幻灯片1
第十二章 R N A 的生物合成
(转录)
(RNA Biosynthesis, Transcription)
转录是指以DNA 为模板合成RNA 的过程 。
幻灯片2
复制和转录的区别
幻灯片3
第一节 转录基本规律与体系
(Basic Rules and System of Transcription) 一、不对称转录 (一)转录的模板 1. DNA 分子上转录出RNA 的区段，称为结构基因(structural gene)。结构基因中能转录生成RNA 的一股单链，称为模板链(template strand)，也称作有意义链或Watson 链。另一股单链是编码链(coding strand)，也称为反义链或Crick 链。
2. 在包含多个基因的DNA 分子中，各基因的模板链并不总在同一条链上，在某个基因节段以其中某一条链为模板进行转录，而在另一个基因节段上则以其对应单链为模板，这种选择性称不对称转录。 幻灯片4
参与物质
原料: NTP (ATP, UTP, GTP, CTP) DNA 模板
RNA 聚合酶(RNA polymerase, RNA-pol)
其他蛋白质因子
配对
聚合酶 - pol A - U ， T - A ， G - C
A - T ， G - C
mRNA
， tRNA ， rRNA
子代双链
DNA
（ 半保留复制）
产物
RNA (RNA )
DNA 聚合酶 酶 NT
dNT
原料 模板链转录(不对称转录) 两股链均复制 模板 转录
复制
(二) 转录的特点
1. 转录的不对称性
2. 转录方向的单向性
3. 转录不需要引物形成连续性
4. 转录过程有特定起始和终止点 幻灯片5
二、 RNA 转录的体系
(一)模板
结构基因双链中的一股链。
(二)原料
4种核糖核苷酸：ATP 、UTP 、GTP 、CTP 。
(三)RNA 聚合酶
1.原核生物的RNA 聚合酶
幻灯片6
原核生物的RNA 聚合酶
5 3
3 5
模板链 编码链 编码链
模板链
转录方向
转录方向
5′···GCAGTACA TGTC ···3′
3′··· c g t g a t g t a c a g ···5′ 5′···GCAGUACAUGUC ···3′
N······Ala · Val · His · Val ······C
编码链 模板链 mRNA 蛋白质
转录
翻译
核心酶
全酶
DNA
RNA 聚合酶全酶在转录起始区的结合 幻灯片7
2.真核生物的RNA 聚合酶
(四)蛋白因子
RNA 转录时除需以上物质外，还需要一些蛋白因子参与。如原核生物使转录过程终止ρ因子。真核生物聚合酶Ⅱ启动转录时的转录因子。 幻灯片8
第二节 R N A 转录过程
(The Process of Transcription) 一、原核生物的转录过程 (一)转录起始
a 36512
决定哪些基因被转录
b 150618 催化功能 b￠ 155613
结合
DNA
模板
s
70263 辨认起始点
亚 基 分 子 量 功 能
TA TAATA TA TTA
+1
-55
TTGACAA
ACTGA
+2
种类 Ⅰ Ⅱ Ⅲ 对鹅膏蕈碱
的反应
45S - rRNA
hnRNA
5S - rRNA tRNA
snRN 耐受
极敏感
中度敏感
转录产物
● 转录起始需解决两个问题
● (1)RNA 聚合酶必须准确地结合在转录模板的起始区域。 ● (2)DNA 双链解开，使其中的一条链作为转录的模板。
幻灯片9
2. 转录起始过程
(1) RNA 聚合酶全酶( 2 )与模板保守序列结合。 (2) DNA 双链解开。
(3) 在RNA-pol 作用下形成转录起始复合物。 (4)转录起始复合物:
RNApol ( 2 ) - DNA - pppGpN- OH 3
原核生物启动子的保守序列 幻灯片10 (二)转录延长
1. 亚基脱落，RNA –pol 核心酶变构，与模板结合松弛，沿着DNA 模板推进，NTP 不断聚合RNA 链不断延长。
(NMP) n + NTP (NMP) n+1 + PPi
转录空泡(transcription bubble)： RNA-pol (核心酶) ···· DNA ···· RNA
TGTTGACA
TA TAAT
5/ 5/
3/
3/ -35区
-10区
转录方向
基因转录区
启动子
+1
编码链 模板链
幻灯片
11
转录延长
2.原核生物转录过程中的羽毛状现象
幻灯片12 (三)转录终止
1.依赖ρ (Rho)因子的转录终止 ρ因子以六聚体形式存在，协助RNA-pol 识别终止信号，与转录产物结合，RNA 和RNA-pol 一起从模板上脱落。
幻灯片13
5 3
DNA
核糖体
RNA
RNA 聚合酶
A T P
rho
5/
3/
5/
3/
rho
2.非依赖ρ因子的转录终止 DNA 模板上靠近终止处，有些特殊的碱基序列，可转录出具有茎环结构的RNA ，来终止转录。
幻灯片14
二、真核生物的转录起始 (一)转录起始
真核生物的转录起始上游区有不同DNA 序列的顺式作用元件，转录起始时，RNA-pol 不直接结合模板，由转录因子识别起始部位。 1. 转录因子
(1)能直接、间接辨认和结合转录上游区段DNA 的蛋白质，现已发现数百种，统称为反式作用因子(trans-acting factors)。
(2)反式作用因子中，直接或间接结合RNA 聚合酶的，则称为转录因子(transcriptional factors, TF)。 幻灯片15
参与RNA-pol Ⅱ转录的TF Ⅱ
* TBP(TATA binding protein) : TATA 结合蛋白。
5/ 35/
3
3
5/
转录产物
RNA 聚合酶
DNA
35
/
3/ 5/ DNA
5/
U-U-U-U-U-U-U-U 3
RNA 聚合酶
CTD 酸化
(
α ) RN
TF TB
TA T
转录因子 蛋白激酶活性，使 CTD ***
磷 TF Ⅱ H
ATPase
57 34 TF Ⅱ E 解螺旋酶 30 ， 74 TF Ⅱ F 促进 RNA - pol Ⅱ 结合及作 为其他因子结合的桥梁 33 TF Ⅱ B 稳定 Ⅱ
D - DN 复合物 12 ， 19 ， 35 TF Ⅱ A 辅助 TBP - DN 结合 TAF**
结合 TA 盒
TBP* 38 TF Ⅱ D
功 能
亚基组成，分子量 ( kD )
( β )
** TAF(TBP associated factors) :TBP辅助因子。在不同的基因转录中有不同的TAF辅助。***CTD(carboxyl terminal domain) : RNA-polⅡ大亚基羧基末端结构域。
幻灯片16
2. 转录起始前的上游区段
修饰点
顺式作用元件(cis-acting element)
切离加尾
AATAAA
外显子
翻译起始点
转录起始点
转录终止点
