微生物限量采样方案
采样方案分为二级和三级方案，二级采样方案设有n、c、m值，三级采样方案设有n、c、m和M值。
n：同一批次产品应采集的样品件数
c：最大可允许超出m值的样品数
m：微生物指标可接受水平的限量值
M：微生物指标的最高安全限量值
例：n=5,c=2,m=100cfu/g,M=1000cfu/g,即从一批产品中采集5个样品，若5个样品的检测结果均小于或等于m值（≤100cfu/g），则这种情况是允许的，若≤2个样品的结果（X）位于m值和M值之间（100cfu/g≤X≤1000cfu/g），则这种情况也是允许的；若有3个及以上样品的检验结果位于m和M之间，则这种情况是不允许的；若有任一样品的检验结果大于M（>1000cfu/g），则这种情况也是不允许的。
0/25g a，标准限量，就是每25g样品不得检出。a通常为5次。
挥发性盐基氮：代表动物蛋白受微生物的作用程度，是动物蛋白新鲜度的代表。
MPN：基于泊松分布的一种间接计数方法，most probable number
GB 7718,直接向消费者提供的预包装食品标签，标示应包括食品名称、配料表、净含量和规格。生产者和经销商的名称、地址和联系方式、生产日期和保质期、贮存条件、食品生产许可证编号、产品标准代号及其他需要标识的内容。
ADI：每日允许摄入量 acceptable daily intake。
净含量字体高度≥4mm。
下列预包装食品豁免强制标示营养标签
1、生鲜食品如包装的生肉、生鱼、生蔬菜和水果、禽蛋等
2、乙醇含量≥0.5%的饮料酒类
3、包装总面积≤100cm3或最大表面面积≤20cm3的食品
4、现制现售的食品
5、包装的饮用水
6、每日食用量≤10g或10mL的预包装食品
7、其他法律法规标准规定可以不标识营养标签的预包装食品
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微生物限量采样方案 采样方案分为二级和三级方案，二级采样方案设有n、c、m值，三级采样方案设有n、c、m和M值。 n：同一批次产品应采集的样品件数 c：最大可允许超出m值的样品数 m：微生物指标可接受水平的限量值 M：微生物指标的最高安全限量值 例：n=5,c=2,m=100cfu/g,M=1000cfu/g,即从一批产品中采集5个样品，若5个样品的检测结果均小于或等于m值（≤100cfu/g），则这种情况是允许的，若≤2个样品的结果（X）位于m值和M值之间（100cfu/g≤X≤1000cfu/g），则这种情况也是允许的；若有3个及以上样品的检验结果位于m和M之间，则这种情况是不允许的；若有任一样品的检验结果大于M（>1000cfu/g），则这种情况也是不允许的。 0/25g a，标准限量，就是每25g样品不得检出。a通常为5次。 挥发性盐基氮：代表动物蛋白受微生物的作用程度，是动物蛋白新鲜度的代表。 MPN：基于泊松分布的一种间接计数方法，most probable number GB 7718,直接向消费者提供的预包装食品标签，标示应包括食品名称、配料表、净含量和规格。生产者和经销商的名称、地址和联系方式、生产日期和保质期、贮存条件、食品生产许可证编号、产品标准代号及其他需要标识的内容。 ADI：每日允许摄入量 acceptable daily intake。 净含量字体高度≥4mm。 下列预包装食品豁免强制标示营养标签 1、生鲜食品如包装的生肉、生鱼、生蔬菜和水果、禽蛋等 2、乙醇含量≥%的饮料酒类 3、包装总面积≤100cm3或最大表面面积≤20cm3的食品 4、现制现售的食品 5、包装的饮用水 6、每日食用量≤10g或10mL的预包装食品 7、其他法律法规标准规定可以不标识营养标签的预包装食品
受控状态： 北京港龙华佳食品有限公司 生产车间微生物验证 （含涂抹实验、食品接触面、车间环境） （依据QS市场准入有关规定编制） 文件编号：HJ-HACCP-02 编制人员：我 审核： 批准： 2013年10月10日发布2013年10月30日实施 北京港龙华佳食品有限公司
生产车间微生物验证 1范围 本标准规定了公司生产过程中微生物控制要求及验证计划。 本标准适用于公司食品生产过程中对微生物控制的验证活动。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准条款，凡是注明日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误内容）或修订版均不适用于本标准，然后，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本均适用于本标准。 GB5749 生活饮用水卫生标准 GB14881 食品企业通用技术规范 GB15980 一次性使用医疗用品卫生标准 GB4789.2食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定 GB4789.3 食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数 卫生标准操作程序（SSOP） 3职责 品管部对车间卫生状况进行监控，定期开展微生物验证，并根据检验结果对车间卫生进行管控，必要时委托化验室抽样检测。 4术语和定义 食品接触面：指生产过程中与所生产的食品直接接触的设备、工具器具、人、水、空气、包材等；或直接接触的门把手、电源开关等。 5验证计划 5.1工厂应按照GB14881等相关国家规定，采取适宜的措施控制食品生产经营过程中微生物。 5.2验证内容包括食品生产经营过程中微生物控制的各个环节（如原材料、人员、生产环境等）及采取的各种措施（如清洗、消毒措施、提高生产车间洁净度要求等） 5.3微生物控制标准应符合食品安全国家标准要求，具体见表一 5.4可通过以下环节的检测进行微生物控制效果验证 5.4.1生产用水 1）采样时间：生产过程中
