第38卷 第2期
水生生物学报
Vol. 38, No.2 2014年3月 ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA
Mar., 2 0 1 4
收稿日期: 2013-01-21; 修订日期: 2013-12-16
基金项目: 海洋公益性行业专项项目(200805039); 海洋可再生能源专项(GHME2001SW02); 国家自然科学基金(41076108,
41106148, 30870247); 山东省科技发展计划(2011GHY11533)资助
作者简介: 周文俊(1987—), 男, 甘肃武威人; 硕士; 主要从事海洋微藻生物燃料的研究。E-mail: 86zwj@https://www.doczj.com/doc/3e14774614.html, 通信作者: 郑立, 副研究员, 博士; E-mail ：zhengli@https://www.doczj.com/doc/3e14774614.html,
doi: 10.7541/2014.45
基于尼罗红染色分析金藻总脂动态积累
周文俊1 郑 立1 韩笑天2 郑明刚1 张魁英1 高 伟1 崔志松1
(1. 国家海洋局第一海洋研究所海洋生态研究中心, 青岛266061; 2. 中国科学院海洋研究所海洋环境科学重点实验室, 青岛266060)
摘要: 通过尼罗红荧光染色对一株富油微藻金藻Isochrysis sp. CCMM5001建立和完善了一种方便快捷且能准确定量金藻油脂含量的方法, 利用该方法探索了不同培养条件对金藻生长和总脂积累的影响。结果表明: 经尼罗红染色后, 金藻的单细胞荧光强度与其总脂含量呈良好的线性关系; 金藻最适生长的氮浓度、光照强度和温度分别为1323 μmol/L 、148.0 μmol/(m 2·s)、25℃; 最适总脂积累的氮浓度、光照强度和温度分别为441 μmol/L 、92.5 μmol/(m 2·s)、15℃; 优化培养条件并采用两阶段培养法后总脂含量和油脂产率都有大幅提高, 可分别高达63.3%和22 mg/(L·d)。
关键词: 金藻; 尼罗红; 总脂; 荧光强度; 生长曲线
中图分类号: Q949.2; Q-33 文献标识码: A 文章编号: 1000-3207(2014)02-0312-08
近年来, 生物柴油因其来源广泛、燃烧性能高、对环境污染低以及可再生等优点而成为研究热点。目前国际上主要以大豆、油菜籽、蓖麻籽、棕榈种子以及动物脂肪等为原料生产生物柴油[1—3], 但这些原料尚不能满足当前经济发展对生物柴油的需求, 同时因其与粮食作物争用耕地而可能导致世界粮食供应问题[4], 对此, 科研人员提出用高油脂含量的微藻来替代传统油料作物生产生物柴油[4—6]。以微藻为原料生产的生物柴油具有清洁环保、燃烧性能好以及可再生等优点, 一些微藻如Chlorella proto-thecoides [7]、
Oedogonium sp. [8]、Chlorella zo ?ngienesis [9]、Haematococcus pluvialis [10]和Dunaliella tertiolecta [11]等已被报道可以高效地生产优质的生物柴油。尽管如此, 这类适合应用于生产生物柴油的微藻种类还很有限, 而如何快速有效地从大量的微藻种类中筛选高油脂含量的藻种, 并根据其油脂积累特点优化培养条件以获得最高的油脂产率一直是微藻生物柴油研究需要解决的难题。传统的油脂提取方法要预先收集足量的藻体并进行冻干、研磨、反复萃取、
离心以及旋转蒸发等一系列繁琐的步骤[12], 这不仅耗时耗力, 并且需要使用大量三氯甲烷和甲醇等化学试剂。因此, 亟待建立和完善一种方便快捷且能准确定量检测微藻油脂含量的方法。
尼罗红是一种具有较强荧光特性的疏水性染料, 它可与脂类物质结合, 在特定波长的激发下发出强烈的橙黄色或红色荧光, 但在水溶剂中, 其荧光性完全淬灭。目前, 尼罗红已被广泛应用于对哺乳动物细胞、浮游动物、酵母菌以及微藻等的油脂进行定性观察和原位检测[13—16]。研究发现, 激发波长和散射波长分别为450—500 nm 和>528 nm 时, 经尼罗红染色的微藻细胞荧光强度(Fluorescence inten-sity, FI)与细胞内油脂(中性脂)含量显著相关[17—19]。因此, 可通过即时测定荧光强度的大小来原位检测微藻的油脂含量, 从而了解其油脂积累规律并确定最佳培养条件和收获周期。与传统的油脂含量测定方法相比, 尼罗红法操作简单, 所需微藻生物量小, 并且允许同时处理大批量的样品。但研究也表明, 并非所有微藻都可被尼罗红染色, 所以该方法只能
2期周文俊等: 基于尼罗红染色分析金藻总脂动态积累 313
针对合适的藻种开展油脂含量的测定研究。
经本实验室前期的培育和研究发现, 实验室筛选的一株金藻Isochrysis https://www.doczj.com/doc/3e14774614.html,MM5001细胞内含有丰富的油脂资源, 其总脂含量可高达藻细胞干重的40%, 且适合制备生物柴油的C14-C18系脂肪酸含量为总脂肪酸含量的80%以上, 表现出作为一种生产生物柴油候选藻种的优良特性, 但其油脂积累的动态规律及具有最高油脂产率的最佳培养条件还需进一步研究。值得一提的是该金藻无细胞壁, 极易被染色材料着色, 但利用尼罗红对其进行染色所开展的油脂含量的测定研究还未见报道。
本文拟通过尼罗红染色法建立一种方便快捷且能准确定量微藻油脂含量的方法, 并利用该方法探讨不同氮浓度、光照强度和温度培养条件下金藻的油脂动态积累过程, 从而确定其生产油脂的最佳培养条件, 为进一步对金藻进行大规模培养以生产优质的生物柴油奠定实验基础。
1材料与方法
1.1微藻来源及其培养
实验藻株金藻Isochrysis https://www.doczj.com/doc/3e14774614.html,MM5001由中国科学院海洋研究所提供, 培养使用f/2培养液配方[20], 光照强度92.5 μmol/(m2·s), 光暗比16h︰8h, 温度(25±1)℃。
1.2仪器与试剂
多功能酶标仪(Tecan Infinite M200)、倒置荧光显微镜(Nikon ECLIPSE TE2000-U)、气相色谱-质谱仪(Agilent GC7890A-MS5975C)。尼罗红(Nile Red)购自J & K Scientific公司, 以丙酮为溶剂配制成
0.1 g/L母液, 于–20℃避光保存。
1.3实验方法
微藻的尼罗红染色用血球计数板法测定藻细胞密度, 取1 mL细胞密度约为1×106 cells/mL的藻液于小试管中, 添加0.01 mL尼罗红母液使其终浓度为1 mg/L, 振荡混匀, 于20℃避光染色10min, 用倒置荧光显微镜(蓝光激发)观察藻细胞内被染色油脂; 取96孔板, 每孔加入200 μL染色藻液, 用多功能酶标仪检测激发波长为480 nm时藻液在580 nm 处的荧光强度, 并扣除未染色藻液在该波长处的荧光强度即为净荧光值, 染色处理组和空白对照组均设置3个平行, 重复测定3次。
单细胞荧光值和油脂含量关系的建立在1.1培养条件下于不同生长阶段分别测定藻液荧光强度和细胞密度, 并离心收集藻体, 冷冻干燥至恒重, 取0.1 g干藻粉采用三氯甲烷-甲醇提取法测定总脂含量(%细胞干重)。将单细胞荧光强度和总脂含量进行线性拟合获得二者线性关系。
不同培养条件下油脂动态积累的检测不同氮浓度(以硝酸钠为氮源)、光照强度、温度等培养条件列于表1中, 其他培养条件同1.1。将处于指数生长期的藻液按照10%的接种量分别接种到不同培养条件的f/2海水培养基中, 每隔一天测定藻细胞密度和荧光强度, 并由上述所得线性关系计算总脂含量。
表1 金藻Isochrysis https://www.doczj.com/doc/3e14774614.html,MM5001的不同培养条件Tab. 1 Different culture conditions for Isochrysis https://www.doczj.com/doc/3e14774614.html,MM5001
培养条件Culture condition
氮浓度
N concentration (μmol/L)
光照强度
Illumination intensity [μmol/(m2·s)]
温度
Temperature ()
℃
氮浓度实验 N experiment 441、882、1323、1764 92.5 25 光照实验 Illumination experiment 882 37.0、92.5、148.0 25
温度实验 Temperature experiment 882 92.5
15、25、35
油脂产率的计算与脂肪酸组成的分析取100 mL藻液, 抽滤于事先称重的0.45 μm滤膜上, 冷冻干燥后称重, 并根据上述步骤中所得相应的总脂含量进行计算即可获得油脂产率。将干藻粉用三氯甲烷-甲醇溶液进行提取, 经过皂化和甲酯化处理后用气相色谱-质谱仪进行脂肪酸组成分析, 色谱柱型号为HP-5MS (30 m×0.25 mm×0.25 μm)。气相色谱条件: 载气为氦气, 流速为 1 mL/min, 进样口温度280,
℃传输线温度为280;
℃升温程序为: 初温50,
℃保持2min, 以6/min
℃升到300,
℃保持15min; 不分流进样, 进样量1 μL。质谱条件: 离子源为EI, 倍增器电压1200V, 离子源温度为230,
℃四级杆温度150, Scan
℃方式检测。
1.4数据统计
每组实验设置3个平行, 取平均值作为实验结果(Mean±SD)。用OriginPro 7.5软件进行统计分析。
314 水生生物学报38卷
2结果
2.1 微藻尼罗红染色镜检结果与单细胞荧光值-总
脂含量线性关系
将染色后的藻液用蓝光激发于荧光显微镜下进行观察(图1), 藻细胞整体呈红色, 细胞内被染色油脂体呈明亮的黄色。经观察发现, 藻细胞内油脂体的大小和数目随藻液所处生长阶段的不同而有所差异。处于对数生长期的藻细胞其油脂体形状较小, 直径约为0.5 μm, 且数目较少。进入稳定期后油脂体逐渐变大, 直径可达1 μm左右, 数目亦有所增加。
图1 金藻Isochrysis https://www.doczj.com/doc/3e14774614.html,MM5001经尼罗红染色后的荧光显微镜镜检图
Fig. 1 The result of fluorescence microscope examination of Isochrysis https://www.doczj.com/doc/3e14774614.html,MM5001stained with Nile Red
