以淀粉为原料双酶法制葡萄糖生产工艺
以淀粉为原料双酶法制葡萄糖生产工艺 双酶法是用专一性很强的淀粉酶和糖化酶为催化剂，将淀粉水解为葡萄糖的工艺。淀粉水解分为两步进行：第一步，用耐高温α-淀粉酶进行液化；第二步，用淀粉糖化酶对液化后液进一步水解为葡萄糖，使 DE 值达到 98%以上。水解反应 〔 C6H10O5〕n + nH2O n〔C6H12O6〕糖化酶 生产工艺流程图： 玉米淀粉（或精制淀粉乳） ↓ 调浆计量 ↓ 蒸汽→喷射液化←淀粉酶 ↓ 糖化←复合糖化酶 ↓ 蒸汽→灭酶脱色←活性炭 ↓ 板框过滤→旧活性炭弃去 ↓ 离子交换 ↓↙冷却水
蒸汽→蒸发浓缩——→葡萄糖浆 ↓ 降温结晶←冷却水 ↓ 糖膏分离 ↓ 蒸汽→气流干燥 筛分 ↓ 食用葡萄糖 ↓ 检验 ↓ 称量包装 ↓ 成品入库 生产结晶葡萄糖一般的配料工序要求的指标为： 浓度： 30%～36% （如生产其他的糖品，料液配料浓度可放宽到 45%）pH 值：最适 pH5.4～6.0(可在 pH5.0～7.0 之间选择) 淀粉乳蛋白含量：≤0.6% 电导率：≤200us/cm 1、调浆
工艺过程：①用低于 42℃的水将粉乳比重调至 17-18.5Be°，用泵将调好的淀粉乳打入调节罐，在不断搅拌条件下加一定量的 10%稀碱液使淀粉 PH 达5.5-5.8。②加入一定量的耐高温α—淀粉酶进行液化。加高温酶的量根据液化液的 DE 值确定，要求 DE 值在 13-17%之间。 2、液化： 工艺过程：①将一定浓度，一定 PH 值的淀粉乳连续用泵打入连续液化器进行液化。②一喷液化温度控制在 106-110℃，二喷液化温度控制在 135-145℃，控制出料速度，使液化液碘色反应为棕红色③液化液不合格必须返工，重新液化。 酶法喷射液化工序要求的指标为： 浓度：32%±2% pH 值：5.4～6.0（最好 5.5～5.8） 加酶量：0.035%～0.07%（对固形物） 喷射温度：一喷温度： 106-110℃二喷温度： 135-145℃ 液化保持：温度：95℃；时间：90～120min. 液化终了 DE 值：14～20%之间（最好在 DE14～16%之间） 碘试：暗红樱色 3、糖化： 工艺过程：①将降温后的液化料液，调好 PH 值，按干物量加入糖化酶②在一定温度 条件下糖化一定时间 DE 值达 98%以上。 酶法糖化工序要求的指标如下：
阿托伐他汀酶法生产工艺 本生物法制备阿托伐他汀原料药，为目前国内最新工艺，仅有两家运用，一家为生产，另一家处于中试阶段。可直接购买A6或A5开始，国内A6或A5已经规模生产，因此成本较自己再合成成本更低。三种酶在国内苏州汉酶有限公司有商品出售，酶代号为供应商代号，若进行战略合作，则全程技术服务可与之深谈。 ATS-6生产工序 一．配比 ATS-5 146.6kG 苯乙烯212.5L （在冷库存放）温度高会聚合 THF 173+104kg 二异丙胺381kg 乙酸叔丁酯406kg 甲基叔丁基醚170+920+1900kg 金属锂26kg 15%盐酸1900+（150-360）L 碳酸氢钠0.5kg 水450+260 ATS-7酶法工艺 一．配比
1.碳酸钠 50kg 2.纯化水 400+400+20L 3.三乙醇胺 8kg 4.15%盐酸适量 5.硅藻土 40kg 6.活性炭 60kg 7.乙酸乙酯 800+400+400+400L 8.饱和盐水 200+200 9.ATS-6 250-300kg(相对146kgATS-5) 10.酶YK 260*1/催化率*0.8 11.酶YM 260*1/催化率*0.9 12.酶YN 260*1/催化率*0.9 ATS-8制备工艺 一．配比 1.ATS-7 一整批（240-280） 2.甲苯 330+460+900L 3.丙烷 260kg 4.甲基磺酸 1.35-2.7L 5.碳酸氢钠 3.3kg 6.水 320+400+400 7.己烷 750L
ATS-8一精 一．配比 1.ATS-8粗品 4批约620-880kg 2.己烷 1400-1500L 3.乙醇 -1 160kg（套用母液加40-80kg） 4.活性炭 9kg 5.己烷乙醇混合液 20L（3:1） ATS-8二精 一．配比 1.AT S-8一精物一整批约600kg 2.己烷-1 1000-1100L 3.乙醇-1 60-120kg 4.乙醇-2 20kg 5.己烷-2 20L 套用母液总收率可以达到100%，按以上投料量月正常生产可以产出9t成品；二异丙胺，乙酸叔丁酯，甲基叔丁基醚可以上塔回收，乙酸乙酯，甲苯，己烷可以套用。 卢红生 2014年3月2日
酶法合成阿莫西林介绍 β-内酰胺抗生素经过多年的发展，己成为抗生素中的最主要类型之一。由于具有良好的抗菌效力，较低的毒副作用，在临床上广泛应用，其发展非常迅速。现全世界耗用量已过万吨，预计今后还会增长。其中，青霉素和头孢菌素为最重要的两大类β-内酰胺抗生素。酶法合成技术始于20世纪60年代末70年代初，经过30多年的发展，现在酶缩合反应技术、产品分离以及固定化酶技术等方面取得很大的发展，配套技术日益完善，具备了大规模工业化生产的条件。全球著名的β-内酰胺抗生素生产厂家如荷兰DSM公司已有酶法合成的商品头孢氨苄、阿莫西林等产品面世。由于酶法应用于β-内酰胺抗生素合成，不仅可减少反应步骤，而且还可减少废弃物的产生，有利于保护环境，降低生产成本，产品质量优异，所含杂质极少。因此，21世纪β-内酰胺抗生素的酶法合成将是发展的必然趋势。我国酶法合成研究起步并不晚，但至今仍未形成大规模工业化生产，与国外先进厂家差距较大。随着我国经济快速发展，人们对自身居住环境的要求，政府对环保的重视，政府和越来越多的企业加大“绿色化学制药”的研究开发，特别是加快工业化生产的推进进程。 酶法产品主要有三大特点： 一是产品含量稳定、变化小，可降低制剂在有效期内的检测风险，并且杂质低，降解速度慢，对制剂的安全性，尤其是特殊制剂的稳定性尤为重要。 二是酶法产品生产批量能够达到化学法产品的2～3倍，这既能够大幅度节省制剂生产商的检验成本，粗略估算原料检测成本能够节约人民币9元/kg；同时，也便于物流、仓储和生产管理。 三是酶法产品是通过生物酶一步到位生产而得，以纯净水为介质，不使用传统化学工艺中的特殊化工原料，有机溶剂的使用量大幅度减少90%，废水排放减少80%，品质更纯净。 1 青霉素酰化酶的发展 青霉素酰化酶是从微生物或其代谢产物中发现的一类具有特定活性的蛋白质。能够产生青霉素酰化酶的微生物广泛分布于细菌、放线菌、真菌和酵母中,如:醋酸杆菌、假单胞菌、粪产碱菌、黄单胞菌、产气单胞菌、大肠杆菌、芽孢杆菌、枝状杆菌、克氏梭菌( Kluyvera) 等,其中常用的有巴氏醋酸杆菌、粪产碱