内含子
增强子
TATA盒
CAAT盒
GC盒
幻灯片17
3. 转录起始前复合物 (pre-initiation complex, PIC)
幻灯片18
(二)转录延长
真核生物转录延长过程与原核生物大致相似，但因有核膜相隔，没有转录与翻译同步的现象。
(三)转录终止
和转录后修饰密切相关。
三、转录后的加工修饰
主要的修饰方式有剪接、剪切、修饰、添加。
剪接(splicing)
剪切(cleavage) 幻灯片19
(一) 真核生物mRNA 的转录后加工
1. 5 端形成 帽子结构(m7GpppNm —)。
2. 3 端加上多聚腺苷酸尾巴(poly A tail)。
POL-Ⅱ
TF ⅡF ⅡA
Ⅱ
TF ⅡF
ⅡH
Ⅱ
TB
TAF TF ⅡD-ⅡA-ⅡB-DNA 复合物
TATA ⅡA
ⅡB TBP TA TA TA ⅡH
ⅡE CTD- P
POL-Ⅱ
幻灯片20
3.mRNA 的剪接
(1) 断裂基因(splite gene)
真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，称为断裂基因。
(2)外显子(exon)在断裂基因及其初级转录产物上出现，并表达为成熟RNA 的核酸序列。
(3)内含子(intron)隔断基因的线性表达而在剪接过程中被除去的核酸序列。 幻灯片21
鸡卵清蛋白基因及其转录、转录后修饰
鸡卵清蛋白基因 转录
hnRNA
7－甲基鸟苷三磷酸 帽子结构
多聚A 尾结构 O
O CH
O
O
+
N HN N
O H2N
N
CH3 O O
H2C O-
O
P
O
O P
O-
O P
鸟嘌呤
O O-
O P
O O AAA-OH 3/
编码区 A 、B 、D 、F 非编码区 C 、E
A B C D E F 7.7kb
L 1 2 3 4 5 6 7
A B C D E F G 47 185 51 129 118 143 156 1043
首、尾修饰
hnRNA 剪接
成熟的mRNA
幻灯片22
GpppG
AA···AAA
GpppG AA···AAA
GpppG AA···AAA
1. 转录后剪切
tRNA前体
内切酶
tRNA核苷酸转移酶、连接酶
ATP
ADP
tRNA 幻灯片23
2. 碱基修饰 (1)甲基化
如：A Am (2)还原反应 如：U DHU T Ψ环
(3)核苷内的转位反应 如：U ψ (4)脱氨反应 如：A I 幻灯片24
(三) rRNA 的转录后加工
(1
(3
(2
(4
氨基酸臂
额外环
OH
A CC A G
A G G G C
CCCCC
GC
AA G
CCG
CU CU CG UA
U
C
T
C
C
GGGGG GGC
A
A G D D G G D
D D A
A C A
G
U U A
I
A
A ψ G U UC C D
m A
A
C A DUH 环
反密码
反密码子
m m
(1
幻灯片25
第三节
逆转录
(Reverse Transcription) 一、逆转录与逆转录酶
DNA
内含子
内含子
28S
5.8S
18S
转录
45S - rRNA
剪接
5.8S 和28S-rRNA 18S - rRNA
(一)
逆转录现象
1.逆转录现象发现于逆转录病毒。
2.cDNA 是指以RNA 为模板，经逆转录合成的与RNA 碱基序列互补的DNA 链。 幻灯片26
二、逆转录研究的意义
(一) 逆转录酶和逆转录现象，是分子生物学研究中的重大发现，发展了中心法则。 (二) 逆转录现象说明至少在某些生物，RNA 同样兼有遗传信息传代与表达功能。 (三) 对逆转录病毒的研究，拓宽了20世纪初已注意到的病毒致癌理论。
逆转录酶
RNA 模板
逆转录酶
DNA-RNA 杂化双链
RNA 酶
cDNA
逆转录酶
双链DNA
I. 1: how many carbons does Arachidic acid have? (20 carbons) 2: how many double bonds does Arachidonic acid have? (4 double bonds) 3: list two advantages that fats have over sugars as stored fuels (more energy gram for gram; no hydration needed) 4: where inside the cells are most of the phospholipids degraded (lysosomes) 5: oligosaccharide head groups determine the blood type of an individual. How are they attached to the plasma membrane? (glycosphingolipids or lipids and surface proteins) 6: list at least one genetic disease that could result from abnormal accumulation of membrane lipids (Tay-Sachs, Sandhoff’s, Fabry’s, Gaucher’s, or Niemann-Pick diseases) 7: list the three main eicosanoids that produced from arachidonic acid (prostaglandins; thromboxanes; and leukotrienes). 8: list one NASID you know (aspirin, ibuprofen, or acetaminophen or meclofenamate) 9: list two fat-soluble vitamins (A, D, E, K) 10: which vitamin can be derived from beta-carotene (A). 11: which year was the fluid mosaic model proposed? (1972) 12: why the thickness of most biological membranes is thicker than 3nm, the standard thickness of lipid bilayer? ( due to association of proteins to the membrane and carbohydrates on the membrane) 13: Please define the transition temperature of the lipid bilayer (the temperature above which the paracrystalline solid changes to fluid) 14: If a membrane protein has its N-terminus exposed to the outside of the cell while its C-terminus resides in the cytosolic compartment, is it a type I transmembrane protein ? (yes). 