B-raf基因突变检测试剂盒(荧光PCR-毛细管电泳法)
标准化操作流程
1、预期用途
该产品用于定性检测确诊的结直肠癌患者石蜡包埋病理组织切片DNA的B-rafV600E 基因突变。B-raf 基因是一种癌基因，编码一种丝/ 苏氨酸特异性激酶，是RAS/RAF/MEK/ERK/MAPK 通路重要的转导因子，参与调控细胞内多种生物学事件，如细胞生长、分化和凋亡等。B-raf 基因位于7p34，长约190kb，转录mRNA 长2.5kb，编码783 氨基酸的蛋白，相对分子质量为94000-95000 Da。
研究表明，在多种人类恶性肿瘤中，如恶性黑色素瘤、结直肠癌、肺癌、甲状腺癌、肝癌及胰腺癌等均存在不同比例的B-raf 突变，B-raf 突变主要发生在Exon15 上的激活区的第1799 氨基酸上(T 突变为A)，导致编码的氨基酸由谷氨酸变成缬氨酸(V600E)，该突变能使B-raf 激酶活性提高，V600E 突变能模拟T598 和S601 两个位点磷酸化作用，使BRAF 蛋白激活。近来研究表明，对于野生型Kras、但存在B-raf 基因V600E 突变患者，抗EGFR 单抗治疗无效。2010 年版《NCCN 结直肠癌临床实践指南》中已明确指出“如K-ras 基因无突变时，需检测B-raf 基因突变，如果后者存在V600E突变，则不应该给予抗EGFR 单抗治疗。”
2、仪器配置要求
移液器，振荡器，微型离心机，生物安全柜，高速冷冻离心机，定性PCR仪，荧光定量PCR仪（ABI7500，LightCycler? 480，MX3000P，CFX-96等），微量紫外分光光度计，基因分析仪（ABI3130，ABI3500DX）。
3、耗材要求
无菌带滤芯吸头、吸水纸，离心管（1.5ml，0.5ml，0.2ml）、PCR反应管（配套荧光定量PCR仪型号）及无粉一次性乳胶手套，基因分析板。
4、责任人
基因扩增实验室室长负责技术指导和质量监督。
5、执行人
操作人员应经过专业培训，具有合格的操作技能的检验专业技术人员。
6、检测原理
本产品选取人类基因组B-raf 基因Exon 15 上设计特异性引物和探针，对扩增后的PCR 产物片段进行测序分析。使用尿苷酶(UNG)防污染体系，经加热可以选择性地降解U-DNA，以防止先前PCR 扩增产物的污染。
7、试剂来源
北京鑫诺美迪基因检测技术有限公司
8、样本要求
8.1用量：每例标本切5张(10μm)白片，连续切片，不漂洗脱蜡，直接封存于1.5ml EP管中；
8.2质量：为确保DNA提取成功率，必须选择2年以内的石蜡标本；
8.3标本收集方法：石蜡包埋病理切片样品应确定含有肿瘤病变细胞，为了保证切片组织中
含有足够比例的肿瘤细胞，需要加同一组织HE染色片子一张（在显微镜下肿瘤细胞比例＞70%）。
9、标准操作程序
9.1试剂准备（在试剂准备区完成）
9.1.1配置说明：检测反应设置阴性质控品和阳性质控品。
9.1.2配置过程
提前30分钟将试剂取出，室温融化，涡旋振荡10秒，2000 rpm离心15秒待用。
确定反应数N，N=待检样本数(n)+质控品数(2)+1。计算加到反应混合物中的各个试剂的量，计算如下（表2）：
试剂B-raf PCR 反应液C B-raf 引物探针混合液纯化水
用量(μl)12.5×N 4.5×N 6×N
取1个灭菌离心管配置上述反应体系，试剂全部加入后涡旋振荡10秒，2000 rpm离心15秒。
然后将上述混合液23 μL/管分装至PCR反应管中(无菌和RNase-Free)。配完试剂后，充分混合均匀，瞬时离心15sec，放入传递窗。
9.2标本制备（标本制备去完成）
9.2.1在缓冲间内更换隔离衣，戴上帽子、口罩、手套，将传递窗的试剂取出放入标本制
备区的冰箱冷藏，备用。
9.2.2从样本盒中取出待检石蜡组织样本，添加1ml二甲苯于样品中，剧烈涡旋10sec。12000rpm离心2min，吸除上清，小心不要吸到沉淀。
9.2.3加入1ml无水乙醇于沉淀中，涡旋混匀。12000rpm离心2min，吸除上清，小心不要吸到沉淀。
9.2.4打开管盖，室温（15℃-25℃）或者37℃放置10min直至残余的乙醇挥发完全。
注意：完全去除残余的乙醇很重要，任何残余的乙醇均会对DNA产生影响。
9.2.5重悬沉淀于180ul缓冲液GA中，加入20ul蛋白酶K，彻底涡旋均匀。56℃水浴1小时（水浴到样本完全裂解为止），再转移到90℃孵育1小时。
9.2.6向离心管中添加200ul缓冲液GB，涡旋均匀。加入200ul无水乙醇，涡旋均匀。再加入200ul无水乙醇，彻底均匀。