葡萄糖生产工艺 葡萄的应用 结晶葡萄糖主要以玉米淀粉或大米为原料，经过一系列的加工而成。水解淀粉常用的生产工艺有三种；酸法、酸酶法、双酶法。分为工业级、口服级、注射级三种。它是可以不经过人体消化而直接被人体吸收的，适用于病人食用，也可以注射到血液中，葡萄糖是发酵行业的基础原料。同时也是食品及糕点加工中蔗糖的替代品。葡萄糖甜度是蔗糖的70%左右。 液化、糖化、脱渣、一次脱色（板框）、二次脱色（板框）、离交、蒸发、结晶、分离、干燥。辅助设备有冷却塔、反渗透、空压机。 液化糖化生产操作规程 一.工艺操作过程 开车时先启动液化真空泵和打开板式换热器循环水进出手阀，启动液化PH调节罐搅拌，并启动10% 碳酸钠溶解液计量泵向PH调节罐加入，同时淀粉车间来料通过调节阀把流量控制 15立方，淀粉乳进入PH调节罐同时启动甜水泵，等淀粉乳溢流后在溢流管上取样检测淀粉乳波美控制在17.5左右。在溢流管上取样检测PH值5.5-5.7同时在溢流管上加入一次耐高温淀粉酶，加入量按干基淀粉0.35公斤平均加入。开启淀粉乳缓冲罐搅拌，等液化缓冲罐液位达到40%寸.液化一次喷射开始走水。走水流量10立方，将一次喷射温度通过蒸汽调节阀迅速调到100°C。等一次闪蒸罐液位达 到20%寸。启动一次闪蒸出料泵，调节二次喷射流量 10立方，将二次喷射温度控制在100C。等淀粉乳缓冲罐液位达到50%寸。先开启缓冲罐底出料阀并迅速关闭走水阀，并迅速调整一次喷射温度106C，将液化流量控制在17立方，喷射后的料液，通过高压维持柱和 U型维持管进入一次闪蒸罐，同时向一次闪蒸罐內加入二次耐高温淀粉酶。控制一次闪蒸罐液位，料逐渐进入二次喷射，并将二次喷射温度控制到125C，料通过高压维持柱和U型维持管进入二次闪蒸罐。走料平稳后逐渐将一次、二次闪蒸罐液位控制
一步酶法生产7-ACA的优点 7-氨基头孢烷酸（7-ACA）是生产头孢菌素类抗生素的重要母核，头孢菌素分子中由于都含有β-内酰胺结构。它能抑制肽转肽酶所催化的转肽反应，使线性高聚物不能交联成网状结构，抑制粘肽的台成，从而阻止细胞壁的形成，导致细胞的死亡。 目前7-ACA生产采用新型酶法工艺，国内已成功开发出新型酶法7-ACA生产技术，打破国外对一步酶法生产7-ACA 技术的垄断。而目前国内的生产厂家采用的双酶大多数是从国外进口的，成本与化学法不相上下。通过本项目技术的使用大大降低7-ACA的成本，从而获得成本优势。新型酶法较好解决了旧酶法技术生产7-ACA在质量、色泽上劣于化学法的问题，同时在生产上的使用批次也大幅度增加，从而也降低了生产成本。 7-ACA和头孢菌素的合成工艺主要有化学法和酶法两种。化学半合成技术主要包括酰氯法和混酐法，化学法合成存在着活化、缩合、保护和去保护的过程；合成过程长、步骤多反应条件苛刻产生大量的三废等弊端，而酶法合成工艺与化学法相比，由于具有许多优点，如：生产工艺简单，周期短；反应条件温和，pH接近中性；高度的区域和立体选择性以及无需保护和去保护过程，割除了化学合成中所需的毒害物质；劳动环境得到改善，减少了三废的排放。因此，用
酶法实现7-ACA及头孢菌素的半合成体现了绿色环保工艺的各种优势。
一步酶法和两步酶法制备7-ACA优势对比分析 对比项一步酶法（CPCA）两步酶法（DAO 与GAC）生物酶NRB—103 D—氨基酸氧化酶 GL—7ACA酰化酶 设备投资减少30% 较大 操作步骤4步6步 操作周期每批90min 每批150min 同等设备条件产量增大一倍较小 7-ACA转化率/% ≥95 ≥93 收率/% 46—50 44—45 7-ACA含量/% ≥98.5 ≥97 技术安全特性优优 技术环保特性优优 技术发展空间非常大有 优点高转化率,高纯度,高经济性,环境保 护。生产成本低, 减少有机溶媒用量，利于环保。 缺点转化率低,酶解路线长、氧化条件 控制难度大、设备条件高。 一步酶法工艺技术指标: 底物浓度:2.0-3.0% 转化率:不低于98% 得率:不低于95% 反应时间: 90 分钟 固定化头孢菌素酰化酶( immoblized CPC acylase) 酶活:80-100U/g 使用寿命:100 次
以淀粉为原料双酶法制葡萄糖生产工艺 双酶法是用专一性很强的淀粉酶和糖化酶为催化剂，将淀粉水解为葡萄糖的工艺。淀粉水解分为两步进行：第一步，用耐高温α-淀粉酶进行液化；第二步，用淀粉糖化酶对液化后液进一步水解为葡萄糖，使DE 值达到98%以上。 水解反应 〔C6H10O5〕n + nH2O n〔C6H12O6〕糖化酶 生产工艺流程图： 玉米淀粉（或精制淀粉乳） ↓ 调浆计量 ↓ 蒸汽→喷射液化←淀粉酶 ↓ 糖化←复合糖化酶 ↓ 蒸汽→灭酶脱色←活性炭 ↓ 板框过滤→旧活性炭弃去 ↓ 离子交换 ↓↙冷却水 蒸汽→蒸发浓缩——→葡萄糖浆 ↓ 降温结晶←冷却水 ↓ 糖膏分离 ↓ 蒸汽→气流干燥 筛分 ↓ 食用葡萄糖 ↓ 检验 ↓ 称量包装 ↓ 成品入库 生产结晶葡萄糖一般的配料工序要求的指标为： 浓度：30%～36% （如生产其他的糖品，料液配料浓度可放宽到45%） pH 值：最适pH5.4～6.0(可在pH5.0～7.0 之间选择) 淀粉乳蛋白含量：≤0.6%