由以上观察结果可知, 金藻在不同的生长阶段其油脂含量有所不同, 经尼罗红染色后的荧光强度也随之发生变化。为确定总脂含量与荧光强度之间的关系, 用三氯甲烷-甲醇提取法测定不同生长阶段微藻的总脂含量, 并将其与相应的单细胞荧光值进行线性拟合, 可获得如图2所示线性拟合图(R2 = 0.9572), 油脂含量与单细胞荧光强度具有良好的线性相关性, 单细胞荧光值随着油脂含量的增加而增大。
2.2在不同培养条件下微藻生长曲线与总脂动态
积累
实验测定了不同氮浓度、光照强度以及温度培养条件下金藻的生长曲线以及不同生长阶段尼罗红染色的单细胞荧光强度, 并根据 2.1中所得线性关系, 获得了微藻总脂的动态积累过程。
在不同氮浓度培养条件下, 金藻的生长状况和总脂动态积累过程均受显著影响。当氮浓度≤1323 μmol/L 时,藻细胞密度随着氮浓度的增加而增大
,
图2 单细胞荧光值与总脂含量的线性关系(R2 = 0.9572) Fig. 2 The linear relationship between the FI of single cell and content of total lipids (R2 = 0.9572)
并在1323 μmol/L培养11d时获得最大藻密度2.7×107 cells/mL; 当氮浓度继续增加到1764 μmol/L 时, 藻细胞密度大幅降低(图3A)。微藻总脂主要在对数生长期后期以及稳定期积累, 随着氮浓度从441 μmol/L增加到1764 μmol/L, 总脂含量逐渐降低, 在培养13d时882 μmol/L的氮浓度可获得最高总脂含量51.2%; 另外, 不同氮浓度的总脂主要积累期随氮浓度的增加而依次有所延后, 即随着藻密度的增加, 氮逐渐被消耗到较低水平时总脂开始积累(图3B)。
光照强度对金藻的生长有较大影响, 但对其总脂的积累影响较小。当光照强度过低[37 μmol/(m2·s)]或过高[148 μmol/(m2·s)]时均不利于微藻的生长, 但随着藻密度的增加, 藻液透光度降低, 此时高光照强度下的藻密度迅速增大并可获得最大藻密度2.6×107cells/mL (图4A)。光照强度对总脂的含量影响较小, 高光照强度时的油脂含量略低于中、低光照强度时的油脂含量(图4B)。
温度对金藻的生长状况和总脂动态积累过程具有显著影响。当温度过低(15)
℃或过高(35)
℃时, 微藻生长缓慢, 可获得的最大藻细胞密度也远低于25℃培养条件下的藻密度2.4×107 cells/mL (图5A)。微藻总脂含量随着温度的升高逐渐降低, 当温度为15℃时总脂迅速积累, 并在培养7d时即可获得最大的总脂含量50.8% (图5B)。
由微藻总脂的积累趋势可以看出, 不同培养条件下稳定期的总脂含量均比对数期时有所增加, 但并未像尼罗红染色镜检时油滴的数目和大小所增加的那样大幅提高, 这可能是因为藻细胞内所含总脂除了以油滴形态存在外, 还以溶解态以及与膜结合的形式等存在。
2期周文俊等: 基于尼罗红染色分析金藻总脂动态积累 315
图3 不同氮浓度对金藻Isochrysis https://www.doczj.com/doc/3e14774614.html,MM5001的生长曲线(A)和总脂积累(B)的影响
Fig. 3 The influence of different N concentrations on growth curves(A) and lipids accumulation(B) of Isochrysis https://www.doczj.com/doc/3e14774614.html,MM5001 2.3微藻培养条件的优化与结果检测
由2.2中培养结果可知, 当氮浓度为1323 μmol/L 时金藻生长最快, 收获时藻密度最大, 但总脂含量并非最高; 培养初期以92.5 μmol/(m2·s)的光照强度进行培养, 当藻密度达到约1×107 cells/mL时适度提高光照强度有利于收获更高的藻生物量; 25℃培养时有利于微藻生长, 但总脂积累较缓慢, 15℃培养时总脂积累迅速且含量较高, 但生长缓慢, 所以可先于25℃下培养一段时间获得一定生物量之后再于15℃下培养5—7d使其总脂得到积累。
为尽可能收获较高的生物量与总脂含量, 根据金藻在不同培养条件下的生长特征和总脂积累特点, 实验设计了两阶段培养法对其进行培养(表2)。
对两阶段培养的金藻的藻密度和总脂含量进行检测(图6), 将其与常规培养条件[氮浓度1323 μmol/L, 光照强度92.5 μmol/(m2·s), 温度25]
℃下的金藻进行比较, 可以看出: 由于温度的降低, 第二阶段微藻的生长略有减缓, 但最终所能收获的最大细胞密度亦可高达 2.5×107 cells/mL; 在第二阶段, 总脂迅速积累, 培养11d时总脂含量可高达63.3%, 远高于常规培养时所能达到的最大总脂含量44.2%。将两阶段培养法所能获得的最大油脂产率和其他不同培养条件下所能获得的最大油脂产率进行对比(图7), 可以看出: 当氮浓度为882 μmol/L时可获得最高油脂产率, 氮浓度继续增大时油脂产率反而降低; 油脂产率随光照强度的增大而增大,当光照强度≥92.5 μmol/(m2·s)时油脂产率不再明显增大; 当温度为25℃时可获得最高油脂产率, 温度过高或过低都会降低油脂产率; 在未进行培养条件优化前, 金藻的油脂产率普遍在15 mg/(L·d)左右, 经过优化并采
图4 不同光照强度对金藻Isochrysis https://www.doczj.com/doc/3e14774614.html,MM5001的生长曲线(A)和总脂积累(B)的影响
Fig. 4 The influence of different illumination intensities on growth curves(A) and lipids accumulation(B) of Isochrysis sp. CCMM5001
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图5 不同温度对金藻Isochrysis https://www.doczj.com/doc/3e14774614.html,MM5001的生长曲线(A)和总脂积累(B)的影响
Fig. 5 The influence of different temperatures on growth curves (A) and lipids accumulation(B) of Isochrysis sp.
CCMM5001 图 6 普通培养法和两阶段培养法对金藻Isochrysis sp. CCMM5001生长曲线和总脂积累的影响对比
Fig. 6 The comparison of influence on growth curves and lipids accumulation of Isochrysis https://www.doczj.com/doc/3e14774614.html,MM5001 between common cul-tivation and two-stage cultivation
用两阶段培养法后其油脂产率大幅提高45%以上, 可高达22 mg/(L·d)。为确定经条件优化后的金藻的油脂成分是否仍具有生产生物柴油的优良特性, 实验利用GC-MS进一步分析研究了其脂肪酸组成。结果显示(表3), 相比常规培养时的脂肪酸组成, 优化的两阶段培养法所含的C14:0、C16:0等饱和脂肪酸含量有所降低, C18:1等不饱和脂肪酸含量有所增加, C14-C18系脂肪酸含量并无明显变化, 均可高达总脂肪酸的88%以上, 保持了其生产生物柴油的优良特性。另外, 不饱和脂肪酸总含量的显著提高也增加了金藻对保健品开发利用的附加产值。
表2金藻Isochrysis https://www.doczj.com/doc/3e14774614.html,MM5001两阶段培养法的培养条件
Tab. 2 The culture conditions of two-stage cultivation for Isochrysis https://www.doczj.com/doc/3e14774614.html,MM5001
培养条件Culture condition
阶段一(培养7d)
Stage one (culture for 7 days)
阶段二(培养6d)
Stage two (culture for 6 days)
氮浓度N concentration (μmol/L) 1323 1323 光照强度Illumination intensity (μmol/(m2·s)) 92.5 148.0 温度 Temperature ()
℃25 15
3讨论
3.1微藻的尼罗红荧光染色
本实验利用尼罗红对金藻进行染色并测定其荧光强度, 发现该荧光强度与藻细胞内总脂含量呈线性关系, 这与Alonzo和Mayzaud[13]对浮游动物的脂类进行染色后发现其荧光强度与脂类浓度呈线性关系的结果类似。尼罗红染色受诸多因素影响, 如尼罗红浓度、染色时间以及藻细胞密度等[17]。Chen, et al.的研究结果表明, 尼罗红的终浓度在0.25—2 mg/L之间时, 染色效果较佳, 染色时间则以10min最佳[21]。本研究在之前进行的预实验中发现, 实验藻株金藻的藻细胞密度在一定范围内(0—1.075×107cells/mL)与其荧光强度具有良好的线性关系(R2=0.9912), 当藻密度大于1.075×107 cells/mL时荧光强度逐渐降低(图8)。并不是所有微藻都适用于尼罗红染色, 因为大多数微藻细胞具有细胞壁, 限制了尼罗红进入藻细胞与脂类结合产生荧光, 如Chen, et al.对劳氏角毛藻(Chaetoceros lauderi)、赫氏圆石藻(Emiliania huxleyi)、寇氏隐甲藻(Crypthecodinium cohnii)、微
2期 周文俊等: 基于尼罗红染色分析金藻总脂动态积累 317
图7 不同培养条件下金藻Isochrysis sp. CCMM5001的油脂产率 Fig. 7 The production rate of total lipids of Isochrysis sp. CCMM5001 under different culture conditions
表3 普通培养法和两阶段培养法对金藻Isochrysis sp. CCMM5001主要脂肪酸组成的影响对比
