实验室常用溶液及试剂配制表一普通酸碱溶液的配制
表二常用酸碱指示剂
表三混合酸碱指示剂
表四容量分析基准物质的干燥
表五缓冲溶液的配制
实验室常用试验方法2
九、柠檬酸（C6H8O7·H2O）
称取试样1.5g（精确到0.0002g）于三角瓶内，加入水50ml溶解，加酚酞指示剂3滴，用1mol/L氢氧化钠标准溶液滴定至粉红色为终点，同时做空白试验。
计算：X%（一水）= （V1-V0）×C×0.06404x m×（1-0.08566）×100
X%（无水）= （V1-V0）×C×0.06404x m×100
V1-----消耗氢氧化钠标准溶液的体积，ml；
V0-----空白所消耗氢氧化钠标准溶液的体积，ml；
C------氢氧化钠标准溶液浓度，mol/L；
m---样品质量。
十、钙含量测定（磷酸氢钙CaHPO4、磷酸二氢钙Ca（H2PO4）2·H2O、钙粉等）
称取2g（精确到0.0002g）样品，用10ml盐酸（1+1）溶解，转移至100ml容量瓶中定溶，用移液管吸取10ml于250ml锥形瓶中，加50ml水，5ml蔗糖溶液（25g/L），2ml三乙酸胺（1+1），1ml乙二胺（1+1），1滴孔雀绿指示液（1g/L），滴加氢氧化钾溶液（200g/L）至无色，再过量10ml，加0.1g盐酸羟胺（每加一种试剂都要摇匀），加钙黄绿素少许，在黑色背景下用0.05mol/L的EDTA标准溶液滴定至绿色荧光消失呈现紫红色为滴定终点。
Ca%= C×V×0.4008x m ×100
C------EDTA标准溶液的浓度，mol/L；
V-----消耗EDTA标准溶液的体积，ml；
m----样品质量。
（二）氟（Fˉ）含量的测定：
1、标准曲线的绘制；
2、试样含量的测定：
称取0.5g（精确到0.0002g）置于50ml纳氏比色管中，加1mol/L盐酸10ml，密闭提取1h （不时摇动），避免粘于管壁，提取后加总离子强度缓冲液25ml，加水至刻度，以滤纸过滤。以氟电极测平衡电位值。
结果计算：X= C×50×1000 x m×1000 = 50C x m
X-----试样中氟含量，
m---试样质量，g；
C-----据电位值查得的浓度，
总离子强度缓冲液：现配现用，3mol/L乙酸钠；0.75mol/L柠檬酸钠，配成（1+1）。
测定时，用蒸馏水洗电极装置至值为-370以后。
（三）磷（P）的测定
磷标准曲线的绘制：准确移取磷标准溶液（分析纯的磷酸二氢钾，在105℃干燥1h，冷却后称取0.2195g，溶于1L的容量瓶中，加硝酸3ml，用水稀释至刻度，得到50ug/ml溶液），分别吸取0.0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0、15.0ml于50ml容量瓶中，各加入磷显色液（钒-钼酸铵显色液：偏钒酸铵1.25g，加250ml硝酸于1000ml容量瓶中；钼酸铵25g 于烧杯中，加400ml水溶解，冷却下，将此液倒入容量瓶中，定容）10ml，用蒸馏水定容，
摇匀放置10min以上，以0.0为参比，在400nm波长测定各溶液的吸光度。以横坐标为磷含量，纵坐标为吸光度，作标准曲线。
样品的测定（磷酸氢钙）：移取测钙时所用的试样溶液5ml于100ml容量瓶中，用水定容，摇匀，准确移取2ml于50ml容量瓶中，加磷显色液10ml，用水定容，测其吸光度。
P%= W×稀释倍数 m×106 ×100
W----以吸光度算出的浓度，
m----试样质量，g。
十一、硫酸铜（CuSO4·5H2O）
鉴别：1、Cu2+，取试样溶液，加0.5ml乙二胺四乙酸二钠溶液（15%，m/v），0.5ml氢氧化钠溶液（0.1mol/L），1ml乙酸乙酯，振摇，有机层显黄棕色。
2、SO42-，取试样溶液，置于白色瓷板上，加BaCl2溶液（5%，m/v），即有白色沉淀生成，在盐酸和硝酸中不溶。
测定：称取0.35g左右（精确到0.0002g）置于碘量瓶中，加50ml水溶解，40ml冰乙酸，2g碘化钾（10mlKI溶液），摇匀，于暗处放置10min，用Na2S2O3标准溶液滴定至淡蓝色，加2ml淀粉，继续滴定至无蓝色（或蓝色刚刚消失为终点）。
硫酸铜%= C×V×0.06355 x m ×100
C------ Na2S2O3标准溶液的浓度，mol/L；
V-----消耗Na2S2O3标准溶液体积，ml；
m-----样品质量，g。
十二、硫酸锌（ZnSO4·H2O）
称取0.2g试样，加50ml水溶解，加3g酒石酸钾钠，2ml浓氨水，50mg络黑体，用EDTA 标准溶液（0.05mol/L）滴定至紫色变为纯蓝色。
ZnSO4%= C×V×0.06537 x m ×100%
C-----EDTA标准溶液的浓度，mol/L；
V-----消耗EDTA标准溶液的体积，ml；
m----样品质量。
十三、硫酸亚铁（FeSO4·H2O）
称取0.35g试样于250ml三角瓶中，加50ml水，5ml浓硫酸（缓慢加入），2ml浓磷酸，冷却至室温，用0.1mol/L高锰酸钾标准溶液滴定至粉红色即为终点。
FeSO4%= C×V×0.05585 x m×100%
C-----高锰酸钾标准溶液的浓度，mol/L；
V-----消耗高锰酸钾标准溶液的体积，ml；
m----试样的质量。
十四、砷
1、原理：在酸性介质中，金属锌将砷化物还原为砷化氢，砷化氢在溴化汞试纸上形成棕黄色砷斑与标准砷进行比较。
2、试剂：盐酸（HCl），碘化钾（KI），氧化亚锡盐酸溶液（40%、m/v），无砷金属锌，乙酸铅棉花·溴化汞试纸，砷标准溶液（1ug/ml）。
3、测定：称取1g试样（精确到0.01g）置于广口瓶中，用水稀释至70ml，加6ml盐酸，摇匀，加1g碘化钾（5mlKI溶液、200g/L），再滴加氯化亚锡，直到溶液由黄色变成无色或
白色，摇匀，放置10min，加2.5g无砷金属锌，装好置于暗处25-30℃放置1-1.5h，溴化汞试纸所呈棕黄色不得深于标准。
十五、硫酸镁（MgSO4）
无色结晶或白色粉末。
称取试样1g（精确到0.0002g），用水溶解，转移至100ml容量瓶中，定容，准确吸取25ml 溶液至250ml锥形瓶中，加30ml水，10ml氨-氯化铵缓冲溶液（PH=10），及5滴铬黑体指示剂（0.5%），用EDTA滴定至溶液由紫红色变为纯蓝色为终点。
X%= C×V×0.02431x m×100
C------EDTA标准溶液的浓度，mol/L；
V-----消耗EDTA标准溶液的体积，ml；
m----样品质量，g。
另：沸石粉、滑石粉、石膏粉和膨润土，只测Pb、Cd和As。
三、维生素
一、甜菜碱盐酸盐
1、原理，采用非水滴定法，用乙酸汞将甜菜碱盐酸盐转化为乙酸盐和难电离的氯化汞，在乙酸介质中用高氯酸滴定溶液对生成的乙酸盐进行滴定。
2、试剂，①冰乙酸；②乙酸汞溶液，将50g乙酸汞研细，加1000ml冰乙酸溶解，置棕色瓶中，密闭保存。③结晶紫指示剂；2g/L，取2g结晶紫，加100ml冰乙酸；④高氯酸标准滴定液，0.1mol/L的溶液。
3、测定
取试样预先在105℃烘箱中干燥至恒重，称取干燥试样0.4g（精确到0.0002g），加50ml冰乙酸加热溶解，加25ml乙酸汞溶液，冷却，加结晶紫指示剂2滴，用0.1mol/L的高氯酸标准溶液滴定到溶液呈绿色，同时作空白试验。
