惠州市水质检测综合有限公司
总大肠菌群滤膜法检测原始记录
粪大肠菌群测定复习试题 一、填空题 1.地表水环境质量标准(GHZB1—1999)中，对环境质量卫生指标粪大肠菌群项目作出明确规定：Ⅰ类水质标准值为；Ⅱ类水质标准值为；Ⅲ类水质标准值为；Ⅳ类水质标准值为，Ⅴ类水质标准值为。 答：≤200个/L；≤1000个/L；≤2000个/L；≤5000个/L；≤10000个/L。 2.粪大肠菌群是一部分，用粪大肠菌群作为卫生学指标比用 更有。目前，粪大肠菌群被认为是受粪便污染的最实用的。 答：总大肠菌群；总大肠菌群；代表性；指示菌。 3.检测粪大肠菌群时作发酵试验用的培养基，是由、、 、等配制而成的，调节pH为，应在 灭菌。 答：蛋白胨；牛肉浸膏；乳糖；氯化钠；7.2-7.4；115℃；20min。 4.农田灌溉水质标准(GB5084—92)中，根据农作物的需求状况，将灌溉水质按灌溉作物分为三类：水作、旱作和蔬菜。其生物指标粪大肠菌群标准值定为 。 答：≤10000个/L。 5.为了区别存在于中的大肠菌群和存在于的大肠菌群,可将培养_ __ _____，在此种条件下仍能_____ 并使____________ _，则称为粪大肠菌群。 答：自然环境；温血动物肠道内；温度提高到44℃；生长；发酵乳糖产酸产气。 6.进行复发酵试验时，用3mm 或灭菌棒将转接到 培养液中。在培养。培养后观察发酵管 表明确信。
答：接种环；培养物；EC；44±0.5℃水浴下，24±2h；产气；试验阳性。 7.在污水综合排放标准(GB8978—1996)中，把医院、兽医院及医疗机构含病原体污水的粪大肠菌群分为三级标准：一级标准值；二级标准值；三级标准值。而传染病、结核病医院污水的粪大肠菌群三级标准值分别为：、、。 答：500个/L；1000个/L；5000个/L；100个/L；500个/L；1000个/L。8.EC培养液的配比是：胰胨，乳糖，氯化钠，磷酸二氢钾，胆盐三号，磷酸氢二钾，溶解于蒸馏水中。在 15min，灭菌后应为。 答：20g；5g；5g；1.5g；1.5g；4g；1000mL；121℃灭菌；pH；6.9。 二、问答题 1.粪大肠菌群的涵义是什么？ 答：指一群需氧及兼性厌氧在44.5℃生长时能使乳糖发酵，在24h内产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。 2.控制粪大肠菌群指标值的意义是什么？ 答：为了人体健康卫生的要求。 3.粪大肠菌群测定有几种方法？通常用哪种方法？ 答：有三种：多管发酵法、滤膜法、延迟培养法。用多管发酵法。 4.简诉测定粪大肠菌群多管发酵法的操作步骤？ 答：测定分二个步骤进行：量取若干经稀释的水样，接种乳糖蛋白胨培养液，进行初发酵试验：在37±0.5℃下培养24±2h，产酸和产气的发酵管表明试验阳性，再将表明试验阳性的发酵管中的培养物转接到EC培养液中，进行复发酵试验，在44±0.5℃水浴下培养24±2h，发酵管产气表明确信试验阳性。 5.在何种情况下用多少三倍浓度的培养基接种？ 答：接种体积为10ml时，试管内应装入有3倍浓度乳糖蛋白胨培养液5ml。 6.什么叫兼性厌氧细菌？ 答：氧存在或不存在的条件下均能繁殖的细菌。
消防系统维护保养检测报告 项目名称：检测日期：年月日 报告类型：月检□季检查□年检□ 一、消防系统检测内容： 、火灾自动报警系统□ 、应急广播系统 □ 、消防电话 □ 、消火栓系统□ 、自动喷水灭火系统 □ 、防排烟系统 □ 、防火分隔□ 、气体灭火系统 □ 、应急照明系统 □ 、消防炮系统□ 、消防供电配电 □ 、消防供水设施 □ 、灭火器□ 、消防电梯 □ 、其他 □ 说明：实施检测内容以消防系统维护保养合同为准，并在□内打“√” 二、本周期主要维护保养内容： 三、本周期主要维修整改内容：
四、消防系统维护保养检测依据： 、《建筑消防设施地维护管理》、《建筑消防设施检测技术规程》 、《建筑设计防火规范》、《高层民用建筑设计防火规范》（年版） 、《火灾自动报警系统设计规范》、《火灾自动报警系统施工及验收规范》 、《自动喷水灭火系统施工及验收规范》、《气体灭火系统施工及验收规范》 建筑消防设施检测记录表（一） 系统检测项目检测内容实测部位及记录运行 情况 故障描述及处理情况 消防供电配电消防配电柜试验主、备带你切换功能；消防电源主、 备电源供电能力测试 发电机组试验发电机组自动、手动启动功能，试验 发电机启动电源充放电功能 应急电源试验应急电源充放电功能 储油设施核对储油量 联动试验试验费消防电源地联动切断功能 火灾火灾探测器试验报警功能
自动报警系统手动报警按钮试验报警功能 监管装置试验监管装置报警功能，屏蔽信息显示功 能 警报装置试验报警功能 报警控制器试验火警报警、故障报警、火警优先、打 印机打印、自检、消音等功能；火灾显示 盘和显示器地报警功能、显示功能 消防联动控制 器 试验联动控制器及控制模块地手动、自动 联动控制功能；试验控制器显示功能，试 验电源部分主、备用电源充、放电功能远程监控系统试验信息传输装置显示、传输功能；试验 监控主机信息显示、告警受理、派单、接 单、远程开锁等功能，试验电源部分主、 备电源切换，备用电源充、放电功能 消防供水设施消防水池核对储水量、自动进水阀进水功能，液体 检测装置报警功能 消防水箱核对储水量、自动进水阀进水功能、模拟 消防水箱出水，测试消防水箱供能力 稳（增）压泵及 气压水罐 模拟系统渗漏，测试稳压泵、增压泵及气 压水罐稳压、增压能力，自动启泵、停泵 及联动启动主泵地压力工况，主、备泵切 换功能