电导率：≤200us/cm 1、调浆 工艺过程：①用低于42℃的水将粉乳比重调至17-18.5Be°，用泵将调好的淀粉乳打入调节罐，在不断搅拌条件下加一定量的10%稀碱液使淀粉PH 达5.5-5.8。②加入一定量的耐高温α—淀粉酶进行液化。加高温酶的量根据液化液的DE 值确定，要求DE 值在13-17%之间。 2、液化： 工艺过程：①将一定浓度，一定PH 值的淀粉乳连续用泵打入连续液化器进行液化。 ②一喷液化温度控制在106-110℃，二喷液化温度控制在135-145℃，控制出料速度，使液化液碘色反应为棕红色③液化液不合格必须返工，重新液化。 酶法喷射液化工序要求的指标为： 浓度：32%±2% pH 值：5.4～6.0（最好5.5～5.8） 加酶量：0.035%～0.07%（对固形物） 喷射温度：一喷温度：106-110℃二喷温度：135-145℃ 液化保持：温度：95℃；时间：90～120min. 液化终了DE 值：14～20%之间（最好在DE14～16%之间） 碘试：暗红樱色 3、糖化： 工艺过程：①将降温后的液化料液，调好PH 值，按干物量加入糖化酶②在一定温度条件下糖化一定时间DE 值达98%以上。 酶法糖化工序要求的指标如下： pH 值：4.1～4.5 加酶量：100～150u/g 淀粉（视酶活力加0.6～0.9kg/T 绝干淀粉） 保持温度：60±2℃ 糖化时间：48h(一般控制45～56h 之间) 糖化终了DE 值：≥98.5%（多数情况下接近或超过99%） 糊精反应：无白色絮凝物 4、蛋白预处理： 工艺过程：糖化液经预涂硅藻土的真空转鼓过滤机阻挡蛋白质后，用板式换热器提温灭酶流入脱色罐。 技术参数：灭菌温度：80-85℃ 蛋白含量：≤0.15% 5、脱色： 工艺过程：①蛋白预处理的料液流入脱色罐，同时加入一定比例的洗蜜、分蜜（洗蜜经板式换热器升至80-85℃），灭酶经过一次脱色，二次脱色，用活性炭吸附杂质，经板框过滤机过滤得到澄清、透明、无色的精制糖液②脱色温度在80℃左右，加炭量可根据出料色泽达到要求为度③当板框压力高，过滤速度慢时，打开板框过滤机把炭卸下来。 技术参数：一次脱色滤膜白度：≥70% 色点：≤15 个/45ml 脱色时间：30 分钟 脱色温度：80-85℃ 二次脱色滤膜白度：≥77% 色点：≤10 个/45ml
《葡萄糖酸钠》行业标准（征求意见稿）编制说明 一、工作简况 （一）任务来源 葡萄糖酸钠是一种白色或淡黄色结晶性粉末，易溶于水，微溶于醇，不溶于醚，是一种用途极为广泛的多羟基有机酸盐。在医药、水质稳定剂、钢铁表面清洗剂、玻璃瓶专用清洗剂、混凝土外加剂等方面有广泛的用途；特别在混凝土外加剂方面的应用近几年发展迅速，用量逐年增加、效益显著。 葡萄糖酸钠在我国尚未形成通用的国家标准和可以使用的行业标准，在国外亦未制定权威标准。目前国内生产的葡萄糖酸钠产品主要是出口，生产葡萄糖酸钠产品的国内企业较多，执行的标准参差不齐，极大地影响了产品在国际市场上的竞争力。企业以质量为核心的经营机制日趋形成，标准的统一制定，能够提高产品质量，可以扩大产品的销路，增加经济效益，促进产品按质论价，优质优价，彻底改变葡萄糖酸钠行业无序竞争的混乱局面，拉动行业经济又好又快发展。 本标准由中国轻工业联合会提出，全国食品工业标准化技术委员会（SAC/TC64）归口，计划名称为《葡萄糖酸钠》，计划编号为2010-2883T-QB。 （二）简要起草过程 1. 2010年11月工信部标准制修订计划下达后，中国生物发酵产业协会于2011年4月8日召开了标准启动工作会议，组织起草单位针对制定《葡萄糖酸钠》行业标准的具体工作进行了认真研究，确定了总体工作方案，并组建了标准起草工作小组，青岛琅琊台集团股份有限公司牵头并执笔，中国生物发酵产业协会负责具体协调，山东凯翔生物化工有限公司、西王集团有限公司、中国科学院过程工程研究所等单位参加。成员单位吸纳了国内主要生产企业及科研机构等部门，能代表全国葡萄糖酸钠行业生产及研究的真实情况。 2. 启动会后，起草工作组收集国内外标准资料以及相关实验方法，综合各种情况进行了综合分析处理后，4月25日前由起草小组提出提出标准文本（草稿），通过电话、邮件与各起草单位进行商量、研究，确定标准文本（初稿），于2011年5月13日进行第二次起草小组工作会议，初步确定了各项指标要求和检验方法。 3. 第二次起草会后，收集各单位葡萄糖酸钠样品并完成送检工作，对样品采用盲样测试方式，进行了检验，完成数据汇总。2011年9月22日进行第三次起草小组工作会议，经过大家的认真、细致的讨论研究，对标准中涉及的主要关键问题达成共识，根据检测数据情况，对一些指标的设定提供了数据支撑，修改形成征求意见稿，向行业内公开征集意见。 （三）主要起草单位
酶法加工麦芽糊精生产工艺 中国食品添加剂和配料协会尤新 概述 麦芽糊精的生产工艺大致可分为3种：酸法工艺、酶法工艺、酸酶法工艺。目前，酸法工艺已基本被淘汰，国内外生产麦芽糊精均采用酶法工艺。酶法产品聚合度在1—6的产物的水解率比值均在2以上，产品透明度高，溶解性强，室温储存不变浑浊。 利用α-淀粉酶对于淀粉的催化水解具有高度的专一性，即只能按照一定的方式水解一定种类和一定部位的葡萄糖苷键，仅水解淀粉，不分解蛋白质、纤维素等。因此，麦芽糊精是以玉米、大米等粗粮直接投料(不是以精制淀粉为原料)，经酶法控制部分水解、脱色提纯、真空浓缩、喷雾干燥而成。 为了便于叙述，在此以大米作原料为例，并按优级品质生产工艺说明。 麦芽糊精系列产品的生产按酶法工艺要求可分为6个工序：原料预处理、液化、过滤、浓缩、干燥、包装等。 1原料预处理工序 预处理包括计量投料、热水浸泡、淘洗杂质、粉碎磨浆4个内容，计量投料是为了保证投料准确，便于操作和管理。热水浸泡可使水分渗透到米的内部组织，促进米粒组织膨胀软化，便于淘洗和粉碎。淘洗是为了除去米糠和其他杂质，保障食品卫生和产品质量。粉碎磨浆是为了保证淀粉粒的细度和粉浆的流动性能，使淀粉易于糊化，并为酶能均匀地水解淀粉创造良好的条件。 大米预处理工序技术要求如下： 浸洗后的米，应该色白无米糠，无酸败味，米粒用两手指轻捏即成粉末状。 粉浆细度，60目以上粉粒应占80%以上，手感无粗粒，不允许在粉浆中混有米粒。 粉浆浓度控制在22—24°Bé，1t米磨成的粉浆相当于2.2m3左右。 粉浆不发酵，pH不低于5.2。 淘洗去杂
