一些固定液及方法介绍
前，免疫细胞化学研究中常用的固定剂仍为醛类固定剂，其中以甲醛类和戊二醛最为常用。在此，简要介绍几种目前较为常用和推荐的固定剂，以供读者选用。
1.4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.3）
试剂：多聚甲醛40g
0.1mol/L磷酸缓冲液至1000ml
配制方法：称取40g多聚甲醛，置于三角烧瓶中，加入500～800ml 0.1mol/L磷酸缓冲液（Phosphate Buffer以下简称PB），加热至60℃左右，持续搅拌（或磁力搅拌）使粉末完全溶解，通常需滴加少许1N NaOH才能使溶液清亮，最后补足0.1mol/L的PB于1000ml，充分混匀。
该固定剂较适于光镜免疫细胞化学研究，最好是动物经灌注固定取材后，继续浸泡固定2～24h。另外，该固定剂较为温和，适于组织标本的较长期保存。
2.4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢氧化钠
试剂：A液：多聚甲醛40g
蒸馏水400ml
B液：Na2HPO4?2H2O16.88g
蒸馏水300ml
C液：NaOH 3.86g
蒸馏水200m
配制方法：A液最好在500ml的三角烧瓶中配制（方法同前），至多聚甲醛完全溶解后冷却待用。注意，在溶解多聚甲醛时，要尽量避免吸入气体或溅入眼内。B液和C液配制好后，将B液倒入C液中，混合后再加入A液，以1N NaOH或1N HCl 将pH调至7.2～7.4，最后，补充蒸馏水至1000ml充分混合，4℃冰箱保存备用。
该固定剂适于光镜和电镜免疫细胞化学研究，用于免疫电镜时，最好加入少量新鲜配制的戊二醛，使其终浓度为0.5%～1%。该固定剂较温和，适于组织的长期保存。组织标本于该固定液中，4℃冰箱保存数月仍可获得满意的染色效果。
3．Bouin's液及改良Bouin's液
试剂：饱和苦味酸
40%甲醛250ml
冰醋酸50ml
配制方法：先将饱苦味酸过滤，加入甲醛（有沉淀者禁用），最后加入冰醋酸，混合后存于4℃冰箱中备用。冰醋酸最好在临用前加入。改良Bouin's液即不加冰醋酸。
该固定液为组织学、病理学常用固定剂这一，对组织的穿透力较强，固定较好，结构完整。但因偏酸（pH为3～3.5），对抗原有一定损害，且组织收缩较明显，故不适于组织标本的长期保存。此外，操作时，应避免吸入或与皮肤接触。
4．Zamboni's(Stefanini's)液
试剂：多聚甲醛20g
饱和苦味酸150ml
Karasson-Schwlt's PB至1000ml
配制方法：称取多聚甲醛20g，加入饱和苦味酸150ml，加热至60℃左右，持续搅拌使充分溶解、过滤、冷却后，加Karasson-Schwlt's PB至1000ml充分混合（Karasson –Schwlt's磷酸缓冲液的配制配制方法见后）。
该固定液适于电镜免疫细胞化学，对超微结构的保存较纯甲醛为优，也适于光镜免疫细胞化学研究，为实验室常用固定剂之一。我们在应用中，常采用2.5%的多聚甲醛和30%的饱和苦味酸，以增加其
对组织的穿透力和固定效果，保存更多的组织抗原。固定时间为6～18h。
5．PLP液PLP液即过碘酸盐-赖氨酸-多聚甲醛固定液（Periodate-Lysine-paraform-alde－hyde fixative）
试剂：过碘酸钠
赖氨酸盐酸盐（或盐酸赖氨酸）：
多聚甲醛
蒸馏水
配制方法：
（1）贮存液A（0.1mol/L赖氨酸-0.5mol/L Na3PO4,pH7.4）：称取赖氨酸盐酸盐1.827g溶于50ml蒸馏水中，得0.2mol/L的赖氨酸盐酸盐溶液，然后加入Na2HPO4至0.1mol/L，将pH调至7.4，补足0.1mol/L的PB至100ml，使赖氨酸浓度也为0.1mol/L,4℃冰箱保存，最好两周内使用。此溶液的渗透浓度为300 mOs mmol/L/kg。
（2）贮存液B（8%多聚甲醛溶液）：称8g多聚甲醛加入100ml蒸馏水中，配成8%多聚甲醛液（方法见前）。过滤后4℃冰箱保存。
（3）临用前，以3份A液与1份B液混合，再加入结晶过碘酸钠（NaIO4），使NaIO4终浓度为2%。由于AB两液混合，pH从约7.5降至6.2，故固定时不需再调pH值。固定时间为6～18h。
该固定剂较适于富含糖类的组织，对超微结构及许多抗原的抗原性保存较好。其机制是借助于过碘酸氧化组织中的糖类形成醛基，通过赖氨酸的双价氨基与醛基结合，从而与糖形成交联。由于组织抗原绝大多数都是由蛋白质和糖两部分构成，抗原决定簇位于蛋白部分，故该固定剂有选择性地使糖类固定，这样既稳定了抗原，又不影响其在组织中的位置关系。Mclean和Nakane等认为，最佳的混合是：含0.01mol/L的过碘酸盐、0.075mol/L的赖氨酸、2%的多聚甲醛及0.037mol/L的磷酸缓冲液。6．Karnovsky's液（pH7.3）
试剂：多聚甲醛30g
25%戊二醛80ml
0.1mol/L PB至1000ml
配制方法：先将多聚甲醛溶于0.1mol/L PB中，再加入戊二醛，最后加0.1mol/L的PB至1000ml，混匀。
该固定剂适于电镜免疫细胞化学，用该固定液在4℃短时固定，比在较低浓度的戊二醛中长时间固定能更好地保存组织的抗原性和细微结构。固定时最好先灌注固定，接着浸泡固定10～30min，用缓冲液漂洗后即可树酯包埋或经蔗糖溶液后用于恒冷切片。
7．0.4% 对苯醌（Parabenzoquinone）
试剂：对苯醌 4.0g
0．01mol/L PBS 1000ml
配制方法：称取4.0g对苯溶于1000ml 0.01mol/L的PBS即可。
对苯醌对抗原具有较好的保护作用，但对超微结构的保存有一定影响，故常与醛类固定剂混合使用。一般要求临用前配制，且避免加热助溶，因加热或放置时间过长，固定液变为棕色至褐色，会使组织标本背景增加，影响观察。此外，对苯醌有剧毒，使用时避免吸入或与皮肤接触。
8．PFG液（Parabenzoquinone-Formaldehyde-Glutaraldehyde fixative, PFG）
试剂：对苯醌20g
多聚甲醛15g
25%戊二醛40ml
0.1mol/L二甲酸钠缓冲液至1000ml
配制方法：先以500ml左右的二甲酸钠缓冲液溶解对苯醌及多聚甲醛，然后加入戊二醛，最后加入二甲酸钠缓冲液至1000ml充分混合。
对苯醌与戊二醛及甲醛联合应用，即可阻止醛基对抗原的损害，又不影响超微结构的保存，故适于多种类抗原的免疫细胞化学，尤其是免疫电镜的研究。
9．碳二亚酰胺-戊二醛（ECD-G）液
试剂：0.05mol/L PB500ml
0.01mol/L PBS500ml
Tris约14g
浓HCl少许
ECD10g
25%戊二醛 3.5ml