Tab. 3 The comparison of influence on fatty acid composition of Isochrysis sp. CCMM5001 between common cultivation and two-stage cultivation (%)
脂肪酸组成 Fatty acid composition
两阶段培养 Two-stage cultivation
普通培养 Common cultivation
C14:0 23.5±0.8 28.0±0.9
C16:1 5.8±0.2 4.1±0.1 C16:0 20.0±0.7 23.2±0.9 C18:2 3.9±0.1 2.9±0.1 C18:1 35.2±1.3 30.8±1.2 C20:5 0.2±0.1 —
C22:6 10.6±0.3 11.0±0.3
UFA 55.6±2.1 48.8±1.9
FA 44.4±1.7 51.2±1.9
PUFA 14.6±0.5 13.9±0.4
C14-C18 88.3±3.1 89.0±3.3
图8 金藻Isochrysis sp. CCMM5001藻细胞密度对荧光强度的影响
Fig. 8 The effect of cell density on the ?uorescence intensity of
the Isochrysis sp. CCMM5001 stained with Nile red dye
绿球藻(Nannochloropsis sp.)以及小球藻(Chlorella sp.)等藻类进行尼罗红染色时发现具有细胞壁的藻细胞很难被有效染色, 而在经过液氮研磨、高温、甲醇、DMSO 、丙酮、乙醇以及异丙醇等各种处理之后藻细胞荧光强度有所增强, 其中以25%的DMSO 处理效果最好[21]。本实验所用的金藻不具有细胞壁, 因此可以直接被尼罗红染色。
以往尼罗红对微藻染色的研究只限于通过荧光强度的大小来定性或粗略地描述脂类的相对含量[17—19, 22], 而未见对其绝对含量进行研究的报道。本论文在建
立单细胞荧光值与总脂含量线性关系的基础上, 通过简单的计算即可获得微藻在不同培养条件下不同生长阶段时总脂的绝对含量, 与传统的测定绝对含量的化学提取法相比, 该方法操作简单、所需样品量少(化学提取法需0.2 g 干藻粉), 并可即时监测总脂的动态积累过程, 另外, 多功能酶标仪和96孔板在实验中的应用也使得同时处理大批量的样品变得快速可行。
3.2 微藻培养条件的优化
本实验研究了不同氮浓度、光照强度以及温度培养条件下金藻的生长状况和总脂动态积累过程, 并优化了培养条件使其具有最高的油脂产率。研究结果表明, 金藻的细胞密度在一定的氮浓度范围内随氮浓度的增加而提高, 这与王学魁等和尹翠玲等的研究结果一致[23, 24]; 当氮浓度继续增加时细胞密度反而降低, 这可能是由于氮的增加改变了培养液的N/P 比, 从而限制了藻细胞的生长。光照强度对
微藻生长的影响表现为光照过强或过弱都将限制微藻的生长,
但随着藻密度的增加藻液透光性降低,
适当增大光照强度更有利于微藻生长。温度是另一个影响微藻生长的重要因素, 一般而言, 低温时微藻生命活动不活跃, 生长迟缓, 温度较高时则生长旺盛, 本研究表明金藻Isochrysis sp. CCMM5001的最佳生长温度为25℃。
不同培养条件对金藻总脂的积累也有明显的影响。王学魁等认为金藻的总脂含量随氮浓度的增加而提高[23], 但本实验的研究结果与其相反, 这可能是氮缺乏导致其他代谢路径的改变, 从而促进了细胞
脂质的合成[25]。孙利芹和杨林涛报道称金藻在高光照条件下总脂含量会相对提高[26], 但本研究结果显示高光照强度[148 μmol/(m 2·s)]条件下反而不利用总脂的积累, 这可能是因为在培养后期高光照强度条
318 水生生物学报38卷
件下的微藻仍处于活跃分裂状态, 蛋白质和色素等
物质的含量相对较高, 而作为储能物质的脂类含量
则相对较低。温度对微藻总脂积累的影响表现为: 低
温有利于总脂尤其是不饱和脂肪酸的积累, 而高温
时总脂含量则相对较低[27—29], 本研究表明金藻Isoch-rysis https://www.doczj.com/doc/3e14774614.html,MM5001的最佳总脂积累温度为15℃。
从实验结果可以看出, 微藻最佳生长条件与最
佳总脂积累条件并不相符。为了获取较高的油脂产出, 本实验首次采用两阶段培养法对金藻Isochrysis https://www.doczj.com/doc/3e14774614.html,MM5001进行培养, 即先在最适生长条件下
培养一段时间以获得较大生物量然后调节至最适总
脂积累条件以获得较高的总脂含量, 从而大幅提高
了其油脂产率。
4结论
本实验利用尼罗红染色法研究发现了金藻Isochrysis https://www.doczj.com/doc/3e14774614.html,MM5001的单细胞荧光强度与其总
脂含量具有良好的线性关系, 并通过该方法探索了
不同培养条件对金藻生长和总脂积累的影响。结果
表明, 最适金藻Isochrysis https://www.doczj.com/doc/3e14774614.html,MM5001生长和总
脂积累的氮浓度、光照强度以及温度分别为: 1323 μmol/L、148.0 μmol/(m2·s)、25℃和441 μmol/L、92.5 μmol/(m2·s)、15℃。采用两阶段培养法后总脂
含量和油脂产率都大幅提高, 可分别高达63.3%
和22 mg/(L·d)。
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RESEARCH ON THE DYNAMIC ACCUMULATION OF LIPIDS IN ISOCHRYSIS SP.
CCMM5001 BASED ON THE LIPID ANALYSIS BY NILE RED METHOD
ZHOU Wen-Jun1, ZHENG Li1, HAN Xiao-Tian2, ZHENG Ming-Gang1, ZHANG Kui-Ying1,
GAO Wei1 and CUI Zhi-Song1
(1. Research Center for Marine Ecology, the First Institute of Oceanography, SOA, Qingdao 266061, China; 2. Key Laboratory
of Marine Environmental Sciences, Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences, Qingdao 266060, China)
Abs tract: Some species of microalgae are considered as an ideal resource for biodiesel production because they contain high level of lipids. The traditional method to quantify the lipids level includes the solvent extraction and gravimetric determination based on a chloroform-methanol-water system. This method has the disadvantage of being time consuming and inefficient. Here we used Nile Red, a lipid-soluble fluorescent probe, to establish a novel method to determinate the level of lipids in mi-croalgae rapidly and accurately. We applied the Nile Red method to investigate the dynamic accumulation of lipids in Isochry-sis https://www.doczj.com/doc/3e14774614.html,MM5001 under different culture conditions. The results showed that there was a linear correlation between the lipids level and the cellular fluorescence of stained microalgal cells, therefore the former can be accurately indicated by the latter. Low nitrogen concentrations and low temperatures were suitable for accumulating of lipids. The level of lipids was reduced if the illumination intensity was overly high or low. On one hand the optimal conditions for the growth were: N concentration at 1323 μmol/L, illumination intensity at 148.0 μmol/(m2·s), and the temperature at 25℃. On the other hand for the maximal accumulation of the lipids, the optimal values of the parameters above were 441 μmol/L, 92.5 μmol/(m2·s), and 15℃ respec-tively. The culture condition was optimized and a two-stage cultivation was carried out to increase both the level and the pro-duction rate of lipids, the former reaching a high concentration of 63.3% and the latter reaching 22 mg/(L·d).
