(第10章肠杆菌科
一、教学大纲要求
（1）肠杆菌科分类
（2）肠杆菌科细菌共同特性
（3）肠杆菌科各菌属特性
（4）肠杆菌科细菌临床意义
（5）肠杆菌科各菌属鉴别
（6）肠杆菌科实验室检查
二、教材内容精要
（一）肠杆菌科概述
1．分类
肠杆菌科是一大类生物学性状相似的革兰阴性杆菌。与临床医学密切相关的肠杆菌科细菌主要有14个菌属：埃希菌属、志贺菌属、爱德华菌属、沙门菌属、枸橼酸菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、哈夫尼亚菌属、多源菌属、沙雷菌属、变形杆菌属、摩根菌属、普罗威登斯菌属、耶尔森菌属。
2．肠杆菌科共同特性
（1）生物学特性：革兰阴性杆菌，无芽胞，有菌毛，多数有周身鞭毛。需氧或兼性厌氧，营养要求不高，生化反应活跃，氧化酶－，发酵葡萄糖产酸、产气或不产气，触酶＋，能还原硝酸盐为亚硝酸盐。
（2）抗原构造：肠杆菌科抗原构成主要有菌体抗原（O抗原）、鞭毛抗原（H抗原）、表面抗原、菌毛抗原等。O抗原与H抗原为肠杆菌科血清学分群与分型的依据，但是O抗原与相应抗体之间的反应可被表面抗原和菌毛抗原阻断。
（3）毒力因子：主要有菌毛或菌毛样结构、荚膜或微荚膜、外膜蛋白、内毒素及外毒素等。3．临床意义
肠杆菌科细菌多为肠道正常菌群，除沙门菌属、志贺菌属、埃希菌属部分菌种、耶尔森菌属有致病作用外，其余均为条件致病菌，可导致医院感染。
4．鉴定与鉴别
（1）科间鉴别：氧化酶阴性基本可将肠杆菌科与弧菌科、非发酵菌、巴斯德菌科区别开来。后3类菌均为阳性(表10-1)。
表10-1 肠杆菌科与其它革兰阴性杆菌区别
试验肠杆菌科弧菌科发酵菌巴斯德菌科
葡萄糖氧化、发酵发酵发酵氧化或不分解发酵氧化酶－＋＋* ＋
形态杆状弧状、杆状杆状球杆状
鞭毛周鞭毛或无单鞭毛单、丛、周鞭毛或无无鞭毛注：*不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌除外
（2）分类鉴别：用苯丙氨酸脱氨酶试验和葡萄糖酸盐试验可将肠杆菌科分为三大类(表10-2)。
表10-2 肠杆菌科初步分类
苯丙氨酸脱氨酶葡萄糖酸盐菌属
－－埃希菌属，志贺菌属，沙门菌属，枸橼酸菌属，爱德华菌属，耶尔
森菌属
＋－变形杆菌属，普罗威登斯菌属，摩根菌属
－＋克雷伯菌属，肠杆菌属，沙雷菌属，哈夫尼亚菌属，耶尔森菌属
（3）属、种、群、型的区分：根据不同菌属的生物学特性、血清学特性等可将已分类的肠杆菌科细菌鉴定到属、种、群、型、株。
（二）埃希菌属
本属以大肠埃希菌为代表种。
1．细菌特性
大肠埃希菌为革兰阴性杆菌，直杆状，周鞭毛，能运动，有菌毛。
具有O抗原、H抗原、K抗原，其血清型别按O∶K∶H的顺序排列，以数字表示，如O111∶K58∶H2；O157∶H7等。
兼性厌氧，营养要求不高，菌落为灰白色、圆形，在肠道选择培养基上能发酵乳糖产酸形成不同颜色的菌落。
生化特征为：发酵多种糖类产酸产气，KIA：AA+-，脲酶-；IMViC++--。
2．临床意义
大肠埃希菌是临床最常见的革兰阴性杆菌，也是医院感染常见病原菌，可引起各种肠道外感染和肠道内感染。引起肠道内感染的亦称为致腹泻大肠埃希菌，分为五组：（1）肠产毒性大肠埃希菌（ETEC）ETEC致病机制主要通过产生LT和ST肠毒素导致腹泻和中毒症状，是旅游者腹泻和婴幼儿腹泻的常见病因，导致恶心、腹痛、低热和类似轻型霍乱的急性水样腹泻。
（2）肠致病性大肠埃希菌（EPEC）是婴儿腹泻的重要病原菌，可导致发热、呕吐、严重水泻和粘液便，常引起婴儿脱水性酸中毒。
（3）肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）与志贺菌有共同抗原，可引起类似志贺菌肠炎的症状，如发热、腹痛、水泻或典型菌痢的里急后重症状，并出现脓血粘液便。
（4）肠出血性大肠埃希菌（EHEC）主要血清型为O157∶H7，引起出血性结肠炎（HC）。表现为腹痛、水泻、血性便。主要见于婴幼儿。以暴发流行为主。O157∶H7感染者中有少部分可发展成为溶血性尿毒综合征（HUS），出现溶血性贫血、血小板减少性紫癜和急性肾功能不全。
（5）肠凝聚性大肠埃希菌（EaggEC）引起婴儿急性或慢性水样腹泻伴脱水，偶有腹痛、发热与血便。
3．微生物学检验
（1）标本采集无菌方法采集各类感染标本及时送检；粪便标本宜采集新鲜、有脓血、粘液的部分。
（2）检验方法
1）显微镜检查为革兰阴性杆菌。
2）分离培养标本接种于BAP、SS、MAC/EMB培养基、或增菌培养基，置35℃孵育18～24h，观察菌落。尿液培养须作菌落计数。
3）鉴定与鉴别
①肠道外大肠埃希菌：本菌因发酵乳糖产酸在MAC上为红色菌落，在EMB上为紫黑色菌落。生化特性如符合即可鉴定为大肠埃希菌。
②肠道内大肠埃希菌：致腹泻大肠埃希菌的基本生物学特性与肠道外大肠埃希菌相似，
但分别具有特殊的血清型、肠毒素或毒力因子。因此，须通过不同的方式来鉴定种、型。
ETEC：主要通过测定ST和L T肠毒素来鉴定。须用生物学方法（兔肠结扎试验，乳鼠灌胃试验、细胞培养等）、免疫学或分子生物学方法来检测。
EPEC：用EPEC分型血清作O∶H分型。
EIEC：用EIEC O∶H血清进行分型；毒力试验为豚鼠眼结膜试验。与志贺菌主要鉴别试验是醋酸钠、葡萄糖铵和黏质酸盐试验，EIEC均为阳性，而志贺菌均为阴性。
EHEC：可用EHEC O∶H血清进行分型。美国CDC已建议将O157∶H7血清型列为常规检测项目。
EaggEC：采用液体培养-凝集试验或DNA探针检测。
4．耐药性
大肠埃希菌的耐药性主要表现在产生超广谱 -内酰胺酶（ESBL）。产ESBL细菌对青霉素类、第1、2、3代头孢菌素及单环菌素耐药，仅对头霉素类、碳青霉烯类及酶抑制剂（克拉维酸）敏感。
（三）沙门菌属
沙门菌属有多种血清型，95%以上沙门菌都属于A～F群。临床常见沙门菌为：伤寒、猪霍乱、甲、乙、丙型副伤寒沙门菌，鼠伤寒和肠炎沙门菌等。
沙门菌无芽胞，无荚膜，有周鞭毛。兼性厌氧，营养要求不高。在普通琼脂上为无色、半透明中等大小菌落。在肠道杆菌选择性培养基上为透明、半透明菌落，与志贺菌相似。大多数菌株能产生H2S，而在SS琼脂上形成黑色中心的菌落。
O抗原是沙门菌分群的依据。H抗原为沙门菌分型的依据。表面抗原以V i抗原为代表：常存在于伤寒沙门菌、丙型副伤寒沙门菌，Vi抗原能阻断O抗原与相应抗体发生凝集，加热可将其破坏。
生化特性KIA：KA+/-+/-；IMViC-+--/+，动力、赖氨酸脱羧酶均+，尿素酶-。
沙门菌可引起以急性胃肠炎或食物中毒、菌血症（败血症）、伤寒、副伤寒。
目前沙门菌已出现耐药现象，以鼠伤寒沙门菌为主，应注意耐药监测。
疑为伤寒沙门菌感染可于第1周采血，第2、3周取粪便，第3周也可取尿液，全病程取骨髓做培养。将标本增菌或直接接种BAP、MAC、SS培养基。若SS、EMB或MAC培养基上生长出无色透明，或黑色中心菌落则进一步鉴定。常见沙门菌的主要生化反应(表10-3)。
表10-3 常见沙门菌的主要生化反应
试验非伤寒沙门菌伤寒副伤寒A
KIA KA++ KA-+ W KA+-/＋W
吲哚－－－
枸橼酸盐＋－－
脲酶－－－
赖氨酸＋＋－
鸟氨酸＋－＋
动力＋＋＋
注：K：产碱；A：产酸；A：产酸；＋：90%～100%菌株阳性；－：90%～100%菌株阴性；＋W：弱阳性血清分型鉴定：首先用A～F多价O血清初步鉴定，再用单价O因子血清鉴定到群（A、B、C、D、E、F），接着用H因子血清第一相（特异相）定型，最后用H因子血清第二相（非特异相）辅助定型。若细菌生化反应符合沙门菌，而A～F多价O血清与细菌不产生凝集现象，应考虑是否有表面抗原（Vi）存在，应加热或传代去除Vi抗原后再进行A～F多
价O血清凝集试验。
血清学诊断：常用肥达反应检测，判断标准如下：
①伤寒沙门菌O凝集效价≥1∶80，H效价≥1∶160，副伤寒A、B、C的H效价≥80有诊断意义；
②单次检测效价增高不能定论，应在病程中逐周动态复查，若效价递增或恢复期比初次效价≥4倍者有诊断意义；