配制方法：先以约500ml的PB与相同体积的PBS混合，加入Tris（使其终浓度为1.4%）溶解，以浓HCl调pH至7.0，再将事先称取好的ECD和戊二醛加入混合液，振摇后计时，用pH计检测，约2～3min时，pH降至6.6，再以1N的NaOH在4min内调pH至7.0，此时，将该混合固定液加入盛有细胞（经PBS漂洗过）的器皿中，在23℃固定7min后，以PBS洗去固定液，即可进一步处理。
ECD即乙基-二甲基氨基丙基碳亚胺盐酸盐[1-ethyl-3(3-dimethyl-aminoprpyl)-carboi－imide hydrochloride]，简称乙基-CDI，常用于多肽类激素的固定，对酶等蛋白质的固定也有良好效果。ECD 单独应用时，边缘固定效应重，但与戊二醛、Tris及PB联合应用，效果明显改善，细胞质仍可渗透，利用细胞中抗原的定位，超微结构保存较好。目前认为是一种用于培养细胞电镜水平免疫细胞化学研究的很好的固定剂。
10．四氧化锇（锇酸Osmic Acid, OsO4）
配制：将洗净装有OsO4的安瓿中加热后，迅速投入装有溶剂的棕色瓶中，使安瓿遇冷自破。也可用钻石刀在安瓿上划痕，洗净后再放入瓶中，盖好瓶塞，用力撞击安瓿，待其破后加溶剂稀释。为保证充分溶解，应在用前几天配制。
（1）2% OsO4水溶解：取OsO41g溶于重蒸水中。此液常作为储备液，于冰箱中密封保存。
（2）1% OsO4-PB：
试剂：A、2.26%NaH2PO4?2H2O 4.15ml
B、2.52% NaOH 8.5ml
C、5.4%葡萄糖5ml
D、OsO40.5g
配制方法：先分别配好A、B、C三种液体，取A液41.5ml与B液8.5ml混合，将pH调至7.3～7.4，取A－B混合液45ml再与5ml C液混合即为0.12mol/L PBG。
（3）1% OsO4/0.1mol/L二甲胂酸钠缓冲液（pH7.2～7.4）：
试剂：2% OsO4水溶液10ml
0.2mol/L二甲胂酸钠缓冲液（pH7.2～7.4）10ml
配制方法：取2%OsO4储备液10ml与等量0.2mol/L、pH7.2～7.4的二甲胂酸钠缓冲液充分混合即可。OsO4是电镜研究所必需的试剂，常用于后固定。尽管OsO4主要为脂类固定剂，但也可与肽类及蛋白质起作用，形成肽-蛋白质或肽-脂交联。过氧化物酶的反应产物经OsO4处理后，电子密度增高，适于电镜研究。但由于OsO4的反应产物对光及电子有较明显的吸收能力，因此在免疫细胞化学染色前常需去除，去锇在光镜水平常用1%的高锰酸钾，在电镜水平则常用H2O2来处理。
以上介绍了目前免疫细胞化学中常用的一些固定液。关于固定液种类还很多，如70%～90%的酒精、丙酮、醋酸酒精（含0.1%～1%醋酸的70%～90%的酒精等），这些溶液都能促使蛋白质凝固。它们最初只是光学显微镜通用的固定液，但在免疫细胞化学上用其它方法不成功时，也可试用。总之，掌握一个原则，免疫细胞化学中，含重金属的固定液禁用（但Zenker-Formalin可进行短时的固定）。目前多数认为，对生物标本较好的固定措施是：用4 ℃的Karnovsky's液灌注固定10～30min后，接着在pH7.3、0.1mol/L的二甲胂酸钠缓冲液中漂洗过液，这种短时冷固定处理，有助于超微结构和许
多肽类抗原的保存。对其它较难保存的抗原可尝试PFG、PLP及Zamboni's液等混合固定液。
移液器的使用方法及注意事项 一、范围 本标准适用于移液器使用、维护和保养。 二、内容 一个完整的移液循环，包括吸头安装——容量设定——预洗吸头——吸液——放液——卸去吸头等六个步骤。每一个步骤都有需要遵循的操作规范。 1.吸头安装：正确的安装方法叫旋转安装法，具体的做法是，把白套筒顶端插入吸头(无论是散装吸头还是盒装吸头都一样)，在轻轻用力下压的同时，把手中的移液器按逆时针方向旋转180度。切记用力不能过猛，更不能采取剁吸头的方法来进行安装，因为那样做会对您手中的移液器造成不必要的损伤。 2.容量设定：正确的容量设定分为两个步骤，一是粗调，即通过排放按钮将容量值迅速调整至接近自己的预想值;二是细调，当容量值接近自己的预想值以后，应将移液器横置，水平放至自己的眼前，通过调节轮慢慢地将容量值调至预想值，从而避免视觉误差所造成的影响。在容量设定时，还有一个需要特别注意的地方。当我们从大值调整到小值时，刚好就行;但从小值调整到大值时，就需要调超三分之一圈后再返回，这是因为计数器里面有一定的空隙，需要弥补。 3.预洗吸头：在我们安装了新的吸头或增大了容量值以后，应该把需要转移的液体吸取、排放两到三次，这样做是为了让吸头内壁形成一道同质液膜，确保移液工作的精度和准度，使整个移液过程具有极高的重现性。其次，在吸取有机溶剂或高挥发液体时，挥发性气体会在白套筒室内形成负压，从而产生漏液的情况，这时就需要我们预洗四到六次，让白套筒室内的气体达到饱和，负压就会自动消失。 4.吸液：先将移液器排放按钮按至第一停点，再将吸头垂直浸入液面，浸入的深度为：P2、P10小于或等于1毫米，P20、P100、P200小于或等于2毫米，P1000小于或等于3毫米，P5ML、P10ML小于或等于4毫米(浸入过深的话，液压会对吸液的精确度产生一定的影响，当然，具体的浸入深度还应根据盛放液体的容器大小灵活掌握)，平稳松开按钮，切记不能过快。 5. 放液：放液时，吸头紧贴容器壁，先将排放按钮按至第一停点，略作停顿以后，再按至第二停点，这样做可以确保吸头内无残留液体。如果这样操作还有残留液体存在的话，您就应该考虑更换吸头了。 6. 卸掉吸头：卸掉的吸头一定不能和新吸头混放，以免产生交叉污染。 两分钟检查法：这是可以对手中移液器进行快速检查的一种简单方法，通过检查，来判断我们手中的移液器是否处于一种正常的工作状态。 1、测漏：我们手中的移液器叫空气排代式移液器，如果出现漏气的情况，那我们的取样结果就肯定不会准确，这将直接影响到我们实验的最终结果，后果是比较比较严重的。那么，如何判断移液器是否漏气呢?这就需要我们对它做一个简单的测试，首先，取一个透明的容器，装上水，将需要测试的移液器装上吸头，吸上水，如果是P 2、P10、P20、P100、P200的移液器，请将吸头浸入液面1——2毫米，静待20秒，观察吸头内部液面是否下降，如果下降了，就说明您手中的移液器出现了漏气的情况;如果是P1000、P5000、P10ML的移液器，请将吸头朝下悬垂20秒，观察是否有液体下滴，如果有，说明您手中的移液器也出现了漏气的情况。出现了漏气的情况怎么办呢? 2、查找故障原因：首先，检查吸头安装是否到位，换掉吸头再次测试，以排除因吸头的关系产生的漏气情况;接着，检查白套筒的端口部份(即白套筒与吸头接触的部份)是否有刮痕;
