超声波法提取香菇多糖
研究背景：
香菇多糖的性质：香菇多糖以β~1，3葡聚糖为主，含有少量的木糖和甘露糖，具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能
用途：抗肿瘤药。为化、放疗辅助药。主要用于胃癌、肺癌、乳腺癌。
生产技术状况：因为香菇多糖的用途广泛，提取比较方便，越来越多的人投身于这方面的研究，是的提取技术方面的大幅度提升。状况良好。
操作过程：
方案设计：香菇多糖的提取
香菇预先烘干→称取干香菇15克→粉碎→圆底烧瓶→200ml热水70℃→超声波发生器（水预热在60℃左右）→提取45min（中间停顿2次，每次5min）→过滤→滤渣→等滤液体积热水70℃→提取30min（中间超声波停2次，每次5min）→过滤→合并滤液→抽滤→滤液→量体积标识贮藏备用
香菇多糖的测定：1.首先去掉香菇多糖溶液中的的蛋白质：采用氯化钙法：将溶液PH 调节至8---9，加热到85℃，加入氯化钙使浓度达5% (w/v)，搅拌，冷却至室温，过滤，得脱蛋白多糖液。
2.制作标准曲线：准确吸取1mg/ ml 葡萄糖标准溶液1.0 、2.0 、
3.0 、
4.0 、
5.0ml 置于50ml 容量瓶定容，准确吸取该系列溶液各2ml ，然后加入6%苯酚1.0ml 及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。
3. 样品的测定：取去完蛋白的样液2ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度。将吸光度控制在0.2-0.8
人员分工：我们分成两组来完成实验，因为有两组待测夜要进行测定。然后标准溶液是由第一大组完成。由于操作比较简单，我们就一起完成。1人对溶液进行去蛋白，2人制作待测液，1人对待测液进行测定，并记录数据。
实验现象：配置待测液时，加入浓硫酸后溶液变成橙黄色。从而可来额定吸光度。（附照片）总结分析
实验结果：标准曲线
两组待测液所得的吸光度：稀释100倍后
组一：
平均吸光度：0.392 浓度：0.0492
组二
平均吸光度：0.345 浓度0.0423
实验遇到问题及解决方法
遇到问题：1.开始提取香菇多糖时对香菇要进行如何处理不是很懂。
经过学习知道要先对香菇进行粉碎，但是又不能多余粉碎。过细的香菇会对后期的过滤产生一定的影响。不易过滤。
2.在测定香菇多糖的含量之前要对香菇进行曲蛋白质，加入的是氯化钙，但对于要加多少的氯化钙不是很了解。以为是每组多加一定的量的。通过向老师询问，知道加入的量是根据原香菇多糖的溶液的多少，计算出的溶度应该是5% 即液体的总体积×5%
3.制作待测液时，当加入浓硫酸后，发现液体全部变为黑色了。
询问老师得知里面的香菇多糖全部碳化，因为其浓度过高，应稀释50-100倍。我们就将其稀释了100倍在进行测定。
4.测定吸光度时，将待测液到入比色皿中时发现溶液变成了红色。
因为我们是第一组做的实验，比色皿中存在水分。溶液遇到水时就变成了红色，对比色皿进行润洗几次，即可，否则会对实验照成较大影响。
5.测定其吸光度时发现有一个特别小，而另一组有一个特别大。
存在原因很多：特别小可能是因为比色皿中的水分将其稀释。特别大可能是稀释过程中存在的误差。也有可能仪器存在的误差。计算时应避免这种数据。
收获建议
实训收获：
1.学会掌握用超声波法提取香菇多糖。
2.知道如何去除香菇多糖中的蛋白质，有多种方法。
3．团队协作能力的提升。
4．对于实验中碰到的一些小问题，能够自己进行解决。
5.对香菇多糖的作用有了一定的了解。
经验教训
1.因为疏忽大意，在配置待测液时，加浓硫酸时，将试管拿在了手里，加入的速度过快，
导致试管温度迅速上升，试管内液体差点喷出。给我们组的人教训很大，以后在加入这些有毒，或强腐蚀性的液体时，一定要小心谨慎，代号手套，可将试管放在烧杯中，在安全的情况下仔细的加。
改进建议
1.苯酚是一种有毒的物质，是否有其他方法，或其他试剂代替苯酚。可以使实验更具有
安全性。
2.用超声波提取香菇多糖时，对于各种影响因素是否是最合理的不是很清楚，可以进行
分组实验寻找最合理的因素。
3.对于去蛋白这步操作中，是否完全的去除了蛋白并不是完全的清楚，应该找一个方法
进行检测。
香菇多糖提取工艺的研究进展 香菇多糖提取工艺的研究进展 香菇Lentinusedodes 为担子菌纲伞形科真菌，是世界上第二大食用菌。香菇多糖是香菇中最重要的一种生物活性物质，具有抑制肿瘤、调节免疫、抗病毒和抗氧化等多方面的药理活性，且毒副作用小。香菇多糖的提取常用水提醇沉法、酸碱提取法，但存在提取工艺复杂、溶剂使用量大、时间长等缺点，而且容易造成多糖降解，生物活性降低。本文主要对近年来香菇多糖提取工艺优化研究方面的进展进行阐述。 1.超声波提取 超声波提取法是利用超声波特殊的物理性质，加速介质质点运动、空化作用、振动匀化等以增大物质分子运动频率和速度，增加溶剂穿透力，从而使药效物质加速融人溶剂提高有效成分的得率。 王恒等用超声波辅助法从香菇中提取香菇多糖，通过实验优化确定出香菇多糖最佳提取工艺为超声功率200W ，料液比 35：1，超声时间40min ，香菇多糖提取率为6.72 ％。王俊颖等采用超声法浸提香菇多糖通过正交试验设计确定的最佳工艺为料水比1 : 25，超声温度60° C超声时间30min , 超声功率300W ，多糖得率为8.72 ％。李宏睿等采用正交试验设计，对香菇多糖的提取条件进行优化，并与单纯的热水浸提进行比较。结果表明，在料水比 l：25 ，超声时间35min ，超声功率105W ，热水浸提温度 90 ％，浸提时间20min 的条件下，提取效果最好，多糖提取率为13.75 ％，比单纯热水浸提法提高6.22％。 2.微波提取 微波辅助提取技术主要是通过调节微波加热的参数，有效地加热物料中的目标成分，对目标成分进行选择性提取。刘小丽等研究微波辅助法提取香菇多糖采用单因素试验对固液比、微波辐射功率、辐射时
