Razavi Int J Med. 2013 November; 1(1): 5-10. Published online 2013 November 20.
Review Article
Role of microRNA in Mesenchymal Stem Cells Differentiation Into Osteoblasts
Aamina Shah 1
, Aftab Ahmad
2,*
1Institute of Biochemistry and Biotechnology, University of the Punjab, Lahore, Pakistan
2School of Biological Sciences, University of the Punjab, Quaid iAzam Campus, Lahore, Pakistan
*Corresponding author : Aftab Ahmad, School of Biological Sciences, University of Punjab, Lahore, Pakistan. Postal Code: 54590. Tel: +92-3007402202, Fax: +92-4299230960, E-mail: aftabac@https://www.doczj.com/doc/3c17007890.html,.
Received: September 16, 2013; Revised: October 21, 2013; Accepted:
November 3, 2013
Implication for health policy/practice/research/medical education:
MiRNAs, based on the type and function, is claimed to playvarious roles in osteogenesis. Some of the miRNA behave as positive ones while others act as negative regulators during osteoblast differentiation. Understanding the mechanism of action of various miRNAs is beneficial in the perception of various bone diseases and thus development of their treatments. Treatments through miRNAs can prove beneficial due to its small size, easy synthesis, targeted and quick delivery. Further work is needed to be done to make miRNA treatments available to large number of people suffering from various bone diseases.
Copyright ? 2013, Razavi Hospital; Published by Kowsar Corp. This is an open-access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution Li-cense, which permits unrestricted use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original work is properly cited.
Expression of gene networks are essential in regulat-ing several cellular functions that are controlled by the coordinate act of transcription factors (TFs), RNA binding proteins and microRNAs (miRNAs) (1). RNA transcripts of genome acquires stem, loop and bulge structure, most of which behave as primary miRNA which is cut by Drosha to form pre-miRNA. Exportin-5 transfers pre-miRNA to cy-toplasm (2, 3) where Dicer cuts it to create double strand-ed RNA (dsRNA) which is 21 - 25 mer nucleotide long and behave as miRNA by forming the RNA induced silencing complex along with the Argonaute protein (4). To some extent, miRNAs can then hybridize to mRNAs and inhibit mRNA translation (5) and promote mRNA degradation (6, 7). miRNA s are short non-coding RNA s, which are made up of ~21-nucleotides that regulate transcript local-ization, polyadenylation, and translation. MiRNAs act as negative regulators of gene expression directly by bind-ing specific sequences within a target mRNA (8, 9).
In a complex functional network, miRNA acts in such a manner that the expression of one coding gene can be supervised by various miRNAs, with each miRNA possibly controlling hundreds of distinguished genes (10, 11). The role of miRNA is even evident in the regulation of numer-ous physiological functions like differentiation of stem
cells, neurogenesis, hematopoiesis, immune response, development of cardiac and skeletal muscles, stress, etc. (12-18).
Mesenchymal Stem Cells (MSCs) known as multi-potent stromal cells isolated from various adult tissue sources have the ability to renew themselves and differentiate into multiple cell lineages (19-21). Stem cells have distinct miRNA expression profiles that can affect the intrinsic properties of self-renewal and pluripotency of stem cell (22-24).
2. Remodeling of Bone
During bone remodeling, the balance between the number and activities of osteoblasts and osteoclasts is of great significance (Figure 1). Osteoclasts have the func-tion of bone resorption whereas osteoblasts synthesize new bones. When remodeling occurs, cytokines are re-leased, which aid in recruiting the osteoclasts on the sur-face of bones. Osteoclast forms a ruffled boarder which contributes to their attachment to the surface of bone. In the cavity between the osteoclasts and the bone osteo-clast’s proton pump creates an acidic environment by re-leasing ions in the micro environment; thus, it dissolves the mineralized component of the bone matrix. The ma-trix gets exposed and degraded by cathepsin K ( 25 ). The
DOI: 10.5812/rijm.14849
reversal phase of bone remodeling is when mononuclear cells transmit signal for adjustments in bone to recruit new osteoblasts. In the beginning, osteoblasts increase rapidly to release an extracellular matrix in which type I collagen is present. Along with osteoblast differentiation, the maturation and mineralization of matrix occurs. When the bone surface is restored, mature osteoblasts may undergo programmed cell death or divide to form bone surface lining cells or may even differentiate to os-teocytes, present in calcified matrix and are responsive to mechanical stresses (26). Osteoclasts are derived from the monocyte/ macrophage lineage (25), whereas osteo-blasts are derived from MSCs which can also differentiate into adipocytes, chondrocytes, or myocytes, depending on the activation or inhibition of specific signaling path-ways (27). These signaling molecules include bone mor-phogenetic proteins (BMPs), transforming growth factor (TGF)-β, WNT, Hedgehog, parathyroid hormone, insulin-like growth factor-1, fibroblast growth factors and Notch.
F igure 1. Bone remodeling. Haematopoietic Stem Cell-Derived Osteo-clasts and Mesenchymal Stem Cell (MSC)-Derived Osteoblasts Participate in Couple and Sequential Process of Bone Remodeling.
MSCs can be isolated from bone marrow, cord blood, pe-ripheral blood, fallopian tube, fetal liver and lung. MSCs derived from bone marrow have the potential to prolifer-ate and get differentiated into osteoblasts, chondrocytes, adipocytes, cartilage, tendons, muscle and skin. Differ-entiation of MSCs into osteoblasts is very significant for bone remodeling. The differential expression of miRNAs has a major influence on the maintenance of differentia-tion of osteoblasts (28-30).
3. Effect of miRNA on Various Aspects of Bone Biology
3.1. Role of miRNA in Angiogenesis
Angiogenesis is a mechanism whereby regenerates and repair bones. At the time of injury, newly-formed blood vessels brings oxygen, nutrients, inflammatory cells, cartilage and bone to regenerating callus. Inflamma-tory cells and stromal cells produce VEGF to maintain angiogenesis. Several miRNA plays a role in angiogenesis like MiR-126, which promotes pro-angiogenesis of VEGFs and FGF by suppressing an intracellular inhibitor of an-giogenic signaling known as Sprouty-related protein 1 (Spred-1) (31). In vivo developmental angiogenesis can be maintained by endothelial cell-restricted miR-126 (32). miR-210 is associated with angiogenesis in patients suf-fering from osteonecrosis (ON) of the femoral head (33).
3.2. Rloe of miRNA in Osteosarcoma
Osteosarcoma (OS) is a malignant bone tumor that develops during adolescence. miRNA plays a role in the down-regulation of Fas expression, in OS expression of miR-20a and miR-19 is relatively more in metastatic low-Fas-expressing LM7 cells than in the parental non meta-static high-Fas-expressing SA OS-2 cells (34). miR-125b is regulated by signal transducer and activator of tran-scription 3 (STAT3), which binds in vitro to the promot-er region of miR-125b thus acts as a transactivator (35). BMP2 targets MiR-34c which induces changes on Notch1, Notch2 and Jag1. miR-34 and notch signaling could be used in therapies in various bone cancers (36). Down-Regulation of miR-183 promotes migration and invasion of OS by Targeting ezrin (37).
3.3. Role of miRNAs in Arthritis
Arthritis is a musculoskeletal state in which various mi-croRNAs plays an important role. MiR-146a inhibits osteo-clastogenesis and when administrated, it prevents from the destruction of joint in mice suffering from collagen-induced arthritis (CIA) by down regulating the expres-sion of c-Jun (transcription factor), Receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand (NF-A Tc1), PU.1 (tran-scription factor), and tartrate-resistant acid phosphatise (TRA P) (38). MiR-223 is up- regulated in rheumatoid ar-thritis (RA) and lentivirus-mediated silencing of miR-223 reduces the severity of arthritis in mice (39). miR-140 is reduced in osteoarthritic chondrocytes, its knockdown promotes arthritis in mice. microRNAs should be critical factors for cartilage development and homeostasis (40). miR-221/222 and miR-323-3p are linked to rheumatoid arthritis when predicted using the human TNF in trans-genic mouse model (41). Dysregulation of 17 miRNAs con-tribute to RA pathogenesis (42).
3.4. Role of miRNA in Osteoporosis
In Osteoporosis, bone strenght is severely affected due to which patients have higher risk of fractures. Neuro-nal and microRNA-dependent pathways are used for the treatment of osteoporosis (43). Various positive and negative regulator miRNA of bone remodeling can be used for therapeutic purposes of osteoporosis like miR-29 family (44), miR-138 (45), etc. miR-133a in circulating monocytes is a potential biomarker for postmenopausal osteoporosis (46). MiR-34c regulates Notch1, Notch2, and Jag1 in osteoblasts to control the differentiation of osteo-clasts, presumably through cell/cell contact (35). miR-214 is elevated in patients with fractures due to low bone for-
Razavi Int J Med. 2013;1(1)
6
7
Razavi Int J Med. 2013;1(1)
mation rate. The inhibitory role of miR-214 in bone for-mation has been revealed in transgenic mice. Both the activity of osteoblast as well as mineralization of matrix promoted by antagomir-214 and deceased by agomir-214, and miR-214 inhibits osteoblast differentiation by affect-ing ATF4. Therefore, if miR-214 is inhibited in osteoblasts, this strategy can be used for treatment against osteopo-
rosis (47).
miR-126Increase of angiogenesis (32)4. miRNAs as Regulators of Osteoblast Differentiation
4.1. miRNAs as Negative Regulators
Several miRNA s regulates bone remodeling by acting as negative regulators of osteoblast differentiation. miR-206 connexin 43 (Cx43) is one of the gap junction protein found in osteoblasts and its negatively regulated if miR-206 is overexpressed (30). miR-378 inhibits osteoblast dif-ferentiation by reducing the expression of nephronectin (NN, an extracellular matrix protein) (48). Osteoblast dif-ferentiation is also inhibited by miR-138 that targets FAK (Focal Adhesion Kinase) translation, consequently reduc-ing phosphorylation of FAK. Its target ERK1/2 proteins re-sults in decreased phosphorylation of Runx2 and Osterix expression 45.
