Ⅰ卷（共55分）
一、单项选择题（本小题共20题，每题2分，共40分）
1．如右图所示，有关酶功能的叙述错误
．．的是
A．切断a处的酶为限制性核酸内切酶
B．DNA连接酶连接a处
C．切断b处的酶为解旋酶
D．连接b处的酶为DNA聚合酶
2．运用某生物工程技术将毒性肽融合进入抗体分子，制造出“导弹药物”，它可自动瞄准和攻击体内的靶组织或靶细胞(如癌细胞)。此技术是
A．基因工程 B．细胞工程C．蛋白质工程 D．胚胎工程
3．深圳市农科集团将包括紫叶生菜、孔雀草等15种生物育种材料随‘神六’在大空邀游110多个小时后返回地面．下列有关生物技术及原理，说法正确的是
A．返回地面后，孔雀草开出不常见的墨色花，其根本原因最可能是基因发生重组
B．如果在孔雀草的种植过程中发现开出了不常见的墨色花，为了快速大量生产宜采用植物组织培养法
C．在培育转基因抗虫孔雀草中，获得目的基因用的工具酶有限制酶、DNA连接酶和载体D．在太空环境(微重力、强辐射等)条件下，孔雀草种子不可能发芽
4．下列材料选择不符合生物工程要求的是
A．采用植物分生区（茎尖）组织培养技术进行作物脱毒
B．采用去核的MⅠ期的卵母细胞作为供体细胞核的受体
C．采用人工改造的天然质粒构建基因表达载体
D．选用传代10代以内的细胞用于核移植的供体细胞
5．用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是
A．都需用CO2培养箱B．都需用液体培养基
C．都要在无菌条件下进行D．都可体现细胞的全能性
6．如果用动物的细胞进行克隆实验应该选择的细胞核不可来源于
A．乳腺细胞 B．卵细胞
C．胃腺细胞 D．囊胚时期的胚胎细胞
7．如果科学家通过转基因工程，成功地把一名女性血友病患者的造血细胞进行改造，使其凝血功能恢复正常。那么，她后来所生的儿子中：
A．全部正常 B．一半正常
C．全部有病 D．不能确定
8．下列有关动物细胞工程的有关说法中，正确的是
A．灭活病毒通过表面的糖蛋白和一些酶与动物细胞膜上的糖蛋白作用，进而诱导融合B．在细胞培养液中添加干扰素，以防止培养过程中的污染
C．动物细胞培养所需的气体主要是CO2，使培养基的pH值维持在7．2～7．4
D．胰蛋白酶将动物细胞膜表面的糖蛋白去掉，细胞黏着性降低，使细胞散开
9.下列关于植物组织培养的叙述中，错误
．．的是
A．培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压
B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化
C．离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织
D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同
10．植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是
A．纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性
B．植物组织培养和动物细胞培养——细胞的全能性
C．原生质体融合和动物细胞融合——生物膜的流动性
D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞增殖
11．右图是某克隆羊培育过程模式图，试分析获得该克隆羊的生殖方式、该克隆羊的基因型以及该克隆羊发育成熟时所分泌的性激素依次是
A．无性生殖、Aa、雌性激素
B．无性生殖、aa、雄性激素
C．有性生殖、aa、雄性激素
D．有性生殖、AA、雌性激素
12．下列关于蛋白质工程及其应用的说法，正确的是
A．蛋白质工程能定向改造蛋白质分子结构，使之更加符合人类需要
B．蛋白质工程的实质是通过改变氨基酸的结构改变蛋白质的功能
C．当前限制蛋白质工程发展的关键因素是基因工程技术还不成熟
D．蛋白质工程技术中的操作对象是蛋白质或控制蛋白质合成的基因
13.下图表示利用植物体细胞杂交技术获得杂种植物白菜—甘蓝的过程，以下说法错误的是
A.①过程表示利用酶解法去除细胞壁获得原生质体的过程
B.②过程常用聚乙二醇诱导原生质体融合
C.③过程中高尔基体活动旺盛
D.最终获得的杂种植物体细胞内含19条染色体
14.关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是
A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同
B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶
C.烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖
D.动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒
15.哺乳动物卵原细胞减数分裂形成成熟卵子的过程，只有在促性腺激素和精子的诱导下才能完成。下面为某哺乳动物卵子及早期胚胎的形成过程示意图（N 表示染色体组）据图分析，下列叙述错误的是
A.次级卵母细胞形成的过程需要激素调节
B.细胞III 只有在精子的作用下才能形成成熟卵子
C.II、III 和IV 细胞分裂后期染色体数目相同
D.培育转基因动物应选择细胞IV 作为受体细胞
16．下列关于胚胎工程的叙述错误的是
A．受精时卵母细胞需发育到减数第二次分裂中期
B．受精时防止多精入卵的两道屏障是顶体反应和卵细胞膜反应
C．胚胎分割可选择囊胚，需要将内细胞团均等分割
D．胚胎移植是胚胎工程最后一道程序，移植的胚胎必须选择在原肠胚之前
17．下列关于人类精子和卵子的发生及受精作用的叙述，正确的是
A．成熟的精子在青春期形成，成熟的卵子在胚胎期形成
B．成熟的精子在睾丸中形成，成熟的卵子在卵巢中形成
C．精子的获能在曲细精管，精子与卵子的结合在输卵管
D．精子变形过程中线粒体聚集到尾的基部，精子穿越放射冠需要顶体酶
18．下列关于胚胎工程的说法不正确的是
A．胚胎移植技术能解决某些不孕症者的生育问题
B．在对囊胚阶段的胚胎分割时要将内细胞团均等分割
C．通过体外诱导胚胎干细胞分化培育供移植的组织器官
D．受体母畜必须经过免疫学检验以防止排斥外来的胚胎
19．通过移植胚胎干细胞期望可以治疗下列哪一组疾病?
①糖尿病②高血压③唐氏综合征(21三体综合征) ④老年痴呆症⑤白化病⑥肝衰竭
A．①②⑤ B．②③⑥
C．①④⑥ D．③④⑤
A．过程①中可通过注射促性腺激素增加排卵数量
B．过程②需要在添加ATP的获能液中完成
C．过程③的培养液中应该添加动物血清
D．过程④成功的条件之一是受体对供体胚胎没有排斥
二、多选题：本题共5个小题，每小题3分，共15分。
21.小鼠杂交瘤细胞表达的单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏反应，为了克服这个缺陷，可选择性扩增抗体的可变区基因（目的基因）后再重组表达。下列相关叙述正确的是
A.设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列
B.用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列
C.PCR体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶
D.一定要根据目的基因编码产物的特性选择合适的受体细胞
22．下图为利用生物技术获得生物新品种的过程，有关说法错误的是
A．A→B过程中一般用4种脱氧核糖核苷酸为原料，并加入一种引物
B．A→B过程利用了DNA复制原理，需要使用耐高温的DNA聚合酶
C．B→C为转基因绵羊的培育过程，常选用的受体细胞是卵母细胞
D．B→D为转基因植物的培育过程，其中④过程常用的方法是农杆菌转化法
23．下列应用涉及基因工程技术的有
A．生产鼠—人嵌合抗体B．培育能生产激素的“超级绵羊”
C．培育高产、优质的“太空椒”D．培育转基因延熟番茄
24．对细胞全能性的表述不正确的有
A．没有离体的成熟植物细胞也能表现出全能性
B．动物细胞融合标志着动物细胞全能性的实现
C．单克隆抗体的制备原理依据是细胞的全能性
D．花粉可培育成单倍体，是细胞全能性的体现
25．下列现代生物科技的应用中，需要进行检测与筛选的是
A．基因工程培育抗虫棉 B．制备单克隆抗体
C．用植物体细胞杂交技术培育“萝卜一甘蓝”
D．对植物的愈伤组织进行诱变处理，培育作物新品种
Ⅱ卷（共65分）
三．非选择题
26．（8分）某质粒上有Sal Ⅰ、Hind Ⅲ、BamH Ⅰ三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题。
(1)将抗盐基因导入烟草细胞内，使烟草植株产生抗盐性状，这种新性状(变异性状)的来源属于______________________________________。
(2)如果将抗盐基因直接导入烟草细胞，一般情况下，烟草不会具有抗盐特性，原因是抗盐基因在烟草细胞中不能__________________，也不能__________________。