水样的采集与保存 1 、范围 本标准规定了生活饮用水及其水源水样的采集，样品保存和采样质量控制的基本原则、措施和要求。 本标准适用于生活饮用水及其水源水样的采集和样品保存。 2、规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本规范的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB5749 生活饮用水卫生标准 GB/T12998 水质采样技术指导 GB/T12999 水质采样样品的保存和管理技术规定 GB17051 二次供水设施卫生规范 3、采样计划 采样前应根据水质检验目的和任务制定采样计划，内容包括：采样目的、检验指标、采样时间、采样地点、采样方法、采样频率、采样数量、采样容器与清洗、采样体积、样品保存方法、样品标签、现场测定项目、采样质量控制、运输工具和条件等。 4、采样容器 4.1 应根据待测组分的特征选择合适的采样容器。 4.2 容器的材质应化学稳定性强，且不应与水样中组分发生反应，容器壁能够吸收或吸附待测组分。 4.3 采样容器应可适应环境温度的变化，抗震性能强。 4.4 采样容器的大小、形状和重量相适宜，能严密封口，并容易打开且易清洗。 4.5 应尽量细口容器，容器的盖和塞得材料应与容器材料统一。在特殊情况下需用软木塞或橡胶塞时应用稳定的金属箔或聚乙稀薄膜包裹，最好有蜡封。有机物和某些微生物检测用的样品容器不能用橡胶塞，碱性的液体样品不能用玻璃塞。 4.6 对无机物、金属和放射性元素测定水样应使用有机材质得采样容器，如聚乙烯塑料容器等。 4.7 对有机物和微生物指标测定水样应使用玻璃材质的采样容器。 4.8 特殊项目测定的水样可选用其他化学惰性材料材质的容器。如热敏物质应该选用热吸收玻璃容器；温度高、压力大的样品或含痕量有机物的样品应选用不锈钢容器；生物（含藻类）样品应选用不透明的非活性玻璃容器，并存放阴暗处；光敏性物质应选用棕色或深色的容器。 5、采样容器的洗涤 5.1 测定一般理化指标采样容器的洗涤
微生物限度取样标准操作规程 1目的： 建立微生物限度取样标准操作程序。 2范围： 适用于微生物限度取样 3职责： QA对本SOP的实施负责。 4程序： 4.1 取样前的准备工作 接到检验申请单后，做好取样准备。 4.1.1用洁净、干燥已消毒的不锈钢（探子、镊子和玻璃管）作取样工具。 4.1.2洁净、干燥已消毒的具塞三角瓶、具塞广口瓶、无菌塑料袋作盛样工具。 4.2 取样原则及数量 4.2.1 按批号、随机抽样，以一次取样为准，不重复取样。 4.2.2 抽取样品时，凡发现有异常或可疑的样品，应先抽有疑问的样品，但因机械操作明显破裂的包装不得作为样品。 4.2.3凡能从药品、瓶口（外盖）内侧及瓶口周围，外观看出长螨、发霉、虫蛀以及变质的药品，可直接判为不合格品，无需再抽样检查。 4.2.4抽样量一般应为检验用量的3倍量。 4.3 取样 4.3.1 用酒精消毒棉球擦拭手和手指甲缝。 4.3.2 固体样品：用不锈钢探子在包装的不同部位取样，盛入无菌塑料袋或无菌玻 璃瓶内，封口，并贴好标签。 4.3.3液体样品：用玻璃管在容器的上、中、下三个部位取样，样品置无菌玻璃瓶内，瓶子内液面与瓶塞留一段空隙，封口，并贴好标签。 4.3.4 标签上应标明品名，批号，取样日期，地点，取样人签名。 4.3.5 封存好已打开的样包件，填写取样证，并贴在被取物料的包装上。 4.3.6 封口后，在检验前不得开启，并保证在运送过程中不受污染。
4.3.7 将样品送QC室，办理样品交接手续，填写样品交接记录。 4.4 取样器具的清洗、干燥、灭菌、贮存 4.4.1 清洗、干燥程序同原辅料取样标准工作程序中的内容。 4.4.2 干燥后，置180℃干烤2小时，保存于专用柜中，并注明有效期。
水样保存方法 一、水样保存的基本要求 1．减缓生物作用 2．减缓化合物或者络合物的水解及氧化还原作用 3．减少组分的挥发和吸附 二、一般的保存措施 1．冷藏或冷冻样品在4℃冷藏或将水样迅速冷冻，贮存于暗处，可以抑制生物活动，减缓物理挥发作用和化学反应速度。冷藏是短期内保存样品的一种较好方法，对测定基本无影响。但需要注意冷藏保存也不能超过规定的保存期限，冷藏温度必须控制在4℃左右。温度太低(例如≤0℃)，因水样结冰体积膨胀，使玻璃容器破裂，或样品瓶盖被顶开失去密封，样品受沾污。温度太高则达不到冷藏目的。 2．加入化学保存剂 （1）控制溶液pH 值：测定金属离子的水样常用硝酸酸化至pHl~2，既可以防止重金属的水解沉淀，又可以防止金属在器壁表面上的吸附，同时在pHl~2 的酸性介质中还能抑制生物的活动。用此法保存，大多数金属可稳定数周或数月。测定氰化物的水样需加氢氧化钠调至pHl2。测定六价铬的水样应加氢氧化钠调至pH8，因在酸性介质中，六价铬的氧化电位高，易被还原。保存总铬的水样，则应加硝酸或硫酸至pHl~2。（2）加入抑制剂：为了抑制生物作用，可在样品中加入抑制剂。如在测氨氮、硝酸盐氮和COD 的水样中，加氯化汞或加入三氯甲烷、甲苯作防护剂以抑制生物对亚硝酸盐、硝酸盐、铵盐的氧化还原作用。考试&大&在