竭诚为您提供优质文档/双击可除超声波法提取香菇多糖实验报告 篇一：超声波提取香菇多糖汇报 项目名称： 超声波提取香菇多糖 【工作汇报】 超声波提取香菇多糖 操作者姓名：王岚 班级技术102 专业生物技术 前言 1、实训的背景、目的和意义： 实训背景： 香菇(Lentinulaedodes)是侧耳科的 担子菌,味道鲜美,药食两用,具有较好的保健作用。香菇多糖是香菇中的重要营 养成分和有效药用组分,具有抗病毒、抗 肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能,香菇还
原糖对于人体糖分的补充也起着重要作用 测定蛋白质的方法可分为两大类：一类是利用蛋白质的物理化学性质来推算，如密度、折射率、紫外吸收、荧光性等；另一类是利用化学方法来计算，如定氮、双缩脲反应、染料结合反应、酚试剂反应等 主要测定方法有：双缩脲法、染料结合法、酚试剂法、紫外分光光度法、水扬酸比色法、折光法、旋光法、近红外光谱法. 目前蛋白质测定最常用的方法是凯氏定氮法，是通过测总氮量来确定蛋白质含量的方法。 实训目的及意义： 1、 2、 2、实训要解决的问题： 掌握微量凯氏定氮仪测定蛋白质含量的原理。熟练掌握微量凯氏定氮仪测定蛋白质含量的操作技术。 1、微量凯氏定氮法与常量法的同点？ 2、根据08年国标，样品消化完全一小时之后，需要冷却后加20ml水，为什么会有晶体析出，成分是什么，为什么会析出？ 3、香菇多糖的主要成分是什么？如何脱蛋白？ 3、实训操作关键技能
1．在蒸馏过程中，切勿关闭电炉，否则会引起硼酸液的倒吸。 2．环境中氨气的含量要低。 3．定氮仪各连接处绝对不能漏气。 4．所用橡皮塞、管用前均需处理。其方法是：浸在10％氢氧化钠溶液中煮沸约10min，再经水洗和水煮10min，最后冲洗数次。 材料及方法 1、实训材料及配制、预处理技术 干香菇，蒸馏水； 电热恒温鼓风干燥箱 组织粉碎机 圆底烧瓶，铁架台，温度计 超声波发生器（带加热功能） 真空泵，漏斗，滤纸，滤布，烧杯，量筒，玻璃棒等 微量凯氏定氮蒸馏装置一套、三角烧瓶、酸式滴定管、容量瓶溶液的配制 1．浓硫酸：分析纯，95.5% 2．80%苯酚：80克苯酚（分析纯重蒸馏试剂）加20克水使之溶解，可置冰箱中避光长期储存。 3．6%苯酚：临用前以80%苯酚配制。（每次测定均需现配）
香菇多糖的提取纯化方法 吕红常秀莲* （烟台大学生命科学院，烟台264005） 摘要：香菇多糖是香菇中分离出的一种重要的具有生理活性的物质，具有抗病毒、抗肿瘤、增强人体免疫力等多种功能，在保健食品和药品开发方面具有广阔的应用前景。概括介绍当前常用的热水浸提法、酶解法、微波提取法和深层发酵培养法等6种香菇多糖的提取方法。并简单比较香菇多糖提取的这几种方法并介绍了超滤-渗滤法和活性炭联合陶瓷膜超滤法这两种香菇多糖的纯化方法。 关键词：香菇多糖; 提取; 纯化; 抗癌;抗病毒 Extraction and purification of Lentinan Lvhong changxiulian* (Yantai university life academy of sciences, Yantai 26005) Abstract: Lentinan was isolated from mushrooms with an important physiological activity of substances with anti-virus, anti-cancer, enhance immunity and other functions. It has broad application prospect s in health food and drug’s development. Give overview of the current formulation used in hot water, enzymatic method, microwave extraction and deep fermentation method 6 kinds of mushroom polysaccharides method, And Introduced the Ultrafiltration-filtration method and the Activated carbon ceramic membrane joint ultrafiltration method of Lentinan purification. Keywords: Mushroom polysaccharide ; Separation ; cancer ; antiviral 1引言 香菇多糖(Lentinan) 是一种β-1,3-葡聚糖, 是从担子菌纲伞菌科真菌香菇子实体中提取分离纯化获得的均一组分的多糖，能治疗癌症, 抗恶性肿瘤, 抗病毒, 抗感染, 提高人体免疫力等多种生理功能。目前国内对香菇多糖的分离有了很大发展，主要采用的方法有传统热水提取法、酸提取法、碱提取法、这些方法都有其优点，也有其难以克服的不足之处。与传统方法相比微波辅助提取法具有设备简单，快速，高效，安全等特点。 2香菇多糖的提取方法 2.1 热水浸提法 这是最早采用的一种传统方法：香菇多糖溶于水，热水浸提时，香菇组织细胞膨胀破裂，多糖成分浸出。 热水浸提香菇多糖，浸提时的料液比、温度、时间、pH、醇析时的乙醇添加倍数及提取次数是影响多糖得率的主要因素。 对料液比而言，若加水太少，提取不彻底；加水太多，容易降低提取液的固形物含量，不利于以后的分离，且加重了工业生产中的后续工艺，一般为1：20左右。对温度来说，随着提取温度的升高，粗多糖得率逐渐升高，在80%一95%时达到高峰，再提高温度时，粗多糖得率升高趋势趋于平缓，考虑到高温会破坏多糖的结构，影响其生物活性，同时高温提取对工业化生产的设备要求更严格。所以，提取温度一般以80 ℃一95 ℃为宜。 随着提取时间的延长，粗多糖得率逐渐增加，0.5 h一3 h之间趋势明显，继续延长提取时间，多糖得率加趋势逐渐趋于平缓，一般浸提时间为8 h一12 h。热水浸提时的pH为自然pH值，大约在6-8之间。而对醇析时提取液的乙醇浓度来说，随着其逐渐升高，多糖得率亦
