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实验室常用的细菌作用及其选择

实验室常用的细菌作用及其选择
实验室常用的细菌作用及其选择

第一篇:JM109,DH5a,BL21这些感受态有何区别

1:DH5a菌株

DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。

基因型:F-,φ80dlacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA1

2:BL21(DE3) 菌株

该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。

基因型:F-,ompT, hsdS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3)

3:BL21(DE3) pLysS菌株

该菌株含有质粒pLysS,因此具有氯霉素抗性。PLysS含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

基因型:F-,ompT hsdS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3,pLysS ,Camr

4:JM109菌株

该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时,由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α-互补,从而显示β-半乳糖苷酶活性,由此很容易鉴别重组体菌株

基因型:recA1,endA1,gyrA96,thi-1,hsdR17,supE44,relA1,Δ(lac -proAB)/F’[traD36,proAB+,lacIq,lacZΔM15]

5:TOP10菌株

该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

基因型:F- ,mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC),φ80 ,lacZΔM15,△lacⅩ74,recA1 ,araΔ139Δ(ara-leu)7697, galU ,galK ,rps, (Strr) endA1, nupG

6:HB101菌株

该菌株遗传性能稳定,使用方便,适用于各种基因重组实验

基因型:supE44,hsdS20(rB-mB-),recA13,ara-14,proA2,lacY1,galK2,rpsL20,xyl-5,mtl-1,leuB6,thi-1

第二篇:JM110或 SCS110

大多数大肠杆菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶,前者可以在GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基,后者在CCA/TGC序列的第一个胞嘧啶 C-5位置上引入甲基。常用的菌株都会产生dam,dcm,从而受到甲基化的影响.

部分限制性内切酶对甲基化的DNA不能切割,如FbaI和MboI等,一般生物公司提供的内切酶说明中均有说明。

大多数酶切位点的甲基化不影响切割,而有些会影响,如XbaI, BclI等。而且甲基化只发生在特定序列,以XbaI为例,只有在位点序列旁出现GA或TC,该XbaI位才会被甲基化。

而要解除这种限制修饰作用通常有两种方法:

(1)选用上述酶的同功酶,如Sau3AI,DNA识别切割位点与MboI相同;但不受甲基化影响;

(2)利用甲基化酶缺失的受体细胞进行DNA的制备,如E.coli JM110和链霉菌等,前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出,而后者细胞内本就没有甲基化酶,从这些细胞中抽提的 DNA就能被上述酶切割。

E.coli JM110

要排除dam,dcm甲基化的影响,需要用特定的dam-,dcm-的菌株,如JM110

如果由JM110或 SCS110等甲基化缺失的菌株产生的质粒,则不会被甲基化.

第三篇:各种感受态细胞的区别用途特征

Xl1-Blue菌株

基因型:endA1 gyrA96(nalR) thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 F‘[Tn10 proAB+ lacIq Δ(lacZ)M15] hsdR17(rK- mK+)。

特点:具有卡那抗性、四环素抗性和氯霉素抗性。

用途:分子克隆和质粒提取。

BL21(DE3)菌株

基因型:F– ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) λ(DE3 [lacI lacUV5-T7 gene 1 ind1 sam7 nin5])。

特点:该菌株用于以T7 RNA聚合酶为表达系统的高效外源基因的蛋白表达宿主。T7噬菌体RNA聚合酶基因的表达受控于λ噬菌体DE3区的lacUV5启动子,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合于非毒性蛋白的表达。

用途:蛋白质表达。

BL21(DE3)ply菌株

基因型:F- ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) λ(DE3) pLysS(cmR)。

特点:该菌株带有pLysS,具有氯霉素抗性。此质粒还有表达T7溶菌酶的基因,T7溶菌酶能够降低目的基

因的背景表达水平,但不干扰IPTG诱导的表达。适合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表达。

用途:蛋白质表达

DH5α菌株

基因型:F- endA1 glnV44 thi-1 recA1 relA1 gyrA96 deoR nupG Φ80dlacZ ΔM15 Δ(lacZYA-argF)U169, hsdR17(rK-, λ–

特点:一种常用于质粒克隆的菌株。其Φ80dlacZΔM15基因的表达产物与pUC 载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补,可用于蓝白斑筛选。recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。

用途:分子克隆、质粒提取和蛋白质表达。

JM109菌株

基因型:endA1 glnV44 thi-1 relA1 gyrA96 recA1 mcrB+ Δ(lac-proA e14- [F ‘ traD36 proAB+ lacIq lacZΔM15]hsdR17(rK-mK+)。

特点:部分抗性缺陷,适合重复基因表达, 可用于M13克隆序列测定和蓝白斑筛选。

用途:分子克隆、质粒提取和蛋白质表达。

第四篇:

E.coli Electro-Cells

E.coli Electro-Cell JM109

制品名 TaKaRa Code 包装量价格(人民币元)

E.coli Electro-Cell JM109 D9022 1 Set (50 μl×10支) 300

■ Genotype

E.coli JM109

recA1, endA1, gyrA96, thi-1, hsdR17, supE44, relA1,

Δ(lac-proA/F'[traD36, proAB+, lac Iq, lacZ ΔM15]

■细胞浓度

1~2×1010 Bacteria/ml

■保存

-80℃

■制品说明

用高电压脉冲电流瞬间击穿大肠杆菌,从而导致DNA转入大肠杆菌内的转化方法称为电穿孔法。电穿孔法是各种转化方法中效率最佳的方法之一,比Ca2+处理的感受态细胞的转化效率高,在转化少量DNA时,特别能发挥其特有的威力。TaKaRa使用独自开发的菌体培养法,制作出了效果极佳的E.coli Electro-Cell JM109。

■细胞种类

α-互补性选择宿主E.coli JM109

E.coli JM109在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时, 由于载体DNA产生的LacZα多肽和JM109 F'编码的lacZΔM15的结合,显示β-半乳糖苷酶活性 (α-互补性)。利用这一特性,可以很容易鉴别重组体菌株。因为具有F'质粒,除可用于制作基因库、进行亚克隆等之外,也可作为M13载体DNA的宿主,调制单链DNA。

■质量标准

使用10 pg的质粒DNA进行转化时:

50 μl E.coli JM109 Electro-Cell/10 pg pUC19 plasmid转化时产生的菌落数

>1×109 transformants/1 μg pUC19 plasmid

F'质粒的稳定性检测

对E.coli JM109使用pUC19 DNA进行电穿孔法转化后,在含有100 μg/ml的Ampicillin、0.2 mM的IPTG, 40 μg/ml的X-Gal的L-琼脂平板培养基上,产生的白色菌落在1%以下。

50 μl的E.coli JM109 Electro-Cell在含有100 μg/ml的Ampicillin L-琼脂平板培养基上不产生菌落。

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BL21(DE3)pLysS细菌菌株

BL21(DE3)pLysS细菌菌株可以表达T7控制并核糖体结合位点的高效蛋白表达。BL21(DE3)pLysS对λDE3(1)是溶源性的。λDE3含有T7噬菌体基因I,编码的T7 RNA聚合酶受lac UV5启动子的控制。BL21(DE3)pLysS含有pLysS质粒,他携带编码T7溶菌酶基因。在T7启动子控制下,T7溶菌酶降低靶基因的背景表达但并不干扰由IPTG诱导的表达水平。

包装:

P9811 500μl

第五篇:JM109,DH5a,BL21感受态有何区别

1:DH5a菌株

DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化

时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。

基因型:F-,φ80dlacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA1

2:BL21(DE3) 菌株

该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。

基因型:F-,ompT, hsdS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3)

3:BL21(DE3) pLysS菌株

该菌株含有质粒pLysS,因此具有氯霉素抗性。PLysS含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

基因型:F-,ompT hsdS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3,pLysS ,Camr

4:JM109菌株

该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时,由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α-互补,从而显示β-半乳糖苷酶活性,由此很容易鉴别重组体菌株

基因型:recA1,endA1,gyrA96,thi-1,hsdR17,supE44,relA1,Δ(lac -proAB)/F’[traD36,proAB+,lacIq,lacZΔM15]

5:TOP10菌株

该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

基因型:F- ,mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC),φ80 ,lacZΔM15,△lacⅩ74,recA1 ,araΔ139Δ(ara-leu)7697, galU ,galK ,rps, (Strr) endA1, nupG

6:HB101菌株

该菌株遗传性能稳定,使用方便,适用于各种基因重组实验

基因型:supE44,hsdS20(rB-mB-),recA13,ara-14,proA2,lacY1,galK2,rpsL20,xyl-5,mtl-1,leuB6,thi-1

M110或 SCS110

大多数大肠杆菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶,前者可以在GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基,后者在CCA/TGC序列的第一个胞嘧啶 C-5位置上引入甲基。常用的菌株都会产生dam,dcm,从而受到甲基化的影响.

