《细胞生物学实验》实验课程教学大纲 一、课程基本信息 课程名称：细胞生物学实验 英文名称：Cell Biology Experiment 课程性质：学科及专业基础课 课程属性：独立设课 适用专业：生物科学本科 学时学分：课程共18学时；课程共1学分 开设学期：第五学期 先修课程：生物化学、细胞生物学 二、课程简介 细胞生物学实验课程是生命科学本科各专业的一门必修基础课程，在生命科学的本科教学中有着十分重要的地位。课程内容包括基础验证性，基本技能性实验，以及综合性、研究设计性实验四大类。基础验证性和基本技能性实验主要是配合理论课的教学，使学生加深理解和掌握有关理论知识，同时能够规范地掌握细胞生物学研究的基本操作与基本的实验技能。综合性、研究设计性实验，目的旨在培养和提高学生实验设计和应用各种实验技术的能力，培养和训练学生的创新意识和创新能力，培养严谨的科学态度和实事求是的作风，提高发现问题、分析问题和解决问题的能力，为今后独立从事科学研究打下坚实的基础。 三、实验课程目的与要求 1、学习本门课程的目的：配合理论课教学，巩固所学知识；掌握细胞生物学研究的相关技术，学习先进的研究方法；通过综合性、研究设计性实验，培养学生的实验设计能力，实验动手能力以及文献查阅、论文写作能力；培养学生的科学思维方法，提高发现问题、分析问题和解决问题的能力。 2、学习本门课程的要求：要求学生掌握基本的实验操作技能，掌握基本的实验设计思路；要求学生以个人或小组的形式根据自己所学知识、兴趣设计研
究课题进行实验，期末要提交完整的实验报告；要求学生通过研讨会、交流会的形式，将实验过程中遇到的各种问题进行探讨，让每个同学都有发表个人见解的机会，从而达到集思广益，提高自主学习的能力。 四、考核方式： 1、实验报告：实验报告应包括实验目的，实验原理，实验用品，实验步骤 (如果指导书上有实验步骤，可以简单梳理步骤或省略此步)，实验结果，结果讨论，有时还要求做思考题。 2、实验课的考核方式和成绩评定办法：实验课的考核方式以实验操作考查 为主。实验课成绩评定可分为三个部分：出勤率、实验态度占总成绩10%；操作能力及实验报告撰写情况占总成绩60%；实验设计（包括实验的思路、论文撰写、课堂讨论）占总成绩30%。 五、实验项目、学时分配情况 序号实验项目名称实验学时实验类型实验要求实验一细胞形态结构与细胞器的显微观察4学时验证性实验必做实验二细胞培养以及冷冻复苏技术5学时综合性实验必做实验三细胞膜的渗透性观察3学时验证性实验选做实验四细胞融合技术（PEG法）4学时综合性实验选做实验五细胞骨架的显示与观察4学时验证性实验选做实验六细胞生理活动的观察5学时综合性实验选做 5学时综合性实验选做实验七细胞组分分离技术及细胞组分 的化学反应 实验八精子细胞生物学特性分析5学时设计性实验选做实验九叶绿体分离及离体叶绿体 4学时验证性实验选做 的还原活性 合计实验个数：9 合计学时数：39学时
生物化学知识点汇编 知识点： 1、各类糖分子的结构和功能；
2、脂类中与生物膜有关的物质结构与功能； 3、核酸的基本结构、相互关系与功能； 4、各类氨基酸的基本结构、特征以及蛋白的构象与功能的关系； 5、酶的分类、作用机制、抑制类型、动力学过程与调节； 6、代谢中的生物氧化过程特别是光合磷酸化过程的机理及意义； 7、代谢中的糖代谢过程； 8、核酸的生物合成、复制、转录及基因表达； 9、各种代谢过程的调控及相互关系； 10、现代生物学的方法和实验手段特别是分离、纯化、活性册顶的基本方法等； 11、生物化学研究进展； ◎●将两种旋光不同的葡萄糖分别溶与水后，其旋光率均逐渐变为+52.7°。，称为变旋现象。 ◎●羟甲基在糖环平面的上方的为D-型，在平面的下方的为L-型。在D-型中，半缩醛羟基在平面的下方的为α-型，在平面的上方的为β-型。 ◎●一切糖类都有不对称碳原子，都具旋光性。 ◎●区分酮糖、醛糖用Seliwanoff反应。 ◎●天然糖苷多为β-型。 ◎●糖醛酸是肝脏内的一种解毒剂。 ◎●自然界存在的糖胺都是己糖胺。 ◎●麦芽糖为[α-D-葡萄糖-α（1→4）-α-D-葡萄糖苷]，异麦芽糖为[α-D-葡萄糖-α（1→6）-α-D-葡萄糖苷]，蔗糖为[α-D-葡萄糖-α，β（1→4）-果糖苷]，乳糖为[半乳糖-β（1→4）-α-D-葡萄糖苷]，纤维二糖为[α-D-葡萄糖-β（1→4）α-D-葡萄糖苷]。 ◎●直链淀粉成螺旋状复合物，遇碘显紫蓝色，碘位于其中心腔内，在620——580nm有最大光吸收。支链淀粉分支平均有24——30个葡萄糖，遇碘显紫红色，在530——555nm有最大光吸收。