9.2.7将上述得到的溶液加入吸附柱CR2中（吸附柱放在收集管中），12000rpm离心1min。将离心出的溶液重新加入到吸附柱中，12000rpm再次离心1min，直到所有的溶液通过吸附柱，弃掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。
9.2.8向吸附柱中加入500ul缓冲液GD，12000rpm离心1min，弃掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。
9.2.9向吸附柱中加入500ul漂洗液PW，室温静置2min，12000rpm离心1min，弃掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。
9.2.10重复步骤15。
9.2.11将上步实验所得吸附柱12000rpm离心3min，弃掉收集管及废液，将吸附柱转入一个新的1.5ml离心管中，打开吸附柱的盖子置于室温放置数分钟。注意：此步骤目的是使吸附
柱中残余的漂洗液挥发干净，漂洗液的残留，可能会影响后续的实验。
9.2.12向吸附柱膜的中央滴加20-50ul 洗脱缓冲液TB ，室温放置2min ，12000rpm 离心2min ，得到DNA 溶液。 9.2.13加样
将B-raf 阴性质控品C 、已处理样本和B-raf 阳性质控品C 分别取2 μL 加入PCR 反应管中，盖紧管盖，瞬时离心将管壁上的液体全部甩至管底，避免产生气泡，如有气泡产生，轻弹PCR 反应管壁，再次瞬时离心（若仍有气泡重复此步骤），然后立即进行PCR 扩增反应。 9.3PCR 扩增
9.3.1PCR 扩增程序设定 序号 阶段 温度 时间 循环数 1 UDG 酶反应 37℃ 2分钟 1 2 预变性 95℃ 3分钟 1
3 变性
94℃ 15秒 15 4 退火、延伸、荧光信号采集(FAM 荧光)
60℃ 35秒 5 变性 94℃ 5秒 30 6 退火，延伸 70℃ 2分钟 7 变性
78℃ 15 秒 8 退火，延伸，荧光信号采集(FAM 荧光)
60℃ 45 秒 9
仪器冷却
25℃
1 分钟
1 收集荧光：FAM 通道 10、PCR 结果分析 10.1结果分析条件设定
10.1.1 ABI 7500 型荧光定量PCR 仪(Version 1.4.0)
反应结束后，根据PCR 仪说明书及荧光曲线进行手动或自动调整基线和阈值。手动调整时，基线（Baseline ）的起始点（Start ）设定在5~8之间，终止点（Stop ）设定在12~15之间，阈值线（Threshold ）通常设定在1000~5000之间（视具体情况而定）。设定之后，点击 “Analyze”（分析）按键，即可从“Report”窗口的“Ct”处得到各样本的Ct 值。 10.1.2 Stratagene Mx3000P 型荧光定量PCR 仪
反应结束后，根据荧光曲线进行手动或自动调整基线和阈值，手动调整基线（Non-adaptive baseline ）的起始点（Start ）一般设定为5~8，终止点（Stop ）一般设定为12~15，阈值线（Threshold fluorescence ）通常设定在500~2000之间（视具体情况而定）。设定之后，可以从“Text report”窗口的“Ct(dRn)”处得到各样本的Ct 值。 10.2质量控制
10.2.1B-raf 阴性质控品C ：靶基因通道无S 型扩增曲线，Reports 界面Ct 一栏显示Undetermined ；
10.2.2B-raf 阳性质控品C：靶基因通道有S 型扩增曲线，且15≤Ct≤25；以上条件必须在同一次实验中全部满足，否则本次实验结果无效；
10.2.3待测样品的Ct>32 时，低于本试剂盒测序检测下限，不能进行后续的测序反应，说明加入的DNA 含量不足或含有较多的PCR 抑制物，应重新提取DNA 或调整DNA 加样量，必须使待测样品的Ct≤32，才能满足后续实验要求；
10.2.4若检测靶基因通道无S 型扩增曲线，Reports 界面Ct 一栏显示Undetermined，则样本提取无DNA，为阴性，建议重新提取；
10.3反应完毕，存储PCR结果以便进行数据分析，PCR产物用于后续实验。
11、PCR产物的酶解
对样本DNA 含量(Ct≤32) PCR 产物和B-raf 阳性质控品C 分别取5 μL于PCR反应管中，再分别加入2 μL SAP酶混合液涡旋振荡10秒，2000 rpm离心15秒，于PCR仪上进行酶解。酶解程序如下：37℃ 60分钟，80℃ 15分钟。
12、基因分析PCR反应
分别取样本和B-raf 阳性质控品C 酶解产物3 μL、测序试剂1 μL和B-raf 测序引物2 μL 进行PCR 扩增，具体条件。
序号阶段温度时间循环数
1 预变性96℃1分钟 1
2 变性96℃10秒
3 退火50℃5秒
25
4 延伸60℃2分钟
