3.叙述指示生物的理想条件。常用的水的卫生细菌学检验的指示生物有哪些检验方法确立的依据是什么（选一种举例说明）
理想条件：1.足够的敏感性 2.有广泛的地理分布和足够的数量 3.生态系统的重要组成 4.实验室易于繁殖和培养 5.具有丰富的生物学背景资料看
4.试述ph对微生物生长的影响。用活性污泥法处理污水为什么要保持在ph6以上
答：微生物的生命活动，物质代谢和ph有密切关系。不同微生物要求不同的ph
应为在ph6以下的酸性环境不利于细菌和原生动物生长，尤其对菌胶团细菌不利。相反对霉菌和酵母菌有利。如果活性污泥中有大量霉菌繁殖，由于多数霉菌不像细菌那样分泌粘性物质于细胞外，其吸附能力和絮凝性能不如菌胶团，如果霉菌的数量在活性污泥中占优势，会造成活性污泥的结构松散，不易沉降，甚至导致活性污泥丝状菌膨胀，就会降低活性污泥整体处理效果，出水水质下降。
5.何为反硝化作用分析反硝化作用的意义。
兼性厌氧的硝酸盐还原菌将硝酸盐还原为氮气叫做反硝化作用
意义：氮是生物的重要营养物质
6.生物处理有哪些类型分别论述其主要特点。
好氧性生物处理、厌氧性生物处理
基因是一切生物体内储存遗传信息的、有自我复制能力的遗传功能单位。它是DNA分子上一个具有特定碱基序列，即核苷酸顺序的片段。
三种：1.结构基因，编码蛋白质或酶的结构，控制某种蛋白质或酶的合成。
2.操纵区，它的功能像“开关”，操纵三个结构基因的表达。
3.调节基因，它控制结构基因。
藻类有哪10个门比较藻类光合作用和细菌光合作用。
蓝藻门、裸藻门、绿藻门、轮藻门、金藻门、黄藻门、硅藻门、甲藻门、褐藻门、红藻门。藻类光合作用：
废气生物处理动态及原理。
原理：实质是利用微生物的代谢作用将废气分解为简单的无机物。由于这一过程在气相中很难进行，废气必须首先经历由气相转移到液相或固相表面液膜的传质过程，然后污染物才能在液相或固相表面被微生物吸附降解。
10.影印平板技术
把长有许多菌落的母培养皿倒置于包有灭菌丝绒布的木质圆柱印章上，使其粘上来自平板的菌落。然后可把这一印章上的菌落一一接种到不同的选择性培养基平板上。待这些平板培养后，对各平板相同位置的菌落做对比后，就可以选择出适当的突变菌株。
ATP生成的具体方法。
1.基质水平磷酸化：在厌氧条件下，在基质氧化过程中产生高自由能的中间产物并将高能键（~）交给ADP，使ADP磷酸化为ATP。
2.氧化磷酸化：微生物在好氧呼吸和无氧呼吸时，通过电子传递体系产生ATP
3.光合磷酸化：光引起叶绿素，菌绿素或菌紫素逐出点子，通过点子传递体系产生ATP.
乙醇发酵和TCA，并进行能量平衡。
微生物的营养物及其生理功能。
水、碳素营养源、氮素营养源、无机盐、生长因子等。
生理功能：1.水：是微生物代谢过程中必不可少的溶剂，有助于营养物质溶解。维持生物大分子结构的稳定性，参与重要的生物化学反应
2.碳源：构成微生物细胞的含碳物质（碳架）和供给微生物生长、繁殖及运动所需的能量
3.氮源：是合成蛋白质的主要原料，一般不提供能量。
4.无机盐：构成细胞组分，构成酶的组分和维持酶的活性，调节渗透压、氢离子浓度、氧化还原电位等，供给自养微生物的能源。
5.生长因子：维持微生物的正常生长
简述厌氧微生物处理原理。
第一阶段：是水解和发酵性细菌群将复杂有机物如纤维素、淀粉等水解为单糖，再酵解为丙酮酸，蛋白质水解为氨基酸，脱氨基成有机酸和氨，脂质水解为低级脂肪酸和醇。
第二阶段：是产氢和产乙酸细菌群把第一阶段的产物进一步分解为乙酸和氢气。
第三阶段：微生物是两组生理性质不同的专性厌氧产甲烷菌群。一组是将氢气和二氧化碳合成甲烷，或一氧化碳和氢气合成甲烷。另一组是将乙酸脱羧生成甲烷和二氧化碳，或利用甲酸、甲醇及甲基胺裂解成甲烷。
第四阶段：为同型产乙酸阶段，是同型产乙酸细菌将H2和CO2转化为乙酸的过程。
活性污泥中的微生物及其作用。
细菌：迅速稳定污（废）水中的有机污染物，有良好的自我凝聚能力和沉降性能，形成菌胶团。作用1.有强大的生物絮凝、吸附能力和氧化分解有机物的能力；2.菌胶团对有机物的吸附分解为原生动物提供了良好的生存环境；3.为原生动物提供附着栖息场所；4.具有指示作用：通过菌胶团的颜色、透明度、数量、颗粒大小及结构的紧松程度可衡量好氧活性污泥的性能。
真菌：主要为丝状真菌，其作用与絮状水体形成及膨胀有关。
微型动物：原生动物和少数多细胞动物1.指示作用根据它们的活动规律判断水质和污废水处理程度和活性污泥培养的成熟程度、处理水质的好坏及进水水质变化和运行中出现的问题。2.净化作用；3促进徐凝作用和沉淀作用。
藻类
蛋白质完全氧化分解的过程。
蛋白质首先在微生物分泌的蛋白酶的作用下进行水解生成多肽与二肽，然后由肽酶进一步水解为氨基酸。在经过氧化脱氨基作用产生酮酸和氨。
描述大肠杆菌的遗传特性
大肠杆菌要求ph为、温度为37℃，发酵糖，产酸，产气。大肠杆菌为杆菌，在异常情况下呈短杆状、近球状或呈丝状。
遗传和变异的物质基础是什么如何证明
物质基础为DNA
证明：用32PO43-和35SO42-标记大肠杆菌T2噬菌体，因蛋白质分子中只含硫不含磷，而DNA只含磷不含硫。故将T2噬菌体的头部DNA标记32P，蛋白质外壳标记35S。用标记过得T2噬菌体感染大肠杆菌，之后将大肠杆菌洗净并绞碎离心沉淀。分别测定沉淀物和上清液，结果32P 全部在沉淀物中，35S全部在上清液中，证明只有DNA进入大肠杆菌体内，蛋白质衣壳留在菌体外部。
叙述放磷和吸磷的生化机制。
放磷：聚磷菌在厌氧条件下分解体内的多聚磷酸盐产生ATP，利用ATP以主动运输的方式吸收产酸菌提供的三类基质进入细胞内合成PHB.与此同时释放PO43-于环境中。
聚磷：聚磷菌在好氧条件下，分解体内PHB和外源基质，产生质子驱动力将体外的PO43-输送到体内合成ATP和核酸，将过剩的PO43-聚合成多聚磷酸盐。