GB/ 肥料中粪大肠菌群的测定 1 范围 本标准规定了肥料中粪大肠菌群的测定方法。 2 定义 粪大肠菌群 fecal coliforms 系指一群在℃±℃条件能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。 粪大肠菌群数为每克（毫升）肥料样品中粪大肠菌群的最可能数（MPN）。 3 设备和材料（内容略） 4 培养基和试剂 培养基：遵照附录A的规定。 革兰氏染色液：遵照附录B的规定（略）。 5 检验步骤 样品稀释 在无菌操作下称取样品g或吸取样品10mL，加入到带玻璃珠的90 mL无菌水中，置于摇床上200 r/min 充分振荡30min，即成10-1稀释液。 用无菌移液管吸取 mL上述稀释液加入到45 mL无菌水中，混匀成10-2稀释液。这样依次稀释，分别得到10-3，10-4等浓度稀释液（每个稀释度须更换无菌移液管）。 乳糖发酵试验 选取三个连续适宜稀释液，分别吸取不同稀释液mL加入到乳糖胆盐发酵管内，每一稀释度接种3支发酵管，置℃±℃恒温水浴或隔水式培养箱内，培养24h±2h。如果所有乳糖胆盐发酵管都不产酸不产气，则为粪大肠菌群阴性；如果有产酸产气或只产酸的发酵管，则按进行。 分离培养 从产酸产气或只产酸的发酵管中分别挑取发酵液在伊红美蓝琼脂平板上划线，置36℃±1℃条件下培养18h～24h。 证实试验 从分离平板上挑取可疑菌落，进行革兰氏染色。染色反应阳性者为粪大肠菌群阴性；如果为革兰氏阴性无芽胞杆菌则挑取同样菌落接种在乳糖发酵管中，置℃±℃条件下培养24h ±2h。观察产气情况，不产气为粪大肠菌群阴性；产气为粪大肠菌群阳性。 结果 证实实验为粪大肠菌群阳性的，根据粪大肠菌群阳性发酵管数，查MPN检索表，得出每克（毫升）肥料样品中的粪大肠菌群数。 附录 A （规范性附录） 培养基 乳糖胆盐发酵培养基 蛋白胨g 猪胆盐g 乳糖g %溴甲酚紫水溶液m L 蒸馏水1000m L
粪大肠菌群的测定 1 卫生学意义 粪大肠菌群测定的卫生学意义：一、与大肠菌群相比，粪大肠菌群在人和动物粪便中所占的比例较大，而且在自然界容易死亡。因此，粪大肠菌群的存在表明食品近期内可能直接或间接的受到了粪便的污染；二、作为粪便污染指标评价食品的卫生状况，推断食品中肠道致病菌污染的可能性；三、常用做贝类和贝类养殖用水的卫生指标。 2 检验方法 2.1 术语与定义 一群在44.5℃培养24h-48h能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。 卫生学概念，又称为耐热大肠菌群，主要是大肠杆菌，但也包括克雷伯氏菌属等。 2.2 设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： （1）恒温培养箱：36℃±1℃。 （2）冰箱：2℃～5℃。 （3）恒温水浴箱：46℃±1℃。 （4）天平：感量0.1g。 （5）无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头。 （6）无菌锥形瓶：容量500mL。 （7）无菌培养皿：直径90mm。 （8）pH 计或pH 比色管或精密pH 试纸。 2.3 培养基和试剂 （1）月桂基硫酸盐胰蛋白胨（Lauryl Sulfate Tryptose，LST）肉汤：1）成分：胰蛋白胨或胰酪胨：20.0g；氯化钠：5.0g；乳糖：5.0g；磷酸氢 二钾（K 2HPO 4 ）：2.75g；磷酸二氢钾（KH 2 PO 4 ）：2.75g；月桂基硫酸钠：0.1g； 蒸馏水：1000mL；pH：6.8±0.2 2）制法：将上述成分溶解于蒸馏水中，调节 pH。分装到有玻璃小倒管的试管中，每管10 mL。121 ℃高压灭菌15 min。 （2）EC肉汤（E.coli，BGLB）： 1）成分：胰蛋白胨或胰酪胨：20.0 g；3号胆盐或混合胆盐：1.5 g；乳糖： 5.0g；磷酸氢二钾（K 2HPO 4 ）：4.0g；磷酸二氢钾（KH 2 PO 4 ）：1.5g；氯化钠：5.0g；
滤膜法-粪大肠菌群的测定 1、适用范围 本标准适用于地表水、地下水、及水中粪大肠菌群的测定。用于检验加氯消毒的水样时，在滤膜法之前，先做试验，证实它所得的数据资料与多管发酵试验所得的数据资料具有可比性。 2、原理 滤膜是一种微孔性薄膜。将水样注入已灭菌的放有滤膜（孔径0.45微米）的滤器中，经过抽滤，细菌即被截留在膜上，然后将滤膜贴于M-FC培养基上，44.5℃温度下进行培养，计数滤膜上生长的此特性的菌落数，计算出每1L水样中含有粪大肠菌群数。 3仪器： 滤膜（孔径0.45微米）、滤器、接液瓶、垫圈、无菌镊子夹 3、培养基和试剂 本标准所用试剂除另有注明外，均为符合国家标准的分析纯化学试剂，实验室用水为新制备的去离子水。 M-FC培养基： 胰胨10g 蛋白胨5g 酵母浸膏 3.0g 氯化钠 5.0g 乳糖12.5g
