SN/T0173-2010进出口食品中副溶血性弧菌检验方法和
涉及产品汇总SN/T1022-2010进出口食品中霍乱弧菌检验方法
进出口食品中霍乱弧菌检验方法涉及产品汇总SN/T0173-2010进出口食品中副溶血性弧菌检验方法和SN/T1022-2010进出口食品中霍乱弧菌检验方法已于2010年7月16日实施，标准中涉及到的新产品有13种，现将标准中涉及到的产品汇总如下：
副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus）是广泛分布于海水、海底泥沙、浮游生物和鱼贝类中的海洋性细菌，为海产食品引起急性胃肠炎的重要病原菌之一，尤其是在夏秋季节的沿海地区，经常由于食用带有大量副溶血性弧菌的海产食品，引起爆发性食物中毒。在非沿海地区，因食用此菌污染的食品而引起中毒者亦时有发生。为保障食品卫生质量和食用安全，根据副溶血性弧菌的特性，进行下列检验，以便鉴别诊断。 第一节副溶血性弧菌标准的检验方法 一、检验方法 （一）操作步骤 1. 分离培养：首先称取样品25g，加225mL3.5％灭菌盐水，用均质器打碎或用乳钵磨碎，接种氯化钠琼脂平板和嗜盐性琼脂平板各一个，同时取10mL加入100mL增菌液中，放37℃8~16h培养后，涂上述平板进行分离，37℃培养18~24h取出观察，挑取可疑菌落，转种3.5％氯化钠三糖铁斜面，37℃、24h观察结果。 2. 涂片镜检：将三糖铁培养基上反应可疑者即底层变黄（葡萄糖产酸不产气）、上层斜面不变（乳糖、蔗糖不分解）、有动力、不产生硫化氢，进行革兰氏染色镜检形态。 3. 嗜盐性试验：将上述可疑培养物分别接种不同含量的盐胨水（0％，3％，7％，10％）于37℃24h培养后观察生长情况，在无盐和10％盐的胨水中不生长，在3％和7％盐的胨水中生长良好者，继续进行下列有关试验。 4. 生化试验：分别接种下列各类生化培养基，葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、甲基红、靛基质、V-P，赖氨酸、鸟氨酸、精氨酸、硫化氢及溶血性试验，放37℃培养，除V-P、靛基质和甲基红试验培养48h后加试剂观察外，其他均在24h观察结果。 5. 动物试验：将上述符合各类反应的副溶血性弧菌，接种3.5％氯化钠胨水，经37℃、16~18h 培养后，小鼠腹腔注射0.3mL，观察2~3d，将死亡小鼠进行解剖作分离培养。 （二）检验程序 图6-1副溶血性弧菌检验程序 二、结果分析判定及注意事项 （一）样品处理 采样时应注意首选准备好灭菌用具及容器，以无菌手续取有代表性的样品，样品必须尽快送检，不宜存放时间过长，副溶血性弧菌在适宜温度下繁殖较快，但不适于低温生存，在寒冷的情况下容易死亡，防止待检材料冷冻，以免影响检验结果。 对采取的样品有时因受存放条件的影响（如低温冷冻或干燥时间过长等原因），使菌体处于受伤状态，故需对此类可疑食品或可疑中毒材料进行增菌培养，但应注意为有利于细菌恢复，不宜选用抑制性较强的培养基，否则影响细菌生长。 样品经增菌8~16h后，转种平板进行分离，挑选可疑菌落，接种于含有3.5％盐的三糖铁培养基，此时挑选数目不应少于5个，尤其夏季海产食品混放，相互污染严重，时有不同型别的大量细菌存在，以防漏检。 （二）形态与染色
食品分析方法的分类 Modified by JACK on the afternoon of December 26, 2020
食品分析方法的分类 对食品品质的评价，主要包括食品营养、卫生和嗜好性三个方面。食品分析所采用的分析方法主要有感观分析法、理化分析法、微生物分析法和酶分析法。 1.感观分析法感官分析又叫感观检验或感观评价，是通过人体的各种感官 器官（眼、耳、鼻、舌、皮肤）所具有的视觉、听觉、嗅觉、味觉和触觉，结合平时积累的实践经验，并借助一定的器具对食品的色、香、味、形等质量特性和卫生状况做出判定和客观评价的方法。感观检验作为食品检验的重要方法之一，具有简便易行、快速灵敏、不需要特殊器材等特点，特别适用于目前还不能用仪器定量评价的某些食品特性的检验，如水果滋味的检验、食品风味的检验以及烟、酒、茶的气味检验等。 依据所使用的感觉器官的不同，感官检验可分为视觉检验、嗅觉检验、味觉检验、触觉检验和听觉检验五种。 （1）视觉检定是鉴定者利用视觉器官，通过观察食物的外观形态、颜色光泽、透明度等，来评价食品的品质如新鲜程度、又无不良改变以及鉴别果蔬成熟度等的方法。 （2）嗅觉鉴定是通过人的嗅觉器官检验食品的气味，进而评价食品质量（如纯度、新鲜度或劣变程度） （3）味觉鉴定是利用人的味觉器官（主要是舌头），通过品尝食物的滋味和风味，从而鉴别食品品质优劣的方法。味觉检验主要用来评价食品的风味（风味是食品的香气、滋味、入口获得的香气和口感的综合构成），也是识别某些食品是否酸败、发酵的重要手段。
（4）听觉器官听觉鉴定是凭借人体的听觉器官对声音的反应来检验食品品质的方法。听觉鉴定可以用来评判食品的成熟度、新鲜度、冷冻程度及罐头食品的真空度等。 （5）触觉鉴定是通过被检食品用于鉴定者的触觉器官（手、皮肤）所产生的反应来评价食品品质的一种方法。如根据某些食品的脆性、弹性、干湿、软硬、黏度、凉热等情况，可评判食品的品质优劣和是否正常。 感官分析的方法很多，常用的检验方法有差别检验法，标度和类别检验法、分析或描述性检验法等。 感官分析法虽然简便、实用且多数情况下不受鉴定地点的限制。但也存在明显缺陷，由于感官分析是以经过培训的评价员的感觉作为一种“仪器”来测定食品的质量特性或鉴别产品之间的差异，因此判断的准确性与检验者的感觉器官的明锐程度和实践经验密切相关。同时检验者的主观因素（如健康状况、生活习惯、文化素养、情绪等），以及环境条件(如光线、声响等)都会对鉴定结果产生一定的影响。另外，感官检验的结果大多情况下只能用于比较性的用词（优、良、中、劣等）表示或用文字表述，很难给出食品品质优劣程度的确切数字。 2.理化分析法根据测定原理、操作方法等的不同，梨花分析又可分为物理分析法、化学分析法和仪器分析法三类。 （1）物理分析法通过对被测食品的某些物理性如温度、密度、折射率、旋光度、沸点、透明度的的测定，可间接求出食品中某种成分的含量，进而判断被检食品的纯度和品质。物理分析法简便、实用，在实际工作中应用广泛。