一般淘洗米采用机械淘洗，通常用压缩空气来翻动淘洗，在特制的洗米罐中进行。 淘洗操作时，将米按规定量送到洗米罐，放入清水，待水浸没米层后，通入压缩空气，利用空气冲击使米粒在水中翻动和相互摩擦，把附着于米粒上的米糠和杂质洗掉，悬浮物从溢流口溢出。当悬浮物基本溢净，可关闭进水阀和空气阀，放出米泔水。如此反复洗米2—3次，可使米粒洗净。 热水浸泡 热水浸泡的目的是为了加快吸收水分，促进米粒组织软化。米粒吸水程度和下列因素有关。 (1)与米粒吸水和浸米时间有关。一般说来，浸泡时间不能少于2h，否则米粒中心部分的水分浸入不足，这样就不利于米的粉碎和糊化。 (2)米粒吸水程度还决定于米的品质。非糯性米要相对延长浸泡时间。 (3)米粒吸水还和浸泡水温度有关。提高水温可加速米粒吸水，缩短浸泡时间。在冬季，浸泡水可利用生产中冷却水代替冷水，但水温不宜高于45℃，若再提高温度，会使米粒表面糊化，淀粉流失。 在浸泡过程中还要注意米粒发酵情况，虽浸泡2h不会很快受到微生物侵入而发酵。若在洗米时没有将米糠洗净，往往也会引起米粒发酵，如此将米磨成粉浆后，会造成液化中途pH下降，致使发生液化困难。凡发酵米粒必须要重新洗米才能粉碎。 米粒和粉浆发酵经常发生在夏秋高温季节，在此期间生产，更应重视环境卫生和设备清洗消毒工作，以减少微生物污染机会。 粉碎磨浆 将米粉碎磨成粉浆，要注意细度和浓度两个质量要求。 粉浆细度影响着液化程度和过滤速度。从糊化角度考虑，粒度细的粉浆溶解性好，容易糊化。从过滤性看，粉浆太细，则不利于过滤。根据工业化规模生产结果表明，粉浆细度以70目为宜，这样液化性和过滤性均好。 粉浆浓度关系到糊化液的流动性和蒸发量，粉浆浓度低，黏度小，流动性好，容易糊化，有利于加热和过滤。但降低液化浓度，增加了蒸发负荷，经济上不合算。高浓度粉浆则流动性差，且糊化困难。所以，粉浆最适宜浓度应在22—24°Bé。 砂盘磨工艺操作 开车：接通电源，先空载运转1—2min，检查有无异常振动和噪音，再调节上下磨盘间距到发出有轻微的摩擦声止。
Short Communication Enzymatic routes for the production of mono-and di-glucosylated derivatives of hydroxytyrosol Antonio Trincone,Eduardo Pagnotta,Annabella Tramice ? Istituto di Chimica Biomolecolare,Consiglio Nazionale delle Ricerche,Via Campi Flegrei 34,80072Pozzuoli,Naples,Italy a r t i c l e i n f o Article history: Received 30August 2011 Received in revised form 20October 2011Accepted 21October 2011 Available online 30October 2011Keywords:a -Glucosidase Aplysia fasciata Transglycosylation Hydroxytyrosol Biocatalysis a b s t r a c t In this work,a new eco-friendly procedure for the synthesis of hydroxytyrosol and tyrosol a -glycosidic derivatives was proposed by using the marine a -glucosidase from Aplysia fasciata ,and a commercial tyrosinase from mushroom for the bioconversion of tyrosol glycosidic derivatives into the corresponding hydroxytyrosol products.New hydroxytyrosol mono-and di-saccharide derivatives were synthesized at ?nal concentrations of 9.35and 10.8g/l of reaction,respectively,and their antioxidant activity was evaluated by DPPH test.The best antioxidant agent resulted the (3,4-dihydroxyphenyl)ethyl-a -D -gluco-pyranoside;it showed a radical scavenging activity similar to that of the hydroxytyrosol,together with an increased hydrosolubility.This molecule could be a good response to many food industry demands,always in search of cheap antioxidants with nutritional properties to improve the nutritional value and the quality of foods. ó2011Elsevier Ltd.All rights reserved. 