胆盐三号 1.5g 1%苯胺蓝水溶10ml 1%玫瑰色酸溶液（溶于0.2mol/L氢氧化钠液中）10ml 蒸馏水1000ml 制法：将上述培养基中的成分（除苯胺蓝和玫瑰色酸外），置于蒸馏水中加热溶解，调节PH为7.4，分装于小烧瓶内，每瓶100ml，于115℃灭菌20min。储存于冰箱中备用，临用前，按上述配比，用灭菌吸管分别加入已煮沸灭菌的1%苯胺蓝溶液1ml及新配制的1%玫瑰色酸溶液（溶于氢氧化钠溶液）1ml，混合均匀。加热溶解前，加入1.2%～1.5%琼脂制成固体培养基。如培养物中杂菌不多，则培养基中不加玫瑰色酸亦可。 4、步骤 水样的选择：水样量的选择根据细菌受检验的特征和水样中预测的细菌密度而定。理想的水样体积是一片滤膜上生长20～60个粪大肠群菌落，总菌落数不超过200个。 滤膜及滤膜灭菌：将滤膜放入高压蒸汽灭菌锅里在121℃灭菌10min，滤器、接液瓶、垫圈分别用纸包好，在使用前经121℃灭菌20min，滤器也可用点燃的酒精棉球火焰灭菌。 过滤：用无菌镊子夹取灭菌滤膜边缘，将粗糙面向上，贴放在已灭菌的滤床上，稳妥的固定好滤器。将适量的水样注入滤器中，加盖，开动真空泵即可抽滤除菌。培养：使用M-FC培养基。培养基含或不含琼脂，不含琼脂的培养基使已用M-FC 培养基饱和的无菌吸收垫。将滤过水样的滤膜置于琼脂或吸收垫表面。将培养皿紧密盖好后，置于能准确恒温于44.5℃±0.5℃的恒温培养箱或恒温水浴中，经
艾山二中2017年消防设施检修、维护记录台账 消防设施未被阻挡 消火栓箱完好情况 “F ”扳手完好情况 水带及卡扣完好情况 水枪完好情况 灭火器铅封完好情况 灭火器压力表指针在绿区 灭火器筒体完好情况 灭火器喷嘴完好情况 消防设施卫生情况 检查人 备注：存在异常情况的处理情况 1 月 2 月 3 月 4 月 5 月 6 月 7 月 8 月 9 月 10月 11月 12月 消防栓检查标准 序号 检查内容 备注 1 “F ” 扳手无腐蚀、无变形能正常开启消火栓阀门。 每月检查外观检查 2 开关手轮、丝杆、胶垫、无腐蚀、开关保持灵活。手轮螺丝不松动、手轮与螺杆不打滑、能正常开启。 3 消火栓、水带接口无腐蚀、无变形、保持紧固、胶圈完整。 4 水带、水枪、胶垫完好、接口紧固、无漏水现象、无腐蚀、无裂痕。 检查 项目 月份
5 水带卡簧无变形、无脱落、无严重腐蚀、卡槽能正常使用。 6 喉管与消火栓接头不松动、无腐蚀漏水现象。 7 消防栓内的消防器材应配备完整齐全（水带、“F ”扳手、水枪）水带、水枪、消火栓型号应保持一致。 8 消防箱的安装与消火栓应匹配、不能影响接口和消防门的开启，无腐蚀、无损坏现象。 9 露天或半露天岗位中的消火栓应加装保温。 10 消火栓开启后是否有水。 11 消防箱上应有责任人标识。 12 周围环境无障碍物、消火栓干净整洁。 13 各消防箱应有拉手、开关保持灵活。 14 消防箱玻璃、门锁应完整无损、能正常开启消防箱。 15 水带接口里槽应加装铁丝固定水带，外槽加装水带卡子固定水带。（统一为16号铁丝固定两圈） 灭火器检查标准 序号 检查内容 备注 1 检查灭火器铅封是否完好。灭火器已经开启后即使喷出不多，也必须按规定要求在充装。消防专业维修部门充装后应作密封试验并牢固铅封。 每月检查外观检查 2 检查压力表指针是否在绿色区域，如指针在红色区域，应查明原因，送消防专业维修部门检修后重新灌装。 3 检查可见部位防腐层的完好程度，轻度脱落的应及时补好，明显腐蚀的应送消防专业维修部门进行耐压试验，合格者再进行防腐处理。 4 检查灭火器可见零件是否完整；有无变形、松动、锈蚀(如压杆)和损坏，装配是否合理。 5 检查喷嘴是否通畅，如有堵塞应及时疏通。 6 检查灭火器责任人标签张贴位置及人员是否对应。 7 检查灭火器及灭火器箱的卫生是否清洁，无尘土、污迹。 8 每半年应对灭火器的重量和压力进行一次彻底检查，并应及时充填。 每月检查 9 对干粉灭火器每年检查一次出粉管、进气管、喷管、喷嘴和喷枪等部分有无干粉堵塞，出粉管防潮堵、膜是否破裂。筒体内干粉是否结块。 10 检查灭火器放置环境及放置位置是否符合设计要求，灭火器的保护措施是否正常
肥料中粪大肠菌群的测定 一：前期准备 一次性帽子、口罩、脚套 1， 移液管10ml 量筒100ml ｝ 玻璃珠 三角瓶 培养皿 2， 乳糖胆盐发酵培养基（用于乳糖发酵） 乳糖发酵培养基（用于复发酵） 伊红美蓝培养基（用于分离培养） } 121℃，15min 无菌水 } 121℃，15min 二：实验过程 无菌条件下进行： 10.0g 固体样品/10ml 液体样品 ↓ 三角瓶（带玻璃珠，90ml 无菌水）1:10=10-1 ↓ 200r/min 振荡30min ↓ 吸取10-1—5ml ，加入45ml 无菌水（提前准备）1:100=10-2 ↓ 吸取吸取10-2—5ml ，加入45ml 无菌水（提前准备）1:1000=10-3 ↓ ……依次稀释得到10-4，10-5等浓度稀释液（每个稀释度必须更换无菌移液管） ↓ 选取三个连续适宜稀释液，分别吸取1.0ml 加入到乳糖胆盐发酵管内（装有乳糖胆盐发酵培 养基）（每一稀释度接种3支发酵管） ↓ 培养箱45℃，24h ↓ 结果：产酸，颜色变；产气，导管有气泡 不产酸，不产气，为粪大肠菌群阴性 ↓ 分离培养：从产酸产气或只产酸的发酵管中挑取发酵液在伊红美蓝培养基平板上划线 ↓ 培养箱36℃，18-24h ↓ 证实实验：从平板上挑取可以菌落，进行革兰氏染色。 结果：染色反应阳性者为粪大肠菌群阴性 ↓ 革兰氏阴性无芽孢杆菌，则挑取同样菌落接种在乳糖发酵管中（装有乳糖发酵培养基） ↓ 培养箱44.5℃，24h ↓ 结果，不产气为粪大肠菌群阴性，产气为粪大肠菌群阳性 ↓ 证实为粪大肠菌群阳性的，根据粪大肠菌群阳性发酵管数，查MPN 检索表，得出每克（毫 升）肥料样品中的粪大肠菌群数 ｝160℃，4h ｝115℃，15min