测酚水样中用磷酸调溶液的pH 值，加入硫酸铜以控制苯酚分解菌的活动。 （3）加入氧化剂：水样中痕量汞易被还原，引起汞的挥发性损失，加入硝酸-重铬酸钾溶液可使汞维持在高氧化态，汞的稳定性大为改善。（4）加入还原剂：测定硫化物的水样，加入抗坏血酸对保存有利。含余氯水样，能氧化氰离子，可使酚类、烃类、苯系物氯化生成相应的衍生物，为此在采样时加入适量的硫代硫酸钠予以还原，除去余氯干扰。样品保存剂如酸、碱或其它试剂在采样前应进行空白试验，其纯度和等级必须 达到分析的要求。 水样的采集、保存和预处理 水样的采集和保存是水质分析的重要环节。要想获得准确、全面的水质分析资料，首先必须使用正确的采样方法和水样保存方法并及时送样分析化验。如果这个环节没有做好，那么，即使分析化验操作严格细致、准确无误，其结果也是毫无意义的。甚至得出错误的结论，耽误了工作。 水样采集和保存的主要原则是：(1)水样必须具有足够的代表性，(2)水样必须不受任何意外的污染。 水样的代表性是指样品中各种组分的含量都应符合被测水体的真实情况。为了得到具有真实代表性的水样就必须选择恰当的采样位置，合理的采样时间和先进的采样技术。 一、采样布点 在采集水样之前，必须做好有关的调查和了解。例如对于水体的采样，应事先了解流域范围内城市和工业的布局及废水排放情况，农业区化肥和农药的使用及污水灌溉情况以及河流的流量、河床宽度和深度等水文情况。对于工业废水的采样，则应事先了解
公共用品微生物的采样方法： 涂抹是公共用品微生物样品采集的常用方法之一 样品包括（六类不同公共用品的采样）：茶具、餐具；毛巾和枕巾、枕套；床单和被罩 等卧具；脸盆、脚盆和浴盆；拖鞋、理发用具。 采样所需设备：灭菌试管（内装10ml生理盐水）、100ml无菌烧瓶（内装50ml生理盐 水）、250ml无菌烧瓶（内装125ml生理盐水）、无菌棉拭子、灭菌剪刀、灭菌5cm X 5cm规格板、酒精灯、酒精棉球、工作服/白大衣、口罩、帽子、记号笔、灭菌镊子、采样记录单 采集样品前的准备： 1 穿好白大衣、戴好帽子及口罩 2 点燃酒精灯 3手消毒 一茶（餐）具微生物的采样方法 1 打开试管盖，用酒精灯烧灼试管口 2 随机抽取清洗消毒后准备使用的茶具或餐具，用灭菌生理盐水湿润棉拭子，在茶具或餐具与口唇接触处，1-1.5cm高度的内外缘各涂抹一周 3 用灭菌剪刀，剪去棉签与手接触部分，将棉拭子放入10ml生理盐水中 4 用酒精灯烧灼试管口，盖好试管盖 5 试管上标明样品编号 二毛巾、枕巾（套）微生物的采样方法 1 打开试管盖，用酒精灯烧灼试管口 2 随机抽取清洗消毒后准备使用的毛巾、枕巾（套），用灭菌生理盐水湿润棉拭子，在毛巾、枕巾（套）对折后两面的中央，各25cm2面积上，在灭菌规格板里用力均匀涂抹5次 3 用灭菌剪刀，剪去棉签与手接触部分，将棉拭子放入10ml生理盐水中 4 用酒精灯烧灼试管口，盖好试管盖 5 试管上标明样品编号 三床单和被罩等卧具微生物的采样方法 1 打开试管盖，用酒精灯烧灼试管口 2 随机抽取清洗消毒后准备使用的床单和被罩等用品，用灭菌生理盐水湿润棉拭子，分别在床单或被罩两端的中间，25cm2面积处以及床单或被罩中央部位25cm2面积上，在灭菌规格板里用力均匀涂抹5次 3 用灭菌剪刀，剪去棉签与手接触部分，将棉拭子放入10ml生理盐水中 4 用酒精灯烧灼试管口，盖好试管盖
微生物取样方法、微生物检测标准 举例一： 一、空气采样及检验方法 1培养基：普通营养琼脂平板，按GB4789.28中3.7条配制 2采样（空气沉降法） 2.1布点：面积小于30平方米的车间，设一对角线，在线上取3点，即中心一点，两端在距墙1米处各取一点；面积大于30平方米的车间，设东、西、南、北、中5个点，其中东、西、南、北点均距墙1米。 2.2采样高度：与地面垂直高度80-150厘米。 2.3采样方法；用直径为9厘米的普通营养琼脂平板在采样点上暴露20分钟盖上送检培养。 3培养：于37℃培养24小时。 4检测频率：每周 空气质量标准： 生车间、熟车间、成品车间：低于100个 半成品库、成品库：低于10个 二、设备的采样与检验方法 根据生产过程所要求的重点卫生部位，实验室对其进行涂抹采样，进行细菌总数检验。 1采样方法 1.1涂抹法（适用于表面平坦的设备和工器具产品接触面） 取经过灭菌的铝片框（框内面积为50平方厘米）放在需检查的部位上，用无菌棉球蘸上无菌生理盐水擦拭铝片中间方框部分，擦完后立即将棉球投入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。 1.2贴纸法（适用于表面不平坦的设备和工器具接处面） 将无菌规格纸（5×5厘米，纸质要薄而软）用无菌生理盐水泡湿后，于需测部分分别贴上两张，两张纸面积共50平方厘米，然后取下放入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。 2检验方法 2.1细菌总数的检验 将上述样液充分振摇，根据卫生情况，相应地做10倍递增稀释，选择其中2-3个合适的稀释度作平皿倾注培养，培养基用普通营养琼脂，每个稀释度作2个平皿，每个平皿注入1毫升样液，于37℃培养24小时后计菌落数。 结果计算 表面细菌总数（cfu/cm2）=平皿上菌落的平均数×样液稀释倍数/30×2 2.2致病菌的检验 沙门氏菌，参照GB4789.4进行 金黄色葡球菌，参照GB7918.5进行 4.检验合格标准：细菌总数10－100个∕cm2， 5.关键点：细菌总数≤10个∕cm2 一般区域：细菌总数≤100个∕cm2 三、人员手表面细菌污染情况的检验
