物质研究是合成多肽药物药学研究的一项重要内容，由于合成多肽本身结构、合成工艺以及稳定性方面的特殊性，这类药物的 有关物质研究较为复杂、存在一定的难度。国家食品药品监督管理 局颁布的《合成多肽药物药学研究技术指导原则》已经就该类产品 的有关物质研究提出了原则性的要求，本文主要是根据审评中遇到 的一些共性问题就合成多肽药物有关物质研究需重点关注的几个 问题做进一步的说明。 （一）合成多肽药物有关物质的特点和研究的难点。 合成多肽的有关物质主要为源于合成过程带来的工艺杂质和由于多肽不稳定而产生的降解产物、聚合物等。 工艺杂质尽管目前合成多肽的纯化工艺已经有了很大进步，但工
艺杂质仍是合成多肽有关物质的重要来源，这主要是由于合成多肽的一些工艺杂质（如缺失肽、断裂肽、氧化肽、二硫键交换的产物等）与药物本身的性质可能非常近似，从而给纯化造成了一定的难度。而且，不同的多肽合成方法也在很大程度上决定了终产品中杂质的性质，例如液相合成和固相合成所引入的工艺杂质就会明显不同，固相合成中Boc合成法与Fmoc合成法所产生的杂质也会有所差异，甚至不同的保护/脱保护策略都会带来不同的工艺杂质。因此，在进行合成多肽的有关物质研究时，研究者必须结合自身的工艺特点对可能由此引入的杂质有充分认识，从而才能够建立有针对性的有关物质研究方法。同时，这也意味着，对于仿制产品而言不能盲目照搬国家标准、已上市产品的有关物质检查方法，必须充分考虑到产品本身的工艺特点。 降解产物及聚合物多肽的化学稳定性和物理稳定性一般较差，因此降解产物、聚合物等是合成多肽有关物质研究的主要对象之一。影响合成多肽稳定性的因素包括脱酰胺、氧化、水解、二硫键错配、消旋、β-消除、聚集等，研究显示合成多肽中最常见的降解产物是脱酰胺产物、氧化产物、水解产物。在组成多肽的各种氨基酸中，天冬酰胺、谷胺酰胺易于发生脱酰胺反应（尤其是在pH值升高和高温条件下）；甲硫氨酸、半胱氨酸、组氨酸、色氨酸、酪氨酸最易氧化，对光照也较为敏感；天冬氨酸参与形成的肽链较易断裂，尤其是Asp-Pro和Asp-Gly肽键。由于一个多肽分子中通常
脂质体及其医药应用 化学01 马高建2010012222 摘要：脂质体是一种天然脂类化合物悬浮在水中形成的具有双层封闭结构的囊泡，目前可由人工合成的磷脂化合物来制备。它作为一种高效的载体，近年来在医药、化妆品和基因工程领域等都有广泛应用，国内外在这方面进行了大量的研究，并取得了一些进展。本文将对脂质体的研究现状和其在医药方面的应用做一下概括，并对脂质体的发展前景做一下展望。 关键词：脂质体、制备、医药、应用 脂质体最初是1965年英国学者Banyhanm和Standish将磷脂分散在水中进行电镜观察时发现的。磷脂分散在水中自然形成多层囊泡，每层均为脂质双分子层，囊泡中央和各层之间被水隔开，双分子层厚度约4 nm，后来将这种具有类似生物膜结构的双分子小囊泡称为脂质体，又称人工膜。 1988年，第一个脂质体包裹的药物在美国进行临床试验，现在用脂质体包裹的抗癌药、新疫苗、其他各种药品、化妆品、农药等也开始上市。 我国的脂质体研究始于上世纪70年代，经过近30年的研究，我国在脂质体的研究和应用方面取得了可喜的成果。目前我国已有多个以脂质体作载体的新药剂型进入临床验证阶段。 当前脂质体的医药应用研究主要集中在模拟膜的研究、药品的可控释放和体内的靶向给药，此外还有如何在体外培养中将基因和其他物质向细胞内传递。由于脂质体具有生物膜的特性和功能，它作为药物载体的研究已有多种，主要用于治疗癌症的药物，它可将包封的活性物质直接运输到所选择的细胞上，故有“生物导弹”之称。 1 脂质体及其分类 脂质体（或称类脂小球、液晶微囊），是一种类似微型胶囊的新剂型，是将药物包封于类脂质双分子层形成的薄膜中间所制成的超微型球状载体剂型，其内部为水相的闭合囊泡。由于其结构类似生物膜，故又称人工生物膜。脂质体主要有双分子层组成，磷脂（卵磷脂、脑磷脂、豆磷脂）和胆固醇是形成双分子层的基础物质，再加入其他附加剂制备而成。 1.1 结构 脂质体可以是单层的封闭双层结构，也可以是多层的封闭双层结构。在显微镜下，脂质体的外形除了常见的球形、橄榄形外，还有长管状结构，直径可以从几百A到零点几毫米（mm），而且各种大小和形状的结构可以共存。 1.2 性质 1.2.1 相变温度T c在加热情况下，脂质体的磷脂分子两条碳氢链从有序的凝胶