糖原遇碘显棕红色，在430——5490nm有最大光吸收。◎●与糖蛋白相比，蛋白聚糖的糖是一种长而不分支的多糖链，即糖胺聚糖。其一定的部位上与若干肽链连接，糖含量超过95%，多糖是系列重复双糖结构。 ◎●糖蛋白是病毒、植物凝集素、血型物质的基本组成部分，Fe2+、Cu2+、血红蛋白和甲状腺素转运蛋白是糖蛋白，它们分别叫转铁蛋白、铜蓝蛋白、触珠蛋白、甲状腺素结合蛋白。参与凝血过程的糖蛋白有：凝血酶原、纤维蛋白酶原。 ◎●血型物质含75%的糖，它们是：岩藻糖、半乳糖、葡萄糖、半乳糖胺。 ◎●木糖-Ser连接为结缔组织蛋白聚糖所特有。 ◎●动植物体的不饱和脂肪酸为顺式，细菌中含脂肪酸种类少，大多为饱和脂肪酸，有的有分支。 ◎●分析脂肪酸混合物的分离用气液柱层析，即气液色谱技术。 ◎●甘油三酯、甘油单酯形成小颗粒微团，叫micelles。 ◎●烷基醚脂酰甘油含有2个脂肪酸分子和一个长的烷基或烯基链分别与甘油分子以酯键、醚键相连。 ◎●糖基脂酰甘油中，糖基与甘油分子第三个羟基以糖苷键相连。 ◎●磷脂根据所含醇类可分为甘油磷脂类和鞘氨醇磷脂类。 ◎●不饱和脂肪酸常与甘油分子的第二个碳原子羟基相连。 ◎●肝脏、心肌中的甘油磷脂多为磷脂酰肌醇，脑中的甘油磷脂多为磷脂酰肌醇磷酸、磷脂酰肌醇二磷酸。 ◎●缩醛磷脂中一个碳氢键以醚键与甘油C1羟基相连。 ◎●除了11-顺-视黄醛外，多数直链萜类的双键均为反式。 ◎●柠檬油的主要成分是柠檬苦素，薄荷油的主要成分是薄荷醇，樟脑油的主要成分是樟脑。 ◎●胆石几乎全是由胆固醇组成，它易与毛地黄核苷结合沉淀。 ◎●脊椎动物体内，胆酸能与甘氨酸、牛黄氨酸结合成甘氨胆酸、牛黄胆酸。 ◎●蟾毒不以糖苷而以酯的形式存在。 ◎●前列腺素是花生四烯酸及其他不饱和脂肪酸的衍生物。分为PGA、PGB、PGD、PGE、PGF、PGG、PGH、PGI 等八类，其功能有：平滑肌收缩、血液供应、神经传递、发炎反应的发生、水潴留、电解质去钠、血液凝结。◎●在tay-sachs病中，神经节苷脂在脑中积累。 ◎●按生理功能，蛋白质可分为酶、运输蛋白、营养和贮存蛋白、收缩蛋白运动蛋白、结构蛋白质和防御蛋白质。◎●胱氨酸、酪氨酸不溶于水。脯氨酸、羟还能溶于乙醇或乙醚中。
中山大学王金发老师比较提汇总 1. 原核生物与真核生物（答案） 答：这两个群体共同构成了生命世界。它们共有一种遗传语言，一些相同的代谢途径，以及许多结构特征。原核生物是较为原始的细胞，包括古细菌和真细菌。真核生物构成了所有其它的生命，包括原生生物、真菌、植物和动物。原核生物要小一些。原核生物具有完全由DNA 构成的染色体。它们缺少真正的核和膜包围而成的细胞器，以简单分裂繁殖。真核细胞有真正的，由膜围成的细胞核，核中含有由蛋白质和DNA构成的染色体。真核生物有膜包围而成的细胞器，内质网，和胞质结构与收缩蛋白。真核生物以有丝分裂增殖，进行有性生殖。虽然原核生物和真核生物都有鞭毛，但鞭毛的功能却很不相同。 1. 放大率和分辨率（答案） 答: 这两个概念都用于衡量显微镜的显微功能。 放大率指显微镜所成像的大小与标本实际大小的比率。而分辨率指可视为明显实体的两个点间的最小距离。放大率对分辨率有影响，但分辨率不仅仅取决于放大率。两者都是观察亚细胞结构的必要参数。 2．透射电子显微镜和扫描电子显微镜（答案） 答: 都用于放大与分辨微小结构，这两种技术通过标本对电子束的影响来探测标本结构。TEMs的电子束穿过标本，聚焦成像于屏幕或显像屏上，SEMs的电子束在标本表面进行扫描，反射的电子聚焦成像于屏幕或显像屏。TEMs用于研究超薄切片标本，有极高分辨率，可给出细微的胞内结构。SEMs可以反映未切片标本的表面特征。 3．差速离心和密度梯度离心（答案）
答: 两者都是依靠离心力对细胞匀浆悬浮物中的颗粒进行分离的技术。差速离心通常用于分离细胞器与较大的细胞碎片，分离的对象都比介质密度大。密度梯度离心也可用于分离较大的颗粒和细胞器，但更常用来分离小颗粒和大分子物质。密度梯度离心的介质形成一个密度梯度，所分离的颗粒密度小于介质底部的密度。因此颗粒从梯度的顶层沉降到与之密度相同的介质层停住， 1. 细胞运输、胞内运输有什么不同?（答案） 答: 细胞运输(cellular transport) 主要是细胞与环境间的物质交换,包括细胞对营养物质的吸收、原材料的摄取和代谢废物的排除及产物的分泌。如细胞从血液中吸收葡萄糖以及细胞质膜上的离子泵将Na+泵出、将K+泵入细胞都属于这种运输范畴。 胞内运输(intracellular transport) 是真核生物细胞内膜结合细胞器与细胞内环境进行的物质交换。