5 仪器冷却25℃1分钟 1
13、基因分析产物纯化
0.2 ml离心管中
13.1.在每孔内加入16 μL醋酸钠-乙醇混合物(3M NaAc:无水乙醇=1:15)，剧烈振荡，避光静置15分钟12000 g以上4 ℃离心30分钟，吸弃上层液体；
13.2.加入70 μL 70%预冷乙醇，剧烈振荡，12000 g以上4 ℃离心15分钟，吸取上层液体；
13.3.让酒精在室温挥发干净，加入12 μL Hi-Di Formamide溶解DNA；
13.4.在PCR仪上变性：95 ℃ 4分钟，4℃ 4分钟，上机电泳；在自动化的基因分析仪上进行分析，若不能当日基因分析，可置-20℃保存。
14、检测结果分析
采用测序分析软件Chromas 对结果进行分析：
14.1.用Chromas 软件打开测序结果，在Edit 菜单下点击“Reverse+Complement”；
14.2.删除不稳定测序区域；
14.3.在Find 下，找到序列GGAGCT，移动光标至“G”左侧的第一个碱基，按快捷键Alt+L 选中测序前段不稳定区域，在Edit 菜单下点击“Delete Cutoff Sequences”删除以上区域；
14.4.按快捷键Ctrl+1，显示氨基酸序列，将其后面的序列与下面的野生型标准序列比对，标
记处600(T1799A)位密码子GTG 可能会发生T→A的突变（参考突变判读依据）。
野生型核苷酸TTT GGT CTA GCT ACA GTG AAA TCT
野生型氨基酸F G L A T V K S
突变型核苷酸TTT GGT CTA GCT ACA GAG AAA TCT
突变型氨基酸F G L A T E K S
突变判读依据：
杂合峰：如果在一个特定的位点上出现了两种颜色的峰叠在一起即为杂合峰。在毛细管电泳时，这些测序图的峰高代表荧光强度，一种荧光素的高度能在一定程度上代表某一特定片段的量。临床取得的肿瘤组织一般会携带正常细胞和肿瘤细胞，因此得到的测序结果中往往会存在2 种颜色的峰同时存在。判读结果时根据突变的热点区、噪音的高低以及污染的轻重来综合判断，当杂合峰的高度显著高于其左右周边的噪音时，可判读为存在突变型。按上述方法查找突变位点，并将结果记录在报告上，若没出现则可能前面的序列发生了移码突变、插入碱基等情形,需要对照标准序列将测序序列校正后返回本步骤重新分析。
15、注意事项
15.1.请自备石蜡切片DNA 提取试剂盒，移液器，振荡器，离心机，无菌带滤芯吸头、离心管、PCR 反应管、测序板、无水乙醇、醋酸钠及无粉一次性乳胶手套(经常更换)
15.2. 使用本产品时，应遵循临床基因扩增实验室的技术规范进行操作。临床基因扩增实验室应该分为以下三个区域、并且各个区域应具有以下表格中的必备物品：PCR 准备区-PCR 反应体系配制区；样本处理区-样本处理、加样区；检测区-PCR 扩增、荧光检测、结果分析区。各区的仪器、耗材、试剂等独立专用，各区间人员流动及空气流动应有严格要求，最大限度避免交叉污染。本产品涉及到PCR 产物的开盖操做，实验过程要特别注意，酶解、测序反应和测序产物纯化只能在检测区进行，严禁在PCR 准备区和样本处理区进行。16、参考文献
[1] Nikiforova MN, Kimura ET, Gandhi M, Biddinger PW, Knauf JA, Basolo F, et al. BRAF mutations in thyroid tumors are restricted to papillary carcinomas and anaplastic or poorly differentiated carcinomas arising from papillary carcinomas J Clin Endocrinol Metab 2003,88 (II):5399-5404.
[2] Davies H, Bignell GR, Cox C, Stephens P, Edkins S, Clegg S, et al. Mutations of the BRAF gene in human cancer. Nature. 2002, 417(6892): 949-54.
[3] Ikenoue T, Hikiba Y, Kanai F, Ljichi H, Togo G, Ohta M, et al. Rapid detection of mutations in the BRAF gene using real-time polymerase chain reaction and melting curve analysis. Cancer Genet Cytogenet. 2004, 149(1): 68-71.
