课时分层作业(七)
(建议用时：45分钟)
[基础达标练]
1．下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是( )
A．用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织
B．将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞
C．细胞铺满整个培养皿底部时，要将细胞转移到新培养液中继续培养
D．动物细胞培养只能传50代左右，所培育的细胞会衰老死亡
【解析】动物细胞培养至50代左右，细胞增殖会明显减缓，甚至完全停止。
【答案】 D
2．下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( )
A．贴壁细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞
B．培养过程中多数细胞的基因型会发生改变
C．二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的
D．恶性细胞系的细胞可进行传代培养
【解析】动物细胞培养时，具有接触抑制现象，贴壁细胞在培养瓶壁上只可形成一层细胞，A错；细胞在培养过程中，传代次数也是有限的，一般为50次就会死亡，留下来的细胞就是发生了癌变的细胞，遗传物质发生改变，具有不死性，B、C错，D正确。
【答案】 D
3．下列有关体细胞核移植技术的说法不正确的是( )
A．体细胞核移植技术在多种动物中获得了成功，成功率非常高
B．克隆技术的各个环节有待于进一步改进
C．大多数克隆动物还存在一些遗传和生理缺陷类的健康问题
D．克隆动物食品的安全性问题仍然存在争议
【解析】本题考查体细胞核移植技术的利弊。由于体细胞核移植技术是一项新的技术，对于其原理并不完全清楚，成功率并不高，有许多问题仍待解决。
【答案】 A
4．伦理学家极力反对克隆人，以下哪项不是他们反对克隆人的原因( )
A．严重地违反了人类伦理道德
B．冲击了现有的伦理道德观念
C．克隆人是心理不正常的人
D．干扰正常的社会和家庭关系
【解析】克隆人严重地违反了人类伦理道德，冲击了现有的伦理道德观念，干扰了正常社会和家庭关系，我们应持反对态度。
【答案】 C
5．下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要区别的是( )
A．培养基成分不同
B．动物细胞培养不需要在无菌条件下进行
C．动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能
D．动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株
【解析】动物细胞培养与植物组织培养有许多相似之处，也有许多不同点。其主要不同点是它们的培养基成分不同。动物细胞培养所用的培养基是液体培养基，动物细胞培养的培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐和维生素等，另外还有动物血清。植物组织培养所用的培养基是固体培养基，植物组织培养所需要的物质包含植物生长和发育所需的全部营养成分，如水、矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素、氨基酸、琼脂等和有机添加物，没有动物血清。
【答案】 A
6．乙马的卵细胞核被甲马的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂发育成重组胚胎，再植入丙马的子宫内发育，产下一匹小马。下列叙述正确的是( )
A．直接在体外对甲马的体细胞进行诱导也能培养出胚胎来
B．小马的性状完全与甲马相同
C．此项技术可用于保护濒危物种
D．该过程可以很好地证明动物细胞的全能性
【解析】克隆过程中细胞质遗传物质来自乙马，细胞核中遗传物质来自甲马，所以小马的性状与甲马不完全一致，该过程只能说明动物细胞核具有全能性，而未体现出动物细胞的全能性。
【答案】 C
7．下列关于动物体细胞核移植技术和克隆动物的叙述，正确的是( )
A．目前科学家可以用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体
B．动物体细胞核移植技术可有选择地繁殖某一性别的家畜
C．用于核移植的供体细胞一般都选用传代50代以内的细胞
D．用体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行100%的复制
【解析】动物体细胞的全能性受到限制，不能经过培养获得动物个体；用于核移植的供体细胞一般是10代以内的细胞；克隆动物细胞核内的遗传物质来自供体细胞，其性别与提供细胞核的动物一致，因此可有选择地克隆某一性别的家畜；克隆动物细胞质内的遗传物质主要来自受体卵母细胞，并不是对体细胞供体动物进行100%的复制。
【答案】 B
8．生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一
只野驴刚死亡，以下提供的“复生”野驴个体的方法中能够成功的是( ) A．将野驴的体细胞取出，利用细胞培养技术，可培育成新个体
B．将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体
C．取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，经孕育培养成新个体
D．将野驴的一个基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体
【解析】野驴的体细胞的全能性已经受到限制，不能经过培养形成新个体，将野驴的一个基因导入家驴的受精卵中，培育成的是带有野驴基因的家驴；野驴的体细胞核中具有发育成野驴的全部基因，因此通过核移植技术，可使野驴“复生”。