职业教育环境监测与治理技术专业教学资源库 《环境监测》练习题 1 《粪大肠菌群的测定》练习题 备注：每题后面的简单、一般、困难是指题目的难易程度。 一、选择题 1.EC 培养液的配比是：胰胨20g ，乳糖5g ，氯化钠5g ，磷酸二氢钾1.5g ，胆盐三号1.5g ，磷酸氢二钾4g ，溶解于1000mL 蒸馏水中。在( C )℃灭菌15min ，灭菌后pH 为6.9。（一般） A 、37 B 、115 C 、121 D 、165 2.检测粪大肠菌群时作发酵试验用的培养基，是由蛋白胨、牛肉浸膏、乳糖、氯化钠等配制而成的，调节pH 为( B )，应在115℃灭菌20min 。（一般） A 、5.2-5.4 B 、7.2-7.4 C 、9.2-9.4 D 、12.2-12.4 二、判断题 1.粪大肠菌群是总大肠菌群一部分，用粪大肠菌群作为卫生学指标比用总大肠菌群更有代表性。目前，粪大肠菌群被认为是受粪便污染的最实用的指示菌。（√）（一般） 2.为了区别存在于自然环境中的大肠菌群和存在于温血动物肠道内的大肠菌群,可将培养温度提高到44℃，在此种条件下仍能生长并使发酵乳糖产酸产气，则称为粪大肠菌群。（√）（一般） 3.进行复发酵试验时，用3mm 接种环或灭菌棒将培养物转接到EC 培养液中。在44±0.5℃水浴下培养24±2h 。培养后观察发酵管产气表明确信试验阴性。（×）（困难） 三、问答题 1.简述粪大肠菌群指标的含义及常用测定方法。（一般） 答案：（1）粪大肠菌群是总大肠菌群中的一部分，主要来自粪便，在44.5℃温度下能生长并发酵乳酸产酸产气的大肠菌群称为粪大肠菌群。（2）粪大肠菌群指标常用的测定方法为多管发酵法，它是根据统计学理论，估计水体中的大肠杆菌密度和卫生质量的一种方法。
BS ISO 4832:2006食品和动物饲料的微生物学大肠菌群计数水 平法--菌落计数技术 序 ISO是国际标准的全球性组织。准备国际标准这项工作通常由ISO技术联盟来完成。每一个团体成员负责各自的学科。与ISO有合作的国际性机构、政府与非政府机构，也有参与这项工作。ISO与国际电子组织（IEC）在电子标准化方面有着密切的合作关系。 国际性标准的起草原则在《ISO/IEC 细则》第三部分中有给出。 起草的国际性标准被技术委员会采用是通过全体成员投票决定的。发布一个国际性标准需要至少75％成员投赞成票。国际性标准ISO 4831 由ISO/IEC 34技术委员会（农产品，小组委员会SC9，微生物）起草的。 这个第三版的ISO 4832取代了ISO 4832:1991和ISO 5541-1:1986。主要的修改内容如下： ——在35℃下培养这个可选择的程序已被删除（见4.2）； ——引入使用亮绿乳糖胆汁培养基做确证实验（见5.4和9.4）。 考虑到本标准的上一个版本已被修改，已确认ISO 4832:1991的选择性方法不受影响。 绪论 由于食品与饲料的种类繁多，这个标准不一定适合某一类产品。在这种情况下，可使用不同的方法，但必须有绝对的技术上的理由。否则，要尽可能地完全遵循本标准。 当这个标准下一次回顾时，将会对这个标准的使用做数据统计，特殊产品偏离本标准使用也会做相关统计。 同一类产品的检测方法也有可能不统一，国际性标准和/或国家标准也不一定完全与本标准相符合。希望相关标准做回顾时，会遵循本标准做出相关的修改，以使只有已被证明的技术上的理由才能与本标准偏离。 本标准在技术上的描述没有ISO 4831那样精确，但大部分的微生物检测能根据本标准开展，每克或每毫升样品中含大数量的大肠菌群可使用本标准。此外，
消防器材检查记录表 Last revised by LE LE in 2021
消防器材（灭火器）检查记录表 设备编号：摆放位置：产品名称：灭火器数量 ※备注：检查项目正常打“√”，异常打“×”。 ※使用方法：1、先上下颠倒几次，使干粉松动。2、然后拔去保险销。3、对准火焰根部，压下压把，灭火剂便会喷出灭火。 ※负责部门：责任人： 消防器材（灭火器）检查记录表 设备编号：摆放位置：产品名称：灭火器数量： ※备注：检查项目正常打“√”，异常打“×”。 ※使用方法：1、先上下颠倒几次，使干粉松动。2、然后拔去保险销。3、对准火焰根部，压下压把，灭火剂便会喷出
※负责部门：责任人： 消防器材（灭火器）检查记录表 设备编号：摆放位置：产品名称：灭火器数量 ※备注：检查项目正常打“√”，异常打“×”。 ※使用方法：1、先上下颠倒几次，使干粉松动。2、然后拔去保险销。3、对准火焰根部，压下压把，灭火剂便会喷出灭火。 ※负责部门：责任人： 消防器材（灭火器）检查记录表 设备编号：摆放位置：产品名称：灭火器数量： ※备注：检查项目正常打“√”，异常打“×”。 ※使用方法：1、先上下颠倒几次，使干粉松动。2、然后拔去保险销。3、对准火焰根部，压下压把，灭火剂便会喷出灭火。
设备编号：摆放位置：产品名称：灭火器数量 ※备注：检查项目正常打“√”，异常打“×”。 ※使用方法：1、先上下颠倒几次，使干粉松动。2、然后拔去保险销。3、对准火焰根部，压下压把，灭火剂便会喷出灭火。 ※负责部门：责任人： 消防器材（灭火器）检查记录表 设备编号：摆放位置：产品名称：灭火器数量： ※备注：检查项目正常打“√”，异常打“×”。 ※使用方法：1、先上下颠倒几次，使干粉松动。2、然后拔去保险销。3、对准火焰根部，压下压把，灭火剂便会喷出灭火。 ※负责部门：责任人：
