维生素E外用方法一：秋冬保湿。天然维生素E +乳液，原液或面霜，秋冬干燥时节，只需用针刺破天然维生素E软胶囊外衣，滴一滴混在乳液或原液在面霜中，将其涂于需要保养的部位；在特别干燥的季节，沐浴后，将维生素E混合护肤乳液一起使用，能避免干燥起皮；长久坚持，能令肌肤滋润、白皙。此法特别适合长期在空调室内工作的女性。
维生素E外用方法二：用维生素E和珍珠粉调和，当眼霜搽。然后多点时间仔细按摩后，双手指互相快速摩擦，令手指发热后，捂在眼睛上，停留几秒，轻轻移至眼角，重复三至五次，加快眼霜的吸收，感觉不错，眼睛一点都不油。
维生素E外用方法三：天然维生素E+酸奶+蜂蜜+柠檬汁，取酸奶二匙、蜂蜜半匙、柠檬汁半匙，与三粒天然维生素E 调成糊状，敷面15分钟后，用温水洗净，注意最好不要用过烫或过冷的水，此法能将毛细孔里的污垢彻底清除，滋养美白，令肌肤光彩照人。
维生素E外用方法四：美发护发，天然维生素E + 洗发水+ 护发素，洗发时，将一粒天然维生素E油滴在洗发水中混合使用；使用护发素的时候，也将天然维生素E混合在一起轻轻按摩，三分钟后冲洗干净，此法能令头发滋润、顺滑，立时见效。
紫外分光光度法测定维生素C和维生素E含量 【摘要】本实验利用紫外分光光度法测定由维生素C和维生素E组成的混合物中各组分的浓度。在这两种组分组成的混合物中，彼此都不影响另一种物质的光吸收性质，根据相互间光谱的重叠的程度采用相对的方法进行定量测定。 【关键词】紫外分光光度法；维生素C；维生素E；浓度 1、引言 维生素C（抗坏血酸）和维生素E(α-生育酚)在食品中能起抗氧化剂作用，即它们在一定时间内防止油脂变性。两者结合在一起比单独使用的效果更佳，因为它们在抗氧化性能方面是“协同的”。因此，它们作为一种有用的组合试剂用于各种食品中。维生素C是水溶性的，维生素E是酯溶性的，它们都能溶于无水乙醇，因此能在同一溶液中，能够利用紫外可见分光光度法测定双组分相同的原理，在紫外光区测定它们。 2、实验原理 根据朗伯—比尔定律，用紫外—可见分光光度法很容易定量测定在此光谱区内有吸收的单一成分。由两种组分组成的混合物中，若彼此都不影响另一种物质的光吸收性质，可根据相互间光谱重叠的程度，采用相对的方法来进行定量测定。例如，当两组分吸收峰部分重叠时，选择适当的波长，仍可按测定单一组分的方法处理；但当两组分吸收峰大部分重叠时，则宜采用解联立方程组或双波长法等方法进行测定。
混合组分中在λ1处的吸收等于组分A 和组分B 分别在λ1处的吸 光度之和A λ1 A+B ，即： A λ1A+B =κλ1A bc A +κλ1B bc B 同理，混合组分在λ2处吸光度之和A λ2A+B 应为： A λ2 A+B =κλ2A bc A +κλ2B bc B 若先用A 、B 组分的标样，分别测的A 、B 两组分在λ1和λ2处的摩尔吸收系数κλ1A 、κλ2A 、κλ1B 、κλ2B ；当测的未知试样在λ1和λ 1处的吸光度A λ1A+B 和A λ2 A+B 后，解下列二元一次方程组： A λ1 A+B =κλ1A bc A +κλ1B bc B A λ2 A+B =κλ2A bc A +κλ2B bc B 即可求得A 、B 两组分各自的浓度c A 和c B 。 c A =（A λ1A+B ·κλ2B ? A λ2A+ B ·κλ1B ）/（κλ1A ·κλ2B ?κλ2A ·κλ1B ） c B =（A λ1 A+B ?κλ1A ·c A ）/κλ1B 一般来说，为了提高检测的灵敏度，λ1和λ2宜分别选择在A 、 B 两组分最大吸收峰处或其附近。 3、紫外分光光度法测定维生素C 和维生素E 含量 3.1、仪器试剂 仪器：紫外-可见分光光度计（天津港东UV-4501S ），石英吸收 池一对 试剂：维生素C （抗坏血酸），维生素E(α-生育酚)，无水乙醇 3.2、实验步骤 3.2.1、 检查仪器 开机预热20min ，并调试至正常工作状态。
维生素E（Vitamin E）是一种脂溶性维生素，其水解产物为生育酚，是最主要的抗氧化剂之一。 溶于脂肪和乙醇等有机溶剂中，不溶于水，对热、酸稳定，对碱不稳定，对氧敏感，对热不 敏感，但油炸时维生素E活性明显降低。 含量测定 方法名称：维生素E的测定—气相色谱法。 应用范围：该方法采用气相法测定维生素E的含量。 该方法适用维生素E。 方法原理：供试品和内标均制成甲醇溶液，进入气相色谱仪进行色谱分离并检测维生素E和 内标正三十二烷的吸收值，计算出其含量。 试剂：正己烷 仪器设备：仪器气相色谱仪 色谱柱：以硅酮（OV-17）为固定相，涂布浓度为2%，或以HP-1毛细管柱（100%二甲基聚 硅氧烷）为分析柱；理论塔板数按维生素E峰计算不低于500（填充柱）或5000（毛细管柱），维生素E峰与内标物质峰的分离度应符合要求。 色谱柱和典型色谱条件：柱长30 m，柱内径0.53 mm 或0.32 mm，固定液为100%甲基聚硅 氧烷 柱温：265℃ 检测器：氢火焰离子化检测器，温度300℃ 进样口：温度290℃；分流进样，分流比1：20；进样量1μL 载气：氮气，流速5 mL/min 试样制备： 1、称取供试品 精密称取该品20mg，放置在棕色具有塞子的瓶中。 2、对照品溶液的制备 精密称取维生素E对照品和维生素E对照品25mg，置100mL棕色量瓶中，加异辛烷80mL，避免加热，超声处理1分钟使完全溶解，并加异辛烷至刻度，摇匀，冲氮密塞，避光，0℃以下保存。 3、内标溶液的制备 4、供试品溶液的制备 该供试品精密加内标溶液10mL，密塞，振摇使溶解，即得供试品溶液。 5、校正因子的测定 另取维生素E对照品20mg，精密称定，置棕色具塞中，精密加内标溶液10mL，密塞，振摇 使溶解，取1~3μL注入气相色谱仪，计算校正因子。 注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准 确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。 操作步骤： 分别精密吸取上述供试品溶液与对照品溶液1~3μL 注入气相色谱仪测定、计算，即得。