论述微生物在环境保护中的作用。
比较活性污泥系统和生物膜系统中的微生物群落及其作用。
活性污泥：细菌：迅速稳定污（废）水中的有机污染物，有良好的自我凝聚能力和沉降性能，形成菌胶团。作用1.有强大的生物絮凝、吸附能力和氧化分解有机物的能力；2.菌胶团对
有机物的吸附分解为原生动物提供了良好的生存环境；3.为原生动物提供附着栖息场所；4.具有指示作用：通过菌胶团的颜色、透明度、数量、颗粒大小及结构的紧松程度可衡量好氧活性污泥的性能。
真菌：主要为丝状真菌，其作用与絮状水体形成及膨胀有关。
微型动物：原生动物和少数多细胞动物1.指示作用根据它们的活动规律判断水质和污废水处理程度和活性污泥培养的成熟程度、处理水质的好坏及进水水质变化和运行中出现的问题。
生物膜系统：
生物膜生物，细菌，以动胶菌为主有良好的降解有机物的能力，丝状菌的菌丝交叉黏连成网状结构，有过滤作用。真菌，降解有机物。藻类，向生物膜供氧。
生物膜面生物：固着型纤毛虫和游泳型纤毛虫，可作为水处理的指示生物。能促进滤池净化速度，提高滤池整体的处理效率。
滤池扫除生物，体形较大的无脊椎动物，去除滤池中的污泥，防止污泥积聚和堵塞。
论述污染水体的微生物生态。
类型外观BIP生物特征河
流
流向α-中污带
1．水为灰色，溶解氧少，
为半厌氧状态，有机
物量减少，BOD下
降；
2．水面上有泡沫和浮
泥，有NH
3
、氨基酸
及H
2
S。臭味。
20~60
1．生物种类比多污带稍
多。细菌数量较多，每
毫升水约有几千万个。
2．出现有蓝藻、裸藻、
绿藻，原生动物有天蓝
喇叭虫、美观独缩虫、
椎尾水轮虫、臂尾水轮
虫及栉虾等。**
3．底泥已部分无机化，
滋生了很多颤蚯蚓。
类型外观BIP生物特征
河流
流向β-中污带
1．有机物较少，BOD和悬
浮物含量低，溶解氧浓
度升高；
2．NH3和H2S分别氧化为
N03—和S042-，两者含量
均减少。
8~20
1．细菌数量减少，每毫
升水只有几万个。
2．藻类大量繁殖，水生
植物出现。***
3．原生动物有固着型纤
毛虫如：独缩虫、聚缩
虫等活跃，轮虫、浮游
甲壳动物及昆虫出现。
类型外观BIP生物特征
河流
流向寡污带
1．有机物全部无机化，
BOD和悬浮物含量极
低，水的浑浊度低，溶
解氧恢复到正常含量。
2．H
2
S消失；
3．河流自净过程已完成的
标志
0~8
1．细菌极少；
2．出现鱼腥藻、硅藻、
黄藻、钟虫、变形虫、
旋轮虫、浮游甲壳动
物、水生植物及鱼。****
论述自然界的碳循环。微生物在碳循环中的作用。
微生物既参与自然界的有机物合成作用，也参与其为二氧化碳的作用，二以后者为主要。微生物在碳循环中主要扮演分解者的角色，能加快碳循环的速度，有利于碳循环的快速进行，能将动植物遗体分解，并转化成二氧化碳释放到空气中或者转化成碳酸盐释放到土壤中。
何谓两相厌氧生物处理技术，其出发点如何
废水处理在两个不同的反应器中依次完成：进行水解和酸化的酸化反应器、产乙酸和产甲烷的甲烷反应器。不同反应器中，污泥细菌的组成区别很大。前者中基本是水解发酵菌、少量产甲烷菌；后者主要是产甲烷菌和少量产氢产甲烷菌。
何谓菌胶团，其在活性污泥处理工作中的作用如何
某些细菌由于其遗传特性决定，不同的细菌按一定的排列方式相互黏集而成的，并被同一个荚膜包裹形成的有一定形态特征的细菌集团。
作用：1、很强的生物吸附和氧化分解有机物的能力2、为原生动物提供良好的生存环境
3、为原生动物、微型动物提供附着场所
4、具有指示作用
试结合生物处理过程，说明呼吸的生物学意义。
绘图说明高浓度有机废水厌氧生物处理的过程，并说明参与以上过程的微生物特点。
特点：厌氧活性污泥是由兼性厌氧菌和专性厌氧菌与无数中的有机物杂质形成的。
其中微生物组成有5种：1.将大分子水解为小分子的水解细菌；2.将小分子的单糖、氨基酸等发酵为氢和乙酸的发酵细菌；3.氢营养型和乙酸营养型的古菌；4利用H2和CO2合成CH4的古菌；5.厌氧的原生动物。专性厌氧产甲烷菌生长速率慢，时代时间长。因此厌氧活性污泥的驯化培养时间长。并且厌氧活性污泥的微生物群落分布与生物膜相似，有分层现象，但没有好氧生物膜明显。
以细菌、游泳型纤毛虫、固着型纤毛虫、轮虫、DO、COD的量为纵坐标，以时间为很坐标，绘制水体自净过程。P259+p303
3.何谓水源水的微污染，特点如何，绘图说明针对微污染水源水常用的给水处理流程，并从微生物的角度就微污染污染物的降解方式进行阐述。
微污染水源水是收到有机物、氨氮、磷及有机污染物较低程度污染的水源水。
这类水所含的污染物种类较多，性质较复杂，但浓度比较低。水质特点：1受工业废水和生活污水的影响，2.水中溶解性有机物大量增加，3.一些有害微生物较难去除，4.内分泌干扰物去除率不高。
水源水预处理（捷径反硝化）→混凝→沉淀→快砂滤→慢砂滤→清水贮罐→出水
降解方式：利用亚硝化细菌将氨氧化为HNO2后，随即利用有机物将HNO2还原为N2。
何谓细菌的生长曲线绘图并说明如何利用它控制生物处理构筑物的运行
以细菌个数或细菌数的对数或细菌的干重为纵坐标，以培养时间为横坐标，连接坐标系上各点成一条曲线即细菌的生长曲线。
在污水生物处理的设计中，按污水的水质情况可利用不同生长阶段的微生物处理废水，1.如常规活性污泥法利用生长率下降阶段的微生物，包括减速期、静止期的微生物；2.微生物吸附法利用静止期的微生物；3.高负荷活性污泥利用对数期和减速期的微生物；4.有机物含量低的，其BOD5与COD cr的比值小于，可生物性差的污水，用延时曝气法处理即利用衰亡期的微生物处理。
从微生物生态学角度分析活性污泥丝状菌膨胀的原因和控制方法。
产生污泥膨胀的主要原因有：废水中碳水化合物较多、溶解氧不足、缺乏N、P
营养元素、水温高或pH较低时都会使丝状菌或真菌增殖过快，引起污泥膨胀。?
