《选修1：生物技术实践》历年真题汇编

2014年

（2014新课标1）39. 植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题:

（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将分解成。

（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的。

（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：

注：“+”表示有，“－”表示无。

据表判断，培养基甲（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是；培养基乙（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是；

【答案】（1）纤维二糖葡萄糖（2）红色透明圈

（3）不能液体培养基不能分离单菌落不能乙培养基中没有纤维素，不会形成CR-纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌

（2014新课标2）39．为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流学科网水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：

（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是；然后，将1mL 水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为。

（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是。

（3）示意图A和B中，表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。

（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液的的含量，同时可以学科网使菌体与培养液充分接触，提高

的利用率。

【答案】（1）检测培养基平板灭菌是否合格 3.8×107

（2）灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落

（3）B （4）溶解氧营养物质

（2014山东）35.（12分）玉米是重要的粮食作物，经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下：

（1）玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可被酵母菌利用发酵生产酒精。培养酵母菌时，该水解产物为酵母菌的生长提供________。发酵过程中检测酵母菌数量可采用_______法或稀释涂布平板法计数。

（2）玉米胚芽油不易挥发，宜选用_______法或________法从玉米胚芽中提取。

（3）玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用________技术可使葡萄糖异构酶重复利用，从而降低生产成本。

（4）利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时，需用耐高温的_______催化。PCR一般要经历三十次以上的循环，每次循环包括变性、_______和_______三步。

【答案】（1）碳源；显微镜直接计数（2）压榨；萃取（注：两空可颠倒）

（3）固定化酶（4）（Taq）DNA聚合酶；（低温）复性（或退火）；（中温）延伸（2014四川）10.有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。

（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、________四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是__________。

（2）与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和_______，这些植物激素一般需要事先单独配置成_________保存备用。

（3）纯化菌株时，通常使用的划线工具是________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________。

（4）为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是________，该实验设计是否合理？为什么？_______。

【答案】（1）氮源和无机盐只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长和繁殖

（2）细胞分裂素母液（3）接种环①接种环灼烧后未冷却；②划线未从第一区域末端开始（4）目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质。不合理，缺少空白对照

2013年

（2013新课标卷Ⅰ）39．回答下列有关泡菜制作的习题：

（1）制作泡菜是，所用盐水煮沸，其目的是。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是。

（2）泡菜制作过程中，乳酸发酵过程即为乳酸菌进行的过程。该过程发生在乳酸菌的中。

（3）泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有、和等。

（4）从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是，原因是。

【答案】（1）消灭杂菌增加乳酸菌含量

（2）无氧呼吸细胞质

（3）温度、食盐用量、腌制时间

（4）乳酸菌数量增加，杂菌数量较少乳酸菌比杂菌更为耐酸

（2013新课标卷II）39.临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。

回答下列问题：

（1）为了从样本中获取致病菌菌落，可用___________法或_____________法将样本借种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。

（2）取该单菌落适当稀释，用________法接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。

（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A，B，C，D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A_________；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B_______；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明__________________________________________；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的____________。

（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗生素_____________。

【答案】（1）划线稀释涂布（或涂布）（2）涂布

（3）敏感不敏感该致病菌对C的敏感性比对A弱耐药菌（4）A （2013海南卷）30.根据生物相关知识，回答胡萝卜素提取和酶应用方面的问题：

（1）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，通常在萃取前将胡萝卜粉碎和，以提高萃取效率；水蒸气蒸馏法（填“适合”或“不适合”）胡萝卜素的提取，原因是；鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时，通常可采用法，并以样品作为对照。

（2）若要提高衣物上血渍的去除效果，可在洗衣粉中加入酶，因为该酶能将血红蛋白水解成可溶性的或；若要提高衣物上油渍的去除效果，洗衣粉中可添加酶；使用加酶洗衣粉时，水温过低或过高时洗涤效果不好的原因分别是。

【答案】（1）干燥不适合水蒸气蒸馏法适用于蒸馏挥发性物质，而胡萝卜素为非挥发性物质，不能随水蒸气蒸馏出（3分）纸层析（2分）标准的胡萝卜素（2分）（2）碱性蛋白（或蛋白）氨基酸小分子肽脂肪水温过低时酶活性较低，水温过高会使酶变性失活（2分）