Key words: Isochrgsis sp; Nile red; Total lipicls; Fluoresence intensity; Growth Curve
软骨染色液(番红O法)步骤及注意事项 货号：G2540 规格：100ml 有效期：12个月有效 产品简介： 软骨组织由软骨细胞、软骨基质和纤维组成，软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。软骨染色方法有很多种，例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法等。 番红0软骨染色的原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色。番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料，其显示软骨组织是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团（硫酸软骨素或硫酸角质素）结合。 自备材料： 10%福尔马林固定液、脱钙液、蒸馏水、Weigert铁苏木素、系列乙醇等。 操作步骤（仅供参考）： 1.标本的处理：10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。 2.常规脱蜡至水。 3.入新鲜配制的Weigert染液染色3-5min。 4.酸性乙醇分化液分化15s。 5.蒸馏水洗10min。 6.（可选）在固绿染色液内浸染5min，蒸馏水洗1min。 7.入Safranin O stain内浸染1-2min，蒸馏水洗1min。 8.分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。
9.二甲苯透明，光学树脂封固。 染色结果： 软骨基质深红色 软骨细胞核蓝色 软骨细胞浆红色 细胞核灰黑色 注意事项： 1.需要显示细胞核时，尽量采用铁苏木素染色，其着色力强色调浓，一般的苏木素着色力不强。 2.Weigert苏木素染液不可预先配制后放置，配制好后一般24h失去染色能力。 3.切片在Safranin O stain中染色不宜过长，否则易导致背景的深红色不易分化掉。 4.Safranin O stain染色后，不宜在低浓度乙醇脱水，否则易褪色。 5.95%乙醇脱水时间不宜过长。 6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
革兰氏染色的实验原理 ●G＋细胞壁的网状结构致密，交联度高，用乙醇处理后，发生脱水作用，肽聚糖层孔径缩小，透性降低，故细菌仍保留初染时的紫色。 ●G－肽聚糖层较薄，交联度低，含较多类脂质，故用乙醇处理后，类脂质被溶解，细胞壁孔径变大，通透性增加，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，细胞被脱色，经沙黄复染呈红色。 涂片固定→结晶紫初染（碱性）→碘液媒染→乙醇（丙酮）脱色→番红复染（碱性）
◆◆◆原理： 当用结晶紫初染后，所有细菌都被染成初染剂的兰紫色，碘作为媒染剂，它能与结晶紫结合成结晶紫-碘复合物，从而增强了染料与细菌的结合力。当用脱色剂处理时，两类细菌的脱色效果是不同的。革兰氏阳性细菌的细胞壁主要有舦聚糖形成的网状结构组成，壁厚，类脂含量低，用酒精脱色时细胞壁脱水，使舦聚糖层的网状结构孔径缩小，透性降低，从而使结晶紫碘复合物不易被洗脱而保留在细胞内，经脱色和复染后仍保留初染剂的兰紫色。革兰氏阴性细菌则不同，由于其细胞壁舦聚糖层较薄，类脂含量较高，，所以当脱色处理时，类脂质被酒精溶解，细胞壁透性增大，使结晶紫-碘复合物比较容易被洗脱出来，用复染剂复染后，细胞被染上复染剂的红色。 ◆◆实验步骤： 1、制片 涂片——干燥——固定 2、初染 滴加结晶紫染色1——2分钟，水洗； 3、媒染 用碘液冲去残水，并用碘液覆盖1分钟； 4、脱色 滴加95%酒精脱色，25-30秒，立即水洗； 5、复染 用番红液复染约2分钟，水洗； 6、镜检 干燥后，用油镜观察。 细菌：细菌是一种具有细胞壁的单细胞微生物，在适宜条件下，能进行无性二分裂繁殖，其形态和结构相对稳定。一般体积微小，通常需要借助光学显微镜才能看到，其测量单位用微米表示。
玛瑙的功效与作用是什么 我们常常会看到很多人都是很喜欢一些玉石的东西，这种东西中就有玛瑙这种玉石。但是有不少人都不知道玛瑙这种东西到底有什么用的。其实了解了这一内容以后，可能对于我们自己是有一定帮助的。那么到底玛瑙的功效与作用是什么?下面我们就来看看是怎么样解答这一问题的吧。 (1)玛瑙是佛教七宝之一，自古以来一直被当为辟邪物、护身符使用，象征友善的爱心和希望，有助于消除压力、疲劳、浊气等负性能量。 (2)将适量的玛瑙放置于枕头下，有助于安稳睡眠，并带来夜夜好梦。 (3)玛瑙聚宝盆可以为一些的水晶饰品来消磁充电，如戒指、坠子、耳环、手链等，但请用纸或布包住，以免被刮伤。 (4)在魔法里，教人将自己的愿望写在一张纸上，折叠包妥，静心冥想过后，再放入玛瑙聚宝盆内，至少要放一天一夜，让能量在其中激荡强化，取出后，将之火化烧掉，藉助火的力量，将你的愿望传入自然界，多能心想事成。
(5)读书的小朋友多接触带水玛瑙，可以感染水的特性，聪明、灵活、乖巧、学习力强、适应力佳。 (6)戴着带水玛瑙，可以强化亲和力，能够灵活应变，八面玲珑，有助事业成长，财源旺盛。 (7)夫妻房中摆设带水玛瑙，有助于夫妻感情和睦，增进闺房之乐。 (8)红色玛瑙可改善内分泌，加强血液循环，让气色变好，消除性方面的障碍，避免性与不孕产生，偏橘色的红玛瑙则可对直肠，胃肠都有效用，可活化内脏，预防便秘，帮助排出毒素，对肝病、风湿、神经痛、静脉曲张等都有舒缓的功用，对于女性，长期佩带玛瑙可以是皮肤润滑，心情开朗，血液循环增强，使嘴唇红润，眼珠明亮有神。 了解了玛瑙的功效与作用的具体内容以后，希望这些能帮助到大家更好的喜爱到玛瑙这种事物。除了要认识这些，我们还可
赤小豆健脾祛湿与红豆易混淆 核心提示：中医认为，赤小豆性平味甘酸，入心、小肠经，有健脾利湿、消肿解毒功效，在外形上，赤小豆和红豆两种色泽接近易生混淆。 本周谈祛湿，不得不说赤小豆。赤小豆和我们平常说的红豆很类似，但是却有差别，赤小豆的功效较强，而红豆主要供食用。中医认为赤小豆健脾利湿，消肿解毒，我们接着来熬一剂祛湿健脾汤。 主题：赤小豆鳞鱼汤 食材：赤小豆100克、陈皮1/4个、鲮鱼400克、生姜少许、食盐、食用油适量。 做法： 1.把赤小豆、陈皮分别洗净；鲮鱼宰洗净，去脏杂待用；生姜切片； 2.把锅烧热，放入食用油，用慢火煎鳞鱼至微黄，捞出； 3.把2中的鲮鱼与生姜一起放进瓦煲内，加入清水，用大火煲沸后，改为小火煲1小时左右，调入适量食盐便食。 此粥可清热下火、祛湿润燥。 39食神特别提醒： 一、赤小豆健脾祛湿和鲮鱼同煮更好 中医认为，赤小豆性平味甘酸，入心、小肠经。有健脾利湿、消肿解毒功效，主治水肿、脚气，而有产后缺乳、腹泻、黄疸或小便不利、痔疮也可通过用赤小豆熬汤或研磨成粉服用辅助治疗。 在西方营养学里，赤小豆含有较多的皂角甙，可刺激肠道，因此它有良好的利尿作用，能解酒、解毒，对心脏病和肾病、水肿有益；而且赤小豆有较多的膳食纤维，可润肠通便、降血压、降血脂、调节血糖、解毒抗癌、预防结石、健美减肥；且富含叶酸，产妇、乳母多吃红小豆有催乳的功效。 针对需要祛湿健脾的朋友来说，可用鲮鱼和赤小豆共煮来调理，因《纲目拾遗》里提到，鲮鱼有“健筋骨、活血行气、逐水利湿”的功效，两者一起煮汤，对祛湿有较好的效果。 二、赤小豆和红豆易混淆吃前分清楚 赤小豆，除了赤豆、红小豆、饭豆等别名，又称为红豆。在外形上，赤小豆和红豆两种色泽接近易生混淆，赤小豆呈细长形，颗粒比红豆小；红豆呈圆柱状，表面为暗棕红色。在熬煮时，赤小豆比较难煮不烂，一般适合煮汤；而红豆久煮会
戴玛瑙的好处 戴玛瑙的好处有哪些?玛瑙是最具疗效的宝石之一，因此，戴玛瑙的好处之一可平衡正负能量，消除精神紧张及压力。戴玛瑙的好处还有很多，下面为大家列举了几种戴玛瑙的好处供大家参考： 1、玛瑙做为一种宝石，形成于千百万年之前，吸日月之精华，经水火之磨炼，它的确具备了护佑主人的功力，据说红玛瑙使人热烈，可舒筋活血，黑玛瑙使人刚毅，白玛瑙使人冰雪聪明，绿玛瑙使人心境平和。 2、玛瑙的摩氏硬度是6.5-7.0,与翡翠是一样的，所以它怕刮，不怕磨，不怕擦，即使不小心在墙壁上磨擦，也不会出现划擦痕迹。 3、天然玛瑙色泽艳丽，花纹美妙，做成手镯、手链等首饰，是其他玉石所不能比的。 4、天然玛瑙花纹美丽奇妙，每一只玛瑙手镯都是天下唯一的，能够满足现代人们突显个性的需要。 5、玛瑙是佛教七宝之一，自古以来不时被当为辟邪物、护身符运用，意味友善的爱心和进展，有助于消弭压力、倦怠、浊气等负机能量。 6、夫妻房中铺排带水玛瑙，有助于夫妻情绪友善，促进闺房之乐。 7、红色玛瑙可改善内渗出，增强血液轮回，让气色变好，消弭性方面的障碍，避免性无能与不孕发生，偏橘色的红玛瑙则可对直肠，
胃肠都有功效，可活化内脏，预防便秘，辅佐排出毒素，对肝病、风湿、神经痛、静脉曲张等都有舒缓的功用，关于女性，历久佩带玛瑙能够是皮肤润滑，心情爽朗，血液轮回增强，使嘴唇红润，眸子明亮有神 佩戴玛瑙还能维持身体及心灵和谐，增强爱、忠诚、及勇气，可促进富足、幸福及长寿，有保平安功效。能发挥如王者的力量，令事件容易达成协议，名成利就，有避邪招财及聚财的作用。能激发勇气，带来信心使人勇敢的宝石；做事能贯彻始终，做人能坚守原则；亦可加强肉体生命力，适合体弱多病、或刚痊愈的人配戴。 红玛瑙的功效是什么 【生理作用】正红色的红玛瑙则可改善内分泌,加强血液循环,让气色变好,去除性方面的障碍,避免性无能与不孕产生,偏橘色的红玛瑙则可对直肠,胃肠都有效用,可活化内脏,预防便秘,帮助排出毒素,对肝病,风湿,神经痛,静脉曲张等都有舒缓的功用,不同颜色的玛瑙各有其作用,其中波斯瓦那也是玛瑙的一种,是天然完整的有眼矿珠，具有超强能量场，可以强化人体的以太禁红玛瑙石网生理能量场，对人体七个能量脉轮作能量传输与开发。加强个人气魄与磁场，吸引正面力量与好运，增强运势！据说玛瑙可增强免疫功能，促进血液循环，强化新陈代谢，让你头好壮壮不会手脚冰冷,还能治疗失眠及避免产生恶梦,对甲状腺,胸腺及声带与太阳神经从
赤小豆的功效与作用 赤小豆的药材分两种，一种叫赤小豆，一种叫赤豆，前者品质好，可惜现在很少了，基本都是赤豆，也都统称赤小豆。中医认为，赤小豆性平，味甘、酸，主治利水消种，解毒排脓。用于水肿胀满、脚气浮肿、黄疸尿赤、风湿热痹、痈肿疮毒、肠痈腹痛。入心、小肠经。 赤小豆能解热毒 根据《朱氏集验方》记载：“宋仁宗在东宫时患痄腮，命道士赞宁治之”，这个痄腮就是现在的腮腺炎，这位道士“取赤小豆四十九粒咒之，杂他药敷之而愈”。其实，道士是故弄玄虚，因为赤小豆本身有解毒的功能。当时，有个叫任承亮的人，他“患恶疮”，他的朋友“投以药立愈”。这个任承亮很好奇，就问：“您用这是什么药呢?”结果，朋友的回答得很痛快，说：“这个，赤小豆也。” 如果宝宝患了流行性腮腺炎，那么就可以利用赤小豆的解毒作用来治疗，用赤小豆五六十粒，研磨成粉，然后用鸡蛋清和清水，调成糊状，摊在纱布上，然后敷在患处，对腮腺炎的恢复很有好处，可以起到迅速消肿的作用。 赤小豆能利水湿 赤小豆利水湿，在生活中善用赤小豆能帮助我们解除身体的不适。 赤小豆冰糖水：在夏天的湿热天里，妈妈可以给用赤小
豆熬水来喝，给宝宝除湿利水。一次用30克左右，可以稍微的放入一点冰糖，如果宝宝脾胃不是虚寒型的，也可以放入一点绿豆，就可以增加祛暑的作用。 赤小豆鲤鱼汤：孕妈妈在后期有水肿的情况，可以用一个简单的食疗方子，即用赤小豆100克，然后用一条一斤以上的鲤鱼，一起熬汤，尽量少放盐和其他调料，喝汤吃鱼，中医认为，鲤鱼本身就是利水的食物，和赤小豆一起煮以后，作用就更加强了。但是不要一直喝，如果浮肿消了，就不用喝了，因为孕妇饮食的原则是多样性，不要一直使用什么食物坚持不变。 赤小豆能通乳 赤小豆还有一个作用，就是可以通乳。新妈妈在生产之后，乳汁的分泌出现问题，这时，也可以用赤小豆来解决问题。在南宋著名医家陈自明写的《妇人大全良方》一书中，他提到自己的妻子生孩子以后，没有奶，“产后乳脉不行已七十日”，结果身为妇科大师的陈自明也是没有办法，用了很多药都无效，把孩子搞得瘦弱不堪，很痛苦。 这时，有朋友偶然地送给他们家一些赤小豆，结果陈自明就煮了赤小豆汤给妻子喝，结果没有想到的是“当夜乳脉通行”。陈自明是大吃一惊，于是赶快翻书，结果看到本草书里面记载过，说赤小豆有通乳的作用。产后的妈妈们又多学了一招通乳的妙招呢!