发生污泥膨胀后可采取以下的控制措施：（1）加强曝气，维持混合液DO不少于1～2mg/L；?（2）投加N、P营养元素，使BOD5:N:P约为100：5：1；（3）?在回流污泥中投加漂白粉或液氯，杀灭丝状菌或真菌，投加量按干污泥～％；（4）调整pH至6～8；（5）投加惰性物质，如硅藻土等；（6）废水处理规模较小时，可考虑采用气浮池代替二沉池。
临床微生物学与检验测试题及答案——细菌感染的实验室检查与诊断及细菌生理 一、名词解释 1.血清学诊断 2.培养基 3.基础培养基 4.选择培养基 5.鉴别培养基 6.菌落 二、填空题 1.实验室细菌学检查结果的准确与否和标本的选 择、、有直接关系。 2.辅助诊断风湿热的抗“O”实验属于。 3.血清学试验一般需作两次，其血清分别取自疾病 的和.第二次抗体效价比第一 次时方有诊断意义。 4.对流行性脑炎患者进行细菌学检查，可采集的标本 有、和。 5.进行病原菌的分离培养时，从有正常菌群部位采取的标本应接种 于培养基或培养基。 6.细菌感染实验室检查中，常用的血清学方法 有、和三大类。 7.属于直接凝集反应的血清学试验有和。 三、单项选择题 1.目前在传染病的预防接种中，使用减毒活疫苗比使用灭活疫苗普遍，关于其原因下述不正确的是 A.减毒活疫苗的免疫效果优于灭活疫苗 B.减毒活疫苗刺激机体产生的特异性免疫的持续时间比灭活疫苗长 C.减毒活疫苗能在机体内增殖或干扰野毒株的增殖及致病作用，灭活疫苗则不能 D.减毒活疫苗可诱导机体产生分泌型IgA，故适用于免疫缺陷或低下的患者 E.减毒活疫苗一般只需接种一次即能达到免疫效果，而灭活疫苗需接种多次 2.白百破三联疫苗的组成是
A.百日咳类毒素，白喉类毒素，破伤风类毒素 B.百日咳死疫苗，白喉类毒素，破伤风类毒素 C.百日咳死疫苗，白喉死疫苗，破伤风类毒素 D.百日咳活疫苗，白喉活疫苗，破伤风死疫苗 E.百日咳活疫苗，白喉死疫苗，破伤风死疫苗 3.使用时要注意防止Ⅰ型超敏反应的免疫制剂是 A.丙种球蛋白 B.胎盘球蛋白 C.抗毒素 D.白细胞介素 E.干扰素 4.关于胎盘球蛋白的叙述，错误的是 A.由健康产妇的胎盘和婴儿脐带中提取制备 B.一般含IgM C.一般不会引起超敏反应 D.主要用于麻疹，甲型肝炎和脊髓灰质炎等病毒性疾病的紧急预防 E.免疫效果不如高效价的特异性免疫球蛋白 5.伤寒病人发病第一周内，分离病原菌应采取的标本是 A.血液 B.尿液 C.粪便 D.呕吐物 E.脑脊液 6.咽喉假膜标本涂片染色后，镜检出有异染颗粒的棒状杆菌，其临床意义在于诊断 A.结核病 B.军团病 C.白喉
1、微生物是如何命名的？举例说明答：微生物的命名是采用生物学中的二名法，即用两个拉丁字命名一个微生物的种，这个种的名字是由一个属名和一个种名组成，属名和种名都用斜体表示，属名在前，用拉丁文名词表示，第一个字母大写。种名在后，用拉丁文的形容词表示，第一个字母小写。如大肠埃希氏杆菌的名字是Escherichia coli 2、写出大肠埃希氏杆菌和枯草杆菌的拉丁名全称 答：大肠埃希氏杆菌的名称是Escherichia coli 枯草杆菌的名称是Bacillus subtilis 3、微生物有哪些特点 答：（1）个体极小：微生物的个体极小，有几纳米到几微米，要通过光学显微镜才能看见，病毒小于0.2微米，在光学显微镜可视范围外，还需要通过电子显微镜才可看见 （2）分布广，种类繁多：环境的多样性如极端高温，高盐度和极端PH造就了微生物的种类繁多和数量庞大 （3）繁殖快：大多数微生物以裂殖的方式繁殖后代，在适宜的环境条件下，十几分钟至二十分钟就可繁殖一代。在物种竞争上取得优势，这是生存竞争的保证。 （4）易变异：多数微生物为单细胞，结构简单，整个细胞直接与环境接触易受外界环境因素影响，引起遗传物质DNA的改变而发生变异。或者变异为优良菌种，或使菌种退化。4、细菌有哪几种形态?各举一种细菌为代表。 答：细菌有四种形态：球状，杆状，螺旋状和丝状。分别叫球菌，杆菌，螺旋菌和丝状菌。球菌：金黄色葡萄球菌，杆菌：芽孢杆菌，螺旋菌：弧菌，丝状菌：铁丝菌 5、叙述革兰氏染色的机制和步骤。 答：机制：①革兰氏染色与细菌等电点有关②革兰氏染色与细胞壁有关 步骤：1在无菌操作条件下，用接种环挑取少量细菌于干净载玻片上涂布均匀，固定。2用草酸结晶紫染液1分钟，水洗。3用碘-碘化钾媒染1分钟，水洗。4用中性脱色剂（如乙醇）脱色，革兰氏阳性菌不褪色仍呈紫色，格兰仕阴性菌褪色，呈无色。5用蕃红染液复染1分钟，革兰氏阳性菌仍呈紫色，格兰仕阴性菌呈红色。革兰氏阳性菌与格兰仕阴性菌及被区别开来 6、细菌有哪些一般结构和特殊结构？它们各有哪些生理功能？ 答：细菌是单细胞生物。所有细菌均有：细胞壁、细胞质膜、细胞质及其内含物、细胞核物质。部分细菌有特殊结构：芽孢、鞭毛、荚膜、粘液层、菌胶团、衣鞘及光合作用片层等。细胞壁是包围在细菌体表面最外层的、具有坚韧而带有弹性的薄膜。可以起到：①保护原生质体免受渗透压引起破裂的作用。②维持细菌的细胞形态。③细胞壁是多孔结构的分子筛，阻挡某些分子进入和保留蛋白质在间质（格兰氏阴性菌细胞壁和细胞质之间的区域）④细胞壁为鞭毛提供指点，使鞭毛运动。 细胞质膜的生理功能有：①维持渗透压的梯度和溶液的转移。②细胞质膜上有合成细胞壁和形成横膈膜组分的酶，故在膜的外表面合成细胞壁③膜内陷形成的中间体含有细胞色素，参与呼吸作用。④细胞质膜上有琥珀酸脱氢酶、NADH脱氢酶、细胞色素氧化酶、电子传递系统、氧化磷酸化酶及腺苷三磷酸酶。在细胞上进行物质代谢和能量代谢。⑤细胞质膜上有鞭毛基粒，鞭毛由此长出，即为鞭毛提供附着点。 荚膜的主要功能有：①具有荚膜的S-型肺炎链球菌毒性强，有助于肺炎链球菌侵入人体。②荚膜可保护致病菌免受宿主吞噬细胞的吞噬，保护细菌免受干燥的影响。③当缺乏营养时，假膜可被用作碳源和能源，有的荚膜还能做氮源。④废水生物处理中细菌的荚膜有生物吸附作用，再爆气池中因爆气搅动和水的冲击力容易把细菌粘液冲刷入水中，以增加水中有机物，它可被其他微生物利用。
微生物实验问题与答案 一、光学显微镜的操作及细菌、放线菌个体形态的观察 1、为什么油镜的放大倍数比普通物镜大？ 答：油镜能减少光的折射，进而提高视野的亮度；通过提高显微镜的数值口径增加显微镜的分辨力。 2、数值口径的表达公式？ 答案：N.A=n ×sin α，n为介质折射率；α为光线最大入射角的半数。 3、显微镜数值口径与分辨力的关系？ 答案：分辨力是指显微镜能辨别两点之间最小距离的能力，它与光的波长成反比，与数值口径成正比。 4、油镜的使用与普通物镜有何不同？ 答案：油镜必须借助于光折射率等于或接近于玻璃的试剂，如香柏油等才能使用，而普通物镜则不需要；油镜是由100×物镜与香柏油构成，而普通物镜则限于10×物镜、40×物镜等。 5、使用油镜时应特别注意什么？ 答案：上下调节镜头时应使用微螺旋，否则容易损坏镜头；应使油镜始终浸泡在香柏油中，否则就不是油镜；使用完毕后，必须用搽镜纸沾取二甲苯等有机溶剂搽去残留的油迹，否则会玷污油镜。 6、什么是物镜的同焦现象？它在显微镜观察中有什么意义？ 答：在一般情况下，当物像在一种物镜中已清晰聚焦后，转动物镜转换器将其他物镜转到工作位置进行观察时，物像将保持基本准焦的状态，这种现象称为物镜的同焦。利用这种同焦现象，可以保证在使用高倍镜或油镜等放大倍数高、工作距离短的物镜时仅用细调节器即可对物像清晰聚焦，从而避免由于使用粗调节器时可能的误操作而损坏镜头或载玻片。 7、根据你的实验体会,谈谈应如何根据所观察微生物的大小,选择不同的物镜进行有效地观察 答：细菌用油镜，真菌用高倍镜。都是先用低倍镜找到目标后，再用高倍镜调到合适的视野和合适的清晰度。 答：放线菌、酵母菌、多细胞真菌相对较大，用放大40倍的物镜就可以看了，细菌小，要用放大1000倍的物镜看，感觉还很小。病毒那就要用电子显微镜看了。