15: How can you predict if a protein has a transmembrane domain? (hydropathy or hydropathy index, or hydropathy plot). 16: Name the two cell surface receptors that HIV use to enter cells (CCR5 and CD4). 17: For the Na+ K+ ATPase, how many Na+ and K+ can it move across the membrane for the hydrolysis of one ATP (2 K+ in, 3 Na+ out). 18: what drives F-type ATPases to synthesize ATP? (proton or proton gradients) 19: The acetylcholine receptor is a _____-gated channel (Ligand) 20: The neuronal Na+ channel is a _____-gated channel (voltage) II. D and H (3 points) The antiparallel orientation of complementary strands in duplex DNA was elegantly determined in 1960 by Arthur Kornberg by nearest-neighbor analysis. In this technique, DNA is synthesized by DNA polymerase I from one (alpha-32P)-labelled and three unlabelled deoxynucleoside triphosphates. The resulting product is then hydrolyzed by a Dnase that cleaves phosphodiester bonds on the 3’ sides of all deoxynucleotides. For example, in the labeled dATP reaction, ppp*A + pppC + pppG +pppT --? …pCpTp*ApCpCp*ApGp*Ap*ApTp… - ? …+Cp+Tp*+Ap+Cp+Cp*+Ap+Gp*+Ap*+Ap+TpT…
绪论生物化学：是研究生命化学的科学，它从分子水平探讨生命的本质，即研究生物体的分子结构与功能、物质代谢与调节及其在生命活动中的作用。运动生物化学：是研究人体运动时体内的化学变化即物质代谢及其调节的特点与规律，研究运动引起体内分子水平适应性变化及其机理的一门学科。 运动生物化学的任务主要体现在：1、解释人体运动变化的本质；2、评定和监控运动人体的机能；3、科学的知道体育锻炼和运动训练。 第一章 1.酶催化反应的特点是什么？影响酶促反应速度的因素有哪些？ 一、高效性；二、高度专一性；三、可调控性 一、底物浓度与酶浓度对反应速度的影响；二、PH对反应速度的影响；三、温度对反应速度的影响；四、激活剂和抑制剂对反应速度的影响； 2.水在运动中有何作用？水代谢与运动能力有何关系？ 人体内的水是进行生物化学反应的场所，水还具有参与体温调节、起到润滑等作用，并与体内的电解质平衡有关。 运动时，人体出汗量迅速增多，水的丢失加剧。一次大运动负荷的训练可以导致人体失水2000~7000ml,水丢失严重时即形成脱水，会不同程度的降低运动能力。 3.无机盐体内有何作用？无机盐代谢与运动能力有何关系？ 无机盐在体内中解离为离子，称为电解质，具有调节渗透压和维持酸碱平衡等重要作用。
4.生物氧化合成ATP有几种形式，他们有何异同？ 生物氧化共有两种形式：1、底物水平磷酸化；2、氧化磷酸化 相同点：1、反应场所都是在线粒体；2、都要有ADP和磷酸根离子存在 不同点：1、在无氧代谢供能中以底物水平磷酸化合成ATP为主，而人体所利用的ATP约有90%来自于氧化磷酸化的合成即在有氧代谢中主要提供能量；2、底物水平低磷酸化不需要氧的参与，氧化磷酸化必须要有氧；3、反应的方式不同。 5.酶对运动的适应表现在哪些方面？运动对血清酶有何影响？ 一、酶催化能力的适应；二、酶含量的适应。 ①、运动强度：运动强度大，血清酶活性增高 ②、运动时间：相同的运动强度，运动时间越长，血清酶活性增加越明显 ③、训练水平：由于运动员训练水平较高，因此完成相同的运动负荷后，一般人血清酶活性增高比运动员明显 ④、环境：低氧、寒冷、低压环境下运动时，血清酶活性升高比正常环境下明显。 6.试述ATP的结构与功能。 ATP分子是由腺嘌呤、核糖和三个磷酸基团组成的核苷酸，其分子结构 功能：生命活动的直接能源；合成磷酸肌酸和其他高能磷酸化合物 7.酶：酶是生物体的活性细胞产生的具有生物催化功能的蛋白质。 生物氧化：指物质在体内氧化生成二氧化碳和水，并释放出能量的过程。生物氧化实际上是需氧细胞呼吸作用中一系列氧化---还原反应，故又称为细胞呼吸。 同工酶：人体内有一类酶，他们可以催化同一化学反应，但催化特性、理