将样品倒入白瓷盘内,在明亮的自然光处观察. 2．含量 2.1试剂 1）四氢呋喃-丙酮溶液：四氢呋喃：丙酮溶液=1：1 2）α－生育酚醋酸酯标准品 3）无水乙醇：不得含有醛类物质 3.1）检查方法：取2ml银氨溶液于试管中，加入用量乙醇，摇匀，再加入10% 氢氧化钠溶液，加热，放置冷却后，若有银镜反应则表示乙醇中有醛。 3.2）取2g硝酸银溶于水中。取4g氢氧化钠溶于温乙醇中。将两者倾入1L乙醇 中，振摇后，放置暗入两天（不时摇动，促进反应），经过滤，置蒸馏瓶 中蒸馏，弃去初蒸出的50ml。当乙醇中含醛较多时，硝酸银用量适当增 加。 2.2仪器 1）超声波振荡器； 2）高效液相色谱仪带紫外检测器； 3）紫外分光光度计； 4）100ml容量瓶； 5）高速离心机； 2.3测定步骤 1）标准溶液的配制：
一100ml溶量瓶中，并定容。将最终稀释液用作标准溶液。 1.2）标准溶液的标定： 于紫外分光光度计中按下面条件测定标准溶液的吸光度： 维生素E标准溶液测定条件：波长：285nm且E 1% 1cm =44 2.4样品的处理： 1）准确称取20.0mg维生素E样品于一100ml容量瓶中，加水约10ml，于65℃超声水浴10min，冷却至室温。 2）加四氢呋喃：丙酮溶液约75ml，常温下超声水浴20min，冷却后，用四氢呋喃：丙酮溶液定容至刻度，离心后取上清液于液相色谱中测定。 2.5高效液相色谱分析 2.5.1色谱条件 1）分析柱：ultrasphere ODS 5μm，4.6mm×25cm； 2）甲醇:色谱纯； 3）紫外检测器波长：285nm； 4）进样量：20μL； 5）流速：1.5ml/min； 6）灵敏度：0.5。 2.5.2样品分析 1）把前标准溶液按上述色谱条件进样3~4次，根据色谱图，计算标准溶液的平均峰面积。 2）将样品溶液按上述色谱条件进样，根据色谱图，计算样品溶液的峰面积。3）计算 A 样 某种维生素含量（mg/g）= ——————×C×100÷1000 A 标×W 样 式中：A 样 ——样品溶液的峰面积； A 标 ——标准溶液的峰面积； W 样 ——样品的质量，g； C——标准溶液的浓度，ug/100g。 3．干燥失重 3.1称取样品1~2g（称准至0.001g）于干燥已知恒重的称量瓶中，于105℃烘箱 干燥1小时。 3.2计算 G 1－G 2 干燥失重 % = ×100 G 1 －G 式中： G1——干燥前称量瓶加试样重，g；广州赢特保健食品有限公司
维生素A和维生素E的测定方法（HPLC） 杨月欣教授等 高效液相色谱法 最小检出量分别为VA：0.8ng；α-E：91.8ng；γ-E：36.6ng；δ-E：20.6ng。 1.原理 食物中的维生素A及维生素E经皂化提取以后，将其不可皂化的部分提取到有机溶剂中。用HPLC法测定维生素A及维生素E的含量。 2. 适用范围 GB12388-90 本法适用于各种食物和饲料的测定 3. 仪器 （1）高压液相色谱仪（带紫外检测器） （2）六孔恒温水浴锅 （3）旋转蒸发器 （4）高纯氮气 （5）高速离心机 4. 试剂 本实验所用试剂皆为分析纯，所用水皆为蒸馏水 4.1 无水乙醇：重蒸，不含有醛类物质 检查方法：取2ml银氨溶液于试管中，加入少量乙醇，摇匀，再加入10%氢氧化钠溶液，加热，放置冷却后，若有银镜反应则表示乙醇中有醛。 脱醛方法：取2g硝酸银溶于少量水中。取4g氢氧化钠溶于温乙醇中。将两者倾入1L乙醇中，振摇后，放置暗处两天（不时摇动，促进反应），经过滤，置蒸馏瓶蒸馏，弃去初蒸出的50ml。当乙醇中： 4.2 10%抗坏血酸溶液（Vc）W/V 临用前配制 4.3 50%氢氧化钾溶液（KOH）W/V 4.4 无水乙醚重蒸，不含过氧化物 4.4.1 过氧化物检查方法：用5ml乙醚加1ml10%碘化钾溶液，振摇1min，如有过氧化物则放出游离碘，水层呈黄色或加4滴0.5%淀粉液，水层呈蓝色。该乙醚需处理后使用。 4.4.2 去除过氧化物的方法：重蒸乙醚时，瓶中放入铁丝或铁末少许。弃去10%初馏液和10%残馏液。4.5 pH 1-14试纸 4.6 无水硫酸钠Na2SO4 4.7 甲醇色谱纯或分析纯重蒸后使用 4.8 重蒸水蒸馏水中加入少量高锰酸钾重蒸后使用 4.9 苯并〔e〕芘标准液称取苯并〔e〕芘（纯度98%），用脱醛乙醇配制成1ml相当于5μg苯并〔e〕芘的内标溶液。 4.10 维生素A标准液视黄醇（纯度85% Sigma公司）用脱醛乙醇溶解维生素A标准品，使其浓度大约为1ml相当于1mg视黄醇。临用前用紫外分光光度法标定其准确浓度。维生素E标准液α-生育酚（纯度95% Sigma公司），δ-生育酚（纯度95% Sigma公司），δ-生育酚（纯度95% Sigma公司）。用脱醛乙醇分别溶解以上三种维生素E标准品，使其浓度大约为1ml相当于1mg。临用前用紫外分光光度法分别标定此三种维生素E的准确浓度。 5. 操作步骤 本实验需避光操作 (1) 样品皂化称取样品于三角瓶中，加30ml无水乙醇，振摇三角瓶，使样品分散均匀。加入5ml 10%抗坏血酸和苯并〔e〕芘标准液2ml，混匀。最后加入10ml氢氧化钾边加边振摇。于沸水浴上回流30min使样品皂化完全。皂化后立即放入冰水中冷却。 (2) 样品萃取将皂化后的样品移入分液漏斗中，用50ml水分2次洗皂化瓶，洗液并入分液漏斗中。用10 0ml无水乙醚分两次洗皂化瓶及残渣，乙醚液并入分液漏斗中。轻轻振摇分液漏斗2min，静置分层，弃去水层。然后每次用约100ml水将乙醚液洗至中性，约4-5次。 (3) 浓缩将乙醚提取液经无水硫酸钠（约5g）滤入150ml旋转蒸发瓶内，用约15ml乙醚冲洗分液漏斗及无水硫酸钠2次，并入蒸发瓶内，并将其接在旋转蒸发器上，于55℃水浴中减压蒸馏并回收乙醚，待瓶中乙醚剩下约2ml时，取下蒸发瓶，立即用氮气将乙醚吹干。加入2ml乙醇溶液，充分混合，溶解提取物。将乙醇液移入塑料离心管中，于离心机上以3000转/min离心5分钟。上清液供色谱分析。 (4) 标准曲线的制备将维生素A和维生素E标准品配置成标准溶液（约1mg/ml），制备标准曲线前用紫外分光光度法标定其准确浓度。标准浓度的标定方法取维生素A和维生素E标准液若干微升，分别稀释至10.00ml乙醇中，并分别按给定波长测定各维生素的吸光值。用比吸光系数计算该维生素的浓度。测定条件如下 标准比吸光系数E1%cm 波长λ，nm 视黄醇1835 325 α—生育酚71 294
饲料中维生素E的快速测定方法 摘要：用简便快捷的方法测定饲料中的维生素E，试剂消耗少，稳定性强，回收率也较为理想。 关键词维生素E 快速测定 维生素E又称生育酚，能维持生殖器官的正常机能，提高母畜生殖能力，促进机体代谢，提高免疫力和抗应激水平，维生素E还有抗氧化作用，可防止脂肪化合物、维生素A、硒(Se)、两种硫氨基酸和维生素C 的氧化作用，提高维生素A的作用。GB／T17812—1999是测定饲料中维生素E含量的传统方法，其原理是用碱液皂化样品，使试样中天然生育酚释放出来，再用乙醚提取未皂化的物质。前处理需经过皂化、提取、浓缩几个步骤，耗时长、过程繁琐、消耗试剂多等局限性。生育酚在碱性环境下极不稳定，在皂化过程中易分解。在提取过程中要用到大量的乙醚，对操作人员的健康伤害大。我们经多次试验，用热的甲醇超声样品，使维生素E溶解到甲醇中，将溶液过膜，上机测定，这种方法操作简便，试剂消耗少，回收率稳定。 1 材料和方法 1.1 方法原理 样品中加入甲醇并于一定温度水浴超声萃取，使维生素E溶解于甲醇中，经高效液相测定，用外标法计算其含量。 1.2仪器设备 高效液相色谱仪（安捷伦1100型），配DAD或VWD检测器；超声波振荡器；电子天平：（精确度分别为0.0001g和 0.00001g）。 1.3 试剂 1.3.1 甲醇（分析纯） 1.3.2 维生素E（dl-α-生育酚）标准溶液 1.3. 2.1 dl-α-生育酚标准储备液：准确称取dl-α-生育酚纯品油剂（USP）100.0mg于100.0mL棕色容量瓶中，用正己烷溶解并稀释至刻度，混匀，4℃ 保存。该储备液浓度每毫升含维生素E1.0mg。 1.3. 2.2 dl-α-生育酚标准工作液： 准确吸取dl-α-生育酚标准储备液（1.3.1.1）1.00mL置于10mL棕色容量瓶中，用氮气吹干，用甲醇稀释至刻度，混匀，再按比例稀释。配制工作液浓度每毫升含维生素E50μg。 1.4 色谱条件 色谱柱为 Zorbax SB-C18 5μm 4.6×150mm（或相当型号色谱柱）,流动相为95％甲醇(色谱纯)，流速1.0mL/min，柱温为室温，检测波长280nm，进样体积20μL。 1.5 试样的提取 称取适量样品与100mL棕色容量瓶中（维生素预混料0.5g,复合预混料 5－10g），加甲醇80mL，置于50℃水 浴中，超声提取15分钟，其中每5min 取出用手振摇一次。超声结束后，取出冷却至室温，用甲醇定容至刻度，混匀。取上层清夜过滤或离心，再经0.45μm膜过滤，供高效液相色谱分析用。 1.6 回收率的测定取适量维生素E标准储备液于100mL棕色容量瓶中,用氮气吹至快干,再称取5g空白样品,使维生素E的含量分别为50μg/g、100μg/g和500μg/g，每个浓度点配制5份样品，求其平均回收率。按1.5项下的方法处理后进行色谱分析，以外标法计算含量，以测得量与添加量之比来计算回收率。同时按GB/T17817
液相色谱法检测的生育酚方法报告 一、生育酚简介 又称维生素E，是一种脂溶性维生素，是最主要的抗氧化剂之一。溶于脂肪和乙醇等有机溶剂中，不溶于水，对热、酸稳定，对碱不稳定，对氧敏感，对热不敏感。 维生素E为微带粘性的淡黄色油状物，在无氧条件下较为稳定，甚至加热至200℃以上也不被破坏。但在空气中维生素E极易被氧化，颜色变深。维生素E易于氧化，故能保护其他易被氧化的物质（如维生素A及不饱和脂肪酸等）不被破坏。 维生素E的化学名称为(1)-2、5、7、8-四甲基2-(-4、8、12-三甲基十三烷基)-6-苯并二氢吡喃醇醋酸酯，分子式为C31H52O3，结构式为： 根据其化学结构可分为生育酚及生育三烯酚两类。生育酚主要有四种衍生物，按甲基位置分为α、β、γ和δ四种。其中，α-生育酚：R1，R2=CH3；β-生育酚：R1=H，R2=CH3；γ-生育酚：R1=CH3，R2=H；δ-生育酚：R1，R2=H。维生素E以α-生育酚生理活性最高，β-及γ-生育酚仅为α-生育酚的40%和8%。 二、色谱方法的选择 现行标准中维生素E的检测仅有两个标准——《食品中维生素A和维生素E的测定》（GB/T 5009.82-2003）和《食用植物油中维生素E组分和含量的测定高效液相色谱法》（NY/T 1598-2008），其中前者介绍了液相色谱法和比色法两种方法。 目前有的文献[1]中指出，气相色谱法虽能正确定量维生素E，但是对不同型分离困难，为了使α-维生素E与β-维生素E及γ-维生素E分离，预先要将试样进行三甲基硅烷化或酯化，同时胆同醇等硬脂类对测定有干扰。