部分限制性内切酶对甲基化的DNA不能切割,如FbaI和MboI等,一般生物公司提供的内切酶说明中均有说明。

大多数酶切位点的甲基化不影响切割,而有些会影响,如XbaI, BclI等。而且甲基化只发生在特定序列,以XbaI为例,只有在位点序列旁出现GA或TC,该XbaI位才会被甲基化。

而要解除这种限制修饰作用通常有两种方法:

(1)选用上述酶的同功酶,如Sau3AI,DNA识别切割位点与MboI相同;但不受甲基化影响;

(2)利用甲基化酶缺失的受体细胞进行DNA的制备,如E.coli JM110和链霉菌等,前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出,而后者细胞内本就没有甲基化酶,从这些细胞中抽提的 DNA就能被上述酶切割。

E.coli JM110

要排除dam,dcm甲基化的影响,需要用特定的dam-,dcm-的菌株,如JM110

如果由JM110或 SCS110等甲基化缺失的菌株产生的质粒,则不会被甲基化

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实验室的一般大肠杆菌拥有4288条基因,每条基因的长度约为950bp,基因间的平均间隔为118bp(基因Ⅷ)。E.coli基因组中还包含有许多插入序列,如λ-噬菌体片段和一些其他特殊组份的片段,这些插入的片段都是由基因的水平转移和基因重组而形成的,由此表明了基因组具有它的可塑造性。

利用大肠杆菌基因组的这种特性对其进行改造,使其中的某些基因发生突变或缺失,从而给大肠杆菌带来可以观察到的变化,这种能观察到的特征叫做大肠杆菌的表现型(Phenotype),把引起这种变化的基因构成叫做大肠杆菌的基因型(Genotype)。具有不同基因型的菌株表现出不同的特性。

分子克隆中常用的大肠杆菌及其遗传标记按Demerec等1966年提出的命名原则,采用的菌株所有的基因都假定处于野生型状态,除非在基因型上另外注明。

大肠杆菌基因型的表示方法(Demerec, et, al. 1966):

一、一般规则:

1、根据基因产物或其作用产物的英文名称的第一个字母缩写成 3个小写斜体字

母来表示。例如:DNA Adenine Methylase→dam。

2、不同的基因座,其中任何一个突变所产生的表型变化可能相同,其表示方法是在3个小写斜体字母后加上一个斜体大写字母来表示区别。例如:Recombination→recA、recB、recC。

3、突变位点应通过在突变基因符号后加不同数字表示。如 supE44(sup基因座E的44位突变)。如果不知道几个等位基因中哪一 /几个发生了功能性突变,则用连字符“ -”代替大写字母,如 trp-31。

4、细菌的基因型中应该包含关于其携带的质粒或附加体的的信息。这些符号包括菌株携带的质粒或附加体、质粒或附加体上的突变基因座和突变位点。其基因符号应与基因座的表示符号明显区别,符号的第一个字母大写、不斜体并位于括号内;质粒或附加体上的突变基因座和突变位点的基因符号的表示方法与染色体上突变基因座、突变位点的符号相同。

5、对于携带附加体的菌株的完整基因型描述应包括附加体的状态(游离或整合)。以 F因子为例,F-:F因子缺失; F+:自主性 F因子,不携带任何遗传可识别染色体片段; F':携带有遗传可识别细菌染色体片段的自主性 F因子;Hfr:整合到染色体上的 F因子( high frequency of recombination)。当这些质粒或噬菌体片段变异或缺失时,用()“或”/“等以区别。例如:/F' [traD3

6、proAB、lac I q、lacZ. M15]

6、某个基因或某个领域缺失时,在其基因型前面加上“”表示。例如: lac-proAB 基因缺失时它的基因型表示为(lac-proAB)。

7、由于某种基因的变异导致大肠杆菌可以明显观察到特征变化,有时也用其表现型代替基因型进行表示。例如:某些抗药性的获得或丧失,用如下方式表示:Streptomycin抗性→Str +或 Str r,Ampicillin敏感性→ Amp-。(第一个字母要大写,“+”或“r”表示有抗性,“-”表示无抗性或敏感)。

8、根据某些特异性蛋白的变异及其导致的结果变化进行表示。例如:TH2菌株上有一种基因型表示如下:hsdS20 (rB-、mB-),其中 S20代表特异性识别蛋白发生变异,()中的 rB-、mB-表示由于 S20的变异而导致 B株来源的 hsdR 和 hsdM的功能缺失。

9、蛋白质的名称与对应的基因或等位基因相同,但不用斜体,且首字母大写,如, UvrA、 UvrB。

三、主要的基因型说明

1、基因重组相关的基因型

recA (Recombination)

功能:recA基因表达 ATP依赖型 DNA重组酶,它在λ-噬菌体与基因组 DNA 的溶原重组时起作用,同时具有对 DNA放射性损伤的修复功能。由 recA基因的变异所产生的基因型使同源或异源 DNA的重组不能进行,保持插入 DNA的稳定性,对 DNA的转化有利。一个菌株的基因型如果是 recA,则说明此菌株的表现型是重组缺陷的。

recB (Recombination)

功能:recB基因表达 ATP依赖型 DNase和核酸外切酶V的一个亚基,对recA 的DNA重组酶起辅助和促进作用。DNase催化双链DNA的解旋和解链,核酸外切酶V催化单链DNA的裂解,在DNA的重组和损伤修复中发挥重要作用。recB基因的变异导致其DNA重组和修复功能丧失,保证了外源DNA的稳定,有利于DNA 转化。

recC (Recombination)

功能:recC基因表达四种酶,即核酸外切酶V,ATP依赖型的核酸内切酶,解旋酶及ATP酶,它们和recA, recB所表达的酶相互协调作用,在DNA的重组及放射性损伤的修复中发挥作用。recC基因的变异导致DNA重组功能缺失,保证外源DNA的稳定性。

2、甲基化相关的基因型

dam (DNA adenine methylase)

功能:dam基因表达DNA腺嘌呤甲基化酶,它能催化特异序列GATC中A的甲基化,保证DNA免受限制性核酸内切酶Mbo I的切断,同时在 DNA复制时也起一定的辅助作用。dam基因的变异导致腺嘌呤(A)甲基化酶活性的缺失,使腺嘌呤(A)不被甲基化,易于获得非甲基化质粒。

dcm (DNA cytosine methylase)

功能:dcm基因表达DNA胞嘧啶甲基化酶,它能特异性识别DNA双链上的CCWGG序列,并使第二个C甲基化,即CmCWGG,避免 DNA受到相关限制酶的切断。dcm基因的导致胞嘧啶甲基化酶活性缺失,使外源DNA上的C不被甲基化,易于获得非甲基化质粒。

mcrA (Modified cytosine restriction protein a)

功能:mcrA基因表达大肠杆菌防御体系中起重要作用的mcrA酶,这种酶能特异性地作用于外来DNA上的被甲基化的胞嘧啶序列,即 C5mCGG特异序列,使之分解,对大肠杆菌本身起保护作用。mcrA基因的变异,导致上述功能缺失,对外来DNA中被甲基化的胞嘧啶特异序(C5mCGG)失去作用,有利于限制酶及甲基化酶的克隆体的稳定。

mcrB, C (Methyl cytosine-specific restriction)

功能:mcrB, C基因表达两种特异性蛋白,即mcrB蛋白和 mcrC蛋白,它们在大肠杆菌的防御系统中起重要作用。一般情况下,只有这两种蛋白同时存在时才表现出活性, mcrC具有识别和调节功能,它能特异性的结合到外源 DNA上被甲基化的胞嘧啶(C)的特异序列 G5mC上,然后由 mcrB蛋白切断(mcrB蛋白是特异性切断外来 DNA中 G5mC序列的限制性核酸内切酶),防御外来 DNA的侵入。mcrB, C基因的变异,使上述的对外来 DNA的防御作用缺失,对质粒的转化有利。

mrr (Methylation requiring restriction)

功能:mrr基因是大肠杆菌细胞防御系统中重要的基因之一,它能严格限制被甲基化的外源DNA的介入。另外,它对限制酶AccⅠ,CviR Ⅰ,Hinf IⅠ(Hha Ⅱ),Nla Ⅱ,Pst Ⅰ以及 N6-腺嘌呤甲基化酶和C5-胞嘧啶甲基化酶活性有明显的抑制作用。mrr欠损株(基因型)可用于含有N6-mA和C5-mC的DNA的转化。另外,含有此基因型的菌株也可用于限制酶和甲基化酶的克隆体。

hsdM (Host specificitive defective)

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功能:hsdM基因所表达的DNA甲基化酶是 I型限制酶复合体(具有对 DNA 切断和修补的双重功能)的一部分,它能使DNA双链上的AA (双腺嘌呤)甲基化,保护宿主DNA不被分解。hsdM的变异使细胞内的DNA不被甲基化,易于获得非甲基化质粒。

3、点突变相关的基因型

mutS (Mutator)

