2005年4月第12卷第4期 中国中医药信息杂志 ·23·
九香心痛舒对大鼠高脂血症血瘀模型的影响
彭芝配1,滕久祥1,韩国栋2,谭洁1,尹进1,方芳1,郜文辉1
(1.湖南中医学院,湖南 长沙 410007；2.上海同济大学附属同济医院,上海 200065)
摘要：目的 探讨九香心痛舒对实验性大鼠高脂血症血瘀模型血液流变学、血脂代谢、血小板颗粒膜蛋白(GMP-140)、一氧化氮(NO)的影响。方法 高脂饲料喂养所致大鼠高脂血症模型,在此基础上采用肾上腺素皮下注射加冰水刺激所致高脂血症血瘀模型；观察各组大鼠血液流变学、血脂代谢、GMP-140、NO改变的情况。结果 九香心痛舒能明显改善大鼠血液粘度(低切、中切、高切)、血浆粘度等血液流变学指标的变化(P<0.05),在某些方面优于阳性对照组；能明显降低血脂,改善血脂代谢(P<0.05)；抑制血小板活化、聚集；改善血管内皮功能,促进一氧化氮(NO)生成、释放(P<0.05)。结论 以活血化瘀、行气化痰立法的九香心痛舒能够改善高脂血症大鼠血瘀状态下的血脂异常代谢,纠正血液流变学的异常改变,抑制血小板活化、聚集,改善血管内皮功能,促进NO生成、释放。
关键词：九香心痛舒；高脂血症；血瘀模型；大鼠
中图分类号：R289.11 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2005)04-0023-02
The Effects of Jiuxiangxintongshu (JXXTS) on Blood Stasis Rats with Hyperlipidemia PENG Zhi-pei1, TENG Jiu-xiang1, HAN Guo-dong2 et al (1.Hunan College of TCM, Changsha 410007, China；2.The Affiliated Tongji Hospital of Shanghai Tongji University, Shanghai 200065,China)
Abstract：Objective To explore the effects of JXXTS on hemorheology, serum lipid metabolism, GMP-140 and NO in blood stasis rats with hyperlipidemia. Method The hyperlipidemia model was prepared with high fat feeding method, and the model of blood stasis model was established with adrenaline subcutaneous injection and being socked in ice water. The changes of hemorheology, serum lipid metabolism, GMP-140 and NO were observed. Result JXXTS can significantly improve the indices changes of blood viscosity (at high, medium and low shear rate) and serum lipid metabolism. The effects of it was superior to the contrast groups in some aspects. JXXTS can remarkably decrease serum lipid, improve the serum lipid metabolism, inhibit the activation and aggregation of platelet, ameliorate vascular endothelial function and promote the production and release of NO (P<0.05). Conclusion JXXTS, which was set by the therapeutic principle of cultivating blood circulation to eliminate stasis and activating qi to resolve phlegm could improve the abnormal serum lipid metabolism, rectify the abnormal changes of hemorheology, inhibit the activation and aggregation of platelet, improve the vascular endothelial function and promote the production and release of NO.