赤小豆和红豆的区别 很多人分不清楚赤小豆和红豆这两种豆子，因为两种豆子都是暗红色的。赤小豆和红豆是一个样的吗？下面就一起来了解下赤小豆和红豆的区别。 其实赤小豆和红豆的区别还是很明显的，虽然颜色相同，但是形状上还是有很大区别的，赤小豆是扁身的，而红豆是圆身，而且两种豆子功效不同，吃起来口感也是不一样的。所以这两种豆子还是很容易区分的。 赤小豆，又名红豆、红小豆等，为豆科植物赤小豆或赤豆的干燥成熟种子。中医认为，赤小豆性味甘、酸、平，归心、脾、小肠经，有健脾益气、利水除湿、解毒排脓之功。能补脾，性善下行而利水，为滋养性食疗佳品，对脾虚湿盛，水肿胀满，肢体重困等，疗效甚佳。《神农本草经》言其“消热毒痈肿，散恶血不尽，烦满，治水肿及肌胀满”。《食疗本草》言其“甚治脚气及大腹水肿，散气，去关节烦热，令人心孔开，止小便数”。 红豆，又名相思豆等，为豆科植物相思子的成熟种子，广布于热带地区。中医认为，本品性味辛、苦、平，有毒，入心、肺经，有清热解毒，祛痰杀虫之功，适用于疮痈肿痛，腮腺炎等。《本草拾遗》言其“通九窍，治心腹气。止热闷头痛，风痰。杀腹藏及皮肤内一切虫”。
一、赤小豆和红豆的外形特征 赤小豆，除了赤豆、红小豆、饭豆等别名，又称为红豆。在本地市场，赤小豆和红豆则是两种色泽接近，长相却不一样的干豆。赤小豆呈细长形，颗粒比红豆小；红豆呈圆柱状，表面为暗棕红色。 红豆，又称相思豆，体积比较大，最常用的就是用来做美味的红豆沙糖水。而赤小豆体积比较小，最适合用来煲汤或者煮粥来吃，有利尿消除水肿的作用，非常适合产妇食用。 二、赤小豆和红豆的功效 赤小豆，性质平和、味甘、酸，是一种营养丰富的小干豆。在每100克的赤小豆中，含蛋白质20.7克，脂肪0.5克，碳水化合物58克，粗纤维4.6克，钙67毫克，铁5.2毫克，还有磷，维生素B1、B2、烟酸以及皂草甙等营养物质。由于赤小豆含有皂草甙物质，具有通便、利尿和消肿的作用，所以常吃赤小豆，可以清血、消除内脏疲劳，对心脏病和肾脏病患者特别有益。此豆还有“久食瘦人”的说法，对老年性肥胖症，有一定的减肥效用。 红豆，五味属甘酸，酸甘化阴，故能补阴血。有疏风清热，燥湿止痒，润肤养颜的功效。 三、赤小豆和红豆的食用方法 赤小豆做粥、做馅、做小吃皆宜。用赤小豆、粳米煮粥，
番红固绿染色简化法 ----------仅限观察植物苗期主根部导管1目的要求： 由于专业的番红固绿需要使用超薄切片机，其功能繁琐，并十分耗时，其主要包括染色，包埋，切片，脱蜡，复染等多个步骤，这里不再赘述。若没有切片机，我们往往要四处奔走求人并支付高昂的费用。经本人亲自实验和总结，采用传统常规染色法，在不使用切片机和钞票的条件下，整理如下流程。若只作为一般实验的验证，样品的容量不大并不需要长期保存的情况下，不需要超薄切片机，只需使用双层刮胡刀片，显微镜可以观察1毫米左右的切片。直径最好大于1mm，肉眼可分辨，一般只用于观察主根。为切片方便，可稍微将根晾干，再进行横切或纵切。 根据对刊用插图(照片)总的要求得出，文稿插图(含照片)的应用以少而精为原则。凡是能用文字说明的,应尽量不用插图,能用线条图表示的,就不用照片图;能用单色图表示的,就不用彩色图。即使是线条图也尽量避免搞成大幅的插页图,以便于编排和印刷。插图的线条必须准确,主次分明,清晰可辨,便于读者理解文字的内容。若切片够均匀，线条够清晰，也可作为论文插图。 2实验步骤： 2.1实验准备： 2.2材料：目的植物新鲜根部，刮胡刀刀片两片，越锋利越好，但注意安全。常规染色用品。 2.3试剂：无水酒精，95%酒精，蒸馏水，预先备制的苯胺番红试剂和苯胺固绿试剂（最好放置一段时间，可提前一月配置，效果更好，但不必要），二甲苯和50%体积无水乙醇和50%体积二甲苯混合液。 3实验步骤： 3.1切片： 按照前文介绍方法切片，若视力好，手法稳，可用单个刀片细细切下，要求，横切厚度在1mm左右，并呈透明圆形，确保中心完好。 3.2染色： 1）滴1-2滴无水酒精； 2）吸去无水酒精用95%酒精冲洗，使其平铺于玻片，酒精分散均匀； 3）第1滴蒸馏水与材料上，是材料包裹于水滴中； 4）滴1-2滴苯胺番红试剂，染色1-3min； 5）使用95%酒精冲去浮色并脱水，处理至透明状态，韧皮部分由于富集细胞壁，颜色可以偏红，其余部分为粉色透明状； 6）少量（一小滴）苯胺固绿复染，并迅速吸去，并滴入无水酒精，操作在2s内完成； 7）继续用无水乙醇洗脱至半透明状，以为无集中色斑为佳； 8）各50%体积的无水酒精和二甲苯混合物，1-2滴； 9）滴1-2滴二甲苯透明； 10）擦去材料以外药剂，使玻片清洁，可不使用盖玻片，一定不能使材料山的二甲苯干掉； 11）镜检。
南红玛瑙之灵性 红玛瑙是最具疗效的宝石之一(消化系统、胃痛)，可平衡正负能量，消除精神紧张及压力。维持身体及心灵和谐，增强爱、忠诚，同时也具激发勇气，使人信心果敢的功效，也适合体弱多病、或刚痊愈的人配戴。对于情绪化的蟹子，需要红玛瑙强大的力量来稳定思绪的困扰。 古时称之为赤玉，是最具疗效的宝石之一。正红色的红玛瑙则可改善内分泌，加强血液循环，让气色变好，去除性方面的障碍，偏橘色的红玛瑙则可对直肠、肠胃都有效用，可活化内脏，预防 红玛瑙 便秘，帮助排出毒素，对肝病、风湿、神经痛、静脉曲张等都有舒缓的功用。可平衡正负能量，消除精神紧张及压力。维持身体及心灵和谐，增强爱、忠诚、及勇气，可促进富足、幸福及长寿，有保平安功效。对思想消极，没有目标及冲劲的人，有刺激其好奇心及行动力的作用，让其认清目标、急起直追，也能消除恶意与忌妒，带来和平的新关系。加强创意与创作力，在创作的过程中灵感泉涌。红玛瑙的颜色娇嫩、鲜丽，令人惊艳！透光看时，会有明显的天然纹路,可爱极了！戴上后，会有皮肤更白皙细嫩的感觉。自古以来，学者们便把玛瑙视为宝石中的“第三眼”,象征着友善的爱心,也代表着希望。正红色的红玛瑙则可改善内分泌，加强血液循环，让气色变好，去除性方面的障碍，偏橘色的红玛瑙则可对直肠、肠胃都有效用，可活化内脏，预防便秘，帮助排出毒素，对肝病、风湿、神经痛、静脉曲张等都有舒缓的功用。心理作用：对目前现况消极，没有目标及冲劲的人，有刺激其好奇心及行动力的作用，
让其认清目标、急起直追，也能消除恶意与忌妒，带来和平的新关系。加强创意与创作力，在创作的过程中灵感泉涌 南红玛瑙： 功能：玛瑙属于水晶家族成员之一，颜色齐备。不论任何颜色的玛瑙，它的能量，都有着沉厚、安定及柔和特性。所以，它能帮助人体的每一个轮位（亦称能量中心），达到平行、隐定。一点也不刺激地，便可加强了每一轮位的功能和力量了。此外，还可帮助个人平伏紧张的情绪。「玛瑙」更是佛教的七宝石之一，可作辟邪用。自古以来学者把玛瑙视为宝石中的“第三眼”,象征友善的爱心,也代表希望。 【生理作用】正红色的红玛瑙则可改善内分泌,加强血液循环,让气色变好,去除性方面的障碍,避免性无能与不孕产生,偏橘色的红玛瑙则可对直肠,胃肠都有效用,可活化内脏,预防便秘,帮助排出毒素,对肝病,风湿,神经痛,静脉曲张等都有舒缓的功用,不同颜色的玛瑙各有其作用,其中波斯瓦那也是玛瑙的一种,是天然完整的有眼矿珠，具有超强能量场，可以强化人体的以太禁网生理能量场，对人体七个能量脉轮作能量传输与开发。加强个人气魄与磁场，吸引正面力量与好运，增强运势！据说玛瑙可增强免疫功能，促进血液循环，强化新陈代谢，让你头好壮壮不会手脚冰冷,还能治疗失眠及避免产生恶梦,对甲状腺,胸腺及声带与太阳神经从中枢都有作用。 【心理作用】对目前现况消极,没有目标及冲劲的人,有刺激其好奇心及行动力的作用,让其认清目标急起直追,也能消除敌人的恶意与忌妒,带来和平的新关系。加强创意与创作力,在创作的过程中灵感泉涌。同
