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1．若两个物质他们的分子式相同,他们的物理性质相同吗?化学性质相同吗?答：化学性质相同一定要分子结构相同，有些物质分子式相同而结构不同（称为同分异构体）则化学性质不相同。
物质不同（包括状态不一样，比如冰和水），物理性质不同。
2.农民经常在湖水中,夏天晒盐,冬天晒碱,请你解释一下这种现象。
碱是什么?答：盐（NaCl）溶解度受温度变化影响较小，适合用蒸发溶剂的方法，只能把水蒸干结晶，因此要夏天晒盐。
而碱（Na2CO3）,溶解度随温度下降显著降低，冬天很易达到饱和，所以适合用冷却热饱和溶液的方法，所以冬天晒碱。
3.乙醇的水溶液,怎样在不分离的情况下判断出他的浓度?答：一、密度。
乙醇浓度越高，密度越低。
二、遮光率。
查表可知。
遮光率和浓度基本呈现线性关系。
三、比较专业一点的就是利用色谱，建议过气相色谱。
利用相对校正因子对面积进行校正，得浓度比。
4.乙醇溶液怎么把乙醇和水进行分离,列举两种方法答：采用特殊精馏：恒沸精馏和萃取精馏5.什么是三传一反?三传和一反分别指什么?萃取、干燥等，遵循质量传递基本规律），“三传”为单元操作，“一反”为化学反应过程。
6.化工常用的反应器有哪些?列举三个答：釜式，管式，塔式，固定床，流化床，涓流床，鼓泡塔。
7.常用的文献检索,中英文的各有哪些?答：中文：CNKI中国知网（全文），万方数据库，维普数据库。
英文：SCI，ACS（美国化学学会），Engineering Village(EI) 。
（各检索流程有待详细了解）8.请你说出一个文献的格式?答：（1）期刊文章（文献类型标识：J）[序号] 主要责任者。
题名[J]。
刊名，年，卷(期)：起止页码（任选）。
（2）专著（文献类型标识：M）[序号] 主要责任者。
题名[M]。
出版地：出版者，出版年，起止页码。
（3）论文集（文献类型标识：C）中析出的文献（文献类型标识：A）[序号] 析出文献主要责任者。
析出文献题名[A]。
论文集主要责任者（任选）。
《微生物学》学期考试题1(参考答案附后)一、填空题(每题分，共25分)二、名词说明(每题３分，共18分)Ⅰ.革兰氏染色法 2.巴斯德消毒法 3.营养缺点型4. 溶源性细菌5.活性污泥6.生物传感器三、问题解答(共57分)l.何谓大肠菌群简述食物中大肠菌群数的测定方式。
(6分)2.现有一培育基配方如下: 可溶性淀粉5%、蛋白胨%、磷酸二氢钾%、硫酸镁%、琼脂2%, ,试回答下列问题: (l)按营养物质来源分类, 属何种类型培育基为什么(2)此培育基适于培育哪类微生物什么缘故(3)简述配制200ml该斜面培育基的操作进程。
(7分)3.现拟从自然界中分离挑选出α-淀粉酶产量较高的枯草芽抱杆菌,试回答以下问题: (l)你以为应该到什么地址搜集含此菌的样品较为适宜(2)进行纯种分离时,为提高效率,根据该菌的何种特性可采纳哪些相应的方式(3)可采纳哪些纯种分离方式(4)在进行性能测按时, 可采纳何种简化的初筛方式(7分)4.关于分支合成途径, 如何才能积存大量的结尾产物试以简图表示并说明之。
(4分)5.什么是活菌计数法现有一细菌菌液, 其中的活菌数约为104～105个/ml, 如何计算出其准确活菌数试用简图表示并说明之。
(7分)6.在进行诱变育种时,对菌悬液的制备有什么要求经诱变处理后的菌液什么缘故要进行中间增殖培育(6分)7.简述高压蒸汽灭菌和干热灭菌的方式及其操作要点或注意事项。
(5分)8.画出曲霉和根霉的形态简图并标明各部份的名称。
(5分)9.什么是细菌生长曲线可分为哪几个时期各有什么特点(5分)10.什么是基因工程？简述基因工程的要紧操作步骤。
(5分)《微生物学》学期考试题1参考答案一、填空题(每题分，共25分)1.微生物是指所有形体微小，单细胞或结构简单的多细胞，或没有细胞结构的一群最低等生物。