功能:mutS基因表达的蛋白具有识别DNA上错配序列的功能,并能修复其错配序列(GC→AT),防止基因突变。mutS基因的变异导致DNA的错配序列不能得到修复,容易发生基因突变,这对于利用点突变进行基因改造是有利的。

mutT(Mutator)

功能:野生大肠杆菌在进行DNA复制时,细胞中的8-OXO-dGTP插入模板DNA 中的DA位点的效率几乎与插入DC位点的效率相同,导致 A-T转换成 G-C,使DNA 产生变异。而mutT蛋白就是特异性地降解8-OXO-dGTP成为单磷酸盐(8-OXO-dGMP),这种单磷酸盐状态的G(鸟嘌呤)不能作为底物进行 DNA合成,从而防止了上述的基因突变。 mutT基因的变异使细胞中8-OXO-dGTP浓度增高,A→C的突变几率增大,有利于利用点突变进行基因改造。

dut (dUTPase)

功能:dut基因表达脱氧尿嘧啶三磷酸核苷酸水解酶(dUTPase),它能水解dUTP成为dUMP,使细胞体内dUTP的浓度维持在较低的水平,尿嘧啶(U)就不易掺入到DNA中,避免了基因发生A→U的突变。dut基因发生突变使dUTPase 活性缺失,导致dUTP浓度升高,碱基U(尿嘧啶)极易掺入到DNA中,使其发生A→U的基因突变,有利于利用点突变进行基因改造。

ung (Uracil DNA glycosylase)

功能:ung基因表达尿嘧啶 -N-糖苷酶,这种酶能特异性识别DNA单链或双链上发生突变的尿嘧啶残基,并从DNA上水解去除尿嘧啶残基,防止 DNA发生突变。ung基因的变异导致上述功能缺失,有利用点突变。

uvrB (Ultraviolet)

功能:uvrB基因表达核酸外切酶中的b亚基,这种核酸外切酶具有DNA的切补功能,对紫外线损伤的DNA有修补作用。uvrB基因的变异使细胞中核酸外切酶切除变异碱基的活性缺失,有利于点突变。

4、核酸内切酶相关的基因型

hsdR (Host specificity defective)

功能:hsdR基因表达 I型限制酶EcoK (K12株)或 EcoB (B株),在大肠杆菌细胞中起到一种”抗体“的作用,对外来的各种 DNA有严格的限制。HsdR基因的变异导致菌株细胞内的 I型限制酶 EcoK或 EcoB活性缺失,这对于外来基因的导入及质粒转化是有利的。

hsdS (Host specificitive defective)

功能:hsdS所表达的特异性蛋白是 I型限制酶EcoK或EcoB复合体中的一部分,它专门负责hsdR酶和hsdM酶对DNA序列的特异识别。hsdS基因的变异使hsdR和hsdM不能正确识别其作用的特异DNA序列,可以保持插入DNA的稳定性。

endA (Endonuclease)

功能:endA基因表达非特异性核酸内切酶Ⅰ,它能使所有DNA双链解开,在DNA的复制和重组中起重要作用。endA基因的变异将使插入的外源 DNA更加稳定,提取的质粒纯度更高。

5、停止密码子相关的基因型

supE (Suppressor)

功能:supE基因表达的阻遏蛋白与停止密码子UAG结合,使蛋白质合成停止。supE基因发生变异时,不能表达正常的阻遏蛋白,即使遇到停止密码子 UAG,蛋白质合成仍能继续,并使 UAG作为一个密码子来编码谷氨酰胺(Glutamine),从而使发生了琥珀突变(AAG→UAG)的基因对蛋白质表达得以延续,因此称 supE 为琥珀突变抑制因子。

supF (Suppressor)

功能:supF基因表达的阻遏蛋白与停止密码子UAG结合,使蛋白质合成停止。supF基因变异时,不能表达正常的阻遏蛋白,即使遇到停止密码子 UAG,蛋白质合成仍能继续,并使 UAG作为一个密码子编码酪氨酸(Tyrosine)。

临床细菌学检验的质量控制流程

临床细菌学检验的质量控制流程 1、质量的概念和质量保证 影响检验结果质量的因素很多,实验过程中,仪器、试剂和操作等均会引起试验结果的误差,衡量检验结果的质量常用准确度和精确度,或特异性和灵敏度。具体采用哪一种指标应根据实验的性质决定,目前临床细菌学检验的工作内容大致有3类,衡量起质量的技术指标不完全相同。 第一类是检出细菌的实验,包括标本直接涂片检查和细菌分离培养。现代的细菌感染,混合菌较常见,一份标本中,会有2种以上细菌存在。无论标本直接涂片还是分离培养,检验结果必须如实反映感染病灶中细菌的真实情况。这类实验的质量,应该用细菌检出率或细菌分离率来衡量。 第二类是鉴定细菌的实验。通过一系列生理生化及形态学、血清学的手段来鉴定病原菌。对分离到的病原菌都做出准确的鉴定,是反映细菌事工作质量的一个重要方面。 第三类是药敏实验。有稀释法和纸片法,前者是半定量的实验,可以用准确度和精密度来衡量,后者以敏感或耐药的形

式报告,属于定性的实验,但实验过程中测量抑菌环是定量的指标。也应以准确度和精确度衡量。 所以实验室人员必须清楚认识到以上这一点,在实验室的设计和管理方面就应该主动设置误差检测系统,实验中一旦出现误差及时发出警报,查明原因及时纠正。 2、室内质量控制 2.1在职人员 2.1.1须受过细菌学检验的专门基础教育以及相关的生物交全防护知识,并以细菌检验为专业,及时终结并积累工作经验。 2.1.2作人员必须具有严谨的工作态度,技术操作须完全遵守操作规程,并直接参与质量控制工作。 2.1.3工作人员应不断加强自身的业务学习,及时了解本领域的新进展,将所掌握的新知识应用到实际工作中。 2.1.4实验室管理人员应注意利用一切机会培养技术人员,积极参加国际、国内学术会议、专业培训班,获取新信息。因为细菌学检验,投资人员培训远比投资与仪器设备更重要。 2.2操作手册及参考书

常见微生物检验项目及临床意义

细菌培养与其它检验项目的临床意义 卫生部规定接受抗菌药物治疗的住院患者微生物检验样本送检率不低于30%(卫办医政发〔2011〕56号)。特介绍微生物检验项目,方便统计与分析点评。细菌检验为感染性疾病诊断和治疗提供依据: 目标性治疗:提高微生物的送检率与检出率,有利于诊断与使用抗菌药。 经验治疗:根据本地区病原菌类型时间、区域、耐药谱等使用抗菌药。 调整治疗方案针对性用药:获得准确病原菌和细菌药敏结果。 细菌培养的临床意义 细菌培养与其它检验项目不同,由于其样本采集易受杂菌的干扰和培养条件的限制,因而造成检测结果有时与临床不完全一致,故在分析细菌培养报告时应明白:细菌培养阴性不代表无细菌感染、细菌培养阳性不代表该菌一定是病原菌,应结合患者具体情况而定。 1、血液和骨髓培养 目前血液培养仍然是菌血症和败血症的细菌学检验的基本方法,并且广泛地应用于伤寒、副伤寒及其它细菌引起的败血症的诊断。菌血症系病原菌一时性或间断地由局部进入血流,但并不在血中繁殖,无明显血液感染临床征象。常可发生在病灶感染或牙齿感染,尤以拔牙、扁桃体切除及脊髓炎手术后等多见。败血症是指病原菌侵入血流,并在其中大量生长繁殖,造成身体的严重损害,引起显著的全身症状(如不规则高热与全身中毒等症状),它多继发于组织器官感染,尤其是当机体免疫功能低下、广谱抗生素和激素的应用及烧伤等。 单次的血培养结果,对临床无鉴别指导意义,应多次多部位采集血液进行培养,才可判定检出菌究竟是病原菌还是污染菌。 抽血时应特别注意皮肤消毒和培养瓶口的灭菌。 2、脑脊液培养 正常人的脑脊液是无菌的,故在脑脊液中检出细菌(排除操作中的污染)应视为病原菌。引起脑膜炎的细菌种类不同,化脓性脑膜炎病原菌多为脑膜炎奈瑟菌,除此之外尚有肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌等。 3、尿液培养 尿液细菌培养对于膀胱和肾脏感染的及早发现和病原学诊断很有价值,对于尿道、前列腺以及内外生殖器的炎症也有一定价值。尿液中出现细菌通常称为菌尿症,如果尿液本身澄清但培养出细菌,一般为标本采集时未彻底消毒尿道口引起。如果细菌培养阳性同时伴有脓尿出现,则提示有尿路感染的可能(需指出轻度感染时可无脓尿出现)。泌尿系感染常见菌为大肠埃希菌、葡萄球菌、链球菌、变形杆菌等,除结核分枝支杆菌外,这些细菌又是尿道口常驻菌,极易引起标本留样污染,应注意鉴别。某些真菌疾病,如曲菌病在播散时也可造成肾脏感染,且尿中也能检查到。