https://www.doczj.com/doc/3710703258.html,/entry/uqjedAc4/ 北大医学部视频资源http://202.112.190.68/shipin.htm 北京中医药大学精品课程https://www.doczj.com/doc/3710703258.html,/ 北大医学部视频资源http://202.112.190.68/shipin.htm 上海中医药大学网络教学资料 方剂学视频:https://www.doczj.com/doc/3710703258.html,/jpkj/fjx/shikuang.htm 方剂学网络课件:https://www.doczj.com/doc/3710703258.html,/jpkj/fjx/index.htm 实验中医学视频:https://www.doczj.com/doc/3710703258.html,/jpkj/syzyx/shikuang.htm 中医内科学课件:https://www.doczj.com/doc/3710703258.html,/jpkj/zynk/cai/ctm.rar 安装须知:https://www.doczj.com/doc/3710703258.html,/jpkj/zynk/cai/setup.rtf 内科学视频:https://www.doczj.com/doc/3710703258.html,/jpkj/zynk/shikuang.htm 针灸学网络课程http://61.129.75.54/zhenjiu/zj_demo/index.htm 辽宁中医学精品课程https://www.doczj.com/doc/3710703258.html,/jpkc/article_index.asp 天津中医学院-实验针灸学网络教学 http://202.113.168.14/zhenjiu/101/ 帐号:test/密码:test http://202.113.168.14/zhenjiu/101/50.htm里面的视频都可以下载! 广州中医药大学精品课程 http://210.38.96.15/index.htm http://210.38.96.15/zjtn/index.htm http://210.38.96.15/zynkx/CONTENT/SHIPIN.HTM http://210.38.96.15/shl/index.htm 福建中医学院精品课程https://www.doczj.com/doc/3710703258.html,/JPKC/JPKC.HTM 暨南大学精品课程https://www.doczj.com/doc/3710703258.html,/ 陕西医学高等专科学校组胚教研室精品课程 https://www.doczj.com/doc/3710703258.html,/jxlx/jxlx.htm 海南医学院精品课程http://210.37.79.3/jingpin/index.htm 四川大学精品课程---医学部分 诊断学http://219.221.200.61/2003/58/classonline.htm 药物化学http://219.221.200.61/2003/show.asp?id=63 病理学http://219.221.200.61/g2003/show.asp?id=57 护理学基础http://219.221.200.61/2004/show.asp?id=47 生理学http://219.221.200.61/2004/show.asp?id=33 生物化学http://219.221.200.61/2004/show.asp?id=45 口腔修复学http://219.221.200.61/2004/show.asp?id=52 河北省精品课程网站http://218.11.76.26/ 河北医科大学https://www.doczj.com/doc/3710703258.html,/jpkc/jpkt.htm 中国医科大学精品课程网https://www.doczj.com/doc/3710703258.html,/curriculum/ 武汉大学精品课程－－医学部分 武汉大学精品课程网站https://www.doczj.com/doc/3710703258.html,/ 人体解剖学https://www.doczj.com/doc/3710703258.html,/jpkc/rtjp/ 病理生理学https://www.doczj.com/doc/3710703258.html,/jpkc/blslx/asp/ 药理学https://www.doczj.com/doc/3710703258.html,/jpkc/ylx/index.htm 临床生物化学和生物化学检验https://www.doczj.com/doc/3710703258.html,/shenbao/lcyx/lcyx01.htm 牙体牙髓学https://www.doczj.com/doc/3710703258.html,/jpkc/ytysbx/index.html
-第十一章RNA的生物合成——转录测试题-- 一、名词解释 1 转录 2 逆转录 3 逆转录酶 4 逆转录病毒 5 RNA聚合酶的核心酶 6 RNA聚合酶全酶 7 σ因子 8 内含子 9 外显子 10 不对称转录 11 ρ因子 12 启动子 13 ρ因子依赖的转录终止 14 ρ因子不依赖的转录终止 15 hnRNA 二、单项选择题 1．模板DNA的碱基序列是3′—TGCAGT—5′，其转录出RNA碱基序列是：A．5′—AGGUCA—3′ B．5′—ACGUCA—3′ C．5′—UCGUCU—3′ D．5′—ACGTCA—3′ E．5′—ACGUGT—3′ 2. 以RNA为模板合成DNA的过程是 A DNA的全保留复制机制 B DNA的半保留复制机制 C DNA的半不连续复制 D DNA的全不连续复制 E 反转录作用 3．识别RNA转录终止的因子是： A．α因子 B．β因子 C．σ因子 D．ρ因子 E．γ因子 4．下列关于DNA指导的RNA合成的叙述中哪一项是错误的？ A．只有在DNA存在时，RNA聚合酶才能催化生成磷酸二酯键 B．转录过程中RNA聚合酶需要引物 C．RNA链的合成方向是5′→3′ D．大多数情况下只有一股DNA作为RNA的模板
E．合成的RNA链没有环状的 5．DNA指导的RNA聚合酶由数个亚基组成，其核心酶的组成是： A．ααββ′ B．ααββ′σ C．ααβ′ D．ααβ E．αββ′ 6．识别转录起始点的是： A．ρ因子 B．核心酶 C．RNA聚合酶的σ因子 D．RNA聚合酶的α亚基 E．RNA聚合酶的β亚基 7．下列关于σ因子的描述哪一项是正确的？ A．RNA聚合酶的亚基，负责识别DNA模板上转录RNA的特殊起始点 B．DNA聚合酶的亚基，能沿5′→3′及3′→5′方向双向合成RNA C．可识别DNA模板上的终止信号 D．是一种小分子的有机化合物 E．参与逆转录过程 8．DNA复制和转录过程具有许多异同点。下列关于DNA复制和转录的描述中哪项是错误的？A．在体内以一条DNA链为模板转录，而以两条DNA链为模板复制 B．在这两个过程中合成方向都为5′→3′ C．复制的产物通常情况下大于转录的产物 D．两过程均需RNA引物 E．DNA聚合酶和RNA聚合酶都需要Mg2+上一页 9．对RNA聚合酶的叙述不正确的是： A．由核心酶与α因子构成 B．核心酶由α2ββ′组成 C．全酶与核心酶的差别在于β亚单位的存在 D．全酶包括σ因子 E．σ因子仅与转录起动有关 10. 关于反转录酶的叙述错误的是 A 作用物为四种dNTP B 催化RNA水解反应 C. 合成方向3’→5’ D 催化以RNA为模板进行DNA合成 E 可形成DNA-RNA杂交体中间产物 11. 真核细胞中经RNA聚合酶Ⅲ催化转录的产物是 A hnRNA B tRNA