X%= （V-V0）×C×0.01536 x m×100
C----高氯酸标准溶液的浓度mol/L
V---试验组消耗高氯酸标准溶液的体积ml
V0---空白组消耗高氯酸标准溶液的体积ml
m---试样质量。
二、氯化胆碱
称取经105℃干燥至恒重的试样1g（精确到0.0002g），置于100ml容量瓶中，加水70ml 混匀，在约80℃水浴上加热15min，取出，在电动振荡器振荡20min，用水定容至100ml，过滤，吸取10ml滤液于100ml高型烧杯中，在冰箱内冷却到5℃以下，加10ml雷氏盐溶液（2%），不时搅拌反应30min（再令沉淀静置陈化15min），然后将沉淀定量到转移到事先在105℃烘干至恒重的玻璃砂芯坩埚中，减压抽滤，在用水洗涤沉淀3-4次，每次10ml，将装有沉淀的坩埚滤器放入烘箱，105℃烘2h称重。
氯化胆碱%= 沉淀重×3.3045 样品重量×100%
雷氏盐甲醇溶液（2%）：2g雷氏盐，溶于100ml甲醇中，放置于低温下保存。
胺盐定性分析：称取3-4g试样，煮50ml水至70-80℃，在加样品，摇匀充分溶解，过滤于150ml三角瓶中，加入1ml浓硫酸，摇匀，将滤液煮沸，用氨制硝酸盐试剂沾滤纸测其
气，观察试纸颜色是否发黑，继续煮1-2min，从电炉上取下放冷，加40%氢氧化钠5ml再煮沸，用PH湿润试纸测其蒸气的PH值，PH在7-8为合格。
氨制硝酸银溶液：取硝酸银1g，加水20ml，滴加氨试剂（取浓氨水400ml，加水至1000ml），边加边搅拌，至棕色沉淀将近全溶，过滤，置于棕色瓶中，在暗处保存。
（二）仲裁法（非水滴定法）：
原理：采用非水滴定法，用乙酸汞将氯化胆碱转化成乙酸盐和难电离的氯化汞，在乙酸介质中，以高氯酸对生成的乙酸盐进行滴定。
试剂：5%乙酸汞溶液、50g/L（称取5g乙酸汞研细，用微热的冰乙酸溶解并稀释至100ml，在棕色瓶中密封保存；0.2%结晶紫、2g/L（称取0.2g，加100ml冰乙酸）
测定步骤：称取试样0.3g（精确到0.0002g）置于100ml锥形瓶中，加20ml冰乙酸，2ml 乙酸酐，10ml乙酸汞溶液和2滴结晶紫指示剂，摇匀，用高氯酸标准溶液滴定至溶液呈纯蓝色。即为终点。同时做空白试验。
X%= C×（V1-V0）×139.63 x m×1000 ×100
C-----高氯酸标准溶液的浓度，mol/L；
V1----试验组消耗高氯酸溶液的体积，ml；
V0----空白组消耗高氯酸溶液的体积，ml；
m----样品的质量，g。
139.63-----氯化胆碱的分子量。
三、维生素B6
称0.15g样品（精确到0.0002g），加冰乙酸20ml，乙酸汞溶液5ml，温热溶解，放冷，加结晶紫指示剂1滴，用高氯酸标准溶液滴定至溶液呈蓝绿色，同时做空白校正。
VitB6%= （V-V0）×F×0.02056 x m×100
V----样品溶液耗高氯酸标准溶液的体积，ml；
V0----空白溶液耗高氯酸标准溶液的体积，ml；
F-----高氯酸标准溶液浓度，mol/L；
m-----样品重，g。
本法适用于化学合成制得的vitB6。
四、维生素B2（核黄素）
避光操作，称取0.075g（精确到0.0002g），置于烧杯中，加冰乙酸1ml和水75ml，加热溶解后，加水稀释放冷，移置500ml容量瓶中，用水定容。摇匀，吸取10ml于100ml容量瓶中，加1.4%乙酸钠溶液7ml。并用水定容，同时做空白试验作对照。以444nm波长测吸光度。
VitB2%= A x 323×L×C×100= 50A x 323m×100%
A-----样品吸光度；
323----维生素B2的系数；
L----光路长度1cm；
C-----100ml溶液中样品的g数。
五、维生素C（包被）
称取0.2g于250ml三角瓶中，加水100ml（煮沸，冷却），10ml冰乙酸，1ml1%淀粉指示剂，用0.1mol/L碘标准溶液滴定至溶液为蓝色。
VitC%= V×F×0.00886 x m×100
V-----消耗碘标准溶液的体积，ml；
m----试样质量，g；
F---浓度校正系数（碘标液/样品液浓度）碘标准溶液的浓度，mol/L。
四、氨基酸
一、赖氨酸硫酸盐含量的测定
1、标准曲线的绘制
标准贮备液：称取L-赖氨酸2克左右于1000ml容量瓶中,加1mol/L盐酸1ml用水溶解，定容。则浓度大约在0.2mg/ml.
标准曲线的绘制:分别吸取3.0,5.0,10.0,11.0,12.0,13.0和14.0ml标准贮备液于100ml容量瓶中,加水定容摇匀.在以上各容量瓶中分别吸取 2.00ml于比色管中,然后在每只比色管中再加10ml印三酮显色液,不定容,用力振摇.于沸水浴中水浴40分钟.立即冷却至室温.同时作空白(只是不加分解液).在分光光度计上于475nm波长处,以空白调零,测量各吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,作图.
2、样品的测定：
:称取样品1.5克左右,加1mol/L的盐酸7ml充分溶解样品，用水定容，过滤，吸取2.00ml 于100ml容量瓶中，加水定容，摇匀。其它同作标准曲线的步骤。测出吸光度。
3、计算：
于标准曲线上查出所测样品的浓度，代入公式
X（%）= C×500 x M
C--------为从标准曲线上查得的样品的浓度。
M-------样品的质量。
500-----为样品稀释的倍数和转变为百分含量的系数。
（空白加样品液和空白试液。）
（一）原理：赖氨酸在PH≤3.0是与茚三酮反应生成红色化合物，其颜色深浅与赖氨酸含量存在性性关系。
（二）试剂：1、茚三酮A液，称取茚三酮1.50g于烧杯中，量取110ml乙二醇-甲谜于烧杯中，溶解。
2、茚三酮B液，称取1.80g二水氯化铜（CuCl2·2H2O）于烧杯中，再量取0.1mol/L柠檬酸39ml于烧杯中，搅拌使其溶解。
3、将A、B两液全部转入1000ml容量瓶中定容，摇匀得茚三酮显色液。
4、赖氨酸空白显色液、称取1.80g二水氯化铜（CuCl2·2H2O）于烧杯中，再量取0.1mol/L 柠檬酸39ml于烧杯中，搅拌使其溶解。转移至1000ml容量瓶中定容，摇匀即可。
二、苏氨酸的检测
允许相对偏差不得超过0.3%.
含量：试样先在105度干燥至恒重，称取样品0.2克,置于250ml的三角瓶中,加3ml甲酸和50ml冰乙酸使之溶解，5ml乙酸汞，10滴α-奈酚苯基甲醇指示剂,用0.1mol/L的高氯酸标液滴定至橙黄→黄绿色为终点，并做空白试验校正.
若滴定样品时与标定高氯酸滴定液时的温度差在10度,则应重新标定,若未超过10度,则可根据下式将高氯酸滴定浓度加以校正.
C1= C0 (1+0.0011)(t1-t0)
结果计算:
样品中L-苏氨酸的含量按式计算:
X%= 0.1191×C1×(V1-V0)×100 m%
鉴别试验：本鉴别试验采用薄层层析法
试剂和溶液：L-苏氨酸标准品:生化试剂BR,
硅胶GF254薄层层析板.若发现受潮,需要80度烘干30分钟,恢复活性后使用.
展开剂:正丁醇:醋酸:水=6.17:2.86:1(体积比)
显色剂:0.5%茚三酮丙酮溶液.