实验诊断学重点

1、红细胞及血红蛋白绝对性增多 ①继发性红细胞增多症 ②真性红细胞增多症 2、红细胞及血红蛋白生理性减少: 婴幼儿和15岁以下儿童、部分老年人、妊娠中、晚期 3、红细胞结构异常 嗜碱性点彩、染色质小体、卡—波环、有核红细胞 4、白细胞减少:白细胞总数低于正常值 5、中性粒细胞数量变化的临床意义 (1)中性粒细胞增多: 急性感染、严重组织损伤及大量血细胞破坏、急性大出血、急性中毒、白血病、骨髓增殖性疾病、恶性肿瘤( (2)中性粒细胞减少: 感染、血液系统疾病、物理化学因素损伤、单核-吞噬细胞系统功能亢进、自身免疫疾病 6、粒细胞缺乏症:中性粒细胞绝对值低于*109/L 7、核左移:周围血中出现不分叶核粒细胞(杆状核粒细胞、晚幼粒、中幼粒、早幼粒等)的百分率增高(超过 5%)时称为核左移 核右移:周围血中若中性粒细胞核出现5叶或更多分叶,其百分率超过3%者称为核右移 8、中性粒细胞中毒性改变: 细胞大小不均中毒颗粒空泡形成杜勒小体核变性 9、中毒颗粒:中性粒细胞胞质中出现粗大,大小不等、分布不均、染色呈深紫红或紫黑色,谓之为~ 10、淋巴细胞增多的临床意义 感染性疾病、肿瘤性疾病、急性传染病的恢复期、移植排斥反应 11、网织红细胞:是晚幼红细胞脱核后的细胞。 [ 12、血小板减少的临床意义: (1)血小板的生成障碍 (2)血小板破坏或消耗增多 (3)血小板分布异常 13、血细胞比容:又称血细胞压积(PCV),是指血细胞在血液中所占容积的比值 14、溶血性贫血:是指各种原因导致红细胞生存时间缩短、破坏增多或加速,而骨髓造血功能不能相应代偿而 发生的一类贫血。 15、血细胞发育过程中形态演变的一般规律 (1)细胞体积 胞体逐渐大→小 (2)细胞质 量:少→多 染色:深蓝→浅染,甚至淡红 颗粒:无颗粒→嗜天青颗粒→特异性颗粒 (3)细胞核 · 大小:大→小 形态:规则→不规则 染色质:细致疏松→粗糙致密

工地试验室主要试验检测项目及频率.doc

序号 公路工程试验检测项目及频率汇总表 类别检验项目采用标准施工单位自检频率取样方法 1 2 3 4 5 颗粒分析、界限含水量 土工试验、击实试 验、室内 CBR试验 筛分、含泥量、泥块含 量 细集料(水泥 表观密度、堆积密度、 砼用) 坚固性 含水量 筛分、表观密度、含泥细集料(沥青 量、砂当量或亚甲兰值 砼用) 坚固性、棱角性 筛分、含泥量、针片状 含量、压碎值 粗集料(水泥 表观密度、堆积密度、 砼用) 坚固性、碱活性 含水量 筛分、含泥量、针片状 含量、压碎值、表观密 粗集料 度、吸水率 (沥青混合 粘附性、磨耗损失、坚 料用) 固性、软石含量、磨光 值(表面层) JTG E40 -2007 《公路土工试验规程》 JTG F10 -2006 《公路路基施工技术规范》每 5000m3或土质发生变化时 《公路工程标准施工招标文件》2009 版 以进场数量为一检验批,每检验批代表数 JTGE42 - 2005 《公路工程集料试验规程》 量不得超过 400m3 《公路工程标准施工招标文件》 2009 版 每一料源检验 1 次 JTJ041-2000《公路桥涵施工技术规范》 混凝土开盘前必做 JTGE42 - 2005 《公路工程集料试验规程》 以进场数量为一检验批,每检验批代表数 量不得超过 400m3 《公路工程标准施工招标文件》 2009 版 JTG F40-2004《公路沥青路面施工技术规范》每一料源检验 1 次 每批次进场检验 1 次,每检验批代表数量 JTGE42-2005 《公路工程集料试验规程》 不得超过 400m3 JTJ041-2000《公路桥涵施工技术规范》每一料源检验 1 次 砼开盘前必做 每批次进场检验 1 次,每检验批代表数量 JTGE42-2005《公路工程集料试验规程》 不得超过 1000m3 JTG F40-2004《公路沥青路面施工技术规范》 每一料源检验 1 次 取具有代表性的扰动土 取样前先铲除堆脚等处无代表性的部分, 再在料堆的顶部、中部和底部,各由均匀 分布的几个不同部位,抽取大致相等的 8 份 组成一组试样。 取样前先铲除堆脚等处无代表性的部分, 再在料堆的顶部、中部和底部,各由均匀 分布的几个不同部位,抽取大致相等的 8 份 组成一组试样。 取样前先铲除堆脚等处无代表性的部分, 再在料堆的顶部、中部和底部,各由均匀 分布的几个不同部位,抽取大致相等的 15 份组成一组试样。 取样前先铲除堆脚等处无代表性的部分, 再在料堆的顶部、中部和底部,各由均匀 分布的几个不同部位,抽取大致相等的 15 份组成一组试样。

布鲁氏菌病实验室诊断技术

龙源期刊网 https://www.doczj.com/doc/439130802.html, 布鲁氏菌病实验室诊断技术 作者:王勤 来源:《湖北畜牧兽医》2018年第04期 摘要:对实验室常用的几种布鲁氏菌病检测方法进行了分析,为实验室检测不同动物群体选择相应的诊断方法提供参考。 关键词:实验室;布鲁氏菌病;检测方法 中图分类号:S858 文献标识码:B 文章编号:1007-273X(2018)04-0025-01 布鲁氏菌病(简称布病)是一种危害性极大的传染性人兽共患病,在世界范围内广泛流行。其主要临床症状为雌性动物流产、生育力下降,雄性动物睾丸炎,甚至不育,给畜牧业造成严重的损失。 1 病原学方法 从疑似感染布病的个体中提取血液或其他样本,对样本处理后在选择培养基上培养,如有菌落生长则通过细菌染色、生化试验等方法鉴别是否为布鲁氏菌,该方法准确性高,但危险性高、操作难度大、分离时间长,对试验环境要求严格,需在特定试验条件下进行。 2 PCR技术 随着分子生物学技术的发展和普及,可通过 PCR、荧光定量PCR以及环介导等温扩增(LAMP)等技术对布病进行诊断。其中PCR技术具有特异性高、灵敏度好、操作较简单等优点,可用于鉴别不同种属的布鲁氏菌。荧光定量PCR 技术相较于传统 PCR 技术具有灵敏度高、高通量和方便快捷等优势,但由于其引物和探针设计较为困难,且限制较多,对专业技术有较高要求。LAMP可用于对奶、组织等样本的检测,具有操作方便、可视性强、特异性高和试验条件要求低等优点,其灵敏性可达10 pg/反应,且可以在普通水浴下完成反应,适于基层检测使用。但是LAMP存在多重扩增较为困难,样本污染等问题,且对引物设计要求很高限 制了该技术的进一步使用。 3 血清学检测方法 3.1 虎红平板凝集试验(RBPT) BRPT是在平板上将30 μL抗原与30 μL血清样品混合,4 min内观察是否出现凝集来判定阴阳性,该法使用方便、结果判定简单、价格低廉,适用于各种家畜布病的田间筛选,在国际上广泛应用,但是特异性较差,易出现假阳性。

