112例少弱精及无精子症患者染色体核型分析
何淑贞;曹金如;苏焕厚;邓汉钊;陈美玲;蒲育栋
【期刊名称】《医药前沿》
【年(卷),期】2016(006)017
【摘要】目的:通过对少弱精症及无精子症患者进行细胞遗传学分析,探讨染色体异常与男性不育之间的关系.方法:对112例患者外周血淋巴细胞进行培养,常规G显带行染色体核型分析.结果:112例患者中,染色体异常9例,异常发生率为8.04％.多态性8例,发生率为7.14％.结论:染色体异常是导致男性不育的重要因素.
【总页数】2页(33-34)
【关键词】少弱精症;无精子症;男性不育
【作者】何淑贞;曹金如;苏焕厚;邓汉钊;陈美玲;蒲育栋
【作者单位】东莞市第三人民医院产前诊断中心广东东莞523326;东莞市第三人民医院产前诊断中心广东东莞523326;东莞市第三人民医院产前诊断中心广东东莞 523326;东莞市第三人民医院产前诊断中心广东东莞 523326;东莞市第三人民医院产前诊断中心广东东莞523326;东莞市第三人民医院产前诊断中心广东东莞 523326
【正文语种】中文
【中图分类】R697+.2
【相关文献】
1.无精子症、重度少弱精子症患者染色体核型与Y染色体微缺失发生率的研究[J], 张雅君; 卢实; 刘琳; 王珊; 李璐璐; 潘蕴苏; 高颖
习惯性流产伴41例异常染色体核型分析 田艳，王厚照，刘芳，史彩虹4 （解放军第174医院检验科，厦门361003） 摘要：目的评价习惯性流产与染色体核型分布的关系。方法对110对习惯性流产夫妇进行外周血染色体核型分析。结果在受检的110对习惯性流产夫妇220例样品中，共检出异常染色体核型41例（女18例、男23例），总检出率为18.6%。在检出的41例染色体异常核型中常染色体结构异常有29例（70.7%），含平衡易位13例（39.02%），罗氏易位3例（7.32%）、臂间倒位3例（7.32%），随体增加5例（12.20%），次缢痕增加5例（12.20%）；性染色体结构异常占12例29.3%。其中大Y染色体5例（12.20%），小Y染色体7例（17.07%）。结论习惯性流产与染色体异常核型密切相关，为降低发病率对夫妻双方进行产前筛查很有必要。 关键词：习惯性流产；染色体；核型分析 中图分类号：R714.21文献标识码：B文章编号：1006－9534（2012）08－0066－02 41cases about karyotype analysis on those habitual abortion abnormal．TIAN Yan，WANG Hou－zhao，LIU Fang，SHI Cai－hong．（174th Hospital of PLA；Xiamen；Fujian361003；China） Abstract：Objective：To study the correlation of chromosome karyotypes and habitual abortion．Methods：Detecting the hromo-some karyotypes of circular lymphocytes in110couples with habitual abortion．Results：Out of110cases，41abnormal chrosome was found，accounting for18.6%of total cases．Including29cases of autosome Abnormalities：13cases of balanced reciprocal transloca-tion and3cases of Robertsonian translocations，2cases of inversions，5cases of satellite increases and5cases of secondary constric-tion．12cases of sex chromosome abnormalities：5cases of large Y chromosom and7cases of small Y chromosom．Conclusion There is a close relationship between chromosome karyotypes and habitual abortion，antepartum screening is necessary to the couples for the purpose of depressed． Key words：Habitual abortion；Chromosomes；Karyotyping 习惯性流产是指3次或3次以上的自然流产。引起习惯性流产的原因有很多，如遗传因素、免疫失调、内分泌紊乱、生殖道感染等，其中遗传因素是引起习惯性流产的重要原因。研究发现习惯性流产大多数处于胚胎发育早期，其染色体异常率高达30% 60%［1］。本文就对41例异常染色体核型进行分析，现报道如下： 资料与方法 1．资料一般资料自2005年9月－2011年9月，对256对习惯性流产夫妇进行相关检查，确诊无功能性病变及其它相关性病变，排除接触各种射线及有毒物质接触史，再进行外周血染色体分析。 2．方法 试验方法：对习惯性流产夫妇双方的外周血淋巴细胞染色体核型进行检查。抽取夫妇双方的正中肘静脉血2mL，在无菌条件下，5mL培养基中，置37?培养，培养66 68h后加入秋水仙素，再继续培养至72h，离心收集培养物，KCl低渗处理35min，加入固定液固定30min或者4?过夜，最后进行制片和染色显带。核型分析：每例平均计数30个核型，分析5 8个核型，异常者加大计数到50个核型，同时分析30个核型，最后按照标准G带核型作细胞遗传学诊断，必要时进行C显带分析。 结果 1．在受检的110对习惯性流产夫妇220例样品中，共检出异常染色体核型41例（女18例、男23例），总检出率为18.6%。