（2013山东）34.(8分胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜或产生胡萝卜素的微生物体中提取获得，流程如下：

（1）筛选产胡萝卜素的酵母菌R 时，可选用 或平板划线法接种。采

用平板划线法接种时需要先灼烧接种环其目的是 。

（2）培养酵母菌R 时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可以分别为酵母菌R 提供 和 。

（3）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和 ，以防止胡萝卜素分解；

萃取过程中宜采用 方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤。其目的是 。

（4）纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。鉴定过程中需要用胡萝卜素标准品作

为 。

【答案】（1）稀释涂布平板法 灭菌（防止杂菌污染） （2）碳源 氮源

（3）时间 水浴 滤去不溶物 （4）(实验)对照

（2013四川）10．由于酵母菌利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因

转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程菌菌种（过程如图甲所示）。

（1）图甲中，过程①需要的酶有_____________。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应

以____________作为唯一碳源。②、③过程需要重复几次，目的是______________。

（2）某间学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的

接种方法是_____________________；推测该同学接种时可能的操作失误是______________。

（3）以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种

________菌的发酵罐需要先排气，其原因是__________________________。

（4）用凝胶色谱法分离α一淀粉酶时，在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量

较________。

【答案】（1）限制性内切酶和DNA 连接酶 淀粉 分离纯化（PS ：关键点在第二步操

作中的“选取”）

（2）稀释涂布法 菌液稀释浓度较大

（3）工程酵母菌 工程酵母菌利用淀粉能力更强，产生CO2速率更快

（4）较小

图甲 图乙

（2012新课标)39.为了探究6－BA和IAA对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响，某研究小组在MS培养基中加入6－BA和IAA，配制成四种培养基（见下表），灭菌后分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体，在适宜条件下培养一段时间后，统计再生丛芽外植体的比率(m)，以及再生丛芽外植体上的丛芽平均数(n),结果如下表。回答下列问题：

(1)按照植物的需求量，培养基中无机盐的元素可分为和两类。上述培养基中，6－BA属于类生长调节剂。

(2)在该实验中，自变量是，因变量是，自变量的取值范围是。

(3)从实验结果可知，诱导丛芽总数最少的培养基是号培养基。

(4)为了诱导该菊花试管苗生根，培养基中一般不加入 (填“6－BA”或“IAA”)。

【答案】 (1)大量元素；微量元素；细胞分裂素 (2)IAA的浓度；再生丛芽外植体的比率(m)和再生丛芽外植体上的丛芽平均数(n)； 0～0.5mg/L (3)1 (4)6－BA

（2012海南)30.回答下列关于腐乳制作的问题：

（1）腐乳是豆腐经微生物发酵后制成的食品。多种微生物参与了该发酵过程，其中起主要作用的微生物是，其产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解为和；其产生的能将豆腐中的脂肪水解为和。

（2）发酵完成后需加盐腌制，加盐还可以抑制生长。

（3）腐乳制作的后期可加入由酒和多种香辛料配置而成的卤汤。卤汤具有一定的防腐作用外，还能使腐乳具有独特的。

【答案】（1）毛霉肽氨基酸脂肪酶甘油脂肪酸（每空2分，共12分）（2）微生物（2分）（3）风味（1分，其他合理答案也给分）

（2012山东)34．辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。

（1）图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的和过程。

（2）图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值（填“高”或“低”）时，有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时，应采用的灭菌方法是。

（3）图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是。用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是和纤维素酶。

（4）提取辣椒素过程中，萃取加热时需安装冷凝回流装置，其目的是。

【答案】（1）脱分化（或去分化）再分化（2）琼脂低高压蒸汽灭菌

（3）70% 果胶酶（4）防止有机溶剂挥发

（2011年新课标）39.有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于培养基。

（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即和。

（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力。

（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、

和。无菌技术要求试验操作应在酒精灯附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。

【答案】（1）原油选择（2）平板划线法稀释涂布平板法（3）强

（4）干热灭菌法高压蒸汽灭菌法火焰

（11年广东）5.以下关于猪血红蛋白提纯的描述，不正确的是（D）

A.洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止红细胞破裂

B.猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少

C.血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测

D.在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢

（2011年山东）34.研究发现柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示。

（1）柚皮易焦糊，宜采用____________法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过___________除去其中的固体杂质。