③一般O、H均升高，伤寒可能性大；O不高而H高可能为预防接种的回忆反应；O 高而H不高则可能为感染早期或与O抗原有交叉反应的其他沙门菌感染，可于一周后复查，如H升高则可诊断为伤寒。
（四）志贺菌属
伯杰细菌鉴定手册将志贺菌属分为A、B、C、D 4群和44个血清型。A群为痢疾志贺菌，B群为福氏志贺菌，C群为鲍氏志贺菌，D群为宋内志贺菌。志贺菌是细菌性痢疾的病原体。
志贺菌无芽胞，无荚膜，无鞭毛，多数有菌毛。兼性厌氧，营养要求不高，在肠道杆菌选择性培养基上呈无色菌落。
志贺菌属典型生化反应模式为KIA：KA――（宋内志贺菌个别菌株可迟缓发酵乳糖）。IMViC－/＋＋－－，脲酶－，动力－。
标本采集应在抗生素使用前采集新鲜粪便中脓、血、粘液部分，床边接种或立即送检，昏迷不能排便病人可用肛拭取样。将标本接种于肠道鉴别培养基MAC/EMB，选择培养基SS，如有无色半透明菌落生长，取可疑菌落进行鉴定。符合典型生化反应模式可进行血清学鉴定。血清学鉴定首先用志贺菌属4种多价血清作玻片凝集试验，如凝集再用A群、B 群、C群、D群单价血清鉴定到种、型。实验中应注意K抗原的阻断作用，并应考虑是否为EIEC。
志贺菌属各群间的鉴别，见表10-4。志贺菌与EIEC鉴别可用葡萄糖铵、醋酸盐、黏质酸盐试验，前者均为阴性，后者均为阳性。志贺菌属与类志贺邻单胞菌鉴别可用氧化酶、动力试验，志贺菌为阴性，后者均为阳性。志贺菌属与伤寒沙门菌鉴别可用动力、H2S试验和O9抗原检测，前者均为阴性，后者均为阳性。
表10-4 志贺菌属各群间生化反应鉴别
生化反应A群B群C群D群
-半乳糖苷酶－－－＋
鸟氨酸脱羧酶－－－＋
甘露醇－＋＋＋
吲哚＋/－＋/－＋/－－
（五）克雷伯菌属
克雷伯菌属有5个种，即肺炎克雷伯菌、产酸（催娩）克雷伯菌、解鸟氨酸克雷伯菌、植生克雷伯菌和土生克雷伯菌。其中肺炎克雷伯菌又可分为3个亚种：肺炎克雷伯菌肺炎亚种、臭鼻亚种、鼻硬结亚种。克雷伯菌属中肺炎克雷伯菌是重要的条件致病菌之一，可引起典型的原发性肺炎，也可引起各种肺外感染。
肺炎克雷伯菌有荚膜，有菌毛，无芽胞，无鞭毛。兼性厌氧，在麦康凯平板上形成红色粘稠菌落。克雷伯菌属生化特性为：KIA：AA+-，IMViC－/＋－＋＋，脲酶多＋，动力-。种间鉴别见表10-5。
表10-5克雷伯菌属种间鉴别（阳性％）
生化反应肺炎克雷
伯菌
产酸克雷
伯菌
解鸟氨酸
克雷伯菌
植生克雷
伯菌
臭鼻克雷
伯菌
鼻硬结克
雷伯菌
土生克雷
伯菌
吲哚0 99 100 20 0 0 0 甲基红10 20 96 100 98 100 60
V-P 98 95 100 100 30 0 40 枸橼酸盐98 95 100 100 30 0 40 脲酶95 90 100 98 10 0 0 鸟氨酸0 0 100 0 3 0 20 丙二酸盐93 98 100 100 3 95 100 黏质酸盐90 93 96 100 25 0 100 葡萄糖产气97 97 100 100 30 0 100 乳糖98 100 100 100 30 0 100
（六）肠杆菌属
肠杆菌属包括11个种，即产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、日勾维肠杆菌、阪崎肠杆菌、中间型肠杆菌、泰洛肠杆菌、河生肠杆菌、阿氏肠杆菌、致癌肠杆菌、溶解肠杆菌、超压肠杆菌。肠杆菌属是常见的环境菌群，也是重要的条件致病菌，可引起泌尿道感染、呼吸道感染、伤口感染及败血症。
本属细菌有动力，无芽胞，无荚膜。兼性厌氧，在麦康凯平板上形成红色较大的菌落。肠杆菌属生化特性为：KIA：AA＋－，IMViC－－＋＋，鸟氨酸、精氨酸双水解酶均＋，赖氨酸脱羧酶－，动力＋，脲酶不同种间各有差异。常见菌种间鉴别见表10-6。
表10-6 肠杆菌属常见菌种间鉴别（阳性％）
生化反应产气肠杆菌阴沟肠杆菌日勾维肠杆菌阪崎肠杆菌甲基红 5 5 5 5
枸橼酸盐95 100 99 99
脲酶 2 65 93 1
赖氨酸98 0 90 0
精氨酸0 97 0 99
鸟氨酸98 96 100 91
乳糖95 93 55 99
蔗糖100 97 98 100
卫矛醇 5 15 0 5
山梨醇100 95 0 0
棉子糖96 97 97 99
蜜二糖99 90 97 100
肌醇95 15 0 75
动力97 95 90 96
（七）枸橼酸杆菌属
枸橼酸杆菌属包括3个菌种，即弗劳地枸橼酸杆菌、异型枸橼酸杆菌、无丙二酸盐枸橼酸杆菌及其丙二酸盐阴性枸橼酸杆菌生物1群。枸橼酸杆菌属为人和动物肠道正常菌群，为条件致病菌，能引起腹泻和败血症、脑膜炎、脑脓肿等肠道外感染。
本属细菌有动力，无芽胞，无荚膜。兼性厌氧，在营养琼脂和血琼脂生长良好，在MAC、EMB、SS琼脂平板上呈乳糖发酵型菌落。弗劳地枸橼酸杆菌可产生H2S，在SS和HE琼脂上形成有黑色中心的菌落。枸橼酸杆菌属的生化特性为：KIA：A/KA＋＋，动力＋，脲酶－/＋，IMViC＋/－＋－＋，精氨酸脱羧酶＋，赖氨酸脱羧酶－。种间鉴别见表10-7。
表10-7 枸橼酸杆菌属种间鉴别
生化反应
弗劳地
枸橼酸杆菌
异型
枸橼酸杆菌
无丙二酸盐
枸橼酸杆菌
无丙生物群
枸橼酸杆菌
吲哚 d ＋＋＋
H2S (＋) －－－
KCN中生长＋－＋＋
丙二酸盐利用（－）＋－－
侧金盏花醇发酵－＋－－
棉子糖发酵 d －－＋
蜜二糖发酵 d －－＋
注：＋：90％以上菌株阳性；－：90％以上菌株阴性；（＋）：76％～89％阳性；（－）：76％～89％阴性；d：26％～75％阳性
（八）沙雷菌属
沙雷菌属包括8个种，即粘质沙雷菌、沙雷菌液化群、臭味沙雷菌、普城沙雷菌、深红沙雷菌、无花果沙雷菌、嗜虫沙雷菌、居泉沙雷菌。其中的粘质沙雷菌是重要条件致病菌。
本属代表种粘质沙雷菌有动力，无芽胞，无荚膜。兼性厌氧，室温下可产生粉色或红色。粘质沙雷菌生化特性为：KIA：KA――，IMViC――＋＋，动力＋，鸟氨酸与赖氨酸脱羧酶、明胶酶、脂酶、DNA酶均＋。DNA酶阳性为本菌与其他相似菌鉴别的重要项目。常见菌种间鉴别见表10-8。
表10-8 沙雷菌属常见菌种间鉴别（阳性％）
生化反应粘质沙雷菌粘质沙雷菌生物Ⅰ群液化沙雷菌深红沙雷菌
DAN酶98 82 85 99
脂酶98 75 85 99
明胶酶（22℃）90 30 90 90
赖氨酸99 55 95 55
鸟氨酸99 65 95 0
L－阿拉伯糖0 0 98 100
D－阿拉伯醇0 0 0 85
D－山梨醇99 92 95 1
蔗糖98 100 98 99
棉子糖 2 0 85 99
红色色素有有无有
（九）多源菌属、哈夫尼亚菌属
多源菌属包括2个种，即聚团多源菌和弥散多源菌。多源菌属有动力，无芽胞，无荚膜。兼性厌氧，营养要求不高，在血平板上形成较大、黄色、不溶血的菌落。多源菌属主要生化特性为KIA：AA＋―，甘露醇＋，阿东醇―，动力＋，鸟氨酸脱羧酶、赖氨酸脱羧酶和精氨酸双水解酶均―。聚团多源菌和弥散多源菌间可用水杨苷试验鉴别，前者为＋，后者为―。
哈夫尼亚菌属分为蜂房哈夫尼亚菌及蜂房哈夫尼亚菌生物Ⅰ群。蜂房哈夫尼亚菌有动力，无芽胞，无荚膜。兼性厌氧，营养要求不高。哈夫尼亚菌属KIA：AA――，甲基红试验35℃时＋，25℃时―，V-P试验35℃时―，25℃时＋，鸟氨酸与赖氨酸脱羧酶＋，吲哚、脲酶、DNA酶均为―。蜂房哈夫尼亚菌和蜂房哈夫尼亚菌Ⅰ群可通过发酵麦芽糖、木糖试
验鉴别，前者均为＋，后者均为―。
（十）变形杆菌属、普罗威登斯菌属、摩根菌属
变形杆菌属包括4个种，即普通变形杆菌、奇异变形杆菌、产粘变形杆菌和潘氏变形杆菌。
本菌属呈多形性，有周身鞭毛，运动活泼，无芽胞，无荚膜。
兼性厌氧，营养要求不高。在普通营养琼脂和血琼脂平板上，普通变形杆菌和奇异变形杆菌多可迁徙生长。在肠道选择鉴别培养基上可形成圆形、扁平、无色透明、乳糖不发酵的菌落，产硫化氢的菌株在SS培养基上菌落中心可呈黑色。
抗原种类多样，变形杆菌某些X菌株的OX19、OX2、OXk抗原与立克次体有共同抗原。临床上用这些X菌株代替立克次体抗原与患者血清做定量凝集试验，辅助诊断立克次体病，称外斐试验。