手、设备表面微生物取样方法 一、携带物品： 酒精灯、75%酒精棉球若干、不锈钢剪、镊子、棉签、10ml生理盐水、一次性手套。 备注：不锈钢剪、镊子、棉签、10ml生理盐水须经高温蒸汽灭菌；10ml生理盐水根据实际所需准备多支；一次性手套需经辐照灭菌； 二、操作方法： 1、手取样 点燃酒精灯，取样人员戴上一次性手套，用棉签蘸取少许无菌生理盐水涂抹车间人员手正背面，反复两次，在涂抹时要转动棉签，使各部位能均匀。完成后用不锈钢剪剪去取样人员手持部段，然后将棉签投入10ml生理盐水中，盖上试管盖。 2、设备表面取样 点燃酒精灯，取样人员戴上一次性手套，用棉签蘸取少许无菌生理盐水涂抹设备平滑表面（面积自己预先估计一个大概数值，25、50或100cm2等），反复涂抹两次，在涂抹时要转动棉签，使各部位能均匀。完成后用不锈钢剪剪去取样人员手持部段，然后将棉签投入10ml生理盐水中，盖上试管盖。 三、细菌及大肠菌群的培养（具体操作时以GB4789.2-2010和GB4789.3-2003为准） 样液稀释：将放有棉棒的试管充分振摇。配成1：10样液。根据污染情况，进行十倍递增稀释，吸取1ml 的1：10样液加9ml无菌生理盐水中，混匀，此液为1：100稀释液，以此类推。 细菌总数： 1、以无菌操作，选择1～2个稀释度各取1ml样液分别注入到无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿，及时将冷却至46℃左右的平板计数琼脂培养基倾注平皿，每皿约15-20ml，转动平皿使其充分混合均匀。 2、待琼脂凝固后，将平皿翻转，置36℃±1℃培养48 h后计数。 3、结果报告：报告每25、50或100cm2数食品接触面或每只手的菌落数。 大肠菌群： 1、以无菌操作，选择3个稀释度各取1ml样液分别接种到乳糖胆盐发酵管内，每个稀释度接种三管。 2、将乳糖胆盐发酵管置于36℃±1℃培养24±2h。所有乳糖胆盐发酵管都不，则可报告为大肠菌群阴性，如有产气者，根据标准做证实实验。 3、结果报告：按乳糖胆盐发酵管产气管数，查MPN表报告每25、50或100cm2食品接触面或每只手的大肠菌群数值。
地表水采样步骤 本次采样地点为环保局北侧河流，主要监测项目为pH、DO、电导率、石油类、铁、锰、苯系物。 1.采样准备 根据采样内容制定采样方案，准备采样器材和现场测定仪器。 a.监测项目中，pH、DO、电导率为现场测定项目，因此在采样前pH计、DO仪、电导率仪应分别清洗和校准。 b.监测项目中，石油类、铁、锰、苯系物样品需分装并加保存剂。需准备石油类、铁、锰和苯系物样品保存剂、广泛pH试纸、一次性吸管、滤纸、纯水等物品。 c.根据规范要求，每批样品除悬浮物、溶解性总固体、油样外，其余每个项目加采不少于10%的现场平行样；每批采集样品数小于3时，加采100%现场平行样；每批样品除色度、臭、浊度、pH、透明度、悬浮物、电导率、溶解氧、溶解性总固体外，其余项目均需加采全程序空白样（全程序空白样采集方法：现场采样时，将纯水带至现场代替样品，采入样品瓶中，按规定加入固定剂，作为全程序空白样）。按要求准备好现场采样瓶：地表水中石油类用1000mL硬质无色透明玻璃瓶，铁、锰用100mL聚乙烯塑料瓶，苯系物用40mL棕色玻璃顶空瓶，每个采样瓶都应事先按要求做充分洗涤。 d.根据要求，准备好相应的采样器（聚乙烯塑料桶、铁皮桶、采油器等）以及现场采样记录和标签纸等。 2.现场采样 A.根据规范要求，该河流水面宽度小于5米，水深小于5米，采样点位应
为河流中泓线上水面下0.5米处，选择断面位置应避开死水区、回水区、排污口处，尽量选择顺直河段、河床稳定、水流平稳、水面宽阔、无急流、无浅滩处。 B.油类采样：采样前先破坏可能存在的油膜，用直立式采水器把玻璃材质容器安装在采水器支架上，将其放到水面下300mm深度，边采水边向上提升，在到达水面时剩余适当空间，油类需单独采样，采样瓶不能用采集水样冲洗。采集完毕，从支架上取下采样瓶，逐滴加入1+1HCl，盖紧瓶盖并轻轻摇匀，用吸管取少量样品，滴于pH试纸以测定pH值，滴加至pH≤2即可，贴好标签，同时另取同样玻璃瓶，加入纯水，加保存剂，采集全程序空白，贴好标签一并放入采样箱（框）中。 C.铁锰采样：用聚乙烯塑料桶采集，采样前用采样水将采水器和水样容器荡洗2-3次后再采集水样（除细菌总数、大肠菌群、油类、DO、BOD5、有机物、余氯等有特殊要求项目外，要先用采样水荡洗采样器与水样容器2-3次），采完加入浓硝酸（1L样品加入10mL），盖好盖子摇匀后贴上标签，同时采集平行样和全程序空白样，加入保存剂，贴上标签，装入采样箱中。 D.苯系物采样：用铁皮桶采集，采样前将采水器荡洗2-3次后再采集水样，有机物采样瓶采样前先加入少量1+10HCl保存剂再采集，有机物项目水样必须注满采样瓶，上部不留空间和气泡，并有水封口，采集完贴上标签，同时采集平行样和全程序空白样，加入保存剂，贴上标签，装入采样箱中。 E.现场采样记录：测定水温、pH、DO、电导率等指标。用经检定合格温度计直接插入采样点测量水温，用经校准后pH计、DO仪、电导率仪测定pH、DO、电导率，每个数据测定两次，认真填入采样记录中，同时记录水样感官指标（颜色、气味、水面有无油膜等）。