“运动生物化学”课程教学大纲 教研室主任：田春兰执笔人：王凯 一、课程基本信息 开课单位：体育科学学院 课程名称：运动生物化学 课程编号：144213 英文名称：sports biochemistry 课程类型：专业方向任选课 总学时： 36理论学时：36 实验学时： 0 学分：2 开设专业：休闲体育 先修课程：运动解剖运动生理 二、课程任务目标 （一）课程任务 运动生物化学是从分子水平上研究运动与身体化学组成之间的相互适应，研究运动过程中机体内物质和能量代谢及调节的规律，从而为增强体质、提高竞技能力提供理论和方法的一门学科，是一门科学性和应用性很强的学科。重视最新科学成就的介绍和体现体育专业的特点及需要。在体育科学和体育教学中占有重要的地位，在体育专业各层次教学中被列为专业基础理论课，是体育院校学生的必修课。 （二）课程目标 在学完本课程之后，学生能够： 1.使学生初步了解运动与身体化学组成之间的相互适应，初步掌握运动过程中机体物质和能量 代谢及调节的基本规律。 2.为增强体质、提高竞技能力(如运动性疲劳的消除和恢复、反兴奋剂及其监测技术、机能监 控和评定、制定运动处方等)提供理论和方法。 3.增强学生的科学素养，培养科学思维的良好习惯。 三、教学内容和要求
第一章绪论 1.理解运动生物化学的概念，研究任务，发展、现状及展望； 2.了解运动生物化学在体育科学中的地位；激发学生学习本学科的兴趣； 3.使学生树立整体观、动态观，用辩证的思维去看待生命、看待运动人体。 重点与难点：运动生物化学的概念；运动生物化学的研究任务。 第二章糖代谢与运动 1.掌握糖的概念、人体内糖的存在形式与储量、糖代谢不同化学途径与ATP合成的关系； 2.了解糖酵解、糖的有氧氧化的基本代谢过程及其在运动中的意义； 3.掌握糖代谢及其产物对人体运动能力的影响； 4.熟悉糖原合成和糖异生作用的基本代谢过程及其在运动中的意义； 5.了解运动训练和体育锻炼中糖代谢产生的适应性变化。 重点与难点：糖代谢的不同化学途径及其与ATP合成的关系 第三章脂代谢与运动 1.掌握脂质的概念与功能、脂肪酸分解代谢的过程； 2.了解酮体的生成和利用及运动中酮体代谢的意义； 3.掌握运动时脂肪利用的特点与规律； 4.理解运动、脂代谢与健康的关系。 重点与难点：脂肪酸分解代谢的过程、酮体代谢的意义；运动时脂肪利用的特点与规律。第四章蛋白质代谢与运动 1.掌握蛋白质的概念、分子组成和基本代谢过程； 2.理解蛋白质结构与功能的辩证关系。 3.了解运动与蛋白质代谢和氨基酸代谢的适应。 重点与难点：运动时蛋白质和氨基酸代谢变化的规律；蛋白质的代谢过程； 第五章水无机盐维生素的生物化学与运动 1.了解掌握水的生物学功能与对运动能力影响 2.了解掌握无机盐的生物学功能及与运动能力的关系 3.了解掌握维生素的生物学功能与运动能力的关系 第六章酶与激素 1了解酶的特点，理解运动中酶的适应变化及运动对血清酶的影响和应用 2了解运动对
一、选择题（单项选择题） 1．下列哪一个化合物的名称与所给出的维生素名称不符? ( ) A．α－生育酚一维生素E B．硫胺素一维生素B， C．抗坏血酸一维生素C D．氰钴胺素一维生素B12 E．吡哆醛一维生素B2 2．下列哪一个辅酶不是来自维生素 ( ) A．CoQ B．FAD C．NAD＋ D.pLp E．Tpp 3．分子中具有醌式结构的是 ( ) A．维生素A B．维生素B1 C．维生素C D．维生素E E．维生素K 4．具有抗氧化作用的脂溶性维生素是 ( ) A．维生素C B．维生素E C．维生素A D．维生素B1 E．维生素D 5．下列维生素中含有噻唑环的是 ( ) 丸维生素E2 B．维生素B1 C．维生素PP D．叶酸 E．维生素B7 6．成人及儿童因缺乏哪种维生素而导致干眼病? ( ) A．维生素]35 B．叶酸 C．维生素A D.维生素B3 E．维生素B6 7．下列哪种维生素可转化为甲基和甲酰基载体的辅酶? ( ) A. 硫胺素 B．叶酸 C.维生素A D．泛酸 E．核黄素 8．下列关于维生素C结构和性质的叙述，哪一项是错误的? ( ) A. 维生素C是含六个碳原子骨架的化合物 B．维生素C具有酸性是因为一COOH释放质子 C．还原型维生素C为烯醇式，而氧化型维生素C为酮式 D．还原型维生素C的元素组成为C：H：O=6：8：6 E．维生素C是一种内酯化合物 9．下列哪一种维生素或辅酶不含环状结构 ( ) A.烟酸 B．四氢叶酸 C．维生素D3 D．泛酸 E．生物素 10．下列哪一种辅酶能与焦磷酸硫胺素一起在丙酮酸转变为乙酰辅酶A的过程中起重要作用 ( ) A．维生素B3 B‘硫辛酸 C．维生素A D．维生素C E．NADP 11．泛酸是CoA的组成成分，后者在糖、脂和蛋白质代谢中起 ( ) A．脱羧作用 B．酰基转移作用 C.脱氢作用 D．还原作用 E．氧化作用12．下列哪个不是丙酮酸脱氢酶系的辅助因子? ( ) A．pLp B．Tpp C．硫辛酸 D．FAD E．CoA 13．下列哪一个反应需要生物素 ( ) A．羟化作用 B．羧化作用 C．脱羧作用 D．脱水作用 E．脱氨基作用 14．转氨酶的辅酶是下列化合物中的哪一个? ( ) A. 尼克酸 B．泛酸 C．硫胺素 D．磷酸吡哆醛 E．核黄素 15．下列哪一种化合物由谷氨酸、对氨基苯甲酸和蝶呤啶组成 ( ) A. 维生素B12 B．氰钴胺素 C．叶酸 D．生物素 E．CoA 16．除CoA可以作为酰基载体之外，下列哪种物质也可以传递乙酰基 ( ) A. 生物素 B．叶酸 C. Tpp D．硫辛酸 E．维生素B12 17．来自于食物的抗生物素蛋白不影响哪一种酶的催化反应? ( ) A．琥珀酸脱氢酶 B．丙酰辅酶A羧化酶
