第4章消毒与灭菌
消毒与灭菌是临床医学和微生物学中十分重要的基本操作技术。由于微生物广泛存在于自然界，其中有些又是病原微生物，因此，从预防感染的角度出发，医务工作者必须牢固树立无菌观念和严格执行无菌操作。例如医疗器械、注射器、手术室和无菌室等均需用适宜的方法进行消毒或灭菌。为防止疾病传播，对于传染病患者的排泄物以及实验室废弃的培养物也要进行消毒或灭菌处理。微生物易受外界条件的影响，如果环境适宜，可促进微生物的生长繁殖；剧烈的环境变化则可使微生物生长受到抑制至死亡。采用的方法不同，达到的效果也有差异。以下是有关消毒
1指杀死物体上病原微生物的方法，但不一定能杀死含
（
2指杀灭物体上所有微生物的方法，包括全部病原微生
3是指防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。如注射针剂
被称作抑菌剂（bacteriostat）。
4无菌指不含有活的微生物，为
进行外科手术时需要防止细菌进入创口，微生物学实验操作中要注意防止微生物的污染和感染。
第一节物理消毒灭菌法
消毒与灭菌的方法一般分为物理学方法、化学方法两大类。用于消毒灭菌的物理因素主要有热力、紫外线、辐射、超声波和滤过除菌等方法。
一、热力灭菌法
高温对微生物有明显的致死作用，其主要是通过变性蛋白质、破坏细胞膜和降解核酸达到杀菌作用。因而常用于消毒和灭菌。热力灭菌法分为干热灭菌和湿热灭菌两大类，在同一温度下，湿热灭菌的效力优于干热灭菌。这是因为：①湿热中微生物的蛋白较易凝固；②湿热的穿透力比干热大；③湿热的蒸气有潜热存在，水由气态变为液态时可释放出潜热，能迅速提高被灭菌物体的温度。多数无芽胞细菌对湿热敏感，55～60℃作用30～60分钟后死亡。80℃作用5～10分钟可杀死所有细菌的繁殖体和真菌。细菌的芽胞对高温抵抗力强，例如炭疽芽胞杆菌的芽胞，可耐受5～10分钟煮沸，肉毒梭菌的芽胞则需煮沸3～5小时才死亡。
（一）干热灭菌法
1．焚烧和烧灼法是一种彻底的灭菌方法。废弃的物品或有感染性的动物尸体等可以直接点燃或在焚烧炉内焚烧。微生物学实验室用的接种环、试管口、瓶口等的灭菌用烧灼的方法。
2．干烤利用干烤箱灭菌，一般加热至160～170℃经2 小时。适用于高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品，例如玻璃器皿、瓷器、玻璃注射器等的灭菌。
3．红外线红外线是一种0.77～1000μm波长的电磁波。波长在1～10μm时的热效应最强。红外线的杀菌作用与干热相似，利用红外线烤箱灭菌所需的温度和时间亦同于干烤。由于热效应只能在照射到的表面产生，因此不能使物体均匀加热。此法多用于医疗器械的灭菌。
（二）湿热灭菌法
1用较低温度杀灭液体中的病原菌（如结核分法。此法由巴斯德创立。方法是加热至61.1～62.8℃ 30分钟或71.7℃加热15～30秒，
2在1个大气压下，水的煮沸温度为100℃，5 分
3h，对个别细菌的芽胞则需5小时才能杀死。若在水中加2%的碳酸钠，可提高沸点温度达105℃，不仅可缩短煮沸时间，还可防止金属器皿生锈。煮沸法可用于餐具、金属器皿的消毒，时间至少应在10
3又称常压蒸汽消毒法，在一个大气压下，
100℃15～30 分钟被杀死，但不易杀死芽胞。该法常用的器具是Arnold消毒器，我国的蒸笼具有相同的原理。可用
5利用反复多次的流动蒸气间歇加热,Arnold灭菌器（可用蒸笼代替）中，经100℃15～30 分钟，杀死其中的繁殖体，取出后放37℃孵箱过夜，使芽胞发育成繁殖体，次日再蒸一次，如此连续三次以上，可达到灭菌的效果。此法适用于
5是一种最有效、最常用的灭
或1.05kg/cm2)，水的沸点达到121.3℃，保持15～20分钟，即可杀死包括细菌芽胞在内所有微生物。常用于细菌培养基、玻璃器皿、生理盐水、手术敷料等耐高温、耐湿制品的灭菌。
二、辐射杀菌法
（一）紫外线（ultraviolet radiation, UV）
紫外线的波长为10～400nm，波长在240～280nm的紫外线（包括日光中的紫外线）均具有杀菌作用，其中以265～266nm杀菌作用最强，这与DNA的吸收光谱
范围一致。紫外线的杀菌机理是作用于DNA，使一条DNA链上相邻两个胸腺嘧啶共价结合而形成二聚体，干扰DNA的转录复制，进而影响蛋白质合成而引起微生物的死亡。紫外线穿透力较弱，普通玻璃、纸张、尘埃、水蒸气等均能阻挡紫外线。因此仅适用于空气、物体表面的消毒灭菌，如无菌室、手术室、烧伤病房、传染病房、细胞培养室的空气消毒及不耐热物品的消毒。
杀菌波长的紫外线对人体皮肤、眼睛有损伤作用，并可诱发皮肤癌，应注意防护。
（二）电离辐射（ionizing radiation）
电离辐射包括X射线、γ射线和高速电子等。在足够剂量时，对各种细菌均有致死作用。其机制在于电离辐射可在瞬间产生大量的自由基，能破坏DNA的正常复制，损伤细胞膜以及产生H2O2都对细菌有致死作用。电离辐射常用于大量一次性医用塑料制品、生物制品的消毒，亦可用于食品的消毒，而不破坏其营养成分。
（三）微波（microwave）
微波是一种波长为1mm到1m的超高频电磁波，其机理是利用高频电场产生高频电磁场造成分子剧烈运动而产生热量，使微生物蛋白质变性凝固。微波可穿透玻璃、塑料薄膜与陶瓷等物质，但不能穿透金属表面，多用于检验室用品、食品食具、药杯等用品的消毒。常用微波炉有2 450MHz（2450兆赫）和915MHz。微波对人体有害，应减少接近工作中的微波炉的次数。
三、滤过除菌法
（filter），滤菌器有许多微细的小孔（0.22~0.45μm），只允许液体或气体通过，而大于孔径的细菌等颗粒则被阻隔在筛板或滤膜的上面。该方法主要用于不耐热的血清、毒素、抗生素，细胞培养液的除菌以及生物安全柜和空气中的虑过除菌。目前常用的有一下4种滤菌器。
1．玻璃菌滤器(glass filter) 在玻璃漏斗嵌入玻璃砂筛板制成。分G1-G6 6个型。G1-G 4孔径大，用于滤清液体，G5和G6用于除菌。G6除菌较G5彻底，但支原体和L型细菌仍有通过的可能，使用时应予注意。
2．石棉滤菌器（asbestos filter）（亦称Seitz滤菌器）在金属夹持容器底部嵌以石棉虑板，按石棉虑孔大小分为K,EK和EK-S 3种。常用EK型除菌，EK-S型尚可阻止较大病毒通过。
3．薄膜滤菌器(membrane filter) 是将不同孔径的硝化纤维素薄膜固定在相应滤器的下部。薄膜滤器有不同容量及不同孔径规格，其中以微量针头滤器在实验室较常用。主要用于小剂量液体的除菌。
4．高效空气颗粒滤菌器(high efficiency particulate air, HEPA filter) 为大型滤器。其是应用空气压缩机产生一定压力的空气气流，通过一定孔径的过滤板以除去空气中小于0.3μm 的颗粒。如医院的手术室、烧伤病房、无菌制剂室及超净工作台等的除菌。
四、超声波杀菌法
～100kHz的高频声波对病原微生物具有一
在10μm的小空腔，小空腔逐渐增大，最后爆裂而产生巨大压力，爆裂时的压力可达到1 000个大气压，其能破坏病原微生物的结构而引起微生物的死亡。超声波杀灭病原微生物不彻底，但能明显减少病原微生物的数量。可用于餐具消毒。目前主要应用超声波粉碎细胞，以提取细胞组分或制备抗原等。
五、其他物理抑菌或杀菌方法
低温、高渗和干燥也具有一定的抑菌或杀菌的作用。
（一）低温
低温可降低病原微生物的新陈代谢，抑制其生长繁殖。不但不能杀死病原微生物，还有利于病原微生物的长期存活，故常利用低温保存病原微生物。利用低温贮藏食品和药品不容易发生变质。
利用低温反复多次的冻融可明显减少细菌的数量。因而有一定的消毒灭菌作用。因为冷冻时细菌内部水分形成结晶，能损伤细胞结构，破坏细胞内胶质状态，并可产生膨胀，导致细菌崩解。实验室常用此原理制备细菌的可溶性抗原。
（二）干燥