【答案】 C
9．实验小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基本过程如下图所示。
下列叙述错误的是( )
A．甲过程需要对实验小鼠进行消毒
B．乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化
C．丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型
D．丁过程得到的细胞具有异质性
【解析】动物细胞培养需要无毒、无菌的环境，甲过程指从实验小鼠身上取下皮肤组织，该过程需要对小鼠进行消毒处理；乙过程表示将得到的皮肤组织分散成单个细胞制备成细胞悬液，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理；丙过程表示原代培养，此时的细胞仍能保持正常的二倍体核型；丁过程表示通过选择或纯化从细胞系中获得具有特殊性质的细胞株的过程，此过程得到的细胞具有异质性。
【答案】 C
10．下图为动物细胞培养过程示意图，请回答以下几个问题：
(1)进行培养的细胞往往取自于胚胎或幼龄动物，原因是____________________________________________________________________
___________________________________________________________________。
(2)容器A中的动物器官或组织首先要剪碎，然后用胰蛋白酶处理，其目的是________________________________________________________________
__________________________________________________________________
_____________________________________________________________。
(3)培养先在B瓶中进行。瓶中的培养基成分有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和________等。当细胞数量增加到一定程度后，细胞的增殖就会减缓。需用胰蛋白酶处理后分瓶继续培养，称为________。
有一类不正常的动物细胞，体外培养失去制约而表现为“疯长”，这类细胞最可能是________。
(4)现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不被染色，原因是_________________________________________________
________________________________________________________________________________ ________________________________________________。
(5)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作________进行攻击。
【解析】(1)同一器官或组织的细胞，胚胎或幼龄动物的较成年和老年的分裂能力强，代谢活力高，更适合进行细胞培养。
(2)对动物的组织碎块使用胰蛋白酶处理，能使各个细胞分散开，形成细胞悬浮液，有利于细胞的生长和增殖。
(3)进行动物细胞培养，需要加入一定量的动物血清，内含多种营养物质和生长因子。
【答案】(1)胚胎或幼龄动物的器官或组织中的细胞代谢旺盛，分裂能力强
(2)使细胞分散，每个细胞可以与培养液充分接触(3)动物血清传代培养癌细胞(4)活细胞的细胞膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色(或死细胞的细胞膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内着色) (5)抗原
[能力提升练]
11．某研究小组为测定药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。下列说法不正确的是( )
A．在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时，也可用胃蛋白酶处理
B．为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素
C．细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液的pH
D．将数量相等的甲、乙细胞分别置于相同适宜条件下培养，一段时间后，会观察到甲细胞数量比乙细胞数量多
【解析】动物细胞培养的适宜pH为7.2－8.4，而在这样的环境中胃蛋白酶会变性失活，因此在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时，不可用胃蛋白酶处理，应用胰蛋白酶处理，A错误；为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素，B正确；细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液的pH，C正确；在适宜环境中，肿瘤细胞的增殖速率大于肝细胞，因此将数量相等的甲、乙细胞分别置于相同适宜培养条件下培养，一段时间后，会观察到甲细胞数量比乙细胞数量多，D正确。
【答案】 A
12．培育克隆蛙的基本过程如图所示。下列叙述不正确的是( )
A．①过程可以用紫外线破坏细胞核
B．若把皮肤细胞换成胚胎细胞则可以提高成功率
C．⑤过程需要进行胚胎移植
D．上述过程证明了细胞质具有调控细胞核发育的作用
【解析】将卵细胞中的细胞核去除可用紫外线破坏的方法，A对；胚胎细胞的增殖能力强于皮肤细胞，B对；青蛙是卵生动物，不需要进行胚胎移植，C错；细胞质中存在激发核基因特异性表达的物质，D对。
