1.酶的改性：通过各种方法改进酶的催化特性的技术过程，主要包括酶分子修饰，酶固定
化，酶非水相催化和酶定向进化等。
2.比活力：酶纯度的一个指标，是指在特定条件下，单位质量（mg）蛋白质或RNA所具
有的酶活力单位数。
3.酶活力单位：在特定条件下（温度可采用25度，pH等条件均采用最合适条件），每1min
催化1umol的底物转化为产物的酶量定义为1个酶活力单位，这个单位称为国际单位IU。
卡特（kat）：在特定条件下，每秒催化1mol底物转化为产物的酶量定义为1卡特（kat）1kat=1mol/s=60mol/min=60*10^6umol/min=6*10^7 IU
4.转换数：又称摩尔催化活性，是指每个酶分子每分钟催化底物转化的分子数。即每摩尔
酶每分钟催化底物转化为产物的摩尔数，是酶催化效率的一个指标。通常用每微摩尔的酶活力单位数表示/min。
5.组成型酶：有些酶在细胞中含量比较恒定，环境因素对这些酶的合成速率影响不大，这
类酶称为组成型酶，如DNA聚合酶，RNA聚合酶，糖酵解途径的各种酶等。
6.适应型酶(调节型酶)：有些酶在细胞中含量变化很大，其合成速率明显受到环境因素的
影响，这类酶称为适应性酶，如大肠杆菌β-半乳糖苷酶。
7.诱导作用：加入某些物质使酶的生物合成开始或加速进行的现象，称为酶生物合成的诱
导作用，简称为诱导作用。
8.分解代谢物阻遏作用：是指某些物质（主要是葡萄糖和其他容易利用的碳源等）经过分
解代谢产生的物质阻遏某些酶（主要是诱导酶）生物合成的现象。原理是是葡萄糖等分解放出能量，ATP增高，AMP降低，cAMP-CAP复合物浓度随之降低，从而cAMP-CAP 无法与启动基因有效结合，RNA聚合酶也无法结合。其实质是cAMP通过启动基因对酶生物合成进行调节控制。
9.培养基：指人工配制的用于细胞培养和发酵的各种营养物质的混合物。一般都含有碳源、
氮源、无机盐、生长因子和水等。根据不同细胞和用途，确定各种组分的种类和含量，并调节pH，以满足细胞生长繁殖和新陈代谢的需要。
10.凝胶层析：又称凝胶过滤，分子排阻层析，分子筛层析等，是指以各种多空凝胶为固定
相，利用流动相中所含各种组分的相对分子质量不同而达到物质分离的一种层析技术。
大分子物质直径大，不能进入凝胶微孔而从颗粒间隙快速漏出。较小的分子不断进入一个个颗粒的微孔，而移动速度较慢。操作分为装柱、上柱、洗脱等过程。
11.固定化酶：指固定在一定载体上并在一定的空间范围内进行催化反应的酶。可以是纯化
分离的酶，也可以是结合在菌体或菌体碎片上的酶或酶系。固定化酶既保持了酶的催化特性，又克服了游离酶的不足之处，具有提高酶的催化效率，增加稳定性，可反复或连续使用以及易于和反应产物分开等显著优点。
12.固定化细胞：固定化细胞是固定在载体上并在一定的空间范围内进行生命活动的含酶菌
体，利用菌体中的酶系进行催化反应，只能用于胞外酶等胞外产物的生产。是固定化酶的一种形式。
13.固定化原生质体：对数生长期细胞经去除细胞壁后，配成一定浓度原生质体，用包埋法
制成用于催化反应的原生质体称为固定化原生质体。一般用于胞内酶和氨基酸生产。14.酶的固定化：采用各种方法，将酶固定在水不溶性的载体上，制备成固定化酶的过程称
为酶的固定化。
15.酶反应器：用于酶进行催化反应的容器及其附属设备称为酶反应器。酶反应器有两种类
型: 一类是直接应用游离酶进行反应,即均相酶反应器，特点是结构简单,广泛应用于饮料食品工业。另一类是应用固定化酶进行的非均相酶反应器，可反复利用，但参数复杂，放大困难。
1.酶的分类
蛋白酶（氧化还原酶，转移酶，水解酶，裂合酶，异构酶，合成酶或连接酶）
核酸酶类：分子内催化R酶（自我剪切酶，自我剪接酶）。分子间催化R酶（RNA剪切酶，DNA剪切酶，多肽剪切酶，多糖剪切酶，氨基酸酯剪切酶，多功能酶）。
2.微生物细胞生长经历调整期，生长期，平衡期和衰退期四个阶段。
3.产酶微生物的特点：酶的产量高，容易培养和管理，产酶稳定性好，利于酶的分离纯化，
安全可靠无毒性。
4.调节溶氧的方法：调节通气量，调节氧的分压，调节气液接触时间，调节气液接触面积，
调节培养液的性质
5.莫诺德常数K s：比生长速率达到最大比生长速率一半时限制性基质的浓度（细胞生长
动力学）米氏常数Km：酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度Km是酶极为重要的动力学参数，其物理含义是指ES复合物的消失速度（k-1+k2）与形成速度（k1）之比。当PH、温度、离子强度不变时，Km是恒定的。
6.细胞破碎方法：
7.酶的提取方法：盐溶液提取，酸溶液提取，碱溶液提取，有机溶剂提取。
8.沉淀分离方法：盐析沉淀法，等电点沉淀法，有机溶剂沉淀法，复合沉淀法，选择性变
性沉淀法。
9.过滤的分类：粗滤>2um酵母霉菌，微滤0.2-2um细菌，超滤20A-0.2um病毒，反渗透
10.层析分离方法：吸附层析，分配层析，离子交换层析，凝胶层析，亲和层析，层析聚焦。
11.萃取分离方法：有机溶剂萃取，双水相萃取，超临界萃取，反胶束萃取。
12.酶生物合成的模式4种：
生长偶联型（同步、中期），部分生长偶联型（延续），非生长偶联型（滞后）
同步合成型：是酶的生物合成与细胞生长同步进行的一种酶生物合成模式，属于生长偶联型。该合成型的酶，生物合成伴随细胞生长开始，在旺盛生长期大量合成，细胞进入平衡期后，酶合成停止。酶的合成可以诱导，但不受分解代谢物阻遏和反应产物阻遏。
当去除诱导物、细胞进入平衡期后，酶的合成立即停止，表明这类酶所对应的mRNA很不稳定。（低温）如米曲霉单宁酶合成延续合成型：酶的生物合成在细胞生长阶段开始，在进入平衡期后酶还可以延续合成一段时间的一种模式，属于该模式的可以是组成酶也可以是诱导酶。可受诱导，一般不受分解代谢物和产物阻遏。所对应的mRNA相当稳定。黑曲霉聚半乳糖醛酸酶合成中期合成型：酶在细胞生长一段时间后才开始，在细胞