（2）筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或____________接种。对新配制的培养基灭菌时所用的设备是_______________。实验前需对超净工作台进行____________处理。

（3）培养基镇南关的尿素可为乳酸菌A生长提供______________。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度___________。

（4）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的______________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

【答案】（1）压榨过滤

（2）稀释涂布平板法（或稀释混合平板法）高压蒸汽灭菌锅消毒

（3）氮源越慢（4）直径（或大小）

（2011年江苏）3．下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述，正确的是（D）

A．腐乳制作所需要的适宜温度最高

B．果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵

C．使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌

D．使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA

（2011年江苏）15．下列有关酶的制备和应用的叙述，正确的是（A）

A．酶解法和吸水涨破法常用于制备微生物的胞内酶

B．透析、电泳和酸解等方法常用于酶的分离与纯化

C．棉织物不能使用添加纤维素酶的洗衣粉进行洗涤

（2010全国卷）34.（12分）下列是与微生物培养有关的问题，请回答：

（1）某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是，碳源是，氮源是。已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，故该培养基属于培养基。按照化学成分分类，该培养基属于培养基。从同化作用类型上看，用该培养基培养的细菌属于。

（2）将少量细菌接种到一定体积的液体培养基中，适宜条件下培养，定时取样测定菌体数目，以时间为横坐标，以细菌数目的对数为纵坐标，可得到细菌的曲线。该曲线中以菌体数目的对数作为纵坐标的原因是。实验室中，为了获得形态和生理特征一致的菌体，一般应在期取材；在生产中，常搜集培养至期的细菌用于次级代谢产物的提取。

【答案】（1）琼脂葡萄糖尿素选择合成异养型

（2）群体生长菌体数目往往非常大，且变化率也很高，以菌体数目的对数为纵坐标有利于作图对数稳定

（2010新课标）37．下列是与芳香油提取相关的问题，请回答：

（1）玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取，其理由是玫瑰精油具有

的性质。蒸馏时收集的蒸馏液 (是、不是)纯的玫瑰精油，原因是

。

（2）当蒸馏瓶中的水和原料量一定时，蒸馏过程中，影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和。当原料量等其他条件一定时，提取量随蒸馏时间的变化趋势是