2.工业微生物要紧包括细菌、放线菌、酵母菌、霉菌、噬菌体等五大类, 其要紧特性是(l) 种类多(2) 散布广(3) 繁衍快 (4) 代谢强 (5) 易变异。
考研-华南理工大学-发酵工程-工业微生物复习题及答案复习思考题及答案第一章微生物与工业微生物学1.什么是微生物？广义的微生物和工业微生物主要包括哪几大类？答：微生物是指所有形体微小，单细胞或结构简单的多细胞，或没有细胞结构的一群最低等的生物。
整个微生物家族的成员包括三大类：(1) 非细胞类微生物(真病毒、亚病毒)；(2) 原核细胞类微生物(细菌、放线菌、蓝细菌、支原体、立克次氏体、衣原体)；(3) 真核细胞类微生物(酵母菌、霉菌、蕈菌、藻类、原生动物)。
以上三大类微生物中, 原核生物中的细菌、放线菌，真核生物中的酵母菌、霉菌和蕈菌, 以及非细胞生物中的噬菌体, 是在工业上有重要用途或关系密切的微生物。
2.微生物具有哪些主要特性？试简要说明之。
答：微生物, 除了具有一般大型生物的共性外, 还带来了以下这些任何其它生物所不能比拟的特性：(1)种类多到目前为止, 人们已经发现并已认识的微生物种类大约有20万种, 其中绝大多数为较容易观察和培养的真菌、藻类和原生动物等大型微生物。
据粗略估计, 微生物的种类约为几百万种。
人类已经开发利用的微生物则仅占已发现微生物种的约1%, 都是与人类的生活、生产关系最密切的那些种类。
此外，在现有环境中还存在着极其大量的“不可培养的”（unculturable）微生物。
微生物种类多, 一方面还表现在微生物的生理代谢类型多, 另一方面还表现在微生物能产生和积累的代谢产物种类繁多。
(2)分布广微生物因其形体微小、重量轻, 故可以随着风和水流到处传播。
在空气、水、土壤和动植物体表体内, 到处都充满了大量的各种微生物。
可以说微生物是无处不有, 无孔不入, 几乎到处都是微生物活动的场所。
只要环境条件合适, 它们就可以在那里大量地繁殖起来。
凡是有动植物生存的地方都有微生物存在, 而没有动植物生存的地方也有微生物存在。
因为一部分微生物具有特殊的抗逆性, 它们可以在某些恶劣的极端环境条件下生活, 被人们认为是生物圈上下限的开拓者和各种世界记录的保持者。
华南理工大学微生物生化考研复试复习题考试题型和分值：填空20’名词解释20’问答题6题60’（无计算题）1.发酵工业常用菌种的特性及分类：培养基原料来源广、廉价；培养条件易控制；发酵周期短；菌株高产；抗病毒（噬菌体）能力强；菌株性状稳定，不易变异退化；菌体本身不能是病原菌。
分类：细菌（短杆菌，枯草杆菌）、酵母菌（假丝酵母，啤酒酵母）、霉菌（黑霉菌，根霉）、放线菌（小单孢菌，灰色放线菌）2.工业发酵中根据发酵菌种的特点如何分类？培养类型分为静置培养法（厌气性发酵）和通气性培养（好气性发酵）；种子扩大培养方法包括液体培养法（三角瓶摇床震荡或转式培养）和表面法培养（菌体在固体、液体表层生长）；大规模工业生产的培养方法分为固体培养（浅盘固体培养，深层固体培养），液体培养（浅盘液体培养，液体深层培养），载体培养（吸收了固态的曲法培养与液态培养的优点），两步法液体深层培养（在酶制剂和氨基酸生产中应用较多）。
3.菌种扩大培养的理由是什么？培养级数如何确定？为了在每次发酵罐的投料中提供相当数量代谢旺盛的种子，根据菌种生长速度快慢和接种量来决定扩大培养的级数。
4.如何保持生产菌种的优良性能？引起菌种衰退的原因是什么？防止菌种衰退的方法：尽可能满足其营养条件、培养条件，避免有害因素影响；尽量减少转代次数；采用幼龄菌种。
菌种复壮方法：分离复壮；若单菌落分离不行，可改变培养条件，或两者结合进行复壮；诱变因素处理，再进行单菌落分离。
原因是：菌种保藏条件不合适；培养条件未得到满足。
5.水解糖的制备方法有哪些，各自特点如何？酸解法：是以酸为催化剂，在高温高压下将淀粉水解转化为葡萄糖的方法，该法简单易行，对设备要求简单，设备生产能力大，但设备要求耐腐蚀，耐高温高压，且有副反应发生，对淀粉原料要求高，淀粉浓度也不宜过高。
酶解法：是用淀粉酶将淀粉水解转化为葡萄糖。