1.Introduction Olive biophenols have attracted the attention of food and phar-maceutical industries ?rst of all for their well-acquainted antioxidant activity (Obied et al.,2005).2-(4-Hydroxyphenyl)etha-nol (tyrosol,1)and 3,4-dihydroxyphenyl ethanol (hydroxytyrosol,2)represent the most abundant oil phenols (Vissers et al.,2004).Hydroxytyrosol,as well as being a powerful antioxidant and scavenger of free radicals,reduces,in fact,the risk of coronary heart disease and atherosclerosis (Visioli et al.,1995,2002)and it is involved in a mechanism of protection against oxidative DNA damage (Waterman and Lockwood,2007).Differently,tyrosol shows milder antioxidant properties (Damiani et al.,2003).Never-theless,it exerts a powerful protective effect against oxidative inju-ries in cell systems and improves the intracellular antioxidant defence systems (Mateos et al.,2008).In spite of their potential applications in the nutraceutical and pharmaceutical ?elds,few methods have been developed for synthesizing tyrosol and hydroxytyrosol glycosidic derivatives. In this paper,we screened the possibility to perform glucosyla-tion reactions of various phenolic compounds,including tyrosol and hydroxytyrosol and their structurally analogous compounds,by using the marine a -glucosidase from Aplysia fasciata .Interesting glucosylations at phenolic sites of some selected acceptors were ob-served,especially considering that phenolic hydroxyls are inef?-ciently glycosylated by glycosidases (van Rantwijk et al.,1999).Among all molecules tested,tyrosol and hydroxytyrosol glycosyla-tion procedures were more deeply investigated.Tyrosol a -glycosidic derivatives were ef?ciently produced by direct glucosylation and in a second enzymatic step,these molecules were regioselectively oxi-dized by a commercial mushroom tyrosinase to give the hydroxyty-rosol a -glycosyl derivatives,possessing interesting radical scavenging activities. These results appeared of great interest when compared to enzymatic synthesis of salidroside,monoglucuronides derivatives of hydroxytyrosol,and tyrosol,previously reported in literature (Tong et al.,2004;Khymenets et al.,2006).2.Methods 2.1.General TLC solvent systems:(A)(CH 3CN:H 2O,8:2,v/v);(B)(CH 3CN:H 2O,9:2,v/v).Compounds on TLC plates were visualized under UV light or charring with a -naphthol reagent. Other technical information were reported in Supplementary Section S.1.2.2.Enzyme source A clear enzymatic homogenate from A.fasciata visceral mass was prepared as previously described by Andreotti et al.(2006).Since the most abundant hydrolytic enzyme in A.fasciata visceral mass extract was an a -D -glucosidase activity,this enzy-matic solution (8.1mg total protein/ml;1.2U/mg,using p -nitro- 0960-8524/$-see front matter ó2011Elsevier Ltd.All rights reserved.doi:10.1016/j.biortech.2011.10.073 Corresponding author.Tel.:+390818675070;fax:+390818041770. E-mail address:atramice@https://www.doczj.com/doc/4b2836009.html,r.it (A.Tramice).