生长进入平衡器=期后，酶的生长合成随之停止。酶的合成受产物的反馈阻遏或分解代谢物阻遏。所对应的mRNA是不稳定的。如枯草杆菌碱性磷酸酶合成滞后合成型：细胞在生长一段时间或进入平衡期后才开始生物合成大量积累酶，又称为非生长偶联型。
受分解代谢物的阻遏作用。（解除）所对应的mRNA稳定性高。黑曲霉酸性蛋白酶
13.酶反应器
1、搅拌式：带有搅拌器的罐式反应器，由反应罐搅拌器和保温装置组成；分BSTR游
固传质阻力小，结构简单造价低操作麻烦剪切力大、Feeding batch、CSTR固混合好但剪切力大2、填充床：固定化酶堆叠在反应器中催化反应，高效结构简单易于操作传质传热差-压力大-pH温度难以控制3、流化：流体流动使固定化酶悬浮翻动传质传热性能好，pH、温度控制及气体的供给比较容易-需要有较高强度动力消耗大，降低转化率；4、鼓泡式反应器：是利用从反应器底部通入的气体产生的大量气泡，在上升的过程中起到提供反应底物和混合两种作用的一类无搅拌装置反应器需要有气体5、游离膜反应器：酶催化和半透膜分离作用组合而成的反应器a酶可回收利用b产物可连续排出降低产物抑制作用c提高酶催化速度d浓差极化膜堵塞，清洗困难
14.固定化细胞发酵产酶特点：1、提高产酶率-固定化细胞使细胞密度较大使得生化反应加
速2、可以反复使用或连续使用较长时间，不易脱落可以半连续发酵反复使用多次，也可以高稀释率连续长时间发酵3、基因工程菌的质粒稳定不易丢失，有载体保护使质粒结构稳定性和分裂稳定性都显著提高4、发酵稳定性好，载体保护使得对温度、pH适应范围变宽，对蛋白酶和酶抑制剂的耐受能力增强，易于控制，便于自动化生产5、缩短发酵周期提高设备利用率，节省了第二批次的细胞预培养耗时6、固定化细胞不溶于水，产品容易分离纯化7、只适用于胞外酶等胞外产物的生产，胞内产物分离纯化更为困难15.酶固定化方法：1吸附法：利用各种固体吸附剂将酶或含酶菌体吸附在其表面，而使得
酶固定化的方法，常用吸附剂有活性炭、氧化铝、硅藻土、多孔陶瓷、多空玻璃、硅胶、
羟基磷灰石等。2包埋法：将酶或含酶菌体包埋在各种多空载体中，使酶固定化的方法，载体多为琼脂、琼脂糖、海藻酸钠、角叉菜胶、明胶、聚丙烯酰胺、光胶联树脂、聚酰胺、火棉胶等。根据载体材料和方法分为凝胶包埋法，半透膜包埋法。3结合法：选择适合的载体，使之通过共价键或离子键与酶结合在一起固定的方法。根据化学键的不同分为离子键结合法和共价键结合法。4交联法：借助双功能试剂使酶分子之间发生交联作用，制成网状结构的固定化酶方法。常用试剂戊二醛、己二胺、顺丁烯二酸酐、双偶氮苯等。5、热处理法：将酶细胞在一定温度下加热处理一段时间，使酶固定在菌体内，而制备得到固定化菌体的方法。适用于热稳定较好的酶的固定化。
16.基因随机突变的方法：
易错PCR：1、提高镁离子浓度、添加一定浓度的锰离子2、改变四种底物（dAMP，dTMP，dCMP，dGMP）的浓度比，扩增时增加碱基配对错误频率
17.提高酶产量措施：1、选用或者选育出优良的产酶细菌2、保证正常的发酵工艺条件并根
据需要加以调节控制，如氧气、温度，培养基组分3、添加诱导物对于诱导酶的发酵生产，在发酵过程中的某个适宜的时机，可以显著提高酶的产量。a.酶的作用底物-乳糖-大肠杆菌β-半乳糖苷酶高3000倍b.酶的反应产物-纤维二糖-纤维素酶c.酶作用底物类似物-异丙基-β-半乳糖苷(IPTG)-β半乳糖苷酶较乳糖高几百倍4、控制阻遏物浓度
产物阻遏①限制产物浓度-硫胺素缺陷型突变株限制硫胺素浓度使硫胺素磷酸焦磷酸化酶合成高1000倍②添加末端产物类似物-添加组氨酸类似物2-噻唑丙氨酸使丙氨酸合成途径的10种酶高30倍b.分解代谢物阻遏①补料、流加碳源控制碳源在较低浓度②添加一定量的cAMP 5、添加非离子型表面活性剂增加细胞的透过性，有利于胞外酶的分泌-加1%吐温(Tween)纤维素酶高1-20倍6、添加适宜的产酶促进剂，如植酸钙镁使霉菌蛋白酶高1-20倍
7、酶反应器的设计：
一、确定酶反应器的类型：主要从酶的应用形式、底物和产物理化性质等方面考虑，同时尽可能具有结构简单、操作方便、易于维护和清洗，可以适用于多种酶的催化反应、制作成本
和运行成本低等特点
1、如根据酶应用形式选择①游离酶a 、游离酶最常用搅拌式b 、有气体参加常用鼓泡式c 、价格较高酶使用膜反应器提高使用效率②固定化酶可以采用搅拌罐式，填充床、流、鼓泡式
二、确定反应器的制造材料
酶反应条件温和，酶反应器制造材料一般采用不锈钢
三、进行热量衡算
酶催化反应一般在30～70℃的常温条件下进行，所以热量衡算并不复杂。
温度的调节控制通常采用一定温度的热水通过夹套（或列管）加热或冷却，进行温度的调节控制，热量衡算是根据热水的温度和使用量计算。
对于某些耐高温的酶，例如高温淀粉酶，可以采用喷射式反应器，热量衡算时，根据所使用的水蒸气热焓和用量进行计算。
四、进行物料衡算
1、根据酶反应动力学特性，确定反应所需底物浓度、酶浓度、最适温度、最适pH 、激活剂浓度等
2、计算底物用量，对于反应器连续式根据产量P （kg ）、产物转化率Yp/s(%)、收得率R(%)计算：底物用量=P/(Yp/s*R)(kg)
3、计算反应液总体积 根据底物用量S(g)和底物浓度
[S](g/L)得反应液体积Vt=S/[S](L) 4、计算酶用量 根据酶浓度[E](U/L)和反应液体积Vt （L ）计算所需的酶量E=[E]*Vt(U) 5、计算反应器数目 一般采用2个以上反应器，反应器的有效体积一般为反应器总体积的70%-80%。
分批式：24t V V N 0d ?=
N 为反应器数目（个）；
Vd 为每天获得的反应液总体积（L/d ）；
V0为单个反应器的有效体积（L ）；
t 为底物在反应器中的停留时间（h ） 连续式：（个）V t V N 0h ?=
N 为反应器数目（个）；
V h 为每小时获得的反应液总体积（L/h ）；
V 0为单个反应器的有效体积（L ）；
t 为底物在反应器中的停留时间（h ）
16.