万方数据
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香菇多糖的提取及其抗氧化性和保湿性评价 作者：王玢， 任清， 李奇， 董银卯， 赵云云 作者单位：王玢,赵云云(首都师范大学生命科学学院,北京,100037)， 任清,李奇,董银卯(北京工商大学植物资源研究开发北京市重点实验室,北京,100037) 刊名： 食用菌 英文刊名：EDIBLE FUNGI 年，卷(期)：2008,30(5) 被引用次数：4次 参考文献(11条) 1.李宝良;李书剑香菇多糖苯酚试剂测定研究[期刊论文]-中国卫生检验杂志 2005(11) 2.杨娟;吴谋成;张声华香菇蛋白多糖抗疲劳作用研究[期刊论文]-营养学报 2001(04) 3.周之国;周谟炯;程灵香菇多糖对大鼠血小板聚集功能的影响[期刊论文]-时珍国医国药 1999(04) 4.金道山;韩志涛;王士雯香菇多糖抗衰老作用的实验研究 1994(01) 5.张海岚;周建平;边洪荣香菇有效成分研究综述[期刊论文]-华北煤炭医学院学报 2004(01) 6.刘春如;易诚香菇的营养价值和药用价值[期刊论文]-中国林副特产 2002(01) 7.盛剑秋;杨淑英香菇多糖的免疫调节作用研究进展 1998(01) 8.芮菁香菇多糖的药理作用和临床应用概况 2000(01) 9.杜小豪;徐卫;杜雪洁护肤产品的保湿功能评价[期刊论文]-日用化学工业 2000(03) 10.刘骏结晶紫分光光度法测定Featon反应产生的羟自由基[期刊论文]-武汉工业学院学报 2005(02) 11.卯晓岚中国大型真菌 2000 引证文献(4条) 1.张智.焦春伟.胡惠萍.潘鸿辉食用菌抗衰老研究进展[期刊论文]-微生物学杂志 2010(3) 2.谢瑶.石萌萌.庞欣高效液相色谱及液相色谱-质谱联用技术在保健食品检测中的应用[期刊论文]-化学通报（印刷版） 2010(8) 3.陆娟.武哲斌.屈长青超声波辅助提取香菇多糖的研究[期刊论文]-安徽农业科学 2010(33) 4.郑永飞活性多糖的保健功能及其应用[期刊论文]-粮食与食品工业 2009(4) 本文链接：https://www.doczj.com/doc/4113437296.html,/Periodical_syj200805044.aspx
黄芪多糖的提取工艺研究及应用展望 微生物与生化药学生研1001班 2010001295：王朝绚 摘要：本文综述了从中药黄芪中提取多糖的不同方法并对其进行比较以及黄芪多糖在抗病毒，免疫调节及血糖调节等方面的生物活性；对黄芪多糖的应用前景进行了展望。 关键词：黄芪，多糖，提取分离，生物活性 1 黄芪 我国的中草药资源丰富，种类繁多，多达12800多种，其中又以植物类的占大多数。中草药黄芪（membranaceus），属于豆科（Leguminosae），又名黄耆，是植物和中药材的统称，产于内蒙古，山西，甘肃，黑龙江等地。中药材黄芪为豆科草本植物蒙古黄芪，膜荚黄芪的根，味甘，性温，具有补气固表、利水退肿、脱毒排脓、生肌等功效，《中华人民共和国药典》上明列有扶正固本，补中益气的功效。现代医学发现黄芪的药理作用很广，其能增强机体免疫功能，加强细胞代谢，调节DNA复制、RNA和蛋白质的合成，具有固肾、降压、保肝、抗炎的功能[1]。 2 黄芪多糖 黄芪多糖（APS）是葡萄糖和阿拉伯糖的多聚糖，是黄芪中含量最多、免疫活性较强的一类物质，是黄芪中重要的天然有效成分。具有促进免疫提高巨噬细胞活性，抑制EAS、双向调节血糖作用[2,3]。其分子量小于8万级的多糖可制成静脉注射液，适用于化疗后的滋补，提高人体免疫力[4]。也可以在化学上对其进行改性使其活性增强，因而具有很好的抗艾滋病和抗凝血的应用前景[5,6]。目前黄芪多糖主要用于出口国外，国内需求量也很大，具有广阔的发展前景[7,8]。 但是目前黄芪多糖的提取分离工艺不成熟，效率较差，而且提取的成本较高。因此严重阻碍了黄芪多糖的研究与开发，本文综述了近年来有关黄芪多糖提取工艺的研究，为进一步的研究提供一定依据。 3 黄芪多糖的提取工艺 判断黄芪多糖提取工艺的优良，有以下几个方面需要考虑：黄芪多糖的得率；所提粗黄芪多糖的含糖量；整个工艺流程是否经济；不破坏所提取的黄芪多糖的活性。近年来有以下几种提取方法： 3.1 水提醇沉法 水提醇沉法的基本工艺为：黄芪根粉—以不同的次数不同量的水煮沸回流不同的时间—合并滤液—调节PH为中性—浓缩—加入一定浓度的乙醇—离心分离—加水溶解—过滤—滤液浓缩至小体积—加乙醇至浓度的80%—乙醇或丙酮洗涤—干燥—粗多糖。 水提醇沉法是应用最多的提取黄芪多糖的传统方法，按这种方法得到的黄芪多糖的的
香菇多糖提取工艺的研究 1引言 多糖类物质是所有生命有机体的重要组成部分，广泛存在于动物、植物和微生物细胞壁中,是生物体内除核酸和蛋白质以外的又一类重要的生物分子,尤其是一类重要的信息分子[1]。到目前为止，已有近300种的多糖化合物从天然产物中分离出来，其中植物提取水溶性多糖最为重要。从植物中提取多糖主要根据不同溶解度来选择溶剂进行。香菇多糖的提取一般有热水提取法、酸提取法、碱提取法、酶提取法和微波助提法等方法[2]，本文进行了浸提香菇多糖的工艺条件研究，以期获得香菇多糖的最佳提取条件，为其产业化生产提供有效的方法和技术参数。本实验采用各种溶剂和酶的处理,提取香菇多糖,保持多糖的生物活性，效果是明显的。 1.1香菇多糖的组成与药理价值 香菇多糖(LentinanLNT) 是一种β—1,3—葡聚糖，系从担子菌纲伞菌科真菌香菇子实体中提取分离纯化获得的均一组分的多糖。