【药学动态】 靶向抗肿瘤药物的研究进展 近年来，随着肿瘤生物学及相关学科的飞速发展，人们逐渐认识到细胞癌变的本质是细胞信号转导通路的失调导致的细胞无限增生，随之而来的是抗肿瘤药物研发理念的重大转变。研发焦点正从传统细胞毒药物向针对肿瘤发生发展过程中众多环节的新药方向发展，这些靶点新药针对正常细胞和肿瘤细胞之间的差异， 可达到高选择性、低毒性的治疗效果，从而克服传统细胞毒药物的选择性差、毒副作用强、易产生耐药性等缺点，为此，肿瘤药物进入了一个崭新的研发阶段。 目前发现的药物靶点主要包括蛋白激酶、细胞周期和凋亡调节因子、法尼基转移酶(FTase)等，现就针对这些靶点的研发药物做一综述。 1、蛋白激酶 蛋白激酶是目前已知的最大的蛋白超家族。蛋白激酶的过度表达可诱发多种肿瘤。蛋白激酶主要包括丝氨酸/苏氨酸激酶和酪氨酸激酶，其中酪氨酸激酶主要与信号通路的转导有关，是细胞信号转导机制的中心。蛋白激酶由于突变或重排，可引起信号转导过程障碍或出现异常，导致细胞生长、分化、代谢和生物学行为异常，引发肿瘤。 研究表明，近80%的致癌基因都含有酪氨酸激酶编码。抑制酪氨酸激酶受体可以有效控制下游信号的磷酸化，从而抑制肿瘤细胞的生长。酪氨酸激酶受体分为表皮生长因子受体(EGFR)、血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR)、血小板源生长因子受体(PDGFR)等，针对各种受体的酪氨酸激酶抑制剂目前已开发上市的主要为表皮生长因子受体酪氨酸激酶(EGFR-TK)抑制剂、血管内皮细胞生长因子受体酪氨酸激酶(VEGFR-TK)抑制剂和血小板源生长因子受体酪氨酸激酶(PDGFR-TK)抑制剂等。基于多靶点的酪氨酸激酶抑制剂目前已成为研究重点，具有广阔的发展前景，其中，包括舒尼替尼和索拉芬尼在内的几个上市新药均获得了良好的临床评价结果。 1.1EGFR-TK抑制剂 许多实质性肿瘤均高度表EGFR，EGFR-TK抑制剂是目前抗肿瘤药研发的热点之一。EGFR 家族成员包括EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4等，其家族受体酪氨酸激酶以单体形式存在，在结构上由胞外区、跨膜区、胞内区3个部分组成，胞外区具有2个半胱氨酸丰富区，胞内区有典型的ATP结合位点和酪氨酸激酶区，其酪氨酸激酶活性在调节细胞增生及分化中起着至关重要的作用。目前已有多个EGFR-TK抑制剂上市，且有不少品种处于研发后期。 1.1.1代表品种 1.1.1.1吉非替尼(易瑞沙) 本品是一种选择性EGFR-TK抑制剂，由阿斯利康公司开发。2002年7月在日本首次上市，用于治疗非小细胞肺癌(NSCLC)。本品也是首个获准上市的EGFR-TK抑制剂，属于苯胺喹钠唑啉化合物(anilinoquinazoline)，为小分子靶向抗肿瘤药物。本品最常见不良反应是痤疮样皮疹和腹泻，最严重不良反应是间质性肺病，发生率为3％-5％。目前，本品用于前列腺癌、食管癌、肝细胞癌(HCC)、胰腺癌、膀胱癌、肾细胞癌(RCC)、卵巢癌、头颈部癌、恶性黑色素瘤等多种治疗适应证处于Ⅱ期临床研究阶段。 1.1.1.2厄洛替尼(特罗凯) 本品由OSI制药公司开发，2004年11月在美国首次上市，用于治疗NSCLC。本品为口服小分子EGFR-TK抑制剂，是目前世界上惟一已明确能提高NSCLC患者生存期的靶向药物。