将淀粉先液化再糖化，故又称双酶水解法。
该法反应条件温和，不需高温高压，可在较高淀粉浓度下水解，所得糖液色浅、较纯净、无苦味，质量高，利于精制，但酶解反应时间较长要求设备较多，易造成糖液过滤困难。
09-11华南理工854微生物生化试题854 华南理工大学2009 年攻读硕士学位研究生入学考试试卷（请在答题纸上做答，试卷上做答无效，试后本卷必须与答题纸一同交回）科目名称：微生物生化(含工业微生物学、生物化学) 适用专业：生物化工，发酵工程，生物制药共3 页第1 页一、填空题(每个空1分，共35分)1．侵染寄主细胞后暂不引起细胞裂解的噬菌体称为（）。
2. 芽孢是芽孢细菌的（）器官。
3．某些酵母在繁殖过程中,芽体不脱落,并相连接成藕节状,形似菌丝称（）。
4．根瘤菌可与（）植物共生固氮。
5. 荚膜的主要化学成分有（）和（）等，常采用（）方法进行荚膜染色。
6．微生物的培养基按用途通常分为基础培养基、完全培养基、（）、（）、（）五大类。
7．Lipopolysaccharides(LPSs) contain both lipid and carbohydrate, and consist of three parts: （）, （）, and （）. (此题要求英语做答)8．Genetic recombination occurs in eucaryotes through sexual reproduction. In bacteria, recombination occurs through the processes of （），（）, and （）. (此题要求英语做答) 9．The multiplication cycle of bacteriophages, like that of all viruses, can be divided into five distinct stages: （）, （）, biosynthesis of viral components, （）, and （）. (此题要求英语做答)10．TCA循环中，α-酮戊二酸脱氢酶催化的反应需要的辅因子有：NAD +、TPP 、（）、（）、（）和（）。
1 、谁是第一个观察到微生物的人？2 、十九世纪哪两个焦点问题的争论促使了这些微生物研究技术的诞生？3 、巴斯德是如何击败自然发生学说？4 、什么是病原菌学说？谁提出，谁验证的？5 、什么是柯赫法则？6 、微生物学在生命科学发展中的重要地位？7 、如何获得纯培养？8 、为了获得细菌纯培养怎样进行平板划线？9 、描述细菌获得纯培养的稀释倒平板法？10 、微生物的保藏的原理？如何防止菌种衰退 ?11 、影响显微镜分辨率的因素？12 、如何实现光学显微镜一般配置的最大放大倍数？其原理？13 、识别显微镜物镜上的标记？14 、生物分类的二种基本原则 ?15 、生物大分子作为进化标尺依据？为什么 16SrRNA 一把好的谱系分析的“ 分子尺”?16 、 Carl Woese 提出的分子进化树 ? 微生物在其中的位置？17 、微生物的命名法？18 、如何进行菌种的分类鉴定（以大肠杆菌为例）？19 、如何利用核酸分子杂交来进行分类鉴定？权威的细菌鉴定手册？20 、细菌的主要特征和繁殖方式？21 、如何使用显微镜测微尺测量细菌大小？22 、细菌细胞壁的结构（ Gram + 、 Gram —）与功能？ gram 染色的原理和步骤？知道常规的几种 Gram + 、 Gram —的菌种23 、细胞膜的组成与结构、功能？液态镶嵌模型24 、细菌芽孢的组成与结构？芽孢的耐热机制？25 、细菌鞭毛的结构及其推动细菌运动的特点？26 、细菌性纤毛的能功能？27 、放线菌的形态与结构、繁殖方式？链霉菌的生活史？28 、霉菌的形态与结构、繁殖方式？有性孢子和无性孢子？霉菌的有性生活史？29 、酵母的形态与结构、繁殖方式？酵母的有性生活史？30 、古细菌细胞的特点？31 、工业应用的主要细菌及其产品？32 、产抗生素的主要生产菌？