Key word：Jiuxiangxintongshu；hyperlipidemia；blood stasis model；rat
九香心痛舒多年来用于防治冠心病、高脂血症,获得了较好的临床疗效。前期部分药理研究证明能降低血小板颗粒膜蛋白(GMP-140)的含量,促进NO生成、释放。本实验在原大鼠高脂血症模型基础上,采用肾上腺素皮下注射加冰水刺激致高脂血症血瘀模型,旨在进一步探讨九香心痛舒对实验性大鼠高脂血症血瘀复合模型血液流变学、血脂代谢、GMP-140、NO的影响及其作用机制。现将实验结果报道如下。
1 实验材料
1.1 动物
SD大鼠40只,体重180～220 g,雌雄各半,湖南中医学院实验动物中心提供。
1.2 药物
基金项目：湖南省科委重大专项资助项目(03SSY1003-3) 九香心痛舒水煎浓缩液(法半夏、延胡索、木香、陈皮、郁金等),自制,水煎后浓缩至含原药材6 g/mL(相当于70 kg 成人4倍临床等效剂量)。通脉降脂片由吉林四平泰康制药有限公司生产,批号20020714,0.21 g/片(配制成4倍临床等效剂量,0.18 g/mL)。
1.3 试剂
高脂饲料(自制,配方：2%胆固醇、10%猪油、0.2%甲基硫氧嘧啶、1%蛋黄粉、1%猪胆盐、85.8%基础饲料,以上试剂均为市售)；肝素钠,天津市生物化学制药厂生产,批号020508,5 mg/ml；TC试剂盒,上海荣盛生物技术有限公司生产,批号030523；TG试剂盒,浙江东瓯生物工程有限公司产品,批号030503；LDL试剂盒,浙江东瓯生物工程有限公司产品,批号030516；HDL试剂盒,上海荣盛生物技术有限公司生产,批号030519；GMP-140放免试剂盒,苏州大学医学院血栓研究
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所生产,批号030628；NO试剂盒,南京建成生物工程研究所产品,批号030827。
1.4 仪器
高速冷冻离心机(TGL16M),台式变频,中国长沙科威实业有限公司生产；三用串热恒温水箱(SHH·W21),北京长源实验设备厂生产；可见光分光光度仪(VIS-723G型),北京瑞利分析仪器公司生产。
2 实验方法
2.1 分组
取合格SD大鼠40只,雌雄各半。按性别、体重分层,再随机分为4组,除空白组(A组)外,其余3组统一造模；造模成功后再按性别、体重分层,再随机分为模型组(B组)、九香心痛舒组(C组)、通脉降脂片组(阳性对照组,简称D组),每组10只。
2.2 给药
空白组以普通饲料喂养,其余大鼠以高脂饮料喂服10 d,形成高脂血症。选取空白组大鼠10只、随机选取造模大鼠10只,剪尾取血检测血脂,以判定造模是否成功。各给药组大鼠按体重予以相应剂量药物灌胃[1 mL/(200 g·只)]；空白组和模型组予以相应剂量的生理盐水灌胃,连续灌胃4周。同时,除空白组之外,其余各组仍予以高脂饲料喂养。临取样前1 d,除空白组外,各组大鼠均予以8 μg/㎏肾上腺素皮下注射,2 h后将大鼠放入冰水中,5 min后取出,2 h后再次予以8 μg/㎏肾上腺素皮下注射以造成血瘀模型,然后禁食12 h,最后1次灌胃后2 h用20%的乌拉坦麻醉,颈动脉插管取血[1]。
2.3 检测指标
测血液流变学、TC(CHO酶法)、TG(GPO-PAP法)、LDL(PVS 法)、HDL(比色法)含量、血浆中GMP-140(放免法)、血清中NO(还原酶法),各指标测定由湖南中医学院第一附属医院检验中心和微生物教研室协助完成。
2.4 统计学方法
计量资料数据均用—x±s表示,进行方差分析；方差齐时,各组间两两比较用单因素方差分析；方差不齐时用非参数检验或Tamhane's T2检验。上述统计过程均由SPSS11.5版统计软件完成。
3 结果(见表1～表3)
4 讨论
九香心痛舒为临床应用多年的经验方,其药物组成为：法半夏、延胡索、木香、莪术、槟榔等9味中药。方中法半夏燥湿化痰、降逆止呕、消痞散结；延胡索活血行气止痛；木香行气止痛；莪术破血祛瘀,行气止痛；槟榔行气利水。全方以行气化痰、活血祛瘀药为主,体现了气、瘀、痰同治,心、肝、脾共调的整体辨证精神。现代药理研究表明,半夏具有显著的降血脂作用,能阻止或延缓高脂血症的形成,并对高脂血症有一定的治疗作用；延胡索能增加冠脉血流量、改 表1 各组大鼠血液流变学的变化(—x±s,n=10,mPa·s)
全血粘度
组别剂量
低切 中切 高切
血浆粘度
A组14.41±2.49*10.84±1.76* 5.16±0.71* 1.16±0.07* B组23.05±2.6516.17±1.13 8.03±0.39 2.46±0.10 C组 30 15.82±3.21*11.61±2.06* 5.76±0.86* 1.50±0.10*▲D组 0.916.41±3.29*12.65±2.37* 6.93±1.49* 1.44±0.19*▲ 注：与B组比较,*P<0.05；与A组比较,▲P<0.05(下同)