1 什么叫活性污泥？ 答：废水处理构筑物曝气池内的污泥。其重要组成成分是菌胶团。 2简述丝状细菌的主要类型、代谢特点及在污水处理中的作用。 答： 3 微生物有哪些共性？ 答：(1)形体微小，结构简单(2) 比表面积大，代谢能力强(3) 生长旺盛，繁殖快。(4) 适应力强，易变异。(5) 分布广，种类多 4 什么叫微生物？ 答：对形体微小，形态简单的低等生物的统称 5 水处理中常见的有哪些微生物类群？ 答：非细胞类型：病毒（动物病毒、植物病毒、昆虫病毒），噬菌体（细菌病毒），真菌病毒等。 原核细胞类型：细菌、放线菌、蓝细菌、立克次氏体、衣原体、支原体等。 真核细胞类型：真菌、原生动物、显微藻类、微型动物等。 6 细菌有哪几种基本形态？其形态是固定不变的吗？ 答：1）球菌：细胞呈球形， a 单球菌： b 双球菌： c 四联球菌： d 八叠球菌： e 链球菌： f 葡萄球菌： 球菌排列方式（优势排列）较稳定，对于细菌分类鉴定有重要意义。 2）杆菌：杆菌排列方式不稳定，对细菌分类鉴定无意义。 3）螺旋状菌： 弧菌：菌体弯曲程度小于一周，呈“C”状，如霍乱弧菌。 螺旋菌：菌体弯曲程度大于一周，螺旋圈数及螺距大小因种而异。细菌形态受环境条件如温度、营养状况、培养时间等因素的影响，环境条件不适时，菌体形态长呈现异常形态。
7 细菌的结构由哪些部分组成？ 答：基本结构：所有细菌都具有的细胞结构部分，例如：细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核等。 特殊结构：部分细菌专有的细胞结构部分，例如：芽孢、鞭毛、荚膜、菌毛等。 8 细菌革兰氏染色原理（机制）？ 答：G+和G-两类细菌细胞壁结构组成上有明显差异导致其染色结果不同。G+经过结晶紫初染，碘液媒染，菌体胞壁被染成紫色，后经酒精脱色，由于其细胞壁较厚，肽聚糖结构层次多，且交联程度大，网孔径因酒精脱水而缩小，细胞壁内形成的结晶紫—碘复合物被阻留于细胞壁内，表现为不被脱色，后虽经过复染，最终染色结果仍然为紫色。（实际为紫中发红）；G+经过结晶紫初染，碘液媒染，菌体胞壁被染成紫色，后经酒精脱色，由于其细胞壁较薄，肽聚糖结构层次少，且交联程度低（松疏），细胞内类脂成分含量较大，网孔径因酒精溶解脂类作用而增大，细胞壁内形成的结晶紫—碘复合物被洗脱，后经过红色染料复染，最终染色结果为红色。 9 原核： 答：细菌等原核生物细胞遗传物质集中分布于细胞质某一区域，无特定形态的核结构（即无核膜、核孔、核仁等），故称原核，拟核或细菌染色体等。核物质含有DNA（占60%），RNA （占30%），蛋白质（占10%），电镜下观察可见原核由环状dsDNA紧密缠绕扭曲折叠成球状，棒状，哑铃状。 10 荚膜 答：某些细菌细胞壁外形成的厚度不一，疏散、透明、粘稠胶状物质结构。主要由多糖多肽或蛋白质组成。保持水分、储存养分。 11 如何区分新生菌胶团和老化菌胶团？ 答：活性污泥性能的好坏，主要可根据所含菌胶团多少、大小及结构来确定。 新生菌胶团颜色较浅，无色透明，有旺盛的生命力，氧化分解有机物的能力强。 老化菌胶团吸附了许多杂质，染色较深，看不到细菌单体，像一团烂泥，生命力较差。
微生物简答题Newly compiled on November 23, 2020
1、微生物是如何命名的举例说明 答：微生物的命名是采用生物学中的二名法，即用两个拉丁字命名一个微生物的种，这个种的名字是由一个属名和一个种名组成，属名和种名都用斜体表示，属名在前，用拉丁文名词表示，第一个字母大写。种名在后，用拉丁文的形容词表示，第一个字母小写。如大肠埃希氏杆菌的名字是Escherichia coli 2、写出大肠埃希氏杆菌和枯草杆菌的拉丁名全称 答：大肠埃希氏杆菌的名称是Escherichia coli 枯草杆菌的名称是Bacillus subtilis 3、微生物有哪些特点 答：（1）个体极小：微生物的个体极小，有几纳米到几微米，要通过光学显微镜才能看见，病毒小于微米，在光学显微镜可视范围外，还需要通过电子显微镜才可看见（2）分布广，种类繁多：环境的多样性如极端高温，高盐度和极端PH造就了微生物的种类繁多和数量庞大 （3）繁殖快：大多数微生物以裂殖的方式繁殖后代，在适宜的环境条件下，十几分钟至二十分钟就可繁殖一代。在物种竞争上取得优势，这是生存竞争的保证。 （4）易变异：多数微生物为单细胞，结构简单，整个细胞直接与环境接触易受外界环境因素影响，引起遗传物质DNA的改变而发生变异。或者变异为优良菌种，或使菌种退化。 4、细菌有哪几种形态各举一种细菌为代表。 答：细菌有四种形态：球状，杆状，螺旋状和丝状。分别叫球菌，杆菌，螺旋菌和丝状菌。 球菌：金黄色葡萄球菌，杆菌：芽孢杆菌，螺旋菌：弧菌，丝状菌：铁丝菌
5、叙述革兰氏染色的机制和步骤。 答：机制：①革兰氏染色与细菌等电点有关②革兰氏染色与细胞壁有关 步骤：1在无菌操作条件下，用接种环挑取少量细菌于干净载玻片上涂布均匀，固定。2用草酸结晶紫染液1分钟，水洗。3用碘-碘化钾媒染1分钟，水洗。4用中性脱色剂（如乙醇）脱色，革兰氏阳性菌不褪色仍呈紫色，格兰仕阴性菌褪色，呈无色。5用蕃红染液复染1分钟，革兰氏阳性菌仍呈紫色，格兰仕阴性菌呈红色。革兰氏阳性菌与格兰仕阴性菌及被区别开来 6、细菌有哪些一般结构和特殊结构它们各有哪些生理功能 答：细菌是单细胞生物。所有细菌均有：细胞壁、细胞质膜、细胞质及其内含物、细胞核物质。部分细菌有特殊结构：芽孢、鞭毛、荚膜、粘液层、菌胶团、衣鞘及光合作用片层等。 细胞壁是包围在细菌体表面最外层的、具有坚韧而带有弹性的薄膜。可以起到：①保护原生质体免受渗透压引起破裂的作用。②维持细菌的细胞形态。③细胞壁是多孔结构的分子筛，阻挡某些分子进入和保留蛋白质在间质（格兰氏阴性菌细胞壁和细胞质之间的区域）④细胞壁为鞭毛提供指点，使鞭毛运动。 细胞质膜的生理功能有：①维持渗透压的梯度和溶液的转移。②细胞质膜上有合成细胞壁和形成横膈膜组分的酶，故在膜的外表面合成细胞壁③膜内陷形成的中间体含有细胞色素，参与呼吸作用。④细胞质膜上有琥珀酸脱氢酶、NADH脱氢酶、细胞色素氧化酶、电子传递系统、氧化磷酸化酶及腺苷三磷酸酶。在细胞上进行物质代谢和能量代谢。⑤细胞质膜上有鞭毛基粒，鞭毛由此长出，即为鞭毛提供附着点。 荚膜的主要功能有：①具有荚膜的S-型肺炎链球菌毒性强，有助于肺炎链球菌侵入人体。②荚膜可保护致病菌免受宿主吞噬细胞的吞噬，保护细菌免受干燥的影响。③当缺