标准操作流程编写程序 编制部门：商务部 文件审核: 文件批准: 批准日期： 2005.05.25 修改记录
1 目的 指导文件编写者能够高效的编写出符合文件编写标准程序的文件来。 2范围 此文件适合所有编写标准操作流程的文件编写人员。
3 职责 3.1 SOP文件编写总负责人对程序的有效性负责。 3.2 编写SOP文件的相关人员执行本程序，并反馈修改信息。 3.3 SOP文件编写总负责人根据此程序对各部门文件编写人进行培训。 3.4 各主过程负责人对文件的编写和修改的有效性负责。 4 定义 4.1 SOP：SOP是标准操作程序（standard operation program）英文的第一个字母的缩写。为各部门共性的、可以固化的业务活动。 4.2工具书:制定的作为岗位快速参考的文件，例如：公差，目标值等贴或放在工作区域附近用于员工工作时参考的文件，这类文件主要包括操作方法，测试标准，流程图等限于特定岗位使用的操作指南，可以作为程序文件的一部分，也可以单独使用。 4.3附件:指SOP文件中所引用的文件，执行文件的同时也必须同时执行的文件，主要包括管理规定，规章制度和标准，可以作为程序文件的一部分，也可以单独使用。4．4流程体系：共由四部分组成，SOP－规范制度－表单－手册。其中，规范为各部门之间在共性流程操作之上的不同的业务管理细的规定，是对SOP的支持和补充；表单是与SOP，和管理规范相匹配的单据、附件等文件；手册是已经固化的指导我们进行SOP操作或执行规范制度的指南性文件。
5程序说明 5.1 编出流程图 5.1.1 文件编写员根据部门业务主过程编出相应的流程图。 5.1.2 根据管理的需要和流程的可持续性和有效性确定流程的控制环节。 5.1.3 流程的控制环节一般是另一个新流程或子流程或附件的起点。 5.1.4 画流程图的统一工具为Visio，图标模板为Sap.vss。图标说明： 5.2 确定流程清单 5.2.1 部门文件编写人员根据流程图的主过程确定本部门的流程数量和名称。 5．3流程编写 5.3.1 程序文件包括以下内容 : （1）目的－此程序的执行目的。 （2）范围－此程序文件所规定及涉及的范围。 （3）职责－明确列出该程序的主要制定人及执行人。 （4）定义－对程序中所使用的专门和特定名词给出定义。 （5）程序说明－详细表述具体工作的执行方法来强调及解释如何作，其重心是技术性、技巧性及可操作性，应涉及技术指标、标准、规范和记录等。同样可用文字，流程图，表格，图片等多种形式描述并可以用数字或字母标明前后顺序，明了易懂。 （6）记录－列出并在有可能的情况下附上本程序中所用的报告、记录、表格、单据或电子记录名称和编号。 （7）参考文件及附件－列出并在有可能的情况下附上本程序中所采用的重要参考文件。另外必须列明此程序支持的纲要和其他相关文件的名称，具体包括三项： -参考文件－列出本程序所参考的重要文献及编号。 -本程序支持的纲要－此程序支持的纲要及编号。 -附件－列出全文引用的支持此程序的文件或工具书及编号等 5.3.2程序文件内容的编码、字体及版面 (1)页眉、页脚设置 页眉设置见模板，涵盖“文档名称”、“文档编号”、“文件负责人”和“第X页共X
流程图的绘制方法及要求 为了使程序文件（管理制度）中的工作流程绘制美观且格式统一，特编写此文件，希望能够对您的流程图绘制给予一定的指导与帮助。 一、流程图绘制软件 建议流程图绘制使用微软Office 办公软件中的Visio软件进行。 二、打开VISIO软件开始您的绘制工作 1点选流程图中的跨职能流程图 2弹出绘图窗口及“流程图”工作框，见下图，点选“垂直”并根据流程涉及部门数量填写“带区的数目”，点击“确认”。 然后出现下图：
3在<职能>填写流程中的涉及部门或岗位。开始流程图的绘制。 4流程绘制应使用“基本流程图形状”进行绘制，包括“准备（开始）”、“流程（具体事项）”、“判定”等等。 其中常用图形有： 在流程绘制过程中，如需强调的流程步骤，可以增加底色强调。 5流程图绘制示例 在流程图绘制软件中根据实际情况进行绘制，其中流程图形状应选择正确。
6流程图编写（word中） 制作完毕后。进入标准编辑的word中，绘制流程。 首先插入表格 列包括：“大阶段”、“各涉及流程部门”、“岗位”、“记录”，如果流程对时间节点要求很高，则需增加一列“时间节点”。故，插入列的数量为“涉及部门数+3or4，行数设置3行即可。 行的数量根据流程图中纵向的步骤来设，譬如上图中涉及了12步，则设12+2（表头）行即可。 然后按照下图表格，将表格合并。
将流程图“Ctrl+C”，放置在“流程图”位置。然后适当的调整图片大小以及行高、列宽。最终即可形成流程图。 接下来在表格顶部右上方增加“本流程责任单位：XXXXX”。流程图的绘制完成。 注：如果流程涉及步骤较多，一页无法显示完成，则在流程图黏贴时，分成相应页面即可。（表头每页必须相同）。