病原微生物的检验项目及结果解释教程文件

病原微生物的检验项目及结果解释

病原微生物的检验项目及结果解释 微生物检查包括:细菌、真菌、衣原体、支原体及病毒等。这对于查明致病原因和选择用药十分重要。但除细菌和真菌外,直接查找方法比较复杂。细菌培养,采集血、痰、咽试子、大便、小便、创面分泌物等标本进行培养,看有无致病菌生长,正常应为阴性或少量非致病菌;真菌检查,标本涂片或培养,检出真菌为不正常。 病原微生物的检验主要是检测与l临床患者致病性有关的病原性微生物,对感染性疾病进行快速、准确地诊断,密切结合临床提出及时有效的治疗方案,防止微生物产生耐药性和医院内感染的发生。 基础知识 1.什么是微生物?什么是病原微生物? 微生物是需借助光学显微镜或电-y:显微镜放大观察到的结构简单,个体微小的生物的总称。微生物的种类很多,医学微生物尤其是临床微生物主要有细菌、病毒、真菌、支原体、衣原体等。 微生物在自然界中广泛存在,与人类和自然界其他生物共生共存,绝大多数对人类和自然界是有益的,只有少部分可以引起人类和动植物发生疾病,这部分微生物才称为病原微生物,比如结核分枝杆菌可引起结核病,痢疾杆菌可以引起痢疾等。 2.什么是细菌?细菌分哪几种? 细菌是在自然界分布最广、个体数量最多的有机体,是大自然物质循环的主要参与者。其体积微小,以微米作为测量单位,无色半透明,只有经过染色才能观察到细菌的轮廓及其结构。经革兰染色,可将细菌分为两大类,即革兰阳性菌和革兰阴性菌。细菌主要由细胞壁、细胞膜、细胞质、核质体等部分构成,有的细菌还有夹膜、鞭毛、菌毛等特殊结构。根据形状则可分为三类,即:球菌、杆菌和螺旋菌(包括弧形菌)。 3.什么是病毒?病毒分哪几种? 病毒是结构最简单、体积最微小(纳米)的一类非细胞型微生物,介于生命和非生命之间的一种物质形式,其必须严格寄生在活细胞内,含有单一种核酸即脱氧核糖核酸(DNA)或核糖核酸(RNA)的基因组和蛋白质外壳,没有细胞结构,对抗生素不敏感,但对于干扰素敏感。按传播途径病毒可分为呼吸道病毒、胃肠道病毒、经性传播感染的病毒和狂犬病毒等。按感染部位与症状特征则分为肝炎病毒、出血热病毒、疱疹病毒、侵犯神经系统的病毒和肿瘤病毒等。

微生物学检验题库及答案

微生物学检验题库及答案

《微生物学与检验》题库及答案 一.名词解释 1.医院感染 2.肥达反应 3.内基小体 4. 噬菌体: 5.血浆凝固酶 6.败血症 7.灭菌 8.药物敏感试验 9.外 - 斐氏试验 10.L 型细菌 11.菌群失调: 12.微生物 13.细菌 14.最小抑菌浓度 15.菌落 16.汹涌发酵 17.无菌操作 18.流感杆菌“卫星现象” 19.培养基 20.包涵体 21.正常菌群 22. 内毒素 23. 干扰现象: 24.菌血症 25菌丝: 二.填空题 1 L 型细菌是指()。 2 杀灭物体上所有微生物的方法称为()。 3 细菌 H-O 变异是指()。 4 药敏试验所用标准培养基是,所用菌液相当于()个细菌/ ml ,细菌接种采用()划线接种法。 5 细菌致病因素包括()、()和()。 6 细菌引起的全身感染包括()、()、()和()四种类型。 7 不染色标本检查主要用于观察细菌的()。 8 影响革兰染色结果的关键步骤是()。 9 有动力细菌在半固体培养基中的生长现象是穿刺接种线(),无动力细菌穿刺接种线()。 10 糖发酵试验用于观察细菌分解糖是否产()和()。 11 靛基质试验的原理为,细菌产生的色氨酸酶分解蛋白胨中的色氨酸而生成(),此代谢产物与加入的试剂反应,生成()。 12 链球菌根据溶血现象分为()、()和()三种类型。 13 葡萄球菌触酶试验结果为()性,链球菌触酶试验结果为()性。 14 呈现脐窝状菌落的球菌是()。 15 抗 O 试验是测定病人血清中()抗体效价的试验,用于风湿热等疾病的辅助诊断。 16 血平板上呈现草绿色溶血环的病原性球菌是()和()。 17 IMViC 试验包括()、()、()和()四项试验。 18 分解乳糖的细菌在肠道选择平板上呈现()菌落,不分解乳糖则为()菌落。 19 KIA 斜面红色表明,底层黄色、有气泡表明()、(),有黑色沉淀表明()试验阳性 20 霍乱弧菌生物型包括()和()。 21 AIDS 的传染源是()和(),传播途径主要有(),()和()。 22 真菌菌落有()、()和()三种。 23 病毒培养方法有()、()和()。 24 病毒的基本结构由()和()组成,有些病毒还具有()。 25 流感病毒根据抗原结构不同分()、()、()三型,其中容易引起流感大流行的是其中的()型。

常见传染病检验项目明细及参考值

常见传染病检验项目明细及参考值、临床意义 检验项目名称内含项目明细参考值临床意义 生化筛查常规丙氨酸氨基转移酶(ALT)<45U/L 增高:肝炎、肝癌、肝硬化、脂肪肝、胆管炎、胆囊炎、心肌梗死等。 …… 生化全套丙氨酸氨基转移酶(ALT)<45U/L 增高:肝炎、肝癌、肝硬化、脂肪肝、胆管炎、胆囊炎、心肌梗死等。 …… 肝功能常规丙氨酸氨基转移酶(ALT)<45U/L 增高:肝炎、肝癌、肝硬化、脂肪肝、胆管炎、胆囊炎、心肌梗死等。 …… 肝功能全套丙氨酸氨基转移酶(ALT)<45U/L 增高:肝炎、肝癌、肝硬化、脂肪肝、胆管炎、胆囊炎、心肌梗死等。 …… 甲肝抗体甲型肝炎抗体测定(HA V-IgM)阴性阳性表示近期内受到HA V感染 乙肝表面抗原定量乙型肝炎表面抗原定量(HBsAg)<0.05IU/mL 乙肝病毒筛查。超过该值表示携带有乙肝病毒。 乙肝表面抗原定性乙型肝炎表面抗原定性(HBsAg)阴性乙肝病毒筛查。阳性表示携带有乙肝病毒。 乙肝三系定量乙型肝炎表面抗原定性(HBsAg)<0.05IU/mL 乙肝病毒筛查。超过该值表示携带有乙肝病毒。 乙型肝炎表面抗体定量(HBsAb) <10.00mIU/mL 用于检查乙型肝炎疫苗免疫后的状态。 乙型肝炎e抗原定量(HBeAg) <1.00S/CO 用于对乙肝病毒感染进程的检查。 乙型肝炎e抗体定量(HBeAb) <1.00S/CO 提示乙肝病毒的感染趋向恢复、病毒的复制减少。 乙型肝炎核心抗体定量(HBcAb) <1.00S/CO HBcAb仅是乙肝病毒感染的血清学标志,HBcAb阳性血具潜在的传染性。 乙型肝炎核心抗体IgM定量(HBcAb-IgM) <1.00S/CO 提示急性乙型肝炎感染或慢性乙肝活动期。 乙肝三系定性乙型肝炎表面抗原定性(HBsAg)阴性乙肝病毒筛查。阳性表示携带有乙肝病毒。 乙型肝炎表面抗体定性(HBsAb) 阴性用于检查乙型肝炎疫苗免疫后的状态。 乙型肝炎e抗原定性(HBeAg) 阴性用于对乙肝病毒感染进程的检查。 乙型肝炎e抗体定性(HBeAb) 阴性提示乙肝病毒的感染趋向恢复、病毒的复制减少。 乙型肝炎核心抗体定性(HBcAb) 阴性HBcAb仅是乙肝病毒感染的血清学标志,HBcAb阳性血具潜在的传染性。

细菌实验室检查项目

细菌室常规检测项目: 一形态学检查(Morphological Examination) (一)各种染色 1革兰染色(Gram stain):将细菌分为革兰阳性菌如葡萄球菌属,链球菌属等;革兰阴性菌如大肠埃希菌沙门菌,志贺菌等。 2抗酸染色(Acid-fast stain):通过染色将细菌分为两大类:抗酸性细菌和非抗酸性细菌,抗酸性细菌种类较少,如结核分枝杆菌,麻风分枝杆菌等。正常:未见。抗酸染色,找到红色分枝杆菌,及报告“找见抗酸分枝杆菌”,量可以用加号表示: ++++ 每个视野>10根 +++ 每个视野发现1~10根 ++ 100个视野发现10~99根 + 300个视野发现3~9根 ±300个视野发现1~2根 3异染颗粒染色(Metachromatic granula stain):用于检查棒状杆菌。 4墨汁染色(Indian ink negative staining):用背景着色,而细菌本身不着色的染色方法,用于脑脊液中查找新生隐球菌。正常:未见。 5鞭毛染色(Flagella stain):鞭毛的数目和位置随细菌种类而不同,可分为周毛菌、单毛菌、双毛菌和丛毛菌,是细菌分类和鉴定的重要依据。如霍乱弧菌是单鞭毛菌。 6荚膜染色(Capsules stain):荚膜是细菌壁外一层粘液性多聚物,赋予致病菌的侵袭力。染色将荚膜染成与菌体不同颜色,可作为细菌鉴定的依据。如肺炎链球菌。 (二)涂片检测(smear) 1便球杆比检查( stool cocus/bacillus):即革兰阳性球菌与革兰阴性杆菌之比。 正常值:便球杆比:1:3 临床意义:健康人肠道内寄居着大量厌氧菌和小部分需氧菌。除人乳喂养的婴儿肠道内以革兰阳性球菌为主外,其余人均以革兰阴性杆菌占绝对优势。在肠道发生致病菌如沙门、志贺、弧菌感染时往往由于使用抗生素而是革兰阴性杆菌受到抑制,此时球菌/杆菌比值有可能变大。若比值显著增大,常提示肠道菌群紊乱或发生二重感染。 2标本真菌涂片(fungi):经革兰染色如发现革兰阳性卵圆形芽生孢子或假菌丝,可初步报告为:找到真菌孢子和菌丝。 正常值:未见真菌。 3痰涂片检查(sputum smear): 临床意义:目的确定标本是否适合做细菌培养,初步判定是否有致病菌存在。首先应确定标本是否为来自下呼吸道的痰,其标准为革兰染色WBC>25/LPF(低倍视野),上皮细胞<10/LPF。有些细菌可做初步判断: 1) 肺炎链球菌:革兰染色为阳性球菌,成双或短链状排列 2) 结核分枝杆菌:抗酸染色,找到红色分枝杆菌,及报告“找见抗酸分枝杆菌”,量可以用加号表示: ++++ 每个视野>10根 +++ 每个视野发现1~10根 ++ 100个视野发现10~99根 + 300个视野发现3~9根 ±300个视野发现1~2根 3) 真菌:经革兰染色如发现革兰阳性卵圆形芽生孢子或假菌丝,可初步报告为:找到真菌孢子和菌丝。