微生物实验思考题参考答案及知识要点 一．酵母菌形态观察及死活细胞鉴别 1.吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同对酵母菌死细胞数量有何影响?是分析其原因。 美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变成为无色的还原型。因此,具有还原能力的酵母活细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色,借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。 美蓝浓度高了,代谢不太活跃的活细胞也会被染色,从而使观察到的死细胞较多,活细胞较少；反之，则代谢微弱的细胞也能还原美蓝,不被染色，从而使观察到的死细胞较少，活细胞较多。 二.细菌的简单染色和革兰氏染色 1.革兰氏染色中那一步是关键？为什么？你是如何操作的? 革兰氏染色的关键步骤是:乙醇脱色(是脱色时间）。如果脱色过度,革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阴性菌；如脱色时间过短,革兰氏阴性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阳性菌。脱色时间的长短还受涂片的厚薄，脱色是玻片晃动的快慢及乙醇用量的多少等因素的影响，难以严格规定（脱色是应当控制速度，脱色时间一般为20—30s)。 2. 固定的目的之一是杀死菌体，这与自然死亡的菌体有何不同? 自然死亡的菌体本身已经部分自溶,结构已经改变。固定杀死细菌时细菌结构是保持死亡时的状态的。 ３. 不经复染这一步能否区分革兰氏阳性菌和阴性菌？ 能。在酒精脱色后,不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌（G＋),被酒精脱色为革兰氏阴性菌。最后一步用番红染液复染，是为了让结果更清楚。 4．涂片为什么要固定,固定适应注意什么问题? a 杀死细菌并使菌体黏附与玻片上;b增加其对染料的亲和力。 固定时应注意：手持玻片,菌膜朝上,在微火过3次（手指触摸玻片反面，不烫手为宜),固定时应尽可能维持细胞原有形态,防止细胞膨胀或收缩。 三. 霉菌、放线菌的形态观察 1．镜检时，如何区分基内菌丝与气生菌丝？ 一般气生菌丝颜色较深，直生或分枝丝状,比基内菌丝粗；而基内菌丝色浅、发亮,可看到横
试卷一 一．选择题（每个2分，共20分） 1、组成病毒粒子衣壳的化学物质是（） A、糖类 B、蛋白质 C、核酸 D、脂肪 2、属于细菌细胞特殊结构的为（） A、荚膜 B、细胞壁 C、细胞膜 D、核质体 3、噬菌体属于病毒类别中的（） A、微生物病毒 B、昆虫病毒 C、植物病毒 D、动物病毒 4、半固体培养基中，琼脂使用浓度为（）。 A、0 B、0.3—0.5% C、1.5—2.0% D、5% 6．下述那个时期细菌群体倍增时间最快( ) A 稳定期 B 衰亡期 C 对数期 D 延滞期 7.下面关于连续培养的说法中，叙述不正确的是（） A.恒化连续培养的控制对象是菌体密度 B.恒浊连续培养中微生物菌体以最高生长速率生长 C.恒化连续培养的产物是不同生长速率的菌体 D.恒浊连续培养无生长限制因子 8. 下列叙述中正确的说法是（） A.产生抗逆性强的芽孢是产芽孢细菌在不良环境条件下的一种生殖方式。 B.厌氧的微生物需要较低的氧化还原电位。 C.一种细菌的学名是Staphylococcus aureus,其中aureus属名，Staphyloccus是种名 D.类病毒是有侵染性的蛋白颗粒。 9.下述诱变剂中常引起移码突变的是：（） A 亚硝酸 B 烷化剂 C 碱基类似物 D 丫啶类染料 10.下述那个最可能产生一个重组细胞：（） A F+ x F- B Hfr x F+ C Hfr x F- D F+ x F- 二、写出下列名词解释的中文翻译及作出解释（每个2分，共12分） 1.Gram positive bacteria 2.parasporal crystal 3 ,colony 4, life cycle 5,capsule 6,endospore 三、判断改错题（每个2分，共10分） 1.大肠杆菌和枯草芽孢杆菌属于单细胞生物，唾液链球菌和金黄色葡萄球菌属于多细胞生物（） 2.遗传型相同的个体在不同环境条件下会有不同的表现型。（） 3.低剂量照射紫外线，对微生物几乎没有影响，但以超过某一阈值剂量的紫外线照射，则会导致微生物的基因突变。（） 4. 一切好氧微生物都含有超氧化物歧化酶（SOD ）。（） 5.一般认为各种抗性突变是通过适应而发生的，即由其所处的环境诱发出来的。（） 四.名词解释（每题3 分，共计18 分）
微生物学实验复习题 一、选择题 1、革兰氏染色得关键操作步骤就是: Ａ、结晶紫染色 B、碘液固定 C、酒精脱色 Ｄ、复染 2、放线菌印片染色得关键操作就是： A、印片时不能移动 B、染色 C、染色后不能吸干 D、A与C 3、高氏培养基用来培养： Ａ、细菌 B、真菌 C、放线菌 ４、肉汤培养基用来培养: A、酵母菌 B、霉菌 Ｃ、细菌 ５、无氮培养基用来培养: Ａ、自生固氮菌。 B、硅酸盐细菌 Ｃ、根瘤菌 D、A、Ｂ均可培养 E、Ａ、B、C 均可培养 ６、在使用显微镜油镜时,为了提高分辨力，通常在镜头与盖玻片之间滴加： A、二甲苯 B、水 C、香柏油 7、常用得消毒酒精浓度为： A、 7５％ Ｂ、 5０% C、 90％ 8、用甲醛进行空气熏蒸消毒得用量就是： A、 20ml/M3 B、 6ｍl/M3 C、１ml/M3 9、实验室培养基高压蒸汽灭菌得工艺条件就是： A、 1２１℃／30miｎ B、 115℃／３0mｉn C、130℃／3０min
1０、巴氏消毒得工艺条件就是： Ａ、６2-6３℃／30ｍiｎ Ｂ、71-72℃／15min C、Ａ、Ｂ、均可 1１、半固体培养基得主要用途就是: A、检查细菌得运动性 B、检查细菌得好氧性 C、 A、Ｂ、两项 １2、半固体培养基得琼脂加入量通常就是: A、 1% B、0、5％ C、0、1% 13、使用手提式灭菌锅灭菌得关键操作就是: A、排冷气彻底 Ｂ、保温时间适当 Ｃ、灭菌完后排气不能太快 D、A-C 1４、目镜头上得“K”字母表示: A、广视野目镜 B、惠更斯目镜 Ｃ、补偿目镜 1５、目镜头上得“P”字母表示: A、平场目镜 B、广视野目镜 C、平场补偿目镜 16、物镜头上得“PL”字母表示: A、正低相差物镜 B、正高相差物镜 C、负高相差物镜 17、物镜头上得“UVＦL”字母表示。 Ａ、无荧光物镜 B、照相物镜 Ｃ、相差物镜 18、镜头上标有“TC”字母得镜头就是: Ａ、相差调整望远镜 B、摄影目镜 C、相差目镜 １９、“ＰA”表示: A、马铃薯培养基 B、高氏培养基 C、肉汤培养基 20、无菌室空气灭菌常用方法就是： A、甲醛熏蒸 B、紫外灯照射
1、主动运输与被动运输：营养物质顺浓度梯度，以扩散方式进入细胞的过程称为被动扩散。主要包括简单扩散和促进扩散。两者的主要区别在于前者不借助载体，后者需要借助载体进行。主动运输是指将营养物质逆自身浓度梯度由稀处向浓处移动，并在细胞内富集的过程，分为简单的主动运输和基团转移。 2、协同反馈抑制与合作反馈抑制：协同反馈抑制指分支代谢途径中的几个末端产物同时过量时才能抑制共同途径的第一酶的反馈调节方式。而合作反馈抑制是指两种末端代谢产物同时存在时，可以起到比一种末端产物大得多的抑制作用。包含体与伴孢晶体：包含体是某些感染了病毒的宿主细胞内出现的光学显微镜下可见，形态和数量不等的小体。而伴孢晶体是某些芽孢杆菌在其形成芽孢的同时，在芽孢旁形成的一颗菱形或双锥形的碱溶性的蛋白晶体。两者都能作为生物农药。 3、中间体与线粒体 中间体：细菌细胞质膜内陷形成的一个或数个不规则的层状、管状或囊状物称为中（间） 体，相当于去核细胞内的线粒体、内质网的功能，同时参与细胞壁的合成与核分裂。 线粒体：存在于真核细胞内具有双层膜结构的棒状细胞器，参与三羧酸循环和氧化磷酸化，产生ATP的所具有遗传的独立性。 类病毒与病毒 : 类病毒是当今所知道的最小、只含有RNA一种成分、专性细胞内寄生的分子生物。病毒也是一类超显微的非细胞生物。病毒比前者大，同时含有核酸和蛋白质等，一般不能通过种子传播。 4、好氧与厌氧 答：好氧：大多数微生物需要在有充足的利用氧供应，才能很好的满足生长的需要。 厌氧：微生物在生长过程中不仅不能利用氧，，而且只能在完全无氧的环境下才能生长，，因为氧对它们的生长有害。 5、选择培养基与鉴别培养基 选择性培养基：根据某种或某类微生物的特殊营养要求，或对某些物理、化学条
