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masson染色结果分析

masson染色结果分析
masson染色结果分析

Masson三色染色液说明书

【产品名称】

Masson三色染色液

【包装规格】

货号:DC0032

套组包装规格:8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒

【预期用途】

主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。

【检验原理】

Masson三色染色又称马松染色,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法,所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织,苯胺蓝的分子量很大,染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。

【主要组成成分】

试剂组成主要成分

1、Weigert铁苏木素A液苏木素

2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁

3、酸性乙醇分化液乙醇

4、蓝化液碳酸盐

5、丽春红品红染色液丽春红、品红

6、乙酸溶液乙酸

7、磷钼酸溶液磷钼酸

8、苯胺蓝染色液苯胺蓝

【储存条件及有效期】

5℃~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为l8个月,在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。

【样本要求】

组织片充分固定和脱蜡。

【检验方法】

1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等,流水冲洗,常规脱水包埋;

2、切片常规脱蜡至水;

3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液,用Weigert铁苏木素染色液染色,流水稍洗;

4、酸性乙醇分化液分化数秒,流水冲洗数分钟;

5、蓝化液返蓝数秒,流水冲洗数分钟;

6、丽春红品红染色液染色数分钟,流水稍冲洗;

7、将蒸馏水:乙酸溶液按一定的比例配制乙酸工作液,用乙酸工作液洗切片;

8、磷钼酸溶液处理后,倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗);

9、苯胺蓝染色液复染,倾去玻片上染色液(不用水洗);

10、用乙酸工作液处理切片,至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制);

11、95%乙醇迅速脱水,无水乙醇脱水数次后,二甲苯透明,中性树胶封固。

【检验结果的解释】

胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色,肌纤维、纤维素和红细胞呈红色,细胞核呈蓝黑色。

【检验方法的局限性】

仅限于病理组织内容物染色观察。

【注意事项】

1、酸性乙醇分化液分化时间应根据切片厚薄、组织的类别和新旧而定。

2、如蓝化液使用量较大,可自行配制Scott促蓝液或0.1~1%碳酸锂水溶液予以替代。

3、磷钼酸处理时最好在镜下控制,分化到胶原纤维呈淡红色、纤维呈红色即可,分化时间根据染色深浅而定。

4、部分组织脱水时容易造成脱色过度,应注意肉眼控制。

5、本产品仅用于体外诊断,应由专业人士使用及进行结果的判读。

6、使用前应详细阅读说明书,并做好个人卫生防护,在有效期内使用,生产日期和有效期至见包装。

7、用后应按医院或环保部门要求处置废弃物。

【基本信息】

备案人/生产企业名称:安徽雷根生物技术有限公司

住所:淮北凤凰山经济开发区凤冠路三期标准化厂房三号厂房

Masson 三色染色液染色步骤及注意事项

Masson三色染色液染色步骤及注意事项 号:G1340 规格:7×50ml/7×100ml 有效期:12个月有效 产品简介: 结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维:胶原纤维、网状纤维、弹力纤维、而胶原纤维(collagen fiber)是分布最广、含量最多的一种纤维。Masson三色染色又称马松染色,是结缔组织染色中最经典的一种方法,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织,而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。然而,淡绿或苯胺蓝的分子量很大,因此Masson染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈绿色或蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 Masson试剂盒的特点:◆染色稳定;◆分化时间短,1-2秒;◆色彩清楚鲜艳;◆使用范围广,适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色;◆所染切片保存时间长且不易褪色。 产品组成: 规格 名称 7×50ml7×100ml Storage 试剂(A):Weigert 铁苏木素染色液A1:Weigert染液A25ml50ml RT避光A2:Weigert染液B25ml50ml RT 临用时,取A1、A2等量混合,成为Weigert铁苏木素染色液,不可预先配制后放置。试剂(B):酸性乙醇分化液50ml100ml RT 试剂(C):Masson蓝化液50ml100ml RT 试剂(D):丽春红品红染色液50ml100ml RT避光

试剂(E):弱酸溶液50ml100ml RT 试剂(F):磷钼酸溶液50ml100ml RT避光 试剂(G):苯胺蓝染色液50ml100ml RT避光 使用说明书1份 自备材料: 固定液:选用甲醛升汞或甲醛盐溶液、蒸馏水、系列乙醇、二甲苯、染缸 操作步骤(仅供参考): 1、切片常规脱蜡至水。 2、用配制好的Weigert铁苏木素染色液染色5min-10min。 3、酸性乙醇分化液分化5-15s,水洗。 4、Masson蓝化液返蓝3-5min,水洗。 5、蒸馏水洗1min。 6、丽春红品红染色液染色5-10min。 7、在上述操作过程中按蒸馏水:弱酸溶液=2:1比例配置弱酸工作液,用弱酸工 作液洗1min。 8、磷钼酸溶液洗1-2min 9、用配置好的弱酸工作液洗1min。 10、直接放入苯胺蓝染色液中染色1-2min。 11、用配置好的弱酸工作液洗1min。 12、95%乙醇快速脱水。 13、无水乙醇脱水3次,每次5-10s。 14、二甲苯透明3次,每次1-2min。