33 、酿酒酵母的形态特点与繁殖及其生产上的用途？34 、毛霉、根霉、曲霉、青霉形态上的差异？35 、淀粉酶、蛋白酶、柠檬酸的主要生产菌？36 、微生物的营养类型的分类？37 、培养基应该具备微生物生长所需要六大营养要素？功能？实验室中常用的药品？38 、选用和设计培养基的原理和方法？基本培养基、完全培养基？鉴别培养基，伊红和美蓝鉴别大肠杆菌的原理？39 、营养物质进入细胞的方式？促进扩散与主动运输的区别？基团转位的原理？40 、 Na+,K+-ATP 酶 (Na+,K+-ATPase) 系统？41 、微生物生长的测定方法？如何用稀释法测定微生物生长？42 、血球计数板的测定方法？以生物量为指标测定微生物的生长的方法？43 、生长曲线并解释之？44 、倍增时间、比生长速率？微生物生长动力学 monod 方程？实验连续培养的条件和方法？45 、下列物品采用什么方法灭菌？说明理由：培养基玻璃器皿46 、下列物品采用什么方法灭菌？说明理由：室内空气酶溶液47 、抗生素的作用机理？青霉素？细菌耐药性机理是哪些 ?48 、试举例说明日常生活中防腐、消毒和灭菌的实例，及其原理。
华南理工大学硕士学位研究生入学考试模拟试卷1一、填空题1测定细菌、放线菌大小一般以____ 为单位，而测定病毒的大小则以___ 为单位。
细菌细胞除基本结构外，还有诸如_____、______ 和_____ 等特殊结构。
2微生物学的发展简史可分为 ___ __、______ 、_____、现处于 __。
3细菌的菌落特征包括____、____、_____、_____、_____、_____、_____、_____。
4真菌菌丝有两种类型，低等真菌的菌丝是______，高等真菌的菌丝是____。
5大多数 DNA 动物病毒的核酸在 ____ 复制 , 蛋白质在 ______ 合成 ,病毒粒子的组装在____ 完成。
6在营养物质运输中既消耗能量又需要载体的运输方式是_______,_______。
分解代谢是______ 能代谢。
7 ED 途径中关键性酶是______。
8微生物按其生长温度范围可分为_______、______ 和_____3 类。
9 pH 影响微生物生长的机制是______、________、______。
10.能引起植物病害的微生物包括_______、________、_______等，其中以______为最多。
11.在进行诱变育种工作时，经紫外线照射后的菌体都须在避光下进行操作或处理，其理由是______。
12.饮用水的卫生状况通常以水中的___、___作为指标。
13.在无电镜时，可用下列方法来判断某种细菌是否长鞭毛 ____ ___；_______；_____。
14.放线菌的菌体形态呈 ____，革兰氏染色_____，____ 运动，为 ____ 营养型微生物。
15.原核微生物包括有_______、_______、_______ 和______ 等，真核微生物包括有_______、_______、________ 和_______ 等，它们的大小以_______ 单位来表示。
16.有一类真菌，由于仅发现_____，未发现_____，所以在真菌学中叫做半知菌。
第一章菌种与种子扩大培养一、菌种保藏1、目的：提高菌种存活率，减少菌种的变异，保持原来优良的生产性能。
2、原理：根据菌种的生物生理、生化特点，人工地创造条件，使菌种的代谢活动处于不活泼状态，生长繁殖处于休眠状态。
二、菌种保藏的方法：斜面保藏法、矿物油保藏法、砂土保管保藏法、真空冷冻干燥法、冷冻法、液态真空干燥法、琼脂穿刺封口保藏法、曲法保藏、麦粒保藏法、无水硅胶保藏法。
三、防止菌种衰退的方法A、从菌种选育方面考虑B、尽量减少传代次数C、创造良好的培养条件D、利用不易衰退的细胞传代E、采用有效的菌种保藏方法四、菌种复壮方法①纯种分离法；②淘汰已衰退的个体③采用其它方法：诱变因素处理，再进行单菌落分离；选择合适的培养基五、种子扩大培养的任务：获得大量的活力强的种子，以便在发酵罐的发酵培养过程中尽可能地缩短迟滞期。