工程制图试题答案（1） 一、填空题（20分） 1、投影法一般可分为两大类，一类叫做中心投影法，一类叫做平行投影法。 2、基本几何体按表面特征分为平面立体，曲面立体两种。 3、一个标注完整的尺寸由尺寸界线，尺寸线和尺寸数字三要素组成。 4、螺纹的画图规定，外螺纹的大经用粗实线线绘制，小径用细实线线绘制；内螺纹的大经用细实线线绘制，小径用粗实线线绘制；内、外螺纹连接时，旋合部分按外螺纹的画法绘制。 5、装配图的内容包括①一组图形，②必要的尺寸，③技术要求，④标题栏，零件序号和明细栏。 6、城市给水工程包括①一、二级泵房，②输水管网，③给水处理厂， ④配水管网。 二、根据立体图画三视图（10分） 参考答案： 三、已知水平线AB在H面上方20mm处，求作它的其余两面投影（10分） 四、补画第三试图（10分） 五、标注尺寸（尺寸数字从图中量取，取整数）（20分） 六、根据物体的三视图，画出正等轴测图（10分） 七、将下列主视图改画全剖试图（20分） 工程制图试题答案（2） 二、填空题（20分） 1、三视图之间的位置关系：以主视图为基准，俯视图在它的正下方，左视图在它的正右方。三视图的“三等”关系：主、俯视图长对正，主、左视 图高平齐，左、俯视图宽相等。 2、正等轴测图的轴间角为1200，轴向变形系数为0.82为了计算方便，一般用1 代替。 3、按剖开机件的范围不同，剖视图可分为全剖视图，半剖视图和局部剖视图。 4、普通螺纹M16×1.5LH-5g6g-S的公称直径为16 mm，旋向为右（左、右）；导程为 1.5 。 5、零件的内容包括①一组视图，②完整的尺寸，③技术要求，④标题栏。 6、暖通空调工程图包括①室内采暖平面图、系统图，②空调通风平面图、系统图， ③设备布置图和祥图。 二、根据立体图画三视图（10分） 三、已知水平线AB与铅垂线MN相交于M点，试完成两直线的三面投影图（10分） 四、补画第三试图（10分） 五、标注尺寸（尺寸数字从图中量取，取整数）（20分） 六、根据物体的三视图，画出正等轴测图（10分）
第一章 1.酶工程：是生物工程的重要组成部分，是随着酶学研究迅速发展，特别是酶的推广应用，使酶学和工程学相互渗透、结合、发展而成的一门新的技术科学，是酶学、微生物学的基本原理与化学工程有机结合而产生的边缘科学技术。 2.化学酶工程：指自然酶、化学修饰酶、固定化酶及化学人工酶的研究和应用 3.生物酶工程：是酶学和以基因重组技术为主的现代分子生物学技术结合的产物，亦称高级酶工程。 4.酶工程的组成部分？ 答：酶工程主要指自然酶和工程酶（经化学修饰、基因工程、蛋白质工程改造的酶）在国民经济各个领域中的应用。内容包括：酶的产生；酶的分离纯化；酶的改造；生物反应器。5.酶的结构特点？ 答：虽然少数有催化活性的RNA分子已经鉴定，但几乎所有的酶都是蛋白质，因而酶必然具有蛋白质四级结构形式。其中一级结构是指具有一定氨基酸顺序的多肽链的共价骨架；二级结构为在一级结构中相近的氨基酸残基间由氢键的相互作用而形成的带有螺旋、折叠、转角、卷曲等细微结构；三级结构系在二级结构基础上进一步进行分子盘区以形成包括主侧链的专一性三维排列；四级结构是指低聚蛋白中各折叠多肽链在空间的专一性三维排列。具有低聚蛋白结构的酶（寡聚酶）必须具有正确的四级结构才有活性。具有活性的酶都是球蛋白，即被广泛折叠、结构紧密的多肽链，其氨基酸亲水基团在外表，而疏水基团向内。 6.酶活性中心：是酶结合底物和将底物转化为产物的区域，通常是整个酶分子中相当小的一部分，它是由在线性多肽链中可能相隔很远的氨基酸残基形成的三维实体。 7.酶作用机制有哪几种学说？ 答：锁和钥匙模型、诱导契合模型 8.酶催化活力的影响因素？ 答：底物浓度、酶浓度、温度、pH等。 9.酶的分离纯化的初步分离纯化的步骤？ 答：（一）材料的选择和细胞抽提液的制备 1.材料的选择：目的蛋白含量要高，而且容易获得 2.细胞破碎方法及细胞抽提液的制备。为了确保可溶性细胞成分全部抽提出来，应当使用类似于生理条件下的缓冲液。动物组织和器官要尽可能除去结缔组织和脂肪、切碎后放人捣碎机中。完全破碎酵母和细菌细胞。 3.膜蛋白的释放:膜蛋白存在于细胞膜或有关细胞器的膜上。按其所在位置大体可分为外周 蛋白和固有蛋白两种类型 4.胞外酶的分离:胞外酶是在微生物发酵时分泌到发酵液中的。发酵后可通过离心或过滤将菌体从发酵液中分离弃去，所得发酵清液通常要适当浓缩，然后再作进一步纯化。目前常用的浓缩方法是超滤法。 （二）蛋白质的浓缩和脱盐 浓缩方法主要有：沉淀法、吸附法、干胶吸附法、渗透浓缩法、超滤浓缩法
装 订 线 内 不 得 答 题 自 觉 遵 守 考 试 规 则，诚 信 考 试，绝 不 作 弊
2.剖面图的剖切位置符号应于下列哪一个图样中绘出( )。 A.立面图 B.剖面图 C.底层平面图 D.标准层平面图 3．立面图中的室外地坪线用什么线型绘制( )。 A.1.4b的粗实线 B.1.2b的粗实线 C. l.lb粗实线 D.O.5b中实线4．基础图通常包括基础平面图和什么图( )。 A.基础立面图 B.基础剖面图 C.基础断面因 D.基础详图 5．在一五层高的住宅建筑中,下列哪一个楼梯平面图没有折断线( )。 A.底层楼梯平面图 B.二层楼梯平面图 C. 标准楼梯平面图 D.顶层楼梯平面图 6.剖切位置线的长度约为多少mm( )。 A.4-6 B.6-10 C.6 - 8 D. 8 - 10 7.若采用1:10比例绘制,3600mm长的线应画成多少mm长的线( )。 A.3.6 B.36 C.360 D.3600 8.线型加深时,一般的顺序是( )。 A.先曲后直 B.先虚后实 C.先直后曲 D.以上都不对 9.下列连接方式中,不属于钢结构连接方式的有( )。 A.焊接 B.预理件连接 c.螺栓连接 D.铆钉连接 10.当焊缝分布不规则或为断续时,在标注焊缝代号的同时,宜在焊缝处加粗线,该粗线表示( )。 A.正面焊缝 B.背面焊缝 C.正背面均有焊缝 D.以上都不对 三、绘图题（14分） 根据楼梯剖视图，完成下页的楼梯底层平面图及二层平面图，要求尺寸、标高及标注完整。
装 订 线 内 不 得 答 题 自 觉 遵 守 考 试 规 则，诚 信 考 试，绝 不 作 弊
试题： 01．填空题： 0102A01.一个完整的尺寸包括、、和。 0102A02.可见轮廓线用线绘制；不可见轮廓线用线绘制。 0102A03.轴线(中心线)用线绘制；断裂边界线用线绘制。 0102A04.比例是指之比。 0102A05.机件的真实大小应以依据，与图形的大小及绘图的准确度无关。0102A06.绘制圆的对称中心线时，圆心应是相交。 0102A07.整圆或大于半圆的圆弧标注尺寸，并在数字前面加注符号。0102A08.圆弧半径尺寸应标注在投影上。 0102A09.等于半圆的圆弧标注尺寸，符号是。 0102A10.平面图形的尺寸有、、。 0102A11.假想轮廓线用线绘用。 0102A12.放大比例是指。 0102A13.缩小比例是指。 0102A14.原值比例是指。 0102A15.斜度是指。 0102A16.锥度是指。 0102A17.丁字尺工作面是用来画线。 0102A18.斜度符号是，锥度符号是。 0102A19.圆弧连接是把和另一线段(直线或圆弧) 。 0102A20.平面图形的线段分为、、。 0102A21.具有定形尺寸而无定位尺寸的线段叫。 0102A22.图样中书写的文字、数字、字母都必须做到、、 、。 0102A23.汉字应采用，并写成。 0102A24.在同一图样中，同类相应线的宽度。 0102A25.尺寸线终端形式有和。 0102A26.尺寸界线表示尺寸的、位置。 0102A27.EQA的含义是。 0102A28.C2的含义是。 0102A29.尺寸线用绘制，不能用代替。 0102A30.标注尺寸数字时，垂直尺寸数字字头，水平尺寸数字字头。