HE Masson染色

4.2肺组织病理学观察 4.2.1石蜡切片的制作方法 (1)取材与固定:取各组小鼠左肺叶迅速用10%中性甲醛溶液固定24小时; (2)脱水:将标本放入PBS缓冲液(PH7.4)内12小时,中间更换两次,先 后入70%酒精、80%酒精、90%酒精、95%酒精、100%酒精I、100%酒精11各 30分钟,用由低浓度到高浓度酒精作脱水剂,逐渐脱去组织块中的水分; (3)二甲苯透明:二甲苯I、11透明,用以替换出组织块中的酒精; (4)常规石蜡包埋:将已透明的组织块置于已溶化的石蜡中,放入溶蜡箱保温, 石蜡I 15分钟、石蜡II25分钟、石蜡III 30分钟,待石蜡完全浸入组织块中后时 行包埋,常温凝固成块; (5)用石蜡切片机进行连续石蜡切片,厚5微米,切下的薄片放在45℃水中, 要尽量展开,再贴在载玻片上,放在45℃恒温箱中烘干,防水密封,低温保存 备用,用于HE染色、Masson染色、及IL一17A免疫组化。 4.2.2HE染色 (1)将切片分别置于二甲苯I、二甲苯II、100%酒精I、100%酒精II、95% 酒精、90%酒精、80%酒精、70%酒精各10分钟脱蜡,再浸入流动自来水中洗去 酒精; (2)苏木精染色1分钟,自来水冲洗; (3)1%盐酸分化10秒,褪去胞浆中的苏木精染色; (4)1%的氨水蓝化5秒,伊红染色2分钟; (5)梯度酒精脱水:70%酒精,80%酒精,90%酒精,95%酒精,各2分钟, 100%酒精I,100%酒精11,各10分钟; (6)二甲苯透明:二甲苯I 2分钟,二甲苯II 5分钟,二甲苯III 10分钟; (7)中性树胶封片。 4.2.3MaSSon染色 (l)切片常规脱蜡至蒸馏水; (2)将切片置于丽春红酸性品红液中染2分钟; (3)入0.2%冰醋酸水溶液2分钟; (4)5%磷铝酸水溶液酶染2分钟; (5)0.2%冰醋酸水溶液洗2分钟; (6)甲基绿染色3分钟,自来水冲洗; (7)95%酒精分色,梯度酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片。 4.2.4小鼠肺组织的形态学分级标准 左肺石蜡切片进行染色后,由病理科医师在光学显微镜下观察肺组织病理 学改变。采用szapiel[25]等建立的方法评价肺泡炎(o一m级)和肺纤维化(0一111级) 程度。 (1)肺泡炎分级: ①O级:无炎症表现: ②工级:轻度肺泡炎,有少量炎症细胞浸润,肺泡间隔稍增宽; ③H级:中度肺泡炎,炎症细胞较前增多,肺泡形态更紊乱; ④111级:重度肺泡炎,大量炎症细胞浸润,病变呈弥漫性,肺泡结构完全破 坏。 (2)肺纤维化分级: ①0级(1分):正常肺组织,无或极少量细丝状胶原纤维;

Masson三色染色试剂盒说明书

Masson三色染色试剂盒说明书 Masson 三色染色试剂盒说明书(南京森贝伽生物科技有限公司) 【产品介绍】 Masson 染液是显示组织中纤维染色的主要方法之一,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关。分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织,而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。淡绿分子量最大。因此Masson 染色肌纤维红色,胶原纤维绿色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 【用途】主要用于胶原纤维染色。 【产品特点】 ①染色稳定;②分化时间短,1~2 分钟;③色彩清晰鲜艳;④适用范围广,适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色;⑤所染切片保存时间长且不易褪色。 固定:甲醛升汞或甲醛盐溶液。 切片:所有类型。 【产品组成】 编号名 SBJ0126 (7×50ml)SBJ0126 (7×100ml) SBJ0126 (7×500ml) Storage 试剂(A) A1:苏木素染色液25ml 100ml 500ml RT A2:三氯化铁水溶液25ml 100ml 500ml RT 临用时取A1、A2 等量混合,成为试剂(A),不可预先配制后放置,因染色液的色素根与铁 会化合,形成不容性沉淀,等量混合后,一般24h 后失去染色力。 试剂(B): 盐酸乙醇分化液50ml 100ml 500ml RT 试剂(C): 氨水水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂(D): 丽春红酸性品红染色液50ml 100ml 500ml RT 试剂(E): 乙酸水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂(F): 磷钼酸水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂(G): 苯胺蓝染色液50ml 100ml 500ml RT 【参考操作步骤】 1、切片脱蜡至水。 2、试剂(A)染色5min~10min。 3、试剂(B)分化、水洗,试剂(C)返蓝、水洗。 4、蒸馏水或者去离子水洗1min。 5、试剂(D)染色5~10min。 6、试剂(E)洗1min。 7、试剂(F)洗1~2min。 8、试剂(E)洗1min。

改良Masson 三色染色液使用说明

改良Masson三色染色液使用说明 货号:G1345 规格:8×50ml/8×100ml 有效期:12个月有效 产品简介: 结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维:胶原纤维、网状纤维、弹力纤维、而胶原纤维(collagen fiber)是分布最广、含量最多的一种纤维。Masson三色染色又称马松染色,是结缔组织染色中最经典的一种方法,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织,而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。然而,淡绿或苯胺蓝的分子量很大,因此Masson染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈绿色或蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 改良Masson染色胶原纤维呈蓝色,肌纤维、胞质、纤维素、角蛋白和红细胞呈红色,胞核呈蓝褐色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 改良Masson三色染色与常规Masson三色染色的区别在于采用天青石蓝苏木素淡染细胞核。其特点在于:分化时间短(1~2分钟);色彩清晰鲜艳;适用范围广,适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色;所染切片保存时间长且不易褪色。改良Masson染色胶原纤维呈蓝色,肌纤维、胞质、纤维素、角蛋白和红细胞呈红色,细胞核呈蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 产品组成: 规格 8×50ml8×100ml Storage 名称 试剂(A):Bouin液50ml100ml RT 试剂(B):天青石蓝染色液50ml100ml4℃避光 试剂(C):Mayer苏木素染色液50ml100ml4℃避光

masson染色步骤(临床医学研究中心总结)