六、作为种子扩大培养的方法①液体培养法（三角瓶摇床震荡或转式培养）；②表面法培养：液体表层；③固态法培养。
七、影响种子质量的主要因素1、培养基：主要是碳源、氮源、无机盐、生长素和水等。
选用原则：组分简单，来源丰富，价格便宜，取材方便等。
种子培养基是培养菌体的（以菌体增殖为主要目的），应该是糖份少而氮源多些。
但种子罐与发酵罐培养基成分趋于一致时，可缩短发酵生产的周期，但在各成分的数量（原料配比上），应根据培养目的而定。
2、种龄与接种量3、斜面冷藏时间4、温度：温度直接影响生长和酶的合成；5、pH值：对微生物有明显的影响。
各种微生物都有生长和合成酶的最适pH。
培养基pH值在发酵时要受菌体代谢的影响。
调节方法（使之保持适当的pH值）有三种方法：用酸碱溶液中和法；使用缓冲溶液法；使用生理缓冲剂；6、通气搅拌：（溶解氧的作用：参与菌体呼吸作用）搅拌：促进氧的溶解与营养物质及代谢产物的分散。
通气量的多少以溶解氧的多少来衡定（溶解氧浓度应不低于临界溶氧浓度）。
通气过程中，影响溶解氧的因素：菌种（丝状影响最大）；培养基性质；培养阶段；发酵罐的结构；7、泡沫：危害：影响微生物对氧的吸收；妨碍CO2的排除；减少设备利用率（有效容积减少）；造成跑料，导致染菌；消泡方法：（1）消泡剂：天然动植物油、石油化工矿物油；改性油，表面活性剂（有机硅聚合物）；（2）机械消泡：（3）改变培养基成分：8、染菌的控制染菌原因：设备、管道、阀门漏损、发酵罐结构“死角”、灭菌不彻底、空气净化不好、无菌操作不严、菌种不纯；9、种子罐级数种子罐级数越少，越有利于简化工艺，便于控制，减少染菌；种子罐级数取决于：①种子的性质（生长繁殖性能）；②孢子瓶中孢子的密度（密度大则级数少）；③孢子发芽及菌丝繁殖速度；④发酵罐中种子的最低接种量；⑤种子罐与发酵罐的容积比；在生产中应注意种龄与接种量：种龄：过老过嫩都不好；细菌以对数生长期为宜（霉菌也是）；酵母以二倍体细胞为好；接种量：依据具体的发酵类型和工艺条件而定。
华南理工大学工业微生物复习试题及大纲复习题一一、名词解释菌落假根荚膜子实体中体质粒有性孢子菌胶团菌株原生质体噬菌体噬菌斑真菌兼性厌氧锁状联合气生菌丝营养缺陷型分生孢子孢囊孢子子囊孢子自养微生物性菌毛鞭毛基因同型乳酸发酵细菌微生物营养细胞病毒发酵有氧呼吸抗生素灭菌无菌巴斯德消毒曝气法分解代谢染色体互生大肠杆菌活性污泥生态平衡葡萄糖效应恒化法生长曲线基因重组转化突变率点突变感受态细胞光复活液泡溶菌酶革兰氏染色载片培养法稀释平板法悬滴法转换二、问答题1. 绘图并标注说明一般根霉和青霉的菌体形态。
2. 什么叫表型延迟现象？引起表型延迟现象的原因是什么？3. 营养物质透过微生物细胞进入细胞的方式包括哪几种类型？4. 溶源性细菌的基本特征如何？怎样检测某一菌种是否是溶源性细菌。
5. 举例说明温度、PH值对微生物的生长与代谢的影响。
6. 试述渗透压对微生物生长的影响。
7. 营养缺陷型筛选中，淘汰野生型的方法有哪两类？8. 试述紫外线对微生物细胞具有诱变与杀菌作用的机制。
9. 试述如何延长微生物的对数生长期？10. 试述高压蒸汽灭菌的操作步骤及其注意事项。
11. 利用物理或化学诱变剂对微生物进行诱变的目的有哪些？12. 筛选抗代谢结构类似物突变株的意义是什么？13. 什么是烈性噬菌体，其生活史包括几个过程？14. 什么叫生长曲线？单细胞微生物的典型生长曲线可分几期。
15. 大肠菌群检测作为食品卫生学检测指标之一的意义是什么？16. 简述缩短延滞期可采取哪些措施？17. 为什么在进行诱变处理时，要把成团的微生物细胞或孢子制成充分分散的单细胞或单孢子悬浮液？18. 简述噬菌体的侵染过程（烈性和温和性噬菌体）并画出草图。
19. 菌种保藏的主要原理是什么？并举例说明。