在检出的41例染色体异常核型中常染色体结构异常占29例70.7%，含片段易位19例：包括平衡易位13例（39.02%），罗氏易位3例（7.32%）、臂间倒位3例（7.32%），随体增加5例（12.20%），次缢痕增加5例（12.20%）。性染色体结构异常占12例29.3%。其中大Y 染色体5例（12.20%），小Y染色体7例（17.07%）。异常染色体核型比例及构成比见表1，具体核型见表2。 表1异常染色体核型比例及构成比异常类型例数异常率（%）构成比（%） 平衡易位137.2731.70 罗氏易位3 1.367.32倒位3 1.367.32随体增加50.9012.20 次缢痕增加5 2.2712.20 大Y染色体5 2.2712.20 小Y染色体7 3.1817.07合计4118.6 讨论 胚胎染色体异常、男女双方或其中任何一方染色体异常都可导致习惯性流产的发生。染色体异常包括结构异常和数目异常两种，结构异常主要包括缺失、易位、倒位和重复4 · 66 ·中国优生与遗传杂志2012年第20卷第8期
实验十人类染色体G显带技术及G带核型分析 实验目的 1、初步掌握染色体G带标本的制备技术。 2、了解人类染色体的G显带的带型特征。 实验用品 1、材料：常规方法制备的中期人类染色体标本（标本片龄不超过30天为宜）。 2、器材：显微镜、恒温培养箱、烤箱、恒温水浴箱、冰箱、染色缸、小镊子、玻片架、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸。 3、试剂：％胰蛋白酶溶液、％EDTA溶液、胰蛋白酶一EDTA混合液、％生理盐水、蒸馏水、Giemsa原液、Giemsa稀释液、1／15mol ／L磷酸缓冲液。 实验原理 人们将用各种不同的方法，以及用不同的染料处理染色体标本后，使每条染色体上出现明暗相间，或深浅不同带纹的技术称为显带技术（banding technique）。本世纪70年代以来，显带技术得到了很大发展，且在众多的显带技术中（Q带、G带、C带、R带、T带），G带是目前被广泛应用的一种带型。因为它主要是被Giemsa染料染色后而显带，故称之为G显带技术，其所显示的带纹分布在整个染色体上。 研究发现，人染色体标本经胰蛋白酶、Na0H、柠檬酸盐或尿素等试剂处理后，再用Giemsa 染色，可使每条染色体上显示出深浅交替的横纹，这就是染色体的G带。每条染色体都有其较为恒定的带纹特征，所以G显带后，可以较为准确的识别每条染色体，并可发现染色体上较细微的结构畸变。关于G显带的机理目前有多种说法，例如，Lee等（1973）认为染色体上与DNA结合疏松的组蛋白易被胰蛋白酶分解掉，染色后这些区段成为浅带，而那些组蛋白和DNA结合牢固的区段可被染成深带。有人认为，染色体显带现象是染色体本身存在着带的结构。比如用相差显微镜观察未染色的染色体时，就能直接观察到带的存在。用特殊方法处理后，再用染料染色，则带更加清楚，随显带方法不同，显出来的带特点也不一样，说明带的出现又与染料特异结合有关。一般认为，易着色的阳性带为含有AT多的染色体节段，相反，含GC多的染色体段则不易着色。总的来说，G显带的机理还未搞清。 内容与方法 一、人类染色体G显带标本制备 1、胰蛋白酶法 ①将常规制备的人染色体玻片标本（未染色的白片）置70℃烤箱中处理2小时，然后转入37℃培养箱中备用，一般在第3～7天进行显带。 ②取％的胰蛋白酶原液加生理盐水至50ml，配成％的工作液并用NaHCO3调pH值至7左右。 ③将配好的胰蛋白酶工作液放入37℃水浴箱中预热。 ④将玻片标本浸入胰蛋白酶中，不断摆动使胰蛋白酶的作用均匀，处理1～2分钟（精确的时间自行摸索）。 ⑤立即取出玻片，放入生理盐水中漂洗两次。 ⑥染色。将标本浸入37℃预温的Giemsa染液（1:10的Giemsa原液和的磷酸缓冲液）
中医治疗弱精子症研究进展 【摘要】总结近5年来中医治疗弱精症的临床研究文献，按经典方加减及自拟方疗法、中成药疗法、针灸疗法和综合疗法等4个方面进行归纳和评述，以此了解中医治疗弱精症的应用情况，并提出下一步科研应该注意的问题及发展方向。 【关键词】弱精症；中医；研究进展 【中图分类号】R25656【文献标志码】A【文章编号】1007-8517（2015）03-0034-02 Abstract：Summarized the past 5 years in traditional medicine to improve sperm motility clinical research papers. To comprehend the traditional medicine for improving sperm motility in the application and proposed the problems and development direction of further research，four aspects of Decoction treatment therapy，medicine therapy，acupuncture therapy and combination therapy were summarized and commented. Keywords：sperm motility；Traditional Chinese Medicine；therapy；research progvess 据资料统计，全世界不育夫妇约占己婚夫妇的15%，其中，男性不育症占所有不孕症的35%～50%[1]，并呈逐年上