4.2. Effect of miRN A on Runx2 in N egative Osteo-genesis
Runx2 is a bone specific transcription factor that regu-lates several genes and is required for the expression of several osteoblast differentiation genes such as type I collagen, osteocalcin (49). Runx2 gene expression is in-hibited by miR-204 and miR-211, which behaves as nega-tive regulators for the differentiation of osteoblasts and mineralization in mesenchymal progenitor cells and bone marrow stromal cell (BMSCs) (50). Various other
miRNA s like miR-23a, miR-30c, miR-34c, miR-133a, miR-135a, miR-137, miR-204, miR-205, miR-217, and miR-338 also target and decrease the expression of Runx2 lead-ing to the inhibition of osteoblast differentiation (51, 52). miR-355 also targets Runx2 mRNA and when miR-335 is overexpressed in hMSCs, it inhibits proliferation, migra-tion as well as osteogenic and adipogenic potential (53). MSCs differentiation into osteoblasts can be inhibited by miRNA s such as hsa-miR-31, hsa-miR-106a, hsa-miR-148a, and hsa-miR-424 and their target genes are Runx2, Cbfb and BMPs. miR-133 and miR- 135 inhibit the differentia-tion of osteoprogenitors by acting on Runx2 and Smad5 pathways (54). miR-26a also inhibits osteoblast differen-tiation by targeting Smad1 in human adipose tissue de-rived stem cells (55). Smad proteins are intracellular sig-naling components for TGF-β/ BMP signaling and BMP-2 via Smads activates osteoblast essential genes (56). TRPS1 is a chondrogenic GA TA transcription factor controlled by miRNA s (51, 52, 54). Due to mutation in Runx2 gene, dominantly inherited skeletal malformation cleidocra-nial dysplasia (CCD) occur. Mutations in the human Trps1 gene causesTricho-Rhino-Phalangeal syndrome types I and III (57-59). Ten Runx2-targeting miRNAs blocks MC3T3 osteoblast differentiation (52). Seven of these also targets TRPS1 and miR-30c is such a TRPS1/RUNX2-targeting miR-NA. TRPS1 inhibits the transcriptional activity of RUNX2 along with Runx2 promoter (58). The genetic interactions and biological correlations between RUNX2 and TRPS1 are remarkable, since they have common miRNA s that regulate their expression, which block their osteochon-drogenic functions, the activities of RUNX2 and TRPS1 leading to a common function linked to early stages of differentiation in skeletal cells (60).
Treatment of osteoblastic or chondrocytic cells with a representative TRPS1/RUNX2-targeting miRNA (miR-30c) results in opposite and coordinate effects on the expres-sion of a number of genes encoding components of sig-naling pathways (e.g. responding to TGF-β/BMP2, IGF1 or FGF2) that control bone or cartilage development (61-63). miR-30 also up-regulates TGF-β signaling components while osteoblast differentiation and the resulting sensiti-zation of TGF-β/SMAD3 signaling synergize with miR-30c to repress RUNX2 and the expression of osteoblast spe-cific ECM proteins (60).
PTK2 encodes FAK protein, which is the activator of ERK1 and ERK2 during osteoblast differentiation of hMSCs, miR-138 binds to 3′UTR of PTK2 and acts as negative regu-lator of hMSCs by maintaining its undifferentiated state (64, 65). The overexpression of miR-138 diminishes FA K at the protein level, whereas the inhibition of miR-138 by antimiR-138 causes the depression of FAK, which is regu-lated by miR-138 during osteoblast differentiation (66).
4.3. miRNA as Positive Regulators
Certain miRNAs act as positive regulators of osteogenic
differentiation like miR-29b down-regulates inhibitors of osteoblast differentiation such as HDAC4, TGF3, ACVR2A, CTNNBIP1, and DUSP2; thus, it promotes osteogenesis (67, 68). Increased levels of let-7, miR-24, miR-125b, and miR-138 repress the expression of non osteogenic target mRNAs involved in PDGF pathway, so these miRNAs up-regulates osteogenic differentiation (69). miR-218 acts as positive regulators during the differentiation of os-teoblasts to the final stage of forming mineralized tis-sue by inhibiting ERB1 (TOB1) and sclerostin (SOST) (70). When the same miRNA polycistron causes transcription of miR-3960 and miR-2861, they act on Runx2/miR-3960/ miR-2861 regulation feedback mechanism and help in os-teoblast differentiation (71). miR-26a/b and miR-29b both behave as positive regulators of osteogenic differentia-tion in unique stem cell type (USSC) by acting on CDK6 and HDAC4 which are osteoinhibitory proteins (72). 4.4. Effect of miRNA on Runx2 in Positive Osteogen-esis
During positive osteogenesis, RUNX2 is influenced by miRNAs like the expression of miR-20a increasing during the osteogenic differentiation and it stimulates the osteo-genesis of hMSCs. BMPs and Runx2 are important factors in the osteogenesis of MSCs (8, 73). miR-20a suppresses PPARγ, which is a very important factor for the differen-tiation of osteoblasts and also is essential for maintain-ing homeostasis of bones (74, 75). PPARγ is the antagonist of BMP and RUNX2 especially when the activated inhibits RUNX2 transcription (76) and down regulates the expres-sion of BMP (77). Due to lowered action of BMP and RUNX2 (77), the phenotypic expression of osteoblast is repressed by PPARγ. Antagonists of the BMP signaling pathway are generally categorized at three levels: extracellular (Nog-gin, Gremlin, Chordin), cell surface (Bambi and Crim1) and intracellular inhibitory (Smads 6 and 7) (78) .Bind-ing sites miR20a are also present in 3'-UTR of Bambi and Crim1. Bambi is negatively activated on by miR-20a and more BMP molecules bind to their receptors, thus, the RUNX2 expression is increased, whereas the role of Crim1 on BMPs after binding them is to reduce their secretion as mature active proteins and processing of pre-protein to mature BMP; hence, it causes the binding of pre-proteins to cell surface (73, 79) and suppression of Crim1 occuring after the transfection of miR-20a. therefore, there is an increase of free, mature and active BMP that activate BMP signaling, thus enhancing the osteogenesis of MSCs (73).
4.5. OstemiR and MSCs Differentiation Into Bone
OstemiR includes miR-30 family, let-7 family, miR-21, miR-16, miR-155, miR-322 and Snord85, whose expression alters during osteogenic differentiation. They play a role in stem-ness, epinegetics, and cell cycle-related mRNAs (80). Different miRNA have different roles in osteogenesis. Some of the miRNA behave as positive regulators; while others act as negative regulators during osteoblast dif-ferentiation. Understanding the role of various miRNAs is beneficial in understanding the various bone diseases and thus the development of their treatments. Treat-ments through miRNAs can be beneficial, due to its small size, easy synthesis, targeted and quick delivery. Further work needed to be done to make miRNA treatment avail-able to large number of people suffering from various bone diseases. Acknowledgements
There are no any specific acknowledgements. Authors’ Contribution
The Manuscript was prepared by A amina Shah under the supervision of Aftab Ahmad.
Financial Disclosure
There is not any financial disclosure for this study. Funding Support
There was no funding/support for present study. References
1. Keene JD. RNA regulons: coordination of post-transcriptional
events. Nat Rev Genet. 2007;8(7):533–43.
2. Grimm D, Streetz KL, Jopling CL, Storm TA, Pandey K, Davis CR, et
al. Fatality in mice due to oversaturation of cellular microRNA/
short hairpin RNA pathways. Nature. 2006;441(7092):537–41.
3. Winter J, Jung S, Keller S, Gregory RI, Diederichs S. Many roads to
maturity: microRNA biogenesis pathways and their regulation.
Nat Cell Biol. 2009;11(3):228–34.
4. Siomi H, Siomi MC. RISC hitches onto endosome trafficking. Nat
Cell Biol. 2009;11(9):1049–51.
5. Olsen PH, A mbros V. The lin-4 regulatory RNA controls devel-
opmental timing in Caenorhabditis elegans by blocking LIN-14
protein synthesis after the initiation of translation. Dev Biol.
1999;216(2):671–80.
6. Hutvagner G, Zamore PD. A microRNA in a multiple-turnover
RNAi enzyme complex. Science. 2002;297(5589):2056–60.
7. Llave C, Xie Z, Kasschau KD, Carrington JC. Cleavage of Scarecrow-
like mRNA targets directed by a class of Arabidopsis miRNA. Sci-
ence. 2002;297(5589):2053–6.
8. mbros V. The functions of animal microRN s. Nature.
2004;431(7006):350–5.
9. Bartel DP. MicroRNA s: genomics, biogenesis, mechanism, and
function. Cell. 2004;116(2):281–97.
10. Lewis BP, Burge CB, Bartel DP. Conserved seed pairing, often
flanked by adenosines, indicates that thousands of human
genes are microRNA targets. Cell. 2005;120(1):15–20.
11. Miranda KC, Huynh T, Tay Y, A ng YS, Tam WL, Thomson A M, et
al. A pattern-based method for the identification of MicroRNA
binding sites and their corresponding heteroduplexes. Cell.
2006;126(6):1203–17.
12. Krichevsky AM, Sonntag KC, Isacson O, Kosik KS. Specific microR-
NAs modulate embryonic stem cell-derived neurogenesis. Stem
Cells. 2006;24(4):857–64.
13. Chen JF, Mandel EM, Thomson JM, Wu Q, Callis TE, Hammond SM,
et al. The role of microRNA-1 and microRNA-133 in skeletal muscle
proliferation and differentiation. Nat Genet. 2006;38(2):228–33.
14. Zhao Y, Samal E, Srivastava D. Serum response factor regulates a
muscle-specific microRNA that targets Hand2 during cardiogen-
Razavi Int J Med. 2013;1(1)
8
esis. Nature. 2005;436(7048):214–20.
15. Pedersen IM, Cheng G, Wieland S, Volinia S, Croce CM, Chisari FV,
et al. Interferon modulation of cellular microRNAs as an antivi-
ral mechanism. Nature. 2007;449(7164):919–22.
16. Kloosterman WP, Lagendijk AK, Ketting RF, Moulton JD, Plasterk
RH. Targeted inhibition of miRNA maturation with morpholinos
reveals a role for miR-375 in pancreatic islet development. PLoS Biol. 2007;5(8).
17. Tay YM, Tam WL, Ang YS, Gaughwin PM, Yang H, Wang W, et al. Mi-
croRNA-134 modulates the differentiation of mouse embryonic stem cells, where it causes post-transcriptional attenuation of Nanog and LRH1. Stem Cells. 2008;26(1):17–29.