医院检验科检验项目一览表

医院检验科检验项目一览表 检验项目(组合)名称项目内容(英文缩写)/备注报告时间血常规(三分类)WBC、RBC、PLT、HGB、HCT等18项+3个直方图30分钟 1小时血常规(五分类)WBC、RBC、PLT、HGB、HCT等26个项目+五分类+异常淋巴 细胞、幼稚细胞提示+5个散点图 三分类血常规+CRP WBC、RBC、PLT、HGB、HCT等18项+3个直方图+CRP 40分钟血型ABO血型鉴定+RH血型鉴定20分钟网织红细胞计数(Ret)1小时嗜酸性细胞直接计数1小时异常白细胞形态检查1小时异常红细胞形态检查1小时红斑狼疮细胞检查(LEC)5小时一氧化碳(CO)定性测定30分钟红细胞比积测定(HCT)30分钟红细胞沉降率测定(ESR激光法)1小时骨髓涂片细胞学检验根据需要进行特殊化学染色3天凝血四项PT、APTT、TT、Fib 1.5小时D-二聚体测定1小时尿液分析+镜检尿化学分析11项+镜检5项30分钟尿妊娠试验10分钟尿沉渣镜检WBC、RBC、管型、结晶等30分钟尿本-周氏蛋白定性检查30分钟尿隐血10分钟

检验项目(组合)名称项目内容(英文缩写)/备注报告时间尿寄生虫30分钟乳糜试验30分钟粪便常规颜色、性状、RBC、WBC、虫卵等20分钟粪便隐血试验(OB化学法)10分钟粪便轮状病毒检测20分钟胸、腹水常规检查颜色、透明度、李凡他试验、WBC等30分钟脑脊液常规检查CSF 颜色、透明度、潘氏试验、WBC等30分钟精液常规检查(手工法)颜色、性状、液化时间、活动率、活动力、精子数等 1.5小时前列腺液常规检查颜色、性状、卵磷脂小体、淀粉颗粒、精子等30分钟阴道分泌物检查WBC、上皮细胞、清洁度、霉菌、滴虫等30分钟 30分钟阴道五联检PH值、过氧化氢、白细胞酯酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨基 肽酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶测定 痰液常规检查颜色、性状、WBC、结晶等30分钟各种穿刺液常规检查颜色、透明度、WBC、RBC等30分钟血流变全血粘度、血浆粘度测定,红细胞流变特性、HCT、ESR等3小时离子6项K、NA、CL、Ca、TCO2、P 1-3小时急诊生化14项UREA、Cr、TBIL、ALB、CK、ALT、AMY、GLU+离子6项1-3小时肝功能5项ALT、AST、TBIL、DBIL、LBIl 3小时肝功能10项TP、ALB、GLB、GGT、LDH、ALP+肝功5项3小时肝功能15项TBA、CHE、HBDH、GLU、ADA+肝功10项3小时心肌酶谱5项CK、CK-MB、LDH、HBDH、AST 3小时血脂4项CHOL、TG、HDL、LDL 3小时血脂7项APoAⅠ、APoB、LP(a)+血脂4项3小时血糖1项GLU 3小时

实验室安全检查表

百科文章 > 社会 > 教育 > 正文 环境工程实验室安全检查表 房间号:检查人员:检查日期: 检查项目检查内容检查结果整改结果 安全教育 1. 新进实验室人员是否进行安全培训; 2. 指导教师和管理人员经常与学生交流安全知识经验。 安全制度 3. 实验室各项安全管理制度健全,措施明确有效; 4. 实验室安全责任落实,实验室安全检查项目具体; 5. 严格执行实验室人员上下班安全检查制; 6. 是否组织假期前后实验室安全检查,并形成记录。 防火措施 7. 防火器材按标准配备,消防器材放置是否合适; 8. 有效安全、方便、安全通道通畅; 9. 各种易燃气体是否有专人保管; 10. 废弃纸箱、泡沫不得堆放于实验室之内。 安全用电 11. 禁止用电炉等电器于生活使用; 12. 仪器设备有否漏电现象, 电线是否有破损现象; 13. 有无超负荷、乱拉电线等现象。 危险品 14. 危险品(易燃、易爆、剧毒、病原物和放射源等)的储存、使用、搬运等符合规定; 15. 严控实验室危险品的出入; 16. 特种品(剧毒、放射源)领用手续严格,记录可追溯; 17. 专用库房监控严密,特种物品专柜储存双人双锁; 18. 妥善处置实验室废弃物; 19. 未经许可,无关人员不得进入危险品实验室。 高压容器及管道 20. 易燃与助燃气瓶分开放置,容器阀门紧闭; 21. 实验室气瓶放置于气瓶架上或气瓶柜中;

22. 水、气管道完好不泄漏; 23. 高压力容器注意安全使用。 实验安全 24. 实验(化学反应、电火加热)过程中,必须有人值守;高危实验不得单独操作; 25. 注意明火电炉、电吹风、水冷却系统等的安全使用; 26. 空调、饮水机、计算机等不得开机过夜; 27. 配置的防火、防爆、防水浸等基本设备设施完好可用; 28. 离开实验室时,关闭水源、电源、气源,以防意外。 实验室卫生内务 29. 实验室整齐划一、清洁卫生; 30. 地面有无、积尘及杂物堆积; 31. 实验台有无积尘、实验药液; 32. 实验室钥匙必须专人专管,不得擅自外借他人使用; 33. 实验室门窗完好无漏洞;防盗设施完好可用; 34. 未经教师批准,实验室内不得留宿

项目6细菌的分布

项目6:细菌的分布 【目的要求】 证明细菌在自然界和正常人体的存在,为在医学实践中树立严格的无菌观念提供依据。 【实验内容】 一、水中的细菌检查 【材料】 高层琼脂培养基、河水(或井水、池水)、自来水、灭菌生理盐水、lml 灭菌吸管、灭菌空培养皿、细菌菌落计算器。 【方法】 (一)取无菌空平皿2只,分别编号1、2。 (二)吸取lml自来水置于1号平皿中。 (三)吸取1ml河水(或井水等)置于2号平皿中。(河水先行适当稀释)(四)取2支熔化且冷至45℃左右的高层琼脂,分别倾注于以上二个培养皿中,充分混匀后静置待凝。 (五)37℃孵育24小时后观察结果,分别记录二块平板上的菌落数。 二、空气中细菌检查 【材料】 普通琼脂平板、细菌菌落计算器、载玻片、革兰染色液。 【方法】 (一)取普通琼脂平板数只,分别置于实验桌上、实验室地上、窗口、走廊等处,启开皿盖,暴露于空气中10分钟后盖回皿盖。 (二)37℃孵育24小时后取出观察,计数菌落,并选择数种作涂片染色检查。 三、正常人体手指的细菌检查 【材料】 普通琼脂平板培养基 【方法】 取普通琼脂平板一块,于平板背面玻璃面上按人数编号,然后每人在培养基的相应部位轻轻按上指印,随后盖上平皿盖,置37℃孵箱中培养24小时后观察结果。 四、正常人体咽喉部细菌的检查 【材料】 血液琼脂平板培养基、灭菌棉拭子。

【方法】 取灭菌棉拭一支,在被检者咽喉部轻轻涂擦后,将检材涂于血液琼脂平板的一侧。然后再以灭菌接种环作分离划线接种,置37℃孵箱培养24小时观察结果。 【实验报告】 记录空气、水、土壤、皮肤、咽喉部细菌检查的结果,分析其与护理工作的关系。