黑豆、红豆、黄豆、绿豆的功效和价值 一、黑豆的功效与作用及食用方法黑豆能改善血液循环、提高排尿能力、消除浮肿的，多吃黑豆不但有助于减肥，还能让人保持精力充沛，富含卵磷脂和皂甙，卵磷脂能减少“坏胆固醇”，防止动脉硬化，而皂甙具有很强的抗氧化作用，能有效预防癌症和肥胖。更年期的女性多吃些黑豆还能缓解更年期的症状。 黑豆的调补服法: 一种是煮料豆法，即与它药同煮；明太医刘俗德《增补内经拾遗方论》载“煮料豆药方：老人服之能乌须黑发，固齿明目。”此方用当归12克，川芎、甘草、陈皮、白术、白芍、菊花各3克，杜仲、炒黄芪各6克，牛膝、生地、熟地各12克，青盐20克，首乌、枸杞子各25克，同黑豆煮透去药，晒干服豆。张石顽《本经逢原》述黑豆“入肾经血分，同青盐、旱莲草、何首乌蒸熟，但食黑豆则须发不白，其补肾之功可知”。这些都是以黑豆与药物同煮，然后去药食豆之法。另一种是：单服法，不与其它药同煮即具补肾养血之功。《本草纲目拾遗》言其“服之能益精补髓，壮力润肌，发白后黑，久则转老为少，终其身无病”。1、治盗汗：黑豆、浮小麦各30克，水煎服；或用黑豆、浮小麦各30克，莲子8克，黑枣7枚同煮。2、头昏畏明：以黑豆30克，菊花12克，枸杞子、刺蒺藜各15克煎服。3、腰痛：黑豆30克，炒杜仲15克，枸杞子12克，煎水服。4、月经不调：黑豆30克，苏木15克水煎，加红糖调服。 5、筋骨痹痛：黑豆30克，桑枝、枸杞子、当归各15克，独活9克，煎服。 6、婴儿湿疹：黑豆油30毫升，黄蜡15克，共熔化为膏，涂患处。 7、烫伤：黑豆250克，煮浓汁，取适量涂患处。黑豆的吃法: 1病后体虚用黑豆可促进康复：用黑豆100克，水浸30分钟，加水适量，煮沸后小火煮40分钟，用少许盐或糖调味，分两次食用，早晚各一次。一般食用一周即可见效。2．正在发育的儿童食用黑豆可促进生长：用黑豆1000克，置烤箱中干燥，研粉装瓶备用。每次20克，一日两次。用开水调成粉糊状或入稀粥中食用均可。四季食用效果更佳。3．患有白癜风或头发早白者用黑豆效果好：用何首乌1000克，食盐60克，共煮一大瓦锅水，滤去药渣，再加黑豆5000克，药液量以能淹没黑豆为度，煮30分钟，捞出，阴至八成干。然后如前法再煮再干，反复九次（即中药九蒸九晒炮制法）即可。每次嚼食25克，早晚个一次，坚持食用。4．肾炎水肿或营养不良性水肿食用黑豆能消肿，增进食欲：食用方法：黑豆100克，精肉50克，水适量，同煮40分钟，分两次食用，早晚个一次。或用黑豆1000克，胎盘一具，洗净，置烤箱中干燥，研粉装瓶备用。每次20克，早晚各一次，效果更显著。肺结核、慢性肝病等食用亦有良好效果。5．慢性湿疹、神经性皮炎用黑豆等煎液外用往往收到预想不到的效果方法是：用黑豆皮、蚕豆皮、扁豆皮125克，加水2500毫升，煎沸25分钟后离火待温，然后用敷料浸上述煎液湿敷患处，一日2次。一剂可用3－－4天。又名红小豆、饭豆、米豆、赤小豆。 二、红豆的功效与作用红豆富含淀粉，因此又被人们称为“饭豆”，它具有“津津液、利小便、消胀、除肿、止吐”的功能，被李时珍称为“心之谷”。红豆有清心养神、健脾益肾功效，加入莲子、百合更有固精益气、止血、强健筋骨等作用，能治肺燥、干咳，提升内脏活力，增强体力。养生也是护肤的重要的一部分，外调加上内养，才能造就一个水灵灵的女人。红豆在传统医学上，主要应用于行水——去水肿、利气——去脚气、健脾，如将红豆和鲤鱼煮汤食用，对水肿、脚气、小便困难等起食疗作用，还能治疗肝硬化、肝腹水、补体虚；红豆与冬瓜同煮后的汤汁是全身水肿的食疗佳品；红豆与扁豆、薏仁同煮，可治疗
微生实验报告 姓名： xx 专业年级：2011级生物技术 学号：1032 实验二细菌的简单染色和革兰氏染色 一、实验目的 学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法的实验原理和实验操作。 二、实验原理 用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。碱性染料的离子带正电荷，能和带负电荷的物质结合。因细菌蛋白质等电点较低，当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷，所以通常采用碱性染料（如美蓝、结晶紫、碱性复红或孔雀绿等）使其着色。酸性染料的离子带负电何，能与带正电荷的物质结合。当细菌分解糖类产酸使培养基pH值下降时，细菌所带正电荷增加，因此易被伊红、酸性复红、或刚果红等酸性染料着色。中性染料是前两者的结合物，又称复合染料，如伊红美蓝、伊红天青等。 简单染色法是只用一种染料使细菌着色以显示其形态的方法，简单染色一般难于辨别细菌细胞的构造。 革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家C.Gram所创立的。革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G—）两大类，是细菌学上最常用的鉴别染色法。该染色法之所以能将细菌分为G+菌和G—菌，是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。G—菌的细胞壁中含有较多的易被乙醇溶解的类脂质，增加了细胞壁的通透性，使处染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经番红复染后就成红色。G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔
径缩小，通透性降低，草酸铵结晶紫与碘的复合物不易被脱掉，因此细菌仍保留处染时的紫色。 三、实验器材 1、菌种： 金色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌。 2、染色剂和试剂： 草酸铵结晶紫染液，卢哥氏碘液，95%酒精，番红复染液，复红染液，吕氏美蓝染液，显微镜擦拭液（乙醚： 乙醇=7:3），xx柏油。 3、器材： 废液缸，洗瓶，载玻片，接种环，酒精灯，擦镜纸，双层瓶，显微镜。 四、实验方法 （一）简单染色 1．涂片： 取干净载玻片一片，在载玻片的左右各加一滴生理盐水，按无菌操作法取菌涂片，左边涂金黄色葡萄球菌，右边涂大肠杆菌，做成浓菌悬液。再取干净载玻片一块将刚制成的金黄色葡萄球菌浓菌悬液挑1~2环涂在左边制成薄的涂片，将大肠杆菌的浓菌悬液取1~2环涂在右边制成薄涂片。亦可直接在载玻片上制薄的涂片，注意取菌不要太多。 2．晾干： 让涂片自然晾干。 3．固定：
红豆的功效与作用 红豆，又称相思豆，体积比较大，最常用的就是用来做美味的红豆沙糖水。以下是为大家精心整理的红豆的功效与作用，欢迎大家阅读，供您参考。更多内容请关注。 红豆的功效与作用红豆的功效： 红豆有清心养神、健脾益肾功效，加入莲子、百合更有固精益气、止血、强健筋骨等作用，能治肺燥、干咳，提升内脏活力，增强体力。养生也是护肤的重要的一部分，外调加上内养，才能造就一个水灵灵的女人。 红豆在传统医学上，主要应用于行水——去水肿、利气——去脚气、健脾，如将红豆和鲤鱼煮汤食用，对水肿、脚气、小便困难等起食疗作用，还能治疗肝硬化、肝腹水、补体虚；红豆与冬瓜同煮后的汤汁是全身水肿的食疗佳品；红豆与扁豆、薏仁同煮，可治疗腹泻。另外，红豆还可与中药同用，如红豆配连翘和当归煎汤，可治疗肝脓肿；红豆配以蒲公英、甘草煎汤，可治疗肠痛等。 中医专家认为，红豆具有消肿、轻身的功效。适宜各类型水肿之人，包括肾脏性水肿、心脏性水肿、肝硬化腹水、营养不良性水肿等患者食用。夏季天气闷热，有些人会出现水肿的现象，这个时候喝些红豆汤，对于水肿有着非常好的食疗功效。如果能在刚出现水肿的时候喝红豆汤来调治，第二天就可以看到水肿的减退，再连服8天左右，就可以使水肿现象完全消失。 红豆的作用：
1、红豆含有较多的皂角甙，可刺激肠道，因此它有良好的利尿作用，能解酒、解毒，对心脏病和肾病、水肿有益； 2、红豆有较多的膳食纤维，具有良好的润肠通便、降血压、降血脂、调节血糖、解毒抗癌、预防结石、健美减肥的作用； 3、红豆是富含叶酸的食物，产妇、乳母多吃红小豆有催乳的功效。 红豆的吃法一、红枣红豆汤 红豆300克，红枣100克，红糖100克。 做法： 1、将红豆洗净，放入锅内，加清水烧开后转小火，待红豆快要爆开时，放人去核的红枣，依然用小火焖煮。 2、将红豆煮熟烂时，把火熄灭，放人红糖溶化即可饮用（冬季和妇女月经期适宜饮用热赤豆红枣汤，夏季待凉后饮用）。 二、红豆冬瓜茶 红豆200克、冬瓜100克、盐少许 做法： 1、先把红豆浸泡半个小时，加入煮滚的1000CC清水中，将冬瓜切成丁，然后和红豆一起煮30分钟左右，要把红豆煮熟就对了，然后熄火。 2、上盖闷十分钟，之后加上一点盐就可以了。每日餐后饮用， 至少吃两个星期 红豆与冬瓜同煮后的汤汁是全身水肿的食疗佳品，这种减肥法 适合各种年龄段减肥，并且适合男女减肥，是一种安全无副作用的减肥方法。