临床检验试题—微生物检验考试试题及答案(1)——肝炎病毒 一、概念 1.HBsAg 2.HBcAg 3.HBeAg 二、填空题 1．肝炎病毒有、、、和五种类型。 2．肝炎病毒中，由粪-口途径传播的有、；由血液和垂直途径传播的有、、；属于DNA病毒的有；属于缺损病毒的是；已有疫苗可主动免疫的是和；可进行细胞培养的是。 3．HBV的外衣壳由、和蛋白组成，构成HBV的；内衣壳由组成；核心由和组成。 4.甲型肝炎的传染源主要为和，猩猩和猿猴作为传染源的意义不大。 5.甲型肝炎的血清抗体中，表示现症感染的抗体是，而表示既往感染的抗体是。 6.乙型肝炎表面抗原（HbsAg）阳性者血清标本，在电子显微镜下可观察到3种不同 形态结构的颗粒，其传染性也不同，即小球形颗粒和以及。 7.乙型肝炎基因组为双股环壮DNA，内含4个开放读框（ORF），分别称为S 区，C区，和。 8.乙型肝炎病毒感染主要经4种传播途径，即血液传播，日常生活密切接触传播，和。 三、单选题 1.乙型肝炎病毒的核酸类型是 A.单股RNA B.双股RNA C.双股线状DNA
D.双股环状DNA E.单股DNA 2.可致慢性肝炎或肝硬化的病毒为 A. HAV，HBV和HCV B. HBV，HCV和HDV C. HCV，HDV和HEV D. HDV，HEV和HAV E. HEV，HAV和HBV 3.可传播乙型肝炎病毒的途径有 A.分娩和哺乳 B.共用牙刷，剃须刀等 C.输血，血浆及血液制品 D.性接触 E.以上均可 4.不符合血清HBsAg（+）， HbeAg（+）和抗HBc（+）的解释是 A.急性乙型肝炎； B.慢性乙型肝炎； C.乙型肝炎恢复期； D.无症状抗原携带者； E.血清有强传染性。 5.关于HAV，错误的是 A.是单股正链RNA病毒； B.能在体外细胞中培养； C.特异性预防可接种疫苗；
实验一、微生物的简单染色思考题 1油镜与普通物镜在使用方法上有何不同？应特别注意些什么？ 答：油镜在使用时必须在载玻片与物镜之间滴加镜头油。油镜使用过程中要注意两点：（1）、使用后镜头的清洁：镜面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布，以保证光洁度，用完油镜必须进行“三擦”（观察完毕，上悬镜筒，先用擦镜纸擦去镜头上的油，然后再用擦镜纸沾取少量二甲苯（或者乙醇乙醚溶液）擦去残留的油，最后用擦镜纸擦去残留的二甲苯，后将镜体全部复原）。 （2）、.观察标本时，必须依次用低、中、高倍镜，最后用油镜。当目视接目镜时，特别在使用油镜时，切不可使用粗调节器，以免压碎玻片或损伤镜面。 2、使用油镜时，为什么必须用镜头油？ 答：在使用普通显微镜时，当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时，由于空气与玻片的密度不同，使光线受到曲折，发生散射，降低了视野的照明度。若中间的介质是一层油（其折射率与玻片的相近），则几乎不发生折射，增加了视野的进光量，从而使物象更加清晰。 3、镜检标本时，为什么先用低倍镜观察，而不是直接用高倍镜或油镜观察？ 答：低倍镜视野比较大，能看到的范围大，容易找到观察的目标，然后在用放大倍数高的高倍镜或油镜有目的的观察。 实验二、革兰氏染色 （1）为什么必须用培养24 h以内的菌体进行革兰氏染色？ 答：24h以内的菌体处于活跃生长期，菌体细胞壁具有典型特征，而处于老龄的革兰氏阳性细菌壁结构开始发生变化，染色时会被染成红色而造成假阴性 （2）要得到正确的革兰氏染色结果，必须注意哪些操作？哪一步是关键步骤？为什么？答：应注意如下几点： 其一，选用活跃生长期菌种染色，老龄的革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成假阴性； 其二，涂片不宜过厚，以免脱色不完全造成假阳性； 其三，脱色是革兰氏染色是否成功的关键，脱色不够造成假阳性，脱色过度造成假阴性 （3）当你对未知菌进行革兰氏染色时，怎样保证操作正确，结果可靠？ 答：当要确证未知菌的革兰氏反应时，可用已知菌进行混合涂片，使二者染色条件保持一致，如果已知菌的结果与预期相符，则证明操作操作正确，结果可靠。 实验三、微生物的显微镜直接计数法 1、在显微镜下直接测定微生物数量有什么优缺点？ 答：1）优点：直观、快速、操作简单。 2）缺点：
微生物的分类（按大小、结构来分） 非细胞型微生物、原核细胞型微生物、真核细胞型微生物 2、革兰阳性菌与阴性菌的细胞壁有何差异 青霉素++ + 溶菌酶++ + 3、何为细菌L型，它的成因和特点是怎样的 细菌细胞壁的肽聚糖结构受到理化或生物因素的直接破坏或合成被抑制，这种细胞壁受损的细菌在高渗环境下仍可存活者称为细菌细胞壁缺陷型。 特点：高度多形性，大小不一；大多为革兰阴性菌；有一定的致病力。 4、细菌特殊结构有哪些，它们各自的意义如何 荚膜：抗吞噬作用，是病原菌的重要毒力因子；抗杀菌物质损伤，如溶酶体、补体；粘附作用，与致病性有关；形成生物膜 鞭毛：细菌的运动器官；某些细菌鞭毛与致病有关；鞭毛蛋白有抗原性：H抗原 菌毛：普通菌毛粘附结构，性菌毛传递质粒 芽胞：有强大的抵抗力；致病性；芽胞的大小、形状、位置等随菌种而异，有重要的鉴别价值 5、根据细菌对氧气的需求与否可把细菌分为哪几类；专性厌氧菌厌氧的原因 （1）专性需氧菌（2）专性厌氧菌（3）兼性厌氧菌（4）微需氧菌 专性厌氧菌厌氧的原因：缺乏完善的呼吸酶系统，利用氧以外的其他物质作为受氢体 6、细菌个体及群体的繁殖规律 细菌个体的生长繁殖：二分裂繁殖；繁殖速度一般20～30分钟一代 细菌群体的生长繁殖：以培养时间为横坐标，培养物中活菌数的对数为纵坐标，可绘制一条生长曲线。分为四期：迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期 7、生长曲线的分期及各期的应用 生长曲线分为四期：迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期 研究细菌的生物学性状（形态染色、生化反应、药物敏感试验等）选对数期的细菌；细菌的芽胞、外毒素和抗生素等代谢产物大多在稳定期产生 8、IMViC试验是哪几个试验，典型的大肠埃希菌的试验结果是怎样的 I：吲哚试验M：甲基红试验Vi：VP试验C：枸橼酸盐于鉴定肠道杆菌，大肠埃希菌+ + - - 9、热原质的定义及特点 热原质：细菌合成的一种注入人体内引起发热反应的物质。大多数是G-菌的脂多糖。 热原质耐高温，高压蒸汽灭菌不能破坏（121℃，20 min），250℃高温干烤才能破坏。10、消毒、灭菌、防腐、无菌的定义 消毒（disinfection）：杀死物体上或环境中的病原微生物的方法。 灭菌（sterilization）：杀灭物体上所有微生物的方法。 防腐（antisepsis）：防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法。 无菌（asepsis）和无菌操作：无菌是无活菌的意思，多是灭菌的结果。防止细菌进入人体或其它物品的操作技术，称为无菌操作。 11、在同等温度下，湿热灭菌法为何优于干热法 原因：（1）湿热中细菌菌体蛋白较易凝固变性（2）湿热的穿透力比干热大（3）湿热的蒸汽