18. Felli N, Fontana L, Pelosi E, Botta R, Bonci D, Facchiano F, et al.
MicroRNAs 221 and 222 inhibit normal erythropoiesis and eryth-
roleukemic cell growth via kit receptor down-modulation. Proc Natl Acad Sci U S A. 2005;102(50):18081–6.
19. Prockop DJ. Marrow stromal cells as stem cells for nonhemato-
poietic tissues. Science. 1997;276(5309):71–4.
20. Petersen BE, Bowen WC, Patrene KD, Mars WM, Sullivan AK, Mu-
rase N, et al. Bone marrow as a potential source of hepatic oval cells. Science. 1999;284(5417):1168–70.
21. Caplan AI. Why are MSCs therapeutic? New data: new insight. J
Pathol. 2009;217(2):318–24.
22. Zhang B, Pan X, A nderson TA. MicroRNA: a new player in stem
cells. J Cell Physiol. 2006;209(2):266–9.
23. Stadler BM, Ruohola-Baker H. Small RNAs: keeping stem cells in
line. Cell. 2008;132(4):563–6.
24. Singh SK, Kagalwala MN, Parker-Thornburg J, Adams H, Majum-
der S. REST maintains self-renewal and pluripotency of embry-
onic stem cells. Nature. 2008;453(7192):223–7.
25. Ross PJ, Beyhan Z, Iager AE, Yoon SY, Malcuit C, Schellander K, et
al. Parthenogenetic activation of bovine oocytes using bovine and murine phospholipase C zeta. BMC Dev Biol. 2008;8:16.
26. Bonewald LO. In Primer on the Metabolic Bone Diseases and Disor-
ders of Mineral Metabolism. 7 ed. Rosen CJ, Compston JE, Lian JB editors. Washington, DC: American Society of Bone and Mineral Research; 2008.
27. Krause C, de Gorter DJJ, Karperien M, ten Dijke P. Signal transduc-
tion cascades controlling osteoblast diff erentiation. In: Rosen
CJ, Compston JE, Lian JB editors. In Primer on the Metabolic Bone Diseases and Disorders of Mineral Metabolism. 7 ed. Washington,
DC: A merican Society of Bone and Mineral Research; 2008. p.
10–16.
28. Abdallah BM, Kassem M. Human mesenchymal stem cells: from
basic biology to clinical applications. Gene Ther. 2008;15(2):109–16.
29. Bianco P, Riminucci M, Gronthos S, Robey PG. Bone marrow stro-
mal stem cells: nature, biology, and potential applications. Stem Cells. 2001;19(3):180–92.
30. Inose H, Ochi H, Kimura A, Fujita K, Xu R, Sato S, et al. A microRNA
regulatory mechanism of osteoblast differentiation. Proc N atl Acad Sci U S A. 2009;106(49):20794–9.
31. Fish JE, Santoro MM, Morton SU, Yu S, Yeh RF, Wythe JD, et al. miR-
126 regulates angiogenic signaling and vascular integrity. Dev Cell. 2008;15(2):272–84.
32. Wang S, Aurora AB, Johnson BA, Qi X, McAnally J, Hill JA, et al. The
endothelial-specific microRNA miR-126 governs vascular integ-
rity and angiogenesis. Dev Cell. 2008;15(2):261–71.
33. Yamasaki K, Nakasa T, Miyaki S, Yamasaki T, Yasunaga Y, Ochi M.
Angiogenic microRNA-210 is present in cells surrounding osteo-
necrosis. J Orthop Res. 2012;30(8):1263–70.
34. Huang G, Nishimoto K, Zhou Z, Hughes D, Kleinerman ES. miR-
20a encoded by the miR-17-92 cluster increases the metastatic
potential of osteosarcoma cells by regulating Fas expression.
Cancer Res. 2012;72(4):908–16.
35. Liu LH, Li H, Li JP, Zhong H, Zhang HC, Chen J, et al. miR-125b sup-
presses the proliferation and migration of osteosarcoma cells through down-regulation of STAT3. Biochem Biophys Res Commun.
2011;416(1-2):31–8.
36. Bae Y, Yang T, Zeng HC, Campeau PM, Chen Y, Bertin T, et al. miR-
NA-34c regulates Notch signaling during bone development.
Hum Mol Genet. 2012;21(13):2991–3000.
37. Zhu J, Feng Y, Ke Z, Yang Z, Zhou J, Huang X, et al. Down-regulation
of miR-183 promotes migration and invasion of osteosarcoma by
targeting Ezrin. Am J Pathol. 2012;180(6):2440–51.
38. Nakasa T, Shibuya H, Nagata Y, Niimoto T, Ochi M. The inhibitory
effect of microRNA-146a expression on bone destruction in colla-
gen-induced arthritis. Arthritis Rheum. 2011;63(6):1582–90. 39. Li YT, Chen SY, Wang CR, Liu MF, Lin CC, Jou IM, et al. Brief re-
port: amelioration of collagen-induced arthritis in mice by lentivirus-mediated silencing of microRNA-223. Arthritis Rheum.
2012;64(10):3240–5.
40. A sahara H. [miRNA s in cartilage development]. Clin Calcium.
2012;22(5):653–7.
41. Pandis I, Ospelt C, Karagianni N, Denis MC, Reczko M, Camps C,
et al. Identification of microRNA-221/222 and microRNA-323-3p association with rheumatoid arthritis via predictions using the
human tumour necrosis factor transgenic mouse model. Ann Rheum Dis. 2012;71(10):1716–23.
42. Xu T, Huang C, Chen Z, Li J. MicroRNA-323-3p: a new biomarker
and potential therapeutic target for rheumatoid arthritis. Rheu-
matol Int. 2013.
43. Takeda S. [Novel regulatory mechanism of bone metabolism].
Nihon Rinsho. 2011;69(7):1209–14.
44. Kapinas K, Delany A M. MicroRNA biogenesis and regulation of
bone remodeling. Arthritis Res Ther. 2011;13(3):220.
45. Eskildsen T, Taipaleenmaki H, Stenvang J, Abdallah BM, Ditzel N,
Nossent AY, et al. MicroRNA-138 regulates osteogenic differentia-
tion of human stromal (mesenchymal) stem cells in vivo. Proc Natl Acad Sci U S A. 2011;108(15):6139–44.
46. Wang Y, Li L, Moore BT, Peng XH, Fang X, Lappe JM, et al. MiR-133a
in human circulating monocytes: a potential biomarker associ-
ated with postmenopausal osteoporosis. PLoS One. 2012;7(4). 47. Wang X, Guo B, Li Q, Peng J, Yang Z, Wang A, et al. miR-214 targets
ATF4 to inhibit bone formation. Nat Med. 2013;19(1):93–100. 48. Kahai S, Lee SC, Lee DY, Yang J, Li M, Wang CH, et al. MicroRNA miR-
378 regulates nephronectin expression modulating osteoblast differentiation by targeting GalNT-7. PLoS One. 2009;4(10). 49. Selvamurugan N, Jefcoat SC, Kwok S, Kowalewski R, Tamasi JA,
Partridge NC. Overexpression of Runx2 directed by the matrix metalloproteinase-13 promoter containing the A P-1 and Runx/
RD/Cbfa sites alters bone remodeling in vivo. J Cell Biochem.
2006;99(2):545–57.
50. Huang J, Zhao L, Xing L, Chen D. MicroRNA-204 regulates Runx2
protein expression and mesenchymal progenitor cell differen-
tiation. Stem Cells. 2010;28(2):357–64.
51. Hassan MQ, Gordon JA, Beloti MM, Croce CM, van Wijnen A J,
Stein JL, et al. A network connecting Runx2, SATB2, and the miR-
23a~27a~24-2 cluster regulates the osteoblast differentiation program. Proc Natl Acad Sci U S A. 2010;107(46):19879–84.
52. Zhang Y, Xie RL, Croce CM, Stein JL, Lian JB, van Wijnen AJ, et al. A
program of microRNAs controls osteogenic lineage progression by targeting transcription factor Runx2. Proc Natl Acad Sci U S A.
2011;108(24):9863–8.
53. Tome M, Lopez-Romero P, Albo C, Sepulveda JC, Fernandez-Guti-
errez B, Dopazo A, et al. miR-335 orchestrates cell proliferation, migration and differentiation in human mesenchymal stem cells. Cell Death Differ. 2011;18(6):985–95.
54. Li Z, Hassan MQ, Volinia S, van Wijnen AJ, Stein JL, Croce CM, et al. A
microRNA signature for a BMP2-induced osteoblast lineage com-
mitment program. Proc Natl Acad Sci U S A. 2008;105(37):13906–11.
55. Luzi E, Marini F, Sala SC, Tognarini I, Galli G, Brandi ML. Osteogen-
ic differentiation of human adipose tissue-derived stem cells is modulated by the miR-26a targeting of the SMAD1 transcription factor. J Bone Miner Res. 2008;23(2):287–95.
56. Kwok S, Partridge NC, Srinivasan N, Nair SV, Selvamurugan N.
Mitogen activated protein kinase-dependent inhibition of os-
teocalcin gene expression by transforming growth factor-beta1. J Cell Biochem. 2009;106(1):161–9.
57. Momeni P, Glockner G, Schmidt O, von Holtum D, A lbrecht B,
Gillessen-Kaesbach G, et al. Mutations in a new gene, encoding
a zinc-finger protein, cause tricho-rhino-phalangeal syndrome
type I. Nat Genet. 2000;24(1):71–4.
58. Napierala D, Garcia-Rojas X, Sam K, Wakui K, Chen C, Mendoza-
Londono R, et al. Mutations and promoter SNPs in RUNX2, a
9
Razavi Int J Med. 2013;1(1)
transcriptional regulator of bone formation. Mol Genet Metab.
2005;86(1-2):257–68.
59. Piccione M, Niceta M, Antona V, Di Fiore A, Cariola F, Gentile M,
et al. Identification of two new mutations in TRPS 1 gene leading
to the tricho-rhino-phalangeal syndrome type I and III. Am J Med
Genet A. 2009;149A(8):1837–41.
60. Zhang Y, Xie RL, Gordon J, LeBlanc K, Stein JL, Lian JB, et al. Con-
trol of mesenchymal lineage progression by microRNA s tar-
geting skeletal gene regulators Trps1 and Runx2. J Biol Chem.