多糖以甘露糖为主，含少量的葡萄糖、微量的岩藻糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖等；肽链由天冬氨酸、组氨酸、丝氨酸、赖氨酸、谷氨酸等18种氨基酸组成。LNT的化学结构是一种以β—D—[1~3]葡萄糖残基为主链，侧链为(1—6)葡萄糖残基的葡聚糖，平均分子量约为50万道尔顿[3]。 香菇多糖1969年在日本首先发现，自此，国内外学者对LNT作了许多深人的研究。近年来，LNT广泛药理作用研究取得了很大进展。主要的药理价值有：免疫调节作用；抗肿瘤作用[4]；抗病毒作用；对寄生虫、霉菌、细菌等感染均有治疗作用；有抗衰老、抗辐射作用，还具有预防实验性高脂血症和高血糖作用。在临床上LNT还用于治疗小儿反复呼吸道感染，糖尿病，寻常型银屑病，硬皮病，面部扁平，尖锐湿疹等。此外，硫酸化香菇多糖具有显著抗HIV作用，香菇多糖在治疗胃
超声波法提取香菇多糖 研究背景： 香菇多糖的性质：香菇多糖以β~1，3葡聚糖为主，含有少量的木糖和甘露糖，具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能 用途：抗肿瘤药。为化、放疗辅助药。主要用于胃癌、肺癌、乳腺癌。 生产技术状况：因为香菇多糖的用途广泛，提取比较方便，越来越多的人投身于这方面的研究，是的提取技术方面的大幅度提升。状况良好。 操作过程： 方案设计：香菇多糖的提取 香菇预先烘干→称取干香菇15克→粉碎→圆底烧瓶→200ml热水70℃→超声波发生器（水预热在60℃左右）→提取45min（中间停顿2次，每次5min）→过滤→滤渣→等滤液体积热水70℃→提取30min（中间超声波停2次，每次5min）→过滤→合并滤液→抽滤→滤液→量体积标识贮藏备用 香菇多糖的测定：1.首先去掉香菇多糖溶液中的的蛋白质：采用氯化钙法：将溶液PH 调节至8---9，加热到85℃，加入氯化钙使浓度达5% (w/v)，搅拌，冷却至室温，过滤，得脱蛋白多糖液。 2.制作标准曲线：准确吸取1mg/ ml 葡萄糖标准溶液1.0 、2.0 、 3.0 、 4.0 、 5.0ml 置于50ml 容量瓶定容，准确吸取该系列溶液各2ml ，然后加入6%苯酚1.0ml 及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。 3. 样品的测定：取去完蛋白的样液2ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度。将吸光度控制在0.2-0.8 人员分工：我们分成两组来完成实验，因为有两组待测夜要进行测定。然后标准溶液是由第一大组完成。由于操作比较简单，我们就一起完成。1人对溶液进行去蛋白，2人制作待测液，1人对待测液进行测定，并记录数据。 实验现象：配置待测液时，加入浓硫酸后溶液变成橙黄色。从而可来额定吸光度。（附照片）总结分析
香菇多糖提取 提取法： 用物理提取的方法生产精细化学品，即通过将某一种物质按一定的要求从混合物中提取出来从而获得产品的方法。 张杨杨 精化1122 1、认识香菇多糖 (1)香菇多糖结构式 分子式：〔C42H72O36〕n 分子量：〔1152.9995〕n
(2)香菇多糖性质 香菇多糖（l e n t i n a n;L N T）是从香菇中分离纯化的一种葡聚糖，是以增强T细胞和巨噬细胞功能为主的免疫增强剂。 密度：1.88g/c m3；沸点：1472℃a t760m m H g。 溶于碱溶液或甲酸，微溶于热水或二甲亚砜，不溶于冷水、醇、乙醚、氯仿、吡啶或六甲基磷酰胺。对硫酸和盐酸稳定。 (3)香菇多糖的功能 香菇多糖具有激活细胞免疫、调节多种体液免疫因子、诱导α-干扰素生成，调节机体免疫应答反应，诱导白细胞对肿瘤浸润，导致肿瘤部位血管扩张、出血、坏死，阻止病毒与宿主细胞的结合，提高S O D〔超氧化物歧化酶〕活性，抑制M D A〔丙二醛〕生成，抗脂质氧化，降低胆固醇，调节糖代谢、改善糖耐量、扩张胃肠道产生饱腹感而减轻食欲，降低血糖等功能。 【丙二醛】 英文名：M a l o n d i a l d e h y d e;m a l o n i c d i a l d e h y d e;P r o p a n e d i a l 简称：M D A 分子式O H C-C H2-C H O 分子量72.0634 无色针状晶体，熔点72～74℃，一般含两个结晶水，60℃下真空干燥可得无水物，易潮解，纯的丙二醛在中性条件下稳定，但在酸性条件下不稳定。 由乙醛和甲酸乙酯在碱作用下缩合而得，可在高真空下升华精制，主要用于医药中间体、感光色素的原料。与蛋白质不相容，有潜在的致癌性。
香菇多糖的提取纯化及其理化性质的研究3 张 欣 吕作舟 (华中农业大学 武汉 430070) 摘要 本研究以香菇菌盖、菌柄、菌丝体为试材,采用水浸法、碱浸法提取香菇多糖。并且,从香菇菌盖中提取纯化得到两种新多糖:香菇多糖A(水浸物)和香菇多糖B(碱浸物)。 关键词 香菇 菌盖 多糖 提取 纯化 理化性质 香菇(Lentinula edodes)不仅是一种美味佳肴,也是一种著名的药用菌。我国历代的医药学家对香菇的药性及功能均有著述,如《日用本草》认为香菇“益气、不饥、治风、破血”〔1〕。现代研究结果表明,香菇中含有能降低血浆胆固醇的香菇嘌呤〔2〕,含有诱生干扰素的双链核糖核酸〔3〕,且含有抗肿瘤活性物质———香菇多糖及香菇糖肽〔4,5〕。 1970年G oro Chihara首先从香菇子实体中浸提出6种香菇多糖,并证明其中一种具有明显的抗肿瘤作用,定名为Lentinan〔5〕。自此,世界各地掀起了一股从大型真菌中寻找抗肿瘤药物的热潮。有关香菇多糖的研究尤其活跃,包括提取工艺及分离纯化研究,香菇多糖理化性质及药用价值研究〔6,7,8〕。但对多糖理化性质、结构、药效、药理等方面仍无定论,仍须继续深入研究。 