变形杆菌属的生化特性为KIA：KA＋＋，苯丙氨酸脱氨酶＋，能迅速分解尿素，IMViC －/＋＋――。本属代表种普通变形杆菌和奇异变形杆菌的区别为前者吲哚、鸟氨酸＋，后者则相反。菌种间的具体鉴别见表10-9。变形杆菌属、普罗威登斯菌属、摩根菌属共同特征为苯丙氨酸脱氨酶阳性，不发酵乳糖，其鉴别见表10-10。
表10-9 变形杆菌属种间鉴别
奇异变形杆菌产粘变形杆菌潘氏变形杆菌
普通变形杆菌
生物2群生物3群
吲哚－－－＋＋
鸟氨酸脱羧酶＋－－－－
七叶苷水解－－－＋－
麦芽糖发酵－＋＋＋＋
木糖发酵＋－＋＋＋
水杨苷水解－－－＋－
氯霉素敏感性S S R V S 注：S：敏感；R：耐药；V：不定
表10-10 变形杆菌属与相似菌属的鉴别
变形杆菌属普罗威登斯菌属摩根菌属迁徙生长＋－－H2S ＋－－明胶液化＋－－西蒙枸橼酸盐 d ＋－
鸟氨酸脱羧酶 d －＋
注：＋：90％以上菌株阳性；－：90％以上菌株阴性；d：25％～75％阳性
普罗威登斯菌属包括5个种：产碱普罗威登斯菌、斯氏普罗威登斯菌、雷氏普罗威登斯菌、海氏普罗威登斯菌和拉氏普罗威登斯菌。普罗威登斯菌属形态染色、培养、生化反应特征与变形杆菌属相似，但无迁徙现象，脲酶－（雷氏除外），H2S－。在血平板上形成中等大小、湿润、灰白菌落；在MAC上为无色透明菌落。本属菌与摩根菌属的区别在于枸橼酸盐＋、鸟氨酸脱羧酶－，而后者结果相反。其种间鉴别见表10-11。普罗威登斯菌属与相似菌属的鉴别见表10-10。
表10-11 普罗威登斯菌属的种间鉴别
生化反应产碱普罗威登斯菌拉氏普罗威登斯菌斯氏普罗威登斯菌雷氏普罗威登斯菌脲酶－－ D ＋
枸橼酸盐＋－＋＋
肌醇－－＋＋
侧金盏花醇＋－－＋
阿拉伯糖－－－＋
海藻糖－－＋－
半乳糖－＋＋＋
摩根菌属只有摩根摩根菌1个种。摩根摩根菌的形态染色和生化反应特征与变形杆菌相似，但无迁徙现象，H2S-。摩根摩根菌与尿路感染、伤口感染及腹泻有关，为医院感染主要病原菌之一。摩根菌属与相似菌属的鉴别见表10-10。
（十一）耶尔森菌属
耶尔森菌属有11个菌种，其中与人类疾病密切相关的有3个菌种，即鼠疫耶尔森菌、小肠结肠炎耶尔森菌和假结核耶尔森菌，他们都是人兽共患病原菌。
1．鼠疫耶尔森菌
鼠疫耶尔森菌是甲类烈性传染病鼠疫的病原菌，俗称鼠疫杆菌。
鼠疫耶尔森菌为革兰阴性球杆菌，两极浓染，有荚膜，无芽胞，无鞭毛。兼性厌氧，最适温度为27℃～30℃，在普通培养基上可生长。在血琼脂上形成柔软、粘稠的粗糙菌落。在肉汤培养基中48h后逐渐形成菌膜，稍加摇动后菌膜呈钟乳石状下垂。
鼠疫耶尔森菌的生物学特征为分解葡萄糖产酸不产气，对大多数糖不分解；IMViC－＋――；动力、赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶、苯丙氨酸脱氨酶、脲酶、硫化氢均为－；不液化明胶，当穿刺培养时，培养物表面呈膜状，细菌沿穿刺线呈纵树状发育。与其他种间的鉴别见表10-12。
表10-12 耶尔森菌属种间鉴别
生化反应鼠疫耶尔森菌小肠结肠耶尔森菌假结核耶尔森菌
吲哚－ D －
鸟氨酸－＋－
25℃动力－＋＋
蔗糖－＋－
鼠李糖－－＋
纤维二糖－＋－
山梨醇－＋－
蜜二糖（－）－＋
注：＋：90％以上菌株阳性；－：90％以上菌株阴性；（－）：76％～89％阴性；d：26％～75％阳性；ND：无资料
因鼠疫为法定甲类烈性传染病，标本采集时应严格按操作规程进行，疑似标本须送指定部门进行鉴定，并报告本地区疾病控制中心。
2．小肠结肠炎耶尔森菌
小肠结肠炎耶尔森菌可寄居在多种动物体内，人类经粪-口途径或因直接接触而感染，多表现为小肠炎和结肠炎，症状与菌痢和阑尾炎相似。小肠结肠炎耶尔森菌中某些血清型引
起的肠道感染有上升趋势。
小肠结肠炎耶尔森菌为革兰阴性球杆菌，无芽胞，无荚膜，有周鞭毛。兼性厌氧，4℃～40℃均能生长，最适温度为20℃～28℃。在普通营养琼脂上生长良好，在肠道培养基（如MAC）和新耶尔森菌选择性琼脂（NYE）上呈无色、半透明、扁平较小的菌落。
小肠结肠炎耶尔森菌生化反应特征为：嗜冷性，在4℃增菌3周可分离纯化；22℃～25℃时有动力，37℃时无动力；脲酶＋，VP试验22℃～25℃时＋，35℃～37℃时－，鸟氨酸脱羧酶＋。
孝感学院生命科学技术学院实验报告 专业：学号：姓名：分数：实验一还原糖和总糖的测定——3,5-二硝基水杨酸比色法一、目的与要求 掌握还原糖和总糖测定的基本原理，学习比色法测定还原糖的操作方法和分光光度计的使用。 二、实验原理 还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖，如乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。利用糖的溶解度不同，可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来，对没有还原性的双糖和多糖，可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量（还原糖以葡萄糖含量计）。 还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物，3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系，利用分光光度计，在540 nm波长下测定光密度值，查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖和总糖的含量。由于多糖水解为单糖时，每断裂一个糖苷键需加入一分子水，所以在计算多糖含量时应乘以0.9。 三、实验材料、主要仪器和试剂 1．实验材料小麦面粉(1000 g) 2．主要仪器 （1）具塞玻璃刻度试管：20 mL×11 （2）滤纸（3）烧杯：100 mL×2 （4）三角瓶：100 mL×1 （5）容量瓶：100 mL×3 （6）刻度吸管：1mL×1；2 mL×2； 10 mL×1 （7）恒温水浴锅（8）煤气炉（9）漏斗（10）天平（11）分光光度计 3．试剂 （1）1mg/mL葡萄糖标准液 准确称取80 ℃烘至恒重的分析纯葡萄糖100 mg，置于小烧杯中，加少量蒸馏水溶解后，转移到100 mL容量瓶中，用蒸馏水定容至100 mL，混匀，4℃冰箱中保存备用。 （2）3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂 3,5－二硝基水杨酸（DNS）试剂：称取6.5 g DNS溶于少量热蒸馏水中，溶解后移入1000 mL 容量瓶中，加入2 mol/L氢氧化钠溶液325 mL，再加入45 g丙三醇，摇匀，冷却后定容至1000 mL。 （3）碘-碘化钾溶液：称取5 g碘和10 g碘化钾，溶于100 mL蒸馏水中。 （4）酚酞指示剂：称取0.1 g酚酞，溶于250 mL 70%乙醇中。 （5）6 M HCl和6 M NaOH各100 mL。（分别取59.19 mL 37 %浓盐酸和24克NaOH定容至100mL） 四、操作步骤 1. 制作葡萄糖标准曲线 批阅教师：年月日
生物化学实验报告册 1．实验前应认真预习实验指导，明确实验目的和要求，写出预实验报告。 2．进入实验室必须穿白大衣。严格遵守实验课纪律，不得无故迟到或早退。不得高声说话。严禁拿实验器具开玩笑。实验室内禁止吸烟、用餐。 3．严格按操作规程进行实验。实验过程中自己不能解决或决定的问题，切勿盲目处理，应及时请教指导老师。 4．严格按操作规程使用仪器，凡不熟悉操作方法的仪器不得随意动用，对贵重的精密仪器必须先熟知使用方法，才能开始使用；仪器发生故障，应立即关闭电源并报告老师，不得擅自拆修。 5．取用试剂时必须“随开随盖”，“盖随瓶走”，即用毕立即盖好放回原处，切忌“张冠李戴”，避免污染。 6．爱护公物，节约水、电、试剂，遵守损坏仪器报告、登记、赔偿制度。 7．注意水、电、试剂的使用安全。使用易燃易爆物品时应远离火源。用试管加热时，管口不准对人。严防强酸强碱及有毒物质吸入口内或溅到别人身上。任何时候不得将强酸、强碱、高温、有毒物质抛洒在实验台上。 8．废纸及其它固体废物严禁倒入水槽，应倒到垃圾桶内。废弃液体如为强酸强碱，必须事先用水稀释，方可倒入