粪大肠菌群的测定 1、半个月前配好初、复发酵所需培养液 2、采样时用500ml 广口玻璃瓶分开采样，牛皮纸封口 3、操作 （1） 培养液 初发酵 单倍乳糖蛋白胨培养液： 蛋白胨 10 g 牛肉浸膏 3 g 乳糖 5 g 氯化钠 5 g 蒸馏水 1000ml 调节PH 为7.2—7.4（NaOH ） 6%溴甲基紫乙醇溶液 1 ml 充分混匀后 10ml （三倍是5ml ）分装于试管中，盖紧塞于蒸气锅中灭菌20min （0.1—0.5kpa ），冷却后于药品储存箱保存。 单月13个地表水（每个水样需10个单倍，5个三倍），2个创业（每个水样需15个单倍）。共190个（1900ml ）单倍，65个三倍（325ml ）。 双月10个地表水，2个创业。共130个（1600ml ）单倍，50个三倍（250ml ）。 创业的水一个月采两次水样 复发酵 EC 培养液 胰胨 20 g 乳糖 5 g 胆盐三号 1.5 g 磷酸氢二钾 4 g 磷酸二氢钾 1.5 g 氯化钠 5 g 蒸馏水 1000ml 充分混匀后 10ml 分装于试管中，盖紧塞于蒸气锅中灭菌20min （0.1—0.5kpa ），冷却后于药品储存箱保存。 三倍乳糖蛋白胨培养液： 蛋白胨 30 g 牛肉浸膏 9 g 乳糖 15 g 氯化钠 15 g 蒸馏水 1000ml 溴甲基紫乙醇溶液 3 ml
（2）做样 初发酵： 地表水15根管为一个水样。5根为一组。第一排为5ml三倍培养液，加10ml水样；第二排为10ml单倍培养液，加1ml水样；第三排为10ml单倍培养液，取1ml水样稀释至10ml后再从中取1ml至装有培养液的试管。 （10、1、0.1的取样量） 创业，每个水样15根单倍。同上逐级稀释，取样量为0.1、0.01、 0.001ml。 将初发酵管放入培养箱中培养，温度为37℃±0.5℃，时间为24h±2h。 观察：产酸产气为阳性，即变色且有气泡产生，可轻击试管查气泡。 复发酵： 呈阳性的试管进行接种后，做复发酵。将阳性的试管中溶液接种（接种环）到EC培养液中，放在45℃±0.5℃的水浴锅中培养24h±2h。水浴锅液面应高于管中液面。 观察：产气（有气泡）则证实为阳性。记录阳性试管数，查表可得MPN值。 结果表示单位为：个/L
滤膜法测定总大肠菌群 1 主题内容与适用范围 本方法规定了生活饮用水中总大肠菌群的滤膜测定方法。 本方法适用于生活饮用水和低浊度的水源水中总大肠菌群数的测定。 2 方法提要 用孔径为0.45μm的微孔滤膜过滤水样，细菌被截留在滤膜上，将滤膜贴在选择性培养基上，经培养后，计数生长在滤膜上的典型大肠菌群菌落数。 3 培养基与试剂 3.1 品红亚硫酸钠培养基 3.1.1 成份 A 蛋白胨10g B 酵母浸膏5g C 牛肉膏5g D 乳糖10g E 琼脂15~20g F 硫酸氢二钾3.5g G 无水亚硫酸钠5g左右 H 碱性品红乙醇溶液(50g/L) 20mL I 蒸馏水1000mL 3.1.2 储存培养基的制备 先将琼脂加到500mL蒸馏水中，煮沸溶解，于另500mL蒸馏水中加入硫酸氢二钾、蛋白胨、酵母浸膏和牛肉膏，加热溶解，倒入已溶解的琼脂，补充蒸馏水至1000mL，混匀后调pH为7.2~7.4，再加入乳糖，分装，115℃高压灭菌20min，储存于冷暗处备用。 3.1.3 平皿培养基的配制 将上法制备的储存培养基加热融化，用灭菌吸管按比例吸取一定量的5％碱性品红乙醇溶液置于灭菌空试管中，再按比例称取所需的无水硫酸钠置于另一灭菌试管中，加灭菌水少许，使其溶解后，置沸水浴中煮沸10min以灭菌。 用灭菌吸管吸取已灭菌的亚硫酸钠溶液，滴加于碱性品红乙醇溶液至深红色退成淡粉色为止，将此亚硫酸钠与碱性品红的混合液全部加到已融化的储存培养基内，并充分混匀(防止产生气泡)，立即将此种培养基15mL倾入已灭菌的空平皿中。待冷却凝固后置冰箱内备
用。此种以制成的培养基于冰箱内保存不宜超过二周。如培养基已由淡粉色变为深红色，则不能再用。 3.2 乳糖蛋白胨培养基 3.2.1 成份 A 蛋白胨10g B 牛肉膏3g C 乳糖5g D 氯化钠5g E 溴甲酚紫乙醇溶液(16g/L) 1mL F 蒸馏水1000mL 3.2.2 制法 将蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化钠溶于蒸馏水中，调整pH为7.2~7.4，再加入1mL1.6％溴甲酚紫乙醇溶液，充分混匀，分装于装有倒管的试管中，115℃高压灭菌20min，贮存于冷暗处备用。 4 仪器 4.1 滤器。 4.2 滤膜，孔径0.45~0.65μm。直经根据滤器规格，目前常用的有3.5cm和4.7cm两种。 4.3 抽滤设备。 4.4 无齿镊子。 4.5 培养箱: 36±1℃。 4.6 冰箱: 0~4℃。 4.7 天平。 4.8 显微镜。 4.9 平皿: 直径为9cm。 4.10 灭菌刻度吸管: 1mL,10mL。 5 检验步骤 5.1 准备工作 5.1.1 滤膜灭菌: 将滤膜放入烧杯中，加入蒸馏水，置于沸水浴中煮沸灭菌三次，每次15min。前两次煮沸后需更换水洗涤2~3次，以除去残留溶剂。
建筑消防（电气）设施检测记录表 一、汇总表检测时间：年月日至月日
检测员：记录员： 甲方现场负责人：施工单位现场负责人： 电话：电话： 建筑消防（电气）设施检测记录表 二、火灾自动报警系统检测时间： 1.消防控制室□: ⑴设置地点：； ⑵防火门□/普通门□，（钢质/木质/铝合金），防火玻璃□，门开启方向□，感烟探测器□；设备房名称标识□；相关制度□；对外直拨电话□；应急灯□，照明灯具□;无关管路通过□； ⑶正常照明时的工作面照度lx，应急照明时工作面照度lx。