什么是SOP？ Standard Operation Procedure 所谓SOP，是 Standard Operation Procedure三个单词中首字母的大写，即标准作业程序。 ? 是以文件的形式描述作业员在生产作业过程中的操作步骤和应遵守的事项； ? 是作业员的作业指导书； ? 是检验员用于指导工作的依据。 “制造”就是以规定的成本、规定的工时、生产出品质均匀、符合规格的产品。要达到上述目的，如果制造现场之作业如工序的前后次序随意变更，或作业方法或作业条件随人而异有所改变的话，一定无法生产出符合上述目的的产品。 因此，必须对作业流程、作业方法、作业条件加以规定并贯彻执行，使之标准化。这就是SOP 的作用。 ? 将企业积累下来的技术、经验记录在标准文件中,以免因技术人员的流动而使技术流失；? 使操作人员经过短期培训，快速掌握较为先进合理的操作技术； ? 根据作业标准，易于追查不良品产生的原因； ? 树立良好的生产形象，取得客户信赖与满意； ? 实现生产管理规范化、生产流程条理化、标准化、形象化、简单化； ? 是企业最基本、最有效的管理工具和技术资料。 S O P编写指南 1. SOP编写流程
2. SOP编写计划书： 明确SOP的编号、工序名称、编写人、初稿完成时间、小组讨论时间及最终的定稿时间。 3. SOP编写人员要求： ? 操作好，有经验，有一定写作基础的一线员工 ? 沟通，打消编写人员的顾虑 ? 培训 ? 给予支持:专门的时间、提供相关资料等 ? 编写小组要有团队精神 4. SOP的讨论修订： ? 统一认识，达成共识 ? SOP讨论会参与人员 ? 操作员、设备员（维修人员）、工艺员、体系管理员、编写组负责人及1-2名与本岗位无关的人员 ? 讨论会要作到互相挑战,各抒己见 ? 必要时可进行现场确认
SOP(Standard Operation Procedure) 前段时期，为了强化公司中高层经理人员的“职业经理人”意识和提升大家的“职业经理人”能力，公司组织了中高层经理人员进行学习余世维先生“职业经理人”讲座的演讲交流活动，并组织相关经理人员参加了余世维先生在南京丁山香格里拉举行的“经理人常犯的11种错误”的专题演讲。在余世维先生的这些演讲时，都特别提到“未能设定标准”是经理人常犯的错误之一。方总也在不同的场合多次提到我们日常工作之所以效率不高或经常出现一些失误，也是由于我们工作没有标准和规范，要求各职能部门建立相应的事件库，规范每一件事情的操作程序。从8月份开始，公司已经把建立SOP作为当月的一项重点工作，以月度任务下达相关部门，并倡导用2到3年的时间建立国瑞公司的整体SOP体系。从8月份此项工作的整体推进效果来看，不是很理想，大家对SOP不是真正了解和把握是主要的原因之一。有基于此，我就 SOP工作的一些理解和大家做一些交流，共同来推进SOP的整体工作，希望得到大家的指正。 1.什么是SOP 所谓SOP，是 Standard Operation Procedure三个单词中首字母的大写，即标准作业程序，就是将某一事件的标准操作步骤和要求以统一的格式描述出来，用来指导和规范日常的工作。SOP的精髓，就是将细节进行量化，用更通俗的话来说，SOP就是对某一程序中的关键控制点进行细化和量化。从对SOP的上述基本界定来看，SOP具有以下一些内在的特征： 1)SOP是一种程序。SOP是对一个过程的描述，不是一个结果的描述。同时，SOP 又不是制度，也不是表单，是流程下面某个程序中关控制点如何来规范的程序。 2)SOP是一种作业程序。SOP首是一种操作层面的程序，是实实在在的，具体可操作的，不是理念层次上的东西。如果结合ISO9000体系的标准，SOP是属于三阶文件，即作业性文件。 3)SOP是一种标准的作业程序。所谓标准，在这里有最优化的概念，即不是随便写出来的操作程序都可以称做SOP，而一定是经过不断实践总结出来的在当前条件下可以实现的最优化的操作程序设计。说得更通俗一些，所谓的标准，就是尽可能地将相关操作步骤进行细化、量化和优化，细化、量化和优化的度就是在正常条件下大家都能理解又不会产生歧义。 4)SOP不是单个的，是一个体系。虽然我们可以单独地定义每一个SOP，但真正从企业管理来看，SOP不可能只是单个的，必然是一个整体和体系，也是企业不可或缺的。余世维在他的讲座中也特别提到：一个公司要有两本书，一本书是红皮书，是公司的策略，即作战指导纲领；另一本书是蓝皮书，即SOP，标准作业程序，而且这个标准作业程序一定是要做到细化和量化。 2.为什么企业要做SOP
SOP标准作业程序与作业指导书 标准作业程序与作业指导书 我常常在咨询或者辅导企业的时候有人问到：“如何才能够增强执行力”，这个问题并不难； 其实一个人先有了想法，才会有看法、说法和做法，您必须让执行作业的人，知道自己的岗 位职责需要做哪一些事情？那就是想法；做好的标准那就是看法；执行业务的人能够很清楚 地说出来以上要做的事流程、步骤、注意事项等等以及标准那就是说法，进一步现场去执行 做好，那就是做法，从想法、看法、说法到做法，一个主管部门到底如何培育与培训员工？ 需要那一些资料？培训？工具呢？如何做好绩效考核？怎样才能够完善呢？我在之前写的博 客有提到任何一个部门体系建立都需要建立在五个方面：1、制度标准化（System Standardization）、 2、专业手册化（Specialized handbook）、3、培训标准化（Training standardization）4、考核量化（Inspection quantification）5、完善工具化 (Perfect tool)。 建立体系需要的两个基本的概念与技术，那就是标准作业程序SOP与作业指导书，这两个工具与技术很简单，但是很多人不想去彻底做好它，所以导致执行力弱或者低下，当然做好之 后的培训更是重要，让我们先看看看怎么做，下一篇文章再告诉大家怎样来培训与怎么做好