培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A和培养基B分别还含有______________、______________。从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是________菌落中的细菌。为了确定抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的________________作探针进行分子杂交检测，又要用______________________________________的方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。
27．（8分）下图是某种动物蛋白质工程示意图，请分析回答：
（1）目前，蛋白质工程中难度最大的图中编号所示的过程，实现③过程的依据有
。
（2）若相关蛋白质的核酸片段是从细胞质中获取的，则④过程表示。（3）为获得较多的受精卵进行研究，⑥过程的处理方案是。若⑥过程所得的卵母细胞是从卵巢中获得的，则体外受精前的⑧过程表示
（4）⑩过程的胚胎发育到时期，为提高培育成功率，进行⑩过程之前，对早期胚胎的处理是，对受体动物的处理是。
28．（8分）口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种偶蹄目动物传染病，目前常用接种弱毒疫苗的方法预防。此疫苗的主要成分是该病毒的一种结构蛋白VPI。科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗，过程如下图所示。请据图回答。
(1)口蹄疫病毒的VPI蛋白在免疫反应中称之为；口蹄疫基因在植物体细胞中也能表达出相同产物的原因是。
(2)过程⑥的培养基中除了加入各种必需营养物质和植物激素外，还需要添加卡那霉素以便筛选出含有
的叶片小段。
(3)在制作含有VPI基因的表达载体时，所选用的载体中有限制酶E、F,G、H的切点各一个。若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从含有VPI目的基因的DNA上进行切割，并将之取代质粒pZHZ1(3．7kb，lkb＝1000对碱基)上相应的E—F区域(0．2kb)，图解如下图2。若再用限制酶G和H各切割一份重组质粒pZHZ2样品，酶切结果如表1所示，试判断VPI目的基因的大小为 kb，酶G和酶H都能将重组质粒切割出两段的原因
是。
(4)获得表达VPI蛋白的番茄植株以后，需要进行免疫效力的测定。具体方法是：将转基因番茄叶片提取液注射到豚鼠体内，每半个月注射一次，三次后检测豚鼠血液内产生的
的量。为了使相应的结论可信，应增设两个对照组，分别注射
和。
29．（8分）有性生殖的生物产生后代需进行受精作用，植物体细胞杂交要进行原生质体的融合，单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合，可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程，据图回答相关问题：
(1)若a、b分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800lx时
都不能生长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞，较为简便的筛选方法是
。杂种细胞含个染色体组。
(2)若a、b表示两种植物体细胞，首先用处理，获得原生质体，由d细胞形成杂种植株的原理是。
(3)若a、b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则d细胞特点是，原因是。由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较，具有的特点。
(4)下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来。顺序是。
30.（8分）玉米是一种主要的农作物，为了提高玉米的产量，科学家做了大量的研究工作。如图是关于玉米培养的过程，请据图回答：
（1）如图A→C，发育成植株D，取D的花药进行离体培养的幼苗，属于，如图E→F，经秋水仙素处理后发育成植株G；从生殖方式上分析，A→D属于__________生殖。
（2）取茎尖进行培养的原因是。（3）A→C的过程要严格控制。
（4）F→G的过程中用处理，使细胞染色体数目加倍，用E→G途径育种的优点是。
（5）若想培育出一种能抗虫的玉米新品种，可以采用育种；若想培育出一种地上结玉米，地下结马铃薯的植株，可以利用技术。
（1）从黑鼠体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为，培养的细胞在贴壁成长至充满培养皿底时停止分裂，这种现象称为