移液管、容量瓶等基本操作 一、实验目的 1．掌握移液管、容量瓶、洗涤、干燥及存放方法； 2．掌握移液管、容量瓶的规范使用方法及使用注意事项。 二、实验原理 移液管为量出式（EX）计量玻璃仪器，吸量管是具有分刻度的玻璃管，吸量管转移溶液的准确度不如移液管。 在滴定分析中，要用到3种能准确测量溶液体积的仪器，即滴定管，移液管和容量瓶。这3种仪器的正确使用是滴定分析中最重要的基本操作。对这些仪器使用得准确、熟练就可以减少溶液体积的测量误差，为获得准确的分析结果创造了先决条件。 三、仪器与试液 （一）仪器：移液管、容量瓶。 （二）试液：自来水、洗涤剂、蒸馏水、毛刷。 ◆洗液：将8克重铬酸钾用少量水润湿，慢慢加入180ml粗硫酸，搅拌以加速溶解，冷却后贮存于磨口试剂瓶中。 四、操作步骤 （一）移液管基本操作 1．洗涤 洗涤前，应先检查移液管或吸量管的管口和尖嘴有无破损，若有破损则不能使用。 （1）自来水洗涤若干次，较脏（内壁挂水珠）时，可用铬酸酸洗液洗净。使其内壁下端的外壁均不挂水珠，用滤纸片将液液口内外残留的水擦掉。 （2）实验室用水润洗：自来水洗净后，要用实验室用水润洗2-3次，方法是：用洗净并烘干的小烧杯盛装实验室用水，用移液管吸取5-10ml，立即用右手食指按信管口（尽量勿使溶液回流，以免稀释），将管横过来，用两手的拇指及食指分别拿住移液管的两端，转动移液管并使溶液布满全管内壁，当溶液流至距上口2-3cm时，将管直立，使溶液由尖嘴（流液口）放出，弃去。（3）欲移取溶液润洗：移取溶液前，先用欲移取的溶液涮洗三次，方法是：用洗净并烘干的小烧杯倒出一部分欲移取的溶液，用移液管吸取溶液5-10ml，立即用右手食指按信管口（尽量勿使溶液回流，以免稀释），将管横过来，用两手的拇指及食指分别拿住移液管的两端，转动移液管并使溶液布满全管内壁，当溶液流至距上口2-3cm时，将管直立，使溶液由尖嘴（流液口）放出，弃去。 ．吸取溶液：用移液管自容量瓶中移取溶液时，右手拇指及中指拿管颈2，将移液管插入容量瓶内液面刻线以上的地方（后面二指依次靠拢中指）深度，不要插入太深，以免外壁沾带溶液过多；也不要插入1-2cm以下太浅，以免液面下降时吸空，左手拿洗耳球，排除空气后紧按在移液管口上，借吸力使液面慢慢上升，移液管应随容量瓶中液面的下降而下降，当管中液面上升至刻线以上时，迅速用右手食指堵住管口（食指最好是。潮而不湿）．调节液面：用滤纸擦去管尖外部的溶液，将移液管的流液口靠洁净小3度，管身保持直立，稍松食指，用拇指及中30烧杯内壁，小烧杯倾斜约指轻轻捻转管身，使液面缓慢下降，直到调定零点，按紧食指，使溶液不再流出，将移液管插入准备承接溶液的容器中。度，．放出溶液：承接溶液的器皿如是锥形瓶，应使锥形瓶倾斜成约430称液管或吸量管直立，管下紧靠锥形瓶内壁，放开食指，使溶液自由地再将移液管或吸量管移去。15秒，沿壁流下，流完后管尖端接触瓶内壁约残留在管末端的少量溶液，不
移液管的使用方法和注意事项 移液管是一种量出式仪器，只用来测量它所放出溶液的体积。它是一根中间有一膨大部分的细长玻璃管。其下端为尖嘴状，上端管颈处刻有一条标线，是所移取的准确体积的标志。常用的移液管有5，10，25，和50mL等规格。通常又把具有刻度的直形玻璃管称为吸量管。常用的吸量管有1，2，5，和10mL等规格。移液管和吸量管所移取的体积通常可准确到0.01mL。 1、使用前：使用移液管，首先要看一下移液管标记、准确度等级、刻度标线位置等。使用移液管前，应先用铬酸洗液润洗，以除去管内壁的油污。然后用自来水冲洗残留的洗液，再用蒸馏水洗净。洗净后的移液管内壁应不挂水珠。移取溶液前，应先用滤纸将移液管末端内外的水吸干，然后用欲移取的溶液涮洗管壁2至3次，以确保所移取溶液的浓度不变。 2、吸液：用右手的拇指和中指捏住移液管的上端，将管的下口插入欲吸取的溶液中，插入不要太浅或太深，一般为10～20mm处，太浅会产生吸空，把溶液吸到洗耳球内弄脏溶液，太深又会在管外沾附溶液过多。左手拿洗耳球，先把球中空气压出，再将球的尖嘴接在移液管上口，慢慢松开压扁的洗耳球使溶液吸入管内，先吸入该管容量的1/3左右，用右手的食指按住管口，取出，横持，并转动管子使溶液接触到刻度以上部位，以置换内壁的水分，然后将溶液从管的下口放出并弃去，如此用反复洗3次后，即可吸取溶液至刻度以上，立即用
右手的食指按住管口。 3、调节液面：将移液管向上提升离开液面，管的末端仍靠在盛溶液器皿的内壁上，管身保持直立，略为放松食指（有时可微微转动吸管）使管内溶液慢慢从下口流出，直至溶液的弯月面底部与标线相切为止，立即用食指压紧管口。将尖端的液滴靠壁去掉，移出移液管，插入承接溶液的器皿中。 4、放出溶液：承接溶液的器皿如是锥形瓶，应使锥形瓶倾斜30°，移液管直立，管下端紧靠锥形瓶内壁，稍松开食指，让溶液沿瓶壁慢慢流下，全部溶液流完后需等15s后再拿出移液管，以便使附着在管壁的部分溶液得以流出。如果移液管未标明“吹”字，则残留在管尖末端内的溶液不可吹出，因为移液管所标定的量出容积中并未包括这部分残留溶液。
移液管的使用与洗涤 自来水的洗涤：把用洗液洗过的移液管置于自来水龙头下，打开水阀，使水从移液管上口流入，待水全部充满移液管下部及部分充满移液管的球部时，用食指按住移液管的上口，将管横过来，用两手的拇指及食指分别拿住移液管的两端，转动移液管，并使水布满全管的内壁，当溶液流至距上口2－3厘米时，将管直立，使水由尖嘴放出，弃去。用自来水将移液管洗涤3遍。 3．去离子水的洗涤：同自来水的洗涤，同样要洗涤3遍。之后用滤纸将移液管下端内外的水吸去。4．用所取溶液的润洗：在用移液管移取溶液之前，必须用所移取的溶液润洗3次。用一个干净并干燥的小烧杯取一定量的溶液，将溶液吸入刚至移液管的球部，立即用食指按住管口(尽量勿使溶液回流，以免稀释)，将管横过来，用两手的拇指及食指分别拿住移液管的两端，转动移液管，并使水布满全管的内壁，当溶液流至距上口2－3厘米时，将管直立，使水由尖嘴放出，弃去。使用1．取液：右手拇指及中指拿住管颈标线以上的地方(后面二指依次靠拢中指)，把移液管的尖端伸入要移取的的液体中，左手拿洗耳球，排出空气后将其尖端紧按在移液管口上，缓慢松开左手，借吸力使液面慢慢上升，移液管的尖端应随容器中液面降低而下降。当管中液面上升至标线以上时，迅速拿走洗耳球，以右手食指按住管口(食指最好要潮而不湿)，用滤纸拭干管颈下端外壁的溶液，将移液管的下端
靠着容器的内壁，左手拿容器，使其倾斜30。稍微放松食指，用拇指及中指轻轻转动移液管，使液面平稳下降，直到液面弯月面与标线相切，即按紧食指，使液体不再流出。2．放液：将移液管移入准备接受溶液的容器，使其下端接触倾斜的器壁，放松食指令液体自由流出。这时应使容器倾斜而使移液管直立。待液体不再流出时，还要等待15s后，再把移液管拿开。此时移液管的尖端还会剩余少量溶液，因原来在标定移液管的体积时，并未把这部分体积计算在内，所以不要用外力使这点溶液进入接受仪器。