。

（3）如果蒸馏过程中不进行冷却，则精油提取量会，原因是。

（4）密封不严的瓶装玫瑰精油保存时最好存放在温度的地方，目的是。

（5）某植物花中精油的相对含量随花的不同生长发育时期的变化趋势如图所示。提取精油时采摘花的最合适时间为天左右。

(6)从薄荷叶中提取薄荷油时 (能、不能)采用从玫瑰花中提取玫瑰精油的方法，理由是。

【答案】（1）易挥发、难溶于水、化学性质稳定；不是；玫瑰精油随水蒸气一起蒸馏出来，所得到的是油水混合物

（2）蒸馏温度在一定时间内提取量随蒸馏时间的延长而增加，一定时间后提取量不再增加；（3）下降部分精油会随水蒸气挥发而流失；

（4）较低减少挥发（5）a （6）能薄荷油和玫瑰精油的化学性质相似（2010海南）25．葡萄发酵可产生葡萄酒，请利用相关的知识回答问题：

（1）利用葡萄制作葡萄酒的过程中，发挥作用的微生物是。

（2）该微生物通过无氧呼吸可分解，产生的终产物是和。

（3）甲、乙、丙三位同学将葡萄榨成汁后分别装入相应的发酵瓶中，在温度等适宜的条件

下进行发酵，如图所示。发酵过程中，每隔一段时间均需排气一次。据图分析，甲和丙同学的操

作有误，其中甲同学的错误是，导致发酵中出现的主要异常现象是。丙同学的错误是，导致发酵

中出现的主要异常现象是。上述发酵过程结束后，甲、乙、丙同学实

际得到的发酵产品依次是、、。

（4）在上述制作葡萄酒的过程中，假设乙同学的某一步骤操作错误导致发酵瓶瓶塞被冲开，该操作错误是。

【答案】（1）酵母菌（2分）（2）葡萄糖乙醇CO2（每空1分，共3分）

（3）未夹住发酵瓶的充气管（2分）发酵液从充气管流出，发酵液变酸（1分）

瓶中发酵液过多，淹没了排气管在瓶内的管口（2分）葡萄醋（或果醋）（2分）

葡萄酒（或果酒）（1分）葡萄酒（或果酒）（1分）（4）未及时排气（2分）（2010山东）生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化

石燃料的消耗，科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物

柴油（如下图）。

（1）用于生产生物柴油的植物油不易发挥，宜选用_____________、___________方法从油

料作物中提取。

（2）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中的添加的植物油为微生物生长提供___ ______ ，培养基灭菌采用的最适方法是________________法。

（3）测定培养液中微生物数量，可选用______________法直接计数；从微生物M分离提取

的脂肪酶通常需要检测_______________，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产技术，可利

用____________技术使脂肪酶能够重复使用。

（4）若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的_____技术。

【答案】（1）压榨；萃取（注：两空顺序无先后）（2）碳源高压蒸汽灭菌

（3）显微镜直接计数酶活性（或：酶活力）固定化酶（或：固定化细胞）

（4）PCR（或：多聚链式反应，聚合酶链式反应）

2009年

（2009年海南）25．请回答下列与实验室提取芳香油有关的问题：

（1）植物芳香油的提取可采用的方法有压榨法、和。

（2）芳香油溶解性的特点是不溶于，易溶于，因此可用作为提取剂来提取芳香油。

（3）橘子果实含有芳香油，通常可用作为材料提取芳香油，而且提取时往往选用新鲜的材料，理由是。

（4）对材料压榨后可得到糊状液体，为除去其中的固体物获得乳状液可采用的方法是。

（5）得到的乳状液加入氯化钠并放置一段时间后，芳香油将分布于液体的层，原因是。加入氯化钠的作用是。

（6）从乳状液中分离得到的芳香油要加入无水硫酸钠，此试剂的作用是。

【答案】25．（1）蒸馏法萃取法（2）水有机溶剂有机溶剂

（3）橘子皮芳香油含量较高（4）过滤（5）上油层的密度比水层小

增加水层密度，使油和水分层（6）吸收芳香油中残留的水分

（2009年宁夏）40.【生物——选修1生物技术实践】（15分）

（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑、和

渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、、等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。

（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行________（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能。

（3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的。

（4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的。

（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是。

（6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

【答案】（1）温度酸碱度易培养生活周期短（2）灭菌消毒损伤DNA的结构（3）比例合适（4）鉴定(或分类) （5）将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生（6）灭菌

（2009山东）34.人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下：

请回答：（1）配制诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行。接种前，要对人参根进行。

（2）用于离体培养的根切块，叫做。培养几天后发现少数培养基被污染，若是有颜色的绒毛状菌落，属于污染；若是有光泽的黏液状菌落，属于污染。

（3）用少量酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合成量。

（4）人参皂苷易溶于水溶性（亲水性）有机溶液，从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用方法，操作时应采用加热。

【答案】（1）灭菌消毒（2）外植体真菌（霉菌）细菌（3）果胶（4）萃取水浴

2008年

（2008宁夏）37.根据从胡萝卜中提取胡萝卜素的相关知识及胡萝卜素的性质，回答下列问题。

（1）胡萝卜素是色的结晶，从胡萝卜中提取胡萝卜素，常用作为溶剂，原因是。

（2）从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是法。用这种方法提取胡萝卜素的主要步骤是：粉碎、干燥、。