2012;287(26):21926–35.
61. Komori T. Signaling networks in RUNX2-dependent bone devel-
opment. J Cell Biochem. 2011;112(3):750–5.
62. Shi S, Mercer S, Eckert GJ, Trippel SB. Growth factor regula-
tion of growth factors in articular chondrocytes. J Biol Chem.
2009;284(11):6697–704.
63. Miraoui H, Marie PJ. Fibroblast growth factor receptor signaling
crosstalk in skeletogenesis. Sci Signal. 2010;3(146):re9.
64. Salasznyk RM, Klees RF, Williams WA, Boskey A, Plopper GE. Fo-
cal adhesion kinase signaling pathways regulate the osteogenic
differentiation of human mesenchymal stem cells. Exp Cell Res.
2007;313(1):22–37.
65. Schaller MD. Biochemical signals and biological responses
elicited by the focal adhesion kinase. Biochim Biophys Acta.
2001;1540(1):1–21.
66. Schlaepfer DD, Hanks SK, Hunter T, van der Geer P. Integrin-medi-
ated signal transduction linked to Ras pathway by GRB2 binding
to focal adhesion kinase. Nature. 1994;372(6508):786–91.
67. Li H, Xie H, Liu W, Hu R, Huang B, Tan YF, et al. A novel microRNA
targeting HDA C5 regulates osteoblast differentiation in mice and contributes to primary osteoporosis in humans. J Clin Invest.
2009;119(12):3666–77.
68. Li Z, Hassan MQ, Jafferji M, Aqeilan RI, Garzon R, Croce CM, et al.
Biological functions of miR-29b contribute to positive regulation
of osteoblast differentiation. J Biol Chem. 2009;284(23):15676–84.
69. Goff LA, Boucher S, Ricupero CL, Fenstermacher S, Swerdel M,
Chase LG, et al. Differentiating human multipotent mesen-
chymal stromal cells regulate microRNA s: prediction of mi-
croRNA regulation by PDGF during osteogenesis. Exp Hematol.
2008;36(10):1354–1369.
70. Jafferji M. Regulation of osteoblast differentiation by
microRNAs.Umass medical school: MQP-BIODSA- 7214; 2009. 71. Hu R, Liu W, Li H, Yang L, Chen C, Xia ZY, et al. A Runx2/miR-3960/
miR-2861 regulatory feedback loop during mouse osteoblast dif-
ferentiation. J Biol Chem. 2011;286(14):12328–39.
72. Trompeter HI, Dreesen J, Hermann E, Iwaniuk KM, Hafner M, Ren-
wick N, et al. MicroRNAs miR-26a, miR-26b, and miR-29b acceler-
ate osteogenic differentiation of unrestricted somatic stem cells
from human cord blood. BMC Genomics. 2013;14(1):111.
73. Zhang JF, Fu WM, He ML, Xie WD, Lv Q, Wan G, et al. MiRNA-20a pro-
motes osteogenic differentiation of human mesenchymal stem
cells by co-regulating BMP signaling. RNA Biol. 2011;8(5):829–38. 74. Ali AA, Weinstein RS, Stewart SA, Parfitt AM, Manolagas SC, Jilka
RL. Rosiglitazone causes bone loss in mice by suppressing os-
teoblast differentiation and bone formation. Endocrinology.
2005;146(3):1226–35.
75. Soroceanu MA, Miao D, Bai XY, Su H, Goltzman D, Karaplis A C.
Rosiglitazone impacts negatively on bone by promoting osteo-
blast/osteocyte apoptosis. J Endocrinol. 2004;183(1):203–16.
76. Jeon MJ, Kim JA, Kwon SH, Kim SW, Park KS, Park SW, et al. Acti-
vation of peroxisome proliferator-activated receptor-gamma
inhibits the Runx2-mediated transcription of osteocalcin in os-
teoblasts. J Biol Chem. 2003;278(26):23270–7.
77. Lian JB, Stein GS, Javed A, van Wijnen AJ, Stein JL, Montecino M, et
al. Networks and hubs for the transcriptional control of osteo-
blastogenesis. Rev Endocr Metab Disord. 2006;7(1-2):1–16.
78. Gazzerro E, Canalis E. Bone morphogenetic proteins and their
antagonists. Rev Endocr Metab Disord. 2006;7(1-2):51–65.
79. Wilkinson L, Kolle G, Wen D, Piper M, Scott J, Little M. CRIM1 regu-
lates the rate of processing and delivery of bone morphogenetic
proteins to the cell surface. J Biol Chem. 2003;278(36):34181–8. 80. Eguchi T, Watanabe K, Hara ES, Ono M, Kuboki T, Calderwood SK.
OstemiR: a novel panel of microRNA biomarkers in osteoblastic
and osteocytic differentiation from mesencymal stem cells. PLoS
One. 2013;8(3).
Razavi Int J Med. 2013;1(1)
10
喝酒与胃癌有何关系 文章目录*一、喝酒与胃癌有何关系*二、胃癌如何预防*三、胃癌食疗方 喝酒与胃癌有何关系1、喝酒与胃癌有何关系 大碗喝酒、大块吃肉、大口抽烟,是东北人所习惯的民俗特色,具有显着的地域特征。以往研究认为,高盐饮食、新鲜蔬菜和新鲜水果摄入量低、胃慢性疾病史等因素与胃癌密切相关。一项关于胃癌的流行病学调研显示,吸烟、饮酒和胃慢性疾病以及三者的联合作用成为东北地区胃癌高发的重要因素。 2、胃癌癌前病变 胃疾病包括胃息肉、慢性萎缩性胃炎及胃部分切除后的残胃,这些病变都可能伴有不同程度的慢性炎症过程、胃黏膜肠上皮化生或非典型增生,有可能转变为癌。癌前病变系指容易发生癌变的胃黏膜病理组织学改变,是从良性上皮组织转变成癌过程中的交界性病理变化。胃黏膜上皮的异型增生属于癌前病变,根据细胞的异型程度,可分为轻、中、重三度,重度异型增生与分化较好的早期胃癌有时很难区分。 3、胃癌临床表现 早期胃癌多数患者无明显症状,少数人有恶心、呕吐或是类似溃疡病的上消化道症状,难以引起足够的重视。随着肿瘤的生长,影响胃功能时才出现较为明显的症状,但均缺乏特异性。 疼痛与体重减轻是进展期胃癌最常见的临床症状。患者常有
较为明确的上消化道症状,如上腹不适、进食后饱胀,随着病情进展上腹疼痛加重,食欲下降、乏力。根据肿瘤的部位不同,也有其特殊表现。贲门胃底癌可有胸骨后疼痛和进行性吞咽困难;幽门附近的胃癌有幽门梗阻表现。 胃癌如何预防少吃或不吃腌菜。腌菜中含有大量的亚硝酸盐和二级胺,在胃内适宜酸度或细菌的作用下,能合成亚硝胺类化合物,这类化合物是很强的致癌物质。所以食品要新鲜,提倡冰箱冷藏。 不吃或少吃烟熏和油煎食物。熏鱼和熏肉中含有大量的致癌物质,如3-4苯并芘和环芳烃。油炸、烘烤、烧焦食物和重复使用的高温食油中也含有此类致癌物质,应尽量少食用。 不吸烟、少饮酒。吸烟与胃癌也有一定的关系,烟雾中含有苯并芘、多环芳香烃、二苯并卡唑等多种致癌或促癌物质,是食管癌和胃癌的病因之一。酒精本身虽不是致癌物质,但烈性酒会刺激胃粘膜,损伤粘膜组织,促进致癌物质的吸收,如果饮酒同时吸烟,其危害性更大。因为酒精可增强细胞膜的通透性,从而加强对烟雾中致癌物质的吸收。 要养成良好的饮食习惯。若饮食不定时定量、暴饮暴食、进食过快过烫,对胃是一个损伤性的刺激,与胃癌的发生有一定的关系。同时,食盐摄入量大,进餐时好生闷气与胃癌也有关系。