20. 试述营养缺陷型的定义, 筛选的一般步骤，并举例说明如何检出缺陷型？复习题二一、名词解释无性孢子真酵母假菌丝菌膜子实体Ｓ型菌落单倍体型粘液层支原体立克次氏体裂解量溶源化寄生好氧免疫免疫原性抗原生长因子原养型基内菌丝内毒素厚垣孢子担孢子异养微生物螺旋藻三域学说菌毛外显子产能代谢基因工程异型乳酸发酵放线菌固氮作用反硝化作用亚病毒无氧呼吸消毒抑菌无菌操作生物膜法核小体致死剂量拮抗大肠菌群诱发突变转染移码突变暗修复糖酵解表达载体底物水平磷酸化光合磷酸化蜗牛酶划线法水浸片法颠换温和噬菌体基因重组原核微生物选择培养基基因突变烈性噬菌体病原微生物芽孢连续培养延迟期光复活现象二、问答题1. 概述制作细菌生长曲线的操作程序、各阶段的特点。
华南理工大学
2016年攻读硕士学位研究生入学考试试卷
（试卷上做答无效，请在答题纸上做答，试后本卷必须与答题纸一同交回）
科目名称：微生物生化(含工业微生物学、生物化学)
适用专业：发酵工程，生物工程(专业学位)
华南理工大学
2017年攻读硕士学位研究生入学考试试卷
（试卷上做答无效，请在答题纸上做答，试后本卷必须与答题纸一同交回）
科目名称：微生物生化（含工业微生物学、生物化学）
适用专业：发酵工程；生物工程（专硕）
华南理工大学
2018年攻读硕士学位研究生入学考试试卷
（试卷上做答无效，请在答题纸上做答，试后本卷必须与答题纸一同交回）
科目名称：微生物生化(含工业微生物学、生物化学)
适用专业：发酵工程；生物工程(专硕)。
考试题型和分值：填空20’名词解释20’问答题6题60’（无计算题）1.发酵工业常用菌种的特性及分类：培养基原料来源广、廉价；培养条件易控制；发酵周期短；菌株高产；抗病毒（噬菌体）能力强；菌株性状稳定，不易变异退化；菌体本身不能是病原菌。
分类：细菌（短杆菌，枯草杆菌）、酵母菌（假丝酵母，啤酒酵母）、霉菌（黑霉菌，根霉）、放线菌（小单孢菌，灰色放线菌）2.工业发酵中根据发酵菌种的特点如何分类？培养类型分为静置培养法（厌气性发酵）和通气性培养（好气性发酵）；种子扩大培养方法包括液体培养法（三角瓶摇床震荡或转式培养）和表面法培养（菌体在固体、液体表层生长）；大规模工业生产的培养方法分为固体培养（浅盘固体培养，深层固体培养），液体培养（浅盘液体培养，液体深层培养），载体培养（吸收了固态的曲法培养与液态培养的优点），两步法液体深层培养（在酶制剂和氨基酸生产中应用较多）。
3.菌种扩大培养的理由是什么？培养级数如何确定？为了在每次发酵罐的投料中提供相当数量代谢旺盛的种子，根据菌种生长速度快慢和接种量来决定扩大培养的级数。
4.如何保持生产菌种的优良性能？引起菌种衰退的原因是什么？防止菌种衰退的方法：尽可能满足其营养条件、培养条件，避免有害因素影响；尽量减少转代次数；采用幼龄菌种。
菌种复壮方法：分离复壮；若单菌落分离不行，可改变培养条件，或两者结合进行复壮；诱变因素处理，再进行单菌落分离。
原因是：菌种保藏条件不合适；培养条件未得到满足。
5.水解糖的制备方法有哪些，各自特点如何？酸解法：是以酸为催化剂，在高温高压下将淀粉水解转化为葡萄糖的方法，该法简单易行，对设备要求简单，设备生产能力大，但设备要求耐腐蚀，耐高温高压，且有副反应发生，对淀粉原料要求高，淀粉浓度也不宜过高。
酶解法：是用淀粉酶将淀粉水解转化为葡萄糖。
将淀粉先液化再糖化，故又称双酶水解法。
该法反应条件温和，不需高温高压，可在较高淀粉浓度下水解，所得糖液色浅、较纯净、无苦味，质量高，利于精制，但酶解反应时间较长要求设备较多，易造成糖液过滤困难。
酸酶法：事先将淀粉酸水解成糊精或低聚糖，再用糖化酶将其水解为葡萄糖。
该法酸液化速度快，且对液化液要求不高，可采用较高浓度淀粉液。
酶酸法：将淀粉乳先用a-淀粉酶液化到一定程度，然后用酸水解成葡萄糖。
此法可才用粗原料淀粉，淀粉浓度较高且酸水解pH值稍高，可减少淀粉水解副反应发生，糖液色泽较浅。
6.设计菌种培养基时，哪些组分最重要，这些组分的作用是什么？能源：生长、繁殖需要；碳源：提供能量、构成菌体、代谢产物的物质基础；氮源：构成菌体、含氮代谢物；无机盐：构成菌体，参与酶的组成，维持酶活性，调节渗透压，调节pH值，维持氧化还原电位；特殊生长因子：酶的辅助部分，维持生命活动；水分：生化反应均在水溶液中进行。