霍乱弧菌检测的快速方法 霍乱是由霍乱弧菌引起的烈性肠道传染病, 发病急、来势凶猛、传播快是该病的特点, 因而及早培养鉴定出霍乱弧菌对控制该病的流行和治疗有极其重要的意义。本文作者在1995年9 月～ 2000 年9 月期间, 对我科1 256 例急性腹泻患者粪便和呕吐物培养霍乱弧菌的方法进行改进, 大大缩短了阳性结果的报出时间, 现总结如下。 1 材料与方法 1.1材料 1.1.1 标本来源1995 年9 月～ 2000 年9 月本院门诊及住院急性腹泻患者新鲜粪便样本1 042 份, 呕吐物214 份。 1.1.2 试剂所用培养基均购自杭州天和微生物制品厂, 霍乱弧菌单克隆抗体购自卫生部兰州生物制品研究所。 1.2 方法 用灭菌毛细吸管吸取1m l 患者米汤样粪便或直接将采便管棉拭子接种于10m l 1% 硷性蛋白胨水中, 置37℃培养箱作增菌培养。快速方法为增菌2 小时后取表面生长物或菌膜转种普通琼脂平板, 6 小时后即可挑取可疑菌落进行鉴定。另一方法为按常规方法增菌6～ 9 小时后转种于庆大霉素琼脂平板,均按《全国临床检验操作规程》进行鉴定。 2 结果 应用快速方法在10 小时内可报出阳性结果, 常规方法则20 小时报出阳性结果。1 256 份标本中, 共检出15 例霍乱弧菌,均为小川型, 两种方法的阳性率均为1119% (15?1 256) , 符合率100%。 3 讨论 霍乱是我国法定的甲类传染病, 国家要求在接诊24 小时内报出检验结果。本文在急性腹泻患者粪便霍乱弧菌培养方面采用缩短增菌时间和转种普通琼脂平板的方法, 从传统的增菌6～ 9 小时再转种选择性培养基改为增菌2 小时后开始转种普通琼脂平板, 能使阳性结果在10 小时内发出报告, 比常规方法快10 小时, 对霍乱的诊断治疗均有重要的意义。 增菌2 小时即可转种是由于: (1) 霍乱患者急性期粪便和呕吐物中含有大量的堆乱弧菌, 增菌 2 小时后霍乱弧菌已被增殖数十倍, 此菌数已足以转种。(2)
表2 本书的内容是讲纸的质量与检测，纸的品种太多，各项质量指标也多，不可能一概而全，面面俱到。要讲清楚，必须从不同的纸及它的用途谈起。离开了用途而泛谈纸的质量（或性能） ，等于对空开炮，无的放矢。因此对于各种功能用纸，质量重点是看是否满足使用或消费者的要求。控制重点质量指标，以降低某些性能来换取增强另一些性能，最终即节省到产品的质量与成本和使质量指标更加符合使用者的需要。 印刷用纸的质量影响因素和检测 随着国民经济迅速发展 # 1、印前原料检测设备 国内常用印刷用纸有:铜版纸、胶版纸、商标纸、牛皮纸、瓦楞纸、纸袋纸、玻璃纸、防潮纸、白卡纸等。伴随着社会经济的发展，人们的物质生活水平提高了，对生活中常用的物品的要求也高了，人们还希望买到一些手感好、质感好的纸张，从而通过印刷品的阅读和浏览，能够得到美的享受，所以纸张的品种和品质必须不断创新和提高。好的印刷材料—印刷用纸的质量保证就不容致疑了。那么纸刷用纸的主要指标有那些呢1、物理性能，如定量、厚度、坚度等；2化学性能，如水份、灰份、施胶度、酸碱性等；3、机械性能，如拉伸强度、裂断长、耐折度、撕裂度、耐破度等；4、光学性能，如白度、不透明度、光泽度等； 5、表面性能，如平滑度、精糙度、表面强度、匀度； 6、其它性能、如耐久性、层间结合性等。在此对它们的含义及方法做解释，详细的测定方法可参考相对应国标： 物理性能 定量：定量是纸最基本的性能指标之一，定量常被视为纸的特性参数，因为大多数纸张都是按质量轻重来销售的，。所谓定量就是“按照规定的试验方法测定的纸与纸板单位面积的质量，单位为g/m2。” 定量的测定方法是：把10张切好的100CM2，经过恒温恒湿处理后，使用分析天平称重，把称得的质量再乘以10，即得出每平方米的克重。定量测定的准确与否，直接影响如裂断长、紧度、拉伸指数等项目的测定，不可小视。定量测定的准确度，与被测试样的面积精度和称重装置的准确度有关，试验方法标准对切样器具和称重仪器严格的要求。关键点在定量取样器的取样精度上，因为瓦楞原纸的纤维比较粗，建议先用冲压式的圆形定量取样器。 推荐使用仪器型号为：QD3018纸张定量取样器。 主要技术参数 % 取样面积：100cm2。 取样面积误差：±0.35cm2。
霍乱弧菌检验程序 一、检查对象 一天内腹泻三次或三次以上的病人。 二、标本采集及处理 1、采集时间：在未服用抗生素前采样。 2、采集方式：用棉拭子或采便管从肛门插入直肠3—5厘 米取样，必须看到有粪便黏附才可：对于自然排出的水样便、呕吐物及保存液保存的标本可直接接种分离或吸取 0.5ML、成形大便取黄豆左右大小。 3、标本送检：标本采集后应立即送检。若不能立即送检， 可保存于碱性蛋白胨水中尽快送检验。24小时以上才能送检的标本，应使用文一腊二氏保存液保存。 4、标本处理：将标本直接分离接种于4号琼脂及放入 8—10ML碱性蛋白胨水中增菌。 “两管三板”： 送检标本马上接种一个4号琼脂平板、同时碱性蛋白胨水培养管增菌；—8小时后接种增菌管内标本于第二块4号琼脂平板，同时转种第二管碱性蛋白胨水；6—8小时后继续接种第二管碱性蛋白胨水的标本于第三块4号琼脂平板上。