包括细胞核、线粒体、叶绿体、溶酶体、过氧化物酶体、高尔基体和内质网等与细胞内的物质交换。 2. 扩散和渗透有什么不同?（答案） 答: 扩散(diffusion)是指物质沿着浓度梯度从半透性膜浓度高的一侧向低浓度一侧移动的过程，通常把这种过程称为简单扩散。这种移动方式是单个分子的随机运动，无论开始的浓度有多高，扩散的结果是两边的浓度达到平衡。虽然这种移动不需要消耗能量，主要是依靠扩散物质自身的力量，但从热力学考虑，它利用的是自由能。如果改变膜两侧的条件，如加热或加压，就有可能改变物质的流动方向，其原因就是改变了自由能。所以，严格地说，扩散是物质从自由能高的一侧向自由能低的一侧流动。
生物化学I（2006年秋季学期, A卷） I.简答题（共25小题，超过60分以60分计入总分） 1．哪些标准氨基酸含两个手性碳原子？写出它们的Fisher投影式。 2．为什么SDS变性电泳可以估算蛋白质的分子量？ 3．Mass spectroscopy在生物大分子研究中有什么应用？ 4．-Keratin、Collagen、Silk fibroin的二级结构和氨基酸组成有何特点？5．根据二级结构的组成和排列可将蛋白质结构分为哪些类型？ 6．蛋白质in vivo条件下的折叠有哪些辅助因子？ 7．蛋白质在与其他分子的相互作用中发挥作用，这种相互作用有何特点？ 8．哪些因素可以导致Hemoglobin与O 2 的亲和力增加？ 9．图示抗体的一般结构（包括结构域及可能的二硫键）。 10．构成肌肉粗丝和细丝的蛋白分子有哪些，各有什么功能？ 11．写出蛋白质氨基酸测序的基本步骤。 12．什么是酶催化的过渡态理论？列出你所知道的支持证据？ 13．酶的可逆抑制剂有几类？它们的抑制动力学各有何特点？ 14．酶在体内的活性是如何受到调控的？ 15．淀粉与纤维素的结构有何区别？ 16．细胞膜表面的Glycoprotein和Glycolipid有哪些生物学功能？ 17．细胞内的DNA可能会出现哪些异常结构，他们有什么生物学意义？ 18．膜脂的分类及其结构特点 19．生物膜的功能有哪些？ 20．膜蛋白以哪些方式参与生物膜的构成？ 21．图示secondary active transport，uniport，symport，antiport. 22．Acetylcholine receptor通道是如何控制开关的？ 23．K＋离子通道是如何对通过的离子进行选择的？ 24．膜电位是怎样控制Na＋通道开关的（可图示并说明）？ 25．Ca2+泵和Na+-K+泵的异同点。 II. You have a crude lysate sample containing a mixture of six proteins (1, 2, 3, 4, 5, and β-galactosidase). Some characteristics of these proteins are shown in the table below. Give an available procedure of purifying β-galactosidase. Protein Concentration of ammonium sulfate required for precipitation Molecular Weight (kDa) Isoelectric point (pI)
第二章细胞生物学研究方法 细胞生物学以细胞为研究对象，从细胞的整体水平、亚显微水平、分子水平三个层次，以动态的观点研究细胞和细胞器结构和功能、细胞生活史和各种生命活动。 1．细胞结构、成分的观察-显微成像技术 原理：照明系统发出的光线或电子束通过样品时，与样品发生相互作用，其被改变的物理特征被肉眼观察或通过探测器检测而成像。 分辨率：r=0.61λ/nsinα；分辨极限：一定波长的射线不能用以探测比它本身波长短得多的结构细节。 1.1普通光学显微镜及样品制备 1.1.1各种光学显微镜 普通光学显微镜 荧光显微镜：利用紫外线为光源照射样品，使之发生荧光。 相差显微镜：将不同成分的衍射系数改变为明暗变化。 暗视野显微镜：利用散射或衍射光增大反差。 倒置显微镜：普通光学显微镜的倒置。 1.1.2样品制备 取材、固定（杀死细胞，稳定细胞的成分，形成一定硬度）、包埋、切片、染色、观察。 放射性自显影：放射性同位素标记、底片。 1.2电子显微镜及其样品制备 1.2.1电子显微镜 透射电子显微镜 照明系统为电子束，电磁透镜调整电子束的亮度与聚焦，真空系统保护电子枪等。 扫描电子显微镜 极狭窄电子束扫描样品，利用样品表面形成的二次电子信号成像。 扫描透射电子显微镜 透射电子显微镜与扫描电子显微镜的结合：电子束扫描，透射电子成像。 1.2.2样品制备 步骤：取材、固定、包埋、切片（超薄切片）、染色（负染色等）、观察（放在载网上）。 负染色：利用重金属盐对样品进行染色，电子密度高的重金属盐包埋了样品中低电子密度的背景，增强了背景散射电子的能力以提高反差。 喷镀技术：以一定角度在样品的表面镀上一层金属，增强背景和待观察样品反差