【答案】 C
13．进行动物的克隆繁殖的基本过程如图所示。下列叙述正确的是( )
A．该过程的技术基础是核移植
B．甲细胞可以是胚胎细胞也可以是体细胞，乙细胞是重组细胞
C．子代动物与提供甲细胞的动物性状完全相同
D．动物难以克隆的根本原因是分化的体细胞的基因组成缺乏完整性
【解析】该过程的技术包括核移植、早期胚胎培养、胚胎移植等，基础是动物细胞培养，A错误；供核细胞可以是胚胎细胞也可以是体细胞，但胚胎细胞分化程度低，全能性高，乙细胞是重组细胞，B正确；子代动物与提供甲细胞的动物性状大体相同，因还受细胞质基因和环境因素的影响，C错误；动物难以克隆的根本原因是动物细胞是高度分化的细胞，全能性受到抑制，D错误。
【答案】 B
14．(2018·全国卷Ⅲ)2018年《细胞》期刊报道，中国科学家率先成功地应用体细胞对非人灵长类动物进行克隆，获得两只克隆猴——“中中”和“华华”。回答下列问题：
(1)“中中”和“华华”的获得涉及核移植过程，核移植是指________________
_______________________________________________________________。
通过核移植方法获得的克隆猴，与核供体相比，克隆猴体细胞的染色体数目______(填“减半”“加倍”或“不变”)。
(2)哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度________(填“大于”或“小于”)体细胞核移植，其原因是__________________________________________________________。
(3)在哺乳动物核移植的过程中，若分别以雌性个体和雄性个体的体细胞作为核供体，通常，所得到的两个克隆动物体细胞的常染色体数目________(填“相同”或“不同”)，性染色体组合________(填“相同”或“不同”)。
【解析】(1)核移植是指将供体细胞核移入除去核的卵母细胞中，使其重组并发育成一
个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。通过核移植方法获得的克隆猴的细胞核由供体提供，所以与核供体相比，克隆猴体细胞的染色体数目不变。
(2)哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度小于体细胞核移植，因为胚胎细胞的分化程度相对较低，恢复其全能性更加容易一些。
(3)哺乳动物核移植的过程中，分别以同种生物的雌性个体和雄性个体的体细胞作为核供体，所得的两个克隆动物体细胞核中除了性染色体组成不同外，常染色体的组成是相同的。
【答案】(1)将供体细胞核移入除去核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体不变
(2)小于胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性更容易
(3)相同不同
15．为了探究不同浓度的某物质(X)对肺癌细胞体外生长的作用，研究人员进行了以下实验，请完善实验思路，并回答相关问题。
材料与用具：小鼠肺癌细胞悬浮液、物质X、癌细胞培养液、生理盐水、蒸馏水、活细胞检测仪、细胞培养瓶等(说明：对动物细胞的培养过程和检测方法不做具体要求)
(1)肺癌细胞是由正常细胞转化而来，除保留了原来细胞的某些特点外，其中最重要的特征是细胞表面粘连蛋白减少和________。
(2)实验思路：
①取五个大小相同的细胞培养瓶，编号A、B、C、D、E，每组加入等量的肺癌细胞悬浮液和____________，并测定初始细胞数。
②在B～E组中依次加入适量且等量不同浓度的物质X(浓度分别为 1.0 μg/mL、2.0 μg/mL、3.0 μg/mL、4.0 μg/mL)，A组则加入________作为对照；每组设置三个重复样品。
③以上各组均置于相同且适宜条件下培养。
④检测与数据处理：分别在24 h、48 h、72 h时取样检测各组存活的细胞数，取________值，求细胞存活率(细胞存活率＝实验组/对照组×100%)。
(3)实验结果见如图：
根据实验结果得出实验结论①__________________________；
②________________。
【解析】(1)癌细胞的重要特征是细胞膜上糖蛋白减少，癌细胞容易分散和转移及无限增殖。
(2)实验设计思路：由曲线可知，实验结果为5条曲线，因此实验分为5组，其中一组加等量生理盐水的是空白对照，另外四组是加入不同浓度的X物质的相互对照，曲线的纵轴代表细胞存活率，因此需要先测初始细胞数，才能计算存活率，为了保证结果的准确性，应该设计重复实验，取平均值，按照实验设计的对照原则与单一变量原则，实验步骤如下：
①取五个大小相同的细胞培养瓶，编号A、B、C、D、E，每组加入等量的肺癌细胞悬浮液和癌细胞培养液，并测定初始细胞数；
②在B～E组中依次加入适量不同浓度的物质X(浓度分别为1.0 μg/mL、2.0 μg/mL、
3.0 μg/mL、
4.0 μg/mL)，A组则加入等量的生理盐水，作为对照；每组设置三个重复样品；
③以上各组均置于相同且适宜的条件下培养；
④检测与数据处理：分别在24 h、48 h、72 h时取样检测各组存活的细胞数，取平均值，求细胞存活率(细胞存活率＝实验组/对照组×100%)。
(3)分析实验结果中的曲线可知，与加入生理盐水的空白对照实验A相比，加入X物质的实验组的肺癌细胞的存活率降低，说明X物质对癌细胞生长有抑制作用；B、C、D、E实验组相比，相同时间内，X物质浓度越高，存活率越低，同一浓度条件，时间越长，细胞的存活率越低，这说明一定范围内抑制作用随浓度的增大和时间的延长而加强。
【答案】(1)无限增殖
(2)①癌细胞培养液②等量的生理盐水④平均
(3)实验结论：①X物质对癌细胞生长有抑制作用②一定范围内抑制作用随浓度的增大和时间的延长而加强