三、检验程序： 1、弧菌形态： 弧菌生长快、菌落大、培养4—5小时，原划线处有菌苔生长，8—10小时可长出小菌落，16小时菌落直径可达2毫米。菌落略带灰色、半透明、扁平、稍隆起、光滑湿润，培养时间延长或室温放置后，菌落略带黄色，中心厚而周围透明，培养基含亚碲酸钾使得菌落成灰色，中心形成黑色金属碲沉淀。在平皿上挑取典型菌落做玻片凝集试验。 2、玻片凝集试验： 首先要注意抗原抗体比例和保证抗原（菌株）的纯洁性，使用O1群和O139群两种诊断血清。如未获单个菌落，可挑取可疑菌苔边缘透明部分做玻片凝集。注意，凝集的菌落应以生理盐水作对照，检查有无自然凝集；然后用此玻片显微镜下看动力（动力活泼如流星样）；再将此玻片革兰氏染色看弧菌形态。 3、弧菌分型： 稻叶型和小川型诊断血清做玻片凝集试验进一步分型。四、报疫程序： 一旦发现阳性可疑标本立即用铁罐保存，通知送检科室，确认病人资料；上报医院总值班2460或2560，派车送海珠区防疫站确证。 五、标本处理：
副溶血性弧菌是临床检验技师考试辅导复习需要了解的知识，整理了相关内容与考生分享，希望给予大家帮助！ 副溶血性弧菌是一种嗜盐性弧菌。常存在于近海岸海水、海产品及盐渍食品中。它是我国沿海地区最常见的食物中毒病原菌。 1.生物学特性 （1）形态染色：革兰阴性菌，随培养基不同菌体形态差异较大，有卵圆形、棒状、球杆状、梨状、弧形等多种形态。两极浓染。菌体一端有单鞭毛，运动活泼。无芽胞、无荚膜。 （2）培养特性：需氧，营养要求不高，在普通培养基中加入适量NaCl即能生长。NaCl 最适浓度为35g／L，在无盐培养基中不生长。本菌不耐热，不耐冷，不耐酸，对常用消毒剂抵抗力弱。生长所需pH为7.0～9.5，最适pH为7.7医^学教育.网搜集整理. 在液体培养基表面形成菌膜。 在35g／L NaCl琼脂平板上呈蔓延生长，菌落边缘不整齐，凸起、光滑湿润，不透明； 在副溶血性弧菌专用选择培养基上形成1～2.5mm，稍隆起、混浊、无粘性、绿色菌落； 在SS平板上不生长或长出1～2mm扁平无色半透明的菌落，不易挑起，挑起时呈粘丝状。 在羊血琼脂平板上，形成2～3mm、圆形、隆起、湿润、灰白色菌落，某些菌株可形成β溶血或α溶血。 在TCBS琼脂上不发酵蔗糖，菌落绿色。（与霍乱弧菌相区别） （3）生化反应：本菌在30g／L NaCl和70g／L NaCl培养基中生长，在无盐或100g ／L NaCl培养基中不生长。神奈川试验是致病菌株能使人或兔红细胞发生溶血，对马红细胞不溶血，称神奈川试验阳性。 2.微生物学检验 1）标本采集：主要是患者的粪便、可疑食物、炊事用具的洗涤液等。 2）检验方法及鉴定：①增菌培养：取标本0.5～1ml接种40g／L NaCl蛋白胨水中，37℃培养，若有本菌存在，一般数小时即出现明显混浊，即可分离培养；②分离培养：将标本或增菌培养物接种副溶血弧菌选择培养基35℃培养18～24h观察结果。菌落湿润、混浊无粘性，呈绿色；③鉴定：根据其形态、染色、多形性、活泼动力等特点，以及在选择培养基上的菌落特征，结合氧化酶试验阳性，在KIA上K/A，H2S（-）。在MIU上“++-”。以及嗜盐试验和血清学分型可作初步鉴定。 最后鉴定，必要时作进一步生化试验及毒力试验。 3.临床意义：
常见的塑料检测标准和方法 检测产品/类别检测项目/参数 检测标准(方法)名称及编号(含年号)序 号 名称 塑料1 光源暴露试验方 法通则 塑料实验室光源暴露试验方法第1部分:通则ISO 4892-1:1999 2 氙弧灯光老化 汽车外饰材料的氙弧灯加速暴露试验SAE J2527:2004 汽车内饰材料的氙弧灯加速暴露试验SAE J2412:2004 塑料实验室光源暴露试验方法第2部分:氙弧灯ISO 4892-2:2006 /Amd 1:2009 室内用塑料氙弧光暴露试验方法ASTM D4459-06 非金属材料氙弧灯老化的仪器操作方法ASTM G155-05a 塑料暴露试验用有水或无水氙弧型曝光装置的操作ASTM D2565-99(2008) 3 荧光紫外灯老化 塑料实验室光源暴露试验方法第3部分:荧光紫外灯ISO 4892-3:2006 汽车外饰材料UV快速老化测试SAE J2020:2003 塑料紫外光暴露试验方法ASTM D4329-05 非金属材料UV老化的仪器操作方法ASTM G154-06 4 碳弧灯老化 塑料实验室光源暴露试验方法第4部分:开放式碳弧灯 ISO 4892-4:2004/ CORR 1:2005 塑料实验室光源曝露试验方法第4部分:开放式碳弧灯 GB/T16422.4-1996 5 荧光紫外灯老化 机械工业产品用塑料、涂料、橡胶材料人工气候老化试验方法荧 光紫外灯GB/T14522-2008 6 热老化 无负荷塑料制品的热老化 ASTM D3045-92(2010) 塑料热老化试验方法GB/T7141-2008 7 湿热老化 塑料暴露于湿热、水溅和盐雾效应的测定ISO4611:2008 塑料暴露于湿热、水喷雾和盐雾中影响的测定GB/T12000-2003 塑料8 拉伸性能塑料拉伸性能的测定第1部分:总则GB/T1040.1-2006