附件1 酶联免疫法检测试剂注册技术审查指导原则 一、前言 本指导原则主要针对酶联免疫类检测试剂的主要原材料、生产工艺及反应体系、产品质量控制等环节提出指导性技术要求。 本指导原则系对酶联免疫法检测试剂的一般要求，申请人应依据产品特性确定其中的具体内容是否适用，若不适用，需详细阐述其理由及相应的科学依据。 本指导原则是对申请人和审查人员的指导性文件，但不包括注册审批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行，如果有能够满足相关法规要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供详细的研究资料和验证资料。应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。 本指导原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制订的，随着法规和标准的不断完善、科学技术的不断发展，其相关内容也将进行适时的调整。 二、适用范围 本指导原则适用于有关病原微生物检测的第三类体外诊断试剂的注册技术审查。其他酶联免疫法检测试剂（如作为二类管理的体外诊断试剂）可参考本指导原则执行。 三、基本要求 （一）基本原则 1.研制、生产用的各种原料、辅料等应制定其相应的质量标准，并应符合有关法规的要求。
2.试剂生产企业应具备相应的专业技术人员、仪器设备以及适宜的生产环境，获得《医疗器械生产许可证》；同时，应按照《体外诊断试剂生产实施细则（试行）》的要求建立相应的质量管理体系，形成文件和记录，加以实施并保持有效运行；还应通过《体外诊断试剂生产企业质量管理体系考核评定标准（试行）》的考核。企业应对试剂的使用范围做出明确规定，并经国家药品监督管理部门批准。 3.诊断试剂的研制应当按照科学、规范的原则，各反应条件的选择和确定应符合基本的科学原理。 4.试剂在研制、生产过程中所用的各种材料及工艺，应充分考虑可能涉及的安全性方面的事宜。 5.生产和质量控制的总体目标：保证试剂使用安全、质量稳定、工艺可控、检测有效。 （二）原材料质量控制 1.主要生物原料 与产品质量最密切相关的生物原料主要包括各种天然抗原、重组抗原、单克隆抗体、多克隆抗体以及多肽类、激素类等生物原科。这类原料可用于包被酶标反应板、标记相关酶（如辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶等）、中和反应用抗原或抗体、制备校准品（标准品）等。使用前应按照工艺要求对这类生物原料进行质量检验，以保证其达到规定的质量标准。主要生物原料若为企业自己生产，其工艺必须相对稳定；若购买，其供应商要求相对固定，不能随意变更供应商，如果主要原料（包括工艺）或其供应商有变更，应依据国家相关法规的要求进行变更申请。 主要生物原料的常规检验项目一般包括： （1）外观 肉眼观察，大部分生物原料为澄清均一的液体，不含异物、浑浊或摇不散的沉淀或颗粒；或者为白色粉末，不含其他颜色的杂质；特殊生
Hp感染与胃癌 当人体暴露于致病因素后，可能引起致病效应，由于人体的抗病机制及内外环境各异，有的可能发病，有的不一定发病。作为对照组的个体，也不等于都不发病。但是病因暴露组的发病率应高于对照组，且应有致病的因—果相关性。 Forman等学者研究了不同国籍的胃癌患者Hp感染情况（表1）。结果表明在不同国家和不同国籍者，Hp抗体阳性率在胃癌组明显高于对照组。Tallcy进一步研究了Hp感染与胃腺癌的部位及组织学分型的关系。69例组织学证实为胃腺癌，Hp抗体阳性率在贲门部腺癌为38%，非贲门部腺癌为65%，与对照组相比，Hp 感染与非贲门部腺癌的危险性相关，OR=2.67（99%CI=1.01～7.06）。在调整年龄和性别后，肠型癌阳性率相对于对照组的OR=4.57(99%CI=0.78～26.73)，而弥漫型癌者OR=2.25(99%CI=0.63～8.08)。Nomnra根据组织学分类，肠型癌与弥漫型癌之间有明显统计学差异。Parsonnet调查了非贲门部胃腺癌中的肠型癌、弥漫型癌以及胃食管结合部腺癌相对于对照组的Hp感染率，OR值分别为 3.1,8.0,0.8(95%CI分别为1.5～6.6，1.0～6 4.00,0.31～2.1(表2)。 表1 不同国籍胃癌患者Hp感染情况 研究者血清HpIgG抗体阳性 OR*95%CI** 研究对象 胃癌组（n）对照组（ n） Forman5 69 41 2.77 1.94-7.97 英国人 Parsonnet1 84 61 3.6 1.8-7.3 美国人 Nomnra3 94 76 6 2.1-17.3 日籍美国人 注：*OR:Odds Ratio(机会比) * *95%CI；95%可信区间 表2 Hp抗体阳性值在胃癌与对照组间的OR值 Hp抗体滴度胃癌组（n）对照组（n）OR 95%CI 1.00-1.70 28 27 4.7 1.5-14.4 1.71- 2.20 32 28 6.3 1.9-21.0 ≥2.2143 28 7.6 2.4-23.9 上述结果提示在不同的研究者对不同的国家和地区，不同的人群，采用病倒对照研究的方法，得出的结论基本一致，即认为Hp与胃癌的危险性相关，而且与胃癌中的非贲门性腺癌，组织学为肠型癌者有相关性。 2.1 Hp感染在胃癌发病中的先导作用 Hp感染作为胃癌的一处危险因素，提示Hp感染先于胃癌。目前的研究多为回顾性的，Hp与胃癌的相关性，有三种可能的解释：①胃癌引起Hp感染；②Hp感染
ELISA检测方法有哪些？ 酶联免疫吸附测定（Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay，ELISA）是研究蛋白抗体的重要方法。它是采用抗原与抗体的特异结合将被测物质与酶标抗体进行直接或间接结合，然后通过标记酶与底物产生颜色反应进行定性和定量分析。那么，它与其它检测方法的灵敏度及您了解吗？跟着小编往下看 ELISA通常分为四种类型：直接法、间接法、竞争法、夹心法等，直接上图： 直接法（Direct ELISA）仅需要抗原和酶标一抗，操作简便，可避免交叉反应，然而该方法要求酶标一抗有较高的特异性要求，同时也并非所有的一抗适合标记处理。直接法在实际运用中并不多见，它并不能对样本中抗体进行定量分析，因为样本中抗体是非酶标抗体，无法进行后续显色，但是该法经过改进就是竞争性ELISA方法，见后文。 间接法（Indirect ELISA）使用了二抗增加信号强度，也使抗体的选择多样化，然而间接法容易产生交叉反应。间接法只能用于测定抗体，主要用于疾病的诊断，其优点是只需要改变包被抗原，酶标抗体是通用的。 夹心法（Sandwich ELISA）分为双抗体夹心法和双抗原夹心法： 双抗体夹心法中抗原被两个抗体——捕捉抗体和检测抗体，结合于不同位点。捕捉抗体固定于载体上，检测抗体通过结合抗原进行显色分析。应用于双抗体夹心法检测的抗体需是单抗，而且对同一抗原结合位点不同，如此才能避免交叉反应或两种抗体竞争性结合同一位点。夹心法具有高灵敏度、高专一性的优势，但该法只适用于有多个结合位点的抗原检测，主要用于检测各种大分子抗原——例如在医学检测中测定HBsAg、HBeAg、AFP等。由于双抗体夹心法特异性高，在检测过程中有时会将样本和酶标抗体同时加入进行反应（一步法），此时如果样本中抗原含量过高会导致其与固相抗体和酶标抗体均有结合而不形成“夹心复合物”，
酶联免疫吸附试验（又称酵素免疫分析法，Enzyme-linked immunoassay，简称ELISA）利用抗原抗体之间专一性键结之特性，对检体进行检测；由于结合于固体承载物(一般为塑胶孔盘)上之抗原或抗体仍可具有免疫活性，因此设计其键结机制后，配合酵素呈色反应，即可显示特定抗原或抗体是否存在，并可利用呈色之深浅进行定量分析。根据待测样品与键结机制的不同，ELISA可设计出各种不同类型的检测方式，主要以三明治法（sandwich）、间接法（indirect）、以及竞争法（Competitive）三种为主，以下为各种方法之介绍. 三明治法 常用于检测大分子抗原，一般之操作步骤为: 1.将具有专一性之抗体固著（coating）于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体 2.加入待测检体，检体中若含有待测之抗原，则其会与塑胶孔盘上的抗体进行专 一性键结 3.洗去多余待测检体，加入另一种对抗原专一之一次抗体，与待测抗原进行键结 4.洗去多余未键结一次抗体，加入带有酵素之二次抗体，与一次抗体键结 5.洗去多余未键结二次抗体，加入酵素受质使酵素呈色，以肉眼或仪器读取呈色 结果 三明治法分别以两种抗体对检体中的抗原进行两次专一性辨认，因此专一性相当高，但此待测抗原必须是多价抗原，如此才可获得两种以上的专一性抗体，以分别进行夹心；而且此法需要足够的表位空间以进行抗原抗体的夹心，所以并不适用于半抗原或小分子抗原等分子量较小之标的。 间接法 间接法常用于检测抗体，一般之操作步骤为： 1.将已知之抗原固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余之抗原 2.加入待测检体，检体中若含有待测之一次抗体，则其会与塑胶孔盘上的抗原进 行专一性键结 3.洗去多余待测检体，加入带有酵素之二次抗体，与待测之一次抗体键结 4.洗去多余未键结二次抗体，加入酵素受质使酵素呈色，藉仪器（ELISA reader） 测定塑胶盘中的吸光值（OD值），以评估有色终产物的含量即可测量待测抗原 的含量。 竞争法 竞争法是一种较少用到的ELISA检测机制，一般用于检测小分子抗原，其操作步骤为： 1.将具有专一性之抗体固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体 2.加入待测检体，使检体中的待测抗原与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结 3.加入带有酵素之抗原，此抗原也可与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结，由于 塑胶孔盘上固著的抗体数量有限，因此当检体中抗原的量越多，则带有酵素之