革兰氏染色法的步骤 详细阐叙革兰氏染色法的步骤 浏览次数:174次悬赏分:0 |解决时间:2011-5-25 17:44 |提问者:肖箫 2011shaw 最佳答案 革兰氏染色 一、目的:在细胞发放之前,利用标准的革兰氏染色法对即将发放的细胞悬液进行检测,判断细胞悬液中是否含有革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌。 二、原理: 通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色;而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差,在遇脱色剂后,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出,因此通过乙醇脱色后仍呈无色,再经沙黄等红色染料复染,就使革兰氏阴性菌呈红色。 三、实验用品准备: 灭菌玻片、10-100ul移液器、10-100ul灭菌移液吸头、100ul-1000ul移液器、100ul-1000ul移液吸头、接种环、酒精灯、打火机、革兰氏染色液、吸水纸、显微镜、香柏油、擦镜纸、计时器 四、操作: 1 涂片:取灭过菌的载玻片于实验台上,用移液枪吸取10ul待检样品滴在载玻片的中央,用烧红冷却后的接种环将液滴涂布成一均匀的薄层,涂布面不宜过大。 2 干燥:将标本面向上,手持载玻片一端的两侧,小心地在酒精灯上高处微微加热,使水分蒸发,但切勿紧靠火焰或加热时间过长,以防标本烤枯而变形。 3 固定:固定常常利用高温,手持载玻片的一端,标本向上,在酒精灯火焰处尽快的来回通过2-3次,共约2-3秒种,并不时以载玻片背面加热触及皮肤,不觉过烫为宜(不超过60℃),放置待冷后,进行染色。 4 初染:在涂片薄膜上滴加草酸铵结晶紫1-2滴,使染色液覆盖涂片,染色约 1min。 5 水洗:斜置载玻片,在自来水龙头下用小股水流冲洗,直至洗下的水呈无色为止。 6 媒染:用100-1000ul移液枪吸取约300ul碘液滴在涂片薄膜上,使染色液覆盖涂片,染色约1min。
石榴石——信心之石 代表忠诚、友爱、贞洁。能使人增加魅力、提升气质，增强自信。 碧玺——水晶之王 碧玺谐音"辟邪"，招财衲福，旺夫旺财，调和五行，提升女性魅力和爱情运。又称为“福晶”。砗磲
镇心、安神，防止老化，增强免疫力。 发晶 发晶：招主财、偏财，招贵人。代表着吉祥、财富、权力、地位，是商业人士的首选。粉水晶/芙蓉石
芙蓉玉与粉色水晶都象征幸福甜蜜的爱情，都能招来异性缘。 紫水晶——爱的守护石 紫水晶能赋予情侣、夫妻间深厚之爱、贞节、诚实及勇气。 琥珀/蜜蜡 安神定惊、活血化瘀、利水通灵。加速新陈代谢，清除体内毒素，提高抗病力及抗衰老
红珊瑚 药用：有定惊、明目的功能。作惊痫、角膜炎的药物。现代西医用来接骨，治溃疡。 欧珀/蛋白石 有助于散发个人魅力与风度，激发灵感、想象力与丰富的创意。是有专才、天才型人士们的宝石。能帮助爱情运和加强人气，增加对异性的吸引力。
孔雀石 孔雀石，一是种脆弱但漂亮的石头，用孔雀石做成手链，有“妻子幸福”的寓意。绿是最正、最浓的绿。 天河石 天河石是信心的宝石。西洋神秘传说，又绿又蓝的天河石，带有幸运、投机、化险为夷的能量。 澳洲玉 澳洲玉（绿色石髓）：开心的宝石，易交新朋友，可聚财，有助新事业。
虎睛 虎睛石能发挥如王者的力量，带来信心使人勇敢；有避邪招财及聚财的作用。有助增进决断力及创造力。 青金石 提升灵性，平稳心态，护身辟邪。促进交流，改善沟通及表达能力小朋友佩带可保平安健康、促进发育。 绿松石 有“成功之石”和“幸运之石”的美誉。聚财、旺财、避邪、保平安，有促进细胞再生、增强免疫、强壮身体，稳定情绪、增加大脑反应力等神奇功效。
植物制片的染色及显微化学鉴定方法 一、目的与要求 1、学习植物制片的一般染色方法。 2、学会并掌握常用显微化学鉴定法，即细胞壁化学组成及细胞内主要后含物性质的鉴定方法。 二、材料和用品 1、自备材料：植物叶片、芹菜叶柄、土豆块茎、花生种子等等，解剖器、剃刀或双面刀片。 2、其它材料和用品：显微镜、载玻片、盖玻片、纱布、吸水纸、蒸馏水、染色缸；0.1%番红、0.1% 固绿或1%苯胺蓝等染液、中性树胶、二甲苯、酒精、碘—氯化锌、盐酸—间苯三酚、苏丹Ⅲ、碘—碘化钾、10%氯化铁、盐酸等。 三、实验内容 1、植物制片的染色方法 2、常用显微化学鉴定法 四、实验方法 1、植物制片的染色方法 用徒手切片法切得的薄片，如果仅仅是为了临时观察，制成临时装片即可，这种临时制片不能长久保存，只能作临时观察之用，又由于没经过染色，结构显示的也不够清晰。为了求得更清晰地显示其细微结构及化学成分，并能够较长时间的保存，可以进一步染色及其它处理以至封片，从而可制成半永久或永久制片。常用的染色方法是番红—苯胺蓝（或固绿）二重染色法，具体操作方法有二： 方法一： （1）将植物切片材料放入30%酒精中，5分钟后移入水中。 （2）用0.1%番红水溶液染色12—24小时。 （3）倒去番红液，用清水冲洗数次后，再放回50%酒精中浸泡5分钟。 （4）将材料从50%酒精中转入70%酒精中脱色，直至硬木质化的细胞壁呈现红色，其它部分呈粉红色或近于无色时为止。 （5） 1%苯胺蓝（用70%酒精配制）对染2—5分钟。若用0.1%固绿对染，则仅需半分钟左右即可。 注意：此步染色，要不时地在显微镜下检视，切忌染色过深，当木质化细胞壁呈红色，其它部分为淡蓝或淡绿色时，即可停止。 （6）用95%酒精冲去多余染液，再经无水酒精脱水5分钟。 （7）放入等量无水酒精与二甲苯溶液中及纯二甲苯中透明各3分钟。 （8）将切片材料移入载玻片上，在二甲苯未干时立即加一滴中性树胶封片，尔后将玻片平放，自然凉干或置于摄氏35度温箱中烘干。 染色结果：木质化细胞壁呈现红色，纤维素细胞壁呈现蓝色或淡绿色。 方法二： （1）将切得的薄片移入盛有FAA固定液的小容器中，盖上盖固定半小时到1小时，24小时以上也可。材料经固定如不及时制片可移入70%酒精中长期保存。 （2）材料从固定液中移入盛有蒸馏水的小培养皿中，漂洗半小时到1小时，换水一次。 （3）将材料移入载玻片上，用吸水纸吸去多余水分，加一滴苯胺番红染色约10分钟。 （4）吸去染液，滴入95%酒精洗两次，去浮色及脱水。 （5）加一滴苯胺固绿复染约2～5秒钟，并轻轻晃动玻片，使染色均匀。（注意：此步骤要迅速，若染色时间过长会使红色全部褪去。） （6）吸去染液，滴入无水酒精洗两次，去浮色及脱水。 （7）滴入等量无水酒精与二甲苯溶液约1分钟后吸去，再滴入纯二甲苯冲洗2次，使材料透明。 （8）擦去材料以外的残存药剂，使玻片清洁，但不使材料上的二甲苯干掉，并及时镜检。 （9）镜检后，如材料的构造清晰，红绿对比鲜明，立即加一滴中性树胶封片。 染色结果同样是木质化细胞壁呈现红色，纤维素细胞壁呈现淡绿色。这种方法更节省时间一些。 2、常用显微化学鉴定法 显微化学鉴定法即将材料经化学试剂处理后，在显微镜下检查、判定细胞壁的化学组成及细胞内含物性质的方