表2 各组大鼠血脂的变化(—x±s,n=10,mmol/L)
组别
剂量
(g/kg)
TC TG LDL HDL
A组 1.88±0.25* 1.42±0.30* 0.36±0.26* 1.09±0.17* B组15.10±1.76 2.88±0.56 11.12±1.82 3.38±0.47 C组30 5.01±0.96*▲1.58±0.48* 3.49±0.97*▲7.22±0.81*▲D组 0.9 5.35±1.04*▲1.98±0.61*▲ 4.75±0.66*▲6.43±0.93*▲ 表3 各组大鼠GMP-140及NO的变化(—x±s,n=10,mmol/L) 组别 剂量(g/kg) GMP-140(个) NO(μmol/L)
A组 97.22±5.09*18.57±2.28*
B组 209.77±11.68 11.52±1.77
C组 30 135.11±4.76*▲21.14±1.94*▲
D组 0.9 143.56±4.53*▲ 8.74±1.48*▲#注：与C组比较,#P<0.05
善心肌供氧；莪术能增加血流量；木香能明显抑制血小板聚集性,有较强的扩血管作用[2]。
血液流变学实验结果显示：两个实验中的模型组大鼠血液流变学各项指标均升高,与血瘀证相一致；九香心痛舒组大鼠血液流变学各项指标均降低,可改善实验动物的血液流变性,具有活血化瘀作用。提示九香心痛舒通过较强的疏通经脉、使气血来复的活血化瘀作用,改善高脂血症状态下异常的血液流变性,从而达到降粘解聚的作用。血脂代谢实验结果显示：模型组的血脂明显出现异常改变,TC、TG、LDL明显升高,虽然HDL也升高,但HDL升高的幅度远没有LDL升高的幅度高,这样导致脂质代谢紊乱,处于高脂状态；提示九香心痛舒能显著降低TC、TG、LDL,升高HDL,使脂质代谢趋向于正常,从而改善高脂状态,预防和延缓动脉粥样硬化的发生和进程,起到防治心脑血管疾病的目的。GMP-140及NO实验结果显示：九香心痛舒可明显降低GMP-140的含量,有效抑制血小板活化、聚集,防止血栓形成；促进NO生成、释放,改善血管内皮功能；具有防治高脂血症及冠心病的作用。
参考文献：
[1] 施新猷.现代医学实验动物学[M].北京：人民卫生出版社,2000.342
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[2] 陈 奇.中药药理研究方法学[M].北京：人们卫生出版社,1993.112.
(收稿日期：2004-10-14)
高血压动物模型高血压病是全身小动脉痉挛引起血管外周阻力增加的直接后果,小动脉的痉挛与遗传/精神刺激、应激、肾脏缺血、肾上腺皮质的作用及钠的作用等诸多因素有关，目前动物高血压模型的复制多以不同角度模拟高血压这些易患因素而形成。所用动物模型有自发性高血压大鼠(SHR)、神经原型、肾外包扎型和醋酸脱氧皮质酮(DOCA)盐型高血压大鼠、肾血管型高血压狗、盐敏感性和盐抵抗性高血压大鼠等。（一）、神经原型高血压模型：可用狗、大白鼠和家兔等，通过机能性方法或物理方法作用于动物神经系统而诱发条件反射性高血压和皮层性高血压模型。 1、神经精神刺激：强烈的声、逛、电刺激，条件反射冲突等可以引起动物高级神经中枢强雷兴奋及血压升高。缺点是这种血压升高不能持久，同时，动物对相同刺激有适应的倾向，因此不能建立持久的高血压模型。 2、去除压力感受器神经：用电损伤动物的孤束或用6-羟多巴胺破坏孤束核的儿茶酚胺神经元，使减压反射中枢失去调整血压的功能，可建立慢性高血压模型，但是有一部分动物可能在手术后短期内死亡。（二）自发性高血压大鼠模型 Okamoto等将血压为~的雄性Wistar大鼠与血压为17，3~的同种雌鼠交配，其子代选择血压高者作为近亲交配，三代后，多数动物血压超过24KPa，他们称之为自发性高血压大鼠（SHR）。通过不断选种，到1969年获得了近交系SHR，至1986年该系已传到第80代。 SHR的后代100%发生高血压。一般在出生后血压随年龄而逐渐升高，据第30~32代统计，生后第10周雄鼠血压平均为±，雌鼠为±，此后还会继续升高，常可超过。血压升高机制：在高血压大鼠生长的早期，其血管阻力持续增加，血压升高，心肌肥大，机体的肾素-血管紧张素系统激活，这一过程持续到生存晚期，并发展为更严重的心肌肥大和充血性心功能衰退。随着高血压的持续发展，高血压大鼠出现了与人类高血压患者相似的并发症——脑和心肌损害，以及肾硬化。优点：自发性高血压大鼠从许多方面讲，如发病机制、高血压心血管并发症、外周血管阻力变化、对盐的敏感性等都与人类高血压患者相似，是目前国际公认最接近于人类原发性高血压的动物模型。