序号《细胞生物学》题目与答案章 节 1. 细胞生物学的研究内容有哪几个方面、包含哪几个层次？ 细胞生物学Cell Biology是研究细胞结构、功能及生活史的一门科学。可分为三个层次， 即：显微水平、超微水平和分子水平。 01 2. 简述细胞学说的主要内容 ①.有机体是由细胞构成的； ②.细胞是构成有机体的基本单位； ③.新细胞来源于已存在细胞的分裂。 01 3. 举例说明细胞生物学与医学的关系 没有参考答案，请提供一些例证说明。 01 4. 原核生物有什么主要特征？ ①.没有核膜，遗传物质集中在一个没有明确界限的低电子密度区，称为拟核； ②.DNA为单个裸露的环状分子，通常没有结合蛋白； ③.没有恒定的内膜系统。 02 5. 病毒（Virus）基本特征有哪些？ ①.个体微小，可通除滤菌器，大多数病毒必须用电镜才能看见； ②.仅具有一种类型的核酸，DNA或RNA； ③.专营细胞内寄生生活。 02 6. 什么是蛋白质感染因子（prion）？ 是一种变异的蛋白质，可引起同类蛋白质发生构象改变，从而使变异蛋白数量增多，在 细胞中积累，引起细胞病变，所以也叫朊病毒。羊瘙痒病、疯牛病都是由蛋白质感染因 子引起的。 02 7. 什么是电镜冰冻蚀刻（freeze-etching）技术 亦称冰冻断裂（freeze-fracture）。标本置于干冰或液氮中，进行冰冻。然后用冷刀骤然 将标本断开，升温后，冰在真空条件下迅即升华，暴露出了断裂面的结构。冰升华暴露 出标本内部结构的步骤称为蚀刻（etching）。蚀刻后，再向断裂面上喷涂一层蒸汽碳和铂。 然后将组织溶掉，把金属薄膜剥下来，此膜即为复膜（replica）。复膜显示出了标本蚀刻 面的形态，可置于电镜下观察。电镜下的影像即代表标本中细胞断裂面处的结构。 03 8. 如何提高光学显微镜的分辨能力? ①.增大镜口率； ②.使用波长较短的光线； ③.增大介质折射率。 03 9. 生物膜的基本结构特征是什么？ ①.磷脂分子以疏水尾部相对，极性头部朝外，形成磷脂双分子层，组成生物膜的基本 骨架。 ②.蛋白分子以不同的方式镶嵌在脂双层分子中或结合在其表面，蛋白具有方向性和分 布的不对称性。 ③.生物膜具有流动性。 04 10. 简述质膜的主要功能 ①.为细胞的生命活动提供相对稳定的内环境； ②.选择性的物质运输，包括代谢底物的输入与代谢产物的排出； ③.提供细胞识别位点，并完成细胞内外信息的跨膜传递； ④.为多种酶提供结合位点，使酶促反应高效而有序地进行； 04
中山大学生物化学考试试题（B卷） 2003-2004年度第一学期 主考老师：邓庆丽苏菁 一、填空题：（每题一分，共15分） 1．在酶的广义酸碱催化机制中，特别重要的一个氨基酸残基是__his_____，因为其侧链PK值接近生物体内的PH条件。 2．紫外分光光度法测定蛋白质的原理在于__trp__ ，Tyr，Phe这三个氨基酸残基侧链基团在280nm处有吸光性。 3．糖类除了作为能源和生物大分子碳骨架的供体之外，它还与生物大分子间的__信号____识别有关。 4．The most two common secondary structures of proteins are α螺旋and β折叠。5．Monosaccharides containing an aldehyde group are called 醛糖aldoses 。6．Both Western blotting and ELISA are used to detect proteins with 抗体antibody 。 7. NMR spectroscopy and X-Ray 衍射are both used to reveal the three dimensional structure of proteins。 8．Anomers produces an equilibrium mixture of α - and β -forms in both furanose and pyranose ring structures。 9．神经节苷脂是一类含有唾液酸的鞘糖脂。 10．DNA变性后，紫外吸收能力增强，沉降速度升高，粘度降低。11．磷脂酶A的水解产物是脂肪酸和溶血磷脂。 12．开链己糖有16 种异构体。 13．胶原蛋白的氨基酸序列是很有特征的。常见的三个氨基酸重复单位是gly-x-y 。