文章编号:1006-3110(2000)06-0474-01 介绍一种霍乱弧菌检测的快速方法 李伟贤 李成欢 罗君 (广东省粤北人民医院,512026)中图分类号:R516.5 文献标识码:A 霍乱是由霍乱弧菌引起的烈性肠道传染病,发病急、来势凶猛、传播快是该病的特点,因而及早培养鉴定出霍乱弧菌对控制该病的流行和治疗有极其重要的意义。本文作者在1995年9月～2000年9月期间,对我科1256例急性腹泻患者粪便和呕吐物培养霍乱弧菌的方法进行改进,大大缩短了阳性结果的报出时间,现总结如下。 1 材料与方法 111 材料 11111 标本来源 1995年9月～2000年9月本院门诊及住院急性腹泻患者新鲜粪便样本1042份,呕吐物214份。 11112 试剂 所用培养基均购自杭州天和微生物制品厂,霍乱弧菌单克隆抗体购自卫生部兰州生物制品研究所。 112 方法 用灭菌毛细吸管吸取1m l患者米汤样粪便或直接将采便管棉拭子接种于10m l1%硷性蛋白胨水中,置37℃培养箱作增菌培养。快速方法为增菌2小时后取表面生长物或菌膜转种普通琼脂平板,6小时后即可挑取可疑菌落进行鉴定。另一方法为按常规方法增菌6～9小时后转种于庆大霉素琼脂平板,均按《全国临床检验操作规程》进行鉴定[1]。 2 结果 应用快速方法在10小时内可报出阳性结果,常规方法则20小时报出阳性结果。1256份标本中,共检出15例霍乱弧菌,均为小川型,两种方法的阳性率均为1119%(15 1256),符合率100%。 3 讨论 霍乱是我国法定的甲类传染病,国家要求在接诊24小时内报出检验结果。本文在急性腹泻患者粪便霍乱弧菌培养方面采用缩短增菌时间和转种普通琼脂平板的方法,从传统的增菌6～9小时再转种选择性培养基改为增菌2小时后开始转种普通琼脂平板,能使阳性结果在10小时内发出报告,比常规方法快10小时,对霍乱的诊断治疗均有重要的意义。 增菌2小时即可转种是由于:(1)霍乱患者急性期粪便和呕吐物中含有大量的堆乱弧菌,增菌2小时后霍乱弧菌已被增殖数十倍,此菌数已足以转种。(2)霍乱弧菌生长的最适PH为712～714,但它有耐硷性,在PH818～910的硷性蛋白胨水中生长良好[2],而大多数细菌在此环境中生长受到抑制,早期转种,即使用普通琼脂平板也能获得较纯的菌株。(3)随着霍乱弧菌的生长,细菌的代谢产物使增菌液的PH下降,此时其它细菌亦开始生长。增菌时间越长,杂菌的数目也越多,给下阶段的分离培养带来困难,甚至造成潜漏检的可能。 霍乱弧菌对营养要求不高,在普通琼脂平板上生长良好,且生长速度快。从实验可知,该菌在普通琼脂平板上长征4小时后,开始长出无色透明水样的菌苔,6小时后可出现单菌落,而在选择性培养基上生长速度较慢,37℃培养10小时,菌落才达到1MM左右。 本文介绍在急性腹泻患者粪便和呕吐物培养霍乱弧菌的方法中采用缩短增菌时间和先转种普通琼脂平板来缩短培养时间,阳性标本用此法处理全部获得成功,同时保留传统的培养方法,在方法学上既可加快阳性结果的报出时间,又保留传统的培养方法防止漏诊。 参考文献 [1]叶应妩,王毓三,主编.全国临床检验操作规程.南京:东南大学出 版社,1997,514～517. [2]刘恭植,主编.微生物学和微生物学检验.北京:人民卫生出版社, 1987,198. (收稿日期:2000-10-18) 3 小结 食品中的亚硝酸盐含量过多,可使大量血红蛋白变成高铁血红蛋白,使其失去输氧能力,导致机体严重缺氧。本文将系数补偿和双波长技术融为一体,运用于香肠、火腿肠等样品的测定,取得了满意的结果。 参考文献 [1]张有贤,冯彦琳,张生万,等.导数一三波长光度法同时测定肉制 品中亚硝酸盐和硝酸盐的研究.分析化学,1990,18(11):1011～ 1012. [2]高甲友,盛永章.催化荧光法测定痕量亚硝酸盐和硝酸盐.理化检 验—化学分册,1994,30(1):31～32. [3]刘劭钢,贾平静,刘开学,等.卡尔曼滤波紫外分光光度法同时测 定硝酸根和亚硝酸根.中国公共卫生学报,1997,16(1):53. [4]中华人民共和国卫生部.食品卫生检验方法理化部分.北京:中国 标准出版社,1997,156. [5]李友芬,柳立新.5-B r-PADA P双波长系数补偿吸光光度法测 定钯铑.理化检验-化学分册,1995,31(91) :34～35. (收稿日期:2000-06-06) 474实用预防医学2000年12月 第7卷 第6期 P ractical P reventive M edicine,D ec.2000,V ol7,N o.6
霍乱弧菌检验标准操作规范 1. 概述 霍乱弧菌可分为古典生物型和El - Tor生物型；根据菌体抗原（即O抗原）又可分为155个血清群，其中O1血清群和O139血清群能引起霍乱的发病和流行，是霍乱的病原菌。 2. 标本类型 粪便标本。 3. 鉴定 3.1 形态与染色：革兰阴性，菌体弯曲呈弧形或逗点状。 3.2 培养特性：在TCBS琼脂平板上呈黄色的菌落。在双氢链霉素洗衣粉琼脂平板上形成 中心晕灰褐色的菌落。 3.3 生化反应：氧化酶试验阳性；发酵葡萄糖、蔗糖、甘露醇，不发酵乳糖和L-阿拉伯糖；动力、赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶、霍乱红、硝酸盐还原和黏丝试验均阳性；精氨酸双水解酶试验阴性。 3.4 鉴别要点 3.4.1 本菌特征：革兰阴性弧菌或杆菌，动力试验阳性，()1群霍乱弧菌诊断血清凝集试验 阳性。 3.4.2 与气单胞芮属、邻单胞菌属的鉴别见表9 - 29。 3.4.3 确诊O1群霍乱弧菌必须具备的条件：涂片为革兰阴性弧菌或杆菌；TCBS等选择培 养基上典型的菌落特征；动力试验阳性，符合生化特性；()1群霍乱弧菌诊断血清凝集试验阳性。 3.5 操作步骡 3.5.1 在碱性蛋白胨水(pH 8.6)中，37℃培养6～8 h后转种于TCBS平板。 3.5.2 玻片凝集试验：从TCBS琼脂平板或双氢链霉素洗衣粉琼脂平板上挑取可疑菌落，与 霍乱多价诊断血清做玻片凝集试验，以生理盐水为阴性对照，诊断血清凝集、生理盐水不凝者为阳性。做初步鉴定试验后，将此高度怀疑菌送疾病预防控制中心(CDC)做最后鉴定。 4.药敏 参见《抗菌药物敏感试验标准操作规程》及CLSI MlOO - S24最新版本文件。 5．质量控制 见《质量管理》。 6.结果解释 初次分离时，采用pH为8.6的碱性蛋白胨水增菌6--8 h，液体呈均匀混浊，表面形成菌膜。