水槽内，并放水冲走。 9．以实事求是的科学态度如实记录实验结果，仔细分析，做出客观结论。 实验失败，须认真查找原因，而不能任意涂改实验结果。实验完毕，认真书写实验报告，按时上交。 10．实验完毕，个人应将试剂、仪器器材摆放整齐，用过的玻璃器皿应刷洗干净归置好，方可离开实验室。值日生则要认真负责整个实验室的清洁和整理，保持实验整洁卫生。离开实验室前检查电源、水源和门窗的安全等，并严格执行值日生登记制度。 实验报告通过分析总结实验的结果和问题，加深对有关理论和技术的理解与掌握，提高分析、综合、概括问题的能力，同时也是学习撰写研究论文的过程。 1．实验报告应该在专用的生化实验报告本上、按上述格式要求书写。 2．实验报告的前三部分①实验原理、②实验材料、③实验步骤要求在实验课前预习后撰写，作为实验预习报告的内容。预习时也要考虑并设计好相应实验记录的表格。 3．每项内容的基本要求 实验原理：简明扼要地写出实验的原理，涉及化学反应时用化学反应方程式表示。 实验材料：应包括各种来源的生物样品及试剂和主要仪
《植物生理生化实验》复习习题 一、名词解释： 标准曲线:用标准溶液制成的曲线。 先配制一系列不同浓度的标准溶液， 在溶液最大吸收波长下，逐一测定吸光度， 然后用坐标纸以溶液浓度为横坐标，吸光度为纵坐标作图，若被测物质对光的吸收符合光的吸收定律，必然得到一条通过原点的直线，即标准曲线。 斐林（Folin）－酚试剂法:又称lowry法，它结合了双缩脲试剂和酚试剂与蛋白质的反应，是双缩脲方法的进一步发展，可利用其在650nm波长下的特定吸收进行比色测定。 茚三酮显色法: 游离氨基酸与茚三酮共热时，能定量生成紫色的二酮茚-二酮茚胺。其吸收峰在570nm，而且在一不定期范围内吸光度与游离氨基酸浓度成正比，因此可用分光光度法测定其含量。 茚三酮溶液与氨基酸共热，生成氨。 氨、茚三酮与还原性茚三酮发生反应，生成紫色化合物。 该化合物颜色的深浅与氨基酸的含量成正比，通过测定570nm 处的光密度，可测定氨基酸的含量。 氮素代谢:氮素及含氮的活体物质的同化、异化、排泄，总称为氮素代谢。 淀粉酶：水解淀粉和糖原的酶类总称 真空渗入: 指将叶片打孔放入注射器中，加水浸没，排出空气后用手指堵住前端小孔，同时把活塞向外抽拉，即可造成减压而排出组织中的空气，轻放活塞，水液即进入组织的方法。 离心技术: 根据物质颗粒在一个实用的离心场中的行为而发展起来的 是1.分离细胞器和生物大分子物质的必备的手段之一， 也是2.测定某些纯品物质的部分性质的一种方法。 差速离心法基于待测物质颗粒大小、密度、沉降速度的不同而得到分离。 电泳:各种生物大分子在一定pH条件下，可以解离成带电荷的颗粒, 这种带电颗粒在电场作用下，向着与其电性相反的电极移动 利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。 同工酶: 指催化同一种化学反应，但其酶本身分子结构和带电性质却有所不同的一组酶。 迁移率: 指带电颗粒在单位电场强度下的泳动速度。 溶液中带电粒子在电场中向着与它电性相反的电极移动，它的移动速度是电场和粒子的有效迁移率(m)的乘积，即：V=mE。
实验十二细菌常用生理生化反应实验结果观察 一结果观察 １葡萄糖发酵实验 直接观察试管, 试管变黄者为葡萄糖发酵阳性菌,不变者为阴性菌. 左边为恶臭假单胞菌，有气泡并变为黄色；右边为大肠杆菌, ２V. P. 反应和甲基红试验: 将培养好的液体培养基分装于两个干净的小试管中,在一管中滴入2-3滴甲基红试剂, 溶液变红的为甲基红阳性菌,不变的为甲基红阴性菌. 在另一管中加入V. P. 试剂,在37℃保温15分钟, 变红者为阳性菌,不变者为阴性菌. VP，图为右边为大肠杆菌，溶液变红，为阳性菌。 ３吲哚实验 在培养好的液体培养基中加入1厘米高的乙醚,振荡,静置分层,加入2-4滴吲哚试剂,在掖面交界出现红色者为吲哚反应阳性菌,不变者为阴性菌.
左边为大肠杆菌，出现红色阳性菌；右边为产气杆菌，颜色不变，阴 性菌。 ４硝酸盐还原实验 在点滴板上滴入革里斯试剂A液和B液，如过溶液变红说明有亚硝酸盐，为硝酸盐还原阳性菌，如果不变色需要再倒出部分培养基在另外的小孔中再滴如耳苯胺试剂，如果变蓝，说明此菌为阴性菌；如果不变色，说明此菌为硝酸盐还原强阳性菌． 右下方恶臭假单胞菌，加入革里斯试剂A、B后不变色，再加入二苯 胺试剂后变蓝，为阴性菌；左上方大肠杆菌为红色。 ５柠檬酸盐实验 直接观察斜面，斜面变兰色者为柠檬酸盐利用阳性菌，不变者为阴性菌．
左边产生蓝色，产气杆菌阳性；右边为大肠杆菌，阴性。 ６明胶水解 向培养好的明胶培养基中加入酸性氯化汞或三氯乙酸溶液，并铺满平板，菌落周围出现透明圈的菌为明胶水解阳性菌，没有透明圈的菌为阴性菌． 左边为大肠杆菌，出现透明圈，阳性；右边为枯草杆菌，阴性菌。 7 淀粉水解实验 向培养好的淀粉培养基平板上加入碘液，并铺满平板，菌落周围出现透明圈的菌为淀粉水解阳性菌，没有透明圈的菌为阴性菌．
一、实验目的： 1、熟悉工作曲线的制作方法及注意事项； 2、掌握3, 5-二硝基水杨酸（DNS）比色定糖的原理和方法； 3、掌握Folin-酚法测定蛋白质含量的原理和方法； 4、掌握酶蛋白分离提纯的原理； 5、掌握酶的比活力测定及其计算方法； 6、掌握酶促反应动力学中用双倒数法测定Km的方法； 7、运用正交试验法确定温度、pH值、离子浓度的最适条件。 称量技术： 1、了解电子天平的用途 2、了解电子天平的工作原理 3、掌握电子天平的使用方法 4、掌握电子天平使用前后的注意事项 离心技术： 1、了解离心机的基本原理和用途 2、了解离心机的类型和用途 3、了解离心机的型号和控制版面 4、掌握离心机的使用方法 5、掌握离心机使用的注意事项 层析技术： 1、了解层析技术的基本原理 2、了解层析技术的分类情况 3、了解各种层析技术的原理 4、掌握凝胶层析技术 光谱分析技术： 1、学习掌握紫外可见、荧光、红外光谱分析技术原理 2、了解仪器结构和分类 3、熟练掌握常用仪器的使用方法和注意事项 电泳技术： 1、了解电泳的基本原理 2、了解电泳的类型
3、学习SDS-PAGE测定蛋白质分子量的原理 4、掌握垂直板电泳的操作技术 5、掌握琼脂糖凝胶电泳的操作技术 6、了解转移电泳的基本原理和操作方法 7、了解双向电泳的基本原理和操作方法 二、实验原理： 1、蔗糖酶的提取： ①酵母菌的基本特征： 单细胞，椭圆形、圆形或柱形。长5-30μm，宽1-5μm。 ②生物材料破碎方法： （1）机械（匀浆）法 ①研钵 ②玻璃或Teflon研棒匀浆器（50mL）Teflon：聚四氟乙烯 先将剪碎的组织置于管中，再套入研杆来回研磨，上下移动，即可将细胞研碎，此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机高，适用于少量组织和脏器。 ③高速组织捣碎机（0.5-1L） 将材料配成稀糊状液，放置于筒内约1/3 体积，盖紧筒盖，将调速器先拨至最慢处，开动开关后，逐步加速至所需速度。此法适用于动物内脏组织、植物肉质种子等。 ④高压匀质机（XL） 高压下的细胞通过阀门流出时，细胞内外压力同时降低，但由于细胞膜的作用，胞外压力瞬间降至常压，而胞内压力相比之下降低较慢，从而在细胞内外形成压力差，使细胞膜破裂。 优点：快速，产热小，对蛋白损伤小，破碎效率高。一次破碎效率可达90%以上 （2）超声波处理法 用一定功率的超声波处理细胞悬液，使细胞急剧震荡破裂，此法多适用于微生物材料，常在30 至60Hz 频率下处理10-15 分钟，此法的缺点是在处理过程会产生大量的热，应采取相应降温措施。（3）反复冻融法 将细胞在-20度以下冰冻，室温融解，反复几次，由于细胞内的水形成冰粒而剩余的细胞液中盐浓度增高引起溶胀，使细胞结构破碎。设备简单、效率不高，时间长，注意蛋白酶！ （4）化学处理法 有些动物细胞可采用十二烷基磺酸钠(SDS)、去氧胆酸钠等细胞膜破坏。