另外，如果前期样品处理不好，很容易对毛细管柱造成污染。故建议使用液相色谱法。 三、内标法和外标法的选择 1、两种方法的区别： 内标法外标法内标物与待测物相似，且均出峰不需要 标准曲线需要，可两点需要，需多点 优点定量准确操作简便 缺点不容易选择内标物；操作精度高与标准品严格相同的操作条件 2、在《食品中维生素A和维生素E的测定》中采用了内标法，内标物为苯并[a]芘，另外 文献中也有使用正三十二烷及十六酸十六醇酯等。《食用植物油中维生素E组分和含量的测定高效液相色谱法》中使用的外标法，国内大多数检测维生素E的文献中都用的是外标法。根据我部门的实际情况，维生素E的检测一般用于豆油脂肪酸的日常检测和协助营销部门的发货定价，故精度要求不是非常高，而内标法每次检测需用到内标物，而内标物的成本通常偏高，因此，外标法可以满足我部门日常检测的需求。
MM_FS_CNG_0793料添加剂维生素E粉检验规程滴定法称量法 MM_FS_CNG_0793 饲料添加剂维生素E粉 1.适用范围 本方法适用于以维生素E为原料，加入适当的吸附剂制成的维生素E粉，在饲料工业中作为维生素类饲料添加剂。 2.分子式、分子量 分子式：G1H2Q 分子量：472.75（按1983年国际原子量） 3.技术要求 3.1.外观和性状 本品为类白色或淡黄色粉末，易吸潮。 3.2.粒度 本品90%通过三号筛。 3.3.项目和指标 称取样品50g,用肉眼观察颜色，再用三号筛测定。 4.2.鉴别 4.2.1.主要试剂 无水乙醇；硝酸。 4.2.2.鉴别方法 称取样品约相当于维生素E15mg加无水乙醇10ml溶解后，加硝酸2ml，摇 匀，在75C加热约15min,溶液显橙红色。 4.3.维生素E含量测定 4.3.1.主要试剂 95%乙醇； 无水乙醇； 硫酸； 二苯胺：1% （g/ml）硫酸溶液； 硫酸铈； 硫酸铈标准液：0.01mol/L。按中国药典一九八五版二部附录134页制备和 4.3.2.测定方法 称取样品约相当于维生素E 0.18g（准确至0.0002g），置于100ml量瓶中，加无水乙醇至刻度。振摇30mi n，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，准确吸取续滤液50ml，置于回流瓶中，再加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，准确吸取25ml，加乙醇20ml，水10ml，二苯胺硫酸溶液2滴，用0.01mol/L硫酸铈标准液滴定，
滴定速度以每10s 25滴为宜，至溶液由亮黄色转变为灰紫色。持续 10s ，即为 终点，并将滴定结果用空白试验校正。 433.计算和结果的表示 所含维生素E 相当于标示量的百分数X i （ %）按式⑴ 计算: (V -V 。)F O.002364 8 1OO . G K 式中：V —样品溶液消耗硫酸铈标准液的体积, V ——空白溶液消耗硫酸铈标准液的体积, F ——硫酸铈标准液浓度校正系数； 0.002364 ——滴定度（每 1ml 0.01mol/L 的 G^Q ）; 8——样品稀释倍数； G —样品重量，g ; 竺邑竺20?等) 100'100'100'100'100 丿 4.4.干燥失重的测定 4.4.1.测定方法 称取样品1g （准确至0.0002g ），置于已在105C 烘箱中干燥至恒重的 构0X 30mm 的称量瓶中，打开称量瓶瓶盖，放置 105°C 烘箱中，干燥至恒重。 4.4.2.计算和结果的表示 干燥失重％（以重量百分数表示）按式（2）计算： X 2(%^^^ 10。 .......................... ⑵ 式中：G ——干燥前的样品加称量瓶重，g ； G --- 干燥后的样品加称量瓶重，g ； G 样品重，go 5. 验收规则 5.1. 本产品应由生产厂的质量检验部门进行检验， 生产厂应保证所有出厂的产品 均符合本标准的要求，每批出厂的产品都应附有质量证明书。 5.2. 使用单位有权按照本标准规定的检验规则和试验方法对所收到的产品进行 质量检验，检验其指标是否符合本标准的要求。 5.3. 取样方法 取样需备有清洁、干燥、具有密闭性和避光性的样品瓶。瓶上贴有标签，注 明 生产厂名称、产品名称、批号及取样日期。 抽样时，应用清洁适用的抽样器。每批产品抽样2份，每份抽样量应为检验 所需样品的3倍量，装入样品瓶中，一件送化验室检验，另一件应密封保存，以 备仲裁分析用。 5.4. 如果在检验中有一项指标不符合本标准时， 应重新抽样，抽样量是第一次的 二倍，进行核验。产品重新检验结果即使只有一项指标不符合标准时， 则整批不 能验收。 5.5. 如供需双方对产品质量发生异议时， 可由双方协商选定仲裁单位，按本标准 的验收规定和检验方法进行仲裁检验。 6. 标志、包装、运输和贮存 X,%) (1) ml ； ml 硫酸铈标准液相当于0.002364g 维生素 E 的标示量（如
xxA和xxE的测定方法 （HPLC）xx教授等 高效液相色谱法 最小检出量分别为VA：0.8ng；α-E：91.8ng；γ-E：36.6ng；δ-E：20.6ng。 1.原理 食物中的维生素A及维生素E经皂化提取以后，将其不可皂化的部分提取到有机溶剂中。用HPLC法测定维生素A及维生素E的含量。 2.适用范围 GB12388-90本法适用于各种食物和饲料的测定 3.仪器 （1）高压液相色谱仪（带紫外检测器） （2）六孔恒温水浴锅 （3）旋转蒸发器 （4）xx氮气 （5）高速离心机 4.试剂 本实验所用试剂皆为分析纯，所用水皆为蒸馏水 4.1无水乙醇：重蒸，不含有醛类物质 检查方法：取2ml银氨溶液于试管中，加入少量乙醇，摇匀，再加入10%氢氧化钠溶液，加热，放置冷却后，若有银镜反应则表示乙醇中有醛。