826例胃癌的临床分析 目的研究讨论年龄、性别因素与胃癌的发病和临床病理学之间的关系。方法以本院2009年9月～2011年9月确诊的826 例胃癌患者为研究对象，分析比较胃癌患者的性别、年龄分布情况及临床病理学差异。结果胃癌的发病率随着年龄的增长而升高，51～60岁为高峰年龄段，胃癌组织学类型在不同性别之间的分布有明显差别，男性低分化腺癌最多，女性印戒细胞癌最多；胃镜或者手术发现肿瘤的发生部位胃窦最多，其中胃底及贲门口中，男性发生率相比女性差异有统计学意义（P < 0.05），而性别及年龄组在其他部位的发生率无显著差异。结论胃癌患者中性别和年龄在发病状况和组织学类型有差异。 标签：胃癌；性别；年龄；临床分析 胃癌是目前危害人类健康的常见恶性肿瘤之一，全球每年新发胃癌100余万，中国占42%，死亡约80万，中国占35%，是胃癌发病率和死亡率最高的国家之一，发病率和死亡率均是世界平均水平的两倍多[1]。笔者选取本院2009年9月～2011年9月826例临床资料完整的胃癌病历进行分析并结合文献进行讨论。 1 资料与方法 1.1 一般资料 选取2009年9月～2011年9月在本院临床就诊的826例患者资料。其中，男性604例，女性222例，男女比例2.72∶1，患者年龄22～91岁，平均54.6岁。其中老年患者250例，男性210例，女性40例，男女比例为5.25∶1；中年患者484例，其中，男性354例，女性130例，男女比例为2.72∶1；青年患者92例，其中男性40例，女性52例，男女比例为0.77∶1。 1.2 临床表现 临床症状表现为上腹部无规律疼痛者792例，占95.88%；其次为上腹饱胀、食欲减退、乏力者760例，占92.01%；反酸、嗳气者661例，占80.02%；体重不同程度下降者742例，占89.03%；呕血、黑便者512例，占61.99%；其他症状如原因不明的发热等149例，占18.04%。检查所见：上腹部压痛636例，占77.00%；腹部肿块430例，占52.06%；腹水24例，占2.91%；贫血（血红蛋白低于80 g/L）413例，占50.00%；其他如左锁骨上淋巴结肿大、黄疸等66例，占7.99%。 1.3 研究方法 826例病例分别按年龄及性别不同分组，其中又分青年（21～40岁）、中年（41～60岁）、老年组（60岁以上）。分析比较性别、年龄及病理学上在胃癌患
酶联免疫分析法 生工121 徐娜 酶联免疫分析法是目前分析化学领域中的前沿课题，它是一种特殊的试剂分析方法，是在免疫酶技术的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术，特别是在食品和饲料中有毒有害物质的检测应用极为广泛。 酶联免疫分析法是把抗原抗体的免疫反应和酶的高效催化作用原理有机地结合起来的一种检测技术。该技术的原理主要有三点：第一、抗原或抗体能结合到固相载体的表面仍具有其免役活性；第二、抗体或抗原与酶结合所形成的结合物仍保持免疫活性和酶的活性；第三，结合物与相应的抗原或抗体反应后，结合的酶仍能催化底物生成有色物质，而颜色的深浅可定量抗体或抗原的含量。 酶联免疫法在医药、食品加工业、农牧渔业等领域有着广泛的应用：如乙型肝炎、莱姆病，急性心肌梗死的早期诊断，定量检测内毒素，HIV抗体初筛，SARS 病毒的快速检测；检测食品中的病毒，残留农药，微生物及其其它成分；检测香蕉有关病毒，小麦黄花叶病毒，检测水产品中氯霉素的残留量，禽脑脊髓抗体等。 一、医学临床中的应用 医学中，检测各种抗原和抗体，为临床疾病的辅助诊断和早期诊断提供了特异性、敏感性强的试验基础。 1、乙型肝炎、原发性肝癌的血清学检测：用血清学方法检测肝炎病毒的抗原或抗体，一直受到各级医疗卫生机构检验科室的高度重视。尤其是对乙型肝炎，甲型肝炎，丙型肝炎的血清学检测，更因为试剂盒的推出而得到广泛开展。上述各种肝炎病毒抗原或抗体的检测方法，绝大部分都是酶联免疫分析法。 2、简化莱姆病的诊断：由于在作出博氏疏螺旋体感染诊断前要进行双重测试，因此莱姆病的测试可能花费很长时间。采用由关键的疏螺旋体抗原决定簇构成的重组蛋白开发出一种新的酶联免疫测定方法。该测试比最常用的商业全细胞酶联免疫测定法特异，而敏感性相同，并且在20分钟就会产生结果。 3、急性心肌梗死的早期诊断：急性心肌梗死为一多发病，病情严重。目前对此病的策略是尽早的确诊并迅速积极的治疗。约有四分之一或更多的患者，在初诊时心电图并不显示典型心肌梗死心电图异常，无Q波。心肌坏死时释放出的Mb可直接快速血液循环。Mb是最早出现的心肌梗死生化标志物，但它在血中滞留时间短。为此，刘宏伟等研制出只需30分钟的酶联免疫快速法，为早期诊断心肌梗死提供了依据。 4、定量检测内毒素：临床上，细菌感染的患者常发生内毒素血症，死亡率高达20%——30%，检测标本中的LPS对早期诊断和防治有重要意义。用优化后的双抗体夹心法检测LPS敏感性为50ng/L,特异性与准确性均高于仪器比浊法和试验定性法。此为内毒素血症提供了一种简便，快速，准确，特异性的诊断参考。 5、快速检测SARS病毒：SARS病毒引起传染性非典型肺炎，发病快，传染性强。2003年4月，北京基因组研究所与军事医学科学院研制出诊断非典的酶联免疫分析法检测试剂，为控制疫情蔓延提供了新的诊断手段。 二、在食品分析中的应用 1、检测食品中的毒素：采用辣根过氧化氢酶标记高亲和力的黄曲霉素B1抗体，建立了直接竞争抑制酶联免疫快速筛选法。该法检测B1抗体的线性范围
p16基因与胃癌关系 宁志杰 2012级临床一班 2012190138 分子生物学和基因工程技术的迅速发展使我们认识到，胃癌的发生同其他肿瘤一样是正常细胞内基因组多重改变的结果。自发的、化学物理性及病毒性致癌因素只是诱因，基因改变才是根本原因，它包括癌基因的激活和抑癌基因的失活。p16(MTS1、CDKN2、CDK4I)基因是新近发现的抑癌基因，与p53基因相比，它具有突变率高、分子量小、易于标定等特点，因而很快成为肿瘤分子生物学研究的热点。本文就胃癌中p16基因的研究情况作一概述。 1 p16基因的分子生物学特点 1993年，Serrano等在研究与细胞周期素依赖性激酶4(cyclin dependent kinase 4, CDK4)相作用的蛋白时，用酵母双杂合蛋白相关性筛选(yeast two-hygrid protein interaction screen)法分离到了特异性CDK4抑制蛋白p16蛋白，并成功地克隆了其cDNA。1994年Kamb等用STS-PCR(serveral-tagged sites-PCR，多标志位点PCR)方法研究了100个黑色素瘤细胞系，发现了在人第9号染色体短臂(9p21)区域存在有与Serrano等报道的p16序列相近的2个区域，分别命名为多发性肿瘤抑制因子1(multiple tumor suppressor 1, MTS 1)和多发性肿瘤抑制因子2(MTS 2)，其中MTS 1与曾报道的p16基因完全吻合，而MTS2与p16基因有93%的序列同源，目前已命名为p15基因。与此同时，Nobori等的研究也证实了上述结论。Serrano等指出，p16基因定位于人第9号染色体的9p21区位，分布在全长为8.5 kb的DNA区段内，由3个外显子和其间的2个内含子组成，3个外显子的长度分别是126 bp、307 bp、11 bp。编码蛋白为15.845 kD、含有一个由148个氨基酸残基组成的开放阅读框架的单链多肽，具有4个沟回状重叠的空间构型，该结构特别是第4个重叠是保持p16基因的活性所必需的。 2 p16基因在胃癌中的表达及意义 国内外学者的研究结果表明，p16基因与胃癌分化、浸润、淋巴结转移及患者预后有显著的相关性，检测胃癌组织p16基因的各种变化，有助于对胃癌生物学行为的进一步了解和对患者预后的评估。 p16基因在胃癌中可发生纯合性缺失、5’端CpG岛异常甲基化、表达下降等3种形式的改变。纯合性缺失是指两个等位基因完全丢失，表现为PCR扩增无产物或Southern杂交信号完全消失。事实上，在已普查过的近300个癌细胞株中，p16基因最易发生纯合性缺失，可能的原因是另有抑癌基因在9p21上与之连锁，如p15基因。CpG岛是DNA的一段区域，长度约0.5～2.0 kb，富含GC，在正常组织中没有甲基化。p16基因常因转录启动区域5’-CpG岛异常甲基化而被灭活，表现为等位基因不转录或异常转录，应用逆转录嵌套式聚合酶链反应(RT-NPCR)法可测得异常转录物。 p16基因发现后不久，日本学者Igaki等就对9例胃癌细胞株进行了Southern杂交分析，发现4例低分化胃癌细胞株中有2例(22%)发生纯合性缺失，而高分化组未见缺失。Akama 等用同法检查了8例胃癌细胞株，结果发现2例(25%)存在p16基因的纯合缺失，另有2例虽未测得基因改变，但均未表达p16，考虑存在5’-CpG岛异常甲基化。吕有勇等检测5株胃癌细胞系，有1株(20%)存在p16基因纯合缺失，另有2例未见明显的基因丢失，但没有表达或表达下调；在85例胃癌组织中，14例(16.4%)存在p16基因纯合缺失，这些缺失的病例都属于低分化、有淋巴结转移的进展期胃癌，提示p16基因结构和表达异常与胃癌分化、转移相关。前不久，Chen等运用RT-NPCR方法检测了10例肠型胃癌、11例弥漫型胃癌，结果分别发现3例(30%)和5例(45.5%)中存在异常p16 mRNA转录物，其中大多数有外显子1和外显子2的核苷酸序列的部分缺失，认为RT-NPCR法是检测小的基因内缺失的有效方法，异常p16 ;mRNA转录物在胃癌中属频发事件。另外，国内学者进行的大量胃癌中p16蛋白表达的研究充分显示，p16蛋白在胃癌组织中表达明显降低，且与胃癌分化、浸润、淋巴结转移、患者预后明显相关。 3 p16基因的生物学作用 研究表明，细胞癌变与细胞周期失控密切相关，典型型的一个细胞周期包括有顺序严格
第十三章口腔颌面部肿瘤重点 口腔颌面部是肿瘤的好发部位之一，可以发生各种类型的肿瘤。本节仅就口腔颌面部常见的肿瘤作简单的介绍。口腔内的囊肿呈非真性肿瘤，为了便于叙述，也包括在本节之内。 一、良性肿瘤 口腔颌面部可发生各种良性肿瘤。发生于软组织者，如涎腺混合瘤、牙龈瘤、血管瘤、淋巴管瘤、神经纤维瘤、纤维瘤等。发生于骨组织者，如巨细胞瘤、骨瘤等。口腔颌面部还有些良性肿瘤与成牙组织有关，属牙源性的肿瘤，如牙瘤、造釉细胞瘤等。现将几种常见的肿瘤分别叙述如下。 （一）混合瘤（多形性腺瘤）（Mixed Tumor,Pleomorphic adenoma）涎腺混合瘤为口腔颌面部最常见的肿瘤之一。来源于涎腺上皮。肿瘤内除上皮成份外，还常有粘液、软骨样组织等。涎腺混合瘤好发于腮腺（图1），其次为腭部及颌下腺。下面以腮腺混合瘤为例叙述其临床表现及治疗原则。 图1 腮腺混合瘤(左腮部) 【临床表现】 腮腺混合瘤多见于中年。一般无明显自觉症状，生长缓慢，病程可达数年甚至数十年之久。肿瘤多表现为耳下区的韧实肿块，表面呈结节状，边界清楚，中等硬度，与周围组织不粘连，有移动性，无压痛。如肿瘤出现下述情况之一时，应考虑有恶变之可能。①肿瘤突然增长迅速加快，②移动性减少甚至固定，③出现疼痛或同侧面瘫等。 【治疗原则】 腮腺混合瘤的治疗以手术彻底切除为原则。术前一般不宜作活检。肿瘤的包膜常不完整，有时瘤细胞可侵入包膜或包膜外组织，若切除不彻底则将复发。故手术时不宜采用剜除肿瘤的方法而应将肿瘤连同其周围的腮腺组织一并切除。术中要注意保持面神经。如有恶性变，应按恶性肿瘤的治疗原则处理。 （二）成釉细胞瘤（Ameloblastoma） 成釉细胞瘤是一种常见的、来自牙源性上皮的颌骨中心性肿瘤。瘤细胞的形态与牙胚中的成釉细胞相似，故称为成釉细胞瘤。