生物化学实验报告 姓名：郭玥 学号： 3120100021 专业年级： 2012级护理本科 组别：第8实验室 生物化学与分子生物学实验教学中心
【实验报告第一部分（预习报告内容）：①实验原理、②实验材料（包括实验样品、主要试剂、主要仪器与器材）、③实验步骤（包括实验流程、操作步骤和注意事项）；评分（满分30分）：XX】 实验目的：1、掌握盐析法分离蛋白质的原理和基本方法 2、掌握凝胶层析法分离蛋白质的原理和基本方法 3、掌握离子交换层析法分离蛋白质的原理和基本方法 4、掌握醋酸纤维素薄膜电泳法的原理和基本方法 5、了解柱层析技术 实验原理：1、蛋白质的分离和纯化是研究蛋白质化学及其生物学功能的重要手段。 2、不同蛋白质的分子量、溶解度及等电点等都有所不同。利用这些性质的差别， 可分离纯化各种蛋白质。 3、盐析法：盐析法是在蛋白质溶液中，加入无机盐至一定浓度或达饱和状态，可 使蛋白质在水中溶解度降低，从而分离出来。蛋白质溶液中加入中性盐后，由 于中性盐与水分子的亲和力大于蛋白质，致使蛋白质分子周围的水化膜减弱乃 至消失。中性盐加入蛋白质溶液后由于离子强度发生改变，蛋白质表面的电荷 大量被中和，更加导致蛋白质溶解度降低，蛋白质分子之间聚集而沉淀。
4、离子交换层析:离子交换层析是指流动相中的离子和固定相上的离子进行可逆 的交换，利用化合物的电荷性质及电荷量不同进行分离。 5、醋酸纤维素薄膜电泳原理：血清中各种蛋白质的等电点不同，一般都低于pH7.4。 它们在pH8.6的缓冲液中均解离带负电荷，在电场中向正极移动。由于血清中 各种蛋白质分子大小、形状及所带的电荷量不同，因而在醋酸纤维素薄膜上电 泳的速度也不同。因此可以将它们分离为清蛋白（Albumin)、α1-球蛋白、α 2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白5条区带。 实验材料：人混合血清葡聚糖凝胶（G-25)层析柱 DEAE纤维离子交换层析柱饱和硫酸铵溶液 醋酸铵缓冲溶液 20%磺基水杨酸 1%BaCl 溶液氨基黑染色液 2 漂洗液 pH8.6巴比妥缓冲溶液 电泳仪、电泳槽 实验流程：盐析（粗分离）→葡聚糖凝胶层析（脱盐）→DEAE纤维素离子交换层析（纯化）→醋酸纤维素薄膜电泳（纯度鉴定） 实验步骤： （一）盐析+凝胶柱层析除盐：
2.1.8转基因植株在盐胁迫下的超氧化物歧化酶(SOD)活性测定 将转基因植株与非转基因对照植株继代于含有0.5% NaCl的MS固体培养上进行胁迫培养，培养条件为27±1℃，每天13 h、3000 lux光照。胁迫培养4 w后，取其叶片测定其SOD 活性，每个样品设3次重复，求其平均数，并进行多重比较。 2.1.8.1主要试剂及配方 （1）0.1 mol/l pH 7.8磷酸钠（Na2HPO4-NaH2PO4）缓冲液 A液（0.1 mol/l Na2HPO4溶液）：称取Na2HPO4·12H2O 7.163 g，用少量蒸馏水溶解后定容至200 ml，4℃冰箱中保存备用； B液（0.1 mol/l NaH2PO4溶液）：称取NaH2PO4·2H2O 0.780 g，用少量蒸馏水溶解后定容至50 ml，4℃冰箱中保存备用； 取上述A液183 ml与B液17ml充分混匀后即为0.1 mol/l pH 7.8的磷酸钠缓冲液，4℃冰箱中保存备用。 （2）0.026 mol/l甲硫氨酸（Met）磷酸钠缓冲液 称取甲硫氨酸（C5H11NO2S）0.388 g，用少量0.1 mol/l pH 7.8的磷酸钠缓冲液溶解后，再用相同磷酸钠缓冲液定容至100 ml，现用现配，4℃冰箱中保存可用1～2 d。 （3）7.5 × 10-4 mol/l NBT溶液 称取NBT（C40H30Cl2N10O6）0.153 g，用少量蒸馏水溶解后，定容至250 ml，现用现配，4℃冰箱中保存可用2～3 d。 （4）含1.0 μmol/l EDTA的20 μmol/l核黄素溶液 A液：称取EDTA 0.003 g，用少量蒸馏水溶解； B液：称取核黄素0.075 g，用少量蒸馏水溶解； C液：合并A液和B液，定容至100 ml，此溶液即为含0.1 mmol/l EDTA的2 mmol/l 核黄素溶液，避光保存（可用黑纸将装有该液的棕色瓶包好），4℃冰箱中可保存8～10 d，当测定SOD酶活时，将C液稀释100倍，即为含1.0 μmol/l EDTA的20 μmol/l核黄素溶液。 （5）含2% PVP的0.05 mol/l pH7.8磷酸钠缓冲液 取0.1 mol/l pH7.8的磷酸钠缓冲液50 ml，加入2 g PVP（聚乙烯吡咯烷酮），充分溶解后移入100 ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，充分混匀，4℃冰箱中保存备用。 2.1.8.2提取及测定方法 （1）称取1.0 g样品叶片于预冷的研钵中，加入4 ml预冷的提取介质（含2% PVP的0.05 mol/l pH7.8磷酸钠缓冲液），冰浴研磨匀浆，转入10 ml离心管，并用提取介质定容至
生物化学实验报告：蛋白质分子量的测定— —凝胶层析法 实验一蛋白质分子量的测定——凝胶层析法 一、实验目的 1.掌握凝胶层析的基本原理。 2.学习利用凝胶层析法测定蛋白质相对分子质量的实验技能。二、实验原理 凝胶层析法也称分子筛层析法，是利用具有一定孔径大小的多孔凝胶作固定相的层析技术。当混合物随流动相经过凝胶层析柱时，其中各组分按其分子大小不同而被分离的技术。该法设备简单、操作方便、重复性好、样品回收率高。凝胶是一种不带电的具有三维空间的多孔网状结构、呈珠状颗粒的物质，每个颗粒的细微结构及筛孔的直径均匀一致，像筛子，小的分子可以进入凝胶网孔，而大的分子则排阻于颗粒之外。当含有分子大小不一的蛋白质混合物样品加到用此类凝胶颗粒装填而成的层析柱上时，这些物质即随洗脱液的流动而发生移动。大分子物质沿凝胶颗粒间隙随洗脱液移动，流程短，移动速率快，先被洗出层析柱；而小分子物质可通过凝胶网孔进入颗粒内部，然后再扩散出来，故流程长，移动速度慢，最后被洗出层析柱，从而使样品中不同大小的分子彼此获得分离。若分子大小介于上述完全排阻或完全渗
入凝胶的物质，则居二者之间从柱中流出。总之，各种不同相对分子质量的蛋白质分子，最终于它们被排阻和扩散的程度不同，在凝胶柱中所经过的路程和时间也不同，从而彼此可以分离开来。 将凝胶装在柱后，柱床体积称为“总体积”，以Vt表示。实质上Vt是Vo，Vi与Vg三部分组成，Vo称为“孔隙体积”或“外水体积”，即存在于柱床内凝胶颗粒外面空隙之间的水相体积，相应于一般层析法中柱内流动相的体积；Vi为内体积，即凝胶颗粒内部所含水相的体积。Vg为凝胶本身的体积。洗脱体积与Vo与Vi之间的关系可用下式表示：Ve=Vo+KdVi 式中Ve为洗脱体积，自加入样品时算起，到组分最大浓度出现时所流出的体积；Kd为样品组分在二相间的分配系数，也可以说Kd是分子量不同的溶质在凝胶内部与外部的分配系数。它只与被分离的物质分子的大小和凝胶颗粒孔隙的大小分布有关，而与柱的长度粗细无关，也就是说它对每一物质为常数，与柱的物理条件无关。Kd可通过实验求得，上式可以改写为:Kd=(Ve-Vo)/Vi 上式中Ve为实际测得的洗脱体积；Vo可用不被凝胶滞留的大分子物质的溶液通过实际测量求得；Vi可g×Wr求得。因此，对一层析柱胶床来说，只要通过实际实验得知某一物质的洗脱体积就可算出它的Kd值。
生化大实验 实验报告 姓名： 学号： 专业： 班级： 实验班级： 单位： 指导老师：