本研究以香菇的菌盖、菌柄、菌丝体为试材,分别采用水浸法、碱浸法提取香菇多糖,检测分析了粗多糖、多糖、蛋白质与原材料之间量的关系,并且,从香菇菌盖中提纯了两种新多糖,对其理化性质和结构进行了初步研究,为进一步对香菇多糖的结构分析、药效、药理实验提供参考。 本研究主要结果如下: 11以香菇菌盖、菌柄、菌丝体为试材,采用水浸法、碱浸法提取香菇多糖。粗多糖、多糖得率都以菌盖的水浸物为最高,而以菌丝体的碱浸物为最低。蛋白质得率以菌柄水浸物为最高,以菌丝体的碱浸物为最低。 21氨基酸自动分析仪的分析结果表明:香菇菌盖水浸物、碱浸物中氨基酸含量丰富,其中包括人体必需氨基酸。水浸物主要含天门冬氨酸、谷氨酸;碱浸物主要含天门冬氨酸、谷氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸。 31采用水浸法、碱浸法从香菇菌盖中提取粗多糖,然后经乙醇沉淀、Sevag法脱蛋白、CT AB (十六烷基三甲基溴化铵)络合沉淀、氨化钠溶液溶解、透析,得到两种多糖:香菇多糖A(水浸物)和香菇多糖B(碱浸物)〔9〕。这种纯化方法具有简便、经济的特点。 41多糖的纸层析结果表明:多糖A、多糖B均仅为一个斑点,R f值分别为0152,0120。多糖的PAGE电泳结果表明:多糖A,B均为紫红色的单一谱带,R f值分别为0151,0162;它们均从负极向正极移动,表明它们是酸性多糖。紫外光谱分析结果表明:多糖A、多糖B均未发现核酸(260nm)和蛋白质(280nm)特征吸收峰〔10〕。组分含量分析表明:多糖A、多糖B均无含氮物质存在,但含少量灰分和水分。以上对多糖的鉴定结果表明:多糖A、多糖B均一性高,多糖A的纯度为7911%,多糖B的纯度为8312%,符合化学定性定量标准;它们是酸性多糖。 51多糖A,B均为灰白色粉未。多糖B不溶于稀酸。多糖A,B均溶于水、稀碱,尤易溶于热水,不溶于乙醇、丙酮、乙醚、乙酸乙酯等有机溶剂,其水溶液透明粘稠状,可被5%CT AB络合沉淀。旋光计测得多糖A的旋光率为〔α〕D25℃+ 4311°(水),多糖B的旋光率为〔α〕D25℃+2513°(水)。采用改良型膜渗透压法测得香菇多糖A的数均分量为8131×104,香菇多糖B为9140×104。 61红外光谱分析结果表明,多糖A、多糖B具类似结构,但不属同一种物质。两种多糖在890cm-1均具吸收峰,在840cm-1均无吸收峰,表明它们为β-糖苷〔11〕;多糖A,B都含有-C OO-基团。因此,香菇多糖A、香菇多糖B均是β-酸性异多糖。 71纸层析结果表明:多糖A,B均由葡萄糖(G lc)、半乳糖(G al)、阿拉伯糖(Ara)、木糖(X yl)、鼠李糖(Rha)构成。用正丁醇-冰醋酸-水(4∶1∶5)为展开剂,以葡萄糖的R f值为1100,则它们的R f值之比为,G lc∶G al∶Ara∶X yl∶Rha= 1100∶1117∶1152∶1176∶2117。气相色谱检测多糖的单糖组成及摩尔比,多糖A为Ara∶Rha∶X yl∶G al∶G lc= 4136∶2103∶1100∶5164∶13180;多糖B为Ara∶Rha∶X yl∶G al∶G lc=9137∶1100∶1164∶7119∶23136。 3 湖北省重点科技计划项目。收稿日期 1999—07—20 43中国食用菌 E DI BLE FUNGI OF CHI NA V ol118,N o16
紫菜多糖的提取与理化性质研究 Made by Zilong 【摘要】水提法分离纯化了紫菜多糖；采用TLC法分析证明紫菜多糖组成中含有半乳糖、甘露糖和葡萄糖；苯酚-硫酸法显色结果为黄色；溶液酸催化分解后加入氯化钡可产生沉淀。 【关键词】苯酚-硫酸法紫菜多糖TLC 前言： 紫菜属于海藻类主要为红藻门红毛菜科植物甘紫菜的叶状体是一种深受人们喜爱的食物。紫菜多糖一般分为紫菜胶和琼胶两类主要区别在于琼胶中硫酸基含量比紫菜胶中的少,而3,6-内醚-半乳糖含量前者比后者高。紫菜多糖的含量由于种类、生长环境和生长季节等不同而有很大差异各种多糖的单体组成也不同主要由岩藻糖、半乳糖、甘露糖、葡萄糖和木糖组成是一种含糖醛酸的酸性异多糖。研究表明紫菜多糖具有多种生物学活性及药用价值如降血脂、抗血栓、降血糖、抗炎、抗疲劳、增强免疫、抑制肿瘤生长等作用在保健品和医药中具有广阔的开发前景。 1.材料与方法 1.1原料与试剂 原料：干紫菜粉末（实验指导教师提供） 试剂：苯酚、浓硫酸、氯化钡、氯仿、正丁醇、三氟乙酸、苯胺、二苯胺均为国 产分析纯试剂。 主要仪器：硅胶薄层板、电热恒温水浴锅、DHG-9145型电热恒温鼓风干燥箱、电子天平、烧杯、安瓿瓶、滴管。 1.2 实验方法 1.2.1 紫菜多糖的提取 取1.0g干紫菜粉末于烧杯中，按照液料比20:1加入20ml蒸馏水，搅拌均匀后用保鲜膜封口，置于水浴锅中80℃恒温提取2h，抽滤后得提取液。 1.2.2 紫菜多糖除杂蛋白 将提取液与saveg试剂（氯仿：正丁醇=4:1）按照体积比1:4混合，按照saveg 法除蛋白得上清液。 1.2.3紫菜多糖的分离纯化 取上清液，加入4倍体积的无水乙醇得到沉淀。抽滤分离沉淀后用80%的乙醇及无水丙酮洗涤干净，在干燥箱中烘干3小时得紫菜粗多糖。 1.2.4紫菜多糖的理化性质分析 1.2.4.1苯酚-硫酸法显色反应 配制0.1mg/ml的粗多糖溶液。取1ml多糖溶液于试管中，加入1ml 0.6%苯酚溶液混匀后加入4ml浓硫酸，室温下放置15min观察颜色变化。 1.2.4.2硫酸钡沉淀反应 取紫菜粗多糖溶解于2M的三氟乙酸中，滴入氯化钡溶液观察有无沉淀产生。 1.2.4.3紫菜多糖组成定性分析（TLC法） 取紫菜粗多糖溶解于2M的三氟乙酸中，将溶液转移至安瓿瓶中，封口，在干燥箱中105℃放置3h得多糖分解液。取薄层色谱板分别点上浓度均为5mg/ml的半乳糖、葡萄糖、甘露糖溶液以及多糖分解液。将薄层色谱板于展开剂（正丙醇:
黄芪多糖提取 一、实验目的 学习并掌握黄芪多糖的提取技术 二、实验原理 黄芪为豆科植物的干燥根，主要药理成分是黄芪多糖和黄芪甙， 黄芪多糖在医药和畜医临床上研究应用较为广泛，可作为免疫促进剂和调节剂同时具有抗病毒和抗肿瘤，抗衰老，抗应激，抗氧化等作用。能提高未成年家畜的抗病能力，对幼仔猪幼畜经常添加可以减少疾病。 三、实验材料 黄芪根，氧化钙，95%乙醇，托盘天平，粉碎机，电磁炉，白瓷缸，稀盐酸，纱布，烧杯，玻璃棒 四、实验步骤 黄芪多糖的提取用CaO溶液提取法。采用PH9~10氧化铝溶液, 煮沸提取，浓缩时调PH6.5左右。 ①称取黄芪根（500g）100g,去掉杂质和泥土，粉碎成粉末。 ②黄芪根加入6~7倍的CaO溶液，煮沸1h,用8层纱布过滤。 ③合并滤液调PH至6.5左右。 ④将浓缩液加入2倍量的95%乙醇沉淀。 ⑤倾去上清液，沉淀物再加入95%乙醇，至浓缩为80%，静置倾出上 清液，滤渣即为黄芪多糖。 五、实验结果及分析 结果
黄芪多糖的物理性状，提取的黄芪多糖为灰白色粉末，易溶于水, 溶液乳白色，无杂质。最后得到的黄芪多糖在酒精中形似豆腐花，灰白色，经洗涤沉淀后的滤渣为黄芪多糖。 分析 黄芪多糖作为黄芪纤维质的组成部分。纤维在水中的溶胀作用和溶解性差，因此水提取法吸收率低。在碱性溶液中的溶胀作用溶解性显著增加。纤维之间的酯键易断裂而发生剥皮反应，使更多的多糖得以游离而被提取出来。从而提高多糖的回收率。因此黄芪多糖应尽量避免在酸性条件下提取。【下载本文档，可以自由复制内容或自由编辑修改内容，更多精彩文章，期待你的好评和关注，我将一如既往为您服务】
香菇是我国传统的药食两用食品，含有多种有效药用成分。尤其是香菇多糖,是一种宿主免疫增强剂,具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能。医学研究证明,它是通过刺激机体的免疫系统使机体的免疫功能得到恢复和提高,由机体本身的抵抗力去杀死肿瘤细胞。它的作用是间接的，毒副作用小,在临床上具有很好的应用前景[1-2]。香菇多糖在日本已生产并外销。但因工艺复杂,收率低,成本高,普通肿瘤病人无法接受。为此,我们对香菇多糖的提取工艺进行研究,初步探讨出较为理想的浸提工艺,希望为其工业化生产提供一定的理论参考。 1材料与方法 1.1材料与试剂 香菇：购自西安市农贸市场；D318型阴离子交换树脂,LX-200型阴离子交换树脂，D201×7型阴离子交换树脂，LX-67型阴离子交换树脂：均购自西安蓝深公司;葡萄糖,苯酚,浓硫酸,无水乙醇,考马斯亮蓝G-205等均为分析纯。 1.2主要仪器设备 752型紫外可见分光光度计：上海光谱仪器有限公司；WP700TL23-K5微波炉：格兰仕电器有限公司；电热恒温水浴锅：北京长源实验设备厂；80-2B台式低速离心机：湖南星科科学仪器有限公司；Delta320pH 计：梅特勒－托利多仪器（上海）有限公司。 1.3提取工艺[3-4] 干香菇→粉碎→加水浸泡20min→微波辐射→热水浸提30min→离心取上清液→浓缩→加乙醇沉淀多糖→离心分离多糖→多糖粗品制成溶液→上树脂柱去除杂蛋白→流出液真空干燥得香菇多糖产物试验中均以1g干香菇粉为提取对象。 1.4检测方法 香菇多糖含量测定：采用苯酚硫酸法[5]。测得标准 微波辅助法提取香菇多糖的工艺 刘小丽，黄晋杰 （长安大学环境科学与工程学院，陕西西安710054） 摘要：研究微波辅助法提取香菇多糖并用离子交换树脂去除杂质蛋白的工艺方法。采用单因素试验对固液比、微波辐射功率、辐射时间、乙醇用量以及杂蛋白的去除条件分别进行了考察。试验结果表明最佳提取工艺条件为:固液比1g∶20mL,微波辐射功率为280W，辐射时间5min，乙醇与多糖提取液体积比为4∶1，香菇多糖提取率可达到9.46%； 采用LX-67阴离子交换树脂在料液pH9时可有效去除蛋白质杂质，多糖纯度可达到85%。 关键词：香菇多糖；微波；离子交换树脂 Study on Microwave-assisted Extraction of Lentinan from Mushroom LIU Xiao-li，HUANG Jin-jie （College of Environmental Science and Engineering，Chang＇an University，Xi'an710054,Sh a anxi，China）Abstract:The methods of extracting lentinan from mushroom with micowave assisting were studied.The ratio of solid to water（g/mL）,microwave power,microwave extraction time,the usage of ethanol,and the remove of protein were studied respectively by the single factor test.The results showed that the optimum conditions of extraction were as follows:the ratio of material to liquid of1g∶20mL,microwave radiation power of280W,the radiation time for5min,the volume ratio of ethanol to liquor of4∶1,under this conditions the extraction rate of polysaccharide can get9.46%.The LX-67negative ion exchange resins were used to remove protein from the rude lentinan with the liquor at pH9,and the purity of lentinan can get85%. Key words:lentinan；microwave；ion exchange resins 作者简介：刘小丽（1975—），女（汉），讲师，在读博士，研究方向：食 品和药物中有用成分提取与分离。
