浙江大学
硕士学位论文
落新妇抗肿瘤活性成分的构效关系及其作用
姓名：郑全芳
申请学位级别：硕士
专业：动物预防医学
指导教师：孙红祥;方维焕
20050501
硕士学位论文落新妇抗肿瘤活性成分的构效关系及其作用机制研究
落新妇化学成分及其药理作用研究进展（综述）
落新妇Ａｓｔｉｌｂｅｃｈｉｎｅｎｓｉｓ（Ｈａｘｉｍ．）Ｆｒａｎｃｈ．ｅｔＳａｖａｔ，别名红升麻、马尾参、野升麻、虎麻、金毛三七（浙江），系虎耳草科（Ｓａｘｉｆｆａｇａｃｅａｅ）落新妇属植物，多年生草本，高４０～１００ｃｍ。根茎粗大呈长块状，横生，有暗褐色须根，基生叶２～３回三出复时或羽状复叶，有长柄，柄上有长柔毛，小叶卵形或卵状菱形，长２～１０ｃｍ，宽１～４ｃｍ，边缘有重锯齿，两面叶脉上疏生硬毛；茎生叶较小，２～３片。圆锥花序，密生棕色长柔毛或间有腺毛，花密集；花瓣５，狭条形，紫红色；雄蕊１０，花药青色。果长．３～４ｍｍ。种子多数，长形，两端细尖。花期６－－７月，果期８Ｎ９月，主要集中分布于东亚，生于海拔４５０—３８００米之山谷溪边、林下、林缘和草甸等处【１．３】。
１．落新妇化学成分
落新妇化学成分早期研究报道，根茎主要含矮茶素ｆ即岩白菜素Ｂｅｒｇｅｎｉｎ）１．０％，淀粉１９．４７％，鞣质１３．７３％，２－羟基苯乙酸０．００５％，研究主要集中于岩白菜素（矮茶素’ｆ４￣７】。ＯｈＫａｐＪｉｎ等Ｌ７ｊ从落新妇根乙醇提取物的乙酸乙酯部位中分离得到５个化合物：没食子酸（ｇａｌｌｉｃａｃｉｄ）、儿茶素（ｃａｔｅｃｈｉｎ）、没食子儿茶素（ｇａｌｌｏｃａｔｅｃｈｉｎ）、岩白菜素（ｂｅｒｇｅｎｉｎ）和１１－没食子酰岩白菜素（ＩＩ—Ｏ－ｇａｌｌｏｙｌ—ｂｅｒｇｅｎｉｎ）。孙红祥等‘岳ｊＩ】为了寻找高效、低毒的抗肿瘤化合物，对浙江产落新妇的乙醇提取物的石油醚、正丁醇、乙酸乙酯及水四部分萃取物进行了体外抗肿瘤活性比较，发现石油醚萃取物的抑瘤作用最强、乙酸乙酯部分次之。因此，选择醇提取物的石油醚和乙酸乙酯萃取部分进行化学成分研究，并先后从中分离得到ｐ．谷甾醇（伊ｓｉｔｏｓｔｅｒ０１）、岩白菜素（ｂｅｒｇｅｎｉｎ）、伊谷甾醇棕榈酸酯（ｆｌ－ｓｉｔｏｓｔｅｒｏｌｐａｌｍｉｔａｔｅ）、胡萝ｈ苷（ｄａｕｃｏｓｔｅｒ０１）、筇一羟基齐墩果一１２一烯－２７一羧酸（３卢．ｈｙｄｒｏｘｙｏｌｅａｎ．１２．ｅｎ一２７一ｏｉｃａｃｉｄ）、驴，筇．二羟基齐墩果一１２一烯－２７一羧酸（３卢，６ｆｌ－ｄｉｈｙｄｒｏｘｙｏｌｅａｎ一１２一ｅ１１—２７．ｏｉｃａｃｉｄ，ＡＴＢ）、３芦．羟基乌