脱醛方法：取2g硝酸银溶于少量水中。取4g氢氧化钠溶于温乙醇中。将两者倾入1L乙醇中，振摇后，放置暗处两天（不时摇动，促进反应），经过滤，置蒸馏瓶蒸馏，弃去初蒸出的50ml。当乙醇中： 4.2 10%抗坏血酸溶液（Vc）W/V 临用前配制 4.3 50%氢氧化钾溶液（KOH）W/V 4.4无水乙醚重蒸，不含过氧化物 4.4.1过氧化物检查方法：用5ml乙醚加1ml10%碘化钾溶液，振摇1min，如有过氧化物则放出游离碘，水层呈黄色或加4滴0.5%淀粉液，水层呈蓝色。该乙醚需处理后使用。 4.4.2去除过氧化物的方法：重蒸乙醚时，瓶中放入铁丝或铁末少许。弃去10%初馏液和10%残馏液。4.5 pH 1-14试纸 4.6无水硫酸钠Na2SO4 4.7甲醇色谱纯或分析纯重蒸后使用 4.8重蒸水蒸馏水中加入少量高锰酸钾重蒸后使用 4.9苯并〔e〕芘标准液称取苯并〔e〕芘（纯度98%），用脱醛乙醇配制成1ml相当于5μg苯并〔e〕芘的内标溶液。 4.10维生素A标准液视黄醇（纯度85% Sigma公司）用脱醛乙醇溶解维生素A标准品，使其浓度大约为1ml相当于1mg视黄醇。临用前用紫外分光光度法标定其准确浓度。维生素E标准液α-生育酚（纯度95% Sigma公司），δ-生育酚（纯度95% Sigma公司），δ-生育酚（纯度95% Sigma公司）。用脱醛乙醇分别溶解以上三种维生素E标准品，使其浓度大约为1ml相当于1mg。临用前用紫外分光光度法分别标定此三种维生素E的准确浓度。 5.操作步骤 本实验需避光操作
高效液相色谱法对维生素E粉、E油含量的测定 色谱条件 色谱柱：采用C18柱(长150 mm，内径，粒径4-5μm) 流动相：甲醇(色谱醇)+水(去离子水) 比例：(98 + 2 ) 流速： ml/min 检测波长:285 nm 柱温: 25±2 ℃ 进样量：20 μL 溶液制备 标准溶液的制备： 本实验室的标准品为液体油状物，因此用注射器抽取直接滴加到容量瓶中称量，把容量瓶放在分析天平托盘上然后滴加，称取维生素E标准品约(准确至,置50mL棕色量瓶中,加甲醇适量溶解并稀释至刻度,摇匀。 绘制标准曲线 把制成 mg/mL的溶液作为贮备液。分别准确移取、、、、5mL 至10mL的棕色量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀；得到浓度分别为、、、、ml的五种溶液，分别经μm 滤膜滤过,滤液作为标准溶液。 用100μL的进样针分别从制备的不同浓度的标准溶液抽取60μL溶液，注意不能带有气泡，注入液相色谱仪,按色谱条件操作,从——ml依次进样，记色谱峰面积以标准品溶液浓度(C)为纵坐标,峰面积(A)为横坐标,按照外标法过5点绘制标准曲线。 样品溶液的制备： 维生素E粉样品溶液的制备 制备步骤为：研磨→称量→水浴溶解→定容→过滤 1.研磨把试样E粉倒入研钵中适量，用研磨棒轻度研磨至颜色有变化为止。 2.称量把称量纸放到分析天平上然后置零，把研磨好的试样用药匙转移到称量纸
上，称取维生素E 粉约1g(约相当于维生素E 0.5g ，准确至0.0002g),置50mL 棕 色量瓶中。 3. 水浴溶解 加甲醇适量,置超声波水浴器中助溶20 min 。 4. 移取定容 冷却至室温,用甲醇稀释至刻度,充分摇匀，从制备好的溶液中移取1mL 到10mL 的容量瓶中，用甲醇稀释至刻度,充分摇匀;再从制备好的10mL 容量瓶中的 溶液中移取放置到10mL 容量瓶中，用甲醇稀释至刻度,充分摇匀。 5. 过滤 把制备好的溶液经μm 滤膜滤过,滤液作为样品溶液。 维生素E 油样品溶液的制备 用注射器直接抽取E 油样品滴加到放在分析天平上的容量瓶中，称维生素E 油样品约 20mg,(准确至,置50mL 棕色容量瓶中,加甲醇适量溶解，置超声波水浴中助溶10min,冷却至室温,用甲醇稀释至刻度,充分摇匀；经μm 滤膜滤过,滤液作为样品溶液。 测定步骤 用100L 的进样针抽取60μL 的维生素E 粉、E 油的样品溶液,注入液相色谱仪，按色谱条件操作,得到色谱峰面积(A i )，每批次样品溶液做三个平行样，根据标准曲线上各点的峰面积(A st )，用外标法计算。 计算和结果的描述 计算公式 维生素E 的含量X 2以质量分数(%)表示 X 2=m st ×P st ×A i m i ×A st ×100% 式中： X 2——样品中维生素E 的含量﹙%﹚ m st ——标准品的质量﹙g ﹚ m i ——样品的质量﹙g ﹚ P st ——维生素E 标准品的含量﹙%﹚
维生素E（VE）含量检测试剂盒说明书微量法 注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 货号：BC1425 规格：100T/48S 产品内容： 提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存； 试剂一：液体3mL×1瓶，4℃避光保存； 试剂二：液体2mL×1瓶，4℃保存； 试剂三：无水乙醇2mL×1瓶，自备，RT保存； 试剂四：液体7mL×1瓶，4℃保存； 标准品：液体20mg×1支，-20℃避光保存。临用前加入1mL无水乙醇，配成20mg/mL的标准品溶液。产品说明： 维生素E（Vitamin E）是一种天然脂溶性抗氧化剂，是最主要的抗氧化剂之一。能阻断机体不饱和脂肪酸的过氧化，维持不饱和脂肪酸细胞膜的完整性和正常功能，并可清除超氧阴离子自由基，具有延缓衰老、预防溶血性贫血等作用。 VE还原Fe3+为Fe2+，Fe2+与1,10-菲罗啉产生有色络合物，在530nm有特征吸收峰。 试验中所需的仪器和试剂： 可见分光光度计/酶标仪、天平、台式离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、漩涡震荡仪、无水乙醇、EP管。 操作步骤： 一、维生素E的提取： 组织：按照质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，匀浆后用提取液定至1mL，定至在漩涡混匀仪上震荡5min（充分抽提），于25℃，5000g离心5-10min， 取上层测定。 第1页共3页