脂质体在药剂领域的研究进展 摘要：目的：本文对脂质体特点、制备方法、最新进展及其在药剂领域的应用进行概述，总结分析脂质体在药剂领域的发展方向和前景。方法：查阅中国知网、Science direct、Web of Science等主流数据库的文献，并总结归纳。结果：发现脂质体在药剂领域（中药、化学药、生物制品等）应用广泛，近年来取得很大进展，部分药物已用于临床。结论：脂质体作为一种新型药物载体，不断发展与完善在药剂领域具有十分广阔的应用前景。 关键词：脂质体、药物递送、靶向、研究进展 Research Progress of Liposomes in Pharmaceutical Field Dan Zhao, school of pharmacy, Pharmaceutics 1302, 3131602034 Abstract: Objective: this article summarizes the characteristics of liposomes, preparation methods, latest developments and their applications in pharmacy field, and to conclude the development direction and prospects of liposomes in pharmaceutical field. Methods: The literatures of mainstream databases such as China Knowledge Network, Sciencedirect and Web of Science were reviewed and summarized. Results: Liposomes have been widely used in pharmaceutical field (traditional Chinese medicine, chemical medicine, biological products, etc.) and have made great progress in recent years. Some drugs have been used in clinic. Conclusions: As a new drug carrier, liposomes have very wide application prospects in pharmaceutical field. Keywords: liposomes, drug delivery, targeting, research progress 脂质体是指由磷脂等类脂质构成的双分子层球状囊泡，它将药物包封于双分子层内而形成微型载药系统。除常见的类脂质双分子层外，它也可以是多层同心脂质双分子层。上个世纪60年代中期，脂质体技术应用于化妆品领域, 但直到 20世纪 70年代才将脂质体应用于药物载体, 并引起广泛关注1。因为脂质体具有诸多优良的特性，例如可通过修饰进行靶向给药、毒性及免疫反应小2等等，其后被广泛用于生命科学及工程领域。 1.脂质体及脂质体药物制剂的特点 脂质体具有以下特点3： 1)脂质体本质上是一种囊泡； 2)脂质体很小一般在 1 μm 以下(1 000 μm =1 mm)； 3)脂质体的囊泡壁一般是由两层磷脂分子构成,也可以是多层同心脂质双分子层； 4)磷脂在一定条件下才能形成脂质体 ,并非把磷脂放在水中就产生脂质体 ,磷脂在水中或甘油中搅拌只能形成乳化颗粒； 5)脂质体可以包裹其他物质（如药物）形成不同内容物脂质体，通过电、超声、热、光等致孔可以使药物从脂质体释放，并且所形成孔的大小和分布会影响释药速度4。 脂质体药物制剂具有以下特点5： 1）体内可降解； 2）低免疫原性； 3）保护药物活性基团； 4）可制备靶向制剂； 5）延长药物半衰期。 理想的脂质体载药系统应具备以下特点:包封率高，药物不易渗漏、粒径分布范围窄、稳定性好，氧化降解速度缓慢3。虽然近年来脂质体药物的研究取得了很大的进步,如多柔