全国霍乱监测方案（试行） 一、概述 霍乱是由霍乱弧菌引起的一种急性肠道传染病，以发病急、传播快、波及范围广为特征，是《国际卫生条例》规定的国际检疫传染病之一，也是《中华人民共和国传染病防治法》规定的甲类传染病之一。《国内交通卫生检疫条例》也将其列为检疫传染病。 我国从1961年第七次霍乱世界大流行开始便受到波及，除西藏无病例报告外，其余各省（市、区）均有疫情发生。1993年开始，我国部分地区也相继发生O139霍乱的局部暴发与流行。随后出现了多菌群（型）混合流行的局面。 霍乱弧菌经水和食物传播，流行规律目前尚不十分明确，引起霍乱流行的自然因素和社会因素依然存在。沿海水域、河口和内陆河流、湖泊等自然水体是霍乱弧菌的自然生境，在自然水体中霍乱弧菌依附浮游生物生存，监测研究发现霍乱的暴发流行与气候和水温、浮游生物的繁殖有高度的关联。在我国这些水域同时也分布着海水、淡水产品（本方案统称为水产品）养殖基地。霍乱病人粪便常污染人群生活邻近水体。这些水体中以及水产品携带的产毒霍乱弧菌在人群霍乱的发生和传播中发挥作用。为进一步加强我国霍乱监测工作，及时发现新病例、识别暴发、确定传染源，同时进一步了解霍乱弧菌在外环境中的生存变化以及环境水体和食品污染与流行的关系，掌握霍乱的流行规律，为制定防治策略和措施提供科学依据，特制订本方案。 二、监测目的 1、及时发现霍乱病例，掌握疫情动态，早期识别暴发疫情，分析流行因素； 2、掌握我国霍乱菌株的型别、分布、毒力、耐药性变化情况，监测菌型变迁与
流行的关联性； 3、了解霍乱弧菌在我国水体中存在和动态变化情况、以及与沿海和内陆霍乱流行的关系。 三、监测定义 1、腹泻病例 指每日排便三次或以上,且具有大便性状异常的病例。 2、疑似病例 具有下列三项之一者： （1）凡有典型临床症状，如剧烈腹泻，水样便(黄水样、清水样、米泔样或血水样)，伴有呕吐，迅速出现脱水或严重脱水，循环衰竭及肌肉痉挛(特别是腓肠肌)的病例。 （2）霍乱流行期间，与霍乱病人或带菌者有密切接触史，并发生泻吐症状者。 （3）出现无痛性腹泻或伴有呕吐，且粪便或呕吐物霍乱弧菌快速辅助诊断检测试验阳性的病例。 3、临床诊断病例 具有下列三项之一者均可视为临床诊断病例： （1）疑似病例的日常生活用品或家居环境中检出O1群或/和O139群霍乱弧菌者； （2）疑似病例的粪便、呕吐物或肛拭子标本霍乱弧菌毒素基因PCR检测阳性者； （3）在一起确认的霍乱暴发疫情中，具有直接暴露史且在同一潜伏期内出现无痛性腹泻或伴呕吐症状者。 4、实验室确诊病例 （1）凡有腹泻症状，粪便、呕吐物或肛拭子样品培养O1群或/和O139群霍乱弧
微生物学检验题库及答案
《微生物学与检验》题库及答案 一.名词解释 1.医院感染 2.肥达反应 3.内基小体 4. 噬菌体： 5.血浆凝固酶 6.败血症 7.灭菌 8.药物敏感试验 9.外 - 斐氏试验 10.L 型细菌 11.菌群失调： 12.微生物 13.细菌 14.最小抑菌浓度 15.菌落 16.汹涌发酵 17.无菌操作 18.流感杆菌“卫星现象” 19.培养基 20.包涵体 21.正常菌群 22. 内毒素 23. 干扰现象： 24.菌血症 25菌丝： 二.填空题 1 L 型细菌是指（）。 2 杀灭物体上所有微生物的方法称为（）。 3 细菌 H-O 变异是指（）。 4 药敏试验所用标准培养基是，所用菌液相当于（）个细菌／ ml ，细菌接种采用（）划线接种法。 5 细菌致病因素包括（）、（）和（）。 6 细菌引起的全身感染包括（）、（）、（）和（）四种类型。 7 不染色标本检查主要用于观察细菌的（）。 8 影响革兰染色结果的关键步骤是（）。 9 有动力细菌在半固体培养基中的生长现象是穿刺接种线（），无动力细菌穿刺接种线（）。 10 糖发酵试验用于观察细菌分解糖是否产（）和（）。 11 靛基质试验的原理为，细菌产生的色氨酸酶分解蛋白胨中的色氨酸而生成（），此代谢产物与加入的试剂反应，生成（）。 12 链球菌根据溶血现象分为（）、（）和（）三种类型。 13 葡萄球菌触酶试验结果为（）性，链球菌触酶试验结果为（）性。 14 呈现脐窝状菌落的球菌是（）。 15 抗 O 试验是测定病人血清中（）抗体效价的试验，用于风湿热等疾病的辅助诊断。 16 血平板上呈现草绿色溶血环的病原性球菌是（）和（）。 17 IMViC 试验包括（）、（）、（）和（）四项试验。 18 分解乳糖的细菌在肠道选择平板上呈现（）菌落，不分解乳糖则为（）菌落。 19 KIA 斜面红色表明，底层黄色、有气泡表明（）、（），有黑色沉淀表明（）试验阳性 20 霍乱弧菌生物型包括（）和（）。 21 AIDS 的传染源是（）和（），传播途径主要有（），（）和（）。 22 真菌菌落有（）、（）和（）三种。 23 病毒培养方法有（）、（）和（）。 24 病毒的基本结构由（）和（）组成，有些病毒还具有（）。 25 流感病毒根据抗原结构不同分（）、（）、（）三型，其中容易引起流感大流行的是其中的（）型。