干燥可使病原微生物脱水、浓缩，新陈代谢减缓，甚至引起死亡。不同病原体对干燥环境的耐受性不同，如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、苍白密螺旋体和流感病毒等对干燥敏感；而结核分枝杆菌、溶血性链球菌、炭疽芽胞杆菌芽胞以及真菌、乙型肝炎病毒等对干燥有一定抵抗力。干燥法主要用于保存食物，防止食物变质。
（三）冷冻真空干燥法（lyophilization）
冷冻真空干燥法是在低温状态下真空抽去菌体内的水分，既可以使病原微生物脱水、新陈代谢减缓，又可避免冷冻时菌体内水分结晶对细菌的损伤。是目前保存菌种的最好方法，一般可保存微生物数年至数十年。
第二节化学消毒灭菌法
许多化学药物具有杀灭病原微生物或抑制其生长繁殖的功能。这类化学药物主要有消毒剂和防腐剂。消毒剂和防腐剂对病原微生物和人体组织细胞都有毒害作用，故只能外用或用于环境的消毒。
一、消毒剂
（一）消毒剂的分类
1．根据消毒剂的杀菌机制分类
（1）使微生物蛋白质变性或凝固：如高浓度的重金属盐类、酚类，醇类、醛类及酸碱类等。
（2）干扰微生物的酶系统和代谢环节：如低浓度的重金属盐类及氧化剂。这类消毒剂能与微生物某些酶分子上的-SH基结合而使其丧失酶活性。
（3）损伤微生物膜结构：某些阳离子表面活性剂如苯扎溴铵、脂溶剂及低浓度的酚类等能降低微生物表面的张力，使细菌细胞膜或病毒包膜通透性增强，胞外液体内渗，导致细菌细胞或病毒的裂解。
2．按消毒剂的化学结构和性质分类
（1）醇类：杀菌机制主要是能使菌体蛋白质变性并能溶解细菌细胞膜中的脂类。如异丙醇杀菌作用强，挥发性低，但毒性较高；乙醇是临床最常用的消毒剂，70％～75％浓度的乙醇杀菌力最强，因高浓度的醇类能使菌体表面蛋白迅速凝固而降低杀菌效力。主要用于皮肤消毒和浸泡体温计等。
（2）酚类：低浓度时破坏菌细胞膜，改变膜的通透性；高浓度时使菌体蛋白凝固变性。也有抑制细菌脱氢酶、氧化酶等作用。常用的有石碳酸、来苏、洗必泰等酚类化合物。
（3）表面活性剂：又称去污剂，能降低液体的表面张力，使物品表面油脂乳化易于清除。表面活性剂通过疏水性基团与细菌细胞膜的疏水区结合而破坏细胞膜。表面活性剂分阳离子、阴离子和非离子三种类型。细菌多带阴电荷，易与阳离子表面活性剂结合，因而杀菌效果最好，常用消毒制剂有新洁尔灭和杜灭芬；阴离子表面活性剂有烷苯磺酸盐和十二烷基硫酸钠。肥皂主要成分为脂肪酸，解离后带阴电，亦属于阴离子表面活性剂，有杀菌作用。阳离子和阴离子表面活性剂不能同时使用，否则易相互降低效果。非离子型消毒剂对细菌无毒性，有些反而有利于细菌的生长，如吐温80（tween 80）对结核分枝杆菌有刺激生长作用。
（4）氧化剂和卤素类：氧化剂主要依靠其氧化能力杀菌，其可与酶蛋白中的-SH 基结合，使其转变为－SS－二硫键而导致酶活性的丧失。常用的有过氧化氢和过氧乙酸。过氧乙酸易分解，并有刺激性与腐蚀性，不适用于金属器具等的消毒。
用于消毒的卤素有碘和氯两类，氯易与蛋白质结合，使菌体蛋白变性。氯溶于水后形成次氯酸和盐酸，而次氯酸具有很强的杀菌作用。氯多用于水的消毒。碘对细菌繁殖体和芽胞都有强大的杀伤作用，常用于外科手术部位的消毒。碘与表面活性剂混合使用称碘伏（iodophors）。
（5）烷化剂：主要是通过对微生物蛋白质及核酸的烷化作用而杀菌；其杀菌谱广，杀菌力强。常用的烷化剂有甲醛、环氧乙烷和戊二醛等。环氧乙烷对分枝杆菌、病毒、真菌和细菌芽胞均有较强的杀伤作用。缺点是对人体有一定毒性。有些烷化剂，如β－丙脂等可能有致癌作用。
（6）重金属盐类：大多数重金属单独或以化合物的形式，通过使微生物蛋白质变性与沉淀，或灭活微生物酶类发挥杀菌作用。常用的消毒剂有氯化汞、硝酸银等。
3．按消毒剂杀菌的效力分类
（1）高效消毒剂（high-level disinfection）：可以杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物。这类消毒剂有甲醛、戊二醛、环氧乙烷、过氧乙酸。
（2）中效消毒剂（intermediate-level disinfection）：能够杀灭除细菌芽胞以外的微生物，包括细菌的繁殖体、多数病毒和真菌。这类消毒剂有乙醇、酚类、含氯消毒剂及碘伏等。
（3）低效消毒剂（low-level disinfection）：能杀死细菌的繁殖体及有包膜的病毒，对真菌有一定作用。新洁尔灭及洗必泰等属于这类消毒剂。
（二）常用消毒剂的种类与应用
消毒剂种类很多，其性质、杀菌能力和作用机制各异，因此用途也就不同。使用时要根据不同的消毒对象来选择消毒剂。常用消毒剂的种类与应用见表4-1。
表4-1 常用消毒剂的种类、作用机制与用途
类别作用机制常用消毒剂与剂量用途
醇类蛋白质凝固与变性，溶
解细胞膜
70%～75%乙醇皮肤、体温计消毒；
酚类损伤细胞膜，灭活酶类，
高浓度导致蛋白质凝固3%～5%石碳酸
2%来苏
0.01%～0.05%
洗必泰
地面、器具表面的消毒，皮
肤消毒；
术前洗手、阴道冲洗等；
表面活性剂损伤细胞膜，灭活氧化
酶活性，蛋白质变性0.05%～0.1%新洁尔灭
0.05%～0.1%杜灭芬
粘膜和皮肤消毒；术前洗手；
浸泡器械；
氧化剂和卤素类氧化作用，蛋白质沉淀0.1%高锰酸钾皮肤、尿道、蔬菜、水果消
毒；
3%过氧化氢深部创伤及外耳道消毒；
0.2%～0.3%过氧乙酸塑料、玻璃和人造纤维；
2.0%～2.5%碘酒皮肤消毒；
0.2ppm～0.5ppm氯饮水及游泳池消毒；
10%～20%漂白粉地面、厕所与排泄物消毒；
0.2%～0.5%氯胺室内空气及物体表面消毒，
0.1%～1.2%浸泡衣服；
0.5%～1.5%漂粉精饮水消毒：0.3%～0.4%/kg；
1%碘伏皮肤、粘膜消毒；
重金属盐类氧化作用，蛋白质变性
与沉淀，灭活酶类0.05%～0.01%升汞
2%红汞
0.1%硫柳汞
1%硝酸银
1%～5%蛋白银
非金属器皿的消毒；
皮肤、粘膜、小创伤消毒；
皮肤消毒、手术部位消毒；
新生儿滴眼、预防淋病奈瑟
菌感染。
烷化剂菌体蛋白质及核酸烷基
化10%甲醛
50mg/L环氧乙烷
2%戊二醛
物品表面消毒，空气消毒；
手术器械、敷料等消毒；
精密仪器、内窥镜等消毒；
染料抑制细菌繁殖，干扰氧
化过程
2%～4%龙胆紫浅表创伤消毒
酸碱类破坏细胞膜和细胞壁，
蛋白质凝固
5～10ml/m3醋酸加等量
水蒸发
生石灰(按1∶4～1∶8
比例加水配成糊状)
空气消毒；
地面、排泄物消毒；
二、防腐剂
防腐剂主要用于生物制剂、制药、食品、饮品等的防腐。医药上所使用的防腐剂多采用低浓度的消毒剂，以抑制细菌的生长，延长保存时限。常用的防腐剂有叠氮钠、氯仿（三氯甲烷）、硫柳汞、甲醛、石碳酸、尼泊金、山梨醇和苯甲酸钠等，后二种多用于食品与饮品的防腐。
三、影响消毒灭菌效果的因素
一般而言，消毒灭菌的效果与消毒剂自身的性质、环境以及微生物的种类、数量等多种因素有关。在使用消毒剂时应予以注意。
（一）消毒剂的化学性质、浓度与作用时间
各种消毒剂的理化性质不同，对微生物的作用效果也有差异。例如阳离子表面活性剂对革兰阳性菌的杀灭效果比对革兰阴性菌好；龙胆紫对葡萄球菌作用较强。同一种消毒剂浓度增加，则杀菌作用增强（乙醇例外），降低消毒剂的浓度，只能起到抑菌防腐作用。一定浓度的消毒剂，作用时间愈长，杀菌效果越愈好。
（二）微生物的种类与数量
微生物的种类和结构特点不同对消毒剂的敏感性不同。例如细菌的芽胞及结核分枝杆菌对消毒剂的抵抗力较一般细菌的繁殖体强。有胞膜的病毒对脂溶性消毒剂比无胞膜病毒敏感。因此，要根据消毒对象选择合适的消毒剂。此外，被消毒的物品中微生物含量多时，应延长消毒的时间。
（三）环境温度与酸碱度
消毒剂的灭菌效果可随温度提高而增强。如使用2%戊二醛杀灭104/ml的炭疽芽胞杆菌，56℃时仅需1分钟，而20℃时则需15分钟。
酸碱度也直接影响消毒剂的杀菌效果，如新洁而灭和戊二醛在碱性条件下杀菌效果好，而酚类、碘则在酸性条件下杀菌作用好。
（四）有机物