附件三 合成多肽药物药学研究技术指导原则
合成多肽药物药学研究技术指导原则 一、前言 多肽类化合物是一类重要的生物活性分子。20世纪70年代生物技术在生命科学领域的应用，使多肽等生物技术药物的研究进展迅速；与此同时，随着多肽固相合成技术及高效液相色谱（HPLC）纯化、分析技术等的发展，合成多肽药物的开发也成为药物研究中的一个活跃领域。 采用化学合成方法制备多肽，可以对天然多肽的结构进行修饰，从而增加多肽与受体的亲和力、选择性，增强对酶降解的抵抗力或改善药代动力学特性，甚至由受体的激动剂变为拮抗剂；此外，新技术的发展，例如以多肽固相合成和组合化学为基础的组合肽库合成技术，使得在短时间内获得大量的多肽化合物成为可能，药物筛选的效率不断提高。因此，将会有越来越多的采用化学合成方法制备的多肽类化合物成为治疗用药物。 合成多肽药物是指采用化学合成方法制备的多肽类药物。这类药物的药学研究同样遵循国家食品药品监督管理局已经发布的相关技术指导原则的一般性要求。但是，由于多肽主要由氨基酸（包括天然氨基酸和非天然氨基酸）构成，这使得多肽类药物在制备方法、结构确证、质量研究等方面又有与一般药物不同的独特问题。本指导原则就是在已有的相关指导原则基础上，对合成多肽药物药学研究方面所涉及的特殊问题进行分析，结合国内对多肽药物研究和评价的实践经验，提出多肽药物药学各项研究的一般性要求。当然，具体品种研究的内容与深度还要取决于品种本身的特性。 本指导原则适用于采用液相或固相合成方法制备的多肽药物。
二、合成多肽药物药学研究的基本考虑 合成多肽药物药学研究的主要内容、研究思路、研究方法及一般性的技术要求与其他类型的化学药物基本一致。但是，由于多肽药物的特点，在进行药学研究时还应注意考虑以下问题。 1、关于多肽（原料药）合成工艺选择的考虑 多肽的化学合成是有机合成的一个非常特殊的分支，目前主要有液相合成和固相合成两种方法。 液相合成是经典的多肽合成方法，一般采用逐步合成或片段缩合方法。逐步合成法通常从链的C'末端氨基酸开始，向不断增加的氨基酸组分中反复添加单个α-氨基保护的氨基酸。片段缩合一般先将目标序列合理分割为片段，再逐步合成各个片段，最后按序列要求将各个片段进行缩合。液相合成的优点是每步中间产物都可以纯化、可以获得中间产物的理化常数、可以随意进行非氨基酸修饰、可以避免氨基酸缺失，缺点是较为费时、费力等。 固相合成是将目标肽的第一个氨基酸的羧基以共价键的形式与固相载体(树脂)相连,再以这一氨基酸的氨基为合成起点,使其与相邻氨基酸（氨基保护）的羧基发生酰化反应,形成肽键。然后让包含有这两个氨基酸的树脂肽的氨基脱保护后与下一个氨基酸的羧基反应,不断重复这一过程,直至目标肽形成为止。其优点是简化了每步反应的后处理操作，避免因手工操作和物料转移而产生的损失，产率较高且能够实现自动化等；其缺点是每步中间产物不可以纯化，必须采用较大的氨基酸过量投料，粗品纯度不如液相合成物，必需通过可靠的分离手段进行纯化等。 液相合成和固相合成各有优缺点，应根据合成的实际需要选择适合的工艺。一般而言，液相合成法较适于合成短肽；固相合成法