鉴别步骤：取适量样品与L-苏氨酸标准品,用蒸馏水分别制成浓度30毫克每毫升的溶液,照薄层色谱法试验.取上述两种溶液0.5毫升分别点样于同一硅胶薄层板上,将点好的样的薄层板放入层析缸的展开剂中展开,展开后于70度烘干.以0.5%茚三酮显色剂喷雾,70度烘干显色.供试品与L-苏氨酸标准品均显紫红色,两者主斑点位置相同,则判定本品为L-苏氨酸．
试剂：盐酸：１＋３；冰乙酸：６％（v/v）溶液；硫化钠：１克硫化钠溶于１０ml水中，临用时新配制；铅标准溶液：１ml
比旋度：称取干燥试样3g，用水溶解，转移至50ml容量瓶，加水定容，摇匀过滤，测定，预热旋光仪后，用蒸馏水调零，润洗至少2遍。苏氨酸为右旋用“-”
三、赖氨酸
1、失重（水分），称取约1g试样于105℃烘箱中烘至恒重。
2、含量测定：称取约0.2g试样，加水3ml甲酸（使之溶解后），加5ml冰乙酸和5ml乙酸汞，加10滴α指示剂，用0.1mol/L高氯酸的冰乙酸标准溶液滴定至溶液由橙黄色变为黄绿色为终点。
X%= C×（V-V0）×0.09132 x m×100
C-----标准溶液的浓度，mol/L；
V----消耗标准溶液的体积，ml；
V0----0.05ml；
m----试样质量，g。
溶液的比旋度：指在液层长度为1dm，浓度为1g/mp，温度为20℃及用钠光谱线波长测定的旋光度，符号用[α]20δ表示，单位（°）度，左旋以负值，右旋以正值表示：
3、比旋度：称取约2g样品，加0.5g活性炭，用10ml（1+1）盐酸溶解，煮沸过滤，用（1+1）洗涤数次，转入50ml容量瓶中，用（1+1）盐酸定容。赖氨酸为左旋用“+”或不用。
[a]10D= 100a L·C
四、DL-蛋氨酸
性状：本品为白色或淡黄色的结晶粉末，具有微弱的含硫化合物或蛋氨酸的特殊气味，易溶于水，稀酸或稀碱，微溶于乙醇，不溶于乙醚，无旋光性，熔点为281℃分解，其1%的水溶液的PH值为5.6-6.1。
鉴别：1、取本品25mg于干燥烧杯中，加入由无水硫酸铜饱和的硫酸1ml，应立即显黄色。
2、取本品0.5g，加20ml水溶解时，溶液是无色至淡黄色，差不多是澄清液。
样品测定：将本品在105℃烘干至恒重，准确称取0.2-0.25g（0.26）（精确到0.0002g）置于500ml锥形瓶中，加水100ml，磷酸氢二钾（K2HPO4）（500g/L）10ml，磷酸二氢钾（KH2PO4）（200g/L）10ml，碘化钾（KI）（200g/L）10ml，充分振荡溶解后，准确加入0.1mol/L碘溶液50ml（0.2mol、25ml），加塞摇匀，用水冲洗碘塞，并用水封口，在暗处放置30min，用0.05mol/LNa2S2O3标准溶液（滴定过量的碘）至溶液微黄色时，以淀粉作为指示剂，再滴溶液由黑色至无色，同时做空白试验。
X%= C×（V2-V1）×0.07460 x m×100
C----Na2S2O3标准溶液的浓度，mol/L；
V1----试验组消耗Na2S2O3标准溶液的体积，ml；
V2----空白组消耗Na2S2O3标准溶液的体积，ml；
m----试样质量，g。
五、抗生素
一、盐霉素含量测定（分光光度法）
1、香草醛试剂（现配现用），称取1.5g香蓝素溶于50ml甲醇，加0.25ml浓硫酸。
2、盐霉素标准贮备液，准确称取一定量的盐霉素标准品，用甲醇配成1000ug/ml标准贮备液于棕色瓶中，冰箱内保存。
3、标准中间工作液（现配现用），准确吸取标准盐霉素贮备液5ml用甲醇稀释至100ml。
4、标准曲线的绘制，取5个50ml容量瓶，分别准确加入3中溶液：0.0、2.0、4.0、6.0、8.0ml，150ug/ml的盐霉素标准中间工作液，各加3ml香草素试剂，转动，使之混合，60℃水浴25min，其中摇动瓶数次，冷却，用甲醇定容，于分光光度计518nm处，测定吸光度，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线图并建立回归方程。
5、样品制备稀释10000倍，12%称取0.35g（10%的称取0.49 g）于250ml碘量瓶中，加100ml 甲醇，加塞，搅拌30min，过滤，吸取滤液10ml于100ml容量瓶中，用甲醇定容，吸取上液5ml于50ml容量瓶中，各加3ml香草醛试剂，水浴定容，测得吸光度代入回归曲线方程。X%= C×稀释倍数 x m ×100%
C----吸光度在回归曲线方程查得的浓度，
m----试样的质量，g。
六、其他
一、氮（N）含量的测定（鱼粉）
称取0.5g样品，用滤纸将样品包好置干燥500ml凯氏烧瓶中，依次加入硫酸钾（K2SO4）或无水硫酸钠（Na2SO4）10g，硫酸铜（CuSO4）粉末0.5g，沿壁缓缓加入浓硫酸20ml，→消化：在凯氏烧瓶口放置一小漏斗，以45°角倾斜在电炉上加热（大概4h）。待溶液为明绿色后，继续加热30min，取下，放冷，沿瓶壁缓缓加水250ml，混匀放冷后，加氢氧化钠溶液（40%）75ml，加锌粒数粒→定氮，取硼酸50ml于500ml锥形瓶中，加甲基红-溴甲酚绿混合指示剂10滴，将冷凝管的一端浸入，加热蒸馏，至接受液的总体积为250ml时，提出尖端，停止蒸馏，馏出液用0.05moll/L硫酸标准液滴定至溶液由蓝绿色为灰紫色，同时作空白。
X%= （V-V0）×F×0.001401x m×（1-X1）×100
V-----滴定样品蒸馏液消耗标准硫酸液的体积，ml；
V0----滴定空白消耗硫酸标准液的体积，ml；
F-----硫酸标准溶液浓度校正系数，
m----样品质量，g。
X1----样品干燥失重，
七、标准溶液的配制及其标定
一、硝酸银（C AgNO3=0.1mol/L）标准溶液的配制
称取硝酸银17.5g，溶于1000ml水中，摇匀，溶液保存于棕色瓶中。
溶液的标定：称取基准氯化钠（NaCl）0.2g（110℃高燥至恒重）（精确到0.0002g），加水50ml 溶解，再加2%淀粉（不含Cl-）溶液5ml，碳酸钙（CaCO3）0.1g与荧光黄指示剂8滴，用配制好的硝酸银溶液滴定至溶液由黄绿色变成微红色。即为终点。
C AgNO3= m（NaCl）x V AgNO3×58.44 ×1000
C-----硝酸银溶液的浓度，mol/L；
m-----氯化钠的质量，g；
V----消耗硝酸银溶液的体积，ml；
58.44----每mol氯化钠的克数。
二、碘（CI2=0.1mol/L）标准溶液的配制
称取13g碘及35g碘化钾，溶于100ml水中，稀释至1000ml，摇匀，保存于棕色瓶中。
溶液的标定：称取0.15g基准三氧化二砷于碘量瓶中，加4ml氢氧化钠（1mol/L）溶解，加50ml水，2滴酚酞指示剂（10g/L），用硫酸（1mol/L）中和，加碳酸氢钠（NaHCO3）3g及3ml淀粉（5g/L），用配制好的碘液滴定至溶液为浅蓝色，同时作空白试验。
CI2= m x（V1-V2）×0.04946
C---碘溶液的浓度，mol/L；
V1----试验组消耗碘溶液的体积，ml；
V2----空白组消耗碘溶液的体积，ml；
m----三氧化二砷的质量，g。
三、硫代硫酸钠（CNa2S2O3=0.1mol/L）标准溶液的配制
称取26gNa2S2O3·5H2O或16g Na2S2O3，溶于1000ml水中，缓缓煮沸10min，冷却，放置两周后过滤备用。
溶液的标定：称取0.15g（精确到0.0001g）于120℃烘至恒重的基准重铬酸钾，置于碘量瓶中，溶于25ml水，加2g碘化钾及20ml硫酸（20%），摇匀，于暗处放置10min，加150ml 水，用配制好的Na2S2O3（0.1mol/L）滴定，近终点时加3ml淀粉指示剂（5g/L），继续滴定至溶液由蓝色变为亮绿色，同时作空白试验。
C Na2S2O3= m x（V1-V2）×0.04903
C------ Na2S2O3标准溶液的摩尔浓度，mol/L；
V1-----试验组消耗Na2S2O3溶液的体积，ml；
V2----空白组消耗Na2S2O3溶液的体积，ml；
m-----重铬酸钾的质量，g。
0.04903-------与1.00ml Na2S2O3标准溶液相当的以g表示的重铬酸钾的质量。
五、高氯酸（CHClO4=0.1mol/L）标准溶液的配制
量取8.5ml高氯酸，在搅拌下注入500ml冰乙酸中，混匀。在室温下滴加20ml乙酸酐，搅拌至溶液均匀。冷却后用冰乙酸稀释至1000ml，摇匀。
溶液的标定：称取0.6g于105-110℃烘至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾（精确到0.0001g），置于干燥的锥形瓶中，加入50ml冰乙酸，温热溶解。加2-3滴结晶紫指示剂（5g/L），用配好的高氯酸溶液滴定至溶液由紫色变为蓝色（微带紫色）。
C= m x V×0.2042
C------高氯酸标准溶液的浓度，mol/L；
V-----消耗高氯酸溶液的体积，ml；
m-----邻苯二甲酸氢钾的质量，g。
（注：本溶液使用前标定，标定高氯酸标准溶液时的温度应与使用该标准溶液滴定时的温度相同。）
六、盐酸（CHCl=0.1mol/L）标准溶液的配制
量取9.0ml盐酸，注入1000ml水，摇匀。
溶液的标定：称取于270-300℃灼烧至恒重的基准无水碳酸钠0.2g（精确到0.0001g），溶于50ml水中，加10滴溴甲酚绿-甲基红混合指示剂，用配好的盐酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色，煮沸2min，冷却后继续滴定至溶液再呈暗红色。同时作空白。
C= m x（V1-V2）×0.05299
C-----盐酸标准溶液的浓度，mol/L；
m-----无水碳酸钠的质量，g；