实验1 多酚氧化酶（PPO）的分离提取 一、实验原理： 多酚氧化酶(PPO)能够通过分子氧氧化酚或多酚形成对应的醌，它是植物组织广泛存在的一种含铜氧化酶，位于质体、微体，可参与植物生长、分化、种皮透性及植物抗性的调节，属于末端氧化酶的一种。 植物受到机械损伤和病菌侵染后，PPO催化酚与O2氧化形成为醌，使组织形成褐变，以便损伤恢复，防止或减少感染，提高抗病能力。醌类物质对微生物有毒害作用，所以受伤组织一般这种酶的活性就会提高。另外，多酚氧化酶也可以与细胞其他底物氧化相偶联，起到末端氧化酶的作用。 蛋白质在不同浓度的盐溶液中的的溶解度不同，通过向溶液中加入适量的固体硫酸铵来调节粗提液的盐浓度从而可以将PPO蛋白从体系中析出，且大分子蛋白质不能通过透析膜。 二、实验目的： 通过本项实验，学习和了解蛋白质的提取、分离的基本原理和方法，掌握相关的仪器设备的正确使用的方法，以及蛋白质的提取分离的系统技术。 三、材料与试剂： 1.材料：马铃薯（两小组共称200g） 2.试剂：0.03M磷酸缓冲液pH 6.0（含0.02M巯基乙醇，0.001M EDTA，5%甘油，1%的聚乙烯吡咯烷酮）配制是配x10倍的浓缩液1000ml；固体硫酸铵； 0.03M磷酸缓冲液pH 6.0（含0.02M巯基乙醇，0.001M EDTA，0.005M MgCl2） 3.设备：试管与试管架；烧杯、玻璃棒；移液管、滴管等；试剂瓶；透析袋；过滤纱布；植物组织匀浆机；pH计和pH试纸；高速冷冻离心机； 四、操作步骤： 1.两小组共称取200g土豆削皮后切成小块，加入300ml缓冲液A，两者按1:1(W/V)比例匀浆1min； 2.用两层纱布将所得的浆液过滤； 3.将匀浆滤液装入200ml的离心管10000rpm离心5min； 4.上清液两组平分，每组150ml，加36.45g硫酸铵固体搅拌均匀后10000rpm离心5min； 5.取上清液定容至150ml，加入30.75g硫酸铵固体搅拌均匀后10000rpm离心8min，倒掉上清液得粗酶沉淀,用并加入10ml 0.03M磷酸缓冲液B复溶沉淀3-5min； 6.将所得溶液倒入透析袋中，用0.02M的KCl溶液透析至无硫酸铵根离子。 五、结果和分析： 实验所得的初酶液颜色为浅黄色，颜色浅，主要是实验过程中特别是匀浆以前速度较快酚类被氧化的少，从而最大程度的保留了PPO的活性；经过一个夜晚的透析，得到了澄清的略带黄色的液体，这样就为进一步的柱层析提供了优良材料。 六、讨论与结论： 1. 本实验在匀浆阶段应尽量快速，防止酚类充分暴露在空气中被氧化； 2．实验材料马铃薯在削皮前一定要清洗干净；
<<植物生理生化实验>>复习题及答题要点 出题人：陈福龙 一、名词解释： 1、分配层析法：是利用物质在两种不同的混合溶剂中的分配系数不同，而达到分离目的的一种实验方法。在一定条件下，一种物质在某种溶剂系统中的分配系数是一个常数即α=溶质在固定相的浓度（Cs）/溶质在流动相的浓度（Cl）。 2、水势：任一体系水的化学势（μw）和纯水的化学势（μ°w）之差，除以水的偏摩尔体积（V W）所得到的商值，表示为：水势Ψw= （μw—μ°w）/V W=Δμw-/ V W 3、电泳: 是指带电粒子在电场中向与其自身所带电荷相反的电极方向移动的现象。 4、同工酶:指催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组酶。 5、荧光现象:叶绿素提取液在透射光下呈绿色，在反射光下呈暗红色或棕红色的现象。 6、自由基:共价键均裂产生的具有奇数个电子或不配对电子的原子、原子团、分子或离子。 7、分光光度法:是利用物质对某一波长的光有着很强的光吸收，具有特定的吸收光谱，利用分光光度计来测定其最大光吸收值，通过光吸收值与该物质浓度之间的比例关系来定性、定量测定该物质的一种实验方法。 8、诱导酶:植物体内本身不含某种酶，当加入特定的诱导物，诱导产生的酶，它的含量在诱导物存在下显著提高，这种诱导物一般是该酶底物本身或底物的类似物。 9、还原糖:具有自由醛基或酮基的单糖（如葡萄糖、果糖）和某些二糖（如麦芽糖、乳糖等）。 10、电渗现象: 电场中，液体相对于固体支持物的相对移动的现象。 二、问答题： 1、简述纸层析的基本原理？ 答：纸层析是以滤纸作为支持物的分配层析法，溶剂系统由有机溶剂和水组成，水和滤纸纤维素有较强的亲和力，因而其扩散作用降低形成固定相；有机溶剂和滤纸亲和力弱，所以滤纸毛细管中自由流动，形成流动相，层析时将滤纸一端进入层析溶剂，有机溶剂连续不断的通过点有样品的原点处，使其中的溶质依据本身的分配系数在两相间进行分配。由于混合液中各种氨基酸的α值不同，其在两相中的分配数量及移动速率（即化移率R f值）就不同，从而达到分离的目的。移动速率R f=原点到层析点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离。
微生物实验报告 微生物的生理生化实验 侯汶青201300140031 组别：周四下午五组 同组者：李璇、李倩茜实验完成时间：2014年12月6号 一、实验目的 1、证明不同微生物对各种有机大分子物质的水解能力不同，从而说明不同微生物有着不同的酶系统。 2、掌握进行微生物大分子物质水解试验的原理和方法。 3、了解糖发酵的原理，掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。 4、了解吲哚和甲基红试验的原理以及其在肠道细菌鉴定中的意义和方法。 5、熟习生理生化反应培养基的配制原理和一般方法步骤。 6、巩固无菌实验操作。 二、实验器材 1、菌种： 枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌（大分子水解实验）； 大肠杆菌、变形杆菌（糖发酵实验）； 大肠杆菌、产气杆菌（吲哚实验）； 大肠杆菌、产气杆菌（甲基红实验）； 2、培养基： （1）固体淀粉培养基，固体油脂培养基（淀粉和油脂的大分子水解实验）；（2）葡萄糖发酵培养基、乳糖发酵培养基试管每组共5支，而且内装有倒置的德汉氏小管（糖发酵实验）； （3）蛋白胨水培养基（吲哚实验） （4）葡萄糖蛋白胨水培养基（甲基红实验） 3、溶液和试剂： 卢戈氏碘液，乙醚，吲哚试剂，甲基红试剂，蒸馏水，去离子水、氢氧化钠溶液、中性红试剂、溴甲酚紫乙醇溶液等 4、仪器或其他用具： 成套培养皿，试管，玻璃棒、酒精灯，烧杯，德汉氏小管，接种环、吸管、滴管、洗耳球、无菌操作台、量筒、试管架等 三、实验原理 1、微生物的生理生化反应原理：在所有生活细胞中存在的全部生物化学反应称之为代谢。代谢过程主要是酶促反应过程。许多细菌产生胞外酶，这些酶从细胞中释放出来，以催化细胞外的化学反应。各种细菌由于具有不同的酶系统，致使它们能利用不同的底物，或虽然可以利用相同的底物，却产生不同的代谢产物，因此可以利用各种生理生化反应来鉴别细菌。 微生物代谢重要特征之一，就是代谢类型的多样性，因此使得微生物在自然
福建农林大学考试试卷（A卷） 2006 —2007 学年第二学期 课程名称：植物生理生化实验考试时间90分钟 专业年级班学号姓名___ 一、名词解释（每小题2分，共20分） 1、标准曲线： 2、离心技术： 3、同工酶： 4、酶活力： 5、诱导酶： 6、呼吸速率： 7、种子生活力： 8、抗逆性： 9、超氧化物歧化酶（SOD）： 10、光合速率： 二、填空题（每格1分，共32分） 1、测定植物组织中可溶性蛋白质含量的方法有_______________________、________________和___________________等。 2、在测定植物可溶性蛋白质含量时，绘制标准曲线是以为横坐标，以_ 为纵坐标。 3、用茚三酮显色法测定植物组织氨基酸含量时，茚三酮溶液与氨基酸共热生成_________，