实验四人类染色体的识别与核型分析 一、实验目的 1.学习染色体核型的分析方法； 2.了解人类染色体的特征。 二、实验原理 1．染色体组型(核型)是指生物体细胞所有可测定的染色体表型特征的总称。包括：染色体的总数，染色体组的数目，组内染色体基数，每条染色体的形态、长度、着丝粒的位置，随体或次缢痕等。染色体组型是物种特有的染色体信息之一，具有很高的稳定性和再现性。组型分析能进行染色体分组外，还能对染色体的各种特征做出定量和定性的描述，是研究染色体的基本手段之一。利用这一方法可以鉴别染色体结构变异、染色体数目变异，同时也是研究物种的起源、遗传与进化，细胞遗传学，现代分类学的重要手段。 2．人类的单倍体染色体组(n=23)上约有30000-40000个结构基因。平均每条染色体上有上千个基因。各染色体上的基因都有严格的排列顺序，各基因间的毗邻关系也是较为恒定的。人类的24种染色体形成了24个基因连锁群，所以，染色体上发生任何数目异常、甚至是微小的结构变异，都必将导致许多获某些基因的增加或减少，从而产生临床效应。染色体异常常表现为具有多种畸形的综合征，称为染色体综合征，其症状表现为多发畸形、智力低下和生长发育异常，此外还可看到一些特征性皮肤纹理改变。染色体畸变还将导致胎儿死产或流产。染色体病已成为临床上较常见的危害较为严重的病种之一，染色体病的检查、诊断已经成为临床实验室检查的重要内容。 1960年，在美国Denver市召开了第一届国际遗传学会议，讨论并确定正常人核型(karyotype)的基本特点即Denver体制，并成为识别人类各种染色体病的基础。按照Denver 体制，将待测细胞的染色体进行分析和确定是否正常，以及异常特点即为核型分析。人类染色体分组及形态特征见表1。 表1 人类染色体分组及形态特征（非显带标本） A组：1-3号，可以区分。1号，最大，M，长臂近侧有一次缢痕；2号，较大，SM；3号，较大，比1号染色体段1/3-1/4）。 B组：4-5号，体积较大，SM，短臂相对较短，两者不容易区分。 C组：6-12，X。中等大小，SM，较难区分。6、7、8、11和X染色体的着丝粒略近中央，短臂相对较长，9、10、12染色体的着丝粒偏离中央。9号染色体长臂有较大次缢痕。
男性少弱精子症就诊指南(转载) 少弱精子症是男性不育最常见的原因之一，治疗起来，也是难题多多。首先，我们要明白什么是少弱精子症？所谓少弱精子症，是指精子密度和活动力都低于正常值的不育症。那么，密度的正常值是多少呢？世界卫生组织的精液标准中指出，男性每次射精的精子密度不小于2000万/毫升，若低于2000万/毫升则称为少精子症。而精子的活动力分为a、b、c、d四级，a、b级是前向运动的精子，需大于50%，若a+b级精子少于50%，则称为弱精子症。 明白了什么是少弱精子症，接下来，我们来了解一下出现这种症状的原因。 导致男性少弱精子症的原因有以下几个方面： 1、生殖道感染——附属生殖腺的慢性感染，即附睾、精囊、前列腺等的炎症引起精浆变异，影响精子活动和存活，并可影响精液中的各种化验指标。 2、内分泌异常——男性正常生精功能依赖于下丘脑-垂体-性腺轴功能的正常，其中任何一环节障碍，都会影响生精功能，其它如甲状腺、肾上腺疾病也会影响生殖腺功能而致少精子症。 3、精索静脉曲张——精索静脉曲张时，由于静脉回流不畅造成阴囊内温度过高和睾丸组织缺氧，血管活性物质增加，从而影响睾丸生精功能，引起精子活动力降低可使精子活力降低。 4、染色体异常——染色体畸变对精子密度、活动率及形态均有严重影响。 5、自身免疫——生殖免疫学研究发现，男性自身免疫可影响生育能力，抗精子抗体使精子凝集或制动，降低精子活动力，同时，还可影响精子的产生和运送。 6、阴囊温度过高，放射损伤，化学毒品及药物影响均可造成少精子症。 7、隐睾——隐睾是影响精液质量重要原因之一。单侧隐睾约60%病人不育，因此若精子密度低，又有隐睾存在，必须及早治疗。 8、睾丸发育受阻，睾丸生精上皮不完全成熟或受损变薄，致使精子质量差，活力减弱。 在生活中，有着许多影响精子质量的因素，具体有： 1、食品包装和化妆品 据德国研究协会日的新闻公报说，过去几十年间，全球男性精子数量的减少可能与一种叫做邻苯二甲酸酯的化学物质有关。 邻苯二甲酸酯是一类能起到软化作用的化学品。它被普遍应用于玩具、食品包装、乙烯地板、壁纸、清洁剂、润滑油、指甲油、头发喷雾剂、香皂和洗发液等数百种产品中。研究表明，邻苯二甲酸酯可干扰内分泌，使男性精子数量减少、运动能力低下、形态异常，严重的还会导致睾丸癌，是造成男性生殖问题的"罪
出生缺陷儿的染色体核型分析内容是什么 导读：我根据大家的需要整理了一份关于《出生缺陷儿的染色体核型分析内容是什么》的内容，具体内容：探讨出生缺陷与染色体核型异常之间的关系。方法 154例出生缺陷儿染色体核型分析。结果发现异常核型31例，异常检出率为20。下面我为你整理154例出生缺陷儿的染色体核型分析，希望能帮到... 探讨出生缺陷与染色体核型异常之间的关系。方法 154例出生缺陷儿染色体核型分析。结果发现异常核型31例，异常检出率为20。下面我为你整理154例出生缺陷儿的染色体核型分析，希望能帮到你。 为探讨出生缺陷与染色体核型异常之间的关系，我们对154例出生缺陷患儿进行外周血淋巴细胞染色体G显带核型分析，发现其中31例为染色体异常，染色体畸变率为20.13%，其结果报告如下。 1 对象与方法 1.1 对象在重庆市2002年8月～2003年11月期间鉴定的独生子女病残儿中选出154例出生缺陷儿。其中，年龄最小的2岁，最大的16岁，平均年龄7.6岁;男112例，占7 2.7%，女42例，占27.3%。 1.2 方法采取患儿静脉血0.8ml，置RPMI1640培养基培养72h，常规制片、G显带分析，每例镜下计数30个分裂相，核型分析5个，发现核型异常则增加计数分析。 2 结果 在154例出生缺陷儿中，发现染色体异常31例(检出率20.13%)涉及异