微生物学问答题 第一章细菌的形态与结构 1.试比较G+和G—菌细胞壁结构的特征和区别？ 答： 2.细菌特殊结构的生理学意义？ 答：（1）荚膜：a,抗吞噬作用，荚膜具有保护细菌抵抗宿主吞噬细胞的吞噬和消化的作用，增强细菌的侵袭力，因而荚膜是病原菌的重要毒力因子。b.黏附作用c.抗有害物质的损伤作用。 （2）鞭毛：有些细菌的鞭毛与致病性有关，如霍乱弧菌鞭毛是其主要致病因素，根据细菌能否运动（有无动力），鞭毛的数量。部位和特异的抗原性，可用于鉴定细菌和进行细菌分类。 （3）菌毛：普通菌毛与细菌的致病性有密切关系，主要是细菌的黏附结构，能与宿主细胞表面的特异性受体结合，如淋球菌。性菌毛在细菌间传递遗传物质，如R质粒。 （4）芽胞：细菌的芽胞对热力干燥，辐射，化学消毒剂等理化因素均有强大的抵抗力。当进行消毒灭菌时，应以芽胞是否将杀死作为判断灭菌效果的指标。根据芽胞大小，位置和数目鉴别细菌。 3.革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌细胞壁结构差异的生物学意义？ 答：（1）与染色有关：G+菌的细胞壁致密、肽聚糖含量高，脂含量低，酒精不容易透入；G-菌的细胞壁疏松、肽聚糖薄，外膜、脂蛋白、脂多糖脂含量极高，酒精容易透入。细胞内结合染液中的结晶紫-碘的复合物容易被酒精溶解而脱色。 （2）与细菌对药物的敏感性有关：主要结构基础是肽聚糖。G+菌的细胞壁对青霉素、溶菌酶敏感，青霉素可抑制肽聚糖四肽侧链与甘氨酸5联桥之间的联结，而干扰肽聚糖的合成；溶菌酶杀菌机理是水解肽聚糖N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸之间的β-1，4糖苷键。G-菌的细胞壁肽聚糖少，有外膜保护，对化学药物有抵抗力，对多种抗生素敏感性低，青霉素作用效果差。 （3）与细菌致病性有关：G-菌的细胞壁含有磷酸脂多糖（LPS），其中的脂类A是其主要毒性成分。 （4）与抗原性有关：G-菌细胞壁磷酸脂多糖（LPS）中的特异性多糖具有抗原性，属于O 抗原，依其可对细菌进行分群、分型。
江南大学微生物实验部分试题库及标准答案 一、名词解释题 1.电子显微镜：电子显微镜是利用电子波波长短,分辨力高的特点以电子流代替光学显微镜的光束使物体放大成象的超显微镜检装置。 2.普通光学显微镜：用自然光或者灯光作光源镜检物体的显微镜。 3.合成培养基：由化学成分已知的营养物质配制而成的培养基。 4.人工培养基：人工配制的供微生物生长繁殖并积累代谢产物的一种营养基质。 5.天然培养基：由化学成分不完全清楚的天然物质如马铃薯,麸皮等配制而成的培养基。 6.半合成培养基：由化学成分已知的化学物质和化学成分不完全清楚的天然物质配制而成的培养基。 7.革兰氏染色法：革兰氏染色是细菌的一种鉴别染色法,细菌首先用结晶紫染色,再用碘液固定,然后用95%的酒精脱色,最后用蕃红复染。凡是菌体初染的结晶紫被酒精脱去了紫色后,又被蕃红复染成红色的细菌称为革兰氏负反应细菌；凡是菌体初染的紫色不能被酒精脱色,也不能被蕃红复染成红色的细菌称为革兰氏正反应细菌。 8.简单染色：用单一染料使微生物细胞染上所用染料颜色的染色方法。 9.稀释平板计数法：将一定量的样品经十倍稀释后,用平板培养最后三个稀释度的样品稀释液。待菌落长出后,计数出某一稀释度的菌落数后再乘以稀释倍数,即为样品中的含菌数。10.显微直接计：利用血球计数板或细菌计数板在显微镜下测计出每小格的微生物细胞数量后,再换算出单位体积中微生物细胞总数的测数方法。 二、选择题 01.革兰氏染色的关键操作步骤是: A.结晶紫染色。 B.碘液固定。 C.酒精脱色。 D.复染。答:(C) 02.放线菌印片染色的关键操作是: A.印片时不能移动。 B.染色。 C.染色后不能吸干。 D.A-C。答:(A)。 03.高氏培养基用来培养: A.细菌。 B.霉菌。 C.放线菌。D酵母菌答:(C)。 04.肉汤培养基用来培养: A.酵母菌。 B.霉菌。 C.细菌。D放线菌答:(C)。 05.无氮培养基用来培养: A.自生固氮菌。 B.硅酸盐细菌。 C.根瘤菌。 D.A,B均可培养。答:(D)。 06.在使用显微镜油镜时,为了提高分辨力,通常在镜头和盖玻片之间滴加: A.二甲苯。 B.水。 C.香柏油。D甲苯答:(C)。 07.常用的消毒酒精浓度为: A.75%。 B.50%。 C.90%。D70% 答:(A)。
问答题 五、问答题：(22分，每题分值如下) 1、革兰氏染色的原理、步骤及注意事项。（6） 答：原理：革兰氏染色是重要的鉴别染色法之一，其原理是G－细菌和G＋细菌细胞壁的成分和结构的不同。通过结晶紫液初染和碘液媒染后，在细菌的细胞膜内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物（CVI dye complex）。G＋细菌（如金黄色葡萄球菌，Staphylococcus aureus，Sa）由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次多和交联致密，故遇脱色剂乙醇（或丙酮）处理时，因失水而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇的处理不会溶出缝隙，因此能把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内，使其保持紫色。反之，G－细菌（如大肠杆菌，Escherichia coli，Ec）因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄和交联度差，遇脱色剂乙醇后，以类脂为主的外膜迅速溶解，这时薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此细胞褪成无色。这时，再经沙黄等红色染料复染，就使G－细菌呈现红色，而G＋细菌则仍保留最初的紫色（实为紫加红色）了。――――（4分） 1min 1min 步骤：细菌涂片+结晶紫染液→冲洗+卢哥氏碘液→冲洗（吸干）+95%乙醇（脱 1min 未脱色（兰紫色）+沙黄（番红）→兰紫色→阳性（G+） 0.5min 色）→冲洗1min 脱色（无色）+沙黄（番红）→红色→阴性（G-） ――――――――――――――――――（1分） 注意事项：（1）95%乙醇（脱色）时间0.5min是最关键步骤； （2）取菌量合适，涂片薄而均匀； （3）菌龄以18h为宜； （4）染色时间：1min，1min，0.5min，1min。―――――――――（1分） 2、单细胞微生物微生物的典型生长曲线分为哪几个时期，各时期有何特点，对微生物发酵生产有何 指导意义。（6） 答：单细胞微生物微生物的典型生长曲线分为四个时期： （1）延滞期：生长速率常数为零，细胞形态变大，rRNA含量增高，合成代谢活跃，对外界不良条件反应敏感。影响延滞期长短的因素：①接种龄：采用对数期“种子”，延滞期较短；而延滞期或衰亡期“种子”,延滞期较长；②接种量：接种量大，延滞期较短；接种量小，延滞期较长；③培养基成分：培养基成分丰富的，延滞期较短；培养基成分与种子培养基一致, 延滞期较短。―――――――――――――――——————（1.5分）（2）指数期：生长速率常数R最大，细胞进行平衡生长，酶系活跃，代谢旺盛。影响指数期代时长短的因素主要有：①菌种：不同菌种的代时差异极大；②营养成分：营养越丰富，代时越短；③营养物浓度：影响微生物的生长速率和总生长量；④培养温度：影响微生物的生长速率。指数期微生物是增殖噬菌体的最适宿主菌龄，是发酵生产中用作“种子”的最佳种龄。————―（1.5分）（3）稳定期：生长速率常数R等于零，即处于新繁殖的细胞数与衰亡的细胞数相等，这时的菌体产量达到了最高点。稳定期到来的原因：①营养物质被消耗不能满足生长需要；②代谢废物或有害物质积累到抑制生长水平；③pH、氧化还原势等物化条件越来越不适宜。稳定期是发酵生产中以菌体为终产品的最佳收获期；某些代谢产物特别是次生代谢产物发生在此阶段，某些细菌的芽孢也发生在此阶段，故又称作代谢产物合成期；导致了连续培养原理的提出和工艺技术的改进。—————（1.5分）（4）衰亡期：生长速率常数R为负值，微生物个体的死亡速度超过新生的速度，整个群体呈现负生长状态。补充营养和能源，以及中和环境毒性，可以减缓死亡期细胞的死亡速率，延长细菌培养物的存活时间。—――――――――――――（1.5分）