吸管（移液管、吸量管）的使用方法吸管是用来准确移取一定体积液体的玻璃量器。 1、分类 吸管分单标线吸管（移液管）和分度吸管（吸量管）两类，见图 10。 图 10 吸管图 11 放出溶液操作 单标线吸管，用来准确移取一定体积的溶液。吸管上部刻有一标线，此标线是按放出液体的体积来刻度的。常见的单标线吸管有5mL、10mL、25mL、50mL等规格。分度吸管是带有分刻度的移液管，用于准确移取所需不同体积的液体。单标线吸管标线部分管直径较小，准确度较高；分度吸管读数的刻度部分管直径较大，准确度稍差，因此当量取整数体积的溶液时，常用相应大小的单标线吸管而不用分度吸管。分度吸管在仪器分析中配制系列溶液时应用较多。 2、吸管的洗涤 洗涤前要检查吸管的上口和排液嘴，必须完整无损。吸管一般先用自来水冲洗，然后用铬酸洗液洗涤，让洗液布满全管，停放1～2min，洗液放回原瓶。用洗液洗涤后，沥尽洗液，用自来水充分冲洗，再用蒸馏水洗3次。洗好的吸管必须达到内壁与外壁的下部完全不挂水珠，将其放在干净的吸管架上。 3、吸管的操作 移取溶液前，先吹尽管尖残留的水，再用滤纸将吸管尖内、外的水擦去，然后移取待取溶液洗涤3次，以确保所移取的操作溶液浓度不变。注意勿使溶液回流，以免稀释及玷污溶液。 移取待取溶液时，将吸管尖插入液面下1～2cm。吸管尖不应伸入液面太深，以免管外壁粘附过多的溶液；也不应伸入太少，否则液面下降后吸空。当管内液面借洗耳球的吸力而慢慢上升时，吸管尖应随着容器中液面的下降而下降。 当管内液面升高到刻度以上时，移去洗耳球，迅速用右手食指堵住管口（食指最好是潮而不湿），将管上提，离开液面。稍松右手食指（使食指的压力减小，注意不要离开管口），用右手拇指及中指轻轻捻转管身，使液面缓慢而平稳地下降，直到溶液弯液面的最低点与刻度上边缘相切，视线与刻度上边缘在同一水平面上，立即停止捻动并用食指按紧管口，保持容器内壁与吸管口端接触，以除去吸附于吸管口端的液滴。取出吸管，立即插入承接溶液的器皿中，使容器倾斜而管直立，松开食指，让管内溶液自由地顺壁流下，最后停靠30秒。
移液器使用方法与注意事项 1. 设定移液体积 从大量程调节至小量程为正常调节方法，逆时针旋转刻度即可； 从小量程调节至大量程时，应先调至超过设定体积刻度，再回调至设定体积，这样可以保证移液器的精确度。 2. 装配移液枪头 将移液枪垂直插入吸头，左右旋转半圈，上紧即可。 （注意：用移液器撞击吸头的方法是非常不可取的，长期这样操作回导致移液器的零件因撞击而松散，严重会导致调节刻度的旋钮卡住。） 3. 吸液及放液 垂直吸液； 吸头尖端浸入液面3mm以下，吸液前枪头先在液体中预润洗2-3次确保移液的精度和准度（因为吸头内壁会残留一层”液膜”，造成排液量偏小而产生误差）； 慢吸慢放，以防突然松开溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气； 放液时如果量很小则应吸头尖端可靠容器内壁。 （使用时要检查是否有漏液现象。方法是吸取液体后悬空垂直放置几秒中，看看液面是否下降。如果漏液，则检查吸液嘴是否匹配和弹簧活塞是否正常。） 4. 浓度和粘度大的液体，会产生误差，为消除其误差的补偿量，可由试验确定，补偿量可用调 节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。（可采用反向移液技术移取高粘度液体） 4．吸有液体的移液枪不应平放，枪头内的液体很容易污染枪内部而可能导致枪的弹簧生锈 5．移液枪在每次实验后应将刻度调至最大，让弹簧回复原型以延长移液枪的使用寿命 6. 移液枪校正 可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法，来校正取液器，1mL 蒸馏水20℃时重0.9982g. 7.移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体（如浓酸、浓碱、有机物等）。 8. 严禁使用移液器吹打混匀液体。 9. 不要用大量程的移液器移取小体积的液体，以免影响准确度； 同时，如果需要移取量程范围以外较大量的液体，请使用移液管进行操作。 10.如液体不小心进入活塞室应及时清除污染物； 定期清洁移液枪外壁，可以用95%酒精或60%的异丙醇，再用蒸馏水擦拭，自然晾干。
滴定管、容量瓶、移液管、刻度吸管使用的标准操作规程 一、目的：制定滴定管、容量瓶、移液管、刻度吸管的使用方法，确保测量结果的准确性。 二、适用范围：适用于定量分析中所需的滴定管、容量瓶、移液管、刻度吸管的使用。 三、责任者：质量检验人员。 四、正文： 1 容量仪器的使用方法很重要。使用方法不正确，即使很准确的容量仪器，也会得到不正确的测量结果。 2在容量分析中，用来准确测量溶液体积的有滴定管、移液管、刻度吸管和容量 瓶，仪器上标有温度、容量和刻度。 3滴定管的使用方法： 滴定管是在滴定时用来测定自管内流出溶液的体积。它是具有准确刻度的细长 玻璃管及开关组成。 在容量分析滴定时，若消耗滴定液在 25ml 以上可选用 50ml 滴定管，10ml 以 上者可用 25ml 滴定管，在 10ml 以下宜用 10ml 或 10ml 以下滴定管。根据消耗量 多少来择一支适当大小滴定管，以减少滴定时体积测量的误差。 4滴定管的种类：酸式滴定管、碱式滴定管、自动滴定装置。 5使用前的准备： 在装溶液前，须将滴定管洗净，使水自然沥干（内壁不挂水珠），先用少量滴 定液荡洗三次（每次约 5~10ml），除去残留在管壁和下端尖内的水，以防装入溶液被 水稀释。 5.2 滴定液最好从贮液瓶中直接倒入滴定管，尽量避免用另一器皿传递，以免滴定 液浓度改变或受污染。 5.3 滴定液装入滴定管应该超过标准刻度零以上，滴定管尖端的气泡必须排除。再
调整溶液的液面至刻度零处，即可进行滴定。在滴定管上扣一个 10ml 成 5ml 小烧杯。 以减少溶液挥发、污染。 6 注意事项： 6.1 滴定管在装满溶液后，管外壁的溶液要擦干。滴定时，避免手紧握装 有溶液部分的管壁。 6.2 每次滴定最好从刻度零开始，以使每次测定结果能抵消滴定管的刻度误差。 6.3 滴定时液体的滴入速度，每秒钟放 3~4 滴为宜，滴定将到终点时，滴定要更慢些。 6.4 最妥善的使用方法必须与校正滴定管采用同样的操作方法。 7 容量瓶（量瓶）的使用法： 7.1 容量瓶主要用来把一定量的溶液（或固体溶解）稀释到一定体积，常见的容量瓶容积在 10、25、50、100、200、250、500、1000ml。 7.2 在把溶液装入瓶内时，必须注意弯月面最低处要恰与瓶颈上的刻度相 切，观察时眼睛位置也应与液面和刻度在同水平面上，否则会引起测量 体积不准确。容量瓶有无色、棕色两种，应注意合理选择使用。 7.3 容量瓶是用来精密配制一定体积的溶液的，配好后的溶液如需保存， 应转移到试剂瓶中，不要用于贮存溶液，其空的容量瓶也不应在烘箱中 烘烤。 8 移液管的使用法： 8.1 常用移液管有 1、2、5、10、20、25、50 及 100ml。 8.2 先将管洗净，自然沥干，并且取待量的溶液少许荡洗 2 次，然后以右手拇指及中指拿住管径标线以上的地方，将移液管插入供试品溶液面下约为1cm，这时，左手拿吸耳球轻轻将溶液吸入，眼睛注意正在上吸的液面的位置，移液管应随容器内液面下降而下降，至液面上升到刻度标线以上时，迅速用右手食指堵住塞口。 8.3 取出移液管，用滤纸条拭干移液管下端外壁，并使与地面垂直，稍微松开右手食指，使液体缓缓下降，此时视线应平视标线，直到弯月面与标线相切，立即按紧食指，使液体不再流出，并使出口尖端接触容器外壁，以除去尖端外残留溶液。 8.4 再将移液管移入准备接受溶液的容器中，使其出口尖端接触器壁，使容器微斜，而使移液管直立，然后放松右手食指，使溶液自由地顺壁流下。待全部流尽后，一般等 15 秒钟拿出，此时移液管尖端仍残留一滴液体，不可吹出。