V1----试验组消耗盐酸溶液的体积，ml；
V2----空白组消耗盐酸溶液的体积，ml；
七、乙二胺四乙酸二钠（CEDTA =0.1mol/L）标准溶液的配制
称取40g乙二胺四乙酸二钠，加热溶于1000ml水中，冷却，摇匀。
溶液的标定：称取0.25g于800℃灼烧至恒重的基准氧化锌（精确到0.0001g），用少量水润湿，加2ml盐酸溶液（20%）使样品溶解，加100ml水用氨水溶液（10%）中和至PH7-8，加10ml氨-氯化铵缓冲溶液甲（PH≈10）及5滴铬黑体指示剂（5g/L），用配好的乙二胺四乙酸二钠（0.1mol/L）溶液滴定至溶液由紫色变为纯蓝色。同时作空白。
C= m x（V1-V2）×0.08138
C-----乙二胺四乙酸二钠标准溶液的浓度，mol/L；
V1----试验组消耗乙二胺四乙酸二钠溶液的体积，ml；
V2----空白组消耗乙二胺四乙酸二钠溶液的体积，ml；
m----氧化锌的质量，g。
八、高锰酸钾（CK2MnO4=0.1mol/L）标准溶液的配制
称取3.3g高锰酸钾，溶于1050ml水中，缓缓煮沸15min，冷却后置于暗处保存两周，过滤于干燥的棕色瓶中。
溶液的标定：称取0.2g于105-110℃烘至恒重的基准草酸钠（精确到0.0001g），溶于100ml 硫酸溶液（8+92），用配好的高锰酸钾溶液滴定，近终点时加热至65℃，继续滴定至溶液呈粉红色保持30秒，同时作空白。
C K2MnO4= m x（V1-V2）×0.06700
C-----高锰酸钾标准溶液的浓度，mol/L；
V1----试验组消耗高锰酸钾溶液的体积，ml；
V2----空白组消耗高锰酸钾溶液的体积，ml；
m----草酸钠的质量，g。
九、氢氧化钠（C NaOH=1mol/L）标准溶液的配制
称取100g氢氧化钠，溶于100ml水中，摇匀，注入聚乙烯容器中，密闭放置至溶液清亮。用塑料管虹吸取52ml上清液，注入1000ml无二氧化碳的水中，摇匀。
溶液的标定：称取于105-110℃烘至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾6g（精确到0.0001g），溶于80ml无二氧化碳的水中，加2滴酚酞指示剂（10g/L），用配好的氢氧化钠溶液滴定至溶液呈粉红色，同时作空白试验。
C NaOH= m x（V1-V2）×0.2042
C-----氢氧化钠标准溶液的浓度，mol/L；
V1----试验组消耗氢氧化钠溶液的体积，ml；
V2----空白组消耗氢氧化钠溶液的体积，ml；
m----邻苯二甲酸氢钾的质量，g。
抗体稀释液 牛血清白蛋白1g NaN3 0.08g 30% Triton 1ml（PBS） 定容PBS（1x）100ml 驴血清封闭液 血清5-10ml NaN3 0.05g 30% Triton 0.5ml（PBS） 定容PBS（1x）100m 抗原稀释液 A 18ml+ B 82 ml5 双蒸水1000ml ,PH=6 封片液 Na2CO3 0.689g NaHCO3 1.554g 溶于50ml 双蒸水 50ml 甘油加热混合 抗原修复液 A:柠檬酸2.1g----100ml ddH2O B:二水柠檬酸三钠14.7g-----500ml A 18ml+ B 82ml+900mlddH2O--------1L(PH=6.0) Neurobasal Media glutamine, 1%penicillin/streptomycin, 10 ng/mL platelet-derived growth factor, 10 ng/mL FGF, and 2% B27 BRDU BrdU is a brominated analog of thymidine. STABILITY / STORAGE AS SUPPLIED: BrdU should be stored at -0°C and desiccated. If properly stored, it will have a shelf-life of two years. SOLUBILITY / SOLUTION STABILITY: Sigma routinely tests the solubility at 50 mg/mL in 1 M ammonium hydroxide yielding a clear colorless solution. It can be dissolved in water at a concentration of up to 10 mg/mL. It is also soluble in DMF, DMSO and water (with heat) at 50-100 mg/mL. Solutions at neutral pH should be stable for at least 6 months when stored frozen at -20°C. APPLICATIONS: BrdU is selectively incorporated into cell DNA at the S phase of cell cycle. The use of BrdU as a thymidine analog has made possible the identification of DNA synthesis in suspensions of cells, cell smears and tissue sections. The incorporation of BrdU into DNA
实验室常用溶剂共沸体系 18、00、960浓盐酸1、19 12、 10、372浓硝酸1、42 15、 90、704磷酸1、70 14、 80、855冰醋酸1、05 17、4 50、998浓氨水0、90 14、5 30、566浓氢氧化钠1、54 19、 40、505注：表中数据录自John A、 Dean、Lange’s Handbook of Chemistry、13th ed、1985常见的共沸混合物1）与水形成的二元共沸物（水沸点100℃）溶剂沸点/℃共沸点/℃含水量/%溶剂沸点/℃共沸点/℃含水量/%氯仿 61、2 56、 12、5甲苯1
85、020四氯化碳77、0 66、04、0正丙醇97、2 87、7 28、8苯 80、4 69、 28、8异丁醇108、4 89、9 88、2丙稀腈 78、0 70、0 13、0二甲苯137- 40、5 92、0 37、5二氯乙烷 83、7 72、0 19、5正丁醇1 17、7
37、5乙睛82、0 76、0 16、0吡啶1 15、5 94、042乙醇78、3 78、 14、4异戊醇1 31、0 95、1 49、6乙酸乙酯77、1 70、 48、0正戊醇1 38、3 95、4 44、7异丙醇82、4 80、4 12、1氯乙醇1
97、8 59、0乙醚353 41、0二硫化碳464 42、0甲酸101107262）常见有机溶剂间的共沸混合物共沸混合物组分的沸点/℃共沸物的组成(质量)/%共沸物的沸点/℃乙醇-乙酸乙酯 78、3， 78、030：70 72、0乙醇-苯 78、3， 80、632：68 68、2乙醇-氯仿 78、3， 61、27：93 59、4乙醇-四氯化碳 78、3， 77、016：84 64、9乙酸乙酯-四氯化碳 78、0， 77、043：57 75、0甲醇-四氯化碳
常用试剂的溶解性 1 . 二甲胺：有机物和无机物的优良溶剂，溶于水、低级醇、醚、低极性溶剂， 强烈刺激性。 2 . 石油醚：不溶于水，与丙酮、乙醚、乙酸乙酯、苯、氯仿及甲醇以上高级醇 混溶，与低级烷相似。 3 . 乙醚：微溶于水，易溶与盐酸，与醇、醚、石油醚、苯、氯仿等多数有机溶 剂混溶。麻醉性 4 . 戊烷：与乙醇、乙醚等多数有机溶剂混溶，低毒性。 5 .二氯甲烷：与醇、醚、氯仿、苯、二硫化碳等有机溶剂混溶。低毒性，麻醉 性强 7 . 二硫化碳：微溶与水，与多种有机溶剂混溶。麻醉性，强刺激性 8 .丙酮：与水、醇、醚、烃混溶。低毒，类乙醇，但较大 9 . 1，1-二氯乙烷：与醇、醚等大多数有机溶剂混溶。低毒、局部刺激性 10 . 氯仿：与乙醇、乙醚、石油醚、卤代烃、四氯化碳、二硫化碳等混溶。中 等毒性，强麻醉性 11 . 甲醇：与水、乙醚、醇、酯、卤代烃、苯、酮混溶。中等毒性，麻醉性 12 . 四氢呋喃：优良溶剂，与水混溶，很好的溶解乙醇、乙醚、脂肪烃、芳香烃、氯化烃。吸入微毒，经口低毒。 13 . 己烷：与甲醇部分溶解，与比乙醇高的醇、醚、丙酮、氯仿混溶。低毒， 麻醉性，刺激性 14 . 三氟代乙酸：与水、乙醇、乙醚、丙酮、苯、四氯化碳、己烷混溶，溶解 多种脂肪族、芳香族化合物。 15 . 1，1，1-三氯乙烷：与丙酮、、甲醇、乙醚、苯、四氯化碳等有机溶剂混溶。低毒类溶剂 16 . 四氯化碳：与醇、醚、石油醚、冰醋酸、二硫化碳、氯代烃混溶。氯代甲 烷中毒性最强。 17 . 乙酸乙酯：与醇、醚、氯仿、丙酮、苯等大多数有机溶剂互溶，能溶解某