常核型6种，其中典型的21-三体综合征10例，klinefelter综合征4例，Y染色体异常12例，Turner综合征2例(均为嵌合型)，超雄1例，性反转2例(见表1)。 表1 31例染色体异常核型(略) 3 讨论 出生缺陷是指出生时发生的遗传疾病和不具遗传倾向的先天性畸形。目前我国出生缺陷的发生率约为13.7，其中原因大致可分为3种:遗传因素、环境因素、不明因素。本文154例出生缺陷儿发现31例为染色体异常，染色体异常发生率为20.13%。因此，在出生缺陷儿中染色体畸变率的发生较高。 在出生缺陷儿中，智力低下的病因复杂，有遗传因素、胚胎期因素及后天因素。本文154例出生缺陷儿均有不同程度的智力(MR)低下、发育迟缓、生殖器发育异常。其中先天愚型(21-三体)发生率占首位，10例为32.2%(男女之比8:2)。可见智力低下最常见的异常核型为21-三体。典型的21-三体几乎都是新发生的。与父母核型无关(它主要是母方生殖细胞在减数分裂时不分离的结果)。本文中涉及的病残儿的父母生育患儿时年龄均未超过30岁，染色体核型分析为正常，因此排除平衡易位携带者遗传和生殖细胞老化等因素。由于患儿父母生育该患儿时年龄均较低，是否存在其他导致减数分裂过程障碍或不良环境因素引起，还有待于进一步研究。 47，xxy的患儿4例，均为纯合型，称为克氏(Kliefeter)综合征，又名先天性睾丸发育不全或先天性小睾丸，是一种常见的睾丸分化异常疾病。是导致男性性功能低下及不育的病因之一。克氏综合征的发生原因是亲代
实验一人染色体核型特征及其分析 实验目的:掌握正常人染色体核型特征及其分析方法。 实验准备 1 、材料：正常人体细胞中期分裂相照片 2 、器材：剪刀、镊子、培养皿、浆糊、牙签。 实验原理人类正常体细胞染色体数为 46 条，其中 22 对为常染色体， 1 对为性染色体。根据染色体的相对长度和着丝粒的位置，将其中 44 条常染色体两两配合成对，形成同源染色体，共 22 对，同时将它们按大小顺序编号（ No.1—22 ）并分成 A 、 B 、 C 、 D 、 E 、 F 、 G7 组，其中性染色体 X 放在 C 组， Y 放在 G 组，每组染色体都有其特定的形态特征。 A 组 (No. 1---3) ：是最大一组染色体 No.1 是一对最大型的中央着丝粒染色体； No.2 较 No.1 稍短，是一对最大型的亚中央着丝粒染色体； No.3 是该组中最短的一对中央着丝粒染色体。 B 组 ( No.4—5) ：比 A 组短，是二对亚中央着丝粒染色体，长短臂区分明显，组内两号不易辨别。 C 组 (No.6---12 和 X 染色体 ) ：是中等大小的亚中央着丝粒染色体。该组只有最大的 No.6 和最小 No.12 容易识别，其余各号间难以区别。以下特点可供识别时参考： No.6 、 7 、 8 、 11 着丝粒近于中央， No.9 、 10 、 12 长短臂区别明显。 D 组（ No.13—15 ）：中等大小，是较大近端着丝粒染色体，短臂末端有随体，组内各号间不易识别。 E 组（ No.16—18 ）：这三对染色体各有特点，彼此间容易区分。 No.16 是本组最大的一对中央着丝粒染色体； No.17 为亚中央着丝粒染色体，稍大； No.18 是本组最小的一对亚中央着丝粒染色体。 F 组（ No.19—20 ）：是两组最小的中央着丝粒染色体，彼此间不易区别。 G 组（ No.21—22 和 Y 染色体）：是一组最小的近端着丝粒染色体， 21 和 22 号短臂末端有随体，彼此不易区分。 Y 染色体属于 G 组，形态与前者不同，它稍大，两长臂互相平行，无随体。 实验内容 取同一细胞的两张照片，一张贴在报告纸上方中央，另一张则将染色体逐个剪下（注意防止丢失），然进行染色体分组配对，并按顺序排列起来，贴在同一报告纸的下面，注意应将 长臂放于短臂下端，而且末端对齐。 实验报告：核型剪贴。 要求： 1、染色体不能丢失： 2、 A 组、 E 组各号鉴别必须准确，其他各组间不能混淆； 3、粘贴整齐有序： 4、卷面清洁。
中医治疗少弱精子症---温补脾阳，补肾填精中医治疗少弱精子症研究进展 马科余小英彭弋峰 (皖南医学院弋矶山医院生殖医学研究所,安徽芜 湖,241001) 【摘要】少弱精子症属于中医“精清”、“精少”、“精冷”范畴，是男性不育的重要原因之一。祖国医学认为其病位在肾，多采用补肾填精的方法治疗。近年来，许多医家遵循辨证论治的原则，从脾肾、肝肾辩治，采用补泻兼施、清利湿热等方法，结合针灸等治疗少弱精子症，取得了较为满意的临床疗效。 【关键词】少弱精子症；不育；中医治疗 目前,世界范围内有15%～20%的育龄夫妇不能生育，男性因素约占50%,其中少精子症和弱精子症是男性不育的重要原因之一[1]。根据世界卫生组织（World Health Organization，WHO）标准[2],少精子症是指精子密度 <20×109 /L的病症。弱精子症是指具有快速向前运动的精
子（A级）与慢速向前运动的精子（B级）之和<50％或A 级精子<25％的病症。目前西医治疗少弱精子症的方法较多，但往往达不到理想疗效，尤其对特发性少弱精子症的治疗常常为经验用药，而人工辅助生殖从理论上讲能解决少弱精子症导致的男性不育，但存在较多问题，如技术的侵袭性、胚胎植入前诊断技术的相对滞后、手术费用昂贵、涉及人类医学伦理问题等。中医治疗少弱精子症有独到之处并取得较好的疗效，现将近年来中医治疗少弱精子症的方法和进展综述如下。 1 少弱精子症病因病机 中医对男子不育症的认识已有数千年的历史，少弱精子症属于中医“精少”、“精清”、“精冷”范畴。古人对男性不育的病因认识已经比较深刻。清代陈士铎《石室秘录·子嗣论》中提到:“男不能生子者有六病,一精寒,二气衰,三精少,四痰多,五 相火盛,六气郁。”把男子不育的原因归结为六类。明代薛立斋认为“更当察男子形气虚实何如。有肾虚精弱，不能融育成胎者；有禀赋微弱，气血虚损者；有嗜欲无度，阳精衰者，各当求其源而治之。”认为肾阳衰虚，气血亏虚，纵欲无度均能导致男子不育。《素问·上古天真论》里记载:“丈夫二八，肾气盛，天癸至，精气溢泻，阴阳和，故能有子。”认为肾的精气充盈是“有子”的基础，历代医家都强调肾精在男性生育中的重要作用,认为肾精的盛衰决定着男子的生育能力,肾精亏