移液管和移液器的使用 一、移液管的使用 1、移液管是生化实验中常用的量取液体的仪器。根据不同需求，分为不同刻度，如10ml、5ml、2ml、0.5ml、0.1ml等几种。首先根据所要量取溶液的体积选择与其相近刻度的移液管（注：移液管体积一定要大于或等于所要量取的体积） 2、观察移液管刻度数字的排布，注意观察刻度是由上到下还是由下到上，找到0刻度值。 3、一手持吸耳球，另一手持移液管。首先将移液管插入液面中约1厘米左右，先捏吸耳球排出气体后堵上移液管上端口，缓慢放松吸耳球，观察液面上升情况。当液面上升吸超过零刻度一定距离后，移去吸耳球，以持移液管手的食指指腹按住移液管上端口（切记不得使用拇指）。 4、持吸耳球手放下吸耳球，取滤纸将移液管外壁沾的液体擦拭干净；拿起试剂瓶，要求试剂瓶与台面成45°，移液管头接触瓶壁并垂直于台面，缓缓放松食指使液面缓慢下降调零。注意不可使液面下降过快。 5、移至另一容器中时，也要求一手持容器，容器与台面成45°，移液管头接触壁且垂直台面，放松食指放出所要移取的体积。 6、当要求将所选择的移液管的液体全部放出时，应注意观察移液管是否需要吹。一般1毫升（包括1毫升）以下的移液管，当需放出全部体积时，应使用吸耳球再吹出管内剩余溶液，这样才是所要求的体积。1毫升以上的移液管全部放出其溶液时，不需要吹，只需移液管头靠壁，全部放完后，停留约15秒，此时管头仍残留一部分溶液，成为死体积，如果吹入，则超过所要求的体积。 7、使用完毕后，应及时清洗移液管，注意避免混用，污染试剂。 二、移液器的使用 1、吸液：根据需要吸取的试剂量选择不同规格的移液器；调准加样器容量，用右手握住加样器外壳，套上移液器枪头，拇指置于推动按钮上，用拇指按下推
移液管的正确使用方法和步骤 1、使用前：使用移液管，首先要看一下移液管标记、准确度等级、刻度标线位置等。 2、吸液：用右手的拇指和中指捏住移液管的上端，将管的下口插入欲吸取的溶液中，插入不要太浅或太深，一般为10～20mm处，太浅会产生吸空，把溶液吸到洗耳球内弄脏溶液，太深又会在管外沾附溶液过多。左手拿洗耳球，接在管的上口把溶液慢慢吸入，先吸入该管容量的1/3左右，用右手的食指按住管口，取出，横持，并转动管子使溶液接触到刻度以上部位，以置换内壁的水分，然后将溶液从管的下口放出并弃去，如此用反复洗3次后，即可吸取溶液至刻度以上约5mm，立即用右手的食指按住管口。 3、调节液面：将移液管向上提升离开液面，用滤纸将沾在移液管外壁的液体擦掉，管的末端靠在盛溶液器皿的内壁上，管身保持垂直，略为放松食指（有时可微微转动吸管）使管内溶液慢慢从下口流出，直至溶液的弯月面底部与标线相切为止，立即用食指压紧管口。将尖端的液滴靠壁去掉，移出移液管，插入承接溶液的器皿中。 4、放出溶液：承接溶液的器皿如是锥形瓶，应使锥形瓶倾斜30°，移液管保持垂直，管下端紧靠锥形瓶内壁，松开食指，让溶液沿瓶壁慢慢流下，当液面降至排液头后管尖端接触瓶内壁约15秒后，再将移液管移去，残留在管末端的少量溶液，不可用外力强使其流出，因较准时已考虑了末端保留的溶液的体积。 备注： 1、移液管购入后都要进行清洗，清洗后进行校准，校准合格后才能使用；
2、看刻度时，应将移液管的刻度与眼睛平行，以最下面的弯月面为准； 3、标示为“吹”的移液管可将排液头内的残留液体吹出； 4、有些特殊移液管，如进口的AS级移液管一般标示等待时间（一般为5秒），该移液管等待时间结束后，将排液头在容器的内壁上向上滑动约10mm以除去残留液体。
移液器（移液枪）的使用与维护方法 一：量程的调节 在调节量程时，用拇指和食指旋转取液器上部的旋钮，如果要从大体积调为小体积，则按照正常的调节方法，逆时针旋转旋钮即可；但如果要从小体积调为大体积时，则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度，再回调至设定体积，这样可以保证量取的最高精确度。在该过程中，千万不要将按钮旋出量程，否则会卡住内部机械装臵而损坏了移液枪。 二：枪头（吸液嘴）的装配 在将枪头套上移液枪时，很多人会使劲地在枪头盒子上敲几下，这时错误的做法，因为这样会导致移液枪的内部配件（如弹簧）因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散，甚至会导致刻度调节旋钮卡住。正确的方法是将移液枪（器）垂直插入枪头中，稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。 三：移液的方法 移液之前，要保证移液器、枪头和液体处于相同温度。吸取液体时，四指并拢握住移液器上部，用拇指按住柱塞杆顶端的按钮，移液器保持竖直状态，将枪头插入液面下2－3毫米，缓慢松开按钮，吸上液体，并停留1～2秒钟（粘性大的溶液可加长停留时间），将吸头沿器壁滑出容器，排液时吸头接触倾斜的器壁。在吸液之前，可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴（尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时）。最后按下除吸头推杆，将吸头推入废物缸。