微生物无菌取样方法 在讨论无菌取样的原因与采集方法之前,必须要理解“无菌的”的这一术语,“无菌”一般用于取样中,意味着取样过程中,避免操作引起污染。一个无菌样品的采集,应该通过这样一种方式,即:在收集过程中,本身应避免污染,然后放入消毒容器中。 一、包装无菌取样的工具: 拥有正确的采取产品或加工过程的无菌取样器械工具就是至关重要的的。除非使用合适的采集工具,否则样品的完整性会被怀疑,甚至样品毫无意义。为了避免没有合适的取样工具,建议建立一个无菌取样的分析清单,来收集取样工具。如果可能盛样品的容器在最初进入加工区之前应当被预先标识,像样品号、取样日期、取样人等。这样可以使在不同的工厂条件下的样品取样更为方便一些。附加样品号码一般在样品采集中被正式确定下来,因此不用预先标明。 人员的工具设施,像工作服、发网或消毒处理过的清洁的鞋靴必须具备有助于证明采集者没有污染到食物产品或样品。 二、采样前准备 1、干冰或冰袋:如果使样品在贮运过程中保持冷却,一些种类的制冷剂就是必需的。检查观瞧 干冰袋子就是否有接触,如果泄漏可能污染样品,您也可以用湿冰,湿冰可以由工厂提供,然而取样前必须清楚这一点,如果想保持样品冷冻,干冰应在检验前获得。 2、灭菌容器及器具:无菌采样袋,袋子必须购买灭菌的,使用时只需撕掉封头,用提供的地方法 张开袋子,将样品放入,然后将袋子顶端卷起,并封口;必要时,取样用镊子,剪子等要灭菌处理。 ３、无菌手套:灭菌手套在采样中并非必须启用,如果一个产品在样品收集过程中必须被接触,那么最好让工人来做(加工处理产品的工人),将样品放入收集容器中,既然工人在生产过程中处理接触产品,那么我们就不能认为她们对产品又有附加的污染。当用手套时必须用一种避免污染的方式戴上,手套的大小必须适合工作的需要。 4、75％酒精棉球以及75%酒精喷壶,一次性帽子,口罩以及白大褂。 当采集无菌样品时,一条最重要的规则就是:千万别污染样品。 三、采样 抽样必须遵循无菌操作程序,抽样工具如整套不锈钢勺子、镊子、剪刀等应当高压灭菌,防止一切可能的外来污染。容器必需清洁、干燥、防漏、广口、灭菌,大小适合盛放检样。抽样全过程中,应采取必要的措施防止食品中固有微生物的数量与生长能力发生变化。确定检验批,应注意产品的均质性与来源,确保检样的代表性。常见的抽样方法有: 1.直接食用的小包装食品: 尽可能取原包装,直到检验前不要开封,以防污染。 2.桶装或大容器包装的液体食品:
河流水样采集及注意事项 玉溪师范学院徐斌 一、采样的具体方法 1、采样前的准备 根据采样任务单的内容，从样品室领取合适的采样工具、足够的样品容器和现场固定剂等用品。并逐一清点。本次采样主要用到以下工具： 瓶子、采水器（绳子）、GPS、相机（拍摄现场）、钢尺（量水深）、笔、记录本（记录表）、标签纸、pH计、溶氧仪、流速仪。 2、现场采样的实施 2.1测断面和采样点的位置的确定 （1）选择有桥的河流断面； （2）测量河流河面的宽度； （3）根据河宽设置采样点的位置和数量，并做记录； 采样点的位置和数量的设定依据为： ①位置 ▲河宽<50m时，只设置一条中泓垂线； ▲河宽50~100m时，在左右近岸有明显水流处各设一条垂线； ▲河宽100~1000m时，设左，中，右三条垂线（中泓，左，右近岸有明显水流处）； ▲河宽>1500m时，至少要设置5条等距离的采样垂线 ②数量（每条垂线上）； ▲当水深≤5m时，只在水面下0.5m处设一个采样点； ▲当水深5~10m时，在水面下0.5m处和河底以上0.5m处各设一个采样点； ▲当水深10~50m，设置3各采样点，即水面下0.5m处一点，河底以上0.5m处一点，水深1/2处一点 ▲当水深>50m时，要酌情增加采样点数目； 2.2样品的采集 在分时间单元采集样品时，测定pH、CODcr（采用重铬酸钾(K2Cr2O7)作为氧化剂测定出的化学耗氧量）、BOD5（5日生化需氧量）硫化物、油类、悬浮物、等项目的样品，不能混合采样，只能单独采样，全部用于测定。
2.2.1水样的类型及适用情况 为了不同的监测目的，需要采取不同的采样方法。水样一般可分为瞬间水样、混合水样和综合水样三种主要类型。但在某些情况下，还可能会有周期水样或连续水样等特殊的水样类型。总而言之，不同的水样类型适用于不同的水体状况和监测目的。 一、瞬间水样 从水体中不连续地随机（就时间和地点而言）采集的样品称之为瞬间水样。 瞬间水样无论是在水面、规定深度或底层，通常均可手工采集，也可以用自动化方法采集。在一般情况下，所采集样品只代表采样当时和采样点的水质，而自动采样是相当于在预定选择时间或流量间隔为基础的一系列这种瞬间样品。 下列情况适于瞬间采样： 1、流量不固定、所测参数不恒定时（如采用混合样，会因个别样品之间的相互反应而掩盖了它们之间的差别）； 2、不连续流动的水流，如分批排放的水； 3、水或废水特性相对稳定时； 4、需要考察可能存在的污染物，或要确定污染物出现的时间； 5、需要污染物最高值、最低值或变化的数据时； 6、需要根据较短一段时间内的数据确定水质的变化规律时； 7、需要测定参数的空间变化时，例如某一参数在水流或开阔水域的不同断面和（或）深度的变化情况； 8、在制定较大范围的采样方案前； 9、测定某些参数，例如溶解气体、余氯、可溶性硫化物、微生物、油脂、有机物和pH 时。 二、混合水样 在同一采样点上以流量、时间、体积或是以流量为基础，按照已知比例（间歇的或连续的）混合在一起的样品，此样品称之混合水样。 混合水样可自动或手工采集。 混合水样是几个单独样品的混合物，可减少分析样品，节约时间，降低消耗。 混合样品提供组分的平均值，因此在样品混合之前，应验证这些样品参数的数据，以确保混合后样品数据的准确性。样品在混合其中待测成分或性质发生明显变化时，则不能采用混合水样，要采取单样储存方式。 下列情况适于混合水样： 1、需测定平均浓度时； 2、计算单位时间的质量负荷； 3、为估价特殊的、变化的或不规则的排放和生产运转的影响。 三、综合水样 为了某种目的，把从不同采样点同时采得的瞬间水样混合为一个样品（时间应尽可能接近，以便得到所需要的数据），这种混合样品称作综合水样。 下列情况适于综合水样： 1、为了评价出平均组分或总的负荷，如一条江河或河川上，水的成分沿着江河的宽度和深度而变化时，采用能代表整个横断面上各点和它们的相对流量成比例的混合样品； 2、几条废水渠道分别进入综合处理厂时。 因为几股废水相互反应，可能对可处理性及其成分产生明显的作用。对其相互作用的数学预测可能不正确或不可能时，综合水样能提供更加有用的资料。