试剂名:改良 Masson 三色染色液货号:G1345 品牌:索莱宝 1、石蜡切片65℃烘烤1h(使组织更贴合玻片,并溶解石蜡。如果是刚切好的切片,则烘烤2-3h),立即放入脱蜡剂中脱蜡; 2、脱蜡:脱蜡剂Ⅰ(15min)、脱蜡剂Ⅱ(15min) 水化:无水乙醇I(5min)、无水乙醇 II(5min)、95%乙醇I(5min)、95%乙醇II (5min)、85%乙醇(5min)、75%乙醇(5min)脱蜡处理,蒸馏水3min 3、将 Bouin 液滴在组织上,于室温作用一晚或置入 37℃的温箱内 2h 进行媒染,然后流水冲洗至切片组织上的黄色消失。 4、天青石蓝染色液滴染3min,稍水洗玻片上无染料即可。 5、Mayer 苏木素染色液滴染3min,稍水洗玻片上无染料即可。(显微镜下观察,细胞核呈现深蓝色,细胞质有蓝色) 6、酸性乙醇分化液分化3-5s,流水冲洗 10min返蓝。(细胞核呈现灰蓝色,细胞质应相对透明无色) 7、丽春红品红染色液染 2-5min,稍水洗玻片上无染料即可。(容易造成深红或紫红色,基本看不清细胞核。建议先染色30s-1min,显微镜下观察,适当增加时间) 8、磷钼酸溶液浸泡10min,倾去上液,切片不用水洗,直接滴入苯胺蓝染色液染 5- 10min。(如果丽春红染色过深,苯胺蓝也应该适当染久一些,最终应该是红蓝色分明,能明显分辨出胶原显微) 9、弱酸溶液处理 2min。 10、透明:切片直接依次放入无水乙醇 I(5min)-无水乙醇 II(5min)- 脱蜡剂Ⅰ(5min)- 脱蜡剂Ⅱ(5min)。然后用纸巾擦干玻片上残余脱蜡剂,或直接铺平玻片在通风橱内,干燥脱蜡剂。使用中性树脂封片。 注:masson染色不像HE可以把颜色洗脱再重复步骤,建议使用同一批切片,先摸索染色时间。

改良Masson三色染色液

仅供科研版本号:170410 改良Masson三色染色液 【产品组成】 【保存条件】 4℃,避光,12个月 【产品概述】 结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维:胶原纤维、网状纤维、弹力纤维,而胶原纤维(collagen fiber)是分布最广、含量最多的一种纤维。Masson三色染色又称马松染色,是结缔组织染色中最经典的一种方法,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。然而,淡绿或苯胺蓝的分子量都很大,因此Masson染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈绿色(淡绿)或蓝色(苯胺蓝),主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 改良Masson三色染色与常规Masson三色染色的区别在于采用天青石蓝苏木素淡染细胞核。其特点在于分化时间短(1~2min);色彩清晰鲜艳;适用范围广,适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色;所染切片保存时间长且不易褪色。胶原纤维呈蓝色,肌纤维、胞质、纤维素、角蛋白和红细胞呈红色,胞核呈蓝褐色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 【使用方法】 1、组织固定于10%福尔马林固定液,常规脱水包埋。切片厚4μm,常规脱蜡至水。 2、切片入Bouin液,室温作用一晚或置入37℃温箱内2h进行媒染,然后流水冲洗至切片上的黄色消失。 3、天青石蓝染色液滴染2~3min,稍水洗。 4、Mayer苏木素染色液滴染2~3min,稍水洗。 5、酸性乙醇分化液分化数秒,流水冲洗10min。 6、丽春红品红染色液滴染10min,蒸馏水稍冲洗。 7、磷钼酸溶液处理约10min。 南京森贝伽生物科技有限公司网址:https://www.doczj.com/doc/5516308199.html,/ 第1页

masson三色法染色

Masson复合染色液的配制: 酸性复红1 g 丽春红2 g 橘黄G 2 g 0.25%醋酸300 ml 混匀,过滤后备用。 亮绿染色液的配制: 亮绿干粉0.1 g 0.2%醋酸100 ml 充分混匀,过滤后备用。 Masson染色 (1)常规脱蜡至水:二甲苯Ⅰ10 min→二甲苯Ⅱ10 min→100%酒精Ⅰ5 min→100%酒精Ⅱ5 min→95%酒精3 min→90%酒精3 min→80%酒精3 min→70%酒精3 min→蒸馏水1 min (2)Masson染色:Masson复合液5 min→自来水过洗2次→0.2%醋酸Ⅰ1 min→0.2%醋酸Ⅱ1 min→自来水过洗1次→1%磷钨酸6 min→自来水过洗1次→亮绿15min→自来水过洗2次→0.2%醋酸Ⅰ1 min→0.2%醋酸Ⅱ1 min→自来水过洗1次 (3)常规脱水透明:70%酒精30 s→80%酒精30 s→90%酒精30 s→95%酒精30 s→100%酒精Ⅰ5 min →100%酒精Ⅱ5 min→二甲苯Ⅰ5 min→二甲苯Ⅱ10 min→中性树胶封片 至于操作要点的话觉得就是在masson复合液和亮绿的染色时间得摸索一下,还有就是70,80酒精时间尽量短,脱色很厉害,不过要是实在脱得严重的话,还可以倒回来重新染色 附图一张,心肌梗死masson染色,肌纤维红色,胶原绿色,红细胞橘黄色

高倍镜下

脱水 4%多聚甲醛中固定,常规石蜡包埋切片; 切片脱蜡至水后入重铬酸钾—醋酸液或3%升汞处理1小时; 水洗后染Regaud氏苏木素10分钟; 自来水充分洗后,用2%盐酸酒精分化; 流水冲洗到蓝黑色; 1%丽春红酸性品红液中染5分钟; 蒸馏水洗; 1%磷钼酸水溶液媒染5分钟; 不经水洗入2%淡绿液3分钟; 1%醋酸液分色1分钟; 脱水、透明、中性树胶封固。 结果:细胞核染黑蓝色,胶原纤维呈绿色,神经胶质纤维、肌纤维、红细胞呈红色。