些金属盐。低毒，麻醉性 18 . 乙醇：与水、乙醚、氯仿、酯、烃类衍生物等有机溶剂混溶。微毒类，麻 醉性 19 . 丁酮：与丙酮相似，与醇、醚、苯等大多数有机溶剂混溶。低毒，毒性强 于丙酮 20 . 苯：难溶于水，与甘油、乙二醇、乙醇、氯仿、乙醚、四氯化碳、二硫化碳、丙酮、甲苯、二甲苯、冰醋酸、脂肪烃等大多有机物混溶。强烈毒性 21 . 乙睛：与水、甲醇、乙酸甲酯、乙酸乙酯、丙酮、醚、氯仿、四氯化碳、 氯乙烯及各种不饱和烃混溶，但是不与饱和烃混溶。中等毒性，大量吸入蒸气， 引起急性中毒 22 . 异丙醇：与乙醇、乙醚、氯仿、水混溶。微毒，类似乙醇 23 . 甲苯：不溶于水，与甲醇、乙醇、氯仿、丙酮、乙醚、冰醋酸、苯等有机 溶剂混溶。低毒类，麻醉作用。 24 .乙二胺：溶于水、乙醇、苯和乙醚，微溶于庚烷。刺激皮肤、眼睛 25 . 丁醇：与醇、醚、苯混溶。低毒，大于乙醇3倍。 26 . 乙酸：与水、乙醇、乙醚、四氯化碳混溶，不溶于二硫化碳及C12以上高级脂肪烃。低毒，浓溶液毒性强 27 .吡啶：与水、醇、醚、石油醚、苯、油类混溶。能溶多种有机物和无机物。 低毒，皮肤黏膜刺激性 28 . 乙酸丁酯：优良有机溶剂，广泛应用于医药行业，还可以用做萃取剂。一 般条件毒性不大 29 . N，N-二甲基甲酰胺：与水、醇、醚、酮、不饱和烃、芳香烃烃等混溶， 溶解能力强。低毒。 30 . N，N-二甲基乙酰胺：溶解不饱和脂肪烃，与水、醚、酯、酮、芳香族化 合物混溶。微毒类 31 . 二甲亚砜：与水、甲醇、乙醇、乙二醇、甘油、乙醛、丙酮乙酸乙酯吡啶、 芳烃混溶。微毒，对眼有刺激性 32 . 甲酰胺：与水、醇、乙二醇、丙酮、乙酸、二氧六环、甘油、苯酚混溶， 几乎不溶于脂肪烃、芳香烃、醚、卤代烃、氯苯、硝基苯等。皮肤、黏膜刺激性、
实验室溶液的配制 一．蛋白试验 （1）4%的硼酸吸收液：分析纯硼酸，4g溶于50ml水，加热使其溶解，冷却，再用蒸馏水标至100ml。 （2）40%的氢氧化钠：分析纯氢氧化钠，40g溶于100ml水。 （4）0.1mol/L盐酸标准溶液：量取9ml盐酸（GB622，分析纯），用蒸馏水定容到1000ml，摇匀。 标定：在电子天平上准确称取5份烘干至恒重的基准无水碳酸钠，每份0.2g左右，记下所称的基准无水碳酸钠的质量m，将5份基准无水碳酸钠分别置于5个250ml锥形瓶中（提前标号），加入50ml水，加2~3滴甲基红指示剂，然后用待标定的0.1mol/L的HCL标准溶液滴定至溶液由黄色变为灰红色，记下消耗的盐酸标准液的体积Vo，然后将滴定完的锥形瓶在电炉上烧至沸腾，然后转小火保持沸腾2分钟,溶液中的二氧化碳被赶出后溶液又变为蓝绿色，冷却，再用盐酸标准溶液滴定至溶液变为灰红色，记下消耗的盐酸标准液体积Vi，两次滴定之和即为消耗的盐酸标准液体积。平行滴定5份基准无水碳酸钠，记录好 每份的数据。计算公式：C(Hcl)＝m/(V o+Vi)×0.05299，五次结果的平均值即为盐酸标准液的浓度，将盐酸标准液转入1000ml容量瓶保存即可。贴上标签标明配制时间，配制人，溶液浓度。 注：测凯氏定氮仪漏气不漏气的方法——取分析纯硫酸铵0.2g左右做蛋白试验，测其氮含量，作3个平行试验，测得硫酸铵含氮量为21.19%±0.2%，否则应检查加减，蒸馏，滴定各步骤是否正确。 二．钙的测定 （1）10%o淀粉溶液的配制：10g淀粉溶于水，加热使其溶解，冷却后转移到1000ml容量瓶，用蒸馏水定容到1000ml。 （2）1/1三乙醇胺溶液（即50%溶液）：取100ml三乙醇胺溶于100ml
实验室常用溶液及试剂配制 一、实验室常用溶液、试剂的配制-------------------------------------------------------1 表一普通酸碱溶液的配制 表二常用酸碱指示剂配制 表三混合酸碱指示剂配制 表四容量分析基准物质的干燥 表五缓冲溶液的配制 1、氯化钾-盐酸缓冲溶液 2、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 3、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 4、乙酸-乙酸钠缓冲溶液 5、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液 6、硼砂-氢氧化钠缓冲溶液 7、氨水-氯化铵缓冲溶液 8、常用缓冲溶液的配制 二、实验室常用标准溶液的配制及其标定-----------------------------------------------4 1、硝酸银（C AgNO3=0.1mol/L）标准溶液的配制 2、碘（C I2=0.1mol/L）标准溶液的配制 3、硫代硫酸钠（C Na2S2O3=0.1mol/L）标准溶液的配制 4、高氯酸（C HClO4=0.1mol/L）标准溶液的配制 5、盐酸（C HCl=0.1mol/L）标准溶液的配制 6、乙二胺四乙酸二钠（C EDTA =0.1mol/L）标准溶液的配制 7、高锰酸钾（C K2MnO4=0.1mol/L）标准溶液的配制 8、氢氧化钠（C NaOH=1mol/L）标准溶液的配制 三、常见物质的实验室试验方法 ----------------------------------------------------------6 1、柠檬酸（C6H8O7·H2O） 2、钙含量测定（磷酸氢钙CaHPO4、磷酸二氢钙Ca（H2PO4）2·H2O、钙粉等） 3、氟（Fˉ）含量的测定 4、磷（P）的测定 5、硫酸铜（CuSO4·5H2O） 6、硫酸锌（ZnSO4·H2O） 7、硫酸亚铁（FeSO4·H2O） 8、砷 9、硫酸镁（MgSO4） 四、维生素检测--------------------------------------------------------------------------------8 1、甜菜碱盐酸盐 2、氯化胆碱
实验室常用溶液配制示例 氢氧化钠滴定液(1、0.5或0.1mol/L) NaOH=40.00 40.00g→1000mL 20.00g→ 1000mL 4.000g→1000mL 【配制】取氢氧化钠适量，加水振摇使溶解成饱和溶液，冷却后，置聚乙烯塑料瓶中，静置数日，澄清后备用。氢氧化钠滴定液(1mol/L) 取澄清的氢氧化钠饱和溶液56mL，加新沸过的冷水使成1000mL，摇匀。氢氧化钠滴定液(0.5mol/L) 取澄清的氢氧化钠饱和溶液28mL，加新沸过的冷水使成1000mL，摇匀。 氢氧化钠滴定液(0.1mol/L) 取澄清的氢氧化钠饱和溶液5.6mL，加新沸过的冷水使成1000mL，摇匀。 【标定】氢氧化钠滴定液(1mol/L) 取在105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约6g，精密称定，加新沸过的冷水50mL，振摇，使其尽量溶解；加酚酞指示液2滴，用本液滴定；在接近终点时，应使邻苯二甲酸氢钾完全溶解，滴定至溶液显粉红色。每1mL的氢氧化钠滴定液(1mol/L) 相当于204.2mg的邻苯二甲酸氢钾。根据本液的消耗量与邻苯二甲酸氢钾的取用量，算出本液的浓度，即得。氢氧化钠滴定液(0.5mol/L) 取在105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约3g，照上法标定。每1mL的氢氧化钠滴定液(0.5mol/L)相当于102.1mg 的邻苯二甲酸氢钾。氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)，取在105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约0.6g，照上法标定。每1mL的氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于20.42mg的邻苯二甲酸氢钾。如需用氢氧化钠滴定液(0.05、0.02或0.01mol/L)时，可取氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)加新沸过的冷水稀释制成。必要时，可用盐酸滴定液(0.05、0.02或0.01mol/L)标定浓度。 【贮藏】置聚乙烯塑料瓶中，密封保存；塞中有2孔，孔内各插入玻璃管1支，1管与钠石灰管相连，1管供吸出本液使用。 盐酸滴定液(1、0.5、0.2或0.1mol/L) HCl=36.46 36.46g→1000mL；18.23g→ 1000mL 7.292g→1000mL；3.646g→1000mL 【配制】盐酸滴定液(1mol/L)：取盐酸90mL，加水适量使成1000mL，摇匀。 盐酸滴定液(0.5、0.2或0.1mol/L)：照上法配制，但盐酸的取用量分别为45、18或9.0mL。【标定】盐酸滴定液（1mol/L）取在270～300℃干燥至恒重的基准无水碳酸钠约1.5g，精密称定，加水50mL使溶解，加甲基红－溴甲酚绿混合指示液10滴，用本液滴定至溶液由绿色转变为紫红色时，煮沸2分钟，冷却至室温，继续滴定至溶液由绿色变为暗紫色。每1mL 的盐酸滴定液(1mol/L)相当于53.00mg的无水碳酸钠。根据本液的消耗量与无水碳酸钠的取用量，算出本液的浓度，即得。 盐酸滴定液(0.5mol/L)照上法标定，但基准无水碳酸钠的取用量改为约0.8g。每1mL的盐酸滴定液(0.5mol/L)相当于26.50mL的无水碳酸钠。 盐酸滴定液(0.2mol/L)：照上法标定，但基准无水碳酸钠的取用量改为约0.3g。每1mL的盐酸滴定液(0.2mol/L)相当于10.60mg的无水碳酸钠。