2018年广东中山大学细胞生物学考研真题 一、填空题（共5小题，每小题2分，共10分。请按顺序把答案写在答卷簿上，并注明题号） 1.恩格斯之所以说细胞学说是19世纪的三大发明之一，这是因为细胞学说____________________。 2.2017年度诺贝尔生理学或医学奖授予来自美国的三位遗传学家：杰弗里·霍尔，迈克尔·罗斯巴什以及迈克尔·扬，以表彰他们在____________________方面做出的贡献。 3.2017年度诺贝尔化学奖授予瑞士洛桑大学科学家雅克·迪波什，美国哥伦比亚大学科学家约阿基姆·弗兰克，英国剑桥大学科学家理查德·亨德森，以表彰他们在____________________方面做出的贡献。 4.红细胞质膜中的带3蛋白具有阴离子转运功能，所以带3蛋白又被称为____________________。 5.胚胎发育早期形成的三个胚层基本上决定了它们的发育方向，如外胚层将要发育成____________________。 二、选择题（共5小题，每小题2分，共10分。请将所选的答案写在答卷簿上，并简要说明选择的依据，不说明不得分，同时标明题号） 1.下列关于细胞死亡的意义，除（）之外都是正确的。 A.调节细胞数量； B.控制细胞质量； C.抑制细胞分裂； D.预防肿瘤的发生。 2.如果在中期染色体移动时，某一侧的动粒受到破坏，则这一侧的染色体将会： A.移向相反的一侧； B.停留在原地； C.停在细胞的中央； D.附着到另外的微管。 3.在减数分裂中，下列哪个时期持续的时间最长？ A.ProphaseⅠ（前期Ⅰ）； B.PrometaphaseⅠ（早中期Ⅰ）； C.TelophaseⅠ（末期Ⅰ）； D.ProphaseⅡ（前期Ⅱ）； E.PrometaphaseⅡ（早中期Ⅱ）。
生物化学I （2006年秋季学期，A卷） 1.简答题（共25小题，超过60分以60分计入总分） 1 .哪些标准氨基酸含两个手性碳原子？写出它们的Fisher投影式。 2.为什么SDS变性电泳可以估算蛋白质的分子量？ 3.Mass spectroscopy在生物大分子研究中有什么应用？ 4.-Keratin、Collagen、Silk fibroin的二级结构和氨基酸组成有何特点？ 5.根据二级结构的组成和排列可将蛋白质结构分为哪些类型？ 6.蛋白质in条件下的折叠有哪些辅助因了？ 7.蛋白质在与其他分子的相互作用中发挥作用，这种相互作用有何特点？ 8.哪些因素可以导致Hemoglobin与O2的亲和力增加？ 9.图示抗体的一般结构（包括结构域及可能的二硫键）。 10.构成肌肉粗丝和细丝的蛋白分子有哪些，各有什么功能？ 11.写出蛋白质氨基酸测序的基本步骤。 12.什么是酶催化的过渡态理论？列出你所知道的支持证据？ 13.酶的可逆抑制剂有几类？它们的抑制动力学各有何特点？ 14.酶在体内的活性是如何受到调控的？ 15.淀粉与纤维素的结构有何区别？ 16.细胞膜表面的Glycoprotein和Glycolipid有哪些生物学功能？ 17.细胞内的DNA可能会出现哪些异常结构，他们有什么生物学意义？ 18 .膜脂的分类及其结构特点 19.生物膜的功能有哪些？ 20.膜蛋白以哪些方式参与生物膜的构成？ 21.图示 secondary active transport, uniport, symport, anti port. 22.Acetylcholine receptor通道是如何控制开关的？ 23.K+离子通道是如何对通过的离子进行选择的？ 24.膜电位是怎样控制Na*通道开关的（可图示并说明）？ 25.Ca新泵和NaF泵的异同点。 IT. You have a crude lysate sample containing a mixture of six proteins (1, 2, 3, 4, 5, and P -galactosidase). Some characteristics of these proteins are shown in the table below. Give an available procedure of purifying B -galactosidase.