故其广泛应用于医学基础试验研究中，如SHR高血压形成的电生瑰研究，在肾素血管紧张素系统的研究，在内皮素方面的研究，在丝裂素活化蛋白激酶方面的研究，血管结构与功能方面的研究，都已取得了一定的进展；又如，在受体水平阻断肾素-血管紧张素醛固酮系统，来探讨高血压性心肌重塑的可能机制，也在用自发性高血压大鼠模型。另外，该模型特别是用于人类高血压的研究及高血压药物筛选。如坎地沙坦在高血压大鼠脑缺血的神经保护作用的研究，亦用自发性高血压模型。缺点：饲养条件高，价格较贵，遗传育种麻烦，需要一定时间，且易变种或断种，若大量使用尚存在一定困难。（三）肾外包扎型高血压模型血压升高机制：肾外异物包扎，可致肾周围炎，在肾外形成一层纤维素性鞘膜，压迫肾实质造成肾组织缺血，使肾素形成增加，血压上升。选用120～150g的大鼠。麻醉后，呈俯卧位固定，背部下方垫一高约2～3cm的沙袋，剪去手术视野的毛，用％洗必太酒精消毒皮肤，从第10胸椎到第3腰椎处沿脊椎中线切开皮肤，在左侧季肋下～2cm和距脊椎1cm处用小血管钳分开肌肉，用两指从腹下部将肾脏自创口中挤出，小心地将肾脏与周围组织剥离，将双层乳胶膜剪成“X”形，绕肾门将肾脏交叉包扎，然后在相对侧切开，取出右肾，分离后切除，分别缝合肌肉和皮肤创口。皮下注射1～2万单位青霉素G。手术所用器械必须高压消毒，只要在75％乙醇中浸泡30min，临用时用煮沸过的生理盐水冲洗一下，用毕后仍浸入乙醇中。手术后可加饮1％氯化钠溶液作为促进因素。（四）、肾性高血压模型 Gold-blatt高血压模型有双肾及单肾模型。双肾模型是指动物保留两侧肾脏，但使一肾或二肾动脉狭窄，所以又称为二肾一夹或双肾双夹型。单肾模型为切除一侧肾脏，狭窄保留肾的肾动脉，及一肾一夹型。这三种模型的动物都能发生长期稳定的高血压。 1、一肾一夹（左侧肾动脉狭窄+右肾切除）血压升高机制主要是由于钠潴留和肾素血管紧张素系统激活以及交感神经活性增强。优点：该模型由于成功率较低，血压不能持续上升，限制了其使用范围，目前较少使用。 2、两肾一夹型（左
实验动物学综述 题目：《高脂血症动物模型的探讨》姓名：张阳慧 学号： 2010109118 院系专业班级：硕2010级12班生理学任课老师刘政江老师 付建华老师
高脂血症动物模型的探讨 张阳慧综述司军强?审校 （石河子大学医学院民族高发病与地方病教育部重点实验室电生理研究室石河子 832002） 摘要：随着生活水平日益提高,高脂血症( hyperlipidemia) 发病率在逐年升高,大量流行病学调查和研究均表明,高脂血症是导致动脉粥样硬化(AS) ,冠心病、糖尿病等多种疾病最重要的的危险因素之一。高脂血症已经成为研究热点,但至今尚未明显突破,除了其他原因外,理想的动物模型(animal model) 制备可能也是制约其发展的重要原因。在研究高脂血症的模型动物中,有野生型、自然缺损和基因修饰的,动物种类包括大鼠、小鼠、兔、金黄地鼠、豚鼠和小型猪等。本文就对先天性、化学物质诱导的和转基因动物模型作一综述,为研究高脂血症的模型选择提供依据。 关键词: 高脂血症; 动物模型; 文献标识码: A Discussion on the animal model of hyperlipidemia Yanghui Zhang, Si Jun-qiang? （Division of Electrophysiology, Key Laboratory of Xinjiang Endemic and Ethnic Diseases, Shihezi University Medical College, Xinjiang Shihezi, 832002） Abstract:With the increasing standard of living, hyperlipidemia incidence has increased year by year, a large number of epidemiological surveys and studies show that hyperlipidemia is a cause of atherosclerosis(AS), coronary heart disease, diabetes and the risk factors of other important disease . Hyperlipidemia is the hot point in the medicine field, but has not been broken through. Besides other reason, the experimental animal models play an important role in the study of the disease. In the study of animal models of hyperlipidemia, there