两种移液方法： （1）是前进移液法。用大拇指将按钮按下至第一停点，然后慢慢松开按钮回原点。接着将按钮按至第一停点排出液体，稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体。最后松开按钮。 （2）是反向移液法。此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体，其原理就是先吸入多于设臵量程的液体，转移液体的时候不用吹出残余的液体。先按下按钮至第二停点，慢慢松开按钮至原点。接着将按钮按至第一停点排出设臵好量程的液体，继续保持按住按钮位于第一停点（千万别再往下按），取下有残留液体的枪头，弃之。 移液器的正确放臵 使用完毕，可以将其竖直挂在移液枪架上，但要小心别掉下来。当移液器枪头里有液体时，切勿将移液器水平放臵或倒臵，以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。 移液器使用注意事项 (1)吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指，绝不允许突然松开，以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。 (2)为获得较高的精度，吸头需预先吸取一次样品溶液，然后再正式移液，因为吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时，吸头内壁会残留一层“液膜”，造成排液量偏小而产生误差。 (3)浓度和粘度大的液体，会产生误差，为消除其误差的补偿量，可由试验确定，补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。
移液器的正确操作和注意事项 很多初次使用移液器的人，总以为移液器的操作非常简单，其实不然。移液器的操作是科学试验的第一步，是一个非常基础的试验操作，但绝大多数人对移液器的操作都有偏见。 其实移液器的操作学问很多。不妨问问自己这么几个问题，就可以看出您的操作有无偏差。 1。您操作时是否发生过液体倒吸进入活塞？ 2。您移液时是否注意确保吸嘴外壁无液体？ 3。移液器使用完毕后，您是否将移液器量程调至最大值？ 4。移液器使用完毕后，您是否将移液器平放在桌面上？ 5。移液器在移粘稠液体和一般液体时，操作方式一样吗？ 6。移液器有多少种移液方式？ 移液器的使用与养护 设定容量：设定所需要的容量时应调整到大于设定容量值的 1/4 圈，再调至设定值，这样可排除机械间隙，使设定量值准确，即先将容量调节钮旋转超过目的容量值的 1/4 圈，再向下调至设定值。 吸液的操作 : 1、连接恰当的吸嘴； 2、按下控制钮至第一档； 3、将移液器吸嘴垂直进入液面下 1-6mm （视移液器容量大小而定）； 0.1-10ul 容量的移液器进入液面下1-2mm 2-200ul 容量的移液器进入液面下 2-3mm 1-5ml 容量的移液器进入液面下 3 -6mm 注：为使测量准确可将吸嘴预洗 3 次，即反复吸排液体 3 次。 4、使控制钮缓慢滑回原位； ---！！！ 5、移液器移出液面前略等待 1-3 秒； 1000ul 以下停顿 1 秒 5-10ml 停顿 2-3 秒 . 6、缓慢取出吸嘴，确保吸嘴外壁无液体。 排液的操作 : 1、将吸嘴以一定角度抵住容量内壁； 2、缓慢将控制钮按至第一档并等待约 1 － 3 秒； 3、将控制钮按至第二档过程中，吸嘴将剩余液体排净； 4、慢放控制钮； 5、按压弹射键弹射出吸嘴。 养护： 1、如液体不小心进入活塞室应及时清除污染物； 2、移液器使用完毕后，把移液器量程调至最大值，且将移液器垂直放置在移液器架上； 3、根据使用频率所有的移液器应定期用肥皂水清洗或用 60 ％的异丙醇消毒，再用双蒸水清洗并晾干； 4、避免放在温度较高处以防变形致漏液或不准； 5、发现问题及时找专业人员处理。
移液管、容量瓶的使用方法 一、移液管的使用方法 移液管为精密转移一定体积溶液时用的一种玻璃量器，形状是中部吹成圆柱形，圆柱形以上及以下为较细的管颈，下部的管颈拉尖，上部的管颈刻有一环状刻度。 1、使用时，应先将移液管洗净，自然沥干，并用待量取的溶液少许荡洗3次。 2、然后以右手拇指及中指捏住管颈标线以上的地方，将移液管插入待量取的溶液液面下约1cm，不应伸入太多，以免管尖外壁粘有溶液过多，也不应伸入太少，以免液面下降后而吸空。这时，左手拿洗耳球轻轻将溶液吸上，眼睛注意正在上升的液面位置，移液管应随容器内液面下降而下降，当液面上升到刻度标线以上约1cm时，迅速用右手食指堵住管口，取出移液管，用滤纸条拭干移液管下端外壁，并使与地面垂直，稍微松开右手食指，使液面缓缓下降，此时视线应平视标线，直到弯月面与标线相切，立即按紧食指，使液体不再流出，并使出口尖端接触容器外壁，以除去尖端外残留溶液。 3、再将移液管移入准备接受溶液的容器中，使其出口尖端接触器壁，使容器微倾斜，而使移液管直立，然后放松右手食指，使溶液自由地顺壁流下，待溶液停止流出后，一般等待15秒钟拿出。 4、注意此时移液管尖端仍残留有一滴液体，不可吹出。 二、容量瓶的使用方法 1、量瓶具有细长的颈和磨口玻塞（亦有塑料塞）的瓶子，塞与瓶应编号配套或用绳子相连接，以免弄错，在瓶颈上有环状刻度。量瓶是用来精密配制一定体积的溶液的。 2、向量瓶中加入溶液时，必须注意弯月面最低处要恰与瓶颈上的刻度相切，观察时眼睛位置也应与液面和刻度同水平面上，否则会引起测量体积不准确。量瓶有无色、棕色两种，应注意选用。 3、量瓶是用来精密配制一定体积的溶液的，配好后的溶液如需保存，应转移到试剂瓶中，不要用于贮存溶液。量瓶不能在烘箱中烘烤。 三、玻璃量器使用的注意事项 1、移液管及刻度吸管一定用洗耳球吸取溶液，不可用嘴吸取。 2、滴定管、量瓶、移液管及刻度吸管均不可用毛刷或其他粗糙物品擦洗内壁，以免造成内壁划痕，容量不准而损坏。每次用毕应及时用自来水冲洗，再用洗衣粉水洗涤（不能用毛刷刷洗），用自来水冲洗干净，再用纯化水冲洗3次，倒挂，自然沥干，不能在烘箱中烘烤。 3.需精密量取一定整数体积的溶液，应选用相应大小的移液管，不能用两个或多个移液管分取相加的方法来精密量取整数体积的溶液。 4、容量仪器（滴定管、量瓶、移液管及刻度吸管等）需校正后再使用，以确保测量体积的准确性。
移液器 装配移液器吸头 对于单道移液器，将移液器端垂直插入吸头，左右微微转动，上紧即可 特别提示用移液器反复撞击吸头来上紧的方法是非常不可取的，长期这样操作，会导致移液器中的零部件因强烈撞击而松散，严重的情况会导致调节刻度的旋钮卡住 吸液和放液 ● 垂直吸液 ● 吸头尖端需浸入液面3mm 以下 ● 慢吸慢放，控制好弹簧的伸缩速度 ● 放液时吸头尖端可靠容器内壁
反向吸液 ●正向吸液是指正常的吸液方式，操作时吸液可将按钮按到第一档吸液，释放按钮。放液时先按下第一档，打出大部分液体，再按下第二档，将余液排出。 ●反向吸液是指吸液时将按钮直接按到第二档再释放，这样会多吸入一些液体，打出液体时只要按到第一档即可。多吸入的液体可以补偿吸头内部的表面吸附，反向吸液方法适用于甘油等粘性液体。 ×吸液时，移液器倾斜吸液 v垂直吸液 ×吸头内含有未打出的液体时，移液器平置于桌面 v将移液器垂直挂在移液器支架上
其他注意事项： (1)吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指，绝不允许突然松开，以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。 (2)为获得较高的精度，吸头需预先吸取一次样品溶液，然后再正式移液，因为吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时，吸头内壁会残留一层“液膜”，造成排液量偏小而产生误差。 (3)浓度和粘度大的液体，会产生误差，为消除其误差的补偿量，可由试验确定，补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。 (4)可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法，来校正取液器，1ml蒸馏水20℃时重0.9982g。 (5)移液器未装吸头时，切莫移液。 所设量程在移液器量程范围内不要将按钮旋出量程，否则会卡住机械装置，损坏了移液器。 数字清清楚楚在显示窗中， 旋转到所需量程 (6)在设置量程时，请注意 (7)移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体（如浓酸、浓碱、有机物等）。 (8)严禁使用移液器吹打混匀液体。 (9)不要用大量程的移液器移取小体积的液体，以免影响准确度。同时，如果需要移取量程范围
移液管量取操作标准规范 1、使用前：使用移液管，首先要看一下移液管标记、准确度等级、刻度标线位置等。使用移液管前，应先用铬酸洗液润洗，以除去管内壁的油污。然后用自来水冲洗残留的洗液，再用蒸馏水洗净。洗净后的移液管内壁应不挂水珠。移取溶液前，应先用滤纸将移液管末端内外的水吸干，然后用欲移取的溶液涮洗管壁2至3次，以确保所移取溶液的浓度不变。 2、吸液：用右手的拇指和中指捏住移液管的上端，将管的下口插入欲吸取的溶液中，插入不要太浅或太深，一般为10～20mm处，太浅会产生吸空，把溶液吸到洗耳球内弄脏溶液，太深又会在管外沾附溶液过多。左手拿洗耳球，先把球中空气压出，再将球的尖嘴接在移液管上口，慢慢松开压扁的洗耳球使溶液吸入管内，先吸入该管容量的1/3左右，用右手的食指按住管口，取出，横持，并转动管子使溶液接触到刻度以上部位，以置换内壁的水分，然后将溶液从管的下口放出并弃去，如此用反复洗3次后，即可吸取溶液至刻度以上，立即用右手的食指按住管口。 3、调节液面：将移液管向上提升离开液面，管的末端仍靠在盛溶液器皿的内壁上，管身保持直立，略为放松食指（有时可微微转动吸管）使管内溶液慢慢从下口流出，直至溶液的弯月面底部与标线相切为止，立即用食指压紧管口。将尖端的液滴靠壁去掉，移出移液管，插入承接溶液的器皿中。 4、放出溶液：承接溶液的器皿如是锥形瓶，应使锥形瓶倾斜30°，移液管直立，管下端紧靠锥形瓶内壁，稍松开食指，让溶液沿瓶壁慢慢流下，全部溶液流完后需等15s后再拿出移液管，以便使附着在管壁的部分溶液得以流出。如果移液
管未标明“吹”字，则残留在管尖末端内的溶液不可吹出，因为移液管所标定的量出容积中并未包括这部分残留溶液。 备注： 1、移液管提出液面后，应用滤纸将沾在移液管外壁的液体擦掉； 2、看刻度时，应将移液管的刻度与眼睛平行，以最下面的弯月面为准。 3、移液管的正确使用，吹与不吹。 移液管、刻度吸管一般标有：“快”、“A"、“B”、“吹”四种符号，写“快”或者“B"的表示：你看到液体放完，再等三秒钟，转移的液体量就达到标明的液体体积了。与“快”相对的，是写着“A”的管子：这种管子一般都很贵，精确度高些，等看到液体转移放完之后，需要再等待15秒钟才能让移液管离开容器壁。“吹”字意思是:等放液结束，需要用洗耳球把移液管尖端残存的液柱吹到容器里，才算是达到目标体积。这段液柱一般可达0.1 - 0.3毫升。“A”管甚少有带“吹”的——带“吹”的一般都是“B”或“快”的管子。 2、洗耳球使用 洗耳球，一种橡胶质地，下面是球形，上面是管状的仪器，用于快速大量吹出风来，一般用于吹走怕湿物体上的灰尘，例如清除键盘、电路板上的灰尘、在实验室洗耳球还可以把密闭容器里的粉末状物质吹散。
移液器的种类和使用 准确的分析方法对于生物化学实验是极为重要的，在各种生物化学分析技术中，首先要熟练掌握的就是准 确的移液技术。为此要用到各种形式的移液管，其中有一些是学生们在化学实验中未用过而在生化实验中 是常用的。 1 滴管 使用方便，可用于半定量移液，其移液量为1mL～5mL，常用2mL，可换不同大小的滴头。滴管有长、短 两种，新出的一种带刻度和缓冲泡的滴管，可以比普通滴管更准确地移液，并防止液体吸入滴头。 2 移液管(吸管) 吸管使用前应洗至内壁不挂水珠，1mL 以上的吸管用吸管专用刷刷洗，0.1mL、0.2mL 和0.5mL的吸管可用洗涤剂浸泡，必要时可以用超声清洗器清洗。由于铬酸洗液致癌，应尽量避免使用。若有大量成批的 吸管洗后冲洗，可使用冲洗桶，将吸管尖端向上置于桶内，用自来水多次冲洗后再用蒸馏水或无离子水冲 洗。 吸管分为两种，一种是无分度的，称为大肚吸管，精确度较高，其相对误差 A 级为0.7％~0.8％，B 级为1.5％~0.16％，液体自标线流至口端(留有残液)，A 级等待15s，B 级等待3s。另一种吸管为分度吸管， 管身为一粗细均匀的玻璃管，上面均匀刻有表示容积的分度线，其准确度低于胖肚吸管，相对误差 A 级为0.8％～0.2％，B 级为 1.6％～0.4％，A 级、B 级在吸管身上有A、B 字样，有”快”字则为快流式，有”吹”字则为吹出式，无”吹”字的吸管不可将管尖的残留液吹出。吸、放溶液前要用吸水纸擦拭管尖。 3 微量进样器 微量进样器常用作气相和液相色谱仪的进样器，在生化实验中主要是用作电泳实验的加样器，通 常可分为无存液和有存液两种。 (1)10μL 以下的极微量液体进样。 无存液微量进样器：进样器的不锈钢芯子直接通到针尖端处，不会出现存液。 (2)10μＬ～100μL 有存液微量进样器：不锈钢的针尖管部分是空管，进样器的柱塞不能到达，因而管内会 存有空气或液体，其使用注意事项是：①不可吸取浓碱溶液，以免腐蚀玻璃和不锈钢零件；②因为有存液， 所以吸液时要来回多拉几次，将针尖管内的气泡全部排尽；③针尖管内孔极小，使用后尤其是吸取过蛋白 质溶液后，必须立即清洗针尖管，防止堵塞。若遇针尖管堵塞，不可用火烧，只能用φ0.1mm 的不锈钢丝耐心串通；④进样器未润湿时不可来回干拉芯子，以免磨损而漏气；⑤若进样器内发黑，有不锈钢氧化物， 可用芯子蘸少量肥皂水，来回拉几次即可除之。 4 自动取液器 这种取液器在生化实验中大量地使用，它们主要用于多次重复的快速定量移液，可以只用一只手操作，十 分方便。移液的准确度(即容量误差)为±(0.5％～1.5％)，移液的精密度(即重复性误差)更小些，为≤0.5％。取液器可分为二种：一种是固定容量的，常用的有100μ L 等多种规格。每种取液器都有其专用的聚丙烯 塑料吸头，吸头通常是一次性使用，当然也可以超声清洗后重复使用，而且此种吸头还可以进行120℃高压灭菌；另一种是可调容量的取液器，常用的有200μＬ、500μL 和1000μL 等几种。 可调式自动取液器的操作方法是用拇指和食指旋转取液器上部的旋钮，使数字窗口出现所需容量体积的数 字，在取液器下端插上一个塑料吸头，并旋紧以保证气密，然后四指并拢握住取液器上部，用拇指按住柱 塞杆顶端的按钮，向下按到第一停点，将取液器的吸头插入待取的溶液中，缓慢松开按钮，吸上液体，并 停留1～2秒钟(粘性大的溶液可加长停留时间)，将吸头沿器壁滑出容器，用吸水纸擦去吸头表面可能附着