香菇中多糖的提取分离与检测 方案设计：根据所查文献，影响因素：料液比>提取时间>提取次数>提取温度 一．香菇多糖的提取 称取干香菇粉2克5份→于1-5号锥形瓶中→加入（20,30,40,50,60）ml热水70℃→超声波发生器（水预热在60℃左右，功率80W左右）→提取40min（中间停顿2次，每15min 一次停顿，每次5min）→抽滤，用量筒量取所得滤液体积→滤渣→向滤渣中加入与滤液体积相等的热水，热水70℃→提取30min（中间停顿2次，每10min一次停顿，每次5min）→抽滤→合并滤液→量体积标识贮藏备用 二．香菇多糖的测定 1.首先去掉香菇多糖溶液中的的蛋白质：采用氯化钙法：量取所得的1-5号储备液各20ml，将溶液PH调节至8---9（NaOH 溶液），加热到85℃，加入氯化钙使浓度达5% (w/v)，搅拌，冷却至室温，过滤，得脱蛋白多糖液。 2.制作标准曲线：准确称取葡萄糖20mg置于500ml 容量瓶定容（40ug/L），分别准确量取0.2,0.6,1.0,1.4,1.8于比色管，补水至2ml（用移液管量取1.8,1.4,1.0,0.6，0.2蒸馏水），然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测吸光度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖浓度，纵坐标为吸光度，
得标准曲线。 3.样品的测定：取去完蛋白的样液2ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测吸光度。将吸光度控制在0.2-0.8 三．仪器与试剂 1.仪器：恒温水槽，超声波发生器，紫外分光光度计，分析天平，锥形瓶（100ml）5个，烧杯（100ml）5个，电热套，温度计，抽滤装置，玻璃棒，搅拌子，勺子，移液管（2ml，5ml），比色管（10ml）10个，容量瓶（50ml）6个。 2.材料：干香菇粉（已脱脂、脱单糖和低聚糖）（60g），氯化钙（60g），葡萄糖标准溶液（1mg/ ml）（30ml），6%苯酚（30ml），浓硫酸（100ml），NaOH溶液，高纯水。 注：1. 加入氯化钙使浓度达5% (w/v)：液体总体积*5% 2.溶液遇水会变红色，所以应润洗几次。 本实验方案由第三小组全体组员共同协作完成。
绝对是极品，一字一句翻译的，都有点不舍得上传 说明：下面提供的是中文翻译，对应的英文原文下载方式： ①谷歌学术搜索搜“Optimization of polysaccharides extraction from Gynostemma pentaphyllum Makino using Uniform Design”进入相关链接下载 ②中国知网搜索“Optimization of polysaccharides extraction from Gynostemma pentaphyllum Makino using Uniform Design”下载 ③大学里的图书馆网站外文数据库搜索“Optimization of polysaccharides extraction from Gynostemma pentaphyllum Makino using Uniform Design”下载 ④百度直接搜索“Optimization of polysaccharides extraction from Gynostemma pentaphyllum Makino using Uniform Design”进入相关链接下载 ⑤实在懒得不想下载的，和我联系。注明需要英文原文QQ：1025325761 原文的部分截图 应用均匀设计优化提取绞股蓝多糖工艺的研究 罗巅辉王昭晶蔡婀娜
摘要：本文应用均匀设计优化提取绞股蓝多糖提取率的工艺条件，对以下四个工艺条件进行了研究，包括水提时间(min），料液比（g/ml），浸泡时间(min），水提温度(℃) 。确定了优化条件，并通过数学模型绘制了三维响应曲面图。T检验和P值表明浸泡时间和水提时间(X2X4)在响应值中出现了互动效应，接着还出现了水萃取时间 (X4)的线性项，浸泡时间和水提温度(X2X3)的互动效应。考虑到效率因素，绞股蓝萃多糖提取的优化条件是：料液比比为1:67，浸泡时间10分钟，水提温度为95℃，水提时间为15分钟。在优化条件下，多糖提取率为11.29%，接近预测提取率。因此，应用均匀设计法从绞股蓝中提取多糖，能够极大缩短提取时间。 关键词：绞股蓝；多糖；提取；均匀设计
** 学院
本科生毕业论文
龙葵粗多糖提取工艺条件的优化
院(部)、专 业 生命科学学院 生物科学 研 究 学 生 学 方 向 姓 名 号 生物化学
指导教师姓名 指导教师职称 讲师
2014 年 06 月 01 日
大庆师范学院本科生毕业论文
摘
要
本实验以龙葵为实验材料 ，通过单因素和正交法相结合的实验方法对龙葵粗 多糖提取工艺进行优化， 考察因素分别是料液比、 冲泡时间、 水浴时间和水浴温度， 最终确定最优工艺条件为料液比 1:25、冲泡时间 50℃、水浴时间 25min、水浴温 度 90℃，粗多糖的提取率为 0.1%。 关键词：龙葵；粗多糖；条件优化
I
大庆师范学院本科生毕业论文
Abstract