第十章细胞骨架与细胞运动 10.1细胞骨架概述 10.1.1细胞骨架的组成和分布 10.1.2细胞骨架的功能 10.1.3细胞骨架的研究方法 10.2微管（MT） 10.2.1微管组成 10.2.2微管装配 10.2.3微管结合蛋白（MAP） 10.2.4微管功能 10.3微丝（MF） 10.3.1微丝组成 10.3.2微丝装配 10.3.3微丝结合蛋白 10.3.4微丝功能 10.4中间纤维（IF） 10.4.1微管组成 10.4.2微管装配 10.4.3微管结合蛋白 10.4.4微管功能 10.1细胞骨架概述 10.1.1细胞骨架的组成和分布 细胞内以蛋白质纤维为主要成分的网络结构。 三类：微管，主要分布在核周围，放射状向胞质四周扩散；微丝，主要在细胞质膜的内侧；中间纤维，分布在整个细胞中。 10.1.2细胞骨架的功能 基本的两个功能：运动与维持结构。 （1）维持细胞的形态结构，细胞内结构有序组织。 （2）细胞内物质及细胞器的运输。 （3）细胞运动。 （4）为mRNA提供锚定位点。 （5）参与细胞信号转导。 （6）细胞分裂的机器。 10.1.3细胞骨架的研究方法
细胞骨架动力学研究：荧光显微镜、电视显微镜。 细胞骨架形态学研究：电子显微镜。 10.2微管（MT） 10.2.1微管组成 由微管蛋白异源二聚体头尾结合形成微管原纤维，13条微管原纤维形成管状的蛋白纤维单体。还有双联体、三联体。 异源二聚体由α微管蛋白和β微管蛋白，两者AA序列同源性高，三维结构相似，为球状，能紧密结合称为二聚体。两者都有GTP结合位点，但α微管蛋白与GTP的结合不可逆，而β微管蛋白结合的GTP可水解，且在结合GTP时对另一异源二聚体具有较高的亲和力。 10.2.2微管装配动力学 （1）装配包括两个步骤：成核与延长。 成核：微管组织中心，包括中心体与基体。在中心体还有γ微管蛋白形成γ微管蛋白环复合体，与β微管蛋白相互作用，协助成核。成核反应形成一个短的微管。 延长：在短微管的基础上，二聚体结合到微管两端，使微管长度增加。（2）微管极性。 一为装配的方向性，一端为β微管蛋白组成的环，另一端为α微管蛋白组成的环；二为生长速度的快慢，装配的速度大于β微管蛋白上GTP的水解速度，则这端形成GTP冒结构，且此端的合成速度大，为“+”端，另一端的合成速度小，为“-”端。 （3）微管装配的动力学性质 动态平衡状态，两端同时解聚和聚合，形成长度的变化，若处于平衡状态，则出现踏车现象。 （4）影响微管稳定性的因素。 游离GTP浓度、温度、pH、药物（秋水仙素）、游离微管蛋白库浓度、压力，容易造成微管不稳定。 微管结合蛋白、某些药物（紫杉醇）、修饰微管的酶（微管蛋白去乙酰化酶及微管去酪氨酸酶）可以稳定微管。 10.2.3微管结合蛋白（MAP） （1）MAP组成 MAPI:MAPIA及MAPIB，重复氨基酸序列Lys-Lys-Glu-X，同带负电荷的微管蛋白结合。 MAPII：MAP2、MAP4、Tau。 （2）MAP功能 ①提高微管的稳定性，与MTOC作用促进微管的聚合。
中山大学细胞生物学英文题库 1. You think you might have discovered a new organelle using electron electron microscopy, but you are not sure if it's real or an artifact of your technique. What might you do to prove it is real? a. Look for the structure in many similarly prepared specimens from the same source. b. Look for the structure in many similar prepared specimens from different sources. c. Look for the same structure in specimens prepared using different staining protocols. d. Look for the same structure in specimens prepared using different (or no) fixatives. 2. Traditional genetic approaches to problems of cell biology have followed the path of information from gene to protein. Biochemical approaches have traced proteins back lto the DNA that encodes them, i.e., from protein to gene. This chapter has given you the basics to follow either path. Assume you are studying a problem relating to cell function. Briefly outline the basic steps you would take if yo u were starting with a gene and trying to deduce the function of the protein. Now outline the steps that you would take to get from a specific protein to a sequenced, isolated gene. 1. Indicate whether the following statement is true or false. If it is false, expolain why in Nuclease-chypersensitive sites in chromation are located in the linker DNA between nucleosomes.(F) 2. Short answer a. Evolutionary conservation of histone proteins. b. nuclear matrix 3. Suppose you discover a temperature-sensitive nutant whose nucleus failed to accumulate certain nuclear protein atan elevated (restrictive) temperature, but continued to accumulate other species. What conclusions might you draw about nuclear localization and the nature of this mutation?