实验室无水试剂的制备 1. 无水甲苯、无水四氢呋喃、无水二氧六环的制作： 钠：除水； 二苯甲酮：指示剂，它在绝对无水的条件下显蓝色 用量方面： 1000ml溶剂需要最多10克钠，二苯甲酮大约需要约5克 操作： 将需要的装置(通常需要：1000ml的圆底瓶，球形冷凝管，直形冷凝管，尾接管，三角瓶，三通，玻璃塞)，烘干，冷却，待用。 在圆底瓶中加入甲苯、二苯甲酮，用镊子加取钠块，棉花擦去钠块表面的煤油，然后用剪刀将钠剪成小块，通过加料漏斗加入到甲苯中；然后架好装置，将装置内的空气用氮气置换了（包括接收瓶）。加热回流2～3h后，回流变蓝后，稍冷（不回流了就可以），改为蒸馏装置，接少量前馏分，收集需要的部分。当圆底烧瓶中液体剩余大约50mL时，停止加热 后处理：圆底烧瓶中剩余的钠球，加无水乙醇室温搅拌，至完全分解。倒入废液瓶。 2. 无水DMF (N, N- 二甲基甲酰胺)的制作： DMF提前一天用无水硫酸镁干燥（25g/L）； 将需要的装置(通常需要：1000ml的圆底瓶，直形冷凝管，尾接管，三角瓶，三通，玻璃塞，水泵)，烘干，冷却，待用。在圆底瓶中加入干燥过的DMF，然后架好装置，用氮气球检查装置的气密性。然后60℃-70℃减压蒸馏接少量前馏分，收集需要的部分。 3. 无水二氯甲烷的制作： ①氢化钙：除水； 用量：50g/L 操作：回流3-4小时后，蒸馏，4A分子筛保存。 后处理：圆底烧瓶中剩余的CaH2，加无水乙醇室温搅拌，至完全分解。倒入废液瓶。 ②无水氯化钙，分子筛； 操作：室温搅拌过夜，蒸馏出来用分子筛保存 4. 无水乙醚的制作： 钠：干燥； 用量：7-8g /500mL 操作：将钠剪成小块状干燥24小时后待用，500mL的试剂瓶用19#的橡胶塞塞紧，插上瘪气球。 备注：旋蒸乙醚时温度不能太高，不要超过30℃；放置太久的乙醚不能加热，因含过氧化物，易于爆炸。
配制溶液的一般实验步骤 配制溶液步骤因配置的溶液不同而有所不同，现举两个例 子： 举例 1：配置 0.05mol/L ，400mL NaOH 溶液的步骤：要准确配置氢氧化钠的浓度，则要用容量瓶定容，实验室没有 400 毫升的容量瓶，则选用 500 毫升的容量瓶。 1.计算需要氢氧化钠的质量：0.5L*0.05mol/L*40.01=1.000 克 2.称 1.000 克氢氧化钠于烧杯中，加少量水溶解，然后倒入 500 毫升容量瓶里，分 3 次洗烧杯，将溶液全部倒入容量瓶里，最后用水稀释至刻度线，摇匀，即，得到 0.05mol/L 的氢氧化钠溶液。 如果不需要很准确的话，可以直接用量筒量 400 毫升，称的时候只要称 0.8 克就可以了。举例 2：配置 1.5mol/L 的稀硫酸 200mL 步骤： 第 1 步：计算：根据 C1V1=C2V2 ，计算需要浓硫酸的体积；第 2 步：量取，利用刻度吸管吸取需要浓硫酸的体积；第 3 步：稀释，将浓硫酸转移到小烧杯中，加少量水稀释；第 4 步：转移 , 待溶液温度降低后，将烧杯中的硫酸转移到 200mL 容量瓶中； 第 5 步：洗涤，洗涤小烧杯，和转移的时候用到的玻璃棒， 至少三次，将洗涤的水一并转移到容量瓶中； 第 6 步：定容，加水定容到刻度线，在距离刻度线一厘米左右改
用胶头滴管定容； 第 7 步：摇匀 ,将溶液摇匀 ,如果液面下降也不可再加水定容；第 8 步：将配得的溶液转移至试剂瓶中，贴好标签；举例 3：配制 500mL ，0.1mol/L 碳酸钠溶液步骤及注意事项所需的仪器：烧杯、容量瓶、玻璃棒、胶头滴管、分析天平、药匙、量筒步骤：第一步：计算：所需碳酸钠的质量 =0.5*0.1*106=5.3 克；第二步：称量：在天平上称量 5.3 克碳酸钠固体，并将它倒入小烧杯中；第三步：溶解：在盛有碳酸钠固体的小烧杯中加入适量蒸馏水，用玻璃棒搅拌，使其溶解；第四步：移液：将溶液沿玻璃棒注入 500mL 容量瓶中；第五步：洗涤：用蒸馏水洗烧杯2?3次，并倒入 容量瓶中；第六步：定容：倒水至刻度线 1?2cm处改用胶头滴管滴到与凹液面平直；第七步：摇匀：盖好瓶塞，上下颠倒、摇匀；第八步：装瓶、贴签；误差分析：固体药品的称量与液体药品的量取是否准确；把溶液向容量瓶中转移，溶液洒了；未洗涤烧杯和玻璃棒；用待配液润洗了容量瓶；定容时水加多了或加少了；定容时未平视刻度线。仰视、俯视对溶液浓度有何影响？★俯视刻度线，实际加水量未到刻度线，使溶液的物质的量浓度增大；★仰 视刻度线，实际加水量超过刻度线，使溶液的物质的量浓度 减小。市售盐酸密度1.19,质量分数36%?38%以37%计 算：步骤： 1.计算：假若需要 2mol/L 的硫酸 100mL ，则需 37%
NMR Chemical Shifts of Common Laboratory Solvents as Trace Impurities Hugo E.Gottlieb,*Vadim Kotlyar,and Abraham Nudelman* Department of Chemistry,Bar-Ilan University, Ramat-Gan52900,Israel Received June27,1997 In the course of the routine use of NMR as an aid for organic chemistry,a day-to-day problem is the identifica-tion of signals deriving from common contaminants (water,solvents,stabilizers,oils)in less-than-analyti-cally-pure samples.This data may be available in the literature,but the time involved in searching for it may be considerable.Another issue is the concentration dependence of chemical shifts(especially1H);results obtained two or three decades ago usually refer to much more concentrated samples,and run at lower magnetic fields,than today’s practice. We therefore decided to collect1H and13C chemical shifts of what are,in our experience,the most popular “extra peaks”in a variety of commonly used NMR solvents,in the hope that this will be of assistance to the practicing chemist. Experimental Section NMR spectra were taken in a Bruker DPX-300instrument (300.1and75.5MHz for1H and13C,respectively).Unless otherwise indicated,all were run at room temperature(24(1°C).For the experiments in the last section of this paper,probe temperatures were measured with a calibrated Eurotherm840/T digital thermometer,connected to a thermocouple which was introduced into an NMR tube filled with mineral oil to ap-proximately the same level as a typical sample.At each temperature,the D2O samples were left to equilibrate for at least 10min before the data were collected. In order to avoid having to obtain hundreds of spectra,we prepared seven stock solutions containing approximately equal amounts of several of our entries,chosen in such a way as to prevent intermolecular interactions and possible ambiguities in assignment.Solution1:acetone,tert-butyl methyl ether,di-methylformamide,ethanol,toluene.Solution2:benzene,di-methyl sulfoxide,ethyl acetate,methanol.Solution3:acetic acid,chloroform,diethyl ether,2-propanol,tetrahydrofuran. Solution4:acetonitrile,dichloromethane,dioxane,n-hexane, HMPA.Solution5:1,2-dichloroethane,ethyl methyl ketone, n-pentane,pyridine.Solution6:tert-butyl alcohol,BHT,cyclo-hexane,1,2-dimethoxyethane,nitromethane,silicone grease, triethylamine.Solution7:diglyme,dimethylacetamide,ethyl-ene glycol,“grease”(engine oil).For D2O.Solution1:acetone, tert-butyl methyl