This experiment by morel as experiment material, using single factor and orthogonal method, experimental method of solanum nigrum polysaccharide extraction process was optimized, examine factors are respectively and solid-liquid ratio, brewing time, water bath time and water bath temperature, and ultimately determine the optimal process conditions for the material liquid ratio, the brewing time 50℃ , and water bath time 25min, water bath temperature 90℃ , the coarse polysaccharide extraction yield of 0.1%. Key words：morel；crude polysaccharide；condition optimization
II
香菇多糖的提取技术 作者：唐庆菊学号：19 摘要：香菇多糖是香菇中分离出的一种重要的具有生理活性的物质，具有抗病毒、抗肿瘤、增强人体免疫力等多种功能，在保健食品和药品开发方面具有广阔的应用前景，本综述通过对当前常用的热水浸提法、酶解法、微波提取法和深层发酵培养法等6种香菇多糖的提取方法进行概述，具体的阐述了深层发酵液中香菇胞内、胞外多糖的提取、香菇多糖的微波提取法。并展望了其今后研究方向及其开发应用前景。 关键词：香菇多糖、提取 1 引言 多糖类物质是所有生命有机体的重要组成部分,广泛存在于动物,植物和微生物细胞壁中,是生物体内除核酸和蛋白质以外的又一类重要的生物分子.,尤其是一类重要的信息分子.到目前为止,已有近300种的多糖化合物从天然产物中分离出来,其中植物提取水溶性多糖最为重要.从植物中提取多糖主要根据不同溶解度来选择溶剂进行。香菇多糖的提取方法一般有热水提取法,酸提取法,碱提取法,酶提取法和微波助提法等方法.. 1．1.香菇多糖的组成及理化性质 香菇多糖又称香蕈、椎耳、香信、冬菰、厚菇、花菇，英文名：Lentinan。香菇是我国传统的著名食用菌，在世界上最早人工驯化栽培。香菇营养丰富，味道鲜美，被视为“菇中之王。
香菇多糖(LentinanLNT) 是一种β—1,3—葡聚糖,是从担子菌纲伞菌科真菌香菇子实体中提取分离纯化获得的均一组分的多糖.多糖以甘露糖为主,含少量的葡萄糖,微量的岩藻糖,半乳糖,木糖,阿拉伯糖等;肽链由天冬氨酸,组氨酸,丝氨酸,赖氨酸,谷氨酸等18种氨基酸组成.LNT的化学结构是一种以β—D—[1~3]葡萄糖残基为主链,侧链为(1—6)葡萄糖残基的葡聚糖,平均分子量约为50万道尔顿。 香菇多糖成品为白色粉末状固体，对光和热稳定。在水中溶解度为3g/L；能溶解于0.5mol/L氢氧化钠，溶解度可达50g/L-100g/L；不溶于甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂中。香菇多糖具有吸湿性，在相对湿度为92.5%，温度为25摄氏度的环境中放置15天，吸水量可达40%。 1.2营养价值 香菇含有的10余种氨基酸，其中有异亮氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、缬氨酸等7种人体必需的氨基酸及维生素B1、B2、PP及矿物盐和粗纤维等。 香菇中含不饱和脂肪酸甚高。除了含有还含有麦角甾醇（ergosterol）外，还有菌甾醇(fungi sterol)，尤其所含大量麦角甾醇可转变为维生素D，有增强人体抗疾病和预防感冒的功效； 香菇中还有腺嘌呤（eriadenine）和胆碱，可预防肝硬化和血管硬化； 香菇中又含酪酸氧化酶，有降低血压的功效。 香菇中还分离出降血清胆固醇的成分（C6H11O4N5,C9H11O3N5） 香菇多糖能提
食用菌多糖的提取方法有水提法、碱提法和酶提法等，其中酶提法是利用酶对细胞结构的破坏作用，使存在于细胞内部的多糖释放出来，从而提高了多糖的得率。 本次实验采用纤维素酶和果胶酶对紫蘑菇进行水解，研究香菇多糖的最佳提取工艺，并探讨蘑菇粒度、蘑菇溶解方法以及酶法提取中多糖提取效果的评价方法。 可以同步做三组对比试验：⑴采用水提，不加酶；⑵采用酶法提取；⑶采用酶空白（只加酶，不加蘑菇粉）。 由于酶中也含有少量的糖类成分，其存在将会对蘑菇多糖的提取产生影响。因此，在计算酶法提取多糖的效果时，要减去酶本身所引入的糖。在确定最佳酶浓度时更要考虑。 一、实验流程：蘑菇干燥→粉碎过筛→加水浸泡0.5h→调PH→加入纤维素酶→提取→离心过滤→测多糖提取率 式中：n一提取液稀释倍数； C一提取液中多糖的浓度（mg/mL）； V一提取液体积（mL）； m一蘑菇的质量（mg）。 测定时取三个平行样，结果数据为平行样的平均数值。 二、具体实验步骤： 1、多糖标准曲线的绘制 精密称取105℃干燥恒重的葡萄糖标准品100mg,置于100 mL容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀。精密吸取0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4、2.8 mL分别置于50 mL 容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀。精密吸取上述各种溶液2.0 mL,分别加入5%苯酚溶液1.0 mL,摇匀,迅速加入5.0 mL浓硫酸,振摇5min,置沸水浴上加热15 min,然后置冷水浴中冷却30 min,随行空白,在490 nm波长处测定吸光度。以标准溶液浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标绘制标准曲线，并计算其标准曲线回归方程。 （1）精密度试验:精密吸取1.0 ml供试液按“标准曲线的制备”项下操作，分别测定吸光度，求得RSD。 （2）重现性及多糖含量测定:精密称取巴西蘑菇多糖0.1000g，按“供试液