7.培养基灭菌的方法有哪些？如何保证灭菌效果？干热灭菌；湿热灭菌；射线灭菌；化学药品灭菌。
排除影响培养基灭菌效果的因素：不同灭菌温度、时间以及培养基成分会影响微生物的耐热性；pH值6~8时最耐热，而<6则因为H+的渗入而改变生理条件易死亡；培养基中的颗粒,小于1mm颗粒影响小,而越大则影响大；由于泡沫形成空气隔热层影响热传递而使杀菌困难,添加消泡剂可有效解决此问题。
8.培养基采用高温短时灭菌的依据，如何证明？高温是因为在致死温度以上，温度越高，微生物的致死时间越短；短时也可以使培养基受热时间短，营养成分破坏少，有利于提高发酵产率。
9.什么是对数残留定律，它的意义是什么？是微生物的热死规律：θ=1/k InN0/Nθ（残留菌数Nθ→0，灭菌时间θ→∞）k——反应速度常数，表示微生物耐热性，相同温度下，k 值越小的微生物越耐热，一般取Nθ≈0.001个杂菌,即灭菌1000次允许有一个菌存在。
10.连续灭菌法有什么优点？高温短时,减少营养成分的损失；发酵罐利用率高；提高能源利用率,节省能源,蒸汽负荷均匀；便于自动化控制。
11.引起糖酵解速度变慢的主要因素是什么？糖酵解的过程受细胞内能量水平的控制。
在生物体内ATP和ADP是有一定比例的,使细胞内维持一定能荷，能荷能对糖酵解进行有效调节。
若细胞内能量满载时,A TP是唯一的腺苷酸，则能荷为1。
当体系中A TP含量高时，A TP抑制磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶的活性，使酵解减慢。
12.在酵母体内，甘油是如何生成的？酵母在一定条件下培养，可以利用糖分生成甘油。
这是磷酸二羟丙酮在α－磷酸甘油脱氢酶催化下，作为受氢体而被还原为α－磷酸甘油，后者在α－磷酸甘油磷酸酯酶催化下生成甘油。
另外，在酵母中，乙醇脱氢酶活力很强，因此，在乙醇发酵中，甘油生成量很少。
如果改变发酵条件或者加入某种抑制剂，阻止乙醛作为受氢体时，就可以大量积累甘油。
13.什么是巴斯德效应？在好气条件下，酵母发酵能力则降低的效应，即是细胞内糖代谢速度降低。
14.柠檬酸生物合成中，应注意哪些调控方法？（1）糖酵解及丙酮酸的调节：磷酸果糖激酶(PFK)是调节酶，受A TP和柠檬酸的抑制,而被AMP,无机磷和NH4 +激活.这表明了NH4 +能有效解除柠檬酸对PFK的抑制，而大量积累柠檬酸。
（2）三羧酸循环的调节：柠檬酸合成酶, 受A TP抑制,而在菌种细胞中，A TP主要以络合物ATP-Mg的形式存在,其抑制作用较弱.而草酰乙酸可激活此酶(通过提高此酶与乙酰CoA的亲和力实现).（3）乙醛酸循环和醋酸发酵柠檬酸：由于黑曲霉中存在异柠檬酸裂解酶，此酶催化异柠檬酸裂解为乙醛酸和琥珀酸，而由醋酸或烃类合成柠檬酸的途径。
在氮源耗尽时，细胞内AMP浓度陡然下降，这就抑制了NAD-异柠檬酸脱氢酶的活性，这时柠檬酸的合成远大于分解从而积累起来。
（4）丙酮酸羧化酶也称线粒体酶，是组成酶。
生物素辅基在酶的位点上起中间载体的作用将羧基转移到丙酮酸上生成草酰乙酸。
K+对该酶有激活作用（5）丙酮酸脱H酶受A TP和亚砷酸的抑制。
ADP、Ca+ 使该酶激活。
（6）柠檬酸→顺乌头酸→异柠檬酸的反应，是因为黑曲霉的线粒体上存在顺乌头酸水合酶,它能催化建立以下平衡:柠檬酸:顺乌头酸:异柠檬酸=90:3:7，该酶需要Fe2+参与，应控制Fe2+浓度。
而NAD-异柠檬酸脱氢酶活性低,虽然细胞质中NADP-异柠檬酸脱氢酶不受柠檬酸抑制,但在线粒体上的NADP-异柠檬酸脱氢酶受柠檬酸抑制;所以当柠檬酸达到一定浓度时，能够抑制自身的进一步分解,导致积累柠檬酸; 当pH到2时,已经能使上述三种酶失活而进一步积累柠檬酸.15.用黑曲霉生产柠檬酸时，通气条件变化会有什么影响？以黑曲霉生产柠檬酸时，如果短时间停止供气，会影响柠檬酸的产量，但对菌体生长没影响。