are wild-type,natural defects and genetic modification, the animal species are including , rats, mice, rabbits, hamsters, guinea pigs and small pigs. To provide information for the choice of the animal models for the study of hyperlipidemia, congenital,chemical - induced and transgenic models were introduced in the review. Key words：hyperlipidemia ; animal model； 高脂血症( hyperlipidemia) 又称脂质代谢紊乱或异常, 是导致脂肪肝、动脉粥样硬化等多种疾病的重要因素。随着发病率的持续增加, 高脂血症的病因学、预防和治疗依然是医学界研究的热点。然而至今药物治疗尚未取得明显突破, 究其原因, 除了其它因素而外, 高脂血症动物模型的制备也可能是影响该类药物发展的重要原因之一, 因此, 选择理想的高脂血症动物模型是推进高脂血症研究进程的关键。本文就近年来高脂血症动物模型的研究概况作一综述, 为该领域的研究者正确合理选择高脂血症动物模型提供依据。 1常见高脂血症模型动物的种类及特点 1.1 大鼠建立大鼠高脂血症模型, 方法简单, 成本适中, 采血量较大, 可以满足一次做多种指标, 且模型建立的方法最多。更重要的是大鼠的食性与人类相似, 所形成的病变与人类早期病理改变相似, 且适应性较强, 是目前国内研究脂质代谢最多的实验动物。但大鼠有对抗动脉粥样硬化形成的能力, 不宜作为抗动脉粥样硬化药物
龙源期刊网 https://www.doczj.com/doc/4e9913535.html, 三种小鼠实验性高脂血症模型效果的比较分析 作者：哈建利张明军夏涛 来源：《科教导刊》2015年第26期 摘要目的：筛选出一种理想的小鼠高脂血症动物模型造模方法。方法：参考相关文献选取三种小鼠高脂血症动物模型配方并略作调整，制成乳剂给小鼠灌胃，分别在2w、4w、6w时取尾静脉血，测定血清中TG、TC、LDL和HDL含量。结果：三种高脂配方均可不同程度地导致小鼠血清中脂代谢紊乱，形成高血脂动物模型。结论：在20%三磷酸甘油酯和10%胆固 醇的基础上加入3%胆酸钠，灌胃4w就可形成理想的小鼠高脂血症动物模型。 关键词高脂血症小鼠模型分析 中图分类号：R589 ; 文献标识码：A ; ; DOI：10.16400/https://www.doczj.com/doc/4e9913535.html,ki.kjdkz.2015.09.078 Comparative Analysis of Three Experimental Rats Hyperlipidemia Models HA Jianli[1]， ZHANG Mingjun[1]， XIA Tao[2] （[1]Nursing School， Hubei Polytechnic Institute， Xiaogan， Hubei 432000; [2]Teaching & Research Section of Environmental Hygiene， Tongji Medical School， Huazhong University of Science & Technology， Wuhan， Hubei 430030） Abstract Objective： To choose an ideally modeling method of rats hyperlipidemia model. Methods： By referring to relevant documents， choose three experimental rats hyperlipidemia models， make into emulsions to perfuse rats' stomachs， and sample tail vein blood after 2 weeks，4 weeks and 6 weeks separately， to measure TG， TC， LDL and HDL contents in blood serum. Results： The three models result in rat lipid metabolic disorder in different degrees， to form hyperlipidemia models. Conclusions： By adding 3% sodium cholate liquor into 20% triglycerol phosphate and 10% cholesterol， perfuse rats' stomachs for 4 weeks to form an ideal rats hyperlipidemia model. Key words Hyperlipidemia; rat; model; analysis 随着我国经济的不断发展，人们生活水平不断提高，高脂血症（hyperlipidemia）的发病率在我国已呈逐年上升趋势。高脂血症是机体脂代谢紊乱的重要标志，也是动脉粥样硬化、心脏