副溶血性弧菌 副溶血性弧菌是什么？ 副溶血性弧菌是我国沿海地区最为常见的食源性病原菌，广泛存在于近岸海水、海底沉积物和鱼贝类等海产品中，主要引起食物中毒。 危害是什么？ 副溶血性弧菌感染最常见的症状是急性胃肠炎，一般恢复较快，少数病人可发展至脱水、休克。 在我国的流行状况 副溶血性弧菌感染常见于沿海地区，随着国民经济的发展，交通运输便利，目前我国内陆省份各大城市也较常见，发病高峰期是夏秋季，主要集中在7－9月。 最常见的污染食品是什么？ 副溶血性弧菌感染引起的食物中毒主要的污染食品是海产品，包括鱼类、软体动物(如生蚝、墨鱼、八爪鱼)和贝壳类动物(如龙虾、虾、蟹)；除了海产品外，其他食物(如烧肉、卤肉和凉拌菜)也可引起副溶血性弧菌感染，这主要是因为交叉污染所致。我国不少地区还发现淡水鱼携带副溶血性弧菌。 最常见发生的地点是哪里？ 副溶血性弧菌引起的食物中毒常发生在沿海地区，特别是旅游景点，高发于接待旅行团团餐的大排档。 典型症状是什么？ 副溶血性弧菌感染平均潜伏期为15小时，最短1小时，最长4天。国内报告9～20小时者占81％，10小时内者占70％。副溶血性弧菌感染的典型症状是急性胃肠炎，如呕吐、腹痛、腹泻等。剧烈腹痛、脐部阵发性绞痛为主要特点，腹泻多呈水样便。病程常为2－3天，恢复较快，少数病人发展至脱水、休克。 是否有易感人群？ 人群普遍易感，男女老幼均可患病，但副溶血性弧菌引起的暴发多以青壮年为主。经常暴露于少量细菌者，感染后临床症状一般较轻，如渔民大多有生食或半生食某些海产品的习惯，暴露机会甚多，但发生食物中毒者并不多，即使发病，症状也较轻。但内陆人员到沿海地区时，饮食稍有不慎，屡见发生病情较重的食物中毒。 1 / 2
霍乱弧菌检测 文章目录*一、霍乱弧菌检测的基本信息1. 定义2. 专科分类3. 检查分类4. 适用性别5. 是否空腹*二、霍乱弧菌检测的正常值和临床意义1. 正常值2. 临床意义*三、霍乱弧菌检测的检查过程及注意事项1. 检查过程2. 注意事项*四、霍乱弧菌检测的相关疾病和症状1. 相关疾病2. 相关症状*五、霍乱弧菌检测的不适宜人群和不良反应1. 不适宜人群2. 不良反应 霍乱弧菌检测的基本信息 1、定义霍乱弧菌检测对霍乱有诊断意义。阳性见于霍乱。霍乱弧菌检查常规方法是:直接涂片、染色检查、动力观察制动试验。阳性结果的临床分析显微镜检查可作为快速诊断的参考。革兰染色镜检可见典型革兰阴性弧菌。悬滴暗视野检查可见穿梭样活泼运动。免疫制动试验阳性,具有重要参考意义。上述结果只能做出初步诊断,最后的确诊仍需以培养结果为准。 2、专科分类传染病检查 3、检查分类病原微生物检查 4、适用性别男女均适用
5、是否空腹非空腹 霍乱弧菌检测的正常值和临床意义 1、正常值未检出霍乱弧菌。 2、临床意义异常结果: 阳性结果的临床分析:显微镜检查可作为快速诊断的参考。革兰染色镜检可见典型革兰阴性弧菌。悬滴暗视野检查可见穿梭样活泼运动。免疫制动试验阳性,具有重 要参考意义。上述结果只能做出初步诊断,最后的确诊仍需以培 养结果为准。 阳性:见于霍乱。 需要检测的人群: 频繁急剧腹泻、呕吐等怀疑为霍乱的病人。 霍乱弧菌检测的检查过程及注意事项 1、检查过程增菌 称取检样25g,加入装有225mL碱性蛋白胨水(APW)的广口瓶内。固体样品应以均质器9000r/min-10000r/min打碎,或以剪刀充分剪碎。(36±1)℃培养6h-8h和16h-24h。如为牡蛎样品,应同样制备另一份检样,置于APW中,42℃培养6h-8h和16h-24h。 分离 以3mm-5mm接种环取6h-8h和16h-24h增菌培养液的表面生长物一环分别划线家终于TCBS琼脂平板至少各一个,于(36±1)℃
实验室生物安全制度 页 码 目录名称 一、实验室内务管理制度??????????????????1 二、工作人员安全防护制度?????????????????3 三、实验室安全防护制度??????????????????5 四、标本采集运输制度???????????????????6 五、菌、毒株保管制度???????????????????8 六、尖锐器具安全使用制度?????????????????9 七、废弃物处理制度????????????????????10 八、安全应急处理制度???????????????????11 九、实验室准入制度????????????????????14 十、检验科医院感染管理制度??????????????? (18) 十一、检验科危险化学品安全管理办法,,,,,,,,,,,,,,19
实验室内务管理制度 1.目的 根据卫生部《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》，为加强科室实验室管理，确保检验质量，防止实验室污染，制定本规定。 2.适用范围 本科实验室按照二级生物安全防护实验室标准管理；本规定使用于本科所有实验室。 3.具体内容 3.1本科实验室是进行临床检验和教学科研实验的场所，不作它用。 3.2实验室的工作人员必须是受过专业教育的技术人员。在独立进行工作前还需在中高级实验技术人员指导下进行上岗培训，达到合格标准，方可开始工作。 3.3实验室工作人员、外来合作者、进修和学习人员在进入实验室及其岗位之前必须经过实验室主任的批准。 3.4非本室人员到实验室做实验，须经实验室主任批准，并办理有关手续。 3.5非实验有关人员和物品不得进入实验室；在实验室内不得进行与实验无关的活动。 3.6实验室的工作人员必须被告知实验室工作的潜在危险并接受实验室安全教育，自愿从事实验室工作； 3.7进入实验室时，应穿着工作服或罩衫等防护服。当知道防护服已被危险材料污染应立即更换。离开实验室区域之前应脱去防护服。 3.8禁止在工作区内使用化妆品和处理隐形眼镜。长发应束在脑后。在工作区内不应配带戒指、耳环、腕表、手镯、项链和其它佩饰物品。 3.9实验室内严禁吸烟、吃饭、饮水等。以上活动应在检验科专用休息室内进行。 3.10工作中工作人员必须戴手套，以防生物危险、化学品污染，冷和热，标本污染，刺伤、擦伤等。在工作完成或中止后应摘掉并放入垃圾袋中，教医院污物处理中心处理。摘除手套后、使用卫生间前后、离开实验室前、进食或吸烟前、接触每一患者前