这主要是黑曲霉含有两条呼吸链，即侧系呼吸链（不生成ATP）和标准呼吸链（生成ATP）。
当供气正常时，两条呼吸链同时工作，代谢正常进行。
当供气不正常时，侧系呼吸链产生不可逆失活，此时NADH2只能通过标准呼吸链氧化，产生过量的A TP从而抑制磷酸果糖激酶(PFK)的活性，糖酵解减慢。
16.GA发酵时，DCA循环应如何控制？在糖质原料发酵谷氨酸时，产物生成期应关闭DCA循环,因为经DCA循环谷氨酸的转化率只有54.4%,而经TCA循环为81.7%。
原因是减少经CO2固定提供的C4产物。
菌种生长时应启动DCA循环提供C4产物,如采用乙酸,乙醇为原料时DCA循环应打开。
生物素浓度高时对异柠檬酸裂解酶有激活作用,可启动DCA循环,当生物素浓度低时（2~5µg/L），有机酸浓度高时对异柠檬酸裂解酶有抑制作用,可关闭DCA 循环。
解除乙醛酸、草酰乙酸对异柠檬酸脱H酶抑制。
17.氨的导入途径有几种，各自的特点如何？途径: 1、由α-酮戊二酸还原氨基化生成；途径: 2、氨基转移作用,提供氨基使α-酮戊二酸直接生成谷氨酸；途径: 3、谷氨酸合成酶途径。
其中以途径1为主,谷氨酸脱氢酶,需要NADPH+H+为辅酶,而NADPH+H+是异柠檬酸脱氢酶崔化形成的，故受到异柠檬酸脱氢酶及其辅酶的限制。
但正常情况下异柠檬酸脱氢酶的活性始终低于谷氨酸脱氢酶.途径2为辅,原因是多消耗1个A TP,但此酶对氨离子的亲和力高，可利用环境中低浓度的氨离子.且不受谷氨酸的反馈抑制.途径3应用极少，因其它氨基酸(天冬氨酸和丙氨酸)量少,不经济。
18.GA生产菌细胞膜通透性的方法有哪些？生物素缺乏，磷脂含量降低而导致细胞膜合成不完整,增加细胞膜通透性。
生物素丰富时，可采用：1、用油酸缺陷型菌株,由于油酸是不饱和脂肪酸,是磷脂的组成分,缺乏时细胞膜不完整而易排出谷氨酸。
2、饱和脂肪酸和表面活性剂是生物素拮抗剂,可阻断不饱和脂肪酸合成而减少磷脂合成。
3、甘油缺陷型，可限制脂肪,包括磷脂合成而起作用。
4、生物素缺陷型,因为生物素促进脂肪酸合成，再生成磷脂.当缺陷时不能合成生物素,限制培养剂中的生物素量,从而抑制不饱和脂肪酸合成和减少磷脂。
生物素过量时，1、添加脂肪酸类物质或表面活性剂，作用是对不饱和脂肪酸合成过程中的生物素有拮抗作用。
2、想法阻碍脂肪酸合成，使油酸合成量减少，导致磷脂合成量不足，影响细胞膜合成。
3、添加青霉素,抑制细胞壁的合成(不完整),引起磷脂和UDP-N-乙酰己糖流失,而导致细胞膜受损.19.赖氨酸发酵过程中，如何解除反馈调节作用？1. 渗漏缺陷型(不完全切断支路代谢) ，即降低不需要的酶活,进一步提高所需要的酶活。
2. 切断支路代谢—选育高丝氨酸缺陷型(完全切断支路代谢)。
3.选育抗结构类似物突变株解除代谢过程的抑制或阻遏作用。
4.解除代谢互锁, 例如赖氨酸合成受亮氨酸阻遏.故采用亮氨酸缺陷菌株,抗亮氨酸突变菌株或用苯醌等处理得到亮氨酸渗漏缺陷型菌株。
5.增加前体物合成和阻塞副产物生成, 从生产速度和提高产率角度分析,可应用合适的前体物合成途径。
6.改善细胞膜的透性, 选育主动运输性强的菌株, 在此利用谷氨酸发酵改善细胞膜的透性方法是否可行?GA棒杆菌以糖蜜发酵赖氨酸时，加入红霉素，产量从40.1g/L升至55.8g/L。
7. 温度敏感突变株,即高温使分支途径酶失活而促进主产物的合成。
8. 细胞工程, 原生质体融合技术.得到耗糖快,发酵速度快,可提高赖氨酸产量的菌株.基因工程, 提高关键酶活性,促进产物合成。
9. 防止回复突变的措施：（1）选择性能稳定的菌株；（2）增加遗传标记,如缺陷型采用二个以上的缺陷,抗性采用两个以上的抗性；（3）缺陷型菌种保藏与培养时，保证所缺的营养要丰富；（4）抗性菌要在培养基中添加所抗类似物；（5）利用生产菌耐某些抗生素的特性，添加一定的抗生素防止回复突变。
20.IMP积累的条件是什么？1、可选育腺嘌呤（Ade-）和黄嘌呤（Xan-）双重缺陷型菌种，切断IMP到SAMP、XMP的二条支路。