液体葡萄糖的生产工艺流程 主要淀粉糖品的生产工艺流程：液体葡萄糖 一、性质及应用 液体葡萄糖是我国目前淀粉糖工业中最主要的产品，广泛应 用于糖果、糕点、饮料、冷饮、焙烤、罐头、果酱、果冻、乳制 品等各种食品中，还可作为医药、化工、发酵等行业的重要原料。 该产品甜度低于蔗糖，黏度、吸湿性适中。用于糖果中能阻 止蔗糖结晶，防止糖果返砂，使糖果口感温和、细腻。 葡萄糖浆杂质含量低，耐储存性和热稳定性好，适合生产高 级透明硬糖； 该糖浆黏稠性好、渗透压高，适用于各种水果罐头及果酱、 果冻中，可延长产品的保存期。 液体葡萄糖浆具有良好的可发酵性，适合面包、糕点生产中 的使用。 二、主要生产工艺 工艺有酸法、酸酶法和双酶法。 1、酸法工艺
酸法工艺是以酸作为水解淀粉的催化剂，淀粉是由多个葡萄 糖分子缩合而成的碳水化合物，酸水解时，随着淀粉分子中糖苷键断裂，逐渐生成葡萄糖、麦芽糖和各种相对分子质量较低的葡萄糖多聚物。该工艺操作简单，糖化速度快，生产周期短，设备 投资少。 1）工艺流程 酸法工艺流程如图所示： 淀粉——调浆——糖化——中和——第一次脱色过滤——离子 交换—— 第一次浓缩——第二次脱色——过滤——第二次浓缩——成品 图酸法工艺流程 2）操作要点 (1)淀粉原料要求常用纯度较高的玉米淀粉，次之为马铃 薯淀粉和甘薯淀粉。 (2)调浆在调浆罐中，先加部分水，在搅拌情况下，加入粉 碎的干淀粉或湿淀粉，投料完毕，继续加入80℃左右的水，使淀粉乳浓度达到22～24波美度(生产葡萄糖淀粉乳浓度为12～14波美度)，然后加入盐酸或硫酸调值为1．8。调浆需用软水，以免产生较多的磷酸盐使糖液混浊。 (3)糖化调好的淀粉乳，用耐酸泵送入耐酸加压糖化罐。边
葡萄糖酸钠用途及生产技术 一、概况 葡萄糖酸钠全世界需求量在50万吨／年，每年将以3－5％的比例增长，是一种有良好市场前景的产品，特别是在食品行业，随着食品安全卫生的加强，采用发酵法生产葡萄糖酸钠以及酸锌、酸钙将日益取代化学合成法。国外年需量在40万吨左右，主要分布在美国10万吨／年，欧洲13万吨左右，日本5万吨左右，台湾1万吨，韩国1万吨，南亚地区3万吨，南美及中美洲5万吨左右，澳大利亚2万吨左右，其主要应用在建筑行业和食品行业以及电镀行业，对产品的内在质量要求很严格。在日本主要用来生产葡萄糖酸内酯，来做内酯豆腐。 国内需求量在8～10万吨，主要分布在南方地区以及北方大城市，广东年需求量在1万吨，江苏在8千吨，上海年需求量在1万吨，北京年需求量在1万2千吨，天津年需求量在1万吨左右，山东在1万吨，东北在2万吨左右，其他地区1～2万`吨左右，主要用于生产葡萄糖酸钙、葡萄糖酸锌、葡萄糖酸铁、葡萄糖酸及内酯。 由于化学催化法使用了重金属作催化剂，导致了产品中重金属含量超标，达不到食品安全要求，出口受到限制；而作为发酵法生产却解决了这些问题，成为今后该产品生产的主流。特别在食品行业，这一需求将逐年增加。 葡萄糖酸钠是一种重要的食品添加剂，在营养增补剂、食品保鲜剂、品质改良剂和缓冲剂等方面有广泛的应用，根据在食品中的不同用途可分为如下几类： 1调整pH功能
葡萄糖酸钠的缓冲pH为3.4，适合做低pH范围的缓冲剂的食品添加剂。饮料pH4以下，一般在65℃下杀菌时间为10min，既能避免杀菌加热对饮料素材的影响，又能节省能源，是饮料生产工程管理的重要性一环，其它有机酸盐难以实现pH4以下杀菌所能达到上述要求，而葡萄糖酸钠能符合上述要求又不影响饮料呈味性，因此葡萄糖酸钠是最优良的食品加工pH缓冲剂。2呈味改善剂 葡萄糖酸钠本身呈味性良，有掩盖苦昧、臭味功能，如在掩盖鱼臭、镁离子的苦味等方面，均优予其它有机酸盐。 3掩盖大豆蛋白臭 大豆蛋白营养价值高，应用于畜肉加工品、鱼肉、鱼糜、冷冻食品等各种食品中，但有固有的大豆蛋白臭，因而使用量有局限性。在香肠制造中，加入5％左右的葡萄糖酸钠，有明显降低大豆蛋白臭的效果。葡萄糖酸钠还有掩盖豆乳、汉堡包等使用大豆蛋白食品特有的大豆蛋自臭味。 4改善高甜度甜味料的呈味性 低热量高甜度甜味剂有益健康，但在呈味性上一般难与砂糖的味质完美相比，经美国、日本试验，葡萄糖酸钠有明显改善高甜度甜味剂天冬甜精、甜菊苷、糖精的味质，天冬甜精与葡萄糖酸钠并用能达到砂糖一样的甜味质。 5代替食盐用于食品加工 在食品加王中食盐不仅赋予食品咸味，还有抑菌等效果，使用时往往量加大。制酱时，盐还有防止杂菌使麦曲正常发酵作用，但不能加盐太多。当今时兴低盐酱，采用在发酵过程中缓缓添加乙醇控制发酵，但工序繁琐。曰本中央味噌研究所研究使用葡萄糖酸钠代替食盐进行味噌发酵，能使发酵正常，