执行力的培训？ 标准作业程序 SOP（Standard Operation Procedure） 什么是SOP（标准作业程序） 所谓SOP，是 Standard Operation Procedure三个单词中首字母的大写，即标准作业程序，就是将某一事件的标准操作步骤和 要求以统一的格式描述出来，用来指导和规范日常的工作。 SOP的精髓，就是将细节进行量化，用更通俗的话来说，SOP就是对某一程序中的关键控制点进行细化和量化。 SOP的由来 在十八世纪或作坊手工业时代,制做一件成品往往工序很少,或分工很粗,甚至从头至尾是一个人完成的,其人员的培训是以学徒形式通过长时间学习与实践来实现的。随着工业革命的兴 起,生产规模不断扩大，产品日益复杂,分工日益明细,品质成本急剧增高,各工序的管理日益困难。如果只是依靠口头传授操作方法,已无法控制制程品质。采用学徒形式培训已不能适应 规模化的生产要求。因此,必须以作业指导书形式统一各工序的操作步骤及方法。 SOP的作用 1) 将企业积累下来的技术?经验,记录在标准文件中,以免因技术人员的流动而使技术流失; 2) 使操作人员经过短期培训,快速掌握较为先进合理的操作技术; 3) 根据作业标准,易于追查不良品产生之原因; 4) 树立良好的生产形象，取得客户信赖与满意。
遠鼎信息科技(上海)有限公司 流程負責單位: 文件編號： 撰寫人： 流程管理人員： 會簽： 核准： ? COPYRIGHT Yuan Ding Integrated Information Service Inc .. 2011 All rights reserved. The copyright of this document belongs to Yuan Ding Integrated Information Service Inc ... No part of this publication may be copied, distributed, transmitted, transcribed, stored in a retrieval system, or translated into any human or computer language without prior written permission of Yuan Ding Integrated Information Service Inc ... Yuan Ding Integrated Information Service Inc .. has made every effort to ensure that the information contained in this document is adequate and
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附件 供电所标准化作业工作流程 供电所标准化作业流程包括安全管理、生产管理、营销管理、专业管理、优质服务、综合管理六个方面，共计46项工作流程，分别为： 1.安全管理工作：安全性评价工作流程、“工作票”管理工作流程、“操作票”工作流程、安全工作（制度）实施流程、周安全活动流程、安全生产例会流程、安全监督检查工作流程、电力设施保护条例实施流程、两措运行管理工作流程、交通安全管理工作流程、防火安全管理工作流程、事故调查分析工作流程、安全工器具管理工作流程、双电源自备电源管理工作流程、漏电保护器管理工作流程。 2.生产管理工作：设备巡视管理流程、春（秋）查管理工作流程、设备检修工作流程、预防性试验管理工作流程、设备资料（台帐）管理工作流程、设备评定级管理流程、缺陷管理工作流程、备品备件管理工作流程、技改工程管理工作流程。 3.营销管理工作：高压业扩工程管理工作流程、低压新装工作流程、低压变更用电工作流程、电费抄核收工作流程、欠费催收停电复电工作流程、电能表计量管理工作流程（客户产权）、电能表计量管理工作流程（公司产权）、用电检查工作流程。 4.专业管理工作：电压无功管理工作流程、电压监测点管理工作流程、供电可靠性目标管理工作流程、计划 １/ 98
停电工作流程、临时停电工作流程、事故停电工作流程、线损管理工作流程。 5.优质服务工作：优质服务工作流程、电力紧急服务工作流程。 6.综合管理工作：经济活动分析会工作流程、培训工作流程、仓储管理工作流程、QC小组活动流程、考核工作流程。 ２/ 98
1.安全性评价工作流程图 ２/ 98
没有问题存在问题 ３/ 98