（2）图中2—细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得，该过程称为，也可从灰鼠体内取出卵子，通过后进行早期胚胎培养获得。
（3）图中重组囊胚通过技术移入白鼠子宫内继续发育，暂不移入的胚胎可使用
方法保存。
（4）小鼠胚胎干细胞（ES）可由囊胚的分离培养获得，iPS与ES细胞同样具有发育全能性，有望在对人类iPS细胞进行定向后用于疾病的细胞治疗。
32．（8分）胚胎干细胞的研究是当前生物技术领域研究的热点之一，尤其在生产转基因动物方面具有极大的科研及应用价值。请据图分析回答：
（1）过程Ⅰ将胚胎干细胞置于γ射线灭活的鼠胎儿成纤维细胞的滋养层上，并加入_________、抗生素等物质，维持细胞不分化的状态。在此过程中，滋养层提供干细胞增殖所需的营养物质，加入抗生素是为了________，这对于研究细胞分化和细胞凋亡的机理具有重要意义。
（2）过程Ⅱ将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响的因素，这项研究利用了胚胎干细胞具有___________的特点。在哺乳动物早期发育过程中，囊胚的后一个阶段是_________。
（3）过程Ⅲ中目的基因导入胚胎干细胞最常用的方法是，将目的基因导入胚胎干细胞前需
，其目的是_______ ___。
（4）通过检测目的基因是否表达出蛋白质产品，可以确定该小鼠体内是否成功发生了基因的同源重组。这种检测方法是。
33．（9分）现有甲、乙两种可能有一定致畸、致癌作用的化学物质，利用动物细胞培养的方法能够鉴定它
们是否有毒性，并比较二者毒性的强弱：请完成下列实验报告。
I．实验材料：小白鼠胚胎。
Ⅱ．药品用具：胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、
剪刀、锥形瓶、细胞培养箱、载玻片、盖玻片、光学显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片。
Ⅲ．实验原理：，根据这些变异细胞
占全部培养细胞的百分数（以下称Q值），可判断该化学物质的毒性。
Ⅳ．实验步骤：
（1）制备细胞悬液：把小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加人胰蛋白酶液处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬液。
（2）进行细胞培养：
①取A、B、C三个洁净的培养瓶，。
②。
③。
（3）制作临时装片：
①当细胞繁殖到大约第8代左右时，同时从细胞培养箱中取出三个培养瓶，用处理，使培养的细胞从瓶壁上脱落，再加入动物细胞固定液迅速杀死细胞，将细胞固定在不同的分裂时期。
②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬液。滴在与培养瓶有相同编号的载玻片中央，加1—2滴一定浓度的染色，3—5 min后，盖上盖玻片，制成临时装片。
（4）镜检和统计：把临时装片放在显微镜下，寻找处于期的细胞，并与对比以确认发生上述变异的细胞，同时统计该期变异的细胞占细胞总数的百分数（Q 值）。
V．实验结果：
Ⅵ．实验结论：。
如东中学高二第一学期生物（选修）阶段测试
参考答案
27．（8分）（1）①氨基酸对应的密码子、mRNA与DNA间的碱基互补配对原则
（2）反转录
（3）用促性腺激素进行超数排卵在体外人工培养到减数第二次分裂中期（4）桑椹胚、囊胚取其部分细胞用目的基因探针进行核酸分子杂交检测
用特定的激素进行同期发情处理
28．（8分）
29．（8分）(1) 大于800lx光照 2 (2) 纤维素酶、果胶酶植物细胞的全能性
(3) 既能无限繁殖，又能产生特定的抗体继承了双亲细胞的遗传物质特异性强、灵
敏度高、化学性质单一
(4)
30.（8分）（1）单倍体无性
（2）分生区附近病毒极少，甚至无病毒
（3）无菌（4）秋水仙素直接得到稳定遗传的优良品种，极大地缩短了育种年限（5）基因工程植物体细胞杂交
31. （8分）（1）原代培养接触抑制
（2）冲卵体外受精（3）胚胎移植冷冻（或低温）
（4）内细胞团细胞诱导分化
32.（8分）(1)动物血清防止杂菌污染(2)发育的全能性原肠胚(3)显微注射法构建基因表达载体使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以传给下一代，同时，使目的基因能够发挥作用 (4)抗原—抗体杂交
33．（9分）Ⅲ．将有毒物质加入细胞培养液后，培养的动物细胞会发生染色体数量和结构变异（答出有毒物质使细胞发生变异）