葡萄的应用 结晶葡萄糖主要以玉米淀粉或大米为原料，经过一系列的加工而成。水解淀粉常用的生产工艺有 三种；酸法、酸酶法、双酶法。分为工业级、口服级、注射级三种。它是可以不经过人体消化而 直接被人体吸收的，适用于病人食用，也可以注射到血液中，葡萄糖是发酵行业的基础原料。同 时也是食品及糕点加工中蔗糖的替代品。葡萄糖甜度是蔗糖的70%左右。 液化、糖化、脱渣、一次脱色（板框）、二次脱色(板框)、离交、蒸发、结晶、分离、干燥。辅 助设备有冷却塔、反渗透、空压机。 液化糖化生产操作规程 一．工艺操作过程 开车时先启动液化真空泵和打开板式换热器循环水进出手阀，启动液化PH调节罐搅拌，并启动10%碳酸钠溶解液计量泵向PH调节罐加入，同时淀粉车间来料通过调节阀把流量控制15立方，淀粉乳进入PH调节罐同时启动甜水泵，等淀粉乳溢流后在溢流管上取样检测淀粉乳波美控制在 17.5左右。在溢流管上取样检测PH值5.5-5.7同时在溢流管上加入一次耐高温淀粉酶，加入量 按干基淀粉0.35公斤平均加入。开启淀粉乳缓冲罐搅拌，等液化缓冲罐液位达到40%时.液化一 次喷射开始走水。走水流量10立方，将一次喷射温度通过蒸汽调节阀迅速调到100℃。等一次闪蒸罐液位达到20%时。启动一次闪蒸出料泵，调节二次喷射流量10立方，将二次喷射温度控制在100℃。等淀粉乳缓冲罐液位达到50%时。先开启缓冲罐底出料阀并迅速关闭走水阀，并迅速调整一次喷射温度106℃，将液化流量控制在17立方，喷射后的料液，通过高压维持柱和U型维持管进入一次闪蒸罐，同时向一次闪蒸罐內加入二次耐高温淀粉酶。控制一次闪蒸罐液位，料逐渐进 入二次喷射，并将二次喷射温度控制到125℃，料通过高压维持柱和U型维持管进入二次闪蒸罐。走料平稳后逐渐将一次、二次闪蒸罐液位控制到30%。启动二次闪蒸出料泵，控制一次、二次闪 蒸真空调节阀，把进液化柱物料温度控制在95-98度。料先进入液化柱1#所有进柱方式是底部进料顶部出料，依次进入到第18个液化柱，料液在液化柱停留时间为90-120分钟。进满时取样检 测典试是否合格。典试以棕红色为合格，典试紫色为不合格。如果不合格料液通过液化柱出料泵 降温后打向淀粉乳缓冲罐重新喷射。如果料液合格通过换热器降温到61℃。料准备进入糖化工序前先启动10%稀酸计量泵、和糖化酶计量泵、PH控制到4.2-4.5、糖化酶加入量按吨干基淀粉 0.45公斤。等PH调节罐满后启动糖化进料泵开启1#糖化罐进料阀，依次进满其余糖化罐。等每 一个糖化罐进满后开启气动搅拌（岗位工操作）气动搅拌时间30分钟。必须保证搅拌均匀，糖化60小时DE值应达到98%以上。 停车操作过程
综合实验报告 题目：玉米淀粉双酶法制取结晶葡萄糖的工艺研究姓名：何雄飞 学号：080700104 学院：生物科学与工程学院 专业：生物工程 指导教师：朱秋享
2010年11月29日-2010年12月28日 综合实验 淀粉是植物体中贮存的养分，贮存在种子和块茎中，各类植物中的淀粉含量都较高，大米中含淀粉62％～86％，麦子中含淀粉57％～75％，玉米中含淀粉65％～72％，马铃薯中则含淀粉超过90％。 葡萄糖在自然界中分布极广，游离状态的葡萄糖存在于植物果实中，动物中也有存在。葡萄糖是有机体能量的主要来源，是许多糖类化合物的组成部分，是多种有机醇和抗生素的糖质原料。本实验所制结晶葡萄糖是主要以玉米淀粉乳为原料，采用双酶法降解转化为葡萄糖后，经过活性炭脱色、过滤等净化处理后，再经过蒸发浓缩、降温冷却结晶、分离、烘干等工序精制而成的一种全结晶体状态的葡萄糖，在经济上有较为诱人的应用价值。 本实验在前人工作的基础上，有针对地对双酶法制取葡萄糖晶体这一工艺进行了研究，主要进行了液化条件的优化选择。 一、实验原理 酶液化和酶糖化工艺称为双酶法、双酶法生产葡萄糖工艺是以作用专一的酶制剂作为催化剂，反应条件温和，复合分解反应较少，因此采用双酶法生产葡萄糖，可以提高转化率及糖液浓度，改善糖液质量，是目前最为理想的制糖方法。首先对淀粉进行调浆;用纯碱调pH值至6.0左右，再加入耐高温的α-淀粉酶，搅拌均匀。将调好后的淀粉浆进行糊化，其目的是打破淀粉分子的结晶结构，初步凝聚蛋白质。待到液化均匀一致，达到合格的液化液，即合理的DE值、外观透明、无白色沉淀、粘度低、蛋白质絮凝好，液化 II