（3）在胡萝卜颗粒的加热干燥过程中，应严格将和控制在一定范围内，原因是。

（4）提取的胡萝卜素可通过法进行鉴定，在鉴定过程中需要用对照。

（5）一般情况下，提取胡萝卜素时，提取效率与原料颗粒的含水量成比。

【答案】（1）橘黄亲脂性有机溶剂（或有机溶剂）胡萝卜素是脂类物质

（2）萃取萃取过滤浓缩（3）温度时间温度过高和时间过长会导致胡萝卜素分解（4）纸层析标准样品（5）反

（2008年海南）25.（18分）某二倍体植物是杂合体，图为其花药中未成熟花粉在适宜的培养基上培养产生完整植株的过程。据图回答：

（1）图中①表示的是该花粉培养过程中的过程，②表示的是过程，X代表的是，③表示的是过程，④表示的是诱导过程。

（2）图中从愈伤组织形成完整植株的途径有两条，具体通过那一条途径主要取决于培养基成分中的种类及其浓度配比，最后获得的来源于为成熟花粉的完整植株都称为植株（甲）。未成熟花粉经培养能形成完整植株，说明为成熟花粉具有。

（3）对植株进行，才能使其结实产生后代（乙），否则植株甲只有通过的方式才能产生后代（丙）。乙、丙两种植株中，能产生可育花粉的是植株，该植株群体中每一植株产生可育花粉的基因组成种类数为种，该群体植株产生可育花粉的基因组成种类数为种。花药培养在育种上的特殊意义是，从而开辟育种新途径。

【答案】（1）脱分化再分化胚状体分化（或发育）生根（每空1分）

（2）激素单倍体细胞的全能性（每空2分）（3）染色体加倍无性生殖

乙（或经过染色体加倍）一多（每空1分）缩短育种周期（2分）

（2008山东）34.(8分)科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白，这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。

(1)分离该抗菌蛋白可用电泳法，其原理是根据蛋白质分子的、大小及形状不同，在电场中的不同而实现分离。

(2)可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的抗菌特性。抗菌实验中所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供和。

(3)分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的，确定该蛋白质的抗菌效果。

(4)细菌培养常用的接种方法有和。实验结束后，对使用过的培养基应进行处理。

【答案】⑴电荷（带电情况）迁移速度⑵碳源氮源⑶数量

⑷平板划线法稀释涂布平板法（稀释混合平板法）灭菌

2007年

（2007宁夏）32．某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。

（1）培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了____和______。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是_____和______。

（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_______。

（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于______中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种______作为对照进行实验。

（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有_____种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_______。

（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐_______细菌，这种培养基被称为____。

【答案】（1）氮源（碳源不作要求）碳源、无机盐、水（2）高压蒸汽灭菌

（3）恒温培养箱无菌水（4）多；高（5）盐（或NaCl），选择性培养基（2007山东）34．（8分）[生物-生物技术实践]乙醇等“绿色能源”的开发备受世界关注。利用玉米秸杆生产燃料酒精的大致流程为：

（1）玉米秸杆经预处理后，应该选用酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。

（2）从以下哪些微生物中可以提取上述酶？（多选）

A．酿制果醋的醋酸菌 B．生长在腐木上的霉菌

C．制作酸奶的乳酸菌 D．生产味精的谷氨酸棒状杆菌

（3）若从土壤中分离产生这种酶的微生物，所需要的培养基为（按功能分），培养基中的碳源为。

（4）从生物体提取出的酶首先要检测，以便更好地将酶用于生产实践。在生产糖液的过程中，为了使酶能够被反复利用，可采用技术。

（5）发酵阶段需要的菌种是，在产生酒精时要控制的必要条件是。

【答案】（1）纤维素（酶）（2）B、E （3）选择培养基纤维素

（4）酶的活力（活性）固定化酶（固定化细胞）（5）酵母菌无氧（密闭、密封）

（2007年海南）19.（18分）已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下：

(1)实验步骤①所代表的反应过程是。

(2)步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用限制性内切酶和酶，后者的作用是将用限制性内切酶切割的和连接起来。

(3)如果省略步骤②而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能，也不能。

(4)为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可用与进行抗原—抗体特异性反应实验，从而得出结论。

(5)步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白氨基酸序列（相同，不同），根本原因是。

【答案】（1）逆转录（2）DNA连接载体 S基因

（3）复制合成S基因的mRNA （4）大肠杆菌中表达的S蛋白 SARS康复病人血清

（5）相同表达蛋白质所用的基因相同