堡主兰堡堡苎整堑塑垫盟塑适竺堕坌盟塑塾羞墨墨茎堡里塑鱼！堑塞
其化学式为Ｃ３２Ｈ５００４，分子量为４９８．３７０９，和ＡＴＡ的区别是Ｃ３．ＯＨ被乙酸基取代。这些化合物的化学结构见Ｆｉｇ．１；ＡＴＡ祀ＡＴＢ的单晶ｘ一衍射分析结果见Ｆｉｇ．２—３。
１Ｒ】＿ｏＨ，Ｒ２＝Ｈ
３ＲＩ＝ＯＨ，Ｒ２＝ｏＨ
２
４Ｒｌ＝ＯＡｃ，Ｒ２＝Ｈ
Ｆｉｇ．１．ＴｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｓｔｍｃｎＪｒｅｏｆｆｏｕｒＣｏｍｐｏｎｅｎｔｓArrayＦｉｇ．２．ＡｖｉｅｗｏｆＡＴＡ，ｗｉｔｈｔｈｅａｔｏｍｉｃｎｕｍｂｅｒｉｎｇｓｃｈｅｍｅ．Ｈａｔｏｍｓｈａｖｅｂｅｅｎｏｍｉｔｔｅｄｆｏｒ
ｃｌａｒｉｔｙ．
堡主堂焦笙塞鲨堑塑垫塑堕适竺堕坌竺塑墼差墨墨苎堡旦垫型堑茎一
Ｆｉｇ．３．ＡｖｉｅｗｏｆＡＴＢ，ｗｉｔｈｔｈｅａｔｏｍｉｃｎｕｍｂｅｒｉｎｇｓｃｈｅｍｅ．Ｈａｔｏｍｓｈａｖｅｂｅｅｎｏｍｉｔｔｅｄｆｏｒｃｌａｒｉｔｙ．
４．２对三种肿瘤细胞株的增殖抑制作用
四种化合物对三种细胞株的ＩＣ５０值见Ｔａｂｌｅｌ。ＡＴ’Ａ、ＡＴＣ、ＡＴＤ三种化合物效果均比ＡＴＢ作用效果好ｆＰ＜０．ｏｏｉ），但ＡＴＤ作用较果也不如ＡＴＡ（Ｐ＜０．０１，Ｈｅｌａ）、ＡＴＣ（Ｐ＜０．０１，ＨＯ一８９１０，Ｐ＜Ｏ．０５，ＨＬ－６０），且存在细胞株种类的差冥。］ｋＴＡ和ＡＴＣ作用效果没有显著性差异（Ｔａｂｌｅ１）。
比较ＡｒＡ等４个化合物对三种细胞株的敏感性，发现ＡＴＡ、ＡＴＣ和ＡＴＤ三者对Ｈｅｌａ细胞增殖抑制作用和对ＨＬ－６０细胞相差不显著（Ｐ＞Ｏ．０５），而对ＨＯ－８９１０抑制作用剐显著低于前两种细胞株。可以看出具有一定的选择性作用。
Ｔａｂｌｅ１．ＩＣ５０ｖａｌｕｅｓｏｆＡＴＡ，ＡＴＢ，ＡＴＣａｎｄＡＴＤａｇａｉｎｓｔｔｈｒｅｅｔｕｍｏｒｃｅｌｌｌｉｎｅｓ（ｎ＝４，Ｘ±ｓＤ）．
Ｔｕｒｎｏｒｃｅｉｌｌｉｎｅｓ
１Ｃｓ０（ｇｍｏｌ／Ｌ）
ＨｅｌａＨ０．８９１０ＨＬ一６０
ＡＴＡ１４，】３ＡＯ．７２２１．７９ｉ４．２７ｉ１．７７＋４．３８
ＡｒＣＡＩＴＢ１４．９士１．９２１９．７０士１．４０１２．６０士０．７２
７１．３４±７．７３ｂ坛７４．６０士５，４４ｂ电５３，４３士５．３３ｂ睡
ＡＴＤ一１６．０７士０．１０８２６．２３士２．８５。１７．３６士３．７３。
８Ｐ＜０．０１，６Ｐ＜０．００１ⅧＡＴＡ：中＜０．０５，ｅｐ＜０．ｏｌ，ｆＰ＜０．００１ｖｓＡＴＣ；ｇＰ＜Ｏ．００１ｖｓ
ＡＴＤ．