共三套 《酶工程》试题一： 一、是非题（每题1分，共10分） 1、酶是具有生物催化特性的特殊蛋白质。（） 2、酶的分类与命名的基础是酶的专一性。（） 3、酶活力是指在一定条件下酶所催化的反应速度，反应速度越大，意味着酶活力越高。（） 4、液体深层发酵是目前酶发酵生产的主要方式。（） 5、培养基中的碳源，其唯一作用是能够向细胞提供碳素化合物的营养物质。（） 6、膜分离过程中，膜的作用是选择性地让小于其孔径的物质颗粒成分或分子通过，而把大于其孔径的颗粒截留。（） 7、在酶与底物、酶与竞争性抑制剂、酶与辅酶之间都是互配的分子对，在酶的亲和层析分离中，可把分子对中的任何一方作为固定相。（） 8、角叉菜胶也是一种凝胶，在酶工程中常用于凝胶层析分离纯化酶。（） 9、α－淀粉酶在一定条件下可使淀粉液化，但不称为糊精化酶。（） 10、酶法产生饴糖使用α－淀粉酶和葡萄糖异构酶协同作用。（） 二、填空题（每空1分，共28分） 1、日本称为“酵素”的东西，中文称为__________,英文则为__________,是库尼（Kuhne）于1878年首先使用的。其实它存在于生物体的__________与__________。 2、1926年，萨姆纳（Sumner）首先制得__________酶结晶，并指出__________是蛋白质。他因这一杰出贡献，获1947年度诺贝尔化学奖。
3、目前我国广泛使用的高产糖比酶优良菌株菌号为__________,高产液化酶优良菌株菌号为___________。在微生物分类上，前者属于__________菌，后者属于__________菌。 4、1960年，查柯柏（Jacob）和莫洛德（Monod）提出了操纵子学说，认为DNA分子中，与酶生物合成有关的基因有四种，即操纵基因、调节基因、__________基因和__________基因。 5、1961年，国际酶委会规定的酶活力单位为：在特定的条件下（25oC，PH及底物浓度为最适宜）__________,催化__________的底物转化为产物的__________为一个国际单位，即1IU。 6、酶分子修饰的主要目的是改进酶的性能，即提高酶的__________、减少__________，增加__________。 7、酶的生产方法有___________，___________和____________。 8、借助__________使__________发生交联作用，制成网状结构的固定化酶的方法称为交联法。 9、酶的分离纯化方法中，根据目的酶与杂质分子大小差别有__________法，__________法和__________法三种。 10、由于各种分子形成结晶条件的不同，也由于变性的蛋白质和酶不能形成结晶，因此酶结晶既是__________，也是__________。 三、名词术语的解释与区别（每组6分，共30分） 1、酶生物合成中的转录与翻译 2、诱导与阻遏 3、酶回收率与酶纯化比（纯度提高比） 4、酶的变性与酶的失活
六、在指定位置用1:1的比例画出指定的断面图（键槽深3mm） 2.半剖视图 四、完成左视图（虚线全部画出）， 注全图中的尺寸（不注数值，但要注写φ等符号，16分） φ φ C 五、根据主左视图求作俯视图（虚线全部画出，10分） φ C 二、完成圆锥截切后的投影（8分） x a e(f) b b′d c o e′ f′ a′ d′ c′工程制图模拟试卷 一、作一正平线MN与AB、CD、EF三直线均相交。 （8分） 三、补全视图中的漏线 1.虚线需全部画出 专业： 姓名： 成绩： （15分）C--C φ （6分） 第1页（共6页）
56 φ52H 7 φ88 八、找出下图中螺纹连接画法的错误，把正确画法画在指定位置。（10分） 234184 12.5 120 R25 4-φ20 A 5 A-A k 100 16 A 16 30 60 k 20 2-M10深16 七、补画主视图（半剖）中的漏线，并画出取全剖的左视图。 （12分） 九、读图，完成下列问题。（15分） φ120 2、尺寸φ52H7中，φ52为___________，H为________，7为__________查表知其公差值为0.064，则其上偏差为________，下偏差为_______。 3、标注下列表面的粗糙度：①φ52H7圆柱面Ra为6.3 ②底面的Ra为12.5 ③其余表面不加工 4、解释2-M10深16的含义，2___________M____________，10________，深16________ 5、完成A—A剖视图 64 32 32 812.5 12.5 8 1、补出图中遗漏的三个尺寸(不写尺寸数值）
年级2001 专业生物技术 一名词解释（每题3分，共计30分） 1.酶工程 2.自杀性底物 3.别构酶 4.诱导酶 5.Mol催化活性 6.离子交换层析 7.固定化酶 8.修饰酶 9.非水酶学 10.模拟酶 二填空题(每空1分,共计30分) 1.决定酶催化活性的因素有两个方面，一是，二是 。 2.求Km最常用的方法是。 3.多底物酶促反应的动力学机制可分为两大类，一类是，另一类是 。 4.可逆抑制作用可分为，，， 。 5.对生产酶的菌种来说，我们必须要考虑的条件有，一是看它是不是，二是能够利用廉价原料，发酵周期，产酶量，三是菌种不易，四是最好选用能产生酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高。 6.酶活力的测定方法可用反应法和反应法。 7.酶制剂有四种类型即酶制剂，酶制剂，酶制剂和 酶制剂。 8.通常酶的固定化方法有法，法，法， 法。 9.酶分子的体外改造包括酶的修饰和修饰。 10.模拟酶的两种类型是酶和酶。 11.抗体酶的制备方法有法和法。 三问答题(每题10分,共计40分) 1.固定化酶和游离酶相比，有何优缺点 2.写出三种分离纯化酶蛋白的方法，并简述其原理。 3.为什么酶制剂的生产主要以微生物为材料 4.下面是某人对酶测定的一些数据，据此求出该酶的最大反应速度和米氏常数。