微生物无菌取样方法文件编码（GHTU-UITID-GGBKT-POIU-WUUI-8968）
在讨论无菌取样的原因和采集方法之前，必须要理解“无菌的”的这一术语，“无菌”一般用于取样中，意味着取样过程中，避免操作引起污染。一个无菌样品的采集，应该通过这样一种方式，即：在收集过程中，本身应避免污染，然后放入消毒容器中。一、包装无菌取样的工具： 拥有正确的采取产品或加工过程的无菌取样器械工具是至关重要的的。除非使用合适的采集工具，否则样品的完整性会被怀疑，甚至样品毫无意义。为了避免没有合适的取样工具，建议建立一个无菌取样的分析清单，来收集取样工具。如果可能盛样品的容器在最初进入加工区之前应当被预先标识，像样品号、取样日期、取样人等。这样可以使在不同的工厂条件下的样品取样更为方便一些。附加样品号码一般在样品采集中被正式确定下来，因此不用预先标明。 人员的工具设施，像工作服、发网或消毒处理过的清洁的鞋靴必须具备有助于证明采集者没有污染到食物产品或样品。 二、采样前准备 1. 干冰或冰袋：如果使样品在贮运过程中保持冷却，一些种类的制冷剂是必需的。 检查观看干冰袋子是否有接触，如果泄漏可能污染样品，你也可以用湿冰，湿冰可以由工厂提供，然而取样前必须清楚这一点，如果想保持样品冷冻，干冰应在检验前获得。
2. 灭菌容器及器具：无菌采样袋，袋子必须购买灭菌的，使用时只需撕掉封头，用 提供的地方法张开袋子，将样品放入，然后将袋子顶端卷起，并封口；必要时，取样用镊子，剪子等要灭菌处理。 3. 无菌手套：灭菌手套在采样中并非必须启用，如果一个产品在样品收集过程中必 须被接触，那么最好让工人来做（加工处理产品的工人），将样品放入收集容器中，既然工人在生产过程中处理接触产品，那么我们就不能认为他们对产品又有附加的污染。当用手套时必须用一种避免污染的方式戴上，手套的大小必须适合工作的需要。 4. 75%酒精棉球以及75%酒精喷壶，一次性帽子，口罩以及白大褂。 当采集无菌样品时，一条最重要的规则是：千万别污染样品。 三、采样 抽样必须遵循无菌操作程序，抽样工具如整套不锈钢勺子、镊子、剪刀等应当高压灭菌，防止一切可能的外来污染。容器必需清洁、干燥、防漏、广口、灭菌，大小适合盛放检样。抽样全过程中，应采取必要的措施防止食品中固有微生物的数量和生长能力发生变化。确定检验批，应注意产品的均质性和来源，确保检样的代表性。常见的抽样方法有： 1．直接食用的小包装食品： 尽可能取原包装，直到检验前不要开封，以防污染。 2．桶装或大容器包装的液体食品： （1）．抽样前摇动或用灭菌棒搅拌液体，尽量使其达到均质；
微生物限量采样方案 采样方案分为二级和三级方案，二级采样方案设有n、c、m值，三级采样方案设有n、c、m和M值。 n：同一批次产品应采集的样品件数 c：最大可允许超出m值的样品数 m：微生物指标可接受水平的限量值 M：微生物指标的最高安全限量值 例：n=5,c=2,m=100cfu/g,M=1000cfu/g,即从一批产品中采集5个样品，若5个样品的检测结果均小于或等于m值（≤100cfu/g），则这种情况是允许的，若≤2个样品的结果（X）位于m值和M值之间（100cfu/g≤X≤1000cfu/g），则这种情况也是允许的；若有3个及以上样品的检验结果位于m和M之间，则这种情况是不允许的；若有任一样品的检验结果大于M（>1000cfu/g），则这种情况也是不允许的。 0/25g a，标准限量，就是每25g样品不得检出。a通常为5次。 挥发性盐基氮：代表动物蛋白受微生物的作用程度，是动物蛋白新鲜度的代表。 MPN：基于泊松分布的一种间接计数方法，most probable number GB 7718,直接向消费者提供的预包装食品标签，标示应包括食品名称、配料表、净含量和规格。生产者和经销商的名称、地址和联系方式、生产日期和保质期、贮存条件、食品生产许可证编号、产品标准代号及其他需要标识的内容。 ADI：每日允许摄入量 acceptable daily intake。 净含量字体高度≥4mm。 下列预包装食品豁免强制标示营养标签 1、生鲜食品如包装的生肉、生鱼、生蔬菜和水果、禽蛋等 2、乙醇含量≥0.5%的饮料酒类 3、包装总面积≤100cm3或最大表面面积≤20cm3的食品 4、现制现售的食品 5、包装的饮用水
《环境微生物检测——采样方法》场景剧本题目：环境微生物检测——采样方法 主题曲、插曲待定 影片主要角色： 男1号梁总，25岁，业务主管（西装革履） 男或女2号小李，20岁，采样组组长（休闲） 女3号小黄，20岁，前台靓女（时尚的靓女） 男3号** 客户，25岁，（带领的衣服）（演成搞笑的土豪人物） 男或女4号：小王，19岁，某学校的顶岗实习生 第一场： 场景：公司前台（汇标公司的前台，甲在埋头做报表，乙在打电话和客户沟通，前台靓女在接水） 时间：上午 人物：前台靓女、客户，前台靓女以及同事两三个。 从门外来了一个大约25岁男性在张望。前台靓女赶紧走出来打开门。 前台靓女：您好。 客户：这里是汇标检测公司吗？ 前台靓女：是啊，有什么可以帮到您？ 客户：我是来自大中国建筑集团有限公司的××。最近我们一个大楼要竣工验收，需要对水质进行检测，你们能做吗？我们不差钱。 前台靓女指引客户坐下，倒一杯水。 前台靓女：这些业务我们做过很多。我们是第三方检测公司，有对该项目进行检测的资质，严格按照国家标准做的。 客户：对水质都监测什么呀？ 前台靓女：《建筑给水排水及采暖工程施工质量验收规范》GB50242-2002中明文规定：