什么是SOP（标准作业程序） 所谓SOP，是Standard Operation Procedure三个单词中首字母的大写，即标准作业程序(标准操作程序)，就是将某一事件的标准操作步骤和要求以统一的格式描述出来，用来指导和规范日常的工作。 SOP的精髓，就是将细节进行量化，用更通俗的话来说，SOP 就是对某一程序中的关键控制点进行细化和量化。 SOP的特征 从对SOP的上述基本界定来看，SOP具有以下一些内在的特征： 1) SOP是一种程序。SOP是对一个过程的描述，不是一个结果的描述。同时，SOP又不是制度，也不是表单，是流程下面某个程序中关控制点如何来规范的程序。 2) SOP是一种作业程序。SOP首是一种操作层面的程序，是实实在在的，具体可操作的，不是理念层次上的东西。如果结合ISO9000体系的标准，SOP是属于三阶文件，即作业性文件。 3) SOP是一种标准的作业程序。所谓标准，在这里有最优化的概念，即不是随便写出来的操作程序都可以称做SOP，而一定
是经过不断实践总结出来的在当前条件下可以实现的最优化的操作程序设计。说得更通俗一些，所谓的标准，就是尽可能地将相关操作步骤进行细化、量化和优化，细化、量化和优化的度就是在正常条件下大家都能理解又不会产生歧义。 4) SOP不是单个的，是一个体系。虽然我们可以单独地定义每一个SOP，但真正从企业管理来看，SOP不可能只是单个的，必然是一个整体和体系，也是企业不可或缺的。余世维在他的讲座中也特别提到：一个公司要有两本书，一本书是红皮书，是公司的策略，即作战指导纲领；另一本书是蓝皮书，即SOP，标准作业程序，而且这个标准作业程序一定是要做到细化和量化。 SOP的作用 1) 将企业积累下来的技术﹑经验,记录在标准文件中,以免因技术人员的流动而使技术流失; 2) 使操作人员经过短期培训,快速掌握较为先进合理的操作技术; 3) 根据作业标准,易于追查不良品产生之原因; 4) 树立良好的生产形象，取得客户信赖与满意。 5) 是贯彻ISO精神核心(说，写，做一致)之具体体现，实现生产管理规范化、生产流程条理化、标准化、形象化、简单化。
教育部作业标准化（SOP）流程图制作规范 秘书室管考科制 931009 壹、前言 「标准作业流程」是企业界常用的一种作业方法。其目的在使每一项作业流程均能清楚呈现，任何人只要看到流程图，便能一目了然。作业流程图确实有助于相关作业人员对整体工作流程的掌握。制作流程图的好处有三： （一）所有流程一目了然，工作人员能掌握全局。 （二）更换人手时，按图索骥，容易上手。 （三）所有流程在绘制时，很容易发现疏失之处，可适时予以调整更正，使各项作业更为严谨。 贰、目的 一、为建立本部作业标准化（SOP）流程图之可读性及一致性，乃参考美国国家标 准协会（American National Standards Institute, ANSI）系统流程图标准 符号，选定部份常用图形，作为本规范流程图制作符号；及参考道勤企业管理 顾问有限公司「效率会议」标准流程，作为本规范流程作业要项及流程图之范 例。 二、本规范对于流程图绘制方式，采用由上而下结构化程序设计（Top-down Structured Programming）观念，亦即流程图的结构，由循序、选择及重复三 种结构所组成，以制作一个简单、易懂及便于维护、修改的流程图。 三、对于制作流程图共通性目标，本规范亦列出流程图绘制原则。 参、流程图符号 可由计算机的Word 软件中，工具列─插入─图片─快取图案─流程图，选取 各种图示绘制；其中最常用者，有下列八种，说明如下：
肆、流程图结构说明： 一、循序结构（Sequence） （一）图形： （二）意义：处理程序循序进行。 （三）语法：DO 处理程序1 THEN DO 处理程序2 （四）实例：
S O P标准作业流程 The Standardization Office was revised on the afternoon of December 13, 2020
SOP(Standard Operation Procedure) 前段时期，为了强化公司中高层经理人员的“职业经理人”意识和提升大家的“职业经理人”能力，公司组织了中高层经理人员进行学习余世维先生“职业经理人”讲座的演讲交流活动，并组织相关经理人员参加了余世维先生在南京丁山香格里拉举行的“经理人常犯的11种错误”的专题演讲。在余世维先生的这些演讲时，都特别提到“未能设定标准”是经理人常犯的错误之一。方总也在不同的场合多次提到我们日常工作之所以效率不高或经常出现一些失误，也是由于我们工作没有标准和规范，要求各职能部门建立相应的事件库，规范每一件事情的操作程序。从8月份开始，公司已经把建立SOP作为当月的一项重点工作，以月度任务下达相关部门，并倡导用2到3年的时间建立国瑞公司的整体SOP体系。从8月份此项工作的整体推进效果来看，不是很理想，大家对SOP不是真正了解和把握是主要的原因之一。有基于此，我就 SOP工作的一些理解和大家做一些交流，共同来推进SOP的整体工作，希望得到大家的指正。 1.什么是SOP 所谓SOP，是 Standard Operation Procedure三个单词中首字母的大写，即标准作业程序，就是将某一事件的标准操作步骤和要求以统一的格式描述出来，用来指导和规范日常的工作。