油红O染色法及Masson染色法

油红O染色及Masson染色 油红O染色 1. 染色液的配制 材料:油红染料棕色可密封瓶异丙醇研钵漏斗定性滤纸 称取预先研磨粉碎的0.5g油红干粉,溶于少量异丙醇中,然后加异丙醇至100ml,棕色瓶密封(或锡箔纸包裹避光)4℃保存,为储存液,可长期保存。用时取6ml加三蒸水4ml 混匀,定性滤纸过滤,稀释后数小时内用完。 2. 10%中性甲醛的配制 材料:中性甲醛(多聚甲醛)密封瓶 称取1g中性甲醛粉末,加入10ml的三蒸水中,密封,在60度水浴中过夜才能溶解。配好的溶液1个星期内有效,最好4度保存。 3.染色对象间充质细胞脂肪诱导后不同时间段。 4.培养载体 3毫升培养瓶。如果培养载体为塑料制品,hoechst33342染核的话,塑料板自发荧光也为蓝色,必须考虑。 5.染色步骤: 5.1 先小心轻缓倒去培养夜。 5.2 用pbs轻缓漂洗(不洗没问题)。 5.3 加10%中性甲醛固定30min(实际固定时间过夜都没问题。固定液用95%酒精也可)。固定的是细胞膜。 5.4 稀释油红储存液,油红:去离子水=3:2,滤纸过滤,室温放置10min(除去一些杂质,染色结果更清晰)。 5.5 染色10min左右,加的体积覆盖住板底即可,如6孔加1.5ml,24孔加0.5-1ml(实际染色时间1小时都可以)。 5.6 脱色,用75%酒精/60%异丙醇漂洗,除去多余的染料(实际用其他平衡液洗也没问题,背景并不会残留多少)。 5.7 复染,淡苏木染色1/5分钟,pbs漂洗(这一步不做也可,看试验需要,并且苏木素会把胞浆染红,如要显示核, hoechst33342也可以,浓度5微克/毫升染10分钟即可把核染上)。 5.8甘油明胶封片(封片后可长期保存)。 5.9 显微镜观察。注意事项: 脂肪油红染色,有的是动物/人体脂肪组织切片,或细胞爬片。各有操作差异。以下是各论坛方法小结,不全。 1.完全成熟饱满的脂肪细胞,容易破裂,脂滴泄漏,所以压片,切片都要考虑到这个问题。 2.细胞爬片细胞溶液脱落,特别是脂滴大的。操作务要轻柔。不要把细胞冲掉。 3.如果做脂肪组织冰冻切片,冰冻温度比普通要低,切片厚度加厚。

masson染色结果分析教程文件

精品文档 精品文档Masson三色染色液说明书 【产品名称】 Masson三色染色液 【包装规格】 货号:DC0032 套组包装规格:8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒 【预期用途】 主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。 【检验原理】 Masson三色染色又称马松染色,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法,所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织,苯胺蓝的分子量很大,染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 【主要组成成分】 试剂组成主要成分 1、Weigert铁苏木素A液苏木素 2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁 3、酸性乙醇分化液乙醇 4、蓝化液 碳酸盐 5、丽春红品红染色液丽春红、品红 6、乙酸溶液乙酸 7、磷钼酸溶液磷钼酸 8、苯胺蓝染色液 苯胺蓝 【储存条件及有效期】 5℃~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为l8个月,在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。 【样本要求】 组织片充分固定和脱蜡。 【检验方法】 1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等,流水冲洗,常规脱水包埋; 2、切片常规脱蜡至水; 3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液,用Weigert铁苏木素染色液染色,流水稍洗; 4、酸性乙醇分化液分化数秒,流水冲洗数分钟; 5、蓝化液返蓝数秒,流水冲洗数分钟; 6、丽春红品红染色液染色数分钟,流水稍冲洗; 7、将蒸馏水:乙酸溶液按一定的比例配制乙酸工作液,用乙酸工作液洗切片; 8、磷钼酸溶液处理后,倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗);

百度文库-Masson染色液说明书

广州市外显子生物技术有限公司Http//https://www.doczj.com/doc/5516308199.html, Masson染色液说明书 货号:S-1518 规格:20ml 产品组成: 名称规格保存 Weigert铁苏木素A液20ml RT避光 Weigert铁苏木素B液20ml RT避光 丽春红酸性品红染液20ml 2-4℃低温环境 磷钼酸溶液20ml 2-4℃低温环境 苯胺蓝染液20ml 2-4℃低温环境 盐酸酒精分化液1%冰醋酸溶液20ml 2-4℃低温环境20ml 2-4℃低温环境 简介: 利用两种或三种阴离子染料混合一起或先后作用完成染色,与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关,根据组织不同的渗透性能,选择分子大小不同的阴离子的染料进行染色,便可把不同组织成分显示出来。 储存条件:本试剂盒应贮存于2-4℃低温环境。 有效期:原包装未开封试剂有效期为12 个月,在有效期内的已开封试剂应在开封后 6 个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。操作步骤: 1.切片脱蜡至水。 2.Weigert铁苏木素使用前Weigert铁苏木素A、B 液等比例混合。染10-20分钟,流水稍洗。 3.盐酸酒精分化,流水冲洗数分钟。 4.丽春红酸性品红染液染5-10分钟,蒸馏水稍冲洗。 5.磷钼酸溶液处理约5分钟,去掉溶液,不用水洗,直接用苯胺蓝染液复染5分钟。 6.1%冰醋酸处理1分钟,95%酒精脱水。 7.无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树脂封固。 注意事项: 1.Weigert铁苏木素分A、B两液,应于临用前将两液等份混合使用,而不宜预先混合,否则容易氧化沉淀而逐渐失去染色力。 2.磷钼酸处理时可在镜下控制,见肌纤维呈红色,胶原纤维呈淡红色即可。 染色结果: 骨组织×200 结果判定: 胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色,弹力纤维呈棕色,肌纤维、纤维素和红细胞染红色,细胞核染蓝黑色。