“4.2.3 生活给水系统管道在交付使用前必须冲洗和消毒，并经有关部门取样检验，符合国家《生活饮用水标准检验方法》方可使用。 生活饮用水标准检验方法GB/T5750 – 2006，具体包括13个分项。包括水样采集和保存、感官性状和物理指标、有机物指标、消毒副产品指标、金属指标和微生物指标等等。 对建筑工程竣工验收水质检测，我们一般取pH、色度、浑浊度、臭味、肉眼可见物、总游离氯、耗氧量、菌落总数、大肠菌群等指标。 客户：听起来很专业，好！我信赖你们公司。 前台靓女：那麻烦您去我们主管办公室对签订合同有关事宜进行协商。 第二场： 场景：办公室 时间：某上午 人物：业务主管梁总、采样组组长小李 梁总：小李，这里刚接和大中国建筑集团有限公司签了一个合同。这可是一个大客户，你们要认真对待。你赶紧安排人过去采样吧。 小李：好的。我会尽快安排人过去采样。您放心吧。 第三场： 场景：公司走廊 时间：某上午 人物：采样组组长小李，实习生小王 小李：小王，我们明天要去广州海珠区琶洲那边对一个大楼的自来水进行采样，你准备一下。 小王：好的。我会马上去做。 第四场： 场景：实验室 时间：任意 人物：小李
微生物取样方法 举例一： 一、空气采样及检验方法 1培养基：普通营养琼脂平板，按中条配制 2采样（空气沉降法） 布点：面积小于30平方米的车间，设一对角线，在线上取3点，即中心一点，两端在距墙1米处各取一点；面积大于30平方米的车间，设东、西、南、北、中5个点，其中东、西、南、北点均距墙1米。 采样高度：与地面垂直高度80-150厘米。 采样方法；用直径为9厘米的普通营养琼脂平板在采样点上暴露20分钟盖上送检培养。 3培养：于37℃培养24小时。 4检测频率：每周 空气质量标准： 生车间、熟车间、成品车间：低于100个 半成品库、成品库：低于10个 二、设备的采样与检验方法 根据生产过程所要求的重点卫生部位，实验室对其进行涂抹采样，进行细菌总数检验。 1采样方法 涂抹法（适用于表面平坦的设备和工器具产品接触面） 取经过灭菌的铝片框（框内面积为50平方厘米）放在需检查的部位上，用无菌棉球蘸上无菌生理盐水擦拭铝片中间方框部分，擦完后立即将棉球投入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。 贴纸法（适用于表面不平坦的设备和工器具接处面） 将无菌规格纸（5×5厘米，纸质要薄而软）用无菌生理盐水泡湿后，于需测部分分别贴上两张，两张纸面积共50平方厘米，然后取下放入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。 2检验方法 细菌总数的检验 将上述样液充分振摇，根据卫生情况，相应地做10倍递增稀释，选择其中2-3个合适的稀释度作平皿倾注培养，培养基用普通营养琼脂，每个稀释度作2个平皿，每个平皿注入1毫升样液，于37℃培养24小时后计菌落数。 结果计算 表面细菌总数（cfu/cm2）=平皿上菌落的平均数×样液稀释倍数/30×2 致病菌的检验 沙门氏菌，参照进行 金黄色葡球菌，参照进行 4.检验合格标准：细菌总数10－100个∕cm2， 5.关键点：细菌总数≤10个∕cm2 一般区域：细菌总数≤100个∕cm2 三、人员手表面细菌污染情况的检验 1. 采样方法：用一支蘸有无菌生理盐水的棉拭子涂擦被检对象手的全部，反复两次，涂擦的时候棉拭子要相应地转动，擦完后，将手接触部分剪去，将棉拭子放入装有10毫升无菌生理盐水的试管内送检培养。 2. 检验方法：同工器具表面细菌总数检验方法。 3. 结果计算：每只手表面的细菌总数（cfu/只手）=平皿上菌落的平均数×样液稀释倍数 四、消毒液药效的微生物学鉴定法
微生物样品的取样方法及取样要求 样品取样的要求 1）在取样之前应确认货、证是否相符。2）取样过程中应避免与水等环境的不良因素影响，防止样品被污染。3）取样用具（如注射器、采血管、试管、探子、铲子、匙、取样器、剪子、样品袋等）必须是经过灭菌的。4）对采集的样品一般要求随机取样。若怀疑最有可能受病原体污染或者带有病原体的样品，可以进行选择取样。5）根据样品种类（如盒装、袋装、瓶装和罐装），应取完整密封的样品。如果样品很大，则需用无菌取样器取样；若样品是粉末，应边取边混合；若样品是液体的，通过振摇即可混匀；若样品是冷冻的，应保持冷冻状态（可放在冰内、冰箱的冷盒内或低温冰箱内保存），而非冷冻动物产品须保持在0℃~5℃中保存。6）取样前或取样后应在盛装样品的容器或样品袋上立即贴上标签，每件样品必须标记清除（包括品名、来源、数量、取样地点、取样人及取样日期）。7）获取有关取样产品的信息：如样品名称、批量大小、包装类型、包装容器体积、生产线、产品编号或控制号、批量号、标签内容、包装破损状况、产品存放地点或建筑物的基本情况等。8）当客户对所规定的取样程序有偏离、添加或删节的要求时，应详细记录这些要求和相关的取样资料，并记入包含检测结果的所有文件中，同时告知相关人员。9）当取样作为检测一部分时，实验室应有程序记录与取样有关的资料和操作。这些纪录应包括所用的取样程序、取样人的识别、环境条件（如果相关）、必要时有抽样地点的图示或其他等效方法，如果合适，还应包括取样程序所依据的统计方法。 食品微生物学的取样点