_________与茚三酮和还原性茚三酮反应，生成________________。该化合物颜色的深浅与氨基酸的含量成_________，可通过测定__________nm处的光密度，求出氨基酸的含量。 4、在测定淀粉酶的活性时：α－淀粉酶不耐，β－淀粉酶不耐。 5、测定淀粉酶活性时，3，5－二硝基水杨酸试剂（DNS）的作用是_______________________和__________________。 6、聚丙烯酰胺凝胶电泳分离过氧化物同工酶实验中，电泳存在三大效应，分别是______________、________ ____ 和。 7、测定硝酸还原酶活性的方法有___________________和_________________________。 8、类胡萝卜素吸收光谱最强吸收区在_____ ，它不仅可以吸收传递光能，还具有_______ 的作用。 9、叶绿素溶液在透射光下呈色，在反射光下呈色。 10、在研究植物矿质元素中,常用的植物溶液培养法有__ 、 __ 和 __________。 11、水培时要选用黑色容器装营养液，这是为了防止______ 。 12、常用________ 法确定植物生长的必需元素。 13、用活体法测定硝酸还原酶的材料，取样前叶子需进行一段时间的光合作用，以积累_______________，产生更多________________，加速硝酸盐的还原。 14、植物光合速率测定方法有__________________和_________________等。 三、选择题(每题1分，共10分) ） A、底物浓度必须极大于酶浓度 B、酶浓度必须极大于底物浓度， D、酶能提高反应的平衡点C、与底物浓度无关 2、蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸。它们具有吸收紫外光的性质，其吸收高峰在（）波长处。 A、260nm B、650nm C、540nm D、280nm 3、斐林(Folin)-酚试剂法测定蛋白质浓度时，应选用的波长是（）。 A、260nm B、650nm C、540nm D、280nm 4、叶绿素提取时，叶片匀浆时加入少许CaCO3，其目的是（） A、使研磨更充分 B、加速叶绿素溶解 C、使叶绿素a、b分离 D、保护叶绿素 5、一般而言，正常植物叶片的叶绿素与类胡萝卜素的比值为（） A、2:1 B、3:1 C、1 :2 D、1:3
实验一糖类的性质实验 （一）糖类的颜色反应 一、实验目的 1、了解糖类某些颜色反应的原理。 2、学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法。 二、颜色反应 （一）α-萘酚反应 1、原理糖在浓无机酸（硫酸、盐酸）作用下，脱水生成糠醛及糠醛衍生物，后 者能与α-萘酚生成紫红色物质。因为糠醛及糠醛衍生物对此反应均呈阳性，故此反应不是糖类的特异反应。 2、器材 试管及试管架，滴管 3、试剂 莫氏试剂：5％α-萘酚的酒精溶液1500mL.称取α-萘酚5g，溶于95％酒精中，总体积达100 mL，贮于棕色瓶内。用前配制。 1％葡萄糖溶液100 mL 1％果糖溶液100 mL 1％蔗糖溶液100 mL 1％淀粉溶液100 mL ％糠醛溶液100 mL 浓硫酸 500 mL 4、实验操作 取5支试管，分别加入1％葡萄糖溶液、1％果糖溶液、1％蔗糖溶液、1％淀粉溶液、％糠醛溶液各1 mL。再向5支试管中各加入2滴莫氏试剂，充分混合。倾斜试管，小心地沿试管壁加入浓硫酸1 mL，慢慢立起试管，切勿摇动。 观察记录各管颜色。 （二）间苯二酚反应 1、原理 在酸作用下，酮醣脱水生成羟甲基糠醛，后者再与间苯二酚作用生成红色物质。此反应是酮醣的特异反应。醛糖在同样条件下呈色反应缓慢，只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时，才呈微弱的阳性反应。实验条件下蔗醣有可能水解而呈阳性反应。 2、器材 试管及试管架，滴管 3、试剂 塞氏试剂：％间苯二酚－盐酸溶液1000 mL，称取间苯二酚0.05 g溶于30 mL 浓盐酸中，再用蒸馏水稀至1000 mL。 1％葡萄糖溶液100 mL 1％果糖溶液100 mL 1％蔗糖溶液100 mL 4、实验操作
生物化学实验报告 动物营养研究所 树润 2015.10.12 猪血中超氧化物歧化酶（SOD）的分离纯化及活性测定一．实验目地 1.通过实验了解活性物质的分离提取。 2.了解超氧化物歧化酶的基本功能与应用。 二．实验原理 超氧化物歧化酶是一种酸性蛋白，是唯一以自由基为底物 的酶，具有清除自由基的功能酶，在酶分子上共价连接金属辅 基，因此它对热、PH、以及某些理化性质表现出异常的稳定性。 该酶首次从牛红细胞中分离得到，是一种蓝色含铜蛋白，之后， 研究发现该蛋白酶具有催化氧发生歧化反应的能力，因此将其 命名为超氧化物歧化酶1-2。超氧化物歧化酶是一种能专一地清 除超氧离子自由基（O2-）的金属酶，它具有抗衰老、抗辐射、 抗炎抗癌等作用，因而在医药（如关节炎、红斑狼疮等疾病的 治疗3）、化妆品(有防晒抗炎效果4)、食品工业（SOD灵芝菌5 等）等方面具有了广泛的应用前景。 超氧化物歧化酶是广泛存在于生物体的一种金属酶, 可催化超氧阴离子自由基(O2-)与H+发生歧化反应, 生成H2O2和 O2。SOD催化下述反应：2H++2O2-→H2O2+O2。
超氧化物歧化酶按照它所含金属离子的不同，可分为 Cu-Zn-SOD、Mn-SOD、Fe-SOD等三种。Cu-Zn-SOD为二聚体，呈 蓝绿色；Mn-SOD呈紫红色；Fe-SOD呈黄褐色。 SOD提取、纯化制备方法各异, 常用方法有经典的溶剂沉淀法、盐析法、超滤法和层析法等6-7。本实验采用有机溶剂沉淀法8以新鲜猪血为原料，从中提取SOD并进行纯化。酶活力测定可用以下方法：邻苯三酚自氧化法9、黄嘌呤氧化酶法、NBT光还原法、化学发光法、肾上腺素自氧化法、亚硝酸法等。 该实验SOD酶活性采用邻苯三酚自氧化法测定，酶活性单 位定义为：每毫升反应液中，每分钟抑制邻苯三酚自氧化速率 达50%的酶量定义为一个酶单位。 样品中蛋白质含量用考马斯亮蓝G-250法测定。考马斯亮 蓝G-250在游离状态下呈红色，与蛋白质结合呈现蓝色。在一 定围，溶液在595nm波长下的光密度与蛋白质含量成正比，可 用比色法测定，测定围1-1000μg。 三．实验试剂与器材 1.实验试剂 ACD抗凝剂、0.9%Nacl、丙酮、95%乙醇、氯仿、考马斯 亮蓝G-250、50mmol/L pH8.3磷酸缓冲液、10mmol/L EDTA钠盐 溶液、3mmol/L邻苯三酚溶液等 2.实验器材
生物化学实验报告 姓名：吴瑞 学号： 3120016004 专业年级： 2012级临床医学（妇幼保健) 组别：第四实验室 生物化学与分子生物学实验教学中心
一、实验室规则 1．实验前应认真预习实验指导，明确实验目的和要求，写出预实验报告。 2．进入实验室必须穿白大衣。严格遵守实验课纪律，不得无故迟到或早退。不得高声说话。严禁拿实验器具开玩笑。实验室内禁止吸烟、用餐。 3．严格按操作规程进行实验。实验过程中自己不能解决或决定的问题，切勿盲目处理，应及时请教指导老师。 4．严格按操作规程使用仪器，凡不熟悉操作方法的仪器不得随意动用，对贵重的精密仪器必须先熟知使用方法，才能开始使用；仪器发生故障，应立即关闭电源并报告老师，不得擅自拆修。 5．取用试剂时必须“随开随盖”，“盖随瓶走”，即用毕立即盖好放回原处，切忌“张冠李戴”，避免污染。 6．爱护公物，节约水、电、试剂，遵守损坏仪器报告、登记、赔偿制度。 7．注意水、电、试剂的使用安全。使用易燃易爆物品时应远离火源。用试管加热时，管口不准对人。严防强酸强碱及有毒物质吸入口内或溅到别人身上。任何时候不得将强酸、强碱、高温、有毒物质抛洒在实验台上。 8．废纸及其它固体废物严禁倒入水槽，应倒到垃圾桶内。废弃液体如为强酸强碱，必须事先用水稀释，方可倒入水槽内，并放水冲走。 9．以实事求是的科学态度如实记录实验结果，仔细分析，做出客观结论。实验失败，须认真查找原因，而不能任意涂改实验结果。实验完毕，认真书写实验报告，按时上交。 10．实验完毕，个人应将试剂、仪器器材摆放整齐，用过的玻璃器皿应刷洗干净归置好，方可离开实验室。值日生则要认真负责整个实验室的清洁和整理，保持实验整洁卫生。离开实验室前检查电源、水源和门窗的安全等，并严格执行值日生登记制度。
植物生理学实验指导 Prepared on 24 November 2020
植物生理学实验指导
目录