第十一章 核酸的生物合成 一、填空题 1．中心法则是 于 年提出的，其内容可概括为 2．所有冈崎片段的延伸都是按 方向进行的。 3．前导链的合成是 的，其合成方向与复制叉移动方向 。 4．引物酶与转录中的RNA 聚合酶之间的差别在于它对 不敏感；后随链的合成是 的。 5．DNA 聚合酶I 的催化功能有 、 、 。 6．DNA 拓扑异构酶有 种类型，分别为 和 ,它们的功能是 。 7．细菌的环状DNA 通常在一个 开始复制，而真核生物染色体中的线形DNA 可以在 起始复制。 8．大肠杆菌DNA 聚合酶III 的 活性使之具有 功能，极大地提高了DNA 复制的保真度。 9．到目前为止，在大肠杆菌中已发现有 种DNA 聚合酶，其中 负责DNA 复制， 负责DNA 损伤修复。 10．大肠杆菌中DNA 指导的RNA 聚合酶全酶的亚基组成为 ，去掉 _因子的部分称为核心酶，这个因子使全酶能识别DNA 上的 位点。 11．在DNA 复制中， 可防止单链模板重新缔合和核酸酶的攻击。 12．DNA 合成时，先由引物酶合成 ，再由 在其3′端合成DNA 链，然后由 切除引物并填补空隙，最后由 连接成完整的链。 13．大肠杆菌DNA 连接酶要求 的参与，哺乳动物的DNA 连接酶要求 参与。 14．原核细胞中各种RNA 是 种RNA 聚合酶催化生成的，而真核细胞核基因的转录分别由 种RNA 聚合酶催化，其中rRNA 基因由 转录，hnRNA 基因由 转录，各类小分子量RNA 则是 的产物。 15．转录单位一般应包括 序列， 序列和 序列。 16．真核细胞中编码蛋白质的基因多为 ，编码的序列还保留在成熟mRNA 中的是 ，编码的序列在前体分子转录后加工中被切除的是 ；在成熟的mRNA 中 序列被拼接起来。 17．限制性核酸内切酶主要来源于 ，都识别双链DNA 中 ，并同时断裂 。 二、选择题(只有一个最佳答案)： 1．如果一个完全具有放射性的双链DNA 分子在无放射性标记溶液中经过两轮复制，产生的四个DNA 分子的放射性情况是：（ ） A 、其中一半没有放射性 B 、都有放射性 C 、半数分子的两条链都有放射性 D 、一个分子的两条链都有放射性 E 、四个分子都不含放射性 2．关于DNA 指导下的RNA 合成的下列论述除了（ ）项外都是正确的。 A 、只有存在DNA 时，RNA 聚合酶才催化磷酸二酯键的生成 DNA DNA RNA 蛋白质 复制 转录 反转录 翻译
第十一章RNA的生物合成 一、单项选择题 1、转录的模板链是（） A、编码链 B、前导链 C、DNA的两条链 D、基因组DNA中的一条链 2、转录需要的原料为（） A、NMP B、NTP C、dNMP D、dNDP E、dNTP 3、转录需要的酶有（） A、引物酶 B、依赖DNA的DNA聚合酶（DDDP） C、依赖DNA的RNA聚合酶（DDRP） D、依赖RNA的DNA聚合酶（RDDP） E、依赖RNA的RNA聚合酶（RDRP） 4、以下关于转录的概念，不正确的是（） A、以DNA为模板合成RNA的过程 B、RNA的生物合成过程叫做转录 C、将染色体DNA分子中储存的遗传信息转为RNA碱基排列顺序的过程 D、转录在遗传信息传递中起中介作用 E、遗传信息的表达包括转录形成RNA及由mRNA指导的蛋白质生物合成 5、原核生物转录时识别起始位点的是（） A、α亚基 B、β亚基
A、δ因子C、β′亚基D、δ亚基E、ρ因子6、原核生物体内催化RNA延长的是（） B、α、β亚基 C、α、β、β′亚基 D、α 2、β、β′亚基E、RNA-pol全酶 E、基因DNA中的一条链 7、在DNA分子中，转录起始的5′上游端（） A、原核生物-35区存在TATA盒是RNA-pol识别的位点 B、原核生物-10区存在TATA盒是RNA-pol结合的位点 C、原核生物-35区存在TTGACA序列是RNA-pol结合的位点 D、原核生物-10区存在TTGACA序列是RNA-pol识别的位点 E、真核生物不存在TATA盒 8、DNA模板链为5′—ATAGCT—3′，其转录产物为（） A、5′—TATCGA—3′ C、5′—UATCGA—3′ E、5′—AUAGCU—3′ 9、RNA为5′—UGACGA—3′，它的模板链是（） A、5′—ACUGCU—3′ C、5′—ACTGCU—3′ E、5′—UCGTCA—3′ 10、RNA链为5′—AUCGAUC—3′，它的编码链是（）
清华大学2006年生物化学科目硕士研究生入学考试 初试试题 一、选择题 1.用阳离子交换树脂分离下述氨基酸时用PH递增的洗脱液淋洗，最后被洗脱下来的是： （） A.谷氨酸 B.丙氨酸 C.苏氨酸 D.缬氨酸 2.关于蛋白质的a－螺旋结构的叙述正确的是：（） A属于蛋白质的三级结构B多为右手a－螺旋，３.６个氨基酸残基升高一圈 C二硫键起稳定作用D盐键起稳定作用E以上多不对 ３.肝脏不能氧化酮体是由于缺乏：（） A酰基－COA合成酶B b-羟酰-CoA-脱氢酶C硫解酶D酮酰-CoA转移酶 4．人体缺乏维生素B12容易引起（） A 唇裂B脚气病C 坏血病D恶性贫血E佝偻病 5．酪氨酸tRNA的反密码子5’-GUA-3’，它能辨认的mRNA的相应密码子是（） A．GUA B。AUG C。UAC D。GTA E。TAC 6．下列几种不同碱基组成比例的DNA分子，下列那种DNA分子Tm值最高（） A. A+T=0.15 B.A+T=0.8 C.G+C=0.4 D.G+C=0.25 E.G+C=0.35 7列那种氨基酸可作一碳单位的供体( ) A.PR0 B.SER C.GLU D.THR E.TYR 8.下列双糖中具有还原性的是( ) A.麦芽糖B。纤维二糖 C.蔗糖. D.乳糖 9.采用发酵法生产14C标记的CO2 ,14C应该标记在葡萄糖什么部位才能最经济有效地保证产生的CO2含14C标记( ) A.标记C-1和C-6 B. 标记C-2和C-5 C. 标记C-3和C-4 D.标记所有碳原子 10.下列哪一种维生素是辅酶A的前体( ) A.核黄素 B.泛酸 C.硫胺素 D.钴胺素 E.吡哆胺 11.下列对光合作用叙述正桮的是( ) A.儉反应与H2O嚄光解反应懠关. B.C4植物不含CA
XX 学院 教学大纲 体育系2012级体育教育专业 2013级专接本 课程名称：运动生物化学 任课教师：XXX 2014年2月24日至2014年6月29日
XX学院体育系体育教育本科专业《运动生物化学》教学大纲 课程名称：运动生物化学 课程代码：108011106S 课程性质：专业必修课 总学时：36 学分：2 适用专业：体育教育 先修课程: 运动解剖学、运动生理学、运动训练学 一、课程的性质、目的与任务： 1.课程性质：《运动生物化学》是生物化学的分支，体育科学学科之一，也是体育科学中应用基础性的学科。本门学科是应用物理学、化学和生物学的方法，从分子水平研究人体运动时机体的化学组成、化学变化、能量转变和运动能力的发展与变化，并应用这些规律为运动实践服务的一门科学。 2.课程目的：通过学习使学生掌握有关运动生物化学基本理论、概念和方法，熟悉运动训练和体育锻炼中人体的生物化学变化特点，能应用运动生物化学的理论方法指导训练和体育锻炼，并为今后进一步学习体育教育专业相关课程打下基础。 3.课程任务：使学生明确运动生物化学的学科地位，提高学生学习兴趣。使学生掌握运动生物化学的基础知识，能够运用化学的原理与方法，从分子水平探讨运动与身体化学组成之间的相互适应，运动过程中机体内物质和能量代谢及调节规律，并学会应用理论指导运动实践活动，为增强体质、提高竞技运动能力提供理论和方法。 二、教学内容与教学基本要求： （一）理论部分 绪论 1.教学内容： 一、运动生物化学的概念与任务 二、运动生物化学的发展与展望 三、学习运动生物化学的意义与方法 2.教学目的与要求：