Masson染色技术

胶原纤维染色(Masson三色染色法) 胶原纤维:是三种纤维中分布最广泛,含量最多的一种纤维。广泛分布于各脏器内。在皮肤、巩膜和肌腱最为丰富。胶原纤维染色主要用于和肌纤维的鉴别。应用意义: 定性定量胶原纤维在体内分布广泛。HE染色不能以不同颜色将其显示出来,而胶原纤维定性特染可作到这一点,故在多种疾病的病理诊断和研究用中具有实用价值. 如: 1.显示组织,器官的损伤或炎症的修复与纤维板化程度 2.判断心肌坏死后被除纤维结缔组织所取代的区域:HE染色时胶原纤维与心肌均为红色,胶原纤维染色则使胶原纤维呈红色,心肌纤维呈黄色。 3.鉴别心肌纤维化与心内膜弹纤维增生症。 4.区别胶原纤维透明变性与淀粉样变性。 5. 对肿瘤方面提供诊断和诊断鉴别的依据。 胶原纤维染色结果:胶原纤维呈绿色,肌纤维呈红色,红细胞呈橘红色。 组织样品应为:4%多聚甲醛固定组织,石蜡切片。 天狼猩红:胶原纤维呈红色,细胞核呈绿色,其它成分呈黄色。 V.G染色法 : 胶原纤维:鲜红色,肌纤维:黄色,红细胞:黄色。细胞核:蓝黑或灰色。 Nagar-Olsen染色 观察心肌缺氧早期改变,是早期心肌病变组织染色: 显色结果:缺氧心肌红细胞呈现红色,正常心肌呈黄色或棕黄色,细胞核呈蓝色。丽春红(Ponceau S)新法染色 首先采用维多利亚蓝将细胞核染成绿色,再用Ponceau S 丽春红复合物将胶原纤维染成红色,肌肉成黄色。 实验流程 一、实验试剂 1. Regaud 氏苏木精:苏木精1g,95%酒精10ml,甘油10ml,蒸馏水80ml。将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用; 2. Masson丽春红酸性复红液:丽春红0.7g,酸性复红0.3g,蒸馏水99ml,冰醋酸1ml; 3. 0.2%冰醋酸水溶液:冰醋酸0.2 ml,蒸馏水100 ml; 4. 1%磷钼酸水溶液:磷钼酸1g,蒸馏水100 ml; 5. 苯胺蓝水溶液:苯胺蓝2g,蒸馏水98 ml,冰醋酸2 ml; 6. 1%光绿水溶液:光绿 1g,蒸馏水100 ml。

改良Masson三色染色液

改良Masson三色染色液 简介: Masson三色染色又称马松染色,是结缔组织染色中最经典的一种方法,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。改良Masson三色染色与常规Masson三色染色的区别在于采用天青石蓝苏木素淡染细胞核。胶原纤维呈蓝色,肌纤维、胞质、纤维素、角蛋白和红细胞呈红色,胞核呈蓝褐色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 自备材料: 1.10% 福尔马林固定液 2.蒸馏水 3.系列乙醇 操作步骤(仅供参考): 1、组织固定于10%福尔马林固定液,常规脱水包埋。切片厚4μm,常规脱蜡至水。 2、切片入Bouin液,室温作用一晚或置入37℃温箱内进行媒染,然后流水冲洗至切片上的黄色消失。 3、天青石蓝染色液滴染2~3min,稍水洗。 4、 Mayer苏木素染色液滴染2~3min,稍水洗。 5、酸性乙醇分化液分化数秒,流水冲洗10min。 6、丽春红品红染色液滴染10min,蒸馏水稍冲洗。

7、磷钼酸溶液处理约10min。 8、倾去上液,切片不用水洗,直接滴入苯胺蓝染色液染5min。 9、弱酸溶液处理2min。 10、95%的乙醇快速脱水。无水乙醇脱水3次,每次5~10s。 11、二甲苯透明3次,每次1~2min,中性树胶封固。 染色结果: 胶原纤维蓝色 肌纤维、胞质、纤维素、角蛋白和红细胞红色 细胞胞核蓝褐色 注意事项: 1、切片脱蜡应尽量干净。酸性乙醇的分化时间应根据切片薄厚,组织的类别和新旧而定。 2、磷钼酸的作用一方面是使染上红色的胶原纤维被分化成无色或淡红色 3、苯胺蓝液染色后用弱酸溶液处理,目的是除去原浆内的蓝色,使染色鲜艳和清晰。相关:多聚甲醛溶液,(4% PFA) ,一抗稀释液,葡萄糖检测试剂盒

Masson三色染色操作规程

Masson染色,操作规程 实验目的: Masson染色,用于显示组织中纤维的染色方法之一 实验原理:Masson氏染色时胶原纤维呈蓝色(被苯胺蓝所染),肌纤维呈红色(被酸性品红和丽春红所染),这与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。不同的组织和细胞成分,它们的孔隙大小是不同的。孔隙的大小,决定了组织的渗透性。如孔隙小,组织结构致密,渗透性低;孔隙宽,组织结构疏松,渗透性高。如已固定的组织用一系列阴离子水溶性染料先后或混合染色,则可发现红细胞被最小分子的阴离子染料着染.肌纤维与胞质被中等大小的阴离子染料着染,而胶原纤维则被大分子的阴离子染料着染。由此说明了红细胞对阴离子染料的渗透性最小,肌纤维与胞质次之,而胶原纤维具有最大的渗透性。根据组织不同的渗透性能,选择分子大小不同的阴离子染料进行染色,便可把不同组织成分显示出来.而染料分子的大小,主要由其分子量来体现。小分子量者易于穿透结构致密、渗透性低的组织,而大分子最者则只能进入结构疏松,渗透性高的组织。一般来说,结构疏松,渗透性高的组织多选择大分子染料,而结构致密,渗透性低的组织多选择小分子染料。 试剂仪器: Harris 氏苏木精:苏木精0.4g,硫酸铝钾6g,黄色氧化汞0.16g,蒸馏水80ml。将蒸馏水预热,预热过程中加入硫酸铝钾,沸腾后拔下电源,加入苏木精,接通电源再度沸腾后,拔掉电源,缓慢加入氧化汞,搅拌混匀,冷却后第二天加入5%比例的冰醋酸即可用。透明玻璃瓶装缓慢氧化可省略冰醋酸,长期有效。Masson丽春红酸性复红液:丽春红0.7g,酸性复红0.3g,蒸馏水99ml,冰醋酸1ml。 1%冰醋酸水溶液:冰醋酸1 ml,蒸馏水100 ml。 1%磷钼酸水溶液:磷钼酸1g,蒸馏水100 ml。 1%苯胺蓝水溶液:苯胺蓝1g,蒸馏水100 ml,冰醋酸2 ml。 1%光绿水溶液:光绿 1g,蒸馏水100 ml