细胞生物学学习体会 通过网络课程学习,有幸聆听到王金发教授对《细胞生物学》课程的讲授，使我不仅学到了细胞生物学专业新的知识与研究技术、方法,而且在教学方面也受益非浅。下面就我的学习谈一些体会。 一、全面学习了细胞生物学的专业知识 《细胞生物学》是一门包容量大、发展迅速的学科。内容涉及生物膜的结构与功能；内膜系统区室化形成及各种细胞器的结构与功能；细胞信号转导；细胞核、染色体以及基因表达；细胞骨架体系；细胞增殖及其调控；细胞分化、癌变及其调控；细胞的衰老与程序性死亡；细胞的起源与进化；细胞工程技术等多个方面。 (一)对细胞生物学的专业知识有了更深的认识。 1、细胞通讯方面 记得第一次听王老师的课就是讲授细胞的通讯，在多细胞生物中，细胞不是孤立存在的，而是生活在细胞社会中，它们必须协调一致，才能维持机体的正常生理机能，它们的协调是通过细胞通讯来完成的。细胞通讯是通过信号分子与受体的识别，从而在靶细胞内产生一系列反应的过程。信号分子有第一信使和第二信使之分，第二信使位于细胞内，由第一信使与受体识别后最先在胞内产生的，它主要与细胞内受体作用，所以受体也可分为表面受体和胞内受体。信号分子与受体的识别作用具有特异性。细胞信号传递所发生的反应有快速反应和慢速反应。快速反应是信号分子与受体作用后直接引起细胞内的一系列代谢反应；慢速反应则需要引起基因表达，再表现出各种代谢反应。细胞通讯过程是个复杂的过程，一个细胞的周围有上百种不同的信号分子，细胞要对这些信号分子进行分析，做出正确的反应。信号转换的研究在近年很热门，但进展缓慢，主要是因为信号转换的复杂性，不同信号的组合产生的效应是不一样的。 2、蛋白质的合成和分选机理 蛋白质的合成是在核糖体上，有两种合成体系，一种是在细胞质中游离的核糖体上，另一种是在膜旁核糖体上合成，它们合成的蛋白质将分布到不同的部
中山大学生物化学（一）真题 一、填空题（每空1分，共30分），答案请标明每题的序号。 1、生化教材中氨基酸结构通式常用兼性离子形式表示，意为_________条件下的结构。 2、含全部标准氨基酸的蛋白质，强酸下完全水解后，检测不到的氨基酸是_________。 3、某蛋白质在280 nm处有强的吸收，其最可能含（一种氨基酸）_________。 4、肌红蛋白中不存在的二级结构有_________。 5、粗肌丝中的肌球蛋白分子是_________聚体。 6、纤维素是D-葡萄糖单体通过_________糖苷键连接而成的聚合物。 7、剧烈运动较长时间后，体内T状态的血红蛋白比例_________。 8、任何蛋白质在细胞内折叠都需要的一类辅助蛋白是_________。 9、联合多糖包括脂多糖、糖脂、糖蛋白和_________。 10、如果柱床体积和密度相同，则上样体积小，洗脱流速慢的常用柱层析是_________。 11、目前，测定蛋白质分子量最准确的方法是_________。 12、某肚不含Pro, Arg和Lys且rza酶不能水解，则此肤可能是_________。 13、酶的特殊基团的催化作用是指酸碱催化、共价催化和_________。 14、酶在体内的活性调节方式主要有共价修饰调节和_________。 15、抑制剂的浓度增加，测得的Km和V-，同比例减小，则属于_________。 16、细胞合成ATP的手段包括光合磷酸化、氧化磷酸化和_________磷酸化。 17、真核细胞的TCA循环在_________中进行。 18、脂肪酸进行β-氧化前先进行活化，其活化形式为_________。 19、酮体包括丙酮酸、乙酞乙酸和_________三种成分。 20、脂肪酸合成的基本原料为乙酞CoA，脂肪酸合成的前体为_________。 21、绝大多数转氨酶以_________作为氨基的受体。 22、完整的尿素循环仅存在于_________细胞。 