实验血糖测定（葡萄糖氧化酶法） 【目的】 体外测定血清或血浆中葡萄糖含量。 【临床意义】 葡萄糖的准确测定对于诊断高血糖症是十分重要的。通常在查找这些病症的起因时，还将各种耐量试验和抑制试验与葡萄糖测定一同进行。葡萄糖含量增高见于：糖尿病、葡萄糖摄入过量、柯兴氏综合症、脑血管意外。葡萄糖含量减少见于：胰岛瘤、胰岛素过量、先天性碳水化合物代谢障碍。 【原理】 样本中的葡萄糖经葡萄糖氧化酶作用生成葡萄糖酸和过氧化氢，后者在过氧化物酶的作用下，将还原性4-氨基安替比林与酚偶联缩合成可被分光光度计测定的醌类化合物。 【器材】 紫外分光光度计，恒温水浴箱，移液器（枪），枪头，试管 【药品】 葡萄糖测定试剂盒，试剂盒主要成分与浓度： 【样本】 新鲜无溶血血清。
【步骤】 将10ml R1与90ml R2混合均匀，即为工作液。 空白管校准管样品管工作液 1.50 ml 1.50 ml 1.50 ml 蒸馏水0.01 ml ———— 校准液——0.01 ml —— 样品————0.01 ml 分别混合均匀，37℃水浴10～15分钟（避免太阳光直射），用波长505nm、比色杯光径1.0cm，用空白管调“零”点测定各管的吸光度（A）值。 【计算】 【参考值】 血清/血浆：3.89—6.11 mmol/L (70—110 mg/dl)。 此范围仅供参考，各实验室须建立本室的参考值范围。 【参考文献】 1．全国临床检验操作规程（第二版），主编：叶应妩，王敏三，1997，P616. 2．Trinder P. Ann Clin Biochem，1969，6: 24-27. 血糖测定实验所需器材： 1.紫外分光光度计（比色杯光径1.0cm）， 2.恒温水浴箱（能调温度的，37℃）， 3.移液器（枪）（规格1.0ml 6个，20μl 6个），枪头各100个 4.试管50支，6个试管架 5.烧杯100ml一个，50ml（或25ml）6个 6.记号笔6支 7.蒸馏水1瓶
生物酶法制备生物柴油研究综述 分数低于0.0005 %，十六烷值高达73.6，在0#柴油中添加了 20%的生物柴油后，尾气排放中 CO 降低了28%，未燃烧的碳氢化合物降低了 36 %，NOx降低了24 %，全负荷烟度下降幅度达到 0.2～0.9 Rb。 蔡志强等 [10]探究了固定化脂肪酶分别催化酯化与醇解两种方法合成生物柴油的最佳工艺条件。 研究发 现，酯化工艺的最佳工艺条件是：2%固定化脂肪酶，温度为30 ℃，油酸∶甲醇=1∶1（摩尔比），分 2 次等摩尔流加甲醇，反应时间 24 h，或分 3 次等摩尔流加甲醇，反应时间 36 h，酯化率都可以达到 95%以上；醇解的最佳工艺条件是：4%固定化脂肪酶，温度为30 ℃，菜籽油∶甲醇=1∶3（摩尔比），分 3 次等摩尔流加甲醇，反应时间为 48 h，酯化率可以达到 95%以上，去除下层甘油后，菜籽油甲酯纯度可达 98%。 安永磊等 [11]利用固定化脂肪酶催化餐饮废油与乙醇反应制备生物柴油。通过实验获得了酯化反应的最佳条件：反应温度47 ℃，有机溶剂为正己烷，醇油比3∶1，5 次投加乙醇，酶用量为 0.3 g，反应时间 32 h 时，生物柴油产率可达 81%。 徐桂转等 [12]利用固定化脂肪酶 Novozym 435，在无有机溶剂存在的情况下，催化菜籽油与甲醇酯交换反应制取生物柴油。研究得到了菜籽油间歇酯交换反应的适宜工艺条件：转速200 r/min，反应温度：50 ℃，甲醇∶菜籽油=1∶5 （摩尔比），酶用量 10%（与菜籽油的质量比）。 反应分两次加入等量甲醇，即先加入总量一半的甲醇，反应 10 h（菜籽油的酯交换率达到 47%）；再加入剩下全部甲醇，反应26 h（酯交换率达到80%）。 唐凤仙等 [13]以戊二醛交联壳聚糖固定的 A.niger Li-38脂肪酶催化棉籽毛油 合成生物柴油取得了不错的效果。 研究发现该固定化酶的贮藏稳定性较好，室温放置 12 d, 酶活性仍能保持 80%以上。固定化酶在30~70 ℃，pH=5.5~6.5 之间较稳定，其热稳定性和 pH 稳定性较游离酶有所提高。固定化酶可重复使用 7 次，转化率保持在80%以上。 洪鲲等 [14]研究了两种脂酶顺序催化制备生物柴油的生产工艺。结果表明：固相化细菌 A007 脂酶催化甘油三酯（TAG）水解的最适条件为：含水量 40%、脂酶用量100 U/g、反应温度30 ℃、反应时间 12 h，此时 TAG水解率和游离脂肪酸（FFA）含量分别为 93.3%和90.1%；在催化 FFA 甲酯化过程中，固相 化 Candidaantarctica 脂酶在FFA∶甲醇=1∶5 时可达到最佳效果；在第二次甲酯化时，加入甘油有利于提高FFA 酯化率，经过 24 h 反应，可将总酯化率