Masson三色染色

Masson 三色染色 一、实验原理 结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维:胶原纤维、网状纤维、弹力纤维、而胶原纤维(collagen fiber)是分布最广、含量最多的一种纤维。Masson 三色染色又称马松染色,是结缔组织染色中最经典的一种方法,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织,而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。然而,淡绿或苯胺蓝的分子量很大,因此 Masson 染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈绿色或蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 二、实验材料 Masson 试剂盒厂家货号:索莱宝 G1340 产品组成: 试剂(A):Weigert 铁苏木素染色液 A1:Weigert 染液A 25ml RT避光 A2:Weigert 染液B 25ml RT 临用时,取 A1、A2 等量混合,成为 Weigert 铁苏木素染色液,不可预配制后放置。 试剂(B): 酸性乙醇分化液 50ml RT 试剂(C): Masson 蓝化液 50ml RT 试剂(D): 丽春红品红染色液 50ml RT 避光 试剂(E): 弱酸溶液 50ml RT 试剂(F): 磷钼酸溶液 50ml RT 避光 试剂(G): 苯胺蓝染色液 50ml RT 避光 自备材料:固定液:选用甲醛升汞或甲醛盐溶液 系列乙醇 二甲苯 操作步骤(仅供参考): 1、切片常规脱蜡至水。 2、用配制好的 Weigert 铁苏木素染色液染色 5min-10min。 3、酸性乙醇分化液分化 5-15s,水洗。 4、 Masson 蓝化液返蓝 3-5min,水洗。 5、蒸馏水洗 1min。 6、丽春红品红染色液染色 5-10min。 7、在上述操作过程中按蒸馏水:弱酸溶液=2:1 比例 配置弱酸工作液,用弱酸工作液洗 1min。 8、磷钼酸溶液洗 1-2min

Masson三色染色液使用说明

Masson三色染色液使用说明 规格:7×50ml/7×100ml 有效期:12个月有效 产品简介: 结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维:胶原纤维、网状纤维、弹力纤维、而胶原纤维(collagen fiber)是分布最广、含量最多的一种纤维。Masson三色染色又称马松染色,是结缔组织染色中最经典的一种方法,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织,而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。然而,淡绿或苯胺蓝的分子量很大,因此Masson染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈绿色或蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 Masson试剂盒的特点:◆染色稳定;◆分化时间短,1-2秒;◆色彩清楚鲜艳;◆使用范围广,适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色;◆所染切片保存时间长且不易褪色。 产品组成:

试剂(B):酸性乙醇分化液50ml100ml RT 试剂(C):Masson蓝化液50ml100ml RT 试剂(D):丽春红品红染色液50ml100ml RT避光试剂(E):弱酸溶液50ml100ml RT 试剂(F):磷钼酸溶液50ml100ml RT避光试剂(G):苯胺蓝染色液50ml100ml RT避光使用说明书1份 自备材料: 固定液:选用甲醛升汞或甲醛盐溶液、蒸馏水、系列乙醇、二甲苯、染缸 操作步骤(仅供参考): 1、切片常规脱蜡至水。 2、Weigert铁苏木素染色液染色5min-10min。 3、酸性乙醇分化液分化、水洗。 4、Masson蓝化液返蓝、水洗。 5、蒸馏水洗1min。 6、丽春红品红染色液染色5-10min。

Masson三色染色试剂盒

Masson三色染色试剂盒 产品简介: Masson三色染色是结缔组织染色中最经典的一种方法,是显示组织中纤维的主要方法之一,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。然而,淡绿或苯胺蓝的分子量都很大,因此Masson染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈绿色(淡绿)或蓝色(苯胺蓝),主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 Leagene Masson三色染色试剂盒的特点:①染色稳定;②分化时间短,1~2s;③色彩清晰鲜艳;④适用范围广,适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色;⑤所染切片保存时间长且不易褪色。 产品组成: 主要成分: 试剂(A): 主要由苏木素和氯化铁等组成。 试剂(B): 主要由乙醇、酸溶液等组成。 试剂(C): 主要由稀氨水等组成。 试剂(D): 主要由丽春红、品红等组成。 试剂(E): 主要由乙酸等组成。