植物材料的采集、处理与保存 植物生理实验使用的材料非常广泛，根据来源可划分为天然的植物材料（如植物幼苗、根、茎、叶、花等器官或组织等）和人工培养、选育的植物材料（如杂交种、诱导突变种、植物组织培养突变型细胞、愈伤组织、酵母等）两大类；按其水分状况、生理状态可划分为新鲜植物材料（如苹果、梨、桃果肉，蔬菜叶片，绿豆、豌豆芽下胚轴，麦芽、谷芽，鳞茎、花椰菜等）和干材料（小麦面粉，玉米粉，大豆粉，根、茎、叶干粉，干酵母等）两大类，因实验目的和条件不同，而加以选择。 植物材料的采集和处理，是植物生理研究测定中的重要环节。在实际工作中，往往容易把注意力集中在具体的仪器测定上，而对于如何正确地采集和处理样品却不够注意，结果导致了较大的实验误差，甚至造成整个测定结果的失败。因此，必须对样品的采集、处理与保存给予足够的重视。 一、原始样品及平均样品的采取、处理 植物生理研究测定结果的可靠性（或准确性），首先取决于试材对总体的代表性，如果采样缺乏代表性，那么测定所得数据再精确也没有意义。所以，样品的采集除必须遵循田间试验抽样技术的一般原则外，还要根据不同测定项目的具体要求，正确采集所需试材。目前，随着研究技术的不断发展，应该不断提高采样技术的水平。 在作物苗期的许多生理测定项目中都需要采集整株的试材样品，在作物中后期的一些生理测定项目中，如作物群体物质生产的研究，也需要采集整株的试材样品，有时虽然是测定植株的部分器官，但为了维持器官的正常生理状态，也需要进行整株采样。 除研究作物群体物质生产外，对于作物生理过程的研究来说，许多生理指标测定中的整株采样，也只是对地上部分的采样，没有必要连根采样，当然对根系的研究测定例外。采样时间因研究目的而不同，如按生育时期或某一特殊需要的时间进行。除逆境生理研究等特殊需要外，所取植株应是能代表试验小区正常生育无损伤的健康植株。
大米和小麦赖氨酸、蛋白质、可溶性糖含量测定 大米和小麦是世界各国的主要粮食，更是我国各地的主食，研究分析它们的营养成分对人们日常生活的膳食有极高的指导意义。赖氨酸是人体必需氨基酸之一，能促进人体发育、增强免疫功能，并有提高中枢神经组织功能的作用；蛋白质是生命的物质基础，没有蛋白质就没有生命增强免疫功能； 糖类是人体新陈代谢的主要能源物质，可溶性糖为植物体内最易被人体吸收的糖。本文分析了大米和小麦赖氨酸、蛋白质和可溶性糖的含量，为大米和小麦的加工和开发利用以及人们日常膳食的搭配提供了参考。 1材料和方法 供示材料为云南农业大学购买的粗米粉和粗面粉，经过一定除杂处理。 赖氨酸含量的测定采用茚三酮法：赖氨酸侧链上的游离氨酸与茚三酮反应生成紫红色络合物，颜色深浅与赖氨酸含量正相关。蛋白质含量的测定采用双缩脲法：双缩脲与蛋白质反应发生紫红色反应，颜色深浅与蛋白质含量正相关。可溶性糖含量测定采用蒽酮法。 2结果与分析 2.1面粉和米粉中的赖氨酸含量 从表1可以看出，面粉和米粉的赖氨酸含量都极低，但很明显面粉赖氨酸含量远高于米粉赖氨酸含量。 表1 面粉和米粉中的赖氨酸含量 材料赖氨酸含量（%） 面粉0.16 米粉0.0369 2.2面粉和米粉中的蛋白质含量 从表2可以很明确的看出面粉和米粉中的蛋白质含量都较高且相差不明显，约在10%——15%之间。 表2 面粉和米粉中的蛋白质含量 材料蛋白质含量（%）
2.3面粉和米粉中的可溶性糖含量 表3 面粉和米粉中的可溶性糖含量 材料可溶性糖含量（%） 面粉 3.6 米粉0.43 显然，面粉和米粉中的可溶性糖含量都不高，相较而言，面粉中的可溶性糖含量远高于米粉。 通过分析3个实验的结果可知，在面粉和米粉中蛋白质含量是极高的，可以有效的补充人体所需蛋白质，赖氨酸和可溶性糖含量相对较低。 3讨论 赖氨酸是人体必须氨基酸，缺乏赖氨酸会造成疲劳，虚弱，恶心，呕吐，头晕，没有食欲，发育迟缓，贫血等。由于大米和小麦中的赖氨酸含量甚低，需要从其他富含赖氨酸的食物中摄取，如：肉类、禽、蛋、奶，鱼、虾、贝类、乳制品和豆类、黑芝麻等。 蛋白质同样是人体必须的物质，蛋白质的缺乏常见症状是代谢率下降，对疾病抵抗力减退，易患病，远期效果是器官的损害，常见的是儿童的生长发育迟缓、体质量下降、淡漠、易激怒、贫血以及干瘦病或水肿，并因为易感染而继发疾病。2000年，中国营养学会重新修订了推荐的膳食营养素摄入量，新修订的蛋白质
1 《植物生理生化实验》综合性实验总结 （2010-2011学年第一学期） 课程：《植物生理生化实验》—生化实验21学时 成绩： NaCl 溶液浸种对水稻种子萌发过程若干生化指标的影响 综 合 性 实验项目 面向专业 09级农学、植保、农资、园艺、设施、茶学、林学、水保、制药、生安等 本项目学时 14学时 （总学时45） 综合性实验总结报告： 题目：NaCl 溶液浸种对水稻种子萌发过程若干生化指标的影响。 摘要：目的：为农作物的耐盐育种和栽培提供试验数据。方法：将水稻种子分别用蒸馏水、60mmol/LNaCl 、600mmol/LNaCl 溶液浸种，本实验通过研究水稻种子在被不同浓度NaCl 浸种和清水浸种后的各种生理活性比较，运用分光光度计、离心机、电泳仪等仪器的使用方法以及电泳技术的基本操作、标准曲线的制作，找出水稻种子的耐盐程度和最适发育环境，探讨了NaCl 溶液浸种对水稻种子萌发过程若干生化指标的影响。结果：表明NaCl 溶液浸种对水稻种子萌发过程若干生化指标的影响与NaCl 溶液的浓度有关。在1~60mmol/L 的NaCl 溶液浸种能提高水稻种子的活力及淀粉酶、过氧化物酶、脂肪酶的活力，提高游离蛋白质的含量和降低游离氨基酸的含量，并且能促进水稻幼苗茎、叶和根系的生长。当浓度超过1~600mmol/L 时，浸种会降低水稻种子的活力及淀粉酶、过氧化物酶、脂肪酶的活力，降低蛋白质的含量和提高游离氨基酸的含量，并且水稻种子的萌发及幼苗的生长受到抑制。结论：低浓度的NaCl 溶液比高浓度的NaCl 溶液的促进效果更好。 关键词：生化指标、高低盐水处理、水稻种子 1.前言： 随着人口的增长和经济的发展，人类对农产品的需求量逐渐增大，由于土地的局限性，所以如何提高农作物的生长及生产的研究程度进一步加大。特别对于中国这个既是人口大国又是农业大国的国家来说，如何提高水稻的萌发及生长和生产的研究是非常重要的。本文研究了研究了高低浓度浸种处理对水稻种子萌发的剂量效应，选择最佳浓度和界定临界浓度，为提高水稻的高产和耐盐育种及栽培提供试验数据。 2.材料与方法： 2.1材料：同品种的60mmol/L 的NaCl 溶液和600mmol/LNaCl 溶液浸泡的新鲜水稻种子。 2.2方法： ①游离氨基酸总量测定②可溶性蛋白质含量的测定③淀粉酶活性的测定④过氧化物酶同工酶测定 2.2.1提取：准确称取分别在60mmol/L 的NaCl 溶液和600mmol/LNaCl 溶液浸泡的新鲜水稻种子1.0g ，置于研钵中，加入2ml 蒸馏水和少量石英砂充分研磨成匀浆。将匀浆倒入离心管中，，并且用蒸馏水洗涤残渣至离心管中。然后放在3000r\min 离心10min,将上清液倒入100ml 容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度，摇匀。 2.2.2检测：①取样品滤液1.0ml,放入20ml 试管中，加入蒸馏水1.0ml 加入0.5ml 乙酸- 氯酸盐缓冲液和3.0ml 水和茚三酮，根据吸光度在曲线上查得用回归方程计算 ②吸取上清液1.0ml 于试管中（另取一只试管加入1.0ml 蒸馏水作为空白），按照标准曲线制作的步骤加入试剂显色并测定其吸光度。 ③取10样品稀释极为淀粉酶稀释液，按照步骤加入试剂和反应后得到酶液，在540nm 波长下比色，记录结果。 ④制作胶体、点样、电泳 、剥胶染色、绘制酶谱条带。 2.2.3计算：①检测公式：氨基酸含量=(C*Vt*100)/(Vs*W) C ——标准曲线上查得的氨 实 验 内 容 简 介 本综合项目以水稻种子为材料，分别用蒸馏水、60ml /LNaCl 和600ml /LNaCl 溶液浸种→催芽→测定不同处理的发芽种子的游离氨基酸、可溶性蛋白质、淀粉酶和同工酶项目。实验要求：掌握分光光度计、离心机、电泳仪等仪器的使用方法以及电泳技术的基本操作、标准曲线的制作，并综合分析NaCl 浸种胁迫对水稻种子生理特性的影响机制。