10-6 10-6 10-5 10-5 10-5 10-4 10-4 10-2 酶工程试题（B） 一名词解释 1.抗体酶 2.酶反应器 3.模拟酶 4.产物抑制 5.稳定pH 6.产酶动力学 7.凝胶过滤 8.固定化酶 9.非水酶学 10.液体发酵法 二填空题(每空1分,共计30分) 值增加，其抑制剂属于抑制剂，Km不变，其抑制剂属于抑制剂，Km 减小，其抑制剂属于抑制剂。 2.菌种培养一般采用的方法有培养法和培养法。 3.菌种的优劣是影响产酶发酵的主要因素，除此之外发酵条件对菌种产酶也有很大的影响，发酵条件一般包括，，，， 和等。 4.打破酶合成调节机制限制的方有，，。 5.酶生物合成的模式分是，，， 。 6.根据酶和蛋白质在稳定性上的差异而建立的纯化方法有法，法和 法 7. 通常酶的固定化方法有法，法，法， 法。 8. 酶分子的体外改造包括酶的修饰和修饰。 9.酶与抗体的重要区别在于酶能够结合并稳定化学反应的，从而降低了底物分子的，而抗体结合的抗原只是一个态分子，所以没有催化能力 三问答题(每题10分,共计40分) 1.在生产实践中，对产酶菌有何要求 2.对酶进行化学修饰时，应考虑哪些因素 3.列出用共价结合法对酶进行固定化时酶蛋白上可和载体结合的功能团 4.某酶的初提取液经过一次纯化后，经测定得到下列数据，试计算比活力，回收率及纯化 倍数。
一、填空题（28 分，每小题4分） 1．投影法分和两大类。 2．在点的三面投影图中，aa x反映点A到面的距离，a’a z反映点A到面的距离。 3．绘制机械图样时采用的比例，为机件要素的线性尺寸与机件相应要素的线性之比。 4．正垂面上的圆在V面上的投影为，在H面上的投影形状为。5．正等轴测图的伸缩系数是，简化伸缩系数是。 6.同一机件如采用不同的比例画出图样，则其图形大小___ ___（相同，不同），但图上所标注的尺寸数值是___ ___（一样的，不一样的）。 7.图形是圆、大于半圆注______尺寸；图形是半圆、小于半圆注______尺寸。 二、判断与选择题（24分，每小题3分） 1.已知一立体的轴测图，按箭头所指的方向的视图是。 2．已知物体的主俯视图，正确的左视图是（）。 3.已知圆柱被截取切后的主、俯视图，正确的左视图是（）
4．已知主视图和俯视图，正确的左视图是（）。 5. 已知平面与V面的倾角为30°，正确的投影图为。6．图示断面的正确画法是（）。 7.判断下列各图是否表示平面。
8．正确的左视图是（）。 三、判断立体表面上指定线段、平面相对于投影面的位置，将结果填写在右下表中。（20 分） 四、已知三角形ABC的AC边是侧垂线，完成三角形的水平投影。（28 分） 线段AB 线段BC 线段CD 平面P 平面Q 平面R 线 线 线 面 面 面
二、判断与选择题（24分，每小题3分） 1.C 2.B 3.C 4.C 5.(2) 6.C 7. 否，否，是，否； 8.D 三、判断立体表面上指定线段、平面相对于投影面的位置，将结果填写在右下表中。（20 分） 四、已知三角形ABC的AC边是侧垂线，完成三角形的水平投影。（28 分）
酶工程试卷(A) 1.决定酶催化活性的因素有两个方面，一是酶分子结构，二是反应条件。 2.求KM最常用的方法是 双倒数作图法。 3.多底物酶促反应的动力学机制可分为两大类，一类是序列机制，另一类是乒乓机制， 4.可逆抑制作用可分为竞争性，反竞争性，非竞争性，混合性； 5.对生产酶的菌种来说，我们必须要考虑的条件有：一是看它是不是致病菌，二是能够利用廉价原料，发酵周期短，产酶量高；三是菌种不易退化；四是最好选用能生产胞外酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高。 6.酶活力的测定方法可用 终止反应法和连续反应法。 7.酶制剂有四种类型即液体酶制剂，固体酶制剂，纯酶制剂和固定化酶制剂。 8。通常酶的固定化方法有吸附法，包埋法，交联法，共价键法。 9.酶分子的体外改造包括酶的表面修饰和内部修饰。 10.模拟酶的两种类型是半合成酶和全合成酶。 11.抗体酶的制备方法有拷贝法和引入法。 1.为什么酶制剂的生产主要以微生物为材料？ 解:1.微生物种类丰富，酶种丰富，且菌株易诱变，菌种多样。 2.微生物生长繁殖快，酶种提取，特别是胞外酶 3.来源广泛，价值便宜。 1）微生物易得，生长周期短 2）可以利用微电脑技术控制酶的发酵生产，可进行连续化，自动化，经济效益高。 3）可以利用以基因工程为主的分子生物学技术，选育和改造菌种，增加产酶率和开发新酶种。 酶工程试题（B） 1.Km值增加，其抑制剂属于竞争性抑制剂，Km不变，其抑制剂属于非竞争性抑制剂，Km调小，其抑制剂属于反竞争性抑制剂。 2.菌种培养一般采用的方法有固体培养法和液体培养法。 3.菌种的优劣是影响产酶的主要因素，除此之外发酵条件对菌种产酶也有很大的影响，发酵条件一般包括温度、PH、氧气、搅拌、湿度和泡沫等。 4.打破酶合成调节机制限制的方法有控制条件，遗传控制，其他方法。 5.酶生物合成的模式分别是同步合成型，延续合成型，中期合成型，滞后合成型。 6.根据酶和蛋白质在稳定性上的差异而建立的纯化方法有热变性法，酸碱变性法和表面变性法。 7.通常酶的固定方法有：交联法、包埋法、吸附法、共价结合法。
工程制图模拟试卷 说明：本模拟试卷仅仅是模拟课程考核会出现的题型和题量，并不说明本模拟试卷的题目里的内容一定会是真正的考核题。切记。 一、单项选择题（每小题 分，共 分） 已知主、左视图，正确的俯视图是 。 已知圆锥被切割后的主、俯视图，正确的左视图是 。 已知主、俯视图，正确的左视图是 。
已知主、俯视图，正确的左视图是 。 已知主、俯视图，正确的左视图是 。 已知主、俯视图，正确的左视图是 。 已知主、俯视图，正确的左视图是 。
已知主、俯视图，正确的左视图是 。 已知主、俯视图，正确的左视图是 。 已知主、俯视图，正确的左视图是 。 ．画法正确的 断面图是 。
．表示正确的螺纹俯视图是 。 二、填空题。（每空 分，共 分） ．阅读下列零件图，并回答下列问题。（每空 分，本题共 分） （ ）表达此零件的视图共有 个，根据所采用的表达方法这四个视图的分别为 图， 图， 图， 图。
（ ）图中机件开螺纹孔的地方有 处，机件底座共开 个光孔，其中Φ 的小孔 个。 （ ）零件上要求最高的表面粗糙度为 ，最低的表面粗糙度为 ， 底面的表面粗糙度为 。 （ ）ф 中的基本尺寸是 ， 是孔的公差带代号，上偏差是 ， ， ，下偏差是 ， ， 。 、参看教材 图 管路布置图示例，看懂此图回答问题（本题每空 分，共 分） （ ）本图列出编号的管道有 种，管道的规格有 种。控制点有 个，就地安装的控制点有 个。 （ ）在 立面图中，连接设备 和设备 的管道是一根还没有标注的管道，该管道的标注可从平面图对应的管道读出，其管道编号及规格为 ，该接管有 个 弯管，管子的水平段安装标高约为 米，管子总长约 米，该管道接上 个阀门，阀门的手轮方位指向 方。（ ）设备 的下方管道的编号及规格为 ，该接管有 个 弯管，管子总长约 米。 三、已知 、 、 、 点及其连线均在圆锥截切体面上，求： （ ）该截切体的左视图。（ 分） （ ） 、 、 、 点其连线在左、俯视图上投影。（ 分）