细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）后在漩涡混匀仪上震荡5min（充分抽提），于25℃，5000g离心5-10min，取上层测定。 血清或其他液体：取0.1mL，加0.9mL提取液，漩涡仪混匀上震荡5min（充分抽提），于25℃，5000g 离心5-10min，取上层测定。 二、测定步骤： 1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至530nm，无水乙醇调零。 2、将20mg/mL标准液用无水乙醇稀释为0.125、0.0625、0.03125、0.015625、0.008、0.004μg/mL的标 准溶液备用。 3、操作表：(在1.5ml离心管或96孔板中依次加入下列试剂) 对照管测定管标准管空白管样品（μL）100100--标准溶液（μL）--100- 无水乙醇（μL）---100 试剂一（μL）20202020 试剂二（μL）-202020 试剂三（μL）20--- 充分混匀，立即记时，25℃反应5min 试剂四（μL）60606060充分混匀，将液体置于微量玻璃比色皿/96孔板中，测定530nm处吸光值，记为A对照管、A测定管、A标准管和A空白管，△A=A测定管-A对照管。计算△A=A测定管-A对照管，△A标准=A标准管-A 空白管。每个测定管需设一个对照管。 三、维生素E含量计算： 1、标准曲线的绘制： 以各个标准溶液的浓度为x轴，其对应的△A标准为y轴，绘制标准曲线，得到标准方程y=kx+b，将△A带入方程得到x（μg/mL） 2、维生素E含量的计算： （1）按蛋白浓度计算 第2页共3页
实验六高效液相色谱法分离和测定α-ＶE 一、实验目的 1. 了解高效液相色谱仪的基本结构，掌握液相色谱仪的基本操作方法。 2. 掌握液相色谱分析的定性及外标定量方法。 二、原理 1. 高效液相色谱的特点 高压泵输送流动相，梯度洗脱，可在柱后直接检测流出液成分，通过改变溶剂极性或强度进而改变色谱柱效能，分离选择性和组分的容量因子，实现改善色谱系统分离度的目的。 2. 高效液相色谱仪 (1) 高压输液系统，是提供足够恒定的高压，使流动相以稳定的流量快速渗透通过固定相。 (2) 进样系统，一般采用旋转式六通阀在高压下进样。 (3) 分离系统，在液相色谱柱中完成。 (4) 检测系统，液相色谱常见检测器有：紫外光度检测器，示差折光检测器、荧光检测器电化学检测器。 3. 高效液相色谱的类型 根据固定相和分离机理的不同，高效液相色谱如下几种类型 (1) 液—固吸附色谱：基于各组分在固体吸附剂表面上具有不同吸附能力而进行分离。 (2) 液—液分配色谱：组分在两相间经过反复多次分配各组分间产生差速迁移，从而实现分离。 (3) 化学键合相色谱：通过共价键将有机固定液结合到硅胶载体表面得到各种性能的固定相。 (4) 离子交换色谱：离子交换树脂上可电离的离子与流动相中带相同电荷的组分离子进行可逆交换，由于亲和力的不同彼此分离。 (5) 离子色谱：用离交换树酯作为固定相，电解质溶液为流动相，用电导检测器检测。 (6) 凝胶色谱：基于试样中各组分分子的大小和形状不同来实现分离。 4. 实验原理 反向色谱与正相色谱组成相反，是以非极性或弱极性的固定液制成的固定相，以极性或相对强的极性溶剂作为流动相组成的液—液分配色谱。但目前多是采用化学反应的方法将
维生素E的含量检验方法 一、目的：建立维生素E含量标准检验方法，保证分析结果的准确性。 二、依据：GB/T5009.82-2003 三、范围：本规程适用于本公司维生素E含量检验操作 四、职责：质量检验员对本标准的实施负责 五、正文： 1、试制和溶液 1.1 无水乙醚：:不含有过氧化物。 1.1.1 过氧化物检查方法:用5 mL乙醚加1mL10%碘化钾溶液，振摇1 min， 如有过氧化物则放出游离碘，水层呈黄色或加4滴0.5%淀粉溶液，水层呈蓝色。 该乙醚需处理后使用。 1.1.2 去除过氧化物的方法：重蒸乙醚时，瓶中放人纯铁丝或铁末少许。 弃去10%初馏液和10%残馏液。 1.2 无水乙醇：不得含有醛类物质 1.2.1 检查方法：取2mL银氨溶液于试管中，加人少量乙醇，摇匀，再加人 氢氧化钠溶液，加热，放置冷却后，若有银镜反应则表示乙醇中有醛。1.2.2 脱 醛方法：取2g硝酸银溶于少量水中。取4g氢氧化钠溶于温乙醇中。将两者倾人 1L乙醇中，振摇后，放置暗处两天(不时摇动，促进反应)，经过滤，置蒸馏瓶 中蒸馏，弃去初蒸出的50 mL。当乙醇中含醛较多时，硝酸银用量适当增加。 1.3 无水硫酸钠。 1.4 甲醇：重蒸后使用。 1.5 重蒸水：水中加少量高锰酸钾，临用前蒸馏。 1.6 抗坏血酸溶液(100 g/L)：临用前配制。 1.7 氢氧化钾溶液(1+1), 1.8 氢氧化钠溶液(100 g/1)。 1.9 硝酸银溶液((50 g/L)o 1.10 银氨溶液：加氨水至硝酸银溶液(3. 9)中，直至生成的沉淀重新溶解 为止，再加氢氧化钠溶液(3.8)数滴，如发生沉淀，再加氨水直至溶解。 1.11 维生素E标准液：a一生育酚(纯度95%)>Y一生育酚(950o),S一生育酚(纯度95%)。用脱醛乙醇分别溶解以上三种维生素E标准品，使其浓度大约为1 mL 相当于1 mg。 临用前用紫外分光光度计分别标定此三种维生素E溶液的准确浓度。 1. 12 内标溶液：称取苯并「e」芘(纯度98%)，用脱醛乙醇配制成每1 mL 相当10 ug苯并「e」芘的内标溶液。