实验室生物安全制度 目录名称页码 一、实验室内务管理制度 (1) 二、工作人员安全防护制度 (3) 三、实验室安全防护制度 (5) 四、标本采集运输制度 (6) 五、菌、毒株保管制度 (8) 六、尖锐器具安全使用制度 (9) 七、废弃物处理制度 (10) 八、安全应急处理制度 (11) < 九、实验室准入制度 (14) 十、检验科医院感染管理制度............................................. (18) 十一、检验科危险化学品安全管理办法 (19) ！
实验室内务管理制度 1.目的 根据卫生部《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》，为加强科室实验室管理，确保检验质量，防止实验室污染，制定本规定。 2.适用范围 本科实验室按照二级生物安全防护实验室标准管理；本规定使用于本科所有实验室。 3.具体内容 ； 本科实验室是进行临床检验和教学科研实验的场所，不作它用。 实验室的工作人员必须是受过专业教育的技术人员。在独立进行工作前还需在中高级实验技术人员指导下进行上岗培训，达到合格标准，方可开始工作。 实验室工作人员、外来合作者、进修和学习人员在进入实验室及其岗位之前必须经过实验室主任的批准。 非本室人员到实验室做实验，须经实验室主任批准，并办理有关手续。 非实验有关人员和物品不得进入实验室；在实验室内不得进行与实验无关的活动。实验室的工作人员必须被告知实验室工作的潜在危险并接受实验室安全教育，自愿从事实验室工作； 进入实验室时，应穿着工作服或罩衫等防护服。当知道防护服已被危险材料污染应立即更换。离开实验室区域之前应脱去防护服。 禁止在工作区内使用化妆品和处理隐形眼镜。长发应束在脑后。在工作区内不应配带戒指、耳环、腕表、手镯、项链和其它佩饰物品。 实验室内严禁吸烟、吃饭、饮水等。以上活动应在检验科专用休息室内进行。 工作中工作人员必须戴手套，以防生物危险、化学品污染，冷和热，标本污染，刺伤、擦伤等。在工作完成或中止后应摘掉并放入垃圾袋中，教医院污物处理中心处理。摘
本标准规定了食品中副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus）的检验方法。 本标准适用于食品中副溶血性弧菌的检验。 2设备和材料设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： 2.1恒温培养箱：36 ℃±1 ℃。 2.2冰箱：2 ℃～5 ℃、7 ℃～10 ℃。 2.3恒温水浴箱：36 ℃±1 ℃。 2.4均质器或无菌乳钵。 2.5天平：感量0.1 g。 2.6无菌试管：18 mm×180 mm、15 mm×100 mm。 2.7无菌吸管：1 mL（具0.01 mL刻度）、10 mL（具0.1 mL刻度）或微量移液器及吸头。 2.8无菌锥形瓶：容量250 mL、500 mL、1000 mL。 2.9无菌培养皿：直径90 mm。 2.10全自动微生物生化鉴定系统。 2.11无菌手术剪、镊子。 3培养基和试剂 3.13％氯化钠碱性蛋白胨水：见附录A中A.1。 3.2硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖（TCBS）琼脂：见附录A中A.2。 3.33％氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂：见附录A中A.3。 3.43％氯化钠三糖铁琼脂：见附录A中A.4。 3.5嗜盐性试验培养基：见附录A中A.5。 3.63％氯化钠甘露醇试验培养基：见附录A中A.6。 3.73％氯化钠赖氨酸脱羧酶试验培养基：见附录A中A.7。 3.83％氯化钠MR-VP培养基：见附录A中A.8。 3.93％氯化钠溶液：见附录A中A.9。 3.10我妻氏血琼脂：见附录A中A.10。 3.11氧化酶试剂：见附录A中A.11。 3.12革兰氏染色液：见附录A中A.12。 3.13ONPG试剂：见附录A中A.13。 3.14Voges-Proskauer（V-P）试剂：见附录A中A.14。 3.15弧菌显色培养基。 3.16生化鉴定试剂盒。 4检验程序 副溶血性弧菌检验程序见图1。
霍乱弧菌的检测 霍乱弧菌相关知识： 稻叶型（A、C） 古典型小川型（A、B、C少量） O1群霍乱弧菌：彦岛型（A、B、C） 稻叶型（A、C） 艾尔托型小川型（A、B、C少量） 彦岛型（A、B、C） 实验室准备： 1.培养基：碱性蛋白胨水、TCBS、4号或庆大霉素琼脂、营养平板、半固体菌种保存管。 2.试剂：拉丝实验用试剂（0.5%去氧胆酸钠水溶液）、氧化酶试剂（1%盐酸对氨基二甲基苯胺或盐酸对氨基四甲基苯胺水溶液。 3.诊断血清：O1群霍乱诊断血清、稻叶型霍乱血清、小川型霍乱血清、O139群霍乱血清。 4.快诊试剂：O1群霍乱胶体金标记快诊卡、O139群霍乱胶体金标记快诊卡。霍乱弧菌检验流程图： 标本 37度6-8小时TCBS、4号或庆大霉素琼脂 小时 胶体金快诊卡/ 制动等试验血清学凝集试验氧化酶实验拉丝实验O/129敏感试验 初步报告、菌种保存