【生物课件】《酶工程》试题一参考答案: 一、是非题（每题1分，共10分） 1、酶是具有生物催化特性的特殊蛋白质。（ ?） 2、酶的分类与命名的基础是酶的专一性。（? ） 3、酶活力是指在一定条件下酶所催化的反应速度，反应速度越大，意味着酶活力越高。 （?） 4、液体深层发酵是目前酶发酵生产的主要方式。（?） 5、培养基中的碳源，其唯一作用是能够向细胞提供碳素化合物的营养物质。（?） 6、膜分离过程中，膜的作用是选择性地让小于其孔径的物质颗粒成分或分子通过，而把大 于其孔径的颗粒截留。（?） 7、在酶与底物、酶与竞争性抑制剂、酶与辅酶之间都是互配的分子对，在酶的亲和层析分 离中，可把分子对中的任何一方作为固定相。（?） 8、角叉菜胶也是一种凝胶，在酶工程中常用于凝胶层析分离纯化酶。（?） 9、α－淀粉酶在一定条件下可使淀粉液化，但不称为糊精化酶。（?） 10、酶法产生饴糖使用α－淀粉酶和葡萄糖异构酶协同作用。（?） 二、填空题（每空1分，共28分） 1、日本称为“酵素”的东西，中文称为酶,英文则为Enzyme,是库尼（Kuhne）于1878年首 先使用的。其实它存在于生物体的细胞内与细胞外。
2、 1926年，萨姆纳（Sumner）首先制得脲酶结晶，并指出酶的本质是蛋白质。他因这一 杰出贡献，获1947年度诺贝尔化学奖。 3、目前我国广泛使用的高产糖比酶优良菌株菌号为As3.4309,高产液化酶优良菌株菌号为 BF7.658。在微生物分类上，前者属于霉菌，后者属于细菌。 4、 1960年，查柯柏（Jacob）和莫洛德（Monod）提出了操纵子学说，认为DNA分子中， 与酶生物合成有关的基因有四种，即操纵基因、调节基因、启动基因和结构基因。 5、 1961年，国际酶委会规定的酶活力单位为：在特定的条件下（25 oC，PH及底物浓度为 最适宜）每1分钟内,催化1μmol的底物转化为产物的酶量为一个国际单位，即1IU。 6、酶分子修饰的主要目的是改进酶的性能，即提高酶的活力、减少抗原性，增加稳定性。 7、酶的生产方法有提取法，发酵法和化学合成法。 8、借助双功能试剂使酶分子之间发生交联作用，制成网状结构的固定化酶的方法称为交联 法。 9、酶的分离纯化方法中，根据目的酶与杂质分子大小差别有凝胶过滤法，超滤法和超离心 法三种。 10、由于各种分子形成结晶条件的不同，也由于变性的蛋白质和酶不能形成结晶，因此
酶工程复习题 一、选择题： 1.下面关于酶的描述，哪一项不正确( ) （A）（答案）所有的蛋白质都是酶 （B）酶是在细胞内合成的，但也可以在细胞外发挥催化功能 （C）酶具有专一性 （D）酶是生物催化剂 2.下列哪一项不是辅酶的功能( ) （A）转移基团 （B）传递氢 （C）传递电子 （D）（答案）决定酶的专一性 3.下列对酶活力的测定的描述哪项是错误的( ) （A）酶的反应速度可通过测定产物的生成量或测定底物的减少量来完成 （B）需在最适pH条件下进行 （C）（答案）按国际酶学会统一标准温度都采用25℃ （D）要求[S]远远小于[E] 4.下列关于酶活性部位的描述，哪一项是错误的 （A）活性部位是酶分子中直接与底物结合，并发挥催化功能的部位 （B）活性部位的基因按功能可分为两大类：一类是结合基团，一类是催化基团（C）酶活性部位的集团可以是同一条肽链但在一级结构上相距很远的集团（D）（答案）不同肽链上的有关基团不能构成该酶的活性部位 5.酶的高效率在于 （A）增加活化能 （B）降低反应物的能量水平 （C）增加反应物的能量水平 （D）（答案）降低活化能
6.作为催化剂的酶分子，具有下列哪一种能量效应 （A）增高反应活化能 （B）（答案）降低反应活化能 （C）增高产物能量水平 （D）降低产物能量水平 二、填空题 1.酶和菌体固定化的方法很多。主要可分为吸附法、结合法、交联法和热处理法 2.系统命名法根据酶所催化的反应类型，将酶分为6大类。即1、氧化还原酶；2、转移酶； 3、水解酶； 4、裂合酶； 5、异构酶； 6、合成酶（或称连接酶）。 3.酶分子修饰中，经过修饰的酶的特性会改变，即可提高酶活力，增加稳定性或降低抗原性。 4.决定酶催化活性的因素有两个方面，一是酶分子结构，二是反应条件。 5.酶的特点酶是生物催化剂；其反应条件温和、催化效率高；酶具有高的作用专一性；其化学本质具有蛋白质性质。 6.常用产酶菌有细菌（大肠杆菌）；霉菌（黑曲酶；青酶；木酶；根酶）；放线菌（链酶菌）；酵母等。 7.通常酶的固定化方法有吸附法共价键结合法交联法包埋法 8.对生产酶的菌种来说，我们必须要考虑的条件有，一是看它是不是致病菌，二是能够利用廉价原料，发酵周期短，产酶量高，三是菌种不易退化，四是最好选用能产生胞外酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高。 9. 酶的生产方法有提取法，发酵法和化学合成法。 10. 借助双功能试剂使酶分子之间发生交联作用，制成网状结构的固定化酶的方法称为交联法。 11. 酶的分离纯化方法中，根据目的酶与杂质分子大小差别有凝胶过滤法，超滤法和超离心法三种。 12.酶的特点酶是生物催化剂；其反应条件温和、催化效率高；酶具有高的作用专一性；其化学本质具有蛋白质性质。 13.在酶的发酵生产中，培养基要从营养的角度考虑碳源、氮源、无机盐、生长因素的调
酶工程试题 一、名词解释 1.固定化酶 采用各种方法，将酶固定在水不溶性的载体上，制备成固定化酶的过程称为酶的固定化。固定在载体上，并在一定的范围内进行催化反应的酶称为固定化酶。 2.酶反应器 用于酶进行催化反应的容器及其附属设备称为酶反应器。 3.模拟酶 利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单，但具有催化作用的非蛋白质分子叫做模拟酶 4.抗体酶 又叫做催化抗体，是抗体的高度选择性和酶的高效催化能力巧妙结合的产物，是一类具有催化活力的免疫球蛋白，其可变区赋予了酶的属性 5.印迹酶 以一种分子充当模板，其周围用聚合物交联，当模板分子除去后，聚合物就留下了与此分子相匹配的空穴，若构建合适，这种聚合物就像锁一样，对钥匙具有选择性识别作用。这种技术称为分子印迹，该技术的酶产物称为印迹酶。 6.融合酶 将两个或者多个酶分子组合在一起形成的融合蛋白 7.定点突变 只在基因的特定位点引入突变，通过取代、插入或者删除已知DNA序列中特定的核苷酸序列来改变酶蛋白结构中某个或某些特定的氨基酸，以此来提高酶对底物的亲和力，增强酶的专一性等。
8.必需水 在有机介质中，酶分子需要一层水化层以维持其完整的空间构象，将对于维持酶活性所必需的最低水量为必需水，由于其与酶分子的结合十分紧密，又称结合水。 9.酶传感器 以酶作为分子识别元件上的敏感材料，同各种不同的转换器结合所构成的一类生物传感器。 10.酶的必需基团和活性中心 酶的必需基团是指酶分子中与酶的活性密切相关的基团，酶的活性中心是指与底物结合并催化反应的场所。 二、填空题 1.酶根据主要组分的不同可以分为：蛋白类酶和核酸类酶两大类，根据酶的作用的底 物和催化反应的类型进行分类可以分为：氧化还原酶、转移酶、水解酶、裂合酶、异构酶、合成酶（连接酶）。（写出4种即可） 2.酶的活力是酶催化速度的度量指标，酶的比活力是酶纯度的度量指标，酶转换数是 酶催化效率的度量指标。 3.酶的生产方法有：提取分离法生产，发酵法生产，化学合成法生产，生物合成 法生产。 4.酶反应器类型有：搅拌罐式反应器，填充床式反应器，流化床反应器，鼓泡式 反应器，膜反应器，喷射式反应器。（写出3种即可） 5.可逆抑制作用可分为＿竞争性抑制作用、＿非竞争性抑制作用＿和＿反竞争性抑制作 用。 6.非竞争性抑制的特点是最大反应速度Vm降低，米氏常数Km不变。 7.细胞破碎的主要方法有：机械破碎，物理破碎，＿化学破碎＿和＿酶促破碎＿。