SOP的精髓，就是将细节进行量化，用更通俗的话来说，SOP就是对某一程序中的关键控制点进行细化和量化。从对SOP的上述基本界定来看，SOP具有以下一些内在的特征： 1)SOP是一种程序。SOP是对一个过程的描述，不是一个结果的描述。同时，SOP又不是制度，也不是表单，是流程下面某个程序中关控制点如何来规范的程序。 2)SOP是一种作业程序。SOP首是一种操作层面的程序，是实实在在的，具体可操作的，不是理念层次上的东西。如果结合ISO9000体系的标准，SOP是属于三阶文件，即作业性文件。 3)SOP是一种标准的作业程序。所谓标准，在这里有最优化的概念，即不是随便写出来的操作程序都可以称做SOP，而一定是经过不断实践总结出来的在当前条件下可以实现的最优化的操作程序设计。说得更通俗一些，所谓的标准，就是尽可能地将相关操作步骤进行细化、量化和优化，细化、量化和优化的度就是在正常条件下大家都能理解又不会产生歧义。 4)SOP不是单个的，是一个体系。虽然我们可以单独地定义每一个SOP，但真正从企业管理来看，SOP不可能只是单个的，必然是一个整体和体系，也是企业不可或缺的。余世维在他的讲座中也特别提到：一个公司要有两本书，一本书是红皮书，是公司的策略，即作战指导纲领；另一本书是蓝皮书，即SOP，标准作业程序，而且这个标准作业程序一定是要做到细化和量化。
SOP模板标准操作流程编写程序
标准操作流程编写程序 编制部门：商务部 文件审核: 文件批准: 批准日期： .05.25
修改记录 1 目的 指导文件编写者能够高效的编写出符合文件编写标准程序的文件
来。 2范围 此文件适合所有编写标准操作流程的文件编写人员。 3 职责 3.1 SOP文件编写总负责人对程序的有效性负责。 3.2 编写SOP文件的相关人员执行本程序，并反馈修改信息。3.3 SOP文件编写总负责人根据此程序对各部门文件编写人进行培训。 3.4 各主过程负责人对文件的编写和修改的有效性负责。 4 定义 4.1 SOP：SOP是标准操作程序（standard operation program）英文的第一个字母的缩写。为各部门共性的、能够固化的业务活动。 4.2工具书:制定的作为岗位快速参考的文件，例如：公差，目标值等贴或放在工作区域附近用于员工工作时参考的文件，这类文件主要包括操作方法，测试标准，流程图等限于特定岗位使用的操作指南，能够作为程序文件的一部分，也能够单独使用。4.3附件:指SOP文件中所引用的文件，执行文件的同时也必须同时执行的文件，主要包括管理规定，规章制度和标准，能够作为程序文件的一部分，也能够单独使用。
4．4流程体系：共由四部分组成，SOP－规范制度－表单－手册。其中，规范为各部门之间在共性流程操作之上的不同的业务管理细的规定，是对SOP的支持和补充；表单是与SOP，和管理规范相匹配的单据、附件等文件；手册是已经固化的指导我们进行SOP操作或执行规范制度的指南性文件。 5 程序说明 5程序说明 5.1 编出流程图 5.1.1 文件编写员根据部门业务主过程编出相应的流程图。 5.1.2 根据管理的需要和流程的可持续性和有效性确定流程的控制环节。
SOP的精髓 SOP的精髓，就是将细节进行量化，用更通俗的话来说，SOP就是对某一程序中的关键控制点进行细化和量化。 简介 从对SOP的上述基本界定来看，SOP具有以下一些内在的特征： SOP是一种程序。SOP是对一个过程的描述，不是一个结果的描述。同时，SOP又不是制度，也不是表单，是流程下面某个程序中关于控制点如何来规范的程序。 SOP是一种作业程序。标准作业指导。SOP是一种操作层面的程序，是实实在在的，具体可操作的，不是理念层次上的东西。如果结合ISO9000体系的标准，SOP是属于三级文件，即作业性文件。 SOP是一种标准的作业程序。所谓标准，在这里有最优化的概念，即不是随便写出来的操作程序都可以称做SOP，而一定是经过不断实践总结出来的在当前条件下可以实现的最优化的操作程序设计。说得更通俗一些，所谓的标准，就是尽可能地将相关操作步骤进行细化，量化和优化，细化，量化和优化的度就是在正常条件下大家都能理解又不会产生歧义。 SOP不是单个的，是一个体系，虽然我们可以单独地定义每一个SOP，但真正从企业管理来看，SOP不可能只是单个的，必然是一个整体和体系，也是企业不可或缺的。余世维在他的讲座中也特别提到：一个公司要有两本书，一本书是红皮书，是公司的策略，即作战指导纲领；另一本书是蓝皮书，即SOP，标准作业程序，而且这个标准作业程序一定是要做到细化和量化。 SOP的由来 在十八世纪或作坊手工业时代，制做一件成品往往工序很少，或分工很粗，甚至从头至尾是一个人完成的，其人员的培训是以学徒形式通过长时间学习与实践来实现的。随着工业革命的兴起,生产规模不断扩大，产品日益复杂，分工日益明细，品质成本急剧增高，各工序的管理日益困难。如果只是依靠口头传授操作方法，已无法控制制程品质。采用学徒形式培训已不能适应规模化的生产要求.因此，必须以作业指导书形式统一各工序的操作步骤及方法。 SOP的格式 1、明确职责：包括负责者、制定者、审定者、批准者。 2、格式：