多肽、蛋白质类药物缓释剂型的研究进展 作者：文章来源：点击数：3201 更新时间：2004-7-13 随着生物技术的高速发展，多肽、蛋白质类药物不断涌现。目前已有35种重要治疗药物上市，生物技术与生物制药企业的发展也日益全球化。生物技术药物研究的重点是应用重组技术开发可应用于临床的多肽、蛋白、酶、激素、疫苗、细胞生长因子及单克隆抗体等。据＇s 报道，目前已有723种生物技术药物正在接受审评(包括Ⅰ～Ⅲ期临床及评估)，700种药物处于早期研究阶段(研究与临床前)，还有200种以上药物已进入最后批准阶段(Ⅲ期临床与评估)［1］。 生物技术药物的基本剂型是冻干剂。常规制剂尽管其疗效早为临床所证实，但由于半衰期短，需要长期频繁注射给药，从患者的心理与经济负担角度看，这些都是难以接受的问题。为此，各国学者主要从两方面着手研究开发方便合理的给药途径和新制剂：①埋植剂和缓释注射剂。 ②非注射剂型，如呼吸道吸入、直肠给药、鼻腔、口服和透皮给药等［2］。缓释生物技术药物的注射制剂，是很有应用前景的新剂型，有一些品种如能缓释1至3个月的黄体生成素释放激素()类似物微球注射剂已经上市［3］，本文着重介绍这类制剂。 1多肽、蛋白质药物缓释制剂的主要类型 多肽、蛋白质药物缓释制剂的研究与开发，从发展过程及剂型看，主要分埋植剂和微球注射剂两类。 1.1埋植剂() 1.1.1细棒型埋植剂［4］埋植剂外形为一空心微型细棒，一头封闭，另一头开口，棒材为聚四氟乙烯等非生物降解聚合物。腔内灌入药物与硅胶(,聚二甲基硅氧烷)混合物。埋植剂埋入人体皮下，药物通过硅胶基质开口处缓慢释放。美国内科医生手册()上收载了商品名为?的埋植剂，药物为左旋-18乙基炔诺酮，用于计划生育。该制剂每根直径 2.4 ，长34 ，医生通过手术将6根细棒状物埋植在患者上臂内侧，药物可在体内按零级模式释药达5年，药物释完后再经手术取出。 1.1.2微型渗透泵埋植剂美国公司20世纪70年代开发了外形像胶囊的埋植剂，该制剂埋植于皮下或其它部分，体液可渗透过外壳，溶解夹层电解层，使体积膨胀的夹层压向塑性内腔，促使药物溶液从开口定速释放。有不少生物大分子药物，如胰岛素、肝素、神经生长因子等作为模型药物的动物体内外研究报道［5］。埋植剂对需要长期用药的慢性患者的治疗具有积极的意义，但它存在以下缺陷：①必须经手术途径植入。②制剂骨架材料为非生物降解聚合物，释药结束后还需经手术取出。③制剂在局部组织有刺激与不适感。 1.1.3可注射的埋植剂可生物降解聚合物作为埋植型或注射型缓释制剂骨架是近20年来国内外学者大力研究的方向，这类聚合物包括两大类：①天然聚合物，如明胶、葡聚糖、白蛋白、甲壳素等。②合成聚合物，如聚乳酸、聚丙交酯、聚乳酸-羟乙酸()、聚丙交酯乙交酯()、聚己内酯、聚羟丁酸等。 近年合成聚合物尤为人们重视，于20世纪70年代起即用作外科缝线及体内埋植材料，如人工关节、护板、螺栓等。聚合物在体内可逐渐
龙源期刊网 https://www.doczj.com/doc/615836781.html, 银屑病治疗靶向药物的研究进展 作者：朱愿超孙雪林胡欣 来源：《中国药房》2019年第04期 中图分类号 R986 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2019）04-0542-06 DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2019.04.22 摘要目的：了解银屑病治疗靶向药物的研究进展，为其新药研发提供参考。方法：以“银屑病”“生物”“靶向治疗”“Psoriasis” “Biological”“Targeted therapy”等為关键词，组合查询2000年-2018年10月在中国期刊全文数据库、万方、维普、PubMed、SpringerLink、Web of Science、Elsevier等数据库中的相关文献，对银屑病治疗药物的作用靶点及其制剂的研究进展进行归纳和总结。结果与结论：共检索到相关文献1 913篇，其中有效文献48篇。目前，银屑病治疗 靶向药物主要是肿瘤坏死因子α抑制剂、白细胞介素及其受体抑制剂、磷酸二酯酶4抑制剂、T细胞靶向治疗药、细胞信号传导小分子抑制剂、血管内皮生长因子抑制剂等。此外，随着银屑病作用机制的深入研究，也发现了很多新的作用靶点，如神经生长因子抑制剂、趋化因子受体拮抗剂、丝裂原激活的蛋白激酶抑制剂、转录激活因子抑制剂等可作用于新的靶点，均可能在银屑病中发挥治疗作用，这些靶点为进一步研究的方向和具体研究点等提供新思路。 