1、使用前：使用移液管，首先要看一下移液管标记、准确度等级、刻度标线位置等。 2、吸液：用右手的拇指和中指捏住移液管的上端，将管的下口插入欲吸取的溶液中，插入不要太浅或太深，一般为10～20mm处，太浅会产生吸空，把溶液吸到洗耳球内弄脏溶液，太深又会在管外沾附溶液过多。左手拿洗耳球，接在管的上口把溶液慢慢吸入，先吸入该管容量的1/3左右（注意：吸出的溶液不能流回原瓶，以防稀释溶液），用右手的食指按住管口，取出，横持，并转动管子使溶液接触到刻度以上部位，以置换内壁的水分，然后将溶液从管的下口放出并弃去，如此用反复洗3次后，即可吸取溶液至刻度以上约5mm，立即用右手的食指按住管口。注意在移动移液管时，应将移液管保持垂直，不能倾斜。 3、调节液面：将移液管向上提升离开液面，用滤纸将沾在移液管外壁的液体擦掉，管的末端靠在被吸溶液器皿的内壁上，被吸溶液的容器成45°移液管身保持垂直，略为放松食指（有时可微微转动吸管）使管内溶液慢慢从下口流出，直至溶液的弯月面底部与标线相切为止，立即用食指压紧管口。将尖端的液滴靠壁去掉，移出移液管，插入承接溶液的器皿中。 4、放出溶液：将移液管小心的移入承接溶液的容器内，将移液管直立，承接容器倾斜约30-45°角，移液管尖端紧靠容器内壁并让其垂直，放开食指，让溶液沿内壁自然流下，溶液下降至管尖时，再保持放液姿态停留15s后，再将移液管移去，残留在管末端的少量溶液，不可用外力强使其流出，因较准时已考虑了末端保留的溶液的体积。 若移液管管身标有“吹”字的，在溶液自然流下，流至尖端不流时，随即用洗耳球将残留溶液吹出。 5.原始数据记录移液管相关原始数据根据其准确度一般记录到小数点后两位。
移液管有各种形状，比较常见的像中部吹成圆柱形，圆柱形以上及以下为较细的管颈，下部的管颈拉尖，上部的管颈刻有一环状刻度。材质一般为玻璃，以刻度确定体积。标定对应体积的对应刻度时，采取的方法即称重法。而由于移液管多为精密转移一定体积溶液时使用，所以我们在使用的时候一定要掌握正确的方法。 1、使用前：应先将移液管洗净，自然沥干，并用待量取的溶液少许荡洗3次。 2、吸液：以右手拇指及中指捏住管颈标线以上的地方，将移液管插入供试品溶液液面下约1cm，不应伸入太多，以免管尖外壁粘有溶液过多，也不应伸入太少，以免液面下降后而吸空。左手拿橡皮吸球，一般用60ml洗耳球，轻轻将溶液吸上，眼睛注意正在上升的液面位置，移液管应随容器内液面下降而下降，当液面上升到刻度标线以上约1cm时，迅速用右手食指堵住管口，取出移液管。用滤纸条拭干移液管下端外壁，并使与地面垂直，稍微松开右手食指，使液面缓缓下降，此时视线应平视标线，直到弯月面与标线相切，立即按紧食指，使液体不再流出，并使出口尖端接触容器外壁，以除去尖端外残留溶液。
3、放液：小心取出移液管，放入接受容器中，在此过程中，不能让管中液体漏出，使管尖靠在接受容器的内壁上。保持移液管垂直而接受容器倾斜，抬起右手食指，让液体自由流出后，等待15秒左右，取出移液管。注意尖嘴处残留的少量液体不能用外力吹出，如果移液管上有注明“吹”字除外。 4、存放：如果每天都用，清洁完后选择一个稳定的架台，尖朝上存放。长期储存对于清洁的移液管，用带隔的抽屉底下垫有干净的塑料泡沫存放。 最后，我们再给大家简单总结一下要点：检查移液管的型号、状态、清洁度；如果有必要的话，用待取液体冲洗移液管；用吸耳球吸取溶液到刻度线以上；用吸水纸擦净移液管；调整弯月面的位置，保证没有视差；移去移液管最后一滴；放出液体；把移液管尖端抵住容器壁等待指定时间，移去外面的一滴，通过转动移液管体如果标有《Ex》，,不要吹出管内液体；清洗擦净移液管；正确存放移液管。 贝兰伯生物技术（杭州）有限公司是由教授级高工带队，博硕士及十几年生命科学领域的研发、销售团队构成，致力于研发、生产高品质实验室耗材、科研
移液器的使用方法及注意事项 一个完整的移液循环，包括吸头安装——容量设定——吸液放液——卸去吸头等步骤。每一个步骤都有需要遵循的操作规范。 1. 吸头安装 ●对于单道移液器，移液器末端垂直插入吸头，轻压左右微微转动即可上紧； ●对于多道移液器，移液器的第一道对准第一个吸头，倾斜插入，前后稍许摇动上紧即可。 ●不可反复撞击移液器来确保吸头气密性，长期以这种方式装配吸头，会导致移液器的零部件因强烈撞击而松散，甚至会导致调节刻度的旋钮卡住。 2. 容量设定 ●从大体积调节至小体积时，逆时针旋转至刻度即可；从 小体积调节至大体积时，可先顺时针调过设定体积，再回调至 设定体积，可保证最佳的精确度（见图）。 ●不可将调节旋钮旋出量程范围外，否则会损坏移液器内 机械装置。 3. 吸液和放液 ●吸液移液器按钮按至第一档，释放按钮，进行吸液。切记不能过快，否则液体进入吸 头过快会导致液体倒吸入移液器内部。 ●放液紧贴容器壁，先按到第一档，略作停顿，再按至第二档排除余液。 ●垂直吸液。 ●5ml和10ml的移液器，吸头需浸入液面5mm，慢吸液体，达到预定体积后，在液面下 停顿3秒，再离开液面。 ●吸液时缓慢松开控制器，否则液体进入吸头过快会导致液体倒吸入移液器内部。 ●吸取挥发液体时，需润洗吸头4-6次，让套筒室内的蒸汽饱和，可以避免产生漏液。 4. 移液器的正确放置 ●使用完毕，可以将其竖直挂在移液枪架上，但要小心别掉下来。当移液器枪头里有液体 时，切勿将移液器水平放置或倒置，以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。 ●如不使用，要把移液枪的量程调至最大值的刻度，使弹簧处于松弛状态以保护弹簧。 5. 常见的错误操作 1) 装配吸头时，反复撞击吸头，导致吸头难以脱卸，甚至损坏移液器。 2) 吸液时，移液器倾斜，导致移液不准确，同时液体容易进入移液器套柄。 3) 吸液时拇指迅速放开，这样会迫使液体形成湍流状态，液体会直接冲到移液器内部。 4) 直接按到第二档吸液(应该按照上述标准方法操作)。 5) 用大量程的移液器移取小体积样品(应该选择合适量程范围的移液器)。 6) 平放带有残余液体吸头的移液器(应将移液器挂在移液器架上)。