⑷消防联动控制设备与输入/输出模块间的连线发生断路、短路故障时间秒。 ⑸火灾报警控制器(联动型)：柜式//琴台式/壁挂式/单列/双列/三列。 型号：数量：台，控制器、控制箱及门接地□； 生产厂家：出厂日期： 安装距离:正面m,后侧m,左侧m,右侧m,距地：m。 火灾报警控制器绝缘电阻:对地MΩ，相间MΩ；接地电阻Ω。 控制器主电直接连消防电源□，。备\专用蓄电池□。 2.不同系统、电压等级、电流类别的导线是否穿在同一管内□，物理位置。顶棚内布线穿管不到位□，未穿管□，物理位置。 3.手动火灾报警按钮□:安装高度: m, 物理位置，分区最远距离: m。 4.消防广播□: 消防广播扬声器背景噪音dB，最远点声强dB，物理位置，消防广播分区最远距离m。 5.消防电话□:安装高度: m，物理位置。 6.火灾警报装置（声光报警器）□: 背景噪音dB，声强dB，物理位置。 7. 火灾探测器内走道安装距离□: ⑴宽度小于3m内走道顶棚设置宜居中布置，感烟间距m；⑵距端墙距离m。 ⑶物理位置。 注:火灾探测器安装间距见GB50116-2013/第6.2.4条“在宽度小于3m的内走道顶棚上设置点型探测器时，宜居中布置。感温火灾探测器的安装间距不应超过10m；感烟火灾探测器的安装间距不应超过15m；探测器至端墙的距离，不应大于探测器安装间距的1/2。” 8.电梯机房□：
建筑消防(电气)设施检测记录表 、汇总表检测时间： _____ 年_月_日至_月_日
检测员：记录员： 甲方现场负责人：施工单位现场负责人： 电话：电话： 建筑消防（电气）设施检测记录表 二、火灾自动报警系统检测时间： _______________ 1. 消防控制室口： ⑴设置地点：________________________ ； ⑵防火门口/普通门□,（钢质/木质/铝合金），防火玻璃□，门开启方向□，感烟探测器口；设备房名称标识口；相关制度口；对外直拨电话□;应急灯□，照明灯具□;无关管路通过□; ⑶正常照明时的工作面照度_Jx ，应急照明时工作面照度_Jx 。 ⑷消防联动控制设备与输入/输出模块间的连线发生断路、短路故障时间_____________ 秒。 ⑸火灾报警控制器（联动型）：柜式//琴台式/壁挂式/单列/双列/三列。 型号：________________ 数量：—台，控制器、控制箱及门接地□; 生产厂家：______________________________ 出厂日期：______________ 安装距离：正面m, 后侧m, 左侧m, 右侧m, 距地：________________________ m。 火灾报警控制器绝缘电阻：对地M 1，相间M 1；接地电阻 ________________ 控制器主电直接连消防电源□, ________________ 。备专用蓄电池口。 2. 不同系统、电压等级、电流类别的导线是否穿在同一管内□，物理位置_____________________ 。 顶棚内布线穿管不到位□，未穿管□，物理位置___________________ 。 3. 手动火灾报警按钮口：安装高度:_m, 物理位置 _____________________ ，分区最远距离：_m_ 4. 消防广播口： 消防广播扬声器背景噪音—dB ，最远点声强—dB ，物理位置____________________________ 消防广播分区最远距离o 5. 消防电话口：安装高度: m ，物理位置_____________________________ o 6. 火灾警报装置（声光报警器）□: 背景噪音—dB ，声强—dB ，物理位置 _____________________________ o 7. 火灾探测器内走道安装距离□: ⑴宽度小于3m内走道顶棚设置宜居中布置，感烟间距」；⑵距端墙距离」o ⑶物理位置 注:火灾探测器安装间距见GB50116-2013/第6.2.4条“在宽度小于3m的内走道顶棚上设置点型探测器时，宜居中布置。感温火灾探测器的安装间距不应超过10m感烟火灾探测器的安装间距不应超过15m探测器至端墙的距离，不应大于探测器安装间距的1/2 °” 8. 电梯机房□:
肥料中粪大肠菌群的测定 一：前期准备一次性帽子、口罩、脚套 1，移液管{10ml 量筒100ml｝160℃，4h 玻璃珠160℃，4h 三角瓶160℃，4h 培养皿160℃，4h 2，乳糖胆盐发酵培养基（用于乳糖发酵）115℃，15min 乳糖发酵培养基（用于复发酵）115℃，15min 伊红美蓝培养基（用于分离培养）121℃，15min 无菌水121℃，15min 二：实验过程无菌条件下进行： 10.0g固体样品/10ml液体样品 ↓ 三角瓶（带玻璃珠，90ml无菌水）1:10=10-1 ↓ 200r/min振荡30min ↓ 吸取10-1—5ml，加入45ml无菌水（提前准备）1:100=10-2 ↓ 吸取吸取10-2—5ml，加入45ml无菌水（提前准备）1:1000=10-3 ↓ ……依次稀释得到10-4，10-5等浓度稀释液（每个稀释度必须更换无菌移液管） ↓ 选取三个连续适宜稀释液，分别吸取1.0ml加入到乳糖胆盐发酵管内（装有乳糖胆盐发酵培养基）（每一稀释度接种3支发酵管） ↓ 培养箱45℃，24h ↓ 不产酸，不产气，为粪大肠菌群阴性→实验终止→<3 结果：产酸，颜色变；产气，导管有气泡 ↓ 分离培养：从产酸产气或只产酸的发酵管中挑取发酵液在伊红美蓝培养基平板上划线 ↓ 培养箱36℃，18-24h ↓ 证实实验：无菌落→实验终止→<3 有菌落，进行革兰氏染色。 染色反应阳性者（紫色）→实验终止→<3 染色反应阴性者（红色）为粪大肠菌群阴性 ↓ 革兰氏阴性无芽孢杆菌，则挑取同样菌落接种在乳糖发酵管中（装有乳糖发酵培养基） ↓ 培养箱44.5℃，24h ↓ 结果，不产气为粪大肠菌群阴性→实验终止→<3 产气为粪大肠菌群阳性 ↓ 根据粪大肠菌群阳性发酵管数，查MPN检索表，得出每克（毫升）肥料样品中的粪大肠菌群数