ether,dimethylformamide,ethanol,2-propanol. Solution2:dimethyl sulfoxide,ethyl acetate,ethylene glycol, methanol.Solution3:acetonitrile,diglyme,dioxane,HMPA, pyridine.Solution4:1,2-dimethoxyethane,dimethylacetamide, ethyl methyl ketone,triethylamine.Solution5:acetic acid,tert-butyl alcohol,diethyl ether,tetrahydrofuran.In D2O and CD3OD nitromethane was run separately,as the protons exchanged with deuterium in presence of triethylamine. Results Proton Spectra(Table1).A sample of0.6mL of the solvent,containing1μL of TMS,1was first run on its own.From this spectrum we determined the chemical shifts of the solvent residual peak2and the water peak. It should be noted that the latter is quite temperature-dependent(vide infra).Also,any potential hydrogen-bond acceptor will tend to shift the water signal down-field;this is particularly true for nonpolar solvents.In contrast,in e.g.DMSO the water is already strongly hydrogen-bonded to the solvent,and solutes have only a negligible effect on its chemical shift.This is also true for D2O;the chemical shift of the residual HDO is very temperature-dependent(vide infra)but,maybe counter-intuitively,remarkably solute(and pH)independent. We then added3μL of one of our stock solutions to the NMR tube.The chemical shifts were read and are presented in Table 1.Except where indicated,the coupling constants,and therefore the peak shapes,are essentially solvent-independent and are presented only once. For D2O as a solvent,the accepted reference peak(δ)0)is the methyl signal of the sodium salt of3-(trimeth-ylsilyl)propanesulfonic acid;one crystal of this was added to each NMR tube.This material has several disadvan-tages,however:it is not volatile,so it cannot be readily eliminated if the sample has to be recovered.In addition, unless one purchases it in the relatively expensive deuterated form,it adds three more signals to the spectrum(methylenes1,2,and3appear at2.91,1.76, and0.63ppm,respectively).We suggest that the re-sidual HDO peak be used as a secondary reference;we find that if the effects of temperature are taken into account(vide infra),this is very reproducible.For D2O, we used a different set of stock solutions,since many of the less polar substrates are not significantly water-soluble(see Table1).We also ran sodium acetate and sodium formate(chemical shifts: 1.90and8.44ppm, respectively). Carbon Spectra(Table2).To each tube,50μL of the stock solution and3μL of TMS1were added.The solvent chemical shifts3were obtained from the spectra containing the solutes,and the ranges of chemical shifts (1)For recommendations on the publication of NMR data,see: IUPAC Commission on Molecular Structure and Spectroscopy.Pure Appl.Chem.1972,29,627;1976,45,217. (2)I.e.,the signal of the proton for the isotopomer with one less deuterium than the perdeuterated material,e.g.,C H Cl3in CDCl3or C6D5H in C6D6.Except for CHCl3,the splitting due to J HD is typically observed(to a good approximation,it is1/6.5of the value of the corresponding J HH).For CHD2groups(deuterated acetone,DMSO, acetonitrile),this signal is a1:2:3:2:1quintet with a splitting of ca.2 Hz. (3)In contrast to what was said in note2,in the13C spectra the solvent signal is due to the perdeuterated isotopomer,and the one-bond couplings to deuterium are always observable(ca.20-30Hz). Figure1.Chemical shift of H DO as a function of tempera-ture. https://www.doczj.com/doc/3d13450250.html,.Chem.1997,62,7512-7515 S0022-3263(97)01176-6CCC:$14.00?1997American Chemical Society
实验室常用得指示剂配制 1 百里香酚蓝-酚酞混合指示液 取3份体积百里香酚蓝溶液(1g/L)与2份体积酚酞溶液(1g/L)混合均匀。 2 甲基红-亚甲基蓝混合指示液 将50mL甲基红溶液(2g/L)与50mL亚甲基蓝溶液(1g/L)混合。 3 酸性铬蓝K-萘酚绿B混合指示剂 称取0、1g酸性铬蓝K,0、1g萘酚绿B与20g干燥氯化钾,置于研钵中,充分研磨混匀,贮存于棕色广口瓶中。 4 溴百里(香)酚蓝-苯酚红混合指示液 0、08g溴百里酚蓝与0、1g苯酚红溶于20mL乙醇中,加水50mL,用氢氧化钠溶液(4g/L)调至pH为7、5(红紫色),再以水稀释至100mL。 5 溴甲酚绿-甲基橙混合指示液 6份体积溴甲酚绿溶液(1g/L)与1份体积甲基橙溶液(1g/L)混合。 6 溴甲酚绿-甲基红混合指示液 3份体积溴甲酚绿溶液(1g/L)与1份体积甲基红溶液(1g/L)混合,摇匀,贮存于棕色瓶中。 7 1,10-菲罗啉-硫酸亚铁铵混合指示液 称取1、6g1,10-菲罗啉及1g硫酸亚铁铵(或0、7g硫酸亚铁),溶于100mL 水中,贮存于棕色瓶中。 8 甲基红指示液(1g/L) 称取0、10g甲基红,溶于乙醇,用乙醇稀释至100mL。 9 溴甲酚绿指示液(2g/L)