1、单项选择题(30) 1．图纸的会签栏一般在（ B） A．图纸右上角及图框线内 B．图纸左上角及图框线外 C．图纸右上角及图框线外 D．图纸左上角及图框线内 @！．一物体图上长度标注为2000，其比例为1﹕5，则其实际大小为（ B）A．400 B．2000 C．10000 D．200 3．下列仪器或工具中，不能用来画直线的是（ D ） A．三角板 B．丁字尺 C．比例尺 D．曲线板 4. 在土木工程制图中，除了遵守建筑工程制图标准和某些行业标准外，还必须遵守的国家标准为：( A ) A.总图制图标准 B.水利水电工程制图标准 C.技术制图标准 D.铁路工程制图标准 5. 由国家职能部门制定、颁布的制图标准，是国家级的标准，简称国标。国标的代号为：( B ) A. ISO B. GB C. Standard D. ANSI 6. 图纸上的各种文字如汉字、字母、数字等，必须按规定字号书写，字体的号数为：( A ) A. 字体的高度 B. 字体的宽度 C. 标准中的编号 D. 序号 7. 绘制工程图应使用制图标准中规定的幅面尺寸，其中A2幅面的尺寸为：( C) A. 594 841（A1） B. 210 297(A4) C. 420 594(A2) D. 297 420(A3) 1189*841(A0) 8. 绘制工程图应使用制图标准中规定的幅面尺寸，其中A4幅面的尺寸为：(B ) A. 594 841 B. 210 297 C. 420 594 D. 297 420 9. 绘图比例是：( A ) A. 图形与实物相应要素的线性尺寸之比 B. 实物与图形相应要素的线性尺寸之比 C. 比例尺上的比例刻度 D. 图形上尺寸数字的换算系数 10. 如果物体的长度为1000mm，绘图比例是1:20，则在绘图时其长度应取：( C ) A. 100 B. 1000 C. 50 D. 20
《机械制图》试卷答案 班级：学号：姓名：分数：一、补画第三视图，并作出表面上各点或直线的其余投影。（7分） 评分标准：视图3分，点投影0.5×6=分，连线1分。 二、判断两直线间的相对位置并给出理由。（8分） 评分标准：判断2×2=4分，依据2×2=4分。 １
三、补画视图中的缺线。（12分，第1题6分，第2题6分） 1、评分标准：每线1分，1×6=6分。 2、评分标准：斜线4分；虚线2分。 四、补画第三视图。（8分） 评分标准：相贯线4分，其余4分。 ２
五、补画第三视图并标注尺寸。（32分） 评分标准：补左视图20分： 1、相贯线8分，每段2分； 2、切线4分，每边2分； 3、粗实线4分； 4、虚线4分。 标尺寸共12分，每尺寸1分。 六、分析剖视图中的错误，画出正确的剖视图。（10分） ３
评分标准：视图2分；剖视图2分；剖面线2分；肋板2分；其余2分。 七、作出正确的螺纹连接视图。（10分） 评分标准：螺纹连接 5分；A-A 3分；剖面线方向 2分。 ４
八、看零件图完成下列各题。（13分） 评分标准：c-c断面图3.5分；第2～6题每空0.5分；第7题3分。 1、作出C-C断面图； 2、主视图是局剖视图图，键槽的图形称局部视图； 3、4-M10螺孔的定位尺寸是φ56±0.05和45°； 4、该零件最光洁的表面是30±0.006，粗糙度代号是 5、φ48 013 .0 002 .0 + +外圆直径，最大可以加工成φ48.013 ，最小可以加工成φ48.002 6、M39×1.5是普通螺纹螺纹，大径是 39 ，螺距是 1.5 ，旋向是右 7 : φ72 01 .0 -的轴线相对于φ48 013 .0 002 .0 + +的轴线同轴度公差为0.03 。 ５
第一章绪论 问题：试述木瓜蛋白酶的生产方法？ 答：木瓜蛋白酶可以采用提取分离法、基因工程菌发酵法、植物细胞培养法等多种方法进行生产。 (1)提取分离法：从木瓜的果皮中获得木瓜乳汁，通过各种分离纯化技术获得木瓜蛋白酶。 (2)发酵法：通过DNA重组技术将木瓜蛋白酶的基因克隆到大肠杆菌等微生物中，获得基因工程菌，在通过基因工程菌发酵获得木瓜蛋白酶。 (3)植物细胞培养法：通过愈伤组织诱导获得木瓜细胞，在通过植物细胞培养获得木瓜蛋白酶。 第二章微生物发酵产酶 1、解释酶的发酵生产、酶的诱导、酶的反馈阻遏(产物阻遏)、分解代谢物阻遏。诱导物的种类？ 答：酶的发酵生产：利用微生物的生命活动获得所需的酶的技术过程； 酶的诱导：加进某些物质，使酶的生物合成开始或加速的现象，称为诱导作用； 产物阻遏（反馈阻遏）：指酶催化反应的产物或代谢途径的末端产物使该酶的生物合成受到阻遏的现象。 分解代谢物阻遏（营养源阻遏）：是指某些物质经过分解代谢产生的物质阻遏其他酶合成的现象。 诱导物的种类：诱导物一般是酶催化作用的底物或其底物类似物，有的也是反应产物。2、微生物产酶模式几种？特点？最理想的合成模式是什么？ 答：（1）同步合成型特点： a.发酵开始，细胞生长，酶也开始合成，说明不受分解代谢物和终产物阻遏。 b.生长至平衡期后，酶浓度不再增长，说明mRNA很不稳定。 （2）延续合成型特点： a.该类酶一般不受分解代谢产物阻遏和终产物阻遏。 b.该酶对应的mRNA是相当稳定的。 （3）中期合成型特点： a.该类酶的合成受分解代谢物阻遏和终产物阻遏。 b.该酶对应的mRNA不稳定。 （4）滞后合成型特点： a.该类酶受分解代谢物阻遏和终产物阻遏作用的影响，阻遏解除后，酶才大量合成。 b.该酶对应的mRNA稳定性高。 选择：在酶的工业生产中，为了提高酶产率和缩短发酵周期，最理想的合成模式是延续合成型。 3、可以添加什么解除分解代谢物阻遏？表面活性剂的作用？ 答：（1）一些酶的发酵生产时要控制容易降解物质的量或添加一定量的cAMP，均可减少或解除分解代谢物阻遏作用。 （2）表面活性剂的作用：增溶、乳化作用、润湿作用、助悬作用、起泡和消泡作用、消毒和杀菌剂。 4、根据微生物培养方式不同，酶的发酵生产有几种类型？哪种是目前酶发酵生产的主要方式？按酶生物合成的速度把细胞中的酶分几类？酶的生物合成在转录水平的调节主要有哪三种模式？微生物细胞生长过程一般分为几个阶段？