改良番红O-固绿软骨染色液说明书 货号：G1371 规格：5×50ml/5×100ml 有效期：6个月有效 产品简介： 软骨组织由软骨细胞、软骨基质和纤维组成，软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。软骨染色方法有很多种，例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法等。 改良番红0-固绿软骨染色法的染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色，嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而成绿色或蓝色，与呈现红色的软骨对比鲜明，从而将软骨组织和骨组织区分开。番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料，其显示软骨组织是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团（硫酸软骨素或硫酸角质素）结合。番红O着色与阴离子的浓度近似成正比关系，间接反映了基质中蛋白多糖的含量和分布。当软骨受到损伤时，软骨中的糖蛋白会释放出来，使基质成分分布不均匀，从而导致番红O淡染或不着色。通过图像分析软件可对番红O染色的软骨基质进行定量分析。固绿与胶原纤维结合，不宜褪色。番红O-固绿染色的分化很关键，分化过度易导致切片不着色，分化不足易导致切片着色过深。 产品组成： 名称规格5×50ml5×100ml Storage 试剂(A)A1:Weigert A液25ml50ml RT避光 A2:Weigert B液25ml50ml RT避光临用时，取A1、A2等量混合为Weigert染液，24h后失去染色力，不宜预先配制。 试剂(B):酸性分化液50ml100ml RT 试剂(C):固绿染色液50ml100ml RT避光 试剂(D):Safranin O stain50ml100ml RT避光 试剂(E):弱酸溶液50ml100ml RT 自备材料： 10%福尔马林固定液，脱钙液，蒸馏水，系列乙醇。 第1页，共2页
革兰氏染色实验 革兰氏染色（Gram Staining）是用来鉴别细菌的一种方法：这种染色法利用细菌细胞壁上的生物化学性质不同，可将细菌分成两类，即革兰氏阳性（Gram Positive）与革兰氏阴性（Gram Negative）。(这种染色法是由一位丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰于1884年所发明)。 未经染色之细菌，由于其与周围环境折光率差别甚小，故在显微镜下极难观察。染色后细菌与环境形成鲜明对比，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，而用以分类鉴定。 阳性紫色，阴性红色 革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌： 革兰氏阳性菌：葡萄球菌属（主要是金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌等）、链球菌属（肺炎链球菌、草绿色链球菌、肠球菌等）、白喉杆菌、炭疽杆菌、破伤风杆菌、蜡样芽孢杆菌等，其中，金黄色葡萄球菌、肠球菌等为临床重要的病原菌。
革兰氏阴性菌：埃希氏菌属、枸橼酸菌属、假单胞菌属（绿脓杆 菌等）、莫拉菌属（卡他莫拉菌等）、奈瑟菌属（淋球菌、脑膜炎 双球菌等）、不动杆菌属（鲍曼不动杆菌、罗菲不动杆菌等）、克 雷伯菌属（主要是肺炎克雷伯杆菌）、沙门氏菌属、志贺氏菌属（痢 疾杆菌等）、黄杆菌属、变形杆菌属、军团菌属、耶尔森菌属、嗜 血杆菌属（杜克雷嗜血杆菌、流感嗜血杆菌等）、产气杆菌属、霍 乱弧菌、阴沟肠杆菌等。革兰氏阴性菌在院内感染中的细菌感染中 占了大约65%，且大多菌株容易对抗菌药物耐药，产生“新德里金 属酶”（NDM-1）的绝大多数细菌都是革兰氏阴性菌（主要是大肠 杆菌、鲍曼不动杆菌和肺炎克雷伯杆菌）。 革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌是利用革兰氏染色法来鉴别的两大类细菌。大多数化脓性球菌都属于革兰氏阳性菌，它们能产生外毒素使人致病，而大多数肠道菌多属于革兰氏阴性菌，它们产生内毒素，靠内毒素使人致病。 细胞形态和结构 细胞的基本结构包括细胞壁和原生质体两部分。原生质体位于细胞壁内，包括细胞膜（细胞质膜）、细胞质、核质和内含物。另外细胞还含有有些特殊结构，主要有荚膜、芽孢、鞭毛和菌毛等4种。 1.细胞壁
文章导读 如果对玛瑙有所了解的话，大家就会知道玛瑙有多种分类，今天为大家介绍的是绿玛瑙，其实就是指外表颜色为绿色的玛瑙，实际上，自然界原生的绿色的玛瑙是非常稀有的，现在市场上的很多绿色的玛瑙，其实是人工着色而成的，但同样非常珍贵，那么绿玛瑙对人体有什么作用和功效呢？ 绿玛瑙功效作用： 1、生理上，绿玛瑙是养人的宝石，绿色代表健康，长期佩戴可加强肉体生命力，适合体弱多病、或刚痊愈的人配戴，可活化内脏，预防便秘，帮助排除毒素，对肝病、风湿、神经痛、静脉曲张等都有舒缓的功用。 2、心里上，绿玛瑙也可平衡正负能量，首先能够对人的一些心理问题形成缓解的功效，在有着一些来自于工作或者是生活上的压力的时候，可以佩戴绿玛瑙来缓解。绿玛瑙可以激发人的勇气，使勇敢，在公众面前容易紧张的人或者是马上要进行一些公考或者是表演之类的时候也容易产生紧张情绪的人，可以佩戴绿玛瑙来增加自信。 3、绿玛瑙有非常好的美容养颜功效，虽然没有石榴石、红碧玺的功效强大，但是绿玛瑙的价格实惠，颜色独特艳丽。绿玛瑙能够促进血液循环，调节新陈代谢，平衡女性荷尔蒙分泌，使女性气色红润，延缓衰老。 4、玛瑙是佛教七宝之一，所以绿玛瑙的也有很强的辟邪作用，经常被当做护身符使用。 5、绿色的宝石几乎都有招财的功效，所以绿玛瑙也是财富的象征，佩戴绿玛瑙可促进富足、幸福及长寿，使在工作中发挥如王者的力量，令事件容易达成协议，名成利就。 佩戴绿玛瑙的同时不能佩戴佛、菩萨、貔貅、八卦镜、龙龟、白菜、财神、鹰、文昌塔、聚宝盆、泰山石。这是因为带佛、菩萨代表修行佛教，佛教讲究的是不求今世但求来生。佛教讲究一切如梦、一切都是身外之物。要是带绿玛瑙再带“佛、菩萨”就无任何功效，只能当做一般的饰品。 绿玛瑙能够帮助女性的皮肤变得更加白皙，除此之外，绿玛瑙还有旺夫的功效，想旺夫的女性朋友，也可以佩戴绿玛瑙饰品。
谁知道红豆跟赤小豆有什么区别？从外观到功效？ 两者颜色相同，但是形状不同。红豆比较圆，赤小豆是细长的，稍扁。煮完之后，红豆会变软，但是赤小豆即便泡过之后再煮，也煮不烂，吃着比较硬。 红豆，又叫红饭豆，个头稍大，就是常用来做豆沙的豆子，有祛湿作用。 赤小豆，个头较小，有红有黑，红如朱，黑如漆，有毒。有一副重要叫做瓜蒂散，里面就是利用赤小豆的毒性来催吐的。 所以大家一定要知道区分，别跑药店买个有毒的赤小豆回来吃了。 赤小豆性质平和、味甘、酸，是一种营养丰富的小干豆。在每100克的赤小豆中，含蛋白质20.7克，脂肪0.5克，碳水化合物58克，粗纤维4.6克，钙67毫克，铁5.2毫克，还有磷，维生素B1、B2、烟酸以及皂草甙等营养物质。 由于赤小豆含有皂草甙物质，具有通便、利尿和消肿的作用，所以常吃赤小豆，可以清血、消除内脏疲劳，对心脏病和肾脏病患者特别有益。此豆还有“久食瘦人”的说法，对老年性肥胖症，有一定的减肥效用。 赤小豆做粥、做馅、做小吃皆宜。用赤小豆、粳米煮粥，不但利水消肿，而且可以健脾胃。而赤小豆冬瓜糖水，则是一道小朋友的健康甜汤，有驱暑健脾的功效。
赤小豆质地坚硬，难于煮烂，如果要与粳米同煲，则应该先把赤小豆煮烂后，才加入粳米。另外，赤小豆适合用适量的糖调味，但不宜放盐，否则不利水分的排出。 赤小豆，除了赤豆、红小豆、饭豆等别名，又称为红豆。在本地市场，赤小豆和红豆则是两种色泽接近，长相却不一样的干豆。赤小豆呈细长形，颗粒比红豆小；红豆呈圆柱状，表面为暗棕红色。 向几名中医师查询，他们说，赤小豆与红豆尽管长相不同种属却相同，同属豆科植物，性质和营养成分也接近，只是赤小豆的功效强些，所以中医入药都用赤小豆，而红豆则只供一般食用。 赤小豆呈细长形，颗粒比红豆小，红豆呈圆柱状，表面为暗棕红色。红豆大颗，赤小豆小颗，赤小豆小而扁，红小豆有点圆，我们这里广东汤喜欢用赤小豆，祛湿的，广东天气湿热，一方水土养一方人，没听说过赤小豆有毒，当然过量吃什么都有毒了，赤小豆也可以煲得软烂，煲汤之前浸泡一下就行了