称取0、20g溴甲酚绿溶解于6mL氢氧化钠溶液(4g/L)与5mL乙醇中,用水稀释至100mL。 10 甲基橙指示液(1g/L) 称取0、10g甲基橙,溶于70℃水中,冷却,用水稀释至100mL。 11 酚酞指示液(10g/L) 称取1、0g酚酞,溶于乙醇,用乙醇稀释至100mL。 12 溴(甲)酚蓝指示液(1g/L) 称取0、10g溴酚蓝,溶于乙醇,用乙醇稀释至100mL。 13 钙指示液(钙羧酸指示剂) 称取0、20g钙指示剂〔2-羟基-1-(2-羟基-4-磺酸-1-萘偶氮)-3-萘甲酸〕(C21H14N2O7S)或其钠盐与10g在105℃干燥得氯化钠,置于研钵中研细混匀。贮存于棕色磨口瓶中。 14 铬黑T指示剂 将1、0g铬黑T与100、0g干燥得氯化钠,置于研钵中,研细混匀。贮存于棕色磨口瓶中。 15 铬黑T指示液(5g/L) 称取0、50g铬黑T与4、5g氯化羟胺,溶于乙醇中,用乙醇稀释至100mL,贮存于棕色瓶中。可保持数月不变质。 16 百里香酚蓝指示液(1g/L) 溶解0、10g百里香酚蓝于2、2mL氢氧化钠溶液(4g/L)与5mL乙醇中,稀释至100mL。 17 孔雀绿指示液(1g/L)
常用溶剂中英文对照 i-pentane(异戊烷) n-pentane(正戊烷) Petroleum ether(石油醚) Hexane(己烷) Cyclohexane(环己烷) Isooctane(异辛烷) Trifluoroacetic acid(三氟乙酸) Trimethylpentane(三甲基戊烷) Cyclopentane(环戊烷) n-heptane(庚烷) Butyl chloride(丁基氯;丁酰氯) Trichloroethylene(三氯乙烯;乙炔化三氯) Carbon tetrachloride(四氯化碳) Trichlorotrifluoroethane(三氯三氟代乙烷) i-propyl ether(丙基醚;丙醚) Toluene(甲苯) p-xylene(二甲苯) Chlorobenzene(氯苯)o-dichlorobenzene(邻二氯苯) Ethyl ether(二乙醚;醚) Benzene(苯) Isobutyl alcohol(异丁醇) Methylene chloride(二氯甲烷) Ethylene dichloride(二氯化乙烯) n-butanol(正丁醇) n-butyl acetate(醋酸丁酯；乙酸丁酯) n-propanol(丙醇) Methyl isobutyl ketone(甲基异丁酮) Tetrahydrofuran(四氢呋喃) Ethyl acetate（乙酸乙酯） i-propanol(异丙醇) Chloroform(氯仿) Methyl ethyl ketone(甲基乙基酮) Dioxane(二恶烷;二氧六环;二氧杂环己烷) Pyridine(吡啶)
实验室所需溶液配制 1.费休氏试液，购买； 2.氢氧化钠溶液，C=0.01mol/l。氢氧化钠分子量40.0，准确称取氢氧化钠固体 0.4g溶于200ml蒸馏水中，并在1L容量瓶中定容，即得到上述浓度溶液； 3.中性红溶液，C=1%。准确称取中性红固体1g溶于50ml蒸馏水中，并在100ml 容量瓶中定容，即得到上述浓度溶液； 4.溴百里香酚蓝溶液，C=1%。准确称取溴百里香酚蓝固体1g溶于50ml蒸馏 水中，并在100ml容量瓶中定容，即得到上述浓度溶液； 5.碘化钾溶液，C=10%。准确称取KI固体50g溶于50ml蒸馏水中，并在500ml 容量瓶中定容，即得到上述浓度溶液； 6.硫代硫酸钠溶液，C=0.1mol/l。硫代硫酸钠分子量158.11，准确称取硫代硫 酸钠固体15.811g溶于200ml蒸馏水中，并在1000ml容量瓶中定容，即得到上述浓度溶液； 7.硫酸溶液，C=2mol/l，硫酸分子量98.08，浓度98%时密度约1.84g/ml，准确 量取硫酸液体108.78ml稀释与500ml蒸馏水中，向水中加入硫酸而非向硫酸中加水，冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液； 8.淀粉溶液，C=0.5%。准确称取可溶性淀粉0.5g，溶于50ml水中，并在100ml 容量瓶中定容，即得到上述浓度溶液； 9.铬酸钾溶液，C=50g/L。准确称取铬酸钾固体50g，溶于500ml水中，并在 1000ml容量瓶中定容，搅拌下逐滴加入10%的硝酸银溶液,直至溶液出现棕红的悬浮物为止. 静置1昼夜,用干净的滤纸漏斗过滤即可，不一定用饱和硝酸银溶液,用10%硝酸银溶液即可.配制方法:1克硝酸银+10毫升纯水溶解,置于棕色瓶中； 10.氯化钠基准试剂，C=0.1mol/l，氯化钠分子量58.5，准确称取氯化钠固,5.85g 溶于500ml蒸馏水中，并在1000ml容量瓶中定容，即得到上述浓度溶液； 11.硝酸银溶液，C=0.1mol/l，硝酸银分子量169.87，准确称取硝酸银固体8.49g 溶于200ml蒸馏水中，并在500ml容量瓶中定容，即得到上述浓度溶液，用前采用基准氯化钠试剂（10）标定，需保存于棕色试剂瓶中；
分子实验室、细胞实验室常用配方
————————————————————————————————作者: ————————————————————————————————日期: ?
(一)WB相关试剂及常用缓冲液 ●RIＰA（１０0mI）(最后要调pH为７.4） 终浓度分子量称取 50mM 1２1.14 60５．7mg Ｔｒｉs-HCI（pH ７.4) NaCI １50 ｍＭ５8.4４87６.６ｍg TritｏnＸ-1０0 1% 1mI 脱氧胆酸钠1％１g EDTA １mM 292.24８２９.224８mｇSＤS 0．1％０.1g ＰMSF（１00ｍM) 使用时每1ｍl加１ ０ｕl ●10%过硫酸铵溶液AP（分装保存于-20度) AP粉末 1ｇ ddＨ2０ 10mｌ ●1０%SDS(十二烷基硫酸钠）： SＤＳ粉末１0g ｄdH20定容到 100ml 注意：用磁力搅拌器搅拌不会容易起泡泡 ●6X蛋白质sample buffer Tris-HCl(１M,ｐH6.８) 30ｍL ＳＤＳ10ｇ 甘油 30ｍL DTT（1５4.２5）９.3g 溴酚蓝０．０6g dd H2０定容至10０mＬ ●10XPBＳ缓冲液的配制： ＮaCｌ 80g KCl 2g Ｎa2ＨPＯ4 14．4ｇ(十二水合36g） KH２PO40 2.４g 加800 mLddH2O,根据开始的pH用ＮaOH或ＨCL调pH到７.4,调好pH再定容到1升。配好后用高压蒸气灭菌后常温保存最好是在4度 ●PBSＴ(1X) ＰBS(1X） 500ml Tweeｎ 2０５０0μｌ ●5０×Tris－乙酸（TＡE）缓冲液配制1Ｌ溶液各成分的用量 Ｔris粉末 2４2ｇ 冰醋酸 57.１ｍl Nａ2EDTA·2H2O 3７.２g
实验室常用溶液及试剂配制表一普通酸碱溶液的配制 表二常用酸碱指示剂
表三混合酸碱指示剂 表四容量分析基准物质的干燥
表五缓冲溶液的配制
实验室常用试验方法2 九、柠檬酸（C6H8O7·H2O） 称取试样1.5g（精确到0.0002g）于三角瓶内，加入水50ml溶解，加酚酞指示剂3滴，用1mol/L氢氧化钠标准溶液滴定至粉红色为终点，同时做空白试验。 计算：X%（一水）= （V1-V0）×C×0.06404x m×（1-0.08566）×100 X%（无水）= （V1-V0）×C×0.06404x m×100 V1-----消耗氢氧化钠标准溶液的体积，ml； V0-----空白所消耗氢氧化钠标准溶液的体积，ml； C------氢氧化钠标准溶液浓度，mol/L； m---样品质量。 十、钙含量测定（磷酸氢钙CaHPO4、磷酸二氢钙Ca（H2PO4）2·H2O、钙粉等） 称取2g（精确到0.0002g）样品，用10ml盐酸（1+1）溶解，转移至100ml容量瓶中定溶，用移液管吸取10ml于250ml锥形瓶中，加50ml水，5ml蔗糖溶液（25g/L），2ml三乙酸胺（1+1），1ml乙二胺（1+1），1滴孔雀绿指示液（1g/L），滴加氢氧化钾溶液（200g/L）至无色，再过量10ml，加0.1g盐酸羟胺（每加一种试剂都要摇匀），加钙黄绿素少许，在黑色背景下用0.05mol/L的EDTA标准溶液滴定至绿色荧光消失呈现紫红色为滴定终点。 Ca%= C×V×0.4008x m ×100 C------EDTA标准溶液的浓度，mol/L； V-----消耗EDTA标准溶液的体积，ml； m----样品质量。 （二）氟（Fˉ）含量的测定： 1、标准曲线的绘制； 2、试样含量的测定： 称取0.5g（精确到0.0002g）置于50ml纳氏比色管中，加1mol/L盐酸10ml，密闭提取1h （不时摇动），避免粘于管壁，提取后加总离子强度缓冲液25ml，加水至刻度，以滤纸过滤。以氟电极测平衡电位值。 结果计算：X= C×50×1000 x m×1000 = 50C x m X-----试样中氟含量， m---试样质量，g； C-----据电位值查得的浓度， 总离子强度缓冲液：现配现用，3mol/L乙酸钠；0.75mol/L柠檬酸钠，配成（1+1）。 测定时，用蒸馏水洗电极装置至值为-370以后。 （三）磷（P）的测定 磷标准曲线的绘制：准确移取磷标准溶液（分析纯的磷酸二氢钾，在105℃干燥1h，冷却后称取0.2195g，溶于1L的容量瓶中，加硝酸3ml，用水稀释至刻度，得到50ug/ml溶液），分别吸取0.0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0、15.0ml于50ml容量瓶中，各加入磷显色液（钒-钼酸铵显色液：偏钒酸铵1.25g，加250ml硝酸于1000ml容量瓶中；钼酸铵25g 于烧杯中，加400ml水溶解，冷却下，将此液倒入容量瓶中，定容）10ml，用蒸馏水定容，