焦坠匡堂！！！兰生！！旦笙望鲞箜！！塑坐！堕！型塑！尘堕竺！望！！！竺！竺！！！！！ｙ！！垫：塑！！！：文章编号：１６７３－８６４０（２０１４）１２．１２１２＿０３中图分类号：Ｒ４４６．１１文献标志码：ＡＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３－８６４０．２０１４．１２．００３ 无精症及严重少精症患者染色体核型和Ｙ染色体微缺失分析 滕贤麟，施金俏，郭辉，周燕霞 （浙江省金华市人民医院检验科，浙江金华３２１０００） 摘要：目的分析男性不育中无精症及严重少精症患者染色体核型和Ｙ染色体微缺失情况及分布特点，为 卵细胞浆内单精子注射术（ＩＣＳＩ）辅助助孕前提供遗传学筛选依据。方法对１５０例无精症及严重少精症患者外周血液采用外周血淋巴细胞培养Ｇ显带方法进行染色体核型分析，采用多重聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合琼脂糖凝胶电泳检测Ｙ染色体微缺失。结果１５０例无精症及严重少精症患者，染色体核型异常１４例，异常率９．３％； Ｙ染色体微缺失１６例，异常率１０．７％。结论对无精症及严重少精症患者进行染色体核型分析和Ｙ染色体微缺失检测，可为患者在ＩＣＳＩ辅助助孕前提供筛选依据，避免在ＩＣＳＩ治疗中将遗传缺陷传递给子代，同时减少患者精神上和经济上的负担。 关键词：染色体；核型；Ｙ染色体微缺失；无精症；严重少精症 ＡｎａｌｙｓｉｓｏｎｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｋａｒｙｏｔｙｐｅｓａｎｄＹｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｍｉｃｒｏｄｅｌｅｔｉｏｎｓｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｚｏｏｓｐｅｒｍｉａｏｒｓｅｖｅｒｅｏｌｉｇｏｚｏｏｓｐｅｒｍｉａＴＥＮＧＸｉａｎｌｉｎ，ＳＨＩＪｉｎｑｉａｏ，ＧＵＯＨｕｉ，ＺＨＯＵＹａｎｘｉａ．（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＪｉｎｈｕａＰｅｏｐｌｅ’ＳＨｏｓｐｉｔａｌ，ＺｈｅｊｉａｎｇＪｉｎｈｕａ３２１０００，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｋａｒｙｏｔｙｐｅｓａｎｄＹｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｍｉｃｒｏｄｅｌｅｔｉｏｎｓａｎｄｔｈｅｉｒｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｚｏｏｓｐｅｒｍｉａｏｒｓｅｖｅｒｅｏｌｉｇｏｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ，ｉｎｏｒｄｅｒｔｏｐｒｏｖｉｄｅｔｈｅｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｏｒｇｅｎｅｔｉｃｓｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆｉｎｔｒａｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｓｐｅｒｍｉｎｊｅｃｔｉｏｎ（ＩＣＳＩ）ｂｅｆｏｒｅｐｒｅｇｎａｎｃｙ．ＭｅｔｈｏｄｓＡｔｏｔａｌｏｆ１５０ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｚｏｏｓｐｅｒｍｉａｏｒｓｅｖｅｒｅｏｌｉｇｏｚｏｏｓｐｅｒｍｉａｗｅｒｅｅｎｒｏｌｌｅｄ．ＣｈｒｏｍｏｓｏｍｅｋａｒｙｏｔｙｐｅａｎａｌｙｓｉｓｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｏｎｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓｗｉｔｈＧ－ｂａｎｄｉｎｇ．Ｙｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｍｉｅｒｏｄｅｌｅｔｉｏｎｓｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｍｕｌｔｉｐｌｅｘｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ（ＰＣＲ）ｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈａｇａｒｏｓｅｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｒｅｗｅｒｅ１４ｃａｓｅｓｏｆａｂｎｏｒｍａｌｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｋａｒｙｏｔｙｐｅｓａｎｄ１６ｃａｓｅｓｏｆＹｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｍｉｃｒｏｄｅｌｅｔｉｏｎｓｉｎ１５０ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｚｏｏｓｐｅｒｍｉａｏｒｓｅｖｅｒｅｏｌｉｇｏｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ，ａｎｄｔｈｅ ａｂｎｏｒｍａｌｒａｔｅｓｗｅｒｅ９．３％ａｎｄ １０．７％．ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓＦｏｒｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｚｏｏｓｐｅｒｍｉａｏｒｓｅｖｅｒｅｏｌｉｇｏｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ，ｔｈｅｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｋａｒｙｏｔｙｐｅａｎａｌｙｓｉｓａｎｄＹｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｍｉｃｒｏｄｅｌｅｔｉｏｎｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｓｃｏｕｌｄｐｒｏｖｉｄｅｇｅｎｅｔｉｃｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｂｅｆｏｒｅｐｅｒｆｏｒｍｉｎｇＩＣＳＩｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ，ａｖｏｉｄｉｎｇｔｈｅｇｅｎｅｔｉｃｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｂｅｉｎｇｐａｓｓｅｄｔｏｏｆｆｓｐｒｉｎｇａｎｄｒｅｄｕｃｉｎｇｔｈｅｐａｔｉｅｎｔｓ’ｍｅｎｔａｌａｎｄｅｃｏｎｏｍｉｃｂｕｒｄｅｎｓ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ；Ｋａｒｙｏｔｙｐｅ；Ｙｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｍｉｃｒｏｄｅｌｅｔｉｏｎ；Ａｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ；Ｓｅｖｅｒｅｏｌｉｇｏｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ 据世界卫生组织调查显示，全世界有１５％的 夫妇患有不孕不育症，其中男性因素占４０％一 ５０％，而３０％的男性不育是由遗传因素引起的生 精障碍¨ｏ，表现为无精或少精。男性不育遗传因 素主要包括三方面：（１）染色体核型异常，如克氏 症４７，ＸＸＹ；（２）Ｙ染色体微缺失，如ＡＺＦｂ缺失； （３）基因突变，如囊性纤维化病等。目前，对无精 症及严重少精症患者辅助生育的有效治疗方法是 卵细胞浆内单精子注射术（ｉｎｔｒａｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｓｐｅｒｍ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ，ＩＣＳＩ），精子的主要来源是精液中排出 的少量精子，也可以通过睾丸细针穿刺术或经皮 附睾穿刺抽吸取精术获取。这些技术的应用，使 自然选择的过程大大减少，增加了将父代的遗传 缺陷垂直遗传给男性子代的风险。因此，精子异 作者简介：滕贤麟，男，１９７８年生，学士，主管技师，主要从事临床检验工作。常的不育患者在ＩＣＳＩ辅助助孕前都应常规进行遗传学筛查，包括染色体核型分析和Ｙ染色体微缺失检测。我们通过对金华地区１５０例无精症及严重少精症患者的染色体核型分析和Ｙ染色体微缺失检测，旨在分析其异常发生的分布和频率，为不育患者在ＩＣＳＩ治疗前提供必要的遗传咨询。 材料和方法 一、材料 １．研究对象２０１０年５月至２０１２年１２月来金华市人民医院生殖中心就诊的１５０例无精症或严重少精症患者（按照世界卫生组织标准连续３次精液常规分析确诊），年龄２５～３８岁；正常对照２０名（年龄２５—３５岁），分别采取２份外周血标 万方数据
人染色体核型分析 一．实验目的 1. 学习染色体核型的分析方法； 2.了解人类染色体的特征。 二．实验原理 1．染色体组型（核型）是指生物体细胞 所有可测定的染色体表型特征的总称。包括： 染色体的总数，染色体组的数目，组内染色体 基数，每条染色体的形态、长度、着丝粒的位 置，随体或次缢痕等。 染色体组型是物种特有的染色体信息之 一，具有很高的稳定性和再现性。 组型分析能进行染色体分组外，还能对染 色体的各种特征做出定量和定性的描述，是研 究染色体的基本手段之一。利用这一方法可以鉴别染色体结构变异、染色体数目变异，同时也是研究物种的起源、遗传与进化，细胞遗传学，现代分类学的重要手段。 2．人类的单倍体染色体组（n=23）上约有30000-40000个结构基因。平均每条染色体上有上千个基因。各染色体上的基因都有严格的排列顺序，各基因间的毗邻关系也是较为恒定的。 人类的24种染色体形成了24个基因连锁群，所以，染色体上发生任何数目异常、甚至是微小的结构变异，都必将导致许多获某些基因的增加或减少，从而产生临床效应。染色体异常常表现为具有多种畸形的综合征，称为染色体综合征，染色体病的检查、诊断已经成为临床实验室检查的重要内容。 1960年，在美国Denver市召开了第一届国际遗传学会议，讨论并确定正常人核型（karyotype）的基本特点即Denver体制，并成为识别人类各种染色体病的基础。按照Denver体制，将待测细胞的染色体进行分析和确定是否正常，以及异常特点即为核型分析。 三．实验材料 人类染色体非显带标本或人类染色体显带标本。 直尺，剪刀，计算机等。 四．实验方法
①选择最佳图象拍照； ②测量、计算； ③配对； ④剪贴（排列——原则：从大到小，短臂向上，着丝粒在一条线上，性染色体单排）。五．实验结果
生命与环境科学学院实验报告 实验课名称遗传学实验实验名称人类染色体的识别及核型分析成绩______________ 姓名王大锤实验报告系列年级学号组别一时间2015.温度6℃ 实验原理及目的 实验目的 1、学习并掌握染色体核型的分析方法； 2、熟悉人类染色体的特征； 3、了解人类染色体结构畸变的表示方法。 实验原理 1．染色体组型（核型）的基本含义 含义：生物体细胞所有可测定的染色体表型特征的总称。 包括：染色体的总数，染色体组的数量，每个染色体组内染色体基数，每条染色体的形态、长度、着丝粒的位置，随体或次缢痕等。 染色体组型是物种特有的染色体信息之一，具有很高的稳定性和再现性。 2．人类染色体特征 Denver体制 1960年，在美国Denver市召开了第一届国际遗传学会议，讨论并确定正常人核型（karyotype）的基本特点即Denver体制，成为识别人类各种染色体病的基础。 3.染色体显带标本 显带技术（banding technique）：用各种不同方法，以及用不同染料处理染色体标本后，每条染色体上出现明暗相间或深浅不同带纹的技术。 每条染色体带纹相对固定，可用于鉴别。 显带技术种类：Q带、G带、C带、R带、T带. G带是目前被广泛应用的一种带型。主要是被Giemsa染色后而显带，故称之为G显带技术，其所显示的带纹分布在整个染色体上。 4.遗传学中一些常用于对染色体和核型分析的指标描述 界标(landmark)：稳定、明显标记的指标.包括末端、着丝粒和带. 区（region）：两相邻界标之间. 带（band）：着色处.（浅、深；亮、暗）. 臂（arm）：p、q 实验材料、仪器及试剂 1.人类染色体标本——非显带标本和显带标本 2.直尺，剪刀，计算机等。 实验步骤 ①染色体制片 制片方法：植物染色体——压片法（酸解、酶解） 动物染色体——滴片法（骨髓细胞、外周血细胞）标本种类：非显带染色体；显带染色体 图片要求：染色体分散；数目全；形态好 ②选择最佳图象拍照 ③测量、计算 ④配对 ⑤剪贴 ⑥排列 排列原则：从大到小；短臂向上；着丝粒在一条线上；性染色体单排。