MM_FS_CNG_0792饲料添加剂维生素E(原料) 检验规程滴定法分光光度法 MM_FS_CNG_0792 饲料添加剂维生素E(原料) 1.适用范围 本方法适于由三四基氢与异植物醇为原料，经化学合成制得的维生素E。在饲料工业中作为饲料添加剂的原料，也可作为抗氧剂。 2. 分子式、分子量 分子式：C 31H 52 O 3 分子量：472.75(按1983年国际原子量) 3.技术要求 3.1.外观和性状 本品为微绿黄色或黄色的粘稠液体，遇光色渐变深。 本品在无水乙醇、丙酮、乙醚或石油醚中易溶，在水中不溶。 4. 4.1.主要试剂 无水乙醇； 乙醚； 硝酸； 2,2-联吡啶：0.5%乙醇溶液。 三氯化铁：0.2%乙醇溶液； 氢氧化钾：0.5mol／L乙醇溶液(按中国药典1985年版二部附录128页制备)； 95%乙醇； 硫酸：12%(V／V)乙醇溶液； 硫酸铈； 二苯胺：1%硫酸溶液； 硫酸铈标准液：0.01mol/L。按中国药内1985年版二部附录134页制备和标定。 4.2.仪器 一般实验仪器设备和折光仪、紫外分光光度计。 4.3.鉴别试验 4.3.1.称取样品约30mg，加无水乙醇10mL溶解后，加硝酸2mL，摇匀，在75℃加热约15min，溶解显橙红色。
4.3.2.称取样品约10mg ，加0.5mol/L 乙醇制氢氧化钾溶液2mL ，煮沸5min ，放冷，加水4mL 及乙醚10mL ，振摇，静止使分层，取乙醚液2mL 和0.5%2，2-联吡啶乙醇溶液数滴，0.2%三氯化铁乙醇溶液数滴混合，应显血红色。 4.4.维生素E 含量测定 4.4.1.测定方法 称取样品0.2g(准确至0.0002g)，置具塞棕色锥形瓶中，加无水乙醇25mL 溶解，加12硫酸乙醇溶液25mL ，加热回流3h ，放冷，移置100mL 棕色量瓶中，用少量无水乙醇洗涤容器，洗液并入量瓶中，加无水乙醇稀至刻度，摇匀，准确量取25mL ，置于三角瓶中，加95%乙醇20mL ，水10mL ，1%二苯胺硫酸试液2滴，用0.01mol ／L 硫酸铈标准溶液滴定，滴定速度以每10s25滴为宜，至溶液由亮黄色转变为灰紫色，持续10s 即为终点，并将滴定结果用空白试验校正。 4.4.2.计算和结果的表示 含维生素E(以重量百分数表示)按式(1)计算： 1004002364.0)((%)01????-=G F V V X ……………………(1) 式中：X 1──维生素E 重量百分数，%； V ──样品消耗0.01mol/L 硫酸铈标准液的体积，mL; V 0──空白溶液消耗0.01mol/L 硫酸铈标准液的体积，mL ； F ──硫酸铈标准液浓度校正系数； 0.002364──滴定度，每1mL 的0.01mol/L 硫酸铈标准相当于0.002364g 的C 31H 52O ； 4──样品稀释倍数； G ──样品重量，g 。 4.5.折光率测定 按GB.614中规定操作。 折光仪使用前应用双蒸馏水校正，20℃时水的折光率为1.3330。 4.6.维生素E 吸收系数测定 4.6.1.测定方法 称取样品10mg(称准至0.0002g)置于100mL 棕色量瓶中，用无水乙醇溶解并稀释至刻度，将稀释液置1cm 比色皿中，用分光光度计于284±1nm 波长处测定吸光度，以无水乙醇作空白对照。 4.6.2.计算和结果的表示 吸收系数以E cm 11%表示，按式(2)计算。 L C A E cm ?=%11……………………………(1) 式中：%11cm E ──样品的吸收系数，即溶液浓度1%(g/mL)光路长度为1cm 时的吸光度。 A ──样品的吸光度； C ──100mL 溶液中含有样品的重量，g ； L ──光路的长度，cm 。 4.7.游离生育酚测定 称取样品0.1g(称准至0.0002g ，)加无水乙醇5mL 溶解，加1%二苯胺硫酸
天然维生素E软胶囊中维生素E的含量测定 Determination of narural vitamin E in Natural Vitamin E Soft Capsules XUWenfeng XUShuo HE Xiaorong JIANG Wenqing WUXuejun KUANG Yongmei JIN Pengfei Department of Pharmacy ，Beijing Hospital National China Center of Gerontology ，Beijing 100730 [] Objective To establish a high performance liquid chromatography ( HPLC) method for the determination of narural vitamin E in Natural Vitamin E Soft Capsules. Methods An Alltima C18 column (150 mnX 4.6 mm , 5 卩m) was used for the separation ，with methanol as the mobile phase at the flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was 285 nm. Results The method showed good linearity with correlation coefficient of 0.9999 for vitamin E. The assay method showed good specificity. The