理解运动生物化学的研究任务，发展、现状及展望；了解运动生物化学在体育科学中的地位；激发学生学习本学科的兴趣；使学生树立整体观、动态观，用辩证的思维去看待生命、看待运动人体。 第一章物质代谢与运动概述 1.教学内容： 第一节运动人体的物质组成 一、组成人体的化学物质 二、运动对人体化学物质的影响 第二节物质代谢的催化剂——酶 一、概述 二、酶催化反应的特点 三、影响酶促反应速度的因素 四、运动与酶适应 五、运动与血清酶 第三节运动时物质代谢 一、糖代谢 二、脂质代谢 三、蛋白质代谢 四、水代谢 五、无机盐代谢 六、维生素代谢 第四节运动时机体的能量代谢 一、腺苷三磷酸——ATP 二、生物氧化 2.教学目的与要求： 掌握运动人体的物质组成、酶催化反应的特点、运动中生物氧化过程及ATP的合成；熟悉运动中机体物质代谢的基本知识；理解运动引起人体物质组成及酶的适应性变化。 第二章糖质代谢与运动 1.教学内容： 第一节糖概述 一、糖的概念和化学组成 二、糖的分类
1.能量的生成:当有机物被氧化成CO2和H2O时，释放的能量转化成ATP。 2.生物氧化的特点（异同点）： ①酶的催化②氧化进行过程中，必然伴随生物还原反应的发生。③水是许多生物氧化反应的氧供体。通过加水脱氢作用直接参予了氧化反应。④氧化过程中脱下来的氢质子和电子，通常由各种载体，如NADH等传递到氧并生成水。⑤生物氧化是一个分步进行的过程，能量通过逐步氧化释放，不会引起体温的突然升高，而且可使放出的能量得到最有效的利用。⑥生物氧化释放的能量一般都贮存于一些特殊的化合物中，主要是ATP. 【生物氧化和有机物在体外氧化（燃烧）的实质相同，都是脱氢、失电子或与氧结合，消耗氧气，都生成CO2和H2O，所释放的能量也相同。但二者进行的方式和历程却不同：生物氧化体外燃烧 细胞内温和条件（常温、常压、中性pH、水溶液）高温或高压、干燥条件 一系列酶促反应，逐步氧化放能，能量利用率高无机催化剂能量爆发释放 释放的能量转化成ATP被利用转换为光和热，散失 3.高能化合物的概念：在标准条件下发生水解时，可释放出大量自由能的化合物，称为高能化合物。 4.高能化合物的类型：磷氧键型（乙酰磷酸）；氮氧键型（磷酸肌酸）；甲硫键型（S-腺苷甲硫氨酸）；硫酯键型（酰基辅酶A） 5.ATP的特殊作用： ①ATP在一切生物生命活动中都起着重要作用，在细胞的细胞核、细胞质和线粒体中都有ATP存在。 ②ATP在磷酸化合物中所处的位置具有重要的意义，它在细胞的酶促磷酸基团转移中是一个“共同中间体” ③ATP是生物体通用的能量货币。
④ATP是能量的携带者和转运者，但并不能量的贮存者。起贮存能量作用的物质称为磷酸原，在脊推动物中是磷酸肌酸。 6.电子传递链的概念:在生物氧化过程中，代谢物上脱下的氢经过一系列的按一定顺序排列的氢传递体和电子传递体的传递，最后传递给分子氧并生成水，这种氢和电子的传递体系称为电子传递链。又称呼吸链。 7.电子传递链的组成：FMN、辅酶Q、细胞色素b、c1、c、a、a3以及一些铁硫蛋白 8.细胞色素c:唯一能溶于水的细胞色素； Q循环:通过辅Q的电子传递方式称为Q循环 9.电子传递链的电子传递顺序（必考）： NADH：NADH→复合体Ⅰ→Q→复合体Ⅲ→细胞色素→复合体Ⅳ→O2 FADH2：FADH2→复合体Ⅱ→Q→复合体Ⅲ→细胞色素→复合体Ⅳ→O2 10.电子传递抑制剂的概念：能够阻断呼吸链中某部位电子传递的物质称为电子传递抑制剂。 10.常见的几种电子传递剂及其作用部位： 鱼藤酮、安密妥、杀粉蝶菌素（阻断了由NADH→辅酶Q的传递）；抗霉素A（抑制电子从还原型QH2向细胞色素c1的传递）；氰化物（CN-）、叠氮化物（N3-）、一氧化碳（CO）等（阻断了电子由细胞色素a3向分子氧的传递） 11.氧化磷酸化概念：伴随电子从底物到氧的传递，ADP被磷酸化形成ATP的酶促过程。 12.底物水平磷酸化：ATP的形成直接由一个代谢中间产物上的磷酸基团转移到ADP分子上的作用。 13.电子传递体系磷酸化：当电子从NADH或FADH2经过电子传递体系(呼吸链)传递给氧形成水时，同时伴有ADP磷酸化为ATP的全过程（通常所说的氧化磷酸化是指电子传递体系磷酸化） 偶联磷酸化：在呼吸链电子传递过程中偶联ADP磷酸化生成ATP，又称为偶联磷酸化
一、单项选择题 1．辅脂酶在脂肪消化吸收中的作用 ( ) A．直接水解脂肪成脂肪酸和甘油 B．是合成脂肪的主要关键酶 C．是胰脂酶对脂肪消化不可缺少的蛋白质辅助因子 D．是脂肪酸β氧化的第一个酶 E．以上都是 2．辅脂酶对胰脂酶起辅助作用的机制是 ( ) A. 传递H原子 B．提供O2 C. 解除肠腔内胆汁酸盐对胰脂酶的抑制 D．通过氧化还原反应为胰脂酶提供NADPH+H+ E．降低胰脂酶和脂肪的结合 3．合成甘油三酯最强的器官是 ( ) A．肝 B．肾 C．脂肪组织 D．脑 E．小肠 4．肝细胞内的脂肪合成后的去向 ( ) A. 在肝细胞内水解 B．在肝细胞内储存， C. 在肝细胞内氧化供能 D. 在肝细胞内与载脂蛋白结合为VLDL分泌入血 E．以上都不对 5．小肠黏膜细胞再合成脂肪的原料主要来源于 ( ) A．小肠黏膜细胞吸收来的脂肪的水解产物 B．肝细胞合成的脂肪到达小肠后被消化的产物 C．小肠黏膜细胞吸收来的胆固醇的水解产物 D．脂肪组织的分解产物 E．以上都对 6．脂肪动员指 ( ) A．脂肪组织中脂肪的合成 B．脂肪组织中脂肪的分解 C．脂肪组织中脂肪被脂肪酶水解为游离脂肪酸和甘油并释放人血供其他组织氧化利用 D．脂肪组织中脂肪酸的合成及甘油的生成 E．以上都对 7．能促进脂肪动员的激素有 ( ) A．肾上腺素 B．胰高血糖素 C．促甲状腺素 D．ACTH E．以上都是 8．线粒体外脂肪酸合成的限速酶是 ( ) A. 酰基转移酶 B．乙酰CoA羧化酶 C．肉毒碱脂酰CoA转移酶I D．肉毒碱脂酰CoA转移酶Ⅱ E．β—酮脂酰还原酶 9．酮体肝外氧化，原因是肝内缺乏 ( ) A. 乙酰乙酰CoA硫解酶 B. 琥珀酰CoA转硫酶 C．β羟丁酸脱氢酶 D．β—羟—β—甲戊二酸单酰CoA合成酶