关键词银屑病；肿瘤坏死因子；白细胞介素及其受体；磷酸二酯酶4；T细胞；细胞信号传导小分子；血管内皮生长因子；靶向药物 银屑病（Psoriasis）是一种常见的慢性免疫炎症性疾病，全球发病率为2%～3%[1]，我国发病率为0.47%～0.59%[2]。其主要症状表现为皮肤病，根据发病特征不同又可分为斑块型银屑病、脓疱型银屑病、红皮病型银屑病、关节病型银屑病等，其中斑块型银屑病在临床最为常见。不同类型的银屑病有可能发生于同一患者，因病情顽固而常需终身治疗；治疗的目的在于控制病情，减缓向全身发展的进程，减轻自觉症状及皮肤损害，尽量避免复发，提高患者生活质量。治疗银屑病的传统药物包括甲氨蝶呤、柳氮磺吡啶、阿维A等，但有部分患者使用上 述药物后效果不佳或者无法耐受不良反应，因此临床上急需新的银屑病治疗药物[3]。 银屑病是一种在多基因遗传背景下，由多种致病因子刺激机体免疫系统，而引起的以T细胞介导为主的自身免疫性皮肤病，其发病机制尚未完全阐明[3]。随着人们对银屑病研究的不 断深入，许多新型银屑病靶向药物逐渐受到关注，其中大多数为生物制剂。为此，笔者以“银屑病”“生物”“靶向治疗”“Psoriasis”“Biological”“Targeted therapy”等为关键词，组合查询2000年-2018年10月在中国期刊全文数据库、万方、维普、PubMed、SpringerLink、Web of Science、Elsevier等数据库中的相关文献。结果，共检索到相关文献1 913篇，其中有效文献48篇。现对银屑病治疗药物的作用靶点及其制剂的研究进展进行归纳和总结，以期为其新药研发提供参考。
?综述? 包覆脂质体的研究进展 吕青志，翟光喜＊，王海刚，黄兴刚 （山东大学药学院，山东 济南２５００１２） 摘要：包覆脂质体是一种新型的膜修饰脂质体，与普通脂质体相比，提高了脂质体体内外稳定性，延长了体内 循环时间，增加了药物的靶向性。现对各种包覆材料的特点予以评价，并对包覆脂质体的国内外研究进展作一综述。关键词：脂质体；包覆脂质体；壳聚糖；多糖中图分类号：Ｑ９４６．４ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７２－９７９Ｘ（２００７）０２－００４５－０４ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ａｄｖａｎｃｅ ｏｎ Ｃｏａｔｅｄ Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ＬＶ Ｑｉｎｇ－ｚｈｉ，ＺＨＡＩ Ｇｕａｎｇ－ｘｉ＊，ＷＡＮＧ Ｈａｉ－ｇａｎｇ，ＨＵＡＮＧ Ｘｉｎｇ－ｇａｎｇ（ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｓｈａｎｇｄｏｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｊｉｎａｎ ２５００１２， Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｃｏａｔｅｄ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ａｒｅ ａ ｋｉｎｄ ｏｆ ｓｕｒｆａｃｅ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｗｈｉｃｈ ｃａｎ ｉｍｐｒｏｖｅ ｔｈｅ ｓｔａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｅｉｔｈｅｒ ｉｎ ｖｉｖｏ ｏｒ ｉｎ ｖｉｔｒｏ， ｐｒｏｌｏｎｇ ｔｈｅ ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ｉｎ ｖｉｖｏ ｂｙ ｒｅｄｕｃｉｎｇ ｔｈｅ ｕｐｔａｋｅ ｏｆ ｔｈｅ ｐｈａｇｏｃｙｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｔｈｅ ｒｅｔｉｃｕｌｏｅｎ－ｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｓｙｓｔｅｍ （ＲＥＳ） ａｎｄ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ． Ｔｈｅ ａｄｖａｎｃｅ ｏｆ ｃｏａｔｅｄ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｈａｒａｃｔｅｒｓ ｏｆ ｃｏａｔｉｎｇｍａｔｅｒｉａｌｓ ａｒｅ ｒｅｖｉｅｗｅｄ ｉｎ ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ．Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｌｉｐｏｓｏｍｅ； ｃｏａｔｅｄ ｌｉｐｏｓｏｍｅ； ｃｈｉｔｏｓａｎ； ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ 收稿日期：２００６－１１－２８ 作者简介：吕青志（１９８３－），女，山东烟台人，硕士研究生，药剂学专业 ＊ 通讯作者：翟光喜，男，博士，副教授Ｔｅｌ：（０５３１）８８３８２０１５Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈａｉｇｕａｎｇｘｉ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ 脂质体（ｌｉｐｏｓｏｍｅ）作为药物载体，具有一定的靶向性和缓释性，能降低药物给药剂量，减轻药物毒性，提高药物的稳定性［１］。但脂质体属微粒分散制剂，存在粒径变大、絮凝、药物渗漏等问题，口服后胃蛋白酶易吸附于磷脂表面，降解酸敏感的大分子药物；静注给药后网状内皮系统对其识别、吸收，导致体内循环时间缩短；磷脂与血中高密度脂蛋白发生脂交换并与白蛋白、调理素、抗体等作用，使脂质体破裂，包封的药物快速渗漏。包覆脂质体（ｃｏａｔｅｄ ｌｉｐｏｓｏｍｅ）是一种新型的膜修饰脂质体，与普通脂质体相比，它可增加脂质体双层膜的稳定性，提高脂质体的体内外稳定性，延缓脂质体中的药物释放；能够给脂质体外层周围提供一个亲水性屏障，阻止血浆蛋白对脂质体表面的吸附，静注给药可延长脂质体在体内的循环时间，增加药物的靶向性。常用的包覆材料有多糖（如壳聚糖、藻酸盐）及其衍生物、聚乙烯醇衍生物（ＰＶＡ－Ｒ）、胶原蛋白、右旋糖苷衍生物等［２，３］。 １壳聚糖及其衍生物１．１ 壳聚糖 壳聚糖（ｃｈｉｔｏｓａｎ，ＣＳ）是甲壳素的部分脱乙 酰基产物，是自然界中唯一的碱性多糖，无毒，具 有生物黏附、吸收促进、酶抑制和生物可降解性。在酸性条件下，壳聚糖带正电荷易与黏膜发生静电 吸附，能打开消化道上皮间的紧密连接，增加药物的透膜吸收。用壳聚糖包覆脂质体，阳离子型的壳聚糖与阴离子脂质体发生电荷作用，壳聚糖未完全脱乙酰化的酰基插入脂质体的脂膜中，使分子镶嵌在脂质体的表面，形成壳聚糖脂质体复合物，增加了脂质体的稳定性和药物的靶向性［４－６］。 魏农农等［７］用旋转蒸发法制备氟尿嘧啶前体脂质体，然后用氟尿嘧啶前体脂质体０．５ ｇ，加 ｐＨ ７．２的磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ）５ ｍＬ，缓慢振摇静置，即得脂质体混悬液，将２．５ ｍＬ置于１０ ｍＬ玻璃离心管中，在漩涡搅拌器上缓慢滴加质量浓度为５ ｇ／Ｌ的壳 聚糖溶液，持续搅拌１０ ｍｉｎ，得混悬状壳聚糖包覆