微生物问答题 1.含碳有机物分解转化特点 2.纤维素分解微生物有哪些 3.参与淀粉向乙醇转化中的微生物 4.木质素降解微生物主要类型 5.硝化、氨化、反硝化、固氮作用 6.硫化、反硫化作用 7.硫循环与水体黑臭、管道腐蚀的关系 8.自然界磷化氢形成机制 9.水管铁锈形成机制 10.甲基汞的形成机制 11.污水微生物处理的形式 12.活性污泥的微生物群体组成，菌胶团细菌优势类型 13.活性污泥对有机物处理的3个步骤 14.活性污泥中原生动物和后生动物在污水处理中的作用 15.好氧生物膜中的微生物群落类型及其功能 16.好氧生物膜对有机物的净化过程 17.有机物厌氧降解为甲烷的三价段四类群理论 18.污水生物脱氮及其类型 19.聚磷菌特性及污水生物除磷过程机制 1、含碳有机物分解转化特点 答：微生物对含碳有机物的分解转化特点 1）纤维素、淀粉、脂肪等：易降解；分解微生物类型多样，自然界广泛存在；分解速率快，循环速率快 2）木质素：较难降解；分解微生物类型以真菌为主；分解速率较慢，循环速率慢 3）石油烃、芳香烃：难降解；分解微生物种类单一，需特别驯化；分解速率很慢，循环速率非常慢 2、纤维素分解微生物有哪些 答:1)细菌: A、好氧纤维素分解菌中，黏细菌最多，有生孢食纤维菌、食纤维菌及堆囊黏菌。革兰氏阴性菌，生孢食纤维菌中的球形生孢食纤维菌和椭圆形生孢食纤维菌较常见; B、镰状纤维菌和纤维弧菌。; C、厌氧的有产纤维二糖芽孢梭菌(Clostridium cellobioparum)、无芽孢厌氧分解菌及嗜热纤维芽孢梭菌(Clostridium thermocellum)，是专性厌氧菌。 2）真菌：青霉菌、曲霉、镰刀霉、木霉及毛霉。 3）放线菌：链霉菌属(Streptomyces)。 3、参与淀粉向乙醇转化中的微生物 答：根霉和曲霉是糖化菌，先转化为葡萄糖，接着由酵母菌将葡萄糖发酵为乙醇和二氧化碳。 4、木质素降解微生物主要类型 答：分解木质素的微生物主要是：
食品微生物学技术思考题答案1.如何区别高倍镜和油镜 答：（1）油镜更接近标本片（2）油镜与标本间的介质是香柏油（3）油镜刻有“oil”或“Hi”字样，也刻有一圈红线或黑线为标记。 2．为什么在使用高倍镜及油镜是应特别注意避免粗调节器的错误操作答：使用高倍镜及油镜时镜头距离标片很近，而粗调节器的调节幅度较大，粗调节器的错误操作会使镜头大幅度向标本移动，很容易损坏标本和镜头。一般先用低倍镜找到物象后换到高倍镜，就只需要用细调节器了。 3.用油镜观察时应注意哪些问题在载破片和镜头之间加滴什么油起什么作用 答：（1）应该先用擦镜纸将镜头擦干净，以防止上次实验的污染，操作时，先低倍再高倍，用完要擦掉油。（2）在转换油镜时，从侧面水平注视镜头注视镜头与玻片的距离。使镜头浸入油中而不以压破载玻片为宜。（3）从目镜内观察，把孔径光阑开到最大，使其明亮。然后用微调将镜台下降，直至视野内物象清晰。如油镜已离开油面仍未见物象，需重复操作。加的是香柏油。作用是增加折光率，增加显微镜的分辨率。 4.在调节焦距时，往往出现一些疑似观察标本的物象点，物象点可能是目镜或物镜上的杂质，也可能是标本片上的观察对象，如何通过操作判断这些物象点是否在标片上 答：移动标本片，看物象点是否移动，如果不移动，则不在标本片上。 5．如果涂片未经热固定或固定温度过高、时间过长，会出现什么现象答：固定时间是杀死菌体，使菌体蛋白质凝固黏附于载玻片上，增加菌体对染色剂的结合力，易于着色。但是如果没固定，不容易着色，且容易被清水冲走。
温度过高会使细胞收缩变形，时间过长会导致菌体变形或形态破坏，难以着色，从而导致难以着色。 6.为什么要培养18-24h的细菌菌体进行革兰氏染色 答:此时菌体进入比较活泼的繁殖生长期，细胞壁比较好着色。若菌龄太老，由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应，关键在于细胞壁的通透性的改变。如果菌龄过老，不便于显微镜下观察时阴性还是阳性菌。 7．如何操作才能保证革兰氏染色结果正确，其中的关键环节是什么答：具体操作步骤为（1）涂片，与简单染色法相同，要求薄而均匀。（2）干燥、固定，在空气中自然晾干，或将涂面朝上，在酒精灯微小火焰上干燥；在酒精灯火焰上通过3-4次，温度不宜过高。（3）染色，用结晶紫进行初染1min,然后水洗。用碘液进行媒染，用碘液覆盖染色部位1min,水洗。在涂有细菌的部位连续滴加95%乙醇，约30s，水洗脱色。用番红溶液复染1min,水洗。（4）干燥，自然干燥或用吸水纸吸干，也可以用电吹风吹干。（5）镜检。 关键环节是酒精脱色。 8．为何常用插片法培养放线菌观察个体形态 答：放线菌的营养菌丝生长在培养基表面或插入培养基里面，不易被接种针挑取制片。采用插片法可观察到放线菌自然生长状态下的特征，而且便于观察不同生长时期的形态。 9.在显微镜下，如何区分基内菌丝和气生菌丝 答：一般气生菌丝颜色较深，直生或分枝丝状，比基内菌丝粗；而基内菌丝色浅、发亮，可看到隔膜，继而断裂成球状或杆状小体。 10.放线菌与细菌的菌落最显着的差异是什么
微生物根据大小、结构、化学组成分为哪3大类微生物？各大类微生物有何特点？包裹哪些种类的微生物？ 1.原核细胞型微生物：仅仅只有原始的核质，无核膜、核仁，缺乏完整的细菌器，只有核糖体，和同时存在。它包括细菌、放线菌、支原体、衣原体、立克次体和螺旋体。 2.真核细胞型微生物：细胞核的分化程度高，有核膜和核仁，胞质内细胞器完整。如真菌属于此类。 3.非细胞型微生物：是最小的一类微生物，结构简单，只有一种核酸（或）存在。缺乏完整的酶系统，必须要在活细胞内增殖。如病毒属于此类。 菌与G－菌细胞壁的异同点？ 肽聚糖组成由聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥构成坚韧三维立体结构由聚糖骨架、四肽侧链构成疏松二维平面网络结构 细胞壁强度较坚韧较疏松 细胞壁厚度 20～80 10～15 肽聚糖层数多，可达50层少，1～2层 脂类含量少，1%～4% 多，11%～22% 磷壁酸有无 外膜无有 细胞壁共同的主要功能 （1）维持形态、抵抗低渗作用，保持菌体完整 （2）屏障作用
（3）物质交换作用 （4）抗原性 （5）致病作用 （6）细胞分裂中的作用 细菌的特殊结构有哪些？有何功能及意义？ 1.荚膜功能：①抗吞噬②抗有害物质损伤③抗干燥。 2.鞭毛功能：是细菌的运动器官。 3.菌毛功能：①普通菌毛：与细菌粘附有关。②性菌毛：具有传递遗传物质作用。 4.芽胞功能：芽胞对理化因素（热、干燥、辐射、化学消毒剂等）具有高强度的抵抗力。此外，当芽胞成为繁殖体后，能迅速大量繁殖而致病。 细菌的生长繁殖分为几个时期，每个时期的特点是什么，有什么意义？ 细菌群体的生长繁殖：迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期 特点 生长时期迟缓期对数期稳定期衰亡期 维持时间 1-4h 4-8h 10h 活菌数量恒定，增加很少对数增长维持平衡逐步减少 生长速率零最大速率速率降低死亡速率增加 细胞代谢非常活跃活性高而稳定活性稳定活性降低衰老 意义