滤膜法测定总大肠菌 群
滤膜法测定总大肠菌群 1 主题内容与适用范围 本方法规定了生活饮用水中总大肠菌群的滤膜测定方法。 本方法适用于生活饮用水和低浊度的水源水中总大肠菌群数的测定。 2 方法提要 用孔径为0.45μm的微孔滤膜过滤水样，细菌被截留在滤膜上，将滤膜贴在选择性培养基上，经培养后，计数生长在滤膜上的典型大肠菌群菌落数。 3 培养基与试剂 3.1 品红亚硫酸钠培养基 3.1.1 成份 A 蛋白胨 10g B 酵母浸膏 5g C 牛肉膏 5g D 乳糖 10g E 琼脂 15~20g F 硫酸氢二钾 3.5g G 无水亚硫酸钠 5g左右 H 碱性品红乙醇溶液(50g/L) 20mL I 蒸馏水 1000mL 3.1.2 储存培养基的制备 先将琼脂加到500mL蒸馏水中，煮沸溶解，于另500mL蒸馏水中加入硫酸氢二钾、蛋白胨、酵母浸膏和牛肉膏，加热溶解，倒入已溶解的琼脂，补充蒸
馏水至1000mL，混匀后调pH为7.2~7.4，再加入乳糖，分装，115℃高压灭菌20min，储存于冷暗处备用。 3.1.3 平皿培养基的配制 将上法制备的储存培养基加热融化，用灭菌吸管按比例吸取一定量的5％碱性品红乙醇溶液置于灭菌空试管中，再按比例称取所需的无水硫酸钠置于另一灭菌试管中，加灭菌水少许，使其溶解后，置沸水浴中煮沸10min以灭菌。 用灭菌吸管吸取已灭菌的亚硫酸钠溶液，滴加于碱性品红乙醇溶液至深红色退成淡粉色为止，将此亚硫酸钠与碱性品红的混合液全部加到已融化的储存培养基内，并充分混匀(防止产生气泡)，立即将此种培养基15mL倾入已灭菌的空平皿中。待冷却凝固后置冰箱内备用。此种以制成的培养基于冰箱内保存不宜超过二周。如培养基已由淡粉色变为深红色，则不能再用。 3.2 乳糖蛋白胨培养基 3.2.1 成份 A 蛋白胨 10g B 牛肉膏 3g C 乳糖 5g D 氯化钠 5g E 溴甲酚紫乙醇溶液(16g/L) 1mL F 蒸馏水 1000mL 3.2.2 制法
精心整理 检测报告 B&C（2017）字054号 标准名称水质粪大肠菌群的测定多管发酵法和滤膜法 标准号HJ/T 347-2007 编制日期2017年9月5日 编制人：校核人： 审核人：签发人：
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一、检测依据及设备 表1 检测方法标准及设备一览表 检测类别检测项目方法名称及编号仪器设备名称及型号仪器设备编号 水质粪大肠菌群水质粪大肠菌群的测定多 管发酵法和滤膜法 HJ/T 347-2007 超净台（） 恒温培养箱（） 水浴锅（） / 二、试剂和材料 （1）检测试剂：同HJ/T 347-2007中多管发酵法“试剂和材料”配制。 （2）检测样品：2009年9月1日取自遗爱湖1L水样。 三、检测步骤 同HJ/T 347-2007中多管发酵法“检测步骤”测定。 四、实验结果 4.1 样品测定 根据不同接种量的发酵管所出现阳性结果数目，从表3中查得每升水样中的粪大肠菌群。 4.2 实验结果 表2 多管发酵法测定粪大肠菌群的结果 初发酵实验2017年9月1日 至 2017年9月2日 将0.1mL、0.01mL和0.001mL水样分别接种到盛有乳糖蛋白胨培养液的5个10mL 发酵管中。在恒温培养箱中 37℃±0.5℃下培养 24h±2h。产酸和产气的发酵管表明试验阳性。如在倒管内产气不明显，可轻拍试管，有小气泡升起的为阳性。 接种量0.1mL 0.01mL 0.001mL 阳性试管数量 4 3 3 复发酵实验2017年9月2日 轻微振荡初发酵试验阳性结果的发酵管，用 3mm 接种环或灭菌棒将培养物转接到 EC 培养液中。在 44.5℃±0.5℃温度下培养 24h±2h（水浴锅的水面应高于试管中培养基液面）。接种后所有发酵管必须在 30min 内放进水浴中。培养后立即观察，发酵管产气则证实为粪大肠菌群阳性。
粪大肠菌群检测 一、室所用设备、器皿 1、无菌区工作台 2、恒温培养箱 3、高压蒸汽灭菌器 4、冰箱 5、酒精灯 6、天平 7、电炉 8、采样广口瓶 9、烧杯、玻璃棒 10 、玻璃发酵管 11、试管架 12、移液管 13、锥形瓶 二、药品：乳糖胆盐培养基 三、前期准备 1、玻璃器皿灭菌（高压蒸汽灭菌） 所用采集水样的广口瓶、玻璃试管、移液管、玻璃棒、锥形瓶等玻璃器皿均需放入高压锅灭菌。 广口瓶：将清洗干净的采样瓶盖好瓶盖，用牛皮纸、报纸等防潮纸将瓶盖、瓶顶和瓶颈处包裹好，用绳子绑好，置于121℃的高压蒸汽灭菌器灭菌15分钟。 玻璃试管、移液管、玻璃棒：用牛皮纸、报纸等防潮纸将其包裹好，置于121℃的高压蒸汽灭菌器灭菌15分钟。 2、采样 采取水样时，可握住瓶子下部直接将已灭菌的带盖采样瓶插入水中，约距水面10~15cm处，拔瓶盖，瓶口朝水流方向，使水样灌入瓶内然后盖上瓶盖，将采样瓶从水中取出。如果没有水流，可握住瓶子水平前推，直到充满水样为止。