2006年5月第16卷 第5期 中国比较医学杂志 CHINESE J OURNAL OF COMPAR ATIVE MEDICINE May ,2006Vol .16 No .5 综述与专论 若干实验性高血压大鼠模型的介绍 程轶群,李晓辉 (第三军医大学基础医学部,重庆 400038) 【摘要】 高血压是我国最常见的心血管疾病,而实验性高血压大鼠模型在高血压研究中扮演着重要的角色.本文对目前若干实验性高血压大鼠模型建立的方法以及它们的主要特点和应用进行了综述。 【关键词】 高血压;大鼠;模型,动物 【中图分类号】R544.1 【文献标识码】A 【文章编号】1671-7856(2006)05-0305-04 Introduction of Some Models of Hypertension in Experimental Rats C HE NG Yi -Qun ,LI Xiao -Hui (The Basic Depart ment of The Third Military Medical University ,Chongq ing 400038,China ) 【Abstract 】 Hypertension is the most familiar cardiovascular disease in our country ,and the rat hypertens ion model play an important role in these studies .This text summarized the methods and characterics of some rat hypertension models . 【Key words 】 Hypertension ;Rat ;Model ,ani mal [基金项目]重庆市自然科学基金重点项目及攻关项目(No .20027537、No .20048256) [作者简介]程轶群(1979-),女,在读药理学硕士生,研究方向:心血管药理。E -mail :chengyiqun269998@sina .com [通讯作者]李晓辉,教授,博导。E -mail :xhl @mail .tmmu .com .cn 高血压是我国最常见的心血管疾病,其发生率在成年人中高达20%,不仅发病因素复杂众多,并且常有许多并发症,如脑卒中、心肌梗死、心力衰竭、 冠心病、糖尿病等。为了更好的研究高血压的发病机制,阐明各种药物的作用机理,并且开发出更多有效的药物,研究人员不断地努力尝试建立和应用各种高血压的动物模型,其中以大鼠模型最多,本文综述了目前若干实验性高血压大鼠模型建立的进展,以及它们的主要特点和应用。1 自发性高血压大鼠模型 国际上常用的原发性高血压的大鼠模型有:自发性高血压大鼠(SHR ,京都)、卒中易感型自发性高血压大鼠(SHR SP ,京都)、新西兰遗传性高血压大鼠(GH ,达尼丁)、以色列高血压大鼠(SBH ,耶路撒冷)、米兰高血压大鼠(MHS ,米兰)、里昂高血压大鼠(L H ,里昂)等。其中SHR 是最广泛应用的模型动物之一 [1] 。SHR 是1963年东京Okamoto 用 Wistar 大鼠培育而成的,其被毛呈白色。此鼠高血 压发生率高,在16周龄时高血压已形成,收缩压>21.28kPa ,无明显原发性肾脏或肾上腺损伤,心血管疾病发生率高。SHR 与人类原发性高血压形成 机制有相似之处,血压的升高均与外周血管阻力的增加有关,且对抗高血压药物有反应,因此,它是人类原发性高血压的研究及高血压药物筛选的较为理想的动物模型 [2] 。 2 转基因高血压大鼠模型 高血压病发病率高且病因复杂。临床研究发现其具有明显的家族倾向性,因而可能与遗传因素有关。从基因水平研究高血压病的发病机制是揭示这一疾病病因的根本途径。现已发现若干基因与发病有关,如肾素基因、血管紧张素转换酶基因、血管紧张素原基因、心房利钠因子基因等。目前,应用高血压相关基因制作转基因小鼠的报道已不胜枚举,而制作转基因大鼠的报道却屈指可数。大鼠是实验高血压学中广泛应用的经典动物,制作转基因大鼠有着更重要的理论和实际意义,但同时也有着较高的技术要求。