环境中的有机物（痰、脓汁和排泄物中的蛋白质等）与消毒剂结合，不仅消耗药品，还可阻碍消毒剂与病原菌的接触而降低杀菌效果。因此医疗器具在消毒灭菌前应先清除其表面的污物，在进行消毒灭菌处理。
第三节生物安全
为操作或人类活动，导致生物体或其产物对人类健康和生态环境引起现实损害或存在潜在风险。生物危害主要来自生物实验室及生物恐怖活动。
一．实验室生物安全
实验室的生物安全不仅指保护实验室工作人员，而且还涉及要保护整个单位的员工及社会群体的安全。实验室人员对生物安全的正确认识、严格遵守实验室行为准则和实验操作规范的科学作风，是提高实验室生物安全的最重要基础和保证。此外，微生物的危害性以及实验室的防护设施也是影响实验室生物安全的重要因素。
（一）生物危害程度的分级
根据微生物以及各种生物活性因子对个体和群体的危害性将其分为四级：
I级：指危害性最低的微生物和寄生虫等生物因子。其绝大部分不感染人类。
Ⅱ级：指中等危害性的生物因子。这类生物因子所致的感染有有效药物或疫苗用于防治。伤寒沙门菌、霍乱弧菌，铜绿假单胞菌、各型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒(HIV)、以及弓形虫等均属于Ⅱ级。
Ⅲ级：指那些可能通过气溶胶感染或能导致严重后果的生物因子。其所致的感染和疾病，可以用抗生素等药物治疗，有些可以用疫苗预防。例如结核分枝杆菌、炭疽芽胞杆菌、霍乱弧菌、鼠疫耶氏菌、布氏菌，各型脑炎病毒、出血热病毒和贝纳柯克次体等。
Ⅳ级：：可通过气溶胶感染的危险的或致死性的生物因子，如天花病毒、马尔堡病毒、埃博拉病毒、森林脑炎病毒。其引起的感染性疾病—般难以治疗，亦无有效疫苗进行预防。其感染可能在人群中，人与动物之间和动物相互之间迅速传播。
（二）实验室的生物安全防护设施
实验室最有效、最常用的防护设施是生物安全柜，它可使感染性气溶胶局限于一
BSL-1、BSL-2、BSL-3和BSL-4
BSL-1、BSI-2实验室为普通建筑结构实验室，一般要求墙面、地面应可以清洗、消毒，有室内洗手池；BSL-2应配备高压灭菌设备及生物安全柜等设施。BSL-3实验
室要求建筑物为可隔离区域。实验室分清洁区、半污染区和污染区，各区之间设缓
冲间。半污染区设有可自动关闭的安全门，有独立的负压保护通风系统。要求实验
室内保持负压、排出空气经高效滤材过滤不得循环使用。BSL-4实验室设施与BSL-3 实验室基本相同，但选址应远离人口密集地区，周围有封闭的安全隔离带，有单独
的供气和排气系统，污染区和半污染区之间有化学消毒喷淋装置，排风装置必须双
重过滤等。
进行不感染人或动物的微生物工作时，采用BSL-1；如果病原体不形成气溶胶，如
肝炎病毒、多数肠道致病菌及金葡萄球菌等采用BSL-2；如果病原体传染性强，且
能通过气溶胶传播，或在操作时可能发生大量接触的，均应采用BSL-3。BSL-4仅
在极少数情况下采用。
二对生物恐怖活动的防范
生物恐怖活动是利用强致病力的细菌、病毒等微生物攻击人群，对社会公众及环
境造成严重危害的一种活动。
（一）生物恐怖威胁的分级
对此尚无统一的标准。目前各国参照较多的是美国疾病控制中心(CDC)的
三级分类，即A级(最大危害)，B级(中等危害)和C级(最低危害)。
（二）可用做生物战剂的病原微生物
属于生物恐怖A级的病原微生物主要有炭疽芽胞杆菌、鼠疫耶氏菌、A型土拉弗朗
西斯菌、出血热病毒（埃博拉出血热病毒、马尔堡出血热病毒和流行性出血热病毒等）天花病毒及由镰刀菌属的真菌产生的T2毒枝菌素(T2毒素)。
（三）生物战剂的传播方式及特点
生物恐怖活动中所使用的病原体制剂常为分散的细小颗粒状，其易以气溶胶形式在空气中传播，人可经呼吸道、眼部及皮肤感染。另一种方式是利用媒介生物携带细菌、病毒、立克次体及生物毒素，通过媒介生物叮咬人或污染环境，经皮肤、消化道、呼吸道侵入人体，引起传播。常利用的媒介生物有蚊子、苍蝇、蜚蠊、臭虫、虱子、跳蚤等昆虫以及鼠类。这些生物战剂具有传染性强，毒力强，传染面积广，危害时间长，施放手段隐蔽不容易被发现等特点。
（四）防范措施
生物恐怖活动发生有着隐蔽性、突发性、致病性强，传播速度快等与经典的传染病不同的独特特点。在防范、处理生物恐怖活动发生方面应从以下方面着手。
1．特异性预防加强生物恐怖病原的相关基础和医学防治研究，研制有效疫苗和治疗药物。
2．对生物恐怖袭击做好应急准备卫生部门应储备所需的疫苗、抗毒素和抗生素，以便及时正确救治病人，减少继发性传播，有效地控制和消灭疫情。
3．开展早期诊断技术和诊断试剂对突发生物恐怖活动事件，应根据现场信息的判定分析及病原检测结果，快速而准确的做出诊断。
4．加强防范有害媒介生物传播疾病的措施，开展群众性的卫生运动,消灭有害媒介生物，建立科学、高效的监控系统网，及时掌握各种媒介生物及其传染病的动态和变化。
5．应急措施一旦生物恐怖发生，根据病原的不同采取不同措施。主要是要注意个人及集体防护，如带防护口罩（N95或N98）、手套；保护食物及水源；对被污染环境、物品进行消毒灭菌处理；对病人及时应用抗菌或抗病毒药物，并根据病情进行对症处理。
第五章预防与控制医院感染 一．??单选题（每题1分） 1.对被特殊感染而无保留价值的物品，最彻底的无菌方法是() A煮沸消毒灭菌法?B高压蒸气灭菌法?C燃烧灭菌法?D熏蒸法 2.乙醇消毒的作用原理是（） A破坏细胞膜的结构B与菌体蛋白的氨基结合使其变性 C使菌体蛋白凝固变性?D干扰细菌酶的活性 3.现有95%的乙醇500ml，预配成70%的，需加入灭菌蒸馏水（） A?159ml?B?169ml?C?179ml??D189ml 4.保管无菌物品哪项是错误的（） A无菌物与非无菌物应分别放置?B无菌包必须注明灭菌日期 C已打开的无菌包未用完，可在48h 5.下列无菌技术操作哪项除外属正确（） A. C.一无菌物品，仅供一病员使用? D. 6.干热灭菌法灭菌条件是() A120～140℃,10～20min?B160℃,10～ 7 C 14．戴无菌手套时评价哪项错误（） A滑石粉末撒落在手套及无菌区??B戴手套时未强行拉扯手套边缘，没有污染 C脱手套时拉扯手指部分????D操作始终在腰或操作台面以上水平进行 15．哪项除外属无菌包的使用评价标准（） A．查看了无菌包名称及灭菌日期??B．一次将包内物品全部取出 C．系带善处理，未吊垂在下??D．关包时系带横向缠绕以示区别 16.下列操作哪项正确（） A.浸泡无菌持物钳的消毒液应浸过无菌钳关节轴? B.关闭容器时，盖子应由前向后覆盖 C.无菌盘铺后应在内4小时内使用?? D.倒无菌溶液时，将未粘有标签的一面握在手中 17..戴无菌手套时哪项不妥（） A.核对手手套包上的手套号码及无菌日期?? B.摊开手套袋，取出滑石粉在其上方擦 C.戴脱时再手套口往下翻转脱下?????D．脱时再手套口往下翻转脱下
2016 一季度 一、多选题（20分） 1.体温表每次用后应在清洁的基础上可选用下列哪些方法消毒（AD ） A、75%乙醇浸泡30分钟 B、含有效溴500mg/L～1000mg/L二溴海因浸泡30分钟 C、过氧乙酸1000mg/L浸泡20分钟 D、含有效氯500mg/L的消毒液浸泡30分钟 2.关于物体表面的消毒，下列描述哪些是正确的（ BCD ） A、地面通常采用含氯或其他消毒液拖地，每天1～2次，墙壁通常不需要进行常规消毒 B、治疗室、注射室、换药室的各种物体表面及台面等每天用含氯消毒剂擦拭 C、病房内如桌子、椅子、凳子、床头柜等用品表面，一般情况下只进行日常的清洁卫生工作 D、洗手池、卫生间、便池等物体表面，通常情况下，每天用洁净水擦抺刷洗处理 3.对拖把的消毒，下列哪些是正确的（ ACD ） A、一般病室、办公室每次使用后的拖把用清水冲洗，干燥备用 B、治疗室、换药室每次使用后的拖把用500mg/L有效氯消毒液浸泡10分钟清水冲洗，干燥备用 C、当病室地面有血液、分泌物、排泄物时，先按有关要求清除污染物，再用浸泡含有1000mg/L有效氯或有效溴消毒液的拖把擦拭，拖把用500mg/L有效氯浸泡30分钟后，清洗干净，干燥备用 D、传染病区使用后的拖把，应先消毒，用1000mg/L有效氯浸泡30分钟，再用清水清洗后用500mg/L有效氯浸泡30分钟后，干燥备用 5.下列专业术语的定义哪些是正确的（ABCD ） A、消毒是指杀灭或清除传播媒介上病原微生物，使其达到无害化的处理 B、灭菌是指杀灭或清除传播媒介上一切微生物的处理 C、消毒剂是用于杀灭传播媒介上的微生物，使其达到消毒或灭菌要求的制剂 D、有效氯是指消毒剂所含氯量，用mg/L或%浓度表示 二、单选题（40分） 1.用于冲洗伤口的过氧化氢浓度一般为（d ） A、1.0% B、1.5% C、2.0% D、3.0% 2.检测紫外线的强度计至少多长时间标定一次（c） A、半年 B、1年 C、2年 D、3年