食品微生物的取样计划中常包括以下取样点：原料、生产线（半成品、环境）、成品、库存样品、零售商店、或批发市场、进口或出口口岸。原料的取样包括食品生产所用的原始材料、添加剂、辅助材料及生产用水等。生产线样品是指食品生产过程中不同加工环节所取的样品，包括半成品、加工台面、与被加工食品接触的仪器面以及操作器具等。对生产线样品的采集能够确定细菌污染的来源，可用于食品加工企业对产品加工过程卫生状况的了解和控制，同时能够用于特定产品生产环节关键控制点的确定和HACCP的验证工作。另外还可以配合生产加工，在生产前后或生产过程中对环境样品（如地面、墙壁、天花板以及空气等）取样进行检验，以检测加工环境的卫生状况。库存样品的取样检验可以测定产品在保质期内微生物的变化情况，同时也可以间接对产品的保质期是否合理进行验证。零售商店或批发市场的样品的检测结果，能够反映产品在流通过程中微生物的变化情况，能够对改进产品的加工工艺起到反馈作用。进口或出口样品通常是按照进出口商所签订的合同进行取样和检测的。但要特别注意的事，进出口食品的微生物指标除满足进出口合同或信用证条款的要求外，还必须符合进口国的相关法律规定，如世界上很多国家禁止含有致病菌的食品进口。不同样品的取样方法（1）包装食品①直接食用的小包装食品：尽可能取原包装，直到检验前不要开封，以防污染。②桶装或大容器包装的液体食品：取样前应摇动或用灭菌棒搅拌液体，尽量使其达到均质；取样时应将取样用具浸入液体内略加漂洗，然后再取所需量的样品，装入灭菌容器的量不应超过其容量的四分之三，以便于检验前将样品摇匀；取完样品后，应用消毒的温度计插入液体内测量食品的温度，并作记录。尽可能不用水银温度计测量，以防温度计破碎后水银污染食品；如为非冷藏易腐食品，应迅速将所取样品冷却至0℃~4℃。③桶装或大容器包装的
微生物限量采样方案 采样方案分为二级与三级方案,二级采样方案设有ｎ、c、m值,三级采样方案设有ｎ、c、ｍ与M值。 ｎ:同一批次产品应采集的样品件数 c:最大可允许超出m值的样品数 m:微生物指标可接受水平的限量值 M:微生物指标的最高安全限量值 例:ｎ=5,c=2,m=100ｃfu/g,M＝1０00cｆu/ｇ,即从一批产品中采集５个样品,若５个样品的检测结果均小于或等于m值(≤１00ｃｆｕ/ｇ),则这种情况就是允许的,若≤２个样品的结果(Ｘ)位于m值与M值之间(１０0cfｕ/ｇ≤X≤1０００cfu/g),则这种情况也就是允许的;若有3个及以上样品的检验结果位于m与M之间,则这种情况就是不允许的;若有任一样品的检验结果大于M(>1000cfｕ/g),则这种情况也就是不允许的。 0/25g a,标准限量,就就是每２5g样品不得检出。a通常为５次。 挥发性盐基氮:代表动物蛋白受微生物的作用程度,就是动物蛋白新鲜度的代表。 MPN:基于泊松分布的一种间接计数方法,mosｔ pｒobａble number GB 77１8,直接向消费者提供的预包装食品标签,标示应包括食品名称、配料表、净含量与规格。生产者与经销商的名称、地址与联系方式、生产日期与保质期、贮存条件、食品生产许可证编号、产品标准代号及其她需要标识的内容。 ADI:每日允许摄入量 aｃｃeptable daｉlｙ iｎtaｋｅ。 净含量字体高度≥４mm。 下列预包装食品豁免强制标示营养标签 1、生鲜食品如包装的生肉、生鱼、生蔬菜与水果、禽蛋等 2、乙醇含量≥0.５％的饮料酒类 3、包装总面积≤100cm3或最大表面面积≤２0cm3的食品 4、现制现售的食品 5、包装的饮用水
工作台（机械器具）表面与工人手表面采样与测试方法 样品采集： (1)取样频率： a)车间转换不同卫生要求的产品时，在加工前进行擦拭检验，以便了解车 间卫生清扫消毒情况。 b)全厂统一放长假后，车间生产前，进行全面擦拭检验。 c)产品检验结果超内控标准时，应及时对车间可疑处进行擦拭，如有检验 不合格点，整改后再进行擦拭检验。 d)实验新产品，按客户规定擦拭频率擦拭检验。 e)对工作表面消毒产生怀疑时，进行擦拭检验。 f)正常生产状态的擦拭，每周一次。 （2）采样方法： a) 工作台（机械器具）：用浸有灭菌生理盐水的棉签在被检物体表面（取 与食品直接接触或有一定影响的表面）取25cm2的面积，在其内涂抹10次，然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检。 b) 工人手：被检人五指并拢，用浸湿生理盐水的棉签在右手指曲面，从指 尖到指端来回涂擦10次，然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放入含10mL 灭菌生理盐水的采样管内送检。 （3）采样注意事项： 擦拭时棉签要随时转动，保证擦拭的准确性。对每个擦拭点应详细记录所在分场的具体位置、擦拭时间及所擦拭环节的消毒时间 细菌·大肠菌群的检测培养: 样液稀释：将放有棉棒的试管充分振摇。此液为1：10稀释液。如污染严重，可十倍递增稀释，吸取1ml 1：10样液加9ml无菌生理盐水中，混匀，此液为1：100稀释液。 细菌总数： （1）以无菌操作，选择1～2个稀释度各取1ml样液分别注入到无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿（平行样），将已融化冷至45℃左右的平板计数
琼脂培养基倾入平皿，每皿约15ml，充分混合。 （2）待琼脂凝固后，将平皿翻转，置36℃±1℃培养48 h后计数。 （3）结果报告：报告每cm2食品接触面中或每只手的菌落数 （4）细菌菌落总数检测 将已采集的样品在6h内送实验室，每支采样管充分混匀后取1m L样液，放人灭菌平皿内，倾注营 养琼脂培养基.每个样品平行接种两块平皿，置35℃士2'C培养48 h，计数平板上细菌菌落数。 Y2=A/SX10 Y3=AX10 式中: Y2一工作台表面细菌菌落总数，cfu/cm2; A 一平板上平均细菌菌落数; S 一采样面积，cmz; Y3 一工人手表面细菌菌落总数,cfu/只手。 4.操作图解： 1.手内侧涂抹 2.手外侧涂抹