第四章实验室检查习题知识分享

第四章实验室检查习题 一.选择题 【A1型】 *1.严重细菌感染时不应出现 A白细胞总数增高B中性粒细胞增高C核左移 D酸性粒细胞增高E中性细胞出现中毒颗粒 2.可能导致中性粒细胞减少的疾病是 A急性病毒感染B急性溶血C急性中毒D急性失血E心肌梗死 **3.中性粒细胞核左移是指 A分叶核在2叶以上的细胞>0.03 B分叶核在3叶以上的细胞>0.03 C分叶核在4叶以上的细胞>0.03 D分叶核在5叶以上的细胞>0.03 E杆状核粒细胞≥0.05 4.嗜酸性粒细胞增多不应出现于 A支气管哮喘B急性支气管炎C钩虫病D皮肤湿疹E药物过敏 5.对缺铁性贫血认识正确的是 A红细胞↓=血红蛋白↓B红细胞↓<血红蛋白↓C红细胞↓>血红蛋白↓ D为大红细胞性贫血E以上都不对 6.下列哪种细菌感染WBC计数减低 A肺炎球菌B链球菌C葡萄球菌D大肠杆菌E伤寒杆菌 7.促使血沉增快的物质是 A清蛋白B胆固醇C血小板D纤维蛋白原E凝血酶原 **8.血沉增快不应出现于 A严重脱水B严重贫血C结核病D风湿病E恶性肿瘤 **9.出血时间延长不应出现于 A血小板减少症B过敏性紫癜C再生障碍性贫血D血小板无力症E血管异常 **10.可致血小板增高的病因是 A急性失血与溶血B再生障碍性贫血C白血病D放射病E淋巴瘤 11.镜下血尿是指尿沉渣红细胞数 A平均>1个/HP B平均>2个/HP C平均>3个/HP D平均>4个/HP E平均>5个/HP 12.蛋白尿时蛋白定量试验为 A>5mg/24h B>15mg/24h C>50mg/24h D>150mg/24h E>250mg/24h 13.下列疾病可出现蛋白尿,除了 A急性肝炎B急性肾小球肾炎C肾病综合征D妊娠中毒症E慢性肾炎 **14.尿常规检查不正常的是 A尿量1500ml/24h B尿比重波动于1.010±0.003/24h C外观清晰透明 D尿色微黄E尿沉渣见少量扁平上皮细胞

实验室检测项目委托合同

实验室检测项目委托合同书 合同编号:XXXXXX能源检测有限公司

委托方(甲方): 被委托方(乙方): 签定于年月日 实验室以ISO17025为标准的认证综合实验室。 客户委托实验室为其物品或产品或项目进行分析、检测及其它服务(以下称“服务”)。相应详细内容列于明细表。因而客户希望与实验室在本文中约定的条款及条件下就该服务订立本合同。 兹同意: 1、服务:明细表中载明的服务费用依据检验检测有关收费文件执行。必要时可经双方共同认可后确认。实验室应就服务范围和检测项目直接与客户进行沟通,并同意按照客户的要求来提供服务。 2、服务费用和付款:实验室同意提供,且客户同意委托,符合本合同中的条款和条件的、在明细表中载明的服务,其适用费用收取依据检验检测有关收费文件。客户方凭实验室方代表提供的发票支付实验室检测费用。 3、期限:〔本合同将从签署之日起(示于本合同开始处)生效并在2(两)年内保持有效〕客户支付服务费用的义务保持有效。任何一方在至少提前30(三十)天书面通知另一方的前提下,可以在任何时间终止此合同。若客户终止此合同,实验室将完全地和绝对地免除所有完成服务及提供分析报告的义务。客户方应当在报检周期完毕后30天内领取检测报告或结果通知单,否则视为自动放弃领取报告或

结果单,由实验室方依据条款12的要求销毁。 4、各方保证:实验室保证其所进行的服务符合公认的ISO17025国际通用标准或其他相关标准。当服务的个别部分不在ISO17025标准涵盖的范围内时,将通知客户。客户保证出于合法的商业目的而要求服务。 5、担保限制条款:客户应在实验室出具报告之日起30天内以书面形式向实验室报告服务中的任何缺陷,以便得到条款6中的担保赔偿。如30天内未收到缺陷通知,实验室将免除下文的所有义务。兹担保是唯一的且替代所有其它无论是明示还是默认的保证。 6、唯一性使用和唯一性赔偿:对于服务中的任何缺陷,客户的唯一性补偿,和实验室的全部责任,应为重新履行服务。如实验室不能按其保证重新履行服务,客户有权收回已付给实验室的该有缺陷的服务的费用。无论何时,实验室对因下述服务引起的民事侵权、合同、间接的或偶然的损害,包括但不限于关于利润损失、产品负责、第三方索赔或其他经济损失的索赔,均不承担责任。 报告或其他服务应如实验室所理解和同意的那样,供客户专用且用于客户的唯一性目的。客户理解并同意与中华人民共和国相关法律法规一致,服务和报告应唯一性地提供给客户。 7、双方关系:实验室系独立的订约人,本合同中任何内容均不应被解释成建立双方的合作、合资或代理关系。 8、订立合同的权限:本合同各方均有权订立并生成本合同。签署本

临床细菌学检验的质量控制

临床细菌学检验的质量控制 目的研究临床细菌学检验质量控制措施。方法本组抽取我院于2012年8月~2013年8月从各科室采集的4500例细菌标本进行临床实验。分析检验结果的准确性。结果经临床病理证实,临床细菌学检验质量优良为2412例,合格为1778例,不合格为310例,合格率为93.11%。结论规范管理程序,保证标本质量采集的质量,对提高临床细菌学检验的质量具有重要意义。 标签:样本采集;检验质量;细菌学 随着医疗技术的快速发展,细菌学检验逐渐成为临床医学中重要的组成部分。通过对入院患者进行标本采集、研究等,可为临床治疗提供依据。由于临床细菌学检验内容非常复杂,包括标本采集、运送、保存、药物过敏检验等多方面的内容,任一环节出错,都会对检查质量造成影响,因此我们必须格外注意各环节的操作标准。现对我院采集的4500例细菌标本的检验过程进行综合分析,得出如下结论。 1资料与方法 1.1一般资料本组抽取我院于2012年8月~2013年8月从各科室采集的细菌标本4500例,其中559例血液标本,678例粪便标本,894例尿液标本,686例脓液标本,759例生殖道分泌物,924例痰液标本。 1.2方法将采集的标本进行分类处理,对不同的标本进行临床细菌学检验,记录检验结果。 1.3临床评价标准参照医学微生物检验规范对本组实验进行综合评价。根据检验结果的准确性进行综合评价,以优良、合格、不合格作为评价等级。对不合格标本进行研究,分析其影响因素。 2结果 本组4500例标本,其中优良为2412例,合格为1778例,不合格为310例,合格率为93.11%。其中,以粪便标本和血液标本的检查合格率最高,见表1。本组310例不合格,不合格率为6.89%,其具体影响因素见表2。 3结论 随着医疗技术的进步,细菌学开始广泛的应用于临床诊断中,为临床治疗提供准确的依据。临床细菌学检验的过程主要包括细菌采集、运送、管理、检验等,在这一系列的过程中,往往会受到其他因素的干扰,影响检验质量。 3.1影响临床细菌学检验质量的因素

第四节 细菌病的实验室诊断方法

第一篇微生物的基本知识 第一章细菌 第四节细菌病的实验室诊断方法 细菌是自然界广泛存在的一种微生物,细菌性传染病占动物传染病的50%左右,细菌病的发生给畜牧业带来了极大的经济损失。因此在动物生产过程中,必须做好细菌病的防治工作。对于发病的群体,及时而准确地做出诊断是十分重要的。 畜禽细菌性传染病,除少数如破伤风等可根据流行病学、临床症状作出诊断外,多数还需要借助病理变化初步诊断,确诊则需在临床诊断的基础上进行实验室诊断,确定细菌的存在或检出特异性抗体。细菌病的实验室诊断需要在正确采集病料的基础上进行,常用的诊断方法有:细菌的形态检查、细菌的分离培养、细菌的生化试验、细菌的血清学试验、动物接种试验、分子生物学的方法等。 一、病料的采集、保存及运送 (一)病料的采集 1.采集病料的原则 (1)无菌采病料原则病料的采集要求进行无菌操作,所用器械、容器及其他物品均需事先灭菌。同时在采集病料时也要防止病原菌污染环境及造成人的感染。因此在尸体剖检前,首先将尸体在适当消毒液中浸泡消毒,打开胸腹腔后,应先取病料以备细菌学检验,然后再进行病理学检查。最后将剖检的尸体焚烧,或浸入消毒液中过夜,次日取出作深埋处理。剖检场地应选择易于消毒的地面或台面,如水泥地面等,剖检后操作者、用具及场地都要进行消毒或灭菌处理。 (2)适时采病料原则病料一般采集于濒死或刚刚死亡的动物,若是死亡的动物,则应在动物死亡后立即采集,夏天不宜迟于6~8h,冬天不迟于24h。取得病料后,应立即送检。如不能立刻进行检验,应立即存放于冰箱中。若需要采血清测抗体,最好采发病初期和恢复期两个时期的血清。 (3)病料含病原多的原则病料必须采自含病原菌最多的病变组织或脏器。 (4)采病料适量的原则采集的病料不宜过少,以免在送检过程中细菌因干燥而死亡。病料的量至少是检测量的四倍。 2.采集病料的方法 (1)液体材料的采集方法破溃的脓汁、胸腹水一般用灭菌的棉棒或吸管吸取放入无菌试管内,塞好胶塞送检。血液可无菌操作从静脉或心脏采血,然后加抗凝剂(每1ml血液加3.8%枸橼酸钠0.1ml)。若需分离血清,则采血后(一定不要加抗凝剂),放在灭菌的试管中,摆成斜面,待血液凝固析出血清后,再将血清吸出,置于另一灭菌试管中送检。方便时可直接无菌操作取液体涂片或接种适宜的培养基。 (2)实质脏器的采集方法应在解剖尸体后立即采集。若剖检过程中被检器官被污染或剖开胸腹后时间过久,应先用烧红的铁片烧烙表面,或用酒精火焰灭菌后,在烧烙的深部取一块实质脏器,放在灭菌试管或平皿内。如剖检现场有细菌分离培养条件,直接以烧红的铁片烧烙脏器表面,然后用灭菌的接种环自烧烙的部位插入组织中,缓缓转动接种环,取少量组织或液体接种到适宜的培养基。 (3)肠道及其内容物的采集方法肠道只需选择病变最明显的部分,将其中内容