采好水样后，迅速盖上瓶盖和包装纸。 采好的水样，应迅速运往实验室，进行检验，一般从取样到检验不宜超过2h，否则应使用10℃以下的冷藏设备保存样品，但不得超过6h。 四、实验步骤（多管发酵法） 1、配制乳糖胆盐培养基试制 （注：做15管的话，10ml的要配双料的，如：30g配1000ml，就应称取60g配1000ml，其他1ml、0.1ml的配制成单料的）,配制试剂时不用定容，只需大概体积即可。 2、称取12g乳糖胆盐培养基溶于200ml蒸馏水中，置于电炉上加热至溶解完全为止，冷却至室温后，分装于玻璃发酵管里。（5管10ml） 3、称取6g乳糖胆盐培养基溶于100ml蒸馏水中，置于电炉上加热至溶解完全为止，冷却至室温后，分装于玻璃发酵管里。（10管10ml） 5、所有发酵管盖好盖子，包裹好置于高压锅灭菌15 分钟（第一次曝气开始计时） 6、分别加入5管10ml、5管1ml、5管0.1ml的水样于已冷却至室温的发酵管中，并置于恒温培养箱里培养24小时（温度为44.5℃） 五、结果 根据不同接种量的发酵管所出现阳性结果的数目，从MPN表中查得相应的MPN指数，按总大肠菌群的计算方法计算每升水中粪大肠菌群细菌的MPN值。
消防系统检查维护记录表 检查日期：20 年月日 序号检测标准结果备注 1.0 消防报警主机1、正常投入使用； 2、无故障点显示； 3、置于自动联动状态。 1、正常/不正常 2、个故障点 3、自动/手动状态 2.0 消防联动柜1、所有设备置于自动联动状态； 2、操作按钮（开关）完好； 3、指示灯完好； 4、标识完好。 1、自动/手动状态 2、完好/不完好 3、完好/不完好 4、完好/不完好 3.0 温感探测器1、温感探测器报警正常，灵敏度高； 2、主机系统报警显示正常，位置准确； 3、无故障点。 1、温感探测器报警正常/不正常 2、准确/不准确 3、个故障点 4.0 消防管道1、消防管道分布是否合理； 2、消防管道是否有漏水； 3、消防栓水压是否正常。 1、合理/不合理 2、漏水/不漏水 3、水压正常/不正常 5.0 手动报警按钮1、手动报警按钮报警功能正常； 2、主机报警信息位置显示准确。 1、手动报警正常/不正常 2、准确/不准确 6.0 疏散通道1、防火门的门扇以及五金配件完好，保持常闭，无上锁 通道门； 2、消防疏散指示灯完好、照明灯光完好； 3、通道畅通，无任何垃圾、杂物； 4、护栏牢固、完好。 1、防火门正常/不正常 2、消防疏散指示灯完好/不完好 3、通道畅通/否 4、完好/不完好好。 7.0 手提灭火器1、公共区域、机房、后勤区域、所有生产区域均有按规 定配置，放置位置正确,数量足够； 2、罐体完好，压力处于正常状态； 3、有否按时对灭火器进行年检。 1、正常/不正常 2、罐体完好/不完好 3、有/否 8.0 值班室1、值班员熟练操作系统；（每三个月一次培训） 最后一次培训日期： 2、图纸、资料、上墙文件齐全完好； 3、消防应急物资齐全完好； 4、专用钥匙、备用钥匙齐全、有效。 1、培训日期月日 2、完好/不完好 3、消防应急物资齐全/不齐全 4、钥匙齐全/不齐全 9.0 其他1、紧急联络电话已放置在现场（值班室、前台、办公区 域、保安）； 2、每年进行消防安全及意识教育培训； 3、生产区和生活区分别进行消防应急预案/演习（每六 个月一次） 最近一次的消防演习日期： 1、齐全/不齐全 2、最近一次的人员培训日期： 3、消防演习月日 检查人：审核： 第 1 页共 1 页
水质总大肠菌群和粪大肠菌群的测定多管发酵法 1. 原理 总大肠菌群和粪大肠菌群可用多管发酵法或滤膜法检验。多管发酵法的原理是根据大肠菌群能发酵乳糖、产酸、产气，以及具备革兰氏染色阴性，无芽孢，呈杆状等有关特性，通过三个步骤进行检验求得水样中的总大肠菌群数。试验结果以最可能数（most probable number），简称MPN表示。 2. 仪器 (1)高压蒸气灭菌器。 (2)恒温培养箱、冰箱。 (3)生物显微镜、载玻片。 (4)酒精灯、3mm接种环。 (5)培养皿（直径100mm）、试管（5×150mm），吸管（1、5、10mL）、烧杯（200、500、2000mL）、锥形瓶（500、1000mL）、采样瓶、移液枪。 3. 培养基及染色剂的制备 3.1 乳糖蛋白胨培养液：将10g蛋白胨、3g牛肉膏、5g乳糖和5g氯化钠加热溶解于1000mL蒸馏水中，调节溶液pH为7.2～7.4，再加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1mL，充分混匀，分装于试管中，于121℃高压灭菌器中灭菌15min，贮存于冷暗处备用。 3.2 三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液：按上述乳糖蛋白胨培养液的制备方法配制。除蒸馏水外，各组份用量增加至三倍。 3.3伊红美蓝培养基： ①贮备培养基的制备：于2000mL烧杯中，先将20g琼脂加到900mL蒸馏水中，加热溶解。再加2.0g邻酸二氢钾及10g蛋白胨，混合使之溶解，用蒸馏水补充至1000mL，调节溶液pH值为7.2～7.4。趁热用脱脂棉或绒布过滤，再加入10g乳糖，混匀后定量分装于250mL或500mL锥形瓶内，于121℃高压灭菌15min，贮于冷暗处备用。 ②平皿培养基的制备：将上述制备的贮备培养基融化。根据锥形瓶内培养基的容量，用灭菌吸管按比例分别吸取一定量已灭菌的2%伊红水溶液（0.4g伊红