23、为尿素循环直接提供N的氨基酸是_________。 24、胸着酸是在胸昔酸合成酶的催化下，由_________甲基化而合成的。 25、大肠杆菌的DNA聚合酶!具有5'-3`的聚合酶,5'-3`的外切核酸酶和_________活性。 26、真核细胞mRNA的3、端含有一段多聚腺营酸序列尾巴，这是在转录后添加上去的。最重要的加尾信号的一致序列为_________。 27、翻译时氨基酸的活化形式为_________。 28、端粒酶的蛋白质部分具有_________活性。 29、尿素循环和嗯咙核昔酸生物合成的共同代谢中间产物是_________。 30、痛风是由_________过量产生或排泄不畅引起。 二、是非题（每题1分，共30分），答案请标明每题的序号。 1、生物体内的甘油醛和3-磷酸甘油醛的构型不同。 2、共价修饰调节的过程中，酶的构象不发生变化。 3、溶菌酶的镜像蛋白不能催化肚聚糖的水解。 4、以螺旋和p折叠都能使蛋白分子内氢键的数目倾向于最大。 5、阳离子交换层析介质表面带负电荷。 6、蛋白质A与B的进化具有协同性，说明他们可能在结构和（或）功能上具有相互依赖关系。 7、阮病毒是一种易于被诱导发生构型变化的蛋白质。
中山大学2006年研究生入学考试细胞生物学试题 一、填空题（每空1分，共20分，请按顺序把答案写在答题纸上，并注明序号） 1、细菌质膜的多功能性主要表现在：具有的呼吸作用、具有的分沁作用，同时具有质膜的信号传导作用。 2、乌本苷和毛地黄是治疗心脏病的重要药物，可使心肌更强烈地收缩。这两种药物的作用 是。不过在治疗中要注意用量，一旦其中一种药物用量过大，将会产生毒害作用。 3、植物叶子萎焉时，细胞内的减小，结果其细胞壁有张力但没有作用，如同自行车橡胶轮胎一样，不再提供刚性。 4、2005 年医学/生理学诺贝尔奖被两位科学家获得，他们发现了导致人类罹患。 5、蛋白酶体既存在于细胞核中，又存在开胞质溶胶中，是溶酶体以外的蛋白质水解系统，主要降两种类型的蛋白质：一类是，另一类是。 6、线料体是一种需氧的细胞器，但氧浓度过高会引起线料体氧中毒，这可通过的作用进行调节。 7、端粒酶属于DNA 合成，但与其他的DNA 聚合酶不同的 是：，并且。 8、如果将双线期灯刷染色体在放射性标记的尿嘧啶中培养，然后通过放射自显影进行检测，大部分的放射性将出现在。 9、精细胞与卵细胞的结合，激活了____ ，最终引起皮层反应。 10、卵母细胞中存在大量mRNA，并且是分布的。 11、原核生物中的DNA 甲基化与真核生物中的DNA 甲基化的意义是不同的，前者是，后者是。 12、对引起家族性乳癌的基因测序时发现，这些基因编码的多肽含有锌指蛋白模体根据这一结果，可推测此类基因产物的正常功能 是：。 13、参与信号转导的受体被磷酸化修饰后可改变受体的活 性， 或失去信号转导的作用。 二、判断题（判断各题正误，并简要说明理由，每题2分，共20分。请将答案写在答题纸 上，并标明题号） 1、当NaCI 溶于水时，与这些离子靠得最近的水分子会倾向于这样的取向：使其氧原子朝 向钠离子而远离氯离子。
中山大学生科院 细胞生物学期中试卷参考答案 一、填空题(每空0.5分，共5分) 1. N-乙酰半乳糖胺残基，半乳糖残基 2. A. 电话交谈: 自分泌 B. 集会演讲内分泌 C.无线电广播突触信号传导 D. 自言自语旁分泌 3. 波长 4. 脱氨 5．整联蛋白肌动蛋白纤维 二、判断以下各题是否正确, 若正确, 用T表示, 不正确用F表示,并做简要说明。 (每题1分，共10分) 1. 正确。 复合物能够激活离子通道, 结合有GTP的亚基能够激活酶。 2. 错误。冰的密度比水低。这样就保证冰能够漂浮在水的表面, 并在温度升高超 过冰点时化冰。 3. 正