一、采样 （一）水样便采取1-2毫升，成形便采取指甲大小的粪量。病人呕吐物、沾染粪便的衣物、尸体的肠腔和口腔内容物亦可做为检材； （二）外坏境样本可采取病人的污染衣物、剩饭菜、可疑食品、抹布、污水、坑塘水、井水、公厕粪便、苍蝇等； （三）按1：10比例置入碱性蛋白胨水增菌液中，迅速送往实验室。 二、增菌、培养 （一）所有粪便标本都应经过增菌，尤其是恢复期病人、带菌者或用过抗菌药物的病人标本含菌量少，单靠直接分离不易检出。需经碱胨水37度增菌6-8小时后分离(夏日可将运送时间计算在内)； （二）标本含菌量少时，为提高检出率可实行2次增菌，取第一次碱胨水增菌后的培养物表层液0.1-0.2毫升，接种于8-10毫升的碱胨水中，37度培养6-8小时后再做分离。 （三）霍乱弧菌好氧，易形成菌膜，故在取出增菌管时动作要轻，接种环于菌膜下取一满环，划线接种于TCBS或4号琼脂平板37℃10~14h孵育培养。 三、快速诊断 （一）、直接镜检：为争取最快速度作出诊断，采取病人“米泔水样”大便或呕吐物，悬滴法镜检（最好用暗视野），可见具有流星状动力的细菌。 （二）、早期玻片凝集试验：埃尔托弧菌在TCBS、4号琼脂及庆大霉素平皿上生长较快，37度培养8-10小时，在其他杂菌尚未生长或长出很小菌落情况下，埃尔托型菌落直径可达1-2mm。将已长出较大半透明菌落或湿润菌苔的平皿取出，直接用霍乱多价血清做玻片凝集，阳性者可初步报告。琼脂平皿继续培养，按常规培养时间再做一次复查。 （三）、要求及注意事项： 1．当霍乱弧菌在4号琼脂及庆大霉素培养基上生长过久（超过36小时）时，会出现菌落粘稠、血清凝集假阴性现象。 2．故应取新鲜培养物（10-14小时）作凝集试验，凝集的菌落立即转种营养琼脂平板。 3．小川型菌株有时在稻叶型单价血清中可出现弱凝集，这并非彦岛型，而是小川型含有少量C抗原成分的缘故。 4．有的标本可能同时存在非O1群霍乱弧菌，可疑菌落较多时，应挑选5个以上的菌落逐个进行玻片凝集检查； 5．必要时，取原划线菌苔边缘透明部分再做玻片凝集（对一次流行的首批病人进行检验时尤应注意）。 6．平皿分离未获分散的单个菌落，而在密集部位仍有可疑菌落时，应将该部分再做分离或经增菌后再做分离； 7．从恢复期病人分离出菌落典型但不凝集的弧菌，这时应以霍乱粗糙型血清做玻片凝集，以确定是否为粗糙型或NAG弧菌。 四、初步鉴定试验： 1．氧化酶实验：在非选择性或非鉴别性培养基如营养琼脂的新鲜培养物上滴加氧化酶试剂1滴，并使其流开。或将菌落用竹签或牙签挑至滴有试剂的滤纸上，在1分钟内出现粉红-紫红-紫蓝色（有的最后呈黑紫色）。为氧化酶阳性。 肠杆菌科细菌多不变色或变成粉红色后很快退色为氧化酶阴性。 注意事项：试验时避开含铁物质（如接种环）。不能直接取产酸培养基上的菌落，
《微生物学与检验》题库及答案 一、名词解释 1、医院感染 2、肥达反应 3、内基小体 4、噬菌体: 5、血浆凝固酶 6、败血症 7、灭菌 8、药物敏感试验 9、外 - 斐氏试验 10、L 型细菌 11、菌群失调: 12、微生物 13、细菌 14、最小抑菌浓度 15、菌落 16、汹涌发酵 17、无菌操作 18、流感杆菌“卫星现象” 19、培养基 20、包涵体 21、正常菌群 22、内毒素 23、干扰现象: 24、菌血症 25菌丝: 二、填空题 1 L 型细菌就是指() 。 2 杀灭物体上所有微生物的方法称为 ()。 3 细菌 H-O 变异就是指() 。 4 药敏试验所用标准培养基就是 ,所用菌液相当于 ()个细菌／ ml ,细菌接种采用 ()划线接种法。 5 细菌致病因素包括() 、() 与() 。 6 细菌引起的全身感染包括() 、() 、() 与() 四种类型。 7 不染色标本检查主要用于观察细菌的 ()。 8 影响革兰染色结果的关键步骤就是() 。 9 有动力细菌在半固体培养基中的生长现象就是穿刺接种线() ,无动力细菌穿刺接种线() 。 10 糖发酵试验用于观察细菌分解糖就是否产() 与 () 。 11 靛基质试验的原理为,细菌产生的色氨酸酶分解蛋白胨中的色氨酸而生成 (),此代谢产物与加入的试剂反应,生成() 。 12 链球菌根据溶血现象分为() 、 ()与() 三种类型。 13 葡萄球菌触酶试验结果为() 性,链球菌触酶试验结果为 ()性。 14 呈现脐窝状菌落的球菌就是() 。 15 抗 O 试验就是测定病人血清中() 抗体效价的试验,用于风湿热等疾病的辅助诊断。 16 血平板上呈现草绿色溶血环的病原性球菌就是() 与() 。 17 IMViC 试验包括() 、() 、() 与() 四项试验。 18 分解乳糖的细菌在肠道选择平板上呈现() 菌落,不分解乳糖则为() 菌落。 19 KIA 斜面红色表明 ,底层黄色、有气泡表明() 、() ,有黑色沉淀表明 ()试验阳性 20 霍乱弧菌生物型包括 ()与 ()。 21 AIDS 的传染源就是 ()与() ,传播途径主要有 (),()与 ()。 22 真菌菌落有() 、() 与() 三种。 23 病毒培养方法有() 、() 与() 。 24 病毒的基本结构由() 与() 组成,有些病毒还具有() 。 25 流感病毒根据抗原结构不同分() 、() 、() 三型,其中容易引起流感大流行的就是其中的() 型。