【实验项目】染色体核型分析 〖实验目的和要求〗 观察分析细胞有丝分裂中期染色体的长短、臂比和随体等形态特征；学习染色体组型分析的基本方法和技能。 〖实验原理〗 染色体组型分析是细胞遗传学研究的基本方法，是研究物种演化、分类以及染色体结构、型态与功能之间的关系所不可缺少的重要手段。染色体组是指二倍体生物配子中所含的染色体总称，常以“Ｘ”表示。 同一物种的同一染色体组内各染色体的形态、结构和连锁群是彼此不同的，但它们却相互协调，共同决定生物性状的发育。 研究染色体组型的方法，一是靠有丝分裂时染色体的形态特征，另一是靠减数分裂时染色体的形态和特征。本实验着重介绍有丝分裂的染色体组型分析。 细胞有丝分裂中期是识别染色体个性特征的最佳时期，而染色体组型分析就是进行染色体特征的鉴别和描述，其形态的鉴别主要依据染色体的长度、着丝粒位置、付缢痕的有无和位置、随体的有无、形状和大小等资料进行分析。现分别介绍如下： 1.染色体长度，同一染色体组内各染色体的长度是不一致的，其绝对长度可在显微镜上测量，或用放大 照片测量后换算。由于染色体制片过程中使用的药剂及方法不同，另外供观察的细胞分裂不可能保证同一时期，故染色体的收缩有差异而导致绝对长度在同一物种或个体不同细胞间发生差异，针对这种情况，在分析中常用染色体的相对长度来表示。 在染色体长度测量中，对染色体的两条臂要分别测量，一般随体不计入染色体长度内。 2.着丝粒的位置：每条染色体都有一着丝粒，其位置可因不同染色体而异。由于着丝粒把染色体分为 两个染色体臂：长臂和短臂，它们的比率（即臂比）便可确定着丝粒的位置。 3.付缢痕的有无和位置：有些染色体上除着丝粒，还另有一不着色或缢缩变细的区域称符缢痕。 4.随体的有无、形状和大小：有些染色体在短臂的末端有一棒状小体称为随体，随体和染色体臂之间 常以付缢痕相隔，具随体的染色体称SAT染色体。 〖材料和方法〗 细胞有丝分裂永久制片或其中期染色体图象的放大照片。 〖用具和药品〗 剪刀、直尺、胶水。 〖实验步骤〗 （一）染色体标本的制备 1.制片 2.观察制片，选择理想的中期分裂相细胞进行显微摄影，冲洗放大照片 （二）染色体组型分析 1.染色体计数
实验四 人类核型分析 1．实验目的 了解人类染色体的形态特征，掌握其核型分析的基本方法。 2．材料 人正常和异常的染色体标本，人显带染色体标本 3．试验内容与方法： 核型：指某种生物个体或某一分类群(种、亚种或变种、居群)的一个体细胞全部中期染色体的数目、大小和形态等特征的总和。用来表述物种的特点和亲缘种属之间的关系。核型分析：将待测细胞的染色体按照该生物固有的染色体形态特征和规定，进行配对、编号和分组，并进行形态分析的过程过程。 Denver体制：按照Denver会议(1960年)提出的染色体命名和分类标准，将人类体细胞的46条染色体按大小（根据长度递减顺序）、着丝粒的位置分成七组(A、B、C、D、E、F、G、)23对的排列，并将副缢痕和随体作为识别染色体的辅助指标。人类染色体核型分析标准是丹佛（Denver）体制（人类有丝分裂染色体的标准命名体制）。该体制规定：每一条染色体可通过相对长度、臂率和着丝粒指数等三个参数予以识别；
非显带染色体：染色体标本制作好后，不经处理直接染色，整条染色体均匀着色（相对于后面的显带染色体而言）。
人中期细胞染色体（数目2N=46） 结构特点 G显带染色体：G带技术是其中最常用的技术，由Pardue和Gall（1970）建立。中期染色体经胰酶处理及Giemsa染色后，能在其长轴上显示出明暗交替的横纹，每个染色体都有特定的带纹，可应用染色体分带技术，来准确地辨别每个染色体。一个细胞中期分裂相的G显带技术，每个染色体被染成深浅相间的带纹，浅的部分称为明带或浅带，深的部分称为暗带或深带。G带反映了染色体DNA上A -T的丰富区，在人类中约 有2000条G带可被鉴别，在间期核呈固缩状态，而且是DNA晚复制区之一。有相当一部分中度重复序列DNA可能在G带区，Giemsa染料在G 带区是与DNA结合，而且与结合DNA的染色质非组蛋白有关。G带区位于染色体的两臂上，和Q带区相对应，而与Ｒ带区相反。人类细胞染色体共分24种不同的带纹（22对常染色体和X、Y染色体） （一）人类正常染色体及其带型的识别 1. 非显带染色体的识别：根据染色体按大小（根据长度递减顺序）、着丝粒的位置分 ①A群：包括第1、2、3对染色体，体积大，彼此易于区别，有中央着丝粒，第二对染色体的着丝粒略偏离中央。 ②B群：包括第4、5对染色体，较大，均为亚中部着丝粒，彼此不易区分。 ③C群：包括6-12对常染色体和X性染色体，中等大小，为亚中部着丝粒染色体，彼此间难以区分，第6对的着丝粒染色体靠近中央，X染色