试剂(F): 主要由磷钼酸等组成。 试剂(G): 主要由苯胺蓝、弱酸等组成。 自备材料: 1、固定液:选用甲醛升汞或甲醛盐溶液,亦可选购leagene的中性福尔马林试剂(DF0111) 2、95%乙醇、无水乙醇等系列乙醇 3、蒸馏水或去离子水 操作步骤(仅供参考): 1、切片常规脱蜡至水。 2、用配制好的试剂(A)染色5~10min。 3、用酸性乙醇分化液分化、水洗。 4、用氨水溶液返蓝、水洗。 5、蒸馏水或者去离子水洗1min。 6、丽春红品红染色液染色5~10min。 7、用乙酸溶液洗1min。 8、磷钼酸溶液洗1~2min。 9、用乙酸溶液洗1min。 10、直接放入苯胺蓝染色液中染色1~2min。 11、乙酸溶液洗1min。 12、95%乙醇快速脱水。 13、无水乙醇(Ⅰ) 5~10s。 14、无水乙醇(Ⅱ) 5~10s。 15、无水乙醇(Ⅲ) 5~10s 16、二甲苯(Ⅰ) 1~2min 17、二甲苯(Ⅱ) 1~2min 18、二甲苯(Ⅲ) 1~2min 19、中性树胶封固。 染色结果: 细胞核,胶原纤维/蛋白蓝色 胞浆、肌肉、红细胞红色

masson染色结果分析

Masson三色染色液说明书 【产品名称】 Masson三色染色液 【包装规格】 货号:DC0032 套组包装规格:8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒 【预期用途】 主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。 【检验原理】 Masson三色染色又称马松染色,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法,所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织,苯胺蓝的分子量很大,染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 【主要组成成分】 试剂组成主要成分 1、Weigert铁苏木素A液苏木素 2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁 3、酸性乙醇分化液乙醇 4、蓝化液碳酸盐 5、丽春红品红染色液丽春红、品红 6、乙酸溶液乙酸 7、磷钼酸溶液磷钼酸 8、苯胺蓝染色液苯胺蓝 【储存条件及有效期】 5℃~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为l8个月,在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。 【样本要求】 组织片充分固定和脱蜡。 【检验方法】 1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等,流水冲洗,常规脱水包埋; 2、切片常规脱蜡至水; 3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液,用Weigert铁苏木素染色液染色,流水稍洗; 4、酸性乙醇分化液分化数秒,流水冲洗数分钟; 5、蓝化液返蓝数秒,流水冲洗数分钟; 6、丽春红品红染色液染色数分钟,流水稍冲洗; 7、将蒸馏水:乙酸溶液按一定的比例配制乙酸工作液,用乙酸工作液洗切片; 8、磷钼酸溶液处理后,倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗); 9、苯胺蓝染色液复染,倾去玻片上染色液(不用水洗); 10、用乙酸工作液处理切片,至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制); 11、95%乙醇迅速脱水,无水乙醇脱水数次后,二甲苯透明,中性树胶封固。 【检验结果的解释】

马松三色染色原理masson.

Masson染色(2010-09-02 14:43:20 转载 标签:杂谈分类:实验日志 masson 染色原理 Masson三色法 (根据Masson,1929 试剂配制 (一 Weigert氏铁苏木素液(见苦味酸——酸性品红法(二丽春红酸性品红液 丽春红(Ponceau 2R 0.7g 酸性品红(acid fuchsin 0.3g 蒸馏水 99ml 冰醋酸(glacial acetic acid 1ml (三 1%磷钼酸水溶液 磷钼酸(phosphomolybdic acid 1g 蒸馏水加至 100ml (四 2%苯胺蓝液 苯胺蓝(aniline blue 2g 冰醋酸(glacial acetic acid 2ml

蒸馏水加至 100ml (五亮绿液 亮绿(light green 1g 蒸馏水 99ml 冰醋酸(glacial acetic acid 1ml 操作方法 1. 组织固定于Bouin氏液或Zenker氏液,流水冲洗一晚,常规脱水包埋。 2. 切片脱蜡至水。 如用Zenker氏液固定者,应进行除汞处理,其步骤如下: (1 切片脱蜡后于0.5%碘酒精作用10分钟。 (2 稍水洗 (3 5%硫代硫酸钠作用5分钟。 (4 流水冲洗10分钟 3. Weiger氏铁苏木素染5-10分钟。 4. 流水稍洗。 5. 1%盐酸酒精分化。 6. 流水冲洗数分钟。 7. 丽春红酸性品红液染5-10分钟。 8. 蒸馏水稍冲洗。

9. 1%磷钼酸水溶液处理约5分钟。 10.不用水洗,直接用苯胺蓝液或绿液复染5分钟。 11.1%冰醋酸处理1分钟。 12.95%酒精脱水多次。 13.无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封固 结果: 胶原纤维虽蓝色(用苯胶蓝液复染或绿色(用亮绿复染。胞质、肌纤维和红细胞红色。胞核蓝褐色。 注意事项: 1.组织用Bouin氏液或Zenker氏液固定为佳。如已用10%甲酸液固定,切片可在脱蜡至水后.再放入Bouin氏液作用一晚或置37。C温箱内1-2小时,然后流水冲洗切片至黄色消失再进行染色。 2.铁苏木素染核(见苦味酸一酸性品红法。 3.如没有丽春红染料,可把酸性品红加至1克来配制。 4.用1%磷钼酸处理时可在镜下控制.见肌纤维呈红色,胶原纤维呈淡红色即可。 染色原理: 上面介绍的胶原纤维染色如苦味酸-酸性品红法和三色染色法,都是利用两种或三种阴离子染料混合一起或先后作用而完成鉴别染色的。Van Gieson氏染色中,为什么胶原纤维呈红色(被酸性品红所染,肌纤维呈黄色(被苦味酸所染.而Masson氏染色时胶原纤维呈蓝色(被苯胺蓝所