胃癌与癌前病变的关系分析 为研究肠上皮化生（IM）及不典型增生（ATP）与胃癌的关系，作者分析证实了近10年的病理活检资料，现将研究结果报告如下： 1 材料和方法 本组材料为我院1983年～1993年常规病理活检资料完整、内镜采取的胃粘膜组织及外科手术中胃大部切除标本368例。观察取材部位主要是胃窦部大弯、小弯，胃体部大弯、小弯以及窦部的前壁、后壁，胃体部前壁、后壁等。每例取材1～8块，以体积分数为10福尔马林液固定。石蜡包埋切片，HE常规染色。 2 结果 IM51.9%(189/368),ATP20.2%(79/386)。IM在胃溃疡发病率为55.9%，在胃癌为58.5%，两种疾病之间无统计学差异（P＞0.05），在高分化腺癌和低分化腺癌的发病率分别为67.6%和50.9%,经统计学处理,两者之间差异不显著(P＞0.05)。ATP在胃溃疡病中发生率为17.6%，在胃癌中37.8％，两者的发生率有显著差别（P＜0.01），在高分化胃腺癌和低分化胃腺癌的发生率分别为53％和24.5%，两者之间的差异显著（P＜0.01）。在非癌非溃疡的其它胃部疾病的胃粘膜中，IM占29.6%，ATP占12.2%，其中胃炎中占10.5%，IM，ATP的发生率均明显低于胃溃疡病及胃癌。IM，ATP等胃的良性病变中，男女之比约为5:1。并随年龄增加而检出率亦增高，其发病的高峰年龄组为40岁～59岁，与胃癌发病年龄一致。IM，ATP病变部位的分布，以窦小弯所占比例较大，胃体部病变检出率较低且程度轻。可见，胃的良性病变以胃窦部的检出率最高，病变的程度也最重，尤其是胃窦小弯部，与癌的病变部位分布一致。 3 讨论 近几年来认为，幽门螺杆菌（简称Hp）的感染是慢性萎缩性胃炎、胃溃疡病及胃癌发生的重要致病因素之一。自1983年Warren和Marshall在胃炎病人胃窦粘膜活检标本中发现并培养出幽门螺杆菌后，引起了国内外学者的重视。人体感染了Hp后，在遭到外界不利因素作用或内环境紊乱时，胃粘膜组织发生了病变。原来桔红色泽丧失，代以灰色灰绿色，粘膜水肿或厚薄不均，缺乏完整性光滑性，出现粘膜表面粗糙或凹凸不平。透镜电镜下发现，慢性萎缩性胃炎病人胃粘膜活检标本的病理变化，粘膜上皮及腺上皮细胞普遍低矮，细胞间隙增宽，排列不整，腺腔扩大，腺管萎缩，分泌颗粒减少，间质水肿伴有淋巴细胞、粒细胞等炎症细胞浸润，少数间质出血等变化。有时局限性组织再生过程占优势，则可发生息肉，病变严重时，胃粘膜形态与小肠相似（肠化）。所以，病理诊断的根据，以胃固有膜腺体萎缩为主，伴有IM，炎细胞浸润，淋巴滤泡形成，粘膜内纤维组织增生或腺体异型增生等。
饮酒与胃癌关系的病例对照研究方案设计 一、研究背景： 1973-1975年以及1990-1992年的调查显示，胃癌死亡率均居各种死亡率之首,我国也是胃癌高发区。2000年，胃癌已成为我国三大肿瘤相关死因，平均死亡率达48.6/10万，男性和女性胃癌分别居肿瘤相关死因第3位和第2位。[1]381目前其病因尚未阐明,早期常无特异症状而易被忽略。 二、研究目的 通过调查研究对象生活习惯，探讨饮酒与胃癌之间的关系 三、研究方法 1.研究对象： 病例组： 2011年3月～2011年9月, 选择在某市某几家指定医院年龄在18岁以上属于本市常住人口的确诊为原发性胃癌患者。若有下列情况之一则排除：①此次检查不是首次确诊为胃癌②具有其它相关疾病（如肝肠疾病）可能引发胃病为并发病的患者③有胃癌遗传史的患者。 诊断标准：按照中华人民共和国卫生部的胃癌诊断标准（WS316-2010），采用纤维胃镜检查或上消化道造影检查。 对照组： 在患者居住周边有相同生活习惯的居民中，按1∶1配对,随机选取与病例同民族、同性别、同居住地、年龄差别±5岁,无消化系统疾病、无肿瘤病人员为对照组。 2.影响因素 （1）生活习惯影响生活习惯（尤其饮食习惯）很大程度上影响个体身体健康状况；（2）生活环境影响不同环境的空气质量和成分不尽相同；可能导致患者经常吸入的物质及其含量存在一定的差异； （3）工作环境影响不同职业对象处于不同的工作环境，日常接触物质有所不同，吸入物有所不同；此外，不同职业可能存在不同的压力状况，饮食和作息规律也会有所不同；（4）个体间在体质、健康状况、遗传、疾病史等方面存在的差异会对研究结果产生一定影
ELISA（酶联免疫吸附测定，enzyme linked immunosorbent assay）指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。 基本原理： ①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。 ③在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。 ④加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅有无定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，故可极大地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。 双抗夹心法 夹心法常用于检测大分子抗原，一般的操作步骤为: ①将具有专一性的抗体固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体； ②加入待测检体，检体中若含有待测的抗原，则其会与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结； ③洗去多余待测检体，加入另一种对抗原专一的一次抗体，与待测抗原进行键结； ④洗去多余未键结一次抗体，加入带有酶的二次抗体，与一次抗体键结； ⑤洗去多余未键结二次抗体，加入酶底物使酵素呈色，以肉眼或仪器读取呈色结果。 间接法 间接法常用于检测抗体，一般的操作步骤为： ①将已知的抗原固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余的抗原。
②加入待测检体，检体中若含有待测的一次抗体，则其会与塑胶孔盘上的抗原进行专一性键结。 ③洗去多余待测检体，加入带有酶的二次抗体，与待测的一次抗体键结。 ④洗去多余未键结二次抗体，加入酶底物使酶呈色，藉仪器（ELISA reader）测定塑胶盘中的吸光值（OD值），以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。 竞争法 竞争法是一种较少用到的ELISA检测机制，一般用于检测小分子抗原，其操作步骤为： ①将具有专一性的抗体固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体； ②加入待测检体，使检体中的待测抗原与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结； ③加入带有酶的抗原，此抗原也可与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结，由于塑胶孔盘上固著的抗体数量有限，因此当检体中抗原的量越多，则带有酶的抗原可键结的固著抗体就越少，亦即，两种抗原皆竞相与塑胶孔盘上抗体键结，即所谓竞争法之由来。 ④洗去检体与带有酶的抗原，加入酶底物使酶呈色，当检体中抗原量越多，代表塑胶孔盘内留下之带有酶的抗原越少，显色也就越浅。 注：当需要侦测无法获得两种以上单一性抗体的抗原，或是不易得到足够的纯化抗体以固著于孔盘上时，一般会考虑使用竞争法ELISA。
酶联免疫吸附测定法（ELISA） 1.定义 (3) 2.原理 (3) 2.1抗原抗体反应 (3) 2.2免疫测定在临床检验中的应用 (5) 3.ELISA的类型 (5) 3.1双抗体夹心法测抗原： (6) 3.2双抗原夹心法测抗体 (6) 3.3间接法测抗体 (6) 3.4竞争法测抗体 (7) 3.5竞争性测抗原 (7) 3.6捕获包被法测抗体 (7) 3.7ABS-ELISA法 (8) 4.ELISA试剂的组成 (9) 4.1固相载体： (9) 4.2包被的方式 (9) 4.3包被用抗原：天然抗原、重组抗原、合成多肽抗原。 (10) 4.4包被的条件： (10) 4.5洗涤液： (10) 4.7酶的催化性； (11) 4.8结合物的制备 (11) 4.9结合物的保存 (12) 4.10酶的底物 (12) 4.11酶反应终止液 (12) 4.12参考标准品 (13) 4.13加样： (13) 4.14保温 (13)
4.15保温方式： (13) 4.16室温温育的反应 (13) 4.17洗涤 (14) 4.18显色 (14) 4.19比色 (14) 4.20酶标比色仪 (15) 4.21结果判定 (15) 4.22定量测定 (16) 4.23ELISA的操作要点 (16)
1.定义 酶联免疫吸附测定法（Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay），简称ELISA，采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接，然后通过酶与底物产生颜色反应，对受检物质进行定性或定量分析的一种检测方法。 2.原理 采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接，然后通过酶与底物产生颜色反应，可对受检物质的定性或定量分析。 2.1抗原抗体反应 2.1.1可逆性 抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡，其反应式为： Ag+Ab→Ag·Ab 抗体的亲和力（affinity），可以用平衡常数K表示：K=[Ag·Ab]／[Ag][Ab]，Ag·Ab的解离程度与K值有关。高亲和力抗体的抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常适合，两者结合牢固，不易解离。解离后的抗原和抗体均能保持原有的结构和活性。 2.1.2特异性 抗原抗体的结合发生在抗原的决定簇与抗体的结合位点之间。化学结构和空间构型互补关系，具有高度的特异性。因此，在很多时候，测定某一特定的物质不需分离待测物。2.1.3最适比例 只有当抗原抗体的浓度比例是当时，才出现可见反应。 以沉淀反应为例（Ab量固定，Ag量递增）