联盛生精片治疗少精子症648例临床分析 摘要】目的探讨联盛生精片治疗少精子症的疗效。方法服用联盛生精片一次4片，一日3次。同时加服富锌康每日10g分2次口服，三个月为一疗程，间隔一 周重复第二疗程，依次类推。每疗程结束后收集精液，常规检查进行动态观察精 液质量。结果服用半年后，精子质量60×106/ml以上达 92.13%较治疗前有非常显著性的提高。结论联盛生精片能促进生精功能，改善精子质量。 【关键词】生精片富锌康少精症精子质量 【Abstract】Objective: To investigate the Sheng Sheng spirit tablets in the treatment of oligospermia efficacy.Methods: taking joint Sheng Sheng fine film,4 tablets each time,3 times a day.At the same time clothing plus zinc-rich Kang10g orally 2 times daily,a course of three months,interval of one week was repeated second course,followed by analogy.Each session to collect semen routine examination,dynamic observation of semen quality.Results: take half a year later,sperm quality 60×106/ml above92.13% than before treatment was significantly improved.Conclusion: the Sheng Sheng fine films can promote spermatogenic function,improve sperm quality. 【Key words】spermatogenic piece of zinc-rich Kang oligospermia sperm quality 不孕症是世界性的难题[1]，也是多年困扰已婚男女的重要疾病之一，缘于男 性不育约40％[2]，祖国医学对男性不育早有记载，但缺乏系统深入的研究，因病因复杂，现代医学又没有有效药物治疗。本文于2008年12月到2011年12月， 共收治少精子症患者2516例，符合纳入对象的少精子子症患者648例，现将疗 效观察报告如下： 1 资料与方法 1.1 入选病例：凡年龄在25-43岁已婚男性，夫妻性生活正常在两年以上，双 方未采取避孕措施，男方精子不能计数～20×106/ml,成活率在0～20%以下不育患 者648例少精子症患者。女方妇科检查无不孕因素。 1.2排除病例男方生殖系统器质性病变。 1.3 观察项目：治疗前后的精液常规检查。 1.4 疗效标准：疗效判定标准①显效：治疗后精液分析显示精子质量正常， 密度＞20×106/ml，且a级＞25%或(a+b)＞50%。②有效：治疗后精液分析显示精子质量较前有改善但仍属正常。③无效：治疗前后精子质量无改善 1.5治疗方法治疗前患者禁房事5天，并收集精液两次计数均值为治疗前基数，服用联盛生精片（国药准字Z20081012贵州联盛药业有限公司生产）一次4片， 一日3次。同时加服富锌康（国食健字G2*******济南平安年生物科技开发有限 公司研制生产，嘱病人外购）每日10g分2次口服，三个月为一疗程，间隔一周 重复第二疗程，依次类推。每疗程结束后收集精液，常规检查进行动态观察。 2 结果 2.1 648例少精症患者治疗前后精液主要指标质量有非常显著性差异见下表。 648例少精症患者治疗前后精液主要指标质量对照 2.2睾丸细胞变化：本组进行了144例精子减少症的睾丸细胞的病理检查，经过生精片治疗后对78例患者进行了睾丸细胞学的电镜超微结构病理方面的观察。治疗前144例睾丸曲精管细胞明显减少，仅见一层精原细胞，精细胞脱落致管腔 阻塞，曲细精管内未见或偶见少量未发育成熟精子。治疗后的78例睾丸电镜超
实验七染色体核型分析
【实验项目】染色体核型分析 实验室名称显微分析实验室实验室地 点 学时2 实验 类型 验证每组 人数 2-4 选做 或必 做 必做 实验目的通过几种生物染色体标本的观察，掌握染色体核型分析的方法 内容提要生物染色体标本的观察；染色体核型的分析 重点难点染色体核型的分析方法 主要 仪器 及耗 材 显微镜、尺子、剪刀 实验七：染色体核型分析 〖实验目的和要求〗 观察分析细胞有丝分裂中期染色体的长短、臂比和随体等形态特征；学习染色体组型分析的基本方法和技能。 〖实验原理〗 染色体组型分析是细胞遗传学研究的基本方法，是研究物种演化、分类以及染色体结构、型态与功能之间的关系所不可缺少的重要手段。染色体组是指二倍体生物配子中所含的染色体总称，常以“Ｘ”表示。同一物种的同一染色体组内各染色体的形态、结构和连锁群是彼此不同的，但它们却相互协调，共同决定生物性状的发育。 研究染色体组型的方法，一是靠有丝分裂时染色体的形态特征，另一是靠减数分裂时染色体的形态和
特征。本实验着重介绍有丝分裂的染色体组型分析。 细胞有丝分裂中期是识别染色体个性特征的最佳时期，而染色体组型分析就是进行染色体特征的鉴别和描述，其形态的鉴别主要依据染色体的长度、着丝粒位置、付缢痕的有无和位置、随体的有无、形状和大小等资料进行分析。现分别介绍如下： 1.染色体长度，同一染色体组内各染色体的长度是不 一致的，其绝对长度可在显微镜上测量，或用放大照片测量后换算。由于染色体制片过程中使用的药剂及方法不同，另外供观察的细胞分裂不可能保证同一时期，故染色体的收缩有差异而导致绝对长度在同一物种或个体不同细胞间发生差异，针对这种情况，在分析中常用染色体的相对长度来表示。 在染色体长度测量中，对染色体的两条臂要分别测量，一般随体不计入染色体长度内。 2.着丝粒的位置：每条染色体都有一着丝粒，其位 置可因不同染色体而异。由于着丝粒把染色体分为两个染色体臂：长臂和短臂，它们的比率（即臂比）便可确定着丝粒的位置。 3.付缢痕的有无和位置：有些染色体上除着丝粒， 还另有一不着色或缢缩变细的区域称符缢痕。 4.随体的有无、形状和大小：有些染色体在短臂的 末端有一棒状小体称为随体，随体和染色体臂之间常以付缢痕相隔，具随体的染色体称SAT染色体。 〖材料和方法〗 细胞有丝分裂永久制片或其中期染色体图象的放大照