Masson染色液

Masson 三色染色液 20ml*5 RT 产品简介: 由Mallory 三色染色改造,利用两种或三种阴离子染料混合一起或先后作用完成染色,与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。根据组织不同的渗透性能,选择分子大小不同的阴离子的染料进行染色,便可把不同组织成分显示出来。 包装内容: 保存条件:室温保存,有效期1年。 操作说明: 1、 组织固定于4%多聚甲醛溶液,Bouin 氏液或Zenker 氏液,流水冲洗过夜, 常规脱水包埋。 2、 切片脱蜡至水。 3、 Weigert 铁苏木素(Weigert 铁苏木素A 、B 液等比例混合液)染5-10min ,流水稍洗。 4、 1%盐酸酒精稍分化,流水冲洗数分钟返蓝。 5、 丽春红酸性品红染液染5-10min ,蒸馏水快速冲洗。 6、 磷钼酸溶液处理约2min ,不用水洗直接用苯胺蓝染液复染5min 。 7、 1%冰醋酸处理1min ,95%酒精脱水多次。 8、 无水酒精脱水,二甲苯透明。中性树胶封固。 染色结果: 胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色。弹力纤维呈棕色。肌纤维、纤维素和红细胞染红色。细胞核染蓝黑色。 注意事项: 1、 Weigert 铁苏木素分A 、B 两液,临用前将两液等比例混合使用。不宜预先混合, 否则容易氧化沉淀而失去染色力。 2、 组织用Bouin 氏液或Zenker 氏液固定为佳。如已用甲醛液固定,切片可在脱蜡至 水后,放入2.5%重铬酸钾媒染剂中处理12-18h ,然后流水冲洗切片至黄色消失再 进行染色。 3、 磷钼酸处理尽可能在镜下控制,见肌纤维呈红色,胶原纤维呈淡红色即可。 4、 切片在各级酒精中脱水,时间不宜过长,否则会将着染的颜色脱去。

病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)

结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法 蓝色:胶原和网状纤维 淡蓝色:软骨、粘液、淀粉样变物质 红色:神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒 橘红色:髓鞘、红细胞 图表 A 1.1.Mallory染色,显示胶原纤维,A组排列规则

1.2. Masson三色染色法 绿色:胶原纤维 红色:肌纤维 橘红色:红细胞 图表 B 1.2 Mssson三色法 图表 C 1.2.Masson三色染色胃癌组织中血管平滑肌

1.3. 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法红色:胶原纤维 黑色:网状纤维 绿色:弹性纤维 淡黄色:肌肉、红细胞 图表 D 4.Weigert间苯二酚法

二、胶原纤维染色法 2.2. Van Gieson(V.G)苦味酸-酸性品红法 鲜红色:胶原纤维 黄色:肌纤维、细胞质、红细胞 蓝褐色:胞核 图表E 2.胶原纤维,Van Gieson(V.G.)苦味酸-酸性品红法 图心肌梗塞myocardial infarction:心肌梗塞后2个月,van Gieson 染色, 坏死心肌被染成红色的纤维组织所代替,黄色区域为残留的心肌纤维。

2.1 天狼星红(Sirius red)苦味酸染色法(参照上图) 红色:胶原纤维 绿色:细胞核 黄色:其他

3.1 Gordon-Sweets银氨染色法(梅花开枝图,金色阳光伴树枝) 黑色:网状纤维 红色:胞核(核固红复染) 黄棕色:胶原纤维 淡红色:细胞质(红液复染) 图表 F 3.Gordon-Sweets氢氧化银氨液浸染法 3.2 Gomori氏银氨液配制法 图表G Gomori氏银氨液配制法

马松MASSON染色

MASSON染色 操作流程及步骤: 1、切片常规脱蜡至水[1-2]。 2、用配制好的Weigert 铁苏木素染色液染色5min-10min[3]。 3、酸性乙醇分化液分化5-15s,水洗[4]。 4、Masson 蓝化液返蓝3-5min,水洗[4]。 5、蒸馏水洗1min。 6、丽春红品红染色液染色5-10min[5]。 7、在上述操作过程中按蒸馏水:弱酸溶液=2:1 比例配制弱酸工作液,用弱酸工作液洗1min。 8、磷钼酸溶液洗1-2min [6]。 9、用配制好的弱酸工作液洗1min。 10、直接放入苯胺蓝染色液中染色1-2min[6]。 11、用配制好的弱酸工作液洗1min。 12、95%乙醇快速脱水。 13、无水乙醇脱水3 次,每次5-10s[7]。 14、二甲苯透明3 次,每次1-2min[6]。 15、中性树胶封固[8]。 心得体会及注意事项: 1、二甲苯Ⅰ-二甲苯Ⅰ-每次五分钟,100%无水乙醇-95%乙醇-80%乙醇-70%乙醇 每次3分钟,最后放入水中2min。 2、二甲苯有毒,要带口罩做好自我防护。 3、Weigert 铁苏木素:配比1:1要现用现配,注意避光,染色时间以5分钟为宜。 4、精确染色时间,酸性乙醇分化时间应该依据切片薄厚,组织的类别和新旧而 定,冲洗要彻底。 5、医大摸索丽春红品红染色时间7分钟。 6、暂定时间为2min。

7、梯度脱水93% 乙醇10F、100%无水乙醇10F。 8、盖盖玻片时注意不要有气泡产生。 说明书中注意事项: 1、切片脱蜡应尽量干净。 2、取A1、A2 等量混合,成为Weigert 铁苏木素染色液,一般24h 失去染色能力。 3、组织固定起着非常重要的作用,使用不同的固定液可延长或缩短染色时间。 4、经典masson 三色染色中,用Harris 苏木精染核,但Harris 苏木精染核后切片颜色不够鲜艳,本染液采用Weigert 染细胞核,因为染色的目的主要在于区分胶原纤维和肌纤维,一般也可以省略该染色步骤。 5、酸性乙醇分化时间应该依据切片薄厚,组织的类别和新旧而定。 6、弱酸溶液可使色彩更清晰鲜艳,如使用量大可自行配制0.1-0.3%乙酸溶液予以替代。 7、磷钼酸分化时要在镜下控制,分化到胶原纤维呈淡红色、纤维呈红色即可。分化时间根据染色深浅而定,一般1-2min。 8、Masson 蓝化液亦可自行配制Scoot 促蓝液或0.1-1%碳酸锂水溶液予以替代。 9、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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