微生物知识及消毒与灭菌知识培训试题答案部门培训试题 培训内容:微生物知识及消毒与灭菌知识 姓名得分 一、填空题(每空2分、共50分) 1( 微生物(microorganism, microbe)是一些肉眼看不见的微小生物的总称。 2( 微生物按其结构、化学组成及生活习性等差异可分成三大类:真核细胞型、原核细胞型、 非细胞型。 3( 微生物的形态结构:细菌、霉菌、酵母菌、放线菌、病毒。 4( 微生物的营养:水分、碳源、氮源、无机盐类、生长因子。 5( 对微生物和尘粒进行更加严格的控制对于针剂生产洁净室非常重要。 6( 辐射灭菌法:辐射有两种类型:一种是电磁波辐射，如紫外线、红外线、微波;一种是 电离辐射，如可引起被照射物电离的X射线、γ射线。 7(过滤除菌的效果与滤膜的性能、孔径的大小、密度、滤膜的厚度等因素有关。 8(高压蒸汽灭菌法:超过一个大气压时，水的沸点高于100?，反之亦然。此法适用于耐 高温和潮湿的物品。 二单项选择题(每题3分、共24分) 1(真菌属于___A__型微生物。 A. 真核细胞型 B. 原核细胞型 C. 非细胞型 D.多核细胞型 2.下列不属于原核细胞型的是____D__
A.细菌 B.衣原体 C. 放线菌 D.病毒 3. 杀灭芽胞最可靠的方法是___C___ A.干热灭菌法 B. 流通蒸汽灭菌法 C. 高压蒸汽灭菌 D. 巴氏灭菌法 4. 下列那个是构成细胞的重要物质__B____ A.水 B.碳源 C. 细胞核 D.无机盐 5. 滤过除菌法要求最终过滤的滤膜孔径为__A____ A. 0.22μm B.0.36μm C.0.45μm D.0.65μm 6. 低温间隙灭菌:将物品先用___C___加热1h，然后置20~25?保存24h(或常温过夜)，使其中残存的芽孢萌发成繁殖体，再用以上条件灭菌，如此反复三次。 A.30 ~40? B.45 ~55? C. 60~80? D. 85~95? 7. 新洁尔灭为我们车间常用消毒剂，其浓度为____B__ A. 0.01% B.0.1% C.1% D.10% 8(车间常用乙醇消毒剂的浓度为____A__ A. 70%~75% B.75%~80% C.65%~70% D.70%~80% 我已接受上述培训，理解、掌握本次培训内容。 受训人签名:_______________ 日期:__________________ 三多项选择(每题4分、共16分) 1. 下列哪些是我们常用的消毒剂 ABCD A. 70%~75%乙醇水溶液 B. 37%~40%甲醛溶液 C. 新洁尔灭 D. 过氧乙酸 2. 高压蒸汽灭菌常用条件为:ABC A. 115.5? 30min B. 121.5? 20min C. 126.5? 15min D. 200?45min 3.下列哪些属于微生物的特点ABCD
第五章预防与控制医院感染 一．单选题（每题1分） 1. 对被特殊感染而无保留价值的物品，最彻底的无菌方法是( ) A 煮沸消毒灭菌法 B 高压蒸气灭菌法 C 燃烧灭菌法 D 熏蒸法 2 .乙醇消毒的作用原理是（） A破坏细胞膜的结构B与菌体蛋白的氨基结合使其变性 C 使菌体蛋白凝固变性 D 干扰细菌酶的活性 3. 现有95%的乙醇500ml，预配成70%的，需加入灭菌蒸馏水（） A 159ml B 169ml C 179ml D 189ml 4.保管无菌物品哪项是错误的（） A 无菌物与非无菌物应分别放置 B 无菌包必须注明灭菌日期 C 已打开的无菌包未用完，可在48h内有效 D 已打开的无菌包，必须注明开包时间 5.下列无菌技术操作哪项除外属正确（） A.衣帽要整齐，口罩遮住口鼻，修剪指甲，洗手 B.无菌物品仅供一病员使用 C.一无菌物品，仅供一病员使用 D.打开无菌容器，将盖内面向下置一于稳妥处。 6.干热灭菌法灭菌条件是( ) A 120～140℃,10～20min B 160℃,10～15min C 180℃,20～30min D 200℃,30～40min 7．取用无菌溶液时，正确的方法是( ) A.打开瓶盖后，应立即倒入无菌容器中所需液 B.可直接在瓶中蘸取 C.倒后的溶液未用可及时倒回瓶中 D.已打开过的溶液瓶，可保存24小时.哪项不是无菌盘评价的标准（） A.无菌中放的位置恰当，放入无菌物品上下两层的边缘对齐 B.无菌巾上物品放置有序，便于使用 C .操作巾无菌巾外面没有被污染 D.无菌巾未被无菌液体打湿 13. 取无菌溶液的评价哪项除外（） A.手未接触瓶口及瓶盖中间部分B．倒溶液时，未引起水珠四溅 C．标签向上D．盖回瓶塞时，手指接接触处对准标签 14．戴无菌手套时评价哪项错误（） A滑石粉末撒落在手套及无菌区 B 戴手套时未强行拉扯手套边缘，没有污染 C 脱手套时拉扯手指部分 D 操作始终在腰或操作台面以上水平进行 15．哪项除外属无菌包的使用评价标准（） A．查看了无菌包名称及灭菌日期B．一次将包内物品全部取出 C．系带善处理，未吊垂在下D．关包时系带横向缠绕以示区别 16.下列操作哪项正确（） A.浸泡无菌持物钳的消毒液应浸过无菌钳关节轴 B.关闭容器时，盖子应由前向后覆盖 C.无菌盘铺后应在内4小时内使用 D.倒无菌溶液时，将未粘有标签的一面握在手中 17..戴无菌手套时哪项不妥（） A.核对手手套包上的手套号码及无菌日期 B.摊开手套袋，取出滑石粉在其上方擦 C.戴脱时再手套口往下翻转脱下D．脱时再手套口往下翻转脱下 18．下列原则哪项除外是正确的（） A．无菌操作环境应清洁，宽阔B．操作者口罩应每4-8小时更换 C．无菌物品与非无菌物品分开D．无菌物品时应面向有菌区，以免无菌物品被污染19．一套无菌物仅供一位病人使用是（） A．节省物品B．方便操作C．防止交叉感染D．防止差错 20无菌盘在何种情况下不得使用（） A．准备好4小时之内B．操作中无菌盘内面污染 C．无菌巾未被无菌液体打湿D．夹取放置无菌物品时，手臂没有跨越无菌区 21．杀死病毒与芽胞的高效消毒剂是（）
消毒隔离知识培训考试题及答案 日期：姓名：科别：成绩： 一、单选题：（每题 2 分，共20 分） 1、.在医疗诊治活动中高度危险性物品，必须选用什么处理方法？（ B ） A. 消毒法 B.灭菌法 C. 一般消毒 D.清洗处置 2、进入组织或器官内部的器械，或与破损的组织、皮肤、黏膜密切接触的器材和用 品的危险性分类是：（A ） A. 高度危险性物品 B.中度危险性物品 C. 低度危险性物品 D.无危险性物品 3．取无菌物品时，下列哪项不正确（ D ） A、操作者身距无菌区20cm B、取无菌物品时须用无菌持物钳（镊），不可触及无菌物品或跨越无菌区域， C、手臂应保持在腰部以上 D、无菌物品取出后，不可过久暴露，若未使用，可放回无菌包或无菌容器内 E、疑有污染，不得使用 4、.用碘伏对细菌繁殖体污染物品的消毒的浓度和时间分别是（C） A.250mg/L，20min B. 50mg/L，40min C. 500mg/L，30min D. 200mg/L，15min 5、有关消毒的描述，错误的是（E） A ?是切断传播途径，防止传染发生的重要措施B?可保护医护人员免受感 染 C ?可防止患者再被其他病原体感染 D. 即使有了强有力的消毒措施，医护人员也必须采取防护措施 E ?对不同的传染病消毒效果相似 6、有关消毒方法的描述，错误的是（E） A.微波消毒属高效消毒法 B.异丙醇属中效消毒法C?通风换气属低效消毒法D.高效消毒可杀灭一切微生物 E. 病原体及消毒方法相同，在不同的物品上消毒效果相同 7、有关隔离的描述，错误的是（D）