酶工程试题(A) 一名词解释（每题3分，共计30分） 1. 酶工程：又叫酶技术，是酶制剂的大规模生产和应用的技术。 2.自杀性底物：底物经过酶的催化后其潜在的反应基团暴露，再作用于酶而成为酶的不可逆抑制剂，这种底物叫自杀性底物。 3.别构酶；调节物与酶分子的调节中心结合后，引起酶分子的构象发生变化，从而改变催化中心对底物的亲和力，这种影响被称为别构效应，具有别构效应的酶叫别构酶 4.诱导酶：有些酶在通常的情况下不合成或很少合成，当加入诱导物后就会大量合成，这样的酶叫诱导酶 5.Mol催化活性：表示在单位时间内，酶分子中每个活性中心转换的分子数目 6.离子交换层析：利用离子交换剂作为载体这些载体在一定条件下带有一定的电荷，当带相反电荷的分子通过时，由于静电引力就会被载体吸附，这种分离方法叫离子交换层析。 7.固定化酶：通过物理的或化学的方法，将酶束缚于水不溶的载体上，或将酶束缚于一定的空间内，限制酶分子的自由流动，但能使酶发挥催化作用的酶 8.修饰酶：在体外用一定的化学方法将酶和一些试剂进行共价连接后而形成的酶 9.非水酶学：通常酶发挥催化作用都是在水相中进行的，研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学 10模拟酶：利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子叫模拟酶。 二填空题(每空1分,共计30分) 1.决定酶催化活性的因素有两个方面，一是酶分子结构，二是反应条件。 2.求Km最常用的方法是双倒数作图法。 3.多底物酶促反应的动力学机制可分为两大类，一类是序列机制，另一类是乒乓机制。 4.可逆抑制作用可分为竞争性，反竞争性，非竞争性，混合性； 5.对生产酶的菌种来说，我们必须要考虑的条件有，一是看它是不是致病菌，二是能够利用廉价原料，发酵周期短，产酶量高，三是菌种不易退化，四是最好选用能产生胞外酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高。 6.酶活力的测定方法可用终止反应法和连续反应法。 7.酶制剂有四种类型即液体酶制剂，固体酶制剂，纯酶制剂和固定化酶制剂。 8.通常酶的固定化方法有吸附法，包埋法，交联法， 共价键结合法。 9.酶分子的体外改造包括酶的表面修饰和内部修饰。 10.模拟酶的两种类型是半合成酶和全合成酶。 11.抗体酶的制备方法有拷贝法和引入法。 三问答题(每题10分,共计40分) 1.固定化酶和游离酶相比，有何优缺点？ 解：优点（1）易将固定化酶和底物，产物分开产物溶液中没有酶的残留简化了提纯工艺 （2）可以在较长的时间内连续使用（3）反应过程可以严格控制，有利于工艺自动化（4）提高了酶的稳定性 （5）较能适于多酶反应 （6）酶的使用效率高产率高成本低 缺点 （1）固定化时酶的活力有损失 （2）比较适应于水溶性底物 （3）与完整的细胞相比，不适于多酶反应。 2.写出三种分离纯化酶蛋白的方法，并简述其原理。 解：.方法:透析与超虑离心分离凝胶过滤盐析等电点沉淀共沉淀吸附层析电泳亲和层析热变性酸碱变性表面变性等（原理略） 3.为什么酶制剂的生产主要以微生物为材料？ 解：（1）微生物种类多，酶种丰富，且菌株易诱变，菌种多样 （2）微生物生长繁殖快，酶易提取，特别是胞外酶 （3）来源广泛，价格便宜 （4）微生物易得，生长周期短 （5）可以利用微电脑技术控制酶的发酵生产，可进行连续化，自动化，经济效益高 （6）可以利用以基因工程为主的分子生物学技术，选育和改造菌种，增加产酶率和开发新酶种 4 下面是某人对酶测定的一些数据，据此求出该酶的最大反应速度和米氏常数 [S](mol/L) V0(umol/min) 0.5?10-628 4.0?10-640 1.0?10-570 2.0?10-595 4.0?10-5112 1.0?10-4128 2.0?10-4139 1.0?10-2140 解：最大反应速度140 ，Km: 1.0?10-5 酶工程试题（B） 一名词解释 1抗体酶：是一种具有催化作用的免疫球蛋白，属于化学人工酶 2酶反应器：是利用生物化学原理使酶完成催化作用的装置，他为酶促反应提供合适的场所和最佳的反应条件，使底物最大限度的转化为物。 3模拟酶：利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子叫模拟酶。 4底物抑制：在酶促反应中，高底物浓度使反应速度降低的现象。 5稳定pH：酶在一定的pH范围之内是稳定的，超过这个限度易变性失活，这样的pH范围为此酶的稳定pH 6产酶动力学：主要研究细胞产酶速率及各种因素对产酶速率的影响，包括宏观产酶动力学和微观产酶动力学。 7凝胶过滤：又叫分子排阻层析，分子筛层析，在层析柱中填充分子筛，加入待纯化样品再用适当缓冲液淋洗，样品中的分子经过一定距离的层析柱后，按分子大小先后顺序流出的，彼此分开的层析方法。 8固定化酶：通过物理的或化学的方法，将酶束缚于水不溶的载体上，或将酶束缚于一定的空间内，限制酶分子的自由流动，但能使酶发挥催化作用的酶 9非水酶学：通常酶发挥催化作用都是在水相中进行的，研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学 10液体发酵法：以液体培养基为原料进行微生物的繁殖和产酶的方法，根据通风方法不同又分为液体表层发酵法和液体深层发酵法。 二填空题(每空1分,共计30分) 1.Km值增加，其抑制剂属于竞争性抑制剂，Km不变，其抑制剂属于非竞争性抑制剂，Km减小，其抑制剂属于反竞争性抑制剂。 2.菌种培养一般采用的方法有固体培养法和液体培养法。 3.菌种的优劣是影响产酶发酵的主要因素，除此之外发酵条件对菌种产酶也有很大的影响，发酵条件一般包括温度，PH ，氧气，搅拌，湿度和泡沫等。 4.打破酶合成调节机制限制的方有控制条件，遗传控制，其它方法。 5.酶生物合成的模式分是同步合成型，延续合成型，中期合成型，滞后合成型。 6.根据酶和蛋白质在稳定性上的差异而建立的纯化方法有热变性法，酸碱变性法和表面变性法 7. 通常酶的固定化方法有交联法、包埋法，吸附法、共价结合法 8. 酶分子的体外改造包括酶的表面修饰和内部修饰。 9.酶与抗体的重要区别在于酶能够结合并稳定化学反应的过滤态，从而降低了底物分子的能障，而抗体结合的抗原只是一个基态分子，所以没有催化能力 三问答题(每题10分,共计40分) 1.在生产实践中，对产酶菌有何要求？ 一般必须符合下列条件： a)不应当是致病菌，在系统发育上最好是与病原菌无关 b)能够利用廉价原料，发酵周期短，产酶量高 c)菌种不易变异退化，不易感染噬菌体 d)最好选用产胞外酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高 在食品和医药工业上应用，安全问题更显得重要 2.对酶进行化学修饰时，应考虑哪些因素？ 解：（1）被修饰酶的性质，包括酶的稳定性，酶活性中心的状况，侧链基团的性质及反应性 （2）修饰反应的条件，包括PH与离子强度，修饰反应时间和温度，反应体系中酶与修饰剂的比例等 3.列出用共价结合法对酶进行固定化时酶蛋白上可和载体结合的功能团 解：（1）酶蛋白N端的α氨基或赖氨酸的∑氨基 （2）酶蛋白C端的羧基及天冬氨酸的β羧基或谷氨酸的γ羧基 （3）半胱氨酸的巯基1分 （7）丝氨酸骆氨酸苏氨酸上的羟基 （8）苯丙氨酸和骆氨酸上的苯环 （9）组氨酸上的咪唑基 色氨酸上的吲哚基 4.某酶的初提取液经过一次纯化后，经测定得到下列数据，试计算比活力，回收率及纯化倍数。 体积（ml）活力单位（u/ml）蛋白氮（mg/ml） 初提取液120 200 2.5 硫酸铵沉淀 5 810 1.5 解：（1）起始总活力：200?120＝24000（单位） （2）起始比活力：200÷2.5＝80（单位/毫克蛋白氮） （3）纯化后总活力810?5＝4050（单位）2 （4）纯化后比活力810÷1.5＝540（单位/毫克蛋白氮） （5）产率（百分产量）：4050÷24000＝17％ （6）纯化倍数：540÷80=6.75