胃癌与饮食的关系论述 □许李莉 【摘要】胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一，在我国其发病率居各类肿瘤的首位。本文就胃癌与饮食之间的关系，以及如何防治胃癌展开论述，希望对胃癌患者的治疗有所帮助。 【关键词】胃癌；饮食；食疗；治疗原则；饮食偏方 【作者简介】许李莉（1983．5 ），女，江苏苏州人，苏州农业职业技术学院；研究方向：食品营养与禁忌 一、引言 胃癌是胃粘膜上皮细胞及肠化上皮细胞在胃部的疾病、食物中的致癌物质及遗传因素等致癌因素的作用下发生癌变而形成的恶性肿瘤。胃癌在我国是一种常见的恶性肿瘤，占消化道恶性肿瘤的首位。正因为如此，胃癌的治疗工作越来越受到人们的重视。 二、胃癌患者的饮食特点 一是总的营养水平较差，蛋白质、脂肪类食品进食甚少，新鲜蔬菜、新鲜水果也进食甚少；他们常吃腌制品，或者含盐量高的食品。有些患者还有喜欢吃油炸、熏制食品的习惯。二是在饮食习惯上，胃癌患者比较普遍的存在着三餐不定时，或者进餐过快，或者喜欢吃得太饱等情况。因此，预防胃癌的重点应放在饮食上，首先应改善饮食习惯，少吃盐腌、烟熏食品，不吃霉变食品，避免重盐饮食，多吃新鲜蔬菜、水果，多饮新鲜牛奶，提倡饮茶，每日服用维生素C，均可减少亚硝胺形成。不吃烫食，不暴饮暴食，不过快进食，避免进食粗糙食物，不在情绪欠佳时进食，不酗酒，不吸烟。 三、胃癌患者的饮食原则 胃癌患者应该纠正不良的饮食习惯，采取正确的饮食原则：一是补充人体所需要的各种营养素。二是给予“三高一 闻媒体及其从业人员的法律，现有的法律大多是从宏观上着眼，权威性不够，可操作性不强。必须要有各方面健全完整的法律对大众媒体进行“监控”，以强制性的法律手段对大众传媒进行监控，加大对大众传媒低俗化的处罚力度。 2．执法部门加强执法力度，做到执法必严，违法必究。传媒低俗化问题涉及到社会生活的各个方面，任何一种大众传媒低俗化现象的出现都是多种因素作用下的结果，单靠一个部门进行管理就达到彻底改变的效果是不现实的。执法方法要以突击式、拉网式的各部门联合执法和各部门的常规检查相结合的方法为主。严肃处理在执法过程中发现的传媒低俗化传播人员，鼓励广大人民举报各类违法现象，进行一场执法部门和人民群众共同打击大众传媒低俗化的人民歼灭战。 （二）社会要通过各种措施净化大众传媒环境 1．加强舆论宣传和引导，创造良好氛围。大众传媒工作者要要关注时事热点，并进行积极正面的报道。在宣传时少一些指令性、灌输性、狂风暴雨式的宣传，取而代之的应该是带有启迪、群众性、潜移默化的的引导。另外也要净化青少年的阅读市场和电视节目这方面，将那些不适合青少年阅读的大众读物和电视节目退出青少年的视野，将那些健康积极、内容鲜活和符合青少年心理的传媒产品引入他们的视野，丰富他们的知识。 2．提高大众传媒主体的行业自律。大众传媒作为信息的主要传播工具和青少年思想政治教育的重要载体，其主体自身的素质十分关键。提高传媒主体道德素质是关键，正所谓道德的基础是人类精神的自律，因此传媒主体要树立强烈 的责任感和道德自律性，不断提升自己的需求层次和精神境界。提高传媒主体文化素质是基础，所以传媒主体应该多以高雅的文化为精神依托，在自身的文化产品中注入高品位的文化内涵，提供更多更好的精神产品。 3．加强对媒介的监管。在当前网络和手机日益普及的形势下，他们越来越成为青少年娱乐和休闲的重要工具，因此要加强对网络的监管，加强对散步不良信息的网络开发者和制作人员的处罚力度，此外更要加强纸质传媒和音响传媒等其他传媒的监管，防微杜渐，把传媒低俗化的苗头扼杀在摇篮里，保护青少年的健康成长。 青少年是祖国的未来，他们的健康成长关系着我们国家未来的发展和兴衰。随着传媒白热化时代的到来，青少年因其生理、心理的特殊性以及对大众媒介的特殊喜好，而必将受到大众传媒的强烈影响，减少和防止大众传媒低俗化对青少年的影响就变成了一个任重而道远的长期任务需要社会各界的共同努力和奋斗。针对未成年人身心成长的特点，大众传媒应营造良好的文化氛围，教育和引导青少年树立正确的价值观。 【参考文献】 1．沙莲香．传播学［M］．北京：中国人民大学出版社，1990 2．唐昆雄，杨斌．大众传媒与当代大学生价值观困惑问题浅析［J］．甘肃社会科学，2008 3．陈凌云．当前我国大众传媒低俗化现象对未成年人的影响及对策思考［D］．武汉：华中师范大学，2008 · 49 ·
1 口腔颌面部肿瘤——1节-概论 口腔颌面部肿瘤(Tumors of Oral and Maxillo-facial Region )系头颈肿瘤（Head and Neck Tumor）的重要组成部分， 国际抗癌联盟（UICC）头颈部癌瘤正式分为七大解剖部位， 即：唇、口腔、上颌窦、咽（鼻咽、口咽、喉咽）、唾液腺、喉和甲状腺， 其中大部分均位于口腔颌面部。 口腔颌面部肿瘤是头颈肿瘤的重要组成部分。 囊肿和瘤样病变 ——不是真性肿瘤，但常具有肿瘤的某些生物学特性和临床表现。一、临床流行病学 ?发病率（incidence rate）： 发病率表示在一定期间内，一定人群中某病新发生的病例出现的频率。是反映疾病对人群健康影响和描述疾病分布状态的一项测量指标。 发病率=（某时期内某人群中某病新病例人数/同时期内暴露人口数）×K K=100%、1000‰、10000/万或100000/10万等。 观察时间单位可根据所研究的疾病病种及研究问题的特点决定，通常以年表示。患病率（prevalence rate）：——现患率 也称患病率，是指某特定时间内总人口中某病新旧病例之和所占的比例。患病率可按观察时间的不同分为期间患病率和时点患病率两种。对慢性病进行现况调查，最适宜计算的指标为患病率。 ?我国的口腔颌面部肿瘤发病率和患病率均不高；一般良性比恶性的多； ?口腔颌面部恶性肿瘤多发生于男性，在40～60岁为最高峰； ?良性肿瘤以牙源性及上皮性肿瘤为多见。——成釉细胞瘤、多形性腺瘤 恶性肿瘤以上皮组织来源最多，——鳞状上皮细胞癌（80%） 其次为腺源性及未分化癌， 肉瘤较少；——纤维肉瘤、骨肉瘤 ?良性肿瘤多见于牙龈、粘膜、颌骨与颜面部。 恶性的以舌、颊、牙龈、腭、上颌窦等处为常见。 二、病因与发病条件 （一）外来因素 1. 物理因素： 长期慢性刺激: 如残根、残冠、锐利的牙尖，不良修复体等的长期慢性刺激可导致舌癌、颊癌的发生; 吸烟与唇癌、灼伤（日光照射.紫外线照射）与皮肤癌；外伤与瘢痕癌，损伤与颌骨肉瘤等的发生有密切关系，放射治疗可引起继发性放射性癌。3 三、口腔颌面部肿瘤的临床表现 肿瘤是机体正常细胞在内、外致瘤因素的长期作用下，所产生的过度增生与异常分化所形成的新生物。 ①良性肿瘤：良性肿瘤一般称为“瘤”，肿瘤细胞分化程度高，近似正常组织细胞，包膜完整，呈膨胀性生长，生长较缓慢，除位于重要部位外，对人体健康无多大影响，不发生转移。 ②恶性肿瘤：恶性肿瘤包括癌（来源于上皮组织者）、肉瘤（来源于间叶组织者）以及胚胎性母细胞瘤等，少数恶性肿瘤仍沿用传统名称，称为“病”、“瘤”，如白血病、恶性淋巴瘤等。恶性肿瘤无包膜，呈浸润性生长，边界不清楚；肿瘤细胞分化程度较低，发展较快，可有转移，虽经手术切除，仍可复发。分类： 1、良性肿瘤 牙源性和上皮源性肿瘤多见（成釉细胞瘤、多形性腺瘤）；其次为间叶组织肿瘤（纤维瘤、管型瘤） 2、恶性肿瘤 根据组织来源可分为癌和肉瘤两大类 口腔癌三种类型：溃疡型、外生性（乳突状型或疣状型）及浸润型。 原位癌（carcinoma in situ）:初起局限于黏膜内或表层之中，称原位癌。 1) 上皮源性最多见（鳞状细胞癌最常见80％以上） 2) 其次为腺源性上皮癌及未分化癌 3) 肉瘤发生在颌面部比较少 4) 淋巴造血系统来源恶性肿瘤可在颌面部首发 3、临界瘤：良、恶性肿瘤的区别是相对，有的肿瘤病程虽较长，但有局部浸润，其生物学行为介于良性与恶性之间，称为“临界瘤”。如唾液腺多
胃癌空间分布与地理环境关系的研究 毛德玲;叶玮;李凤全;朱丽东;吴勇;韩克孟 【期刊名称】《浙江预防医学》 【年(卷),期】2011(023)006 【摘要】目的通过区域胃癌发病率空间分布特征的分析,探讨地理环境对疾病的影响.方法统计青州市2006年1月-2010年5月胃癌病例资料,利用ArcGIs、ArcView、Ceoda等分析青州市胃癌发病率空间分布情况,利用SPSS分析青州市各乡镇胃癌发病率与其平均海拔的相关性.结果青州市胃癌年平均标化发病率为16.95/10万,其中男性标化发病率为24.14/10万,女性标化发病率为9.97/10万;胃癌发病率的全局自相关系数Moran's/系数为0.533683,P<0.05;各乡镇胃癌发病率与其平均海拔的Pearson系数为0.708,在置信度(双侧)为0.01时,相关性明显.结论青州市是我国胃癌高发区,且胃癌分布存在明显空间集聚现象,高发区集中于山地丘陵地区,基岩岩性为寒武纪灰岩,发病率大体呈现由西南向东北递减的趋势.%Objective To investigate the impact of geography on disease by analyzing the status of regional spatial distribution of gastric cancer incidence rate.Methods Collecting baseline information on gastric cancer in Qingzhou from January 2006 to May 2010.ArcGIS, ArcView and Geoda were used to analyze the spatial distribution of gastric cancer incidence, and SPSS was used to analyze the correlation between gastric cancer incidence rate and the average elevation of township in Qingzhou.Results The standardized incidence rate of gastric cancer in Qingzhou was 16.95/105; 24.14/105 among