题目：维生素e的检测方法学院：食品与生物工程学院专业：应用化学 班级：化学1401 学号：1410070118 学生姓名：闫文卉 指导教师：张祥 二○一六年十一月
维生素e的检测方法 摘要：维生素e亦称维他命e，是一种脂溶性维生素。其水解产物为生育酚，是最主要的抗氧化剂之一，在食油、水果、蔬菜及粮食中均存在。它溶于脂肪和乙醇等有机溶剂中，不溶于水，对热、酸稳定，对碱不稳定，对氧敏感。维生素e对人体的益处十分大。由于其是脂溶性物质，不溶于水相，因此在检测过程中提取困难，在测定操作上有一定的难度。现存的测定方法之间存在一定的差异，本文采用了气相色谱法和双波长紫外分光光度法具体检测维生素e的含量，并分析其优点与不足。 关键词：维生素e 国标法紫外分光光度法检测 1、引言 维生素E（Vitamin E）是一种脂溶性维生素，其水解产物为生育酚，是最主要的抗氧化剂之一。易溶于脂肪和乙醇等有机溶剂中，不溶于水，对热、酸稳定，对碱不稳定，对氧敏感，对热不敏感，但油炸时维生素E活性明显降低。它能延缓衰老，有效减少皱纹的产生；减少细胞耗氧量，使人更有耐久力，有助减轻腿抽筋和手足僵硬的状况；抗氧化保护机体细胞免受自由基的毒害；改善脂质代谢，预防冠心病、动脉硬化；预防癌症、预防多处慢性疾病；预防炎症性皮肤病、脱发症；预防溶血性贫血、保护红血球使之不容易破裂；预防治疗甲状腺疾病，改善血液循环、保护组织、降低胆固醇、预防高血压；维生素E是一种很重要的血管扩张剂和抗凝血剂可预防与治疗静脉曲张；可防止血液的凝固，减少斑纹组织的产生；强化肝细胞膜、保护肺泡细胞，降低肺部及呼吸系统遭受感染的几率；保护皮肤免受紫外线和污染的伤害，减少疤痕与色素的沉积;加速伤口的愈合；促进性激素分泌，使男子精子活力和数量增加，使女子雌性激素浓度增高，提高生育能力，预防流产。近来还发现维生素E可抑制眼睛晶状体内的过氧化脂反应，使末稍血管扩张，改善血液循环，预防近视发生和发展。维生素E在胆酸、胰液和脂肪的存在时，在脂酶的作用下以混合微粒，在小肠上部经非饱和的被动弥散方式被肠上皮细胞吸收。各种形式的维生素E被吸收后大多由乳糜微粒携带经淋巴系统到达肝脏。肝脏中的维生素E通过乳糜微粒和极低密度脂蛋白（VLDL）的载体作用进入血浆。乳糜微粒在血循环的分解过程中，将吸收的维生素E转移进入脂蛋白循环，其他的作为乳糜微粒的残骸。α-生育酚的主要氧化产物是α-生育醌，在脱去含氢的醛基生成葡糖醛酸。葡糖醛酸可通过胆汁排泄，或进一步在肾脏中被降解产生α-生育酸从尿酸中排泄。。由于维生素 E 结构复杂，异构体繁多，准确分析测定较困难。近年来许多科学家致力于其分析测定的研究，取得了很大的进展 ,开发了很多实用高效的检测方法。本文着重介绍了气相色谱法和双波长紫外分光光度法具体检测维生素e的含量，并分析其优点与不足。
维生素E检验操作规程 1 目的：建立维生素E检验操作规程。 2 适用范围：适用于维生素E检验操作。 3 职责：检验人员对本规程的实施负责。 4 规程： 4.1 编制依据：《中国药典》2010年版二部P907。 4.2 质量指标：见《维生素E质量标准》。 4.3 仪器与用具：气相色谱仪、折光仪、紫外分光光度计、容量瓶、电子天平、旋光仪、红外分光光度仪。 4.4 试药与试液：无水乙醇、丙醇、乙醚、石油醚、氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）、酚酞指示液、二苯胺、硫酸铈滴定液（0.1mol/L）。 4.5 操作方法
4.5.1 性状：本品为微黄色至黄色或黄绿色澄清的黏稠液体；几乎无臭；遇光色渐变深。天然型放置会固化，25℃左右熔化。 本品在无水乙醇、丙酮、乙醚或植物油中易溶，在水中不溶。 比旋度：避光操作，精密称取本品0.4g，置150ml具塞圆底烧瓶中，加无水乙醇25ml使溶解，加硫酸乙醇溶液（1→7）20ml，水浴回流3小时，放冷，用硫酸乙醇溶液（1→72）定量转移至200ml量瓶中并稀释至刻度，摇匀。精密量取100ml，置分液漏斗中，加水200ml，用乙醚提取2次（75ml，25ml），合并乙醚液，加铁氰化钾氢氧化钠溶液[取铁氰化钾50g，加氢氧化钠溶液（1→125）溶解并稀释至500ml]50ml，振摇3分钟；取乙醚层，用水洗涤4次，每次
50ml，弃去洗涤液，乙醚液经无水硫酸钠脱水后，置水浴中减压或在氮气流下蒸干至7-8ml时，停止加热，继续挥干乙醚，残渣立即加异辛烷溶解并定量转移至25ml量瓶中，加异辛烷稀释至刻度，依法测定，比旋度（按d-α-生育酚计，即测得结果除以换算系数0.911）不得低于+24°（天然型）。 折光率：取本品按《折光率检查操作规程》测定，本品的折光率为1.494-1.499。 吸收系数：取本品，精密称定，加无水乙醇溶液并定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液，照《紫外-可见分光光度法检验操作规程》在284nm的波长处测定吸收度，吸收系 数（E 1% 1cm ）为41.0-45.0。 4.5.2 鉴别