A?是控制传染病流行的重要措施 B ?便于管理传染源C ?可防止病原体向外扩散给他人D.根据传染病的平均传染期来确定隔离期限 E ?某些传染病患者解除隔离后尚应进行追踪观察 8、有关标准预防下列哪项是错误的（E） A ?要防止血源性疾病的传播也要防止非血源性疾病的传播 B. 强调双向防护C?所有的患者均被视为具有潜在感染者 D. 要根据疾病的主要传播途径，采取相应的隔离措施 E ?脱去手套后可以不洗手 9、控制医院感染最简单、最有效、最方便、最经济的方法是：（C ） A、环境消毒 B、合理使用抗菌素 C、洗手 D、隔离传染病人。 10．将盛有无菌持物镊的无菌干罐于8AM 打开，那么（C ）后，将不可再使用 A、当日8PM D、当日5PM B 、次日晨8AM E、当日10AM C、当日12N 二、多选题：（每题4 分，共24 分） 1、下列概念正确的是（AB） A. 杀灭或清除媒介物上病原微生物，使其达到无害化水平的处理为消毒。 B. 杀灭或清除媒介物上所有微生物的处理为灭菌。 C. 抑制媒介物上的病原微生物的处理为消毒。 D. 杀灭或清除媒介物上的病原微生物，使其达到无害化水平的处理为灭菌。 E. 杀灭或清楚媒介物上的绝大部分病原微生物的处理为灭菌。 2、碘伏有以下哪些特点？（ABCDE ） A.稳定性好 B.刺激性小 C.毒性较低 D.中效消毒剂 E.腐蚀性很小 3、下列哪些方法可以达到灭菌（ABE） A.热力法 B.电离辐射法 C. 新洁尔灭浸泡 D.2%碘酊浸泡 E.2%戊二醛浸泡 4、个人防护用品包括（ABCDE ） A. 口罩；B、手套；C、护目镜；D、隔离衣；E、防护服 5、灭菌后的物品在何种情况下视为已被污染？（ A B D E ） A、手感潮湿； B、与潮湿物接触或浸水； C、在有效期内； D、包装松散; E、无菌包不慎掉地。 6．手术器械包灭菌后储存要求（ABCDE ）
消毒人员培训考核试题 一、单选题（在每小题列出的备选答案中只有一个是正确的，请将 其代码填写在括号内。错选、多选或未选均不得分。每题1.5 分，共30分） 1、有效氯是（a ）。 A.衡量含氯消毒剂氧化能力的标志，是指与含氯消毒剂氧化能力相当的氯量。 B.是指含氯消毒剂所含氯量。 C.是指消毒剂所含氯量。 D.代表含氯消毒剂的氯含量。 E.代表高效消毒剂。 2、疫源地终末消毒是指（b ）。 A.有传染源存在时对其排除的病原体可能污染的环境和物品及时进行的消毒。 B.传染源离开疫源地后进行的彻底消毒。 C.对可能受到病源微生物污染的物品和场所进行的消毒。 D.对存在或曾经存在传染源的场所进行的消毒。 E.对污染或可能被污染人员进行人体、着装、随身物品等的消毒与清洗等除污染处理。 3、对下列哪种传染病不需开展终末消毒。( c ) A.霍乱、副霍乱 B.细菌性痢疾 C.流行性脑脊髓膜炎 D.甲型肝炎 E.伤寒、副伤寒 4、传染病疫源地消毒，消毒人员应做到防护等级A A.二级 B.一级 C.三级 D.四级 E.以上均可
5、最适于密闭房间空气熏蒸消毒的消毒剂是（D ）。 A.戊二醛 B.漂白粉 C.碘伏 D.过氧乙酸 E.环氧乙烷 6、现有18％过氧乙酸5mL，欲配制成0.5％过氧乙酸溶液，如在现场工作用简便计算法，算出其近似值，问约需加多少蒸馏水？（ D ） A.180mL B.150mL C.350mL D.175mL E.195mL 7、层流洁净手术室属于哪类环境？（ A ） A.Ⅰ类环境 B.Ⅱ类环境 C.Ⅲ类环境 D.Ⅳ类环境 E.以上都不对 8、现有18％过氧乙酸5mL，欲配制成0.5％过氧乙酸溶液，如在现场工作用简便计算法，算出其近似值，问约需加多少蒸馏水？（D ） A.180mL B.150mL C.350mL D.175mL E.195mL 9、《一次性使用卫生用品卫生标准》GB15979-2002规定一次性使用卫生用品装配与包装车间空气中细菌菌落总数应（A ）。 A.≤2500cfu/m3 B.≤1500cfu/m3 C.≤10000cfu/m3 D.≤250cfu/m3 E.≤500cfu/m3 10、《一次性使用卫生用品卫生标准》GB15979-2002规定消毒级口罩微生物指标细菌菌落总数应（ B ）。 A.≤200cfu/g B.≤20cfu/g C.≤10000cfu/g D.≤100cfu/g E.10cfu/g 11、溶出性抑菌产品抑菌性能判定为有较强的抑菌作用时，其抑菌率应为（ B ）。 A.≥50%~90% B.≥90% C.≥99% D.≥99.9% E.100% 12、下列消毒剂中，最适宜于衣物和书报消毒的是（A ）。 A.环氧乙烷 B.84消毒液 C.二氯异氰尿酸钠 D.氯己定 E.乙醇 13、活菌计数中因技术操作误差引起的菌落数误差率（平板间、稀释度间）不
消毒供应中心考试试题 2010年3月 姓名：__________ 分数：_______ 一、填空（每空2分）： 1、供应室三区划分为：污染区、清结区、无菌区。 2、紫外线消毒从灯亮5-7分钟计时，消毒时间为30-60分钟。 3、任何物品在消毒灭菌前均应充分清洗干净。 4、使用布类包装必须一用、一洗。 5、进入病人口腔内的所有诊疗器械必须一人、一用、一消毒。 6、医院的消毒供应中心是向医院提供各种无菌器械、敷料和其它无菌物品的重要科室。 7、无菌包上应标明：物品名称、有效日期、灭菌日期、操作者、核对人。 8、用于洗手的肥皂应当置于清洁的容器内，容器应当定期消毒，使用的固体肥皂应保持清洁干燥。 9、医疗机构医用诊疗包使用后处理流程：回收→分类→去污洗涤消毒→包装→灭菌→质检→无菌物品存放→发放。 10、污物的收集，应设置三种以上颜色的污物袋。其中，黑色袋装生活垃圾，黄色袋装医用垃圾。 二、选择题（包括单选、多选，每题4分）： 1、灭菌效果监测包括（ABC） A、工艺监测 B、化学监测 C、生物监测 D、质量监测
2、每个灭菌包包外均应粘贴（A） A、化学指示胶带 B、消毒指示卡 C、消毒指示剂 D、B-D试纸 3、灭菌合格的物品应有明显的灭菌标志和有效期，有效期为几天（B） A、6天 B、7天 C、8天 D、15天 4、灭菌质量记录保留期限至少为（C ） A、1年 B、2年 C、3年 D、4年 5、灭菌器械包重量不大于(C) A、4kg B、5kg C、7kg D、10kg 6、灭菌敷料包重量不大于（A） A、5kg B、6kg C、7kg D、8kg 7、污染物的分类（ABCD） A、生活垃圾 B、感染性废弃物 C、病理性废弃物 D、化学性废弃物 8、清洗分哪几种（ABC） A、手工清洗 B、清洗机清洗 C、超声波清洗 D、肥皂水清洗 9、如用布类布包包装时，包布层数不少于（B） A、一层 B、两层 C、三层 D、四层 10、洗手取适量肥皂或者洗手液，应认真揉搓双手至少多少秒（B） A、5秒 B、10秒 C、8秒 D、15秒 三、是非题（每题1分） 1.消毒供应中心按其职能可分为集散式和集中式消毒供应中心两种模式。（╳） 2.集中管理是将全院所有需要复用的医疗用品、器械的再处理过程，包括回收、清洗、消毒、灭菌、发放等集中由消毒供应中心完成的管理模式。(√ )