第十一章RNA的生物合成（转录） 一、选择题 A型题 1．下列关于RNA的生物合成，哪一项是正确的？ A．需RNA引物B．DNA双链一股单链是模板C．RNA-pol以DNA为辅酶 D．生成的RNA都是翻译模板E．在胞浆中进行 2．DNA上某段碱基顺序为5′ACTAGTCAG 3′，转录后的mRNA相应的碱基顺序为：A．5′TGATCAGTC 3′ B．5′UGAUCAGUC 3′ C．5′CUGACUAGU 3′ D．5′CTGACTAGT 3′ E．5′CAGAUGACU 3′ 3．转录过程中需要的酶是： A．DNA指导的DNA-pol B．核酸酶C．RNA指导的RNA-polⅡD．DNA指导的RNA-pol E．RNA指导的DNA-pol 4．关于RNA-pol的叙述不正确的是： A．由核心酶与σ因子构成B．核心酶由α2ββ′（ω）组成C．全酶与核心酶的差别在于β亚基的存在D．全酶包括σ因子 E．σ因子仅与转录起始有关 5．原核生物参与转录起始的酶是： A．RNA-pol全酶B．引物酶C．RNA-polⅡD．解链酶E．RNA-pol核心酶 6．原核生物RNA-pol的核心酶组成是： A．αββ′（ω）B．α2ββ′（ω）C．α ββ′σ（ω）D．αβσ（ω）E．ββ′σ（ω）7．能特异性抑制原核生物RNA-pol的是： A．利福平B．鹅膏蕈碱C．假尿嘧啶D．亚硝酸盐E．氯霉素8．在转录延长中，RNA-pol与DNA模板的结合是： A．全酶与模板结合B．核心酶与模板特定位点结合 C．结合状态相对牢固稳定D．结合状态松弛而有利于RNA-pol向前移动E．和转录起始时的结合状态没有区别 9．ρ因子的功能是： A．在启动区域结合阻遏物B．增加RNA合成速率 C．释放结合在启动子上的RNA-pol D．参加转录的终止过程 E．允许特定转录的启动过程 10．RNA作为转录产物，其5′-端常见的起始核苷酸是： A．A或G B．C或U C．pppG或pppA D．pppC或pppU E．无一定规律 11．电子显微镜下观察到转录过程的羽毛状图形说明： A．模板一直打开成单链B．可见复制叉 C．转录产物RNA与模板DNA形成很长的杂化双链 D．多聚核糖体生成必须在转录完结后才出现 E．转录未终止即开始翻译
一、生物化学、化学生物学、分子生物学，三者联系与区别 欧洲化学生物学的一个专门刊名为ChemBioChem刊物，这部刊物在我所阅读的文献中被反复提及，我查到该文献的两位主编分别是Jean-Marie Lehn教授和Alan R. Fersht教授，他们在诠释刊物的宗旨[1]时指出：ChemBioChem意指化学生物学和生物化学，其使命是涵盖从复杂的碳水化合物、多肽蛋白质到DNA/RNA，从组合化学、组合生物学到信号传导，从催化抗体到蛋白质折叠，从生物信息学和结构生物学到药物设计，这一范围宽广而欣欣向荣的学科领域。既然化学生物学涵盖面这么广泛，它到底和其它学科之间怎么区分呢？ 想到拿这个题目出来介绍是因为这是我在第一节课课堂讨论中的内容，我们小组所参考的文献主要是关于对化学生物学这门学科的认识，化学生物学的分析手段以及一些新的研究进展，比如药物开发和寻找药物靶点。当时课堂上对于题目中三者展开过热烈讨论，作为新兴学科的化学生物学，研究的是小分子作为工具解决生物学问题的学科，它如何从生物化学和分子生物学中分别出来，这也是我自己最开始产生过矛盾的问题，这里我结合所查阅的文献谈一下自己的理解。 1.1 生物化学(Biological Chemistry) 生物化学是研究生命物质的化学组成、结构、化学现象及生命过程中各种化学变化的生物学分支学科[1]。根据一些生物化学的书我归纳了一下，其研究的基本内容包括对生物体的化学组成的鉴定，对
新陈代谢与代谢调节控制，生物大分子的结构与功能测定，以及研究酶催化，生物膜和生物力学，激素与维生素，生命的起源与进化。 生物化学对其他各门生物学科的深刻影响首先反映在与其关系比较密切的细胞学、微生物学、遗传学、生理学等领域。通过对生物高分子结构与功能进行的深入研究，揭示了生物体物质代谢、能量转换、遗传信息传递、光合作用、神经传导、肌肉收缩、激素作用、免疫和细胞间通讯等许多奥秘，使人们对生命本质的认识跃进到一个崭新的阶段。(摘自https://www.doczj.com/doc/3710703258.html,/view/253496.htm) 1.2 化学生物学（Chemical Biology） 化学生物学是使用小分子作为工具解决生物学的问题或通过干扰/调节正常过程了解蛋白质的功能[1]。曾看到过一篇关于介绍化学生物学的奠基人Schreiber的文章，他曾经指出：“化学生物学是对分子生物学的有力补充，分子生物学采用定点突变的方法来改变生物分子如蛋白质和核酸的功能；而化学生物学是采用化学的手段，如运用小分子或人工设计合成的分子作为配体来直接改变生物分子的功能[2]。” 化学生物学是近年来出现的新兴研究领域，它融合了化学、生物学、物理学、信息科学等多个相关学科的理论、技术和研究方法，是一个有活力、有应用前景的新学科。它主要研究的内容包括[3]：1化学遗传学—采用小分子活性化合物作为探针,探索和调控细胞过程 (1)基因表达的小分子调控
第十二章基因工程下册 P580 12-1 基因工程 是对携带遗传信息的分子进行设计和施工的分子工程，包括基因重组、克隆和表达。核心是构建重组体DNA的技术。 一一一DNA克隆 将DNA限制酶切片段插入克隆载体，导入宿主细胞，经无性繁殖以获得相同的DNA扩增分子。 一1一DNA限制酶和连接酶： 限制酶可将DNA切割成平末端或黏性末端，互补黏性末端之间碱基配可促使连接反应容易进行。 相容的限制片段可用DNA连接酶相连接，DNA的黏性末端和平末端连接见P5 82 图40-1。 一2一分子克隆的载体与宿主系统： 载体：将外源DNA带入宿主细胞并进行复制的运载工具。 克隆载体通常是由质粒、病毒（如λ-噬菌体）或一段染色体DNA改建而成。 质粒是染色体外自主复制的遗传因子，多为共价闭环DNA分子，常用作细菌与真菌的克隆载体。如用限制性酶切割环形质粒DNA，制备一个具黏性末端的 开环质粒分子。 作为克隆载体应具有自主复制能力，有易于筛选的选择标记，如含有抗药基因等。 宿主细胞应根据载体的性质来选定，应易于接受外源DNA，且易于生长和筛选。 一3一外源基因导入宿主细胞： 欲引入的外源目标DNA经限制酶切割后应与载体有同样的黏性末端，用连接酶将外源DNA片段和载体连接成外源基因。 用CaCl2等方法,使E. coli等宿主细胞处于感受态，从而将外源基因导入细胞。 此外还有电穿孔法等使外源DNA高效导入细胞。 最后分离筛选出带有目的基因的重组体并进行克隆（可按重组体某种特征，如抗药性选择、营养标记选择等在特定培养基上进行筛选后繁殖形成菌落。每 个菌落的细胞将含有同样的重组质粒DNA，这些质粒DNA又含有同样外源DN A片段）。 一一一基因文库 一1一基因文库的构建： P589 基因文库是指整套由基因组DNA片段插入克隆载体获得的分子克隆之总和。 理想情况下基因文库应包含该基因组的全部遗传信息。 基因文库的构建包括基因组DNA的随机片段化、载体DNA的制备、重组DNA 的体外包装、重组噬菌体感染大肠杆菌、基因文库的鉴定和扩增等步骤。 一2一cDNA文库的构建： 真核生物基因是断裂的，需经RNA转录后加工过程才使编码序列拼接在一起。若将加工成熟的mRNA经逆转录合成互补的DNA（cDNA），接上原核生物表达 控制元件，在原核生物表达。 通过cDNA还可研究不稳定的mRNA。