医学检验所临床常用项目一览表

伊康医学检验所临床常用项目一览表 检测项目临床意义价格标本要求报告时间唐氏综合征筛查用于产前唐氏综合征筛查200 血清1ML 3个工作日 肿瘤异常糖链蛋白TAP测定一次组合检测几十种异常糖链糖蛋白,提高肿瘤 检测的准确性,根据糖链的质变来诊断,因此灵 敏度高,特异性强,出具图文报告 370 血清2ML 1个工作日 甲状腺五项 (T3、T4、TSH、FT3、FT4)增高:甲亢、妊娠、急性肝炎。 降低:甲减、长期营养不良、其他全身性疾病 200 血清2ML 24小时 妊娠甲状腺功能检测五项(FT3、FT4、TSH、TG-AB、TPC-AB)增高:甲亢、妊娠、自身免疫性甲状腺炎,慢性 淋巴细胞性甲状腺炎等。 降低:甲减、低蛋白血症、长期营养不良、自身 免疫性甲状腺炎等。 200 血清2ML 24小时 降钙素原(PCT)细菌感染,全身炎症反应综合征脓毒症的早期及 鉴别诊断 230 血清1ML 24小时 糖类抗原CA50 广谱肿瘤标志物,可用于胰腺、肝、卵巢、肠道、 胃、肺等肿瘤的诊断和疗效监测。 80 血清1ML 4个工作日 液基细胞学检查TCT 两者结合检测灵敏度极高,HPV阴性同时TCT 正常者,其发病率风险很低,随访间隔可延至3 年HPV阳性但TCT正常者,可每年随访一次, 对HPV和TCT同时阳性及HPV阴性但TCT阳 性者进行病理切片检查确诊170 宫颈刷出物 2个工作日 人乳头瘤病毒(HVP)340 宫颈刷出物 女性肿瘤四项 (APF、CEA、CA125、CA153)用于女生常见肿瘤(如原发生肝癌、肺癌卵巢癌、 子宫内膜等)诊断和治疖监测,以及乳腺癌的辅 助诊断 235 血清1ML 24小时 孕酮测定(PGN)增高:妊娠、糖尿病孕妇、多胎、原发性高血压、 先天性肾上腺增生等 40 血清1ML 1个工作日 微量元素6项检测人体内微量元素平衡状态,预防微量元素失 衡所致疾病的发生;铅为有毒金属元素;铅增高 可引起肾上腺皮质功能减退,高血压、贫血、胃 肠功能紊乱、儿童智力下降和行为异常等,损伤 生殖细胞及性功能 60 专用管24小时 甲胎蛋白(AFP)测定用于原发生肝癌的诊断,疗效预后监测:畸胎瘤 及胎儿畸形诊断。病毒性肝炎、肝硬化患者AFP 也会有不同程度的升高。 37.5 血清1ML24小时 癌胚抗原(CEA)测定是肺癌和肠癌的首选标志物,用于肺癌、子宫、 乳腺、消化系统肿瘤、肝转移癌等诊断和治疗、 复发监测、判断预后 37.5 血清1ML 24小时 糖类抗原CA19-9测定用于胰腺癌、胆囊癌、胃癌等肿瘤的辅助诊断及 疗效观察 80 血清1ML 24小时 糖类抗CA72-4测定胃癌首选标志物,可用于肠癌、胰腺癌、肝癌的 辅助诊断及疗效监测。 80 血清1ML 24小时 孕妇叶酸水平测定三项:维生素B12;叶酸;红细胞内叶酸维生素B12和叶酸缺乏可导致营养性和巨幼细 胞性贫血,如得不到及时纠正,可导致不可逆性 神经系统损伤,妊娠期血清维生素B12和叶酸水 平低下可导致胎儿神经管缺损 105 血清1ML 24小时 特异?人绒毛膜促性腺激素(?-HCG)早孕、异位妊娠、女性生殖系统肿瘤及绒癌术后 随访指标:睾丸肿瘤等40 血清1ML 24小时

检验士 复习资料

1. 青霉素能抑制细胞壁肽聚糖的合成; 2. 普通培养基:含有细菌需要的最基本营养成分,可供大多数细菌生长;血培养含有丰富的营养成分可供营养要求较高的细菌生长;SS选择培养可选择所欲分离的细菌生长,而抑制其他细菌生长;厌氧培养基加有还原性的物质,降低培养基的氧化还原电势,利于厌氧菌生长,而不利于兼性厌氧菌的生长; 3. 药物敏感试的稀释法用来定量测定药物对被检菌的MIC和MBC; 4. 临床细菌学检验常用的细菌培养方法是:需氧培养法、二氧化碳培养法和厌氧培养法; 5. WHO推荐梅毒血清学诊断的过筛试验是快速血浆反应素环状卡片试验(RPR);WHO推荐梅毒血清学诊断的确证试验是荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS); 6. 大肠埃希氏菌在KIA上分解GLU和乳糖,产气、不产生H2S、在MIU上,动力阳性,吲哚阳性,脲酶阴性,在IMVIC试验++--(加加减减); 7. 寄生虫病流行的三个特点是:地方性、季节性、有些自然疫源性; 8. 我国流行广泛开展重点防治的五大寄生虫病是:血吸虫、疟疾、黑热病、钩虫、丝虫病; 9. 检查微丝蚴制作厚血膜时应注意:应在晚上九点钟以后采血、取三大滴血、应自然风干、血检季节应以夏季或气候温暖时为宜; 10. 可致腹泻的原虫是:结肠小袋纤毛虫、人毛滴虫、隐孢子虫、蓝氏贾第鞭毛虫; 11. 瑞特染料的质量可采用吸光度比值(RA)来作为瑞特染料的质量规格,当瑞特染料成熟时,其RA值应接近于1.3; 12. 消化道肿瘤与消化道溃疡患者粪便隐血试验主要区别在:阳性持续的时间; 13. 嗜碱性点彩红细胞形成的原因为:胞浆内残留的RNA变性; 14. 脑脊液中IgM增高,主要见于化脓性脑膜炎; 15. 精子形态异常超过30%时为不正常,可影响受孕; 16. 胆固醇结晶可存在于:胆汁、胸膜腔积液、关节腔积液、粪便中; 17. 血浆中能使血沉减慢的物质有白蛋白和卵磷脂; 18. 沉淀反应第一阶段:抗原抗体特异性结合、几秒钟至几分钟内即完成、可用散射比浊测定反应结果; 19. 采用试管凝集试验方法的实验有:肥达氏试验、外斐试验、输血交叉配血试验; 20. 正向间接凝集试验是用已知抗原检测相应抗体、临床是主要用于检测自身免疫病患者抗体。 1. 循环免疫复合物的检测是诊断自身免疫性疾病的辅助指标; 2. 待测孔最后显示的颜色深浅与标本中的待测抗原或抗体呈正相关的是:双抗体夹心法、双位点一步法、间接法测抗体; 3. HbF检查,2周岁后正确值是小于2.5%; 4. 正常人红细胞内没有:HbH和HbS; 5. 在正常凝血过程中,可形的复合体的有:A:III、VIIa和Ca2+;B:IXa、VIIIa、磷脂和Ca2+;C:Xa、Va、磷脂和Ca2+; 6. 内源性凝血途径的始动因子是因子XII,外源性的是因子III(组织因子);

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