消毒隔离与无菌技术知识培训考试试卷 科别：姓名：日期：成绩：一、名词解释：（每题10分，共20分） 消毒： 灭菌： 二、填空题：（每空1分，共40分） 1．（）和（）是预防和控制医院感染两个基本的环节。医务人员必须遵守消毒灭菌原则，进入人体组织或无菌器官的医疗用品必须（），接触皮肤粘膜的医疗用品必须（）。 2. 手卫生指（）、（）、（）的总称。 3．抽出的注射药液须注明时间，超过（）不得使用 4．无菌包外须标明（）、（）、（）、（）、（）、（），（）按失效期先后顺序摆放。 5．中度危险性物品有（）、（）、（）、（）、（）等。 6．（）是预防和控制医院感染所有措施中最基本、最重要、最简单易行、最有效果的措施。也是医务人员个人防护的最基本措施。 7. 使用紫外线灯照射进行空气消毒，每天一次，每次（）分钟。紫外线灯每 周用（）擦拭一次，灯管表面有灰尘、油污时，应（）。记录 8.对病人床单位保洁实行（），病人出院、转科或死亡后，床单元必须按要 求进行（）。 9.无菌物品定点放置于清洁、干燥、离地面（）离墙（）离顶（） 以上的柜内，有合格标志及有效期，过期物品应重新灭菌。 10.无菌棉签开启需注明时间，使用时间不得超过（）。安尔碘开启需注明时间 用后拧紧瓶盖，时间不得超过（）。无菌盘须注明铺盘时间，超过（）不得使用。 11.抽出的注射药液须注明时间，超过（）不得使用；开启的各种溶媒（除静脉用药外）超过（）不得使用。 12. 医用物品对人体的危险性分类：（）（）（）、（） 13、.用含氯消毒剂对细菌繁殖体污染物品的消毒的浓度和时间分别（）（） 四、简答题（每题20分，共40分） 1.医疗废物的分类 2.发生锐器伤的处理流程： 消毒隔离与无菌技术知识培训考试试卷 科别：姓名：日期：成绩：三、名词解释：（每题10分，共20分） 消毒： 灭菌： 四、填空题：（每空1分，共40分） 1．消毒隔离和无菌操作是预防和控制医院感染两个基本的环节。医务人员必须遵守消毒灭菌原则，进入人体组织或无菌器官的医疗用品必须灭菌，接触皮肤粘膜的医疗 2. 手卫生指洗手、卫生手消毒、外科手消毒的总称。
消毒灭菌技术知识考试题 科室: 姓名: 成绩: 一、单选题： 1.在医疗诊治活动中高度危险性物品，必须选用什么处理方法？B A.消毒法 B.灭菌法 C.一般消毒 D.清洗处置 2.进入组织或器官内部的器械，或与破损的组织、皮肤、黏膜密切接触的器材和用品的危险性分类是：A A.高度危险性物品 B.中度危险性物品 C.低度危险性物品 D.无危险性物品 3.微生物对消毒因子的抗力从高到低的顺序是B A.细菌芽孢、分枝杆菌、亲水性病毒、真菌孢子、真菌繁殖体、细菌繁殖体、亲脂性病毒 B.细菌芽孢、真菌孢子、分枝杆菌、亲水性病毒、真菌繁殖体、细菌繁殖体、亲脂性病毒 C.细菌芽孢、分枝杆菌、真菌孢子、亲水性病毒、真菌繁殖体、细菌繁殖体、亲脂性病毒 D.真菌孢子、细菌芽孢、分枝杆菌、亲水性病毒、真菌繁殖体、细菌繁殖体、亲脂性病毒 4.医疗器械用下排气式压力蒸汽灭菌，一般需要维持的温度和时间分别是C A.115℃，15—30min B.121℃，10—15 min C. 121℃，15—30min D. 115℃，20—30 min 5.压力蒸汽灭菌物品存放时间C A.7天 B.16天 C.10—14天 D.10小时 6.紫外线消毒的目标微生物不详时，照射计量不应低于D A.10000μW*S/cm2 B.600000μW*S/cm2 C.60000μW*S/cm2 D.100000μW*S/cm2 7.2%戊二醛对医疗器械浸泡消毒和灭菌的时间分别是A A.20分钟达消毒要求，10小时达灭菌要求 B. 15分钟达消毒要求，4小时达灭菌要求 C.45分钟达消毒要求，9小时达灭菌要求 D.15分钟达消毒要求，8小时达灭菌要求 8.用碘伏对细菌繁殖体污染物品的消毒的浓度和时间分别是C A.250mg/L，20min B. 50mg/L，40min C. 500mg/L，30min D. 200mg/L，15min 9. 消毒是指杀灭或清除传播媒介上的D A. 病原细菌 B. 病原真菌 C. 病原病毒 D. 病原微生物 E. 病原放线菌 10. 关于影响消毒灭菌效果的因素，下述错误的提法是A A. 凡是消毒剂，其浓度越高消毒效果越好 B. 同一消毒剂对不同微生物的杀菌效果不同 C. 一般温度升高，可提高消毒效果 D. 消毒剂的杀菌作用受酸碱度影响 E. 环境中有机物的存在，减弱消毒剂的消毒效果 11. 在消毒试验中，可用杀灭对数值（KL）表示消毒效果。当KL＝2时，相应杀灭的微生物的百分率为D A. 99.999％ B. 99.99％ C. 99.9％ D. 99％ E. 90％ 12. 若某消毒方法的D值为15，则表示该方法C A. 作用15min，微生物杀灭率可达到100％ B. 作用15min，微生物杀灭率可达到99％ C. 作用15min，微生物杀灭率可达到90％ D. 作用10min，微生物杀灭率可达到50％
消毒隔离与无菌技术知识培训考试试卷 科别: 姓名: 日期: 成绩: 一、名词解释:( 每题10分,共20分) 消毒: 灭菌: 二、填空题:( 每空1分,共40分) １.( )与( )就是预防与控制医院感染两个基本得环节、医务人员必须遵守消毒灭菌原则,进入人体组织或无菌器官得医疗用品必须( ),接触皮肤粘膜得医疗用品必须( )。 2。手卫生指( )、( )、( )得总称。 ３、抽出得注射药液须注明时间,超过( ) 不得使用 4、无菌包外须标明( ) 、( )、( )、( )、 ( )、( ) ,( )按失效期先后顺序摆放。 5.中度危险性物品有( )、( )、( )、( )、( )等。 6。( )就是预防与控制医院感染所有措施中最基本、最重要、最简单易行、最有效果得措施。也就是医务人员个人防护得最基本措施、 7。使用紫外线灯照射进行空气消毒,每天一次,每次( )分钟。紫外线灯每周用( )擦拭一次,灯管表面有灰尘、油污时,应( )、记录 8。对病人床单位保洁实行( ),病人出院、转科或死亡后,床单元必须按要求进行( )。 9。无菌物品定点放置于清洁、干燥、离地面( )离墙( )离顶( )以上得柜内,有合格标志及有效期,过期物品应重新灭菌。 10. 无菌棉签开启需注明时间,使用时间不得超过( )。安尔碘开启需注明时间用 后拧紧瓶盖,时间不得超过( )。无菌盘须注明铺盘时间,超过( )不得使用。 １1。抽出得注射药液须注明时间,超过( )不得使用;开启得各种溶媒(除静脉用药外)超过( )不得使用。 12、医用物品对人体得危险性分类:( ) ( )( )、( ) 13、。用含氯消毒剂对细菌繁殖体污染物品得消毒得浓度与时间分别( )( ) 四、简答题( 每题2０分,共４０分) 1.医疗废物得分类 2、发生锐器伤得处理流程: 消毒隔离与无菌技术知识培训考试试卷 科别: 姓名: 日期: 成绩: 三、名词解释:( 每题10分,共２０分) 消毒: 灭菌: 四、填空题:( 每空1分,共40分) １消毒隔离与无菌操作就是预防与控制医院感染两个基本得环节、医务人员必须遵守消毒灭菌原则,进入人体组织或无菌器官得医疗用品必须灭菌,接触皮肤粘膜得医疗 2. 手卫生指洗手、卫生手消毒、外科手消毒得总称。 3.抽出得注射药液须注明时间,超过2小时不得使用
第五章培养基及设备的灭菌 第一节培养基灭菌的目的、要求和方法 一、定义 1，培养基灭菌的定义 是指从培养基中杀灭有生活能力的细菌营养体及其孢子，或从中将其除去。工业规模的液体培养基灭菌，杀灭杂菌比除去杂菌更为常用。 2，灭菌与消毒的区别 灭菌：用物理或化学方法杀死或除去环境中所有微生物，包括营养细胞、细菌芽孢和孢子 消毒：用物理或化学方法杀死物料、容器、器皿内外的病源微生物。 二、培养基灭菌的目的 1，在发酵过程中夹杂其它杂菌造成的后果 生产菌和杂菌同时生长，生产菌丧失生产能力；在连续发酵过程中，杂菌的生长速度有时会比生产菌生长得更快，结果使发酵罐中以杂菌为主；杂菌及其产生的物质，使提取精制发生困难；杂菌会降解目的产物；杂菌会污染最终产品，杂菌会污染最终产品；发酵时如污染噬菌体，可使生产菌发生溶菌现象。 2，工业上具体措施包括 （1）使用的培养基和设备须经灭菌； （2）好氧培养中使用的空气应经除菌处理； （3）设备应严密，发酵罐维持正压环境； （4）培养过程中加入的物料应经过灭菌； （5）使用无污染的纯粹种子。 3，培养基灭菌的目的 杀灭培养基中的微生物，为后续发酵过程创造无菌的条件。 4，培养基灭菌的要求 （1）达到要求的无菌程度（10-3） （2）尽量减少营养成分的破坏，在灭菌过程中，培养基组分的破坏，是由两个基本类型的反应引起的： 培养基中不同营养成分间的相互作用；对热不稳定的组分如氨基酸和维生素等的分解。 5，灭菌的方法 （1）化学法 化学药品灭菌法 （2）物理法 干热灭菌法
湿热灭菌法 射线灭菌法 6，湿热灭菌的原理 每一种微生物都有一定的最适生长温度范围。当微生物处于最低温度以下时，代谢作用几乎停止而处于休眠状态。当温度超过最高限度时，微生物细胞中的原生质胶体和酶起了不可逆的凝固变性，使微生物在很短时间内死亡，加热灭菌即是根据微生物这一特性而进行的。 7，湿热灭菌中的相关定义 杀死微生物的极限温度称为致死温度。在致死温度下，杀死全部微生物所需的时间称为致死时间；在致死温度以上，温度愈高，致死时间愈短。 微生物的热阻：是指微生物在某一特定条件（主要是温度和加热方式）下的致死时间。相对热阻是指某一微生物在某条件下的致死时间与另一微生物在相同条件下的致死时间的比值。 各种微生物对湿热的相对热阻 微生物 相对热阻 营养细胞和酵母 细菌芽孢 霉菌孢子 病毒和噬菌体 1.0 3×106 2~10 1~5 8，湿热灭菌的优点 蒸汽来源容易，操作费用低，本身无毒；蒸汽有强的穿透力，灭菌易于彻底； 蒸汽有很大的潜热；操作方便，易管理。 2 湿热灭菌的理论基础 一，培养基湿热灭菌需解决的工程问题 1，将培养基中的杂菌总数N 0 杀灭到可以接受的总数N （10-3）， 需要多高的温度、多长的时间为合理。 菌温度和时间的确定取决于： （1）杂菌孢子的热灭死动力学 （2）反应器的形式和操作方式 （3）培养基中有效成分受热破坏的可接受范围 二、微生物的热死灭动力学方程 实验证明，微生物营养细胞的均相热死灭动力学符合化学反应的一级反应动力学，即： N ：任一时刻的活细菌浓度（个/L ） () 1N k dt dN ?=-
消毒灭菌试题 选择题（每题4分） 1、一次性使用棉签开启后有效使用期限是不超过（B）A、12小时 B、24小时 C、48小时 D、36小时 2、检验科台面消毒的有效氯浓度一般为（A ）A、500mg/L B、1000mg/L C、1500mg/L D、2000mg/L 3、静脉采血消毒所用的酒精浓度为（C）A、95% B、90% C、75% D、100% 4、传染病人或疑似传染病人产生的标本如排泄物、呕吐物，必须用含氯消毒剂浓度（ D ）消毒后方可运出。A、500mg/L B、1000mg/L C、1500mg/L D、2000mg/L 5、碘伏开启（C ）后就禁止使用。A、3天 B、5天 C、7天 D、1个月 6、500mg/L有效氯的配置正确的是（C ） A、含氯（5%）原液稀释25倍 B、含氯（5%）原液稀释50倍 C、含 氯（5%）原液稀释100倍D、含氯（5%）原液稀释200倍 7、检验科室内分区正确的是（D ） A、全是污染区 B、全是半污染区 C、污染区和清洁区 D、污染区、半污染区、清洁区餐具消毒设备的餐具消毒目的有哪些 8、检验科化验单消毒处理措施正确的是（B）A、戊二醛熏蒸法 B、紫外线法 C、福尔马林法 D、以上都对 9、以下关于静脉采血消毒过程的描述正确的是（D ）A、直接用碘酒消毒后采血B、直接用75%酒精消毒后采血C、先用75%酒精，再用碘酒消毒皮肤后采血D、先用 碘酒消毒皮肤再用75%酒精脱碘，再采血
10、高压蒸汽灭菌的温度及时间要求正确的是（A ） A、121.3 °C,15-20分钟 B、123°C，30分钟 C、121.3°C，30分钟 D、120°C，15-20分钟 11、紫外线杀菌的特点描述正确的是（B ） A、医院所有区域均可 B、穿透力弱，仅适用于桌面、台面 C、对人体无害 D、耐热物品也可用紫外线消毒 12、以下关于臭氧消毒正确的是（D ） A、可以人机共用 B、成本低 C、臭氧消毒对环境物品无损坏 D、以上都错 13、关于消毒与灭菌的说法正确的是（D ） A、消毒能够杀死芽孢，灭菌不能 B、灭菌才能杀死芽孢，消毒不能 C、消毒 灭菌无明显差异D、灭菌是杀死包括芽孢在内的所有微生物 14、对于被特殊感染但又没有保存价值的物品的物品应该采取的灭菌方法应是（ C ） A、高压蒸汽灭菌法 B、煮沸消毒灭菌法 C、高温焚烧法 D、熏蒸法 15、一套无菌物品仅限一人使用主要是为了（ C ） A、节省成本 B、方便操作 C、防止交叉污染 D、防止差错 二、填空题（每题4分）1、高压蒸汽灭菌的压力要求是（）Kpa.温度是（），作用时间为（）。2、紫外线杀菌的波长为（）nm 3、静脉采血一人一针一管，微量采血一人一针一片，一套无菌物品，只能供一个病员使用，是为了避免（）4、无菌物品如棉签、棉球、纱布等及其容器应在有效期内使用，开启后注明（），使用时间不得超过（）小时。5、无菌 操作中，操作中应与无菌物品保持距离约（）cm 6、接种细菌时，接种环在酒精 灯外焰上灼烧是为了（） 7、用7.15％次氯酸钠溶液，配置成含有效氯2g/L的溶液1000ml，需要加水多少（）8、配置有效氯溶液的计算公式是 （）9、医用酒精最合适的消毒浓度是（），医用碘伏的浓度是（）10、紫外线杀菌原理是（
2016 季度 一、多选题（ 20 分） 1. 体温表每次用后应在清洁的基础上可选用下列哪些方法消毒（ AD ） A 、75%乙醇浸泡30分钟 B 、含有效溴500mg/L ?1000mg/L 二溴海因浸泡 30分钟 C 过 氧乙酸 1000mg/L 浸泡20分钟 D 、含有效氯500mg/L 的消毒液浸泡30分钟 2. 关于物体表面的消毒，下列描述哪些是正确的（ BCD ） A 、地面通常采用含氯或其他消毒液拖地， 每天1?2次，墙壁通常不需要进行常规消毒 B 、 治疗室、注射室、换药室的各种物体表面及台面等每天用含氯消毒剂擦拭 C 、病房内如桌 子、椅子、 凳子、 床头柜等用品表面， 一般情况下只进行日常的清洁卫生工作 D 、洗手池、 卫生 间、便池等物体表面，通常情况下，每天用洁净水擦抺刷洗处理 3. 对拖把的消毒，下列哪些是正确的（ ACD ） A 、一般病室、办公室每次使用后的拖把用清水冲洗，干燥备用 B 、治疗室、换药室每次使 用后的拖把用 500mg/L 有效氯消毒液浸泡 10分钟清水冲洗，干燥备用 C 、当病室地面有 血液、分泌物、排泄物时，先按有关要求清除污染物，再用浸泡含有 1000mg/L 有效氯或有 效溴消毒液的拖把擦拭， 拖把用 500mg/L 有效氯浸泡 30分钟后，清洗干净， 干燥备用 D 、 传染 病区使用后的拖把，应先消毒，用 1000mg/L 有效氯浸泡 30 分钟，再用清水清洗后用 500mg/L 有效氯浸泡 30 分钟后，干燥备用 5.下列专业术语的定义哪些是正确的（ ABCD ） A 、消毒是指杀灭或清除传播媒介上病原微生物，使其达到无害化的处理 B 、灭菌是指杀 灭或清除传播媒介上一切微生物的处理 C 、消毒剂是用于杀灭传播媒介上的微生物，使其 达到消毒或灭菌要求的制剂 D 、有效氯是指消毒剂所含氯量，用 mg/L 或％浓度表示 二、单选题（ 40 分） 1. 用于冲洗伤口的过氧化氢浓度一般为（ d ） A 、 1.0% B 、 1.5% C 、 2.0% D 、 3.0% 2. 检测紫外线的强度计至少多长时间标定一次（ c ） A 、半年 B 1年 C 、2年 D 3年 3、 普通 30W 直管紫外线灯在距灯管多少米处测定消毒效果（ c ） A 、 1.5 米 B 、 2 米 C 、 1 米 D 、 0.5 米 4、 功率》30W 的紫外线消毒灯由新灯的强度降低到 70卩W/cm 的时间，不应低于多少小时 （b ） A 、 3000 小时 B 、 1000 小时 C 、 2000 小时 D 、 4000 小时 5?手术切口部位的皮肤消毒范围应在手术野及其外扩展》多少部位由内向外擦拭（ 凡士林纱布条厚度不应超过 1.3cm D 、装载高度不应超过灭菌器内腔高度的 2/3，物品间应 留有空 隙 8. 下列哪种消毒剂不适用于粘膜、伤口创面的冲洗消毒（ c ） A 、有效含氯0.2%的氯乙定 B 、30g/L 的过氧化氢氧 C 、含有效碘0.5%的碘伏 D 、含量 有效碘 0.05%的碘伏 A 、 5cm B 、 8cm C 、 10cm D 、 15cm 6. 干热灭菌器进行灭菌，下列灭菌参数哪项是错误的（ A 150C, 120 分钟 B 、160C, 120 分钟 C 170 7. 在下列干热灭菌相关中，哪项叙述是错误的（ b A 、灭菌物品包体积不应超过 10cm X 10cm X 20cm a ） C, 60 分钟 D 、180C, ） B 油剂、粉剂的厚度不应超过 30 分钟 1.0cm C 、
第 7 章消毒与灭菌 测试题 一、选择题 A 型题 1.杀灭物体上所有微生物的方法 A.消毒 B.灭菌 C.无菌 D.抑菌 E.防腐 2.杀灭物体上病原微生物的方法 A.消毒 B.灭菌 C.无菌 D.抑菌 E.防腐 3.防腐的含义是 A.杀灭物体上所有微生物 B.杀灭物体上的病原微生物 C.使物体上无活菌存在 D.杀死含芽胞的细菌 E.抑制微生物生长繁殖 4.无菌的含义 A.杀灭物体上所有微生物 B.杀灭物体上的病原微生物 C.使物体上无活菌存在 D.杀死含芽胞的细菌 E.抑制微生物生长繁殖 5.玻璃器皿、瓷器、玻质注射器等的灭菌要在何种温度下 2 小时干烤 A.100~150 。C B.160~170 C C.170~250 。C D.250~300 。C E.300~400 。C 6.高压蒸汽灭菌法灭菌需要的条件是 A.121.3 oC， 15~20 分钟 B.100oC，15~20 分钟 C.120oC ，10 分钟 D.121.3oC，10 分钟 E.100oC ，20 分钟
7.用于耐高温、耐湿等物品的最佳灭菌方法是 A.高压蒸汽灭菌法 B.煮沸法 C.间歇蒸汽灭菌法 D.流动蒸汽灭菌法 E.巴氏消毒法 8.适用于物体表面和空气灭菌的方法是 A.干热灭菌法 B.湿热灭菌法 C.紫外线灭菌法 D.电离辐射灭菌法 E.超声波杀菌法 9.紫外线杀菌的最佳波长是 A.200~300nm B.260~266nm C.300~365nm D.350~400nm E.400~500nm 10.下列哪项不是热力灭菌的机制 A.使菌体蛋白质变性 B.使菌体蛋白质凝固 C.使细菌核酸降解 D.使细菌胞质膜损伤 E.使细菌电解质降解 11.目前主要用于牛乳消毒的方法是 A.巴氏消毒法 B.煮沸法 C.流动蒸气消毒法 D.间歇蒸气灭菌法 E.高压蒸气灭菌法 12.超声波消毒法主要用于 A.空气消毒 B.物体表面消毒 C.玻璃器皿消毒 D.提取细胞组分或制备抗原等 E.病人排泄物的消毒 13.超声波杀菌的机制是 A.干扰蛋白质合成 B.干扰 DNA 的复制和转录 C.灭活酶类 D.空化作用 E.烷化作用 14.70%~75% 乙醇的消毒灭菌机制是
第4章消毒与灭菌 消毒与灭菌是临床医学和微生物学中十分重要的基本操作技术。由于微生物广泛存在于自然界，其中有些又是病原微生物，因此，从预防感染的角度出发，医务工作者必须牢固树立无菌观念和严格执行无菌操作。例如医疗器械、注射器、手术室和无菌室等均需用适宜的方法进行消毒或灭菌。为防止疾病传播，对于传染病患者的排泄物以及实验室废弃的培养物也要进行消毒或灭菌处理。微生物易受外界条件的影响，如果环境适宜，可促进微生物的生长繁殖；剧烈的环境变化则可使微生物生长受到抑制至死亡。采用的方法不同，达到的效果也有差异。以下是有关消毒灭菌的常用术语。 1. 消毒 (disinfection ) 指杀死物体上病原微生物的方法，但不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物，如饮用水的消毒。用于消毒的药品称为消毒剂 (dis in fecta nt)。 2. 灭菌(sterilization) 指杀灭物体上所有微生物的方法，包括全部病原微生物和非病原 微生物以及细菌的芽胞。如注射用生理盐水及外科用敷料的灭菌。 3. 防腐(antisepsiS) 是指防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。如注射针剂或中草药中加入0.01%硫柳汞可防止杂菌生长。一般低浓度的消毒剂即为防腐剂。 一些抗生素可抑制微生物的生长繁殖称之为抑菌(bacteriostasis，这些抗生素被称作抑菌剂(bacteriosta)。在体内抑制细菌的繁殖，在体外可用于抑菌试验以检测细菌对抗生素的敏感性。_________________________________________ 4. 无菌 (asepsis 及无菌操作(aseptic technique)无菌指不含有活的微生物，为灭菌的结果。防止微生物进入人体或其它物品的操作技术，称为无菌操作。例如在进行外科手术 时需要防止细菌进入创口，微生物学实验操作中要注意防止微生物的污染和感染。 第一节物理消毒灭菌法 消毒与灭菌的方法一般分为物理学方法、化学方法两大类。用于消毒灭菌的物理因素主要有热力、紫外线、辐射、超声波和滤过除菌等方法。 一、热力灭菌法 高温对微生物有明显的致死作用，其主要是通过变性蛋白质、破坏细胞膜和降解核酸达到杀菌作用。因而常用于消毒和灭菌。热力灭菌法分为干热灭菌和湿热灭菌两大类，在同一温度下，湿热灭菌的效力优于干热灭菌。这是因为：①湿热中微生物的蛋白较易凝固；②湿热的穿透力比干热大；③湿热的蒸气有潜热存在，水由气态变为液态时可释放出潜热，能迅速提高被灭菌物体的温度。多数无芽胞细菌对湿热敏感，55?60C作用30?60分钟后死亡。80C作用5?10分钟可杀死所有细菌的繁殖体和真菌。细菌的芽胞对高温抵抗力强，例如炭疽芽胞杆菌的芽胞，可耐受5?10分钟煮沸，肉毒梭菌的芽胞则需煮沸3?5小时才死亡。 (一)干热灭菌法 干热（dry heat）的杀菌作用是利用火焰、热空气及电磁波产热等方法，使微生物脱
消毒隔离知识培训考试试卷 科别：姓名：日期：成绩： 一、单选题：（每题4分，共20分） 1、进入组织或器官内部的器械，或与破损的组织、皮肤、黏膜密切接触的器材和用品的危险性分类是：（A ） A.高度危险性物品 B.中度危险性物品 C.低度危险性物品 D.无危险性物品 2、.用含氯消毒剂对细菌繁殖体污染物品的消毒的浓度和时间分别是（C） L，20min B. 50mg/L，40min C. 500mg/L，30min D. 200mg/L，15min 3、有关消毒的描述，错误的是（E） A．是切断传播途径，防止传染发生的重要措施 B．可保护医护人员免受感染 C．可防止患者再被其他病原体感染 D．即使有了强有力的消毒措施，医护人员也必须采取防护措施 E．对不同的传染病消毒效果相似 4、有关隔离的描述，错误的是（D） A．是控制传染病流行的重要措施B．便于管理传染源C．可防止病原体向外扩散给他人D．根据传染病的平均传染期来确定隔离期限 E．某些传染病患者解除隔离后尚应进行追踪观察 5、有关标准预防下列哪项是错误的（E） A．要防止血源性疾病的传播也要防止非血源性疾病的传播 B．强调双向防护 C．所有的患者均被视为具有潜在感染者 D．要根据疾病的主要传播途径，采取相应的隔离措施 E．脱去手套后可以不洗手 二、多选题：（每题8分，共40分） 1、下列概念正确的是（AB） A.杀灭或清除媒介物上病原微生物，使其达到无害化水平的处理为消毒。 B. 杀灭或清除媒介物上所有微生物的处理为灭菌。 C.抑制媒介物上的病原微生物的处理为消毒。 D.杀灭或清除媒介物上的病原微生物，使其达到无害化水平的处理为灭菌。 E.杀灭或清楚媒介物上的绝大部分病原微生物的处理为灭菌。 2、下列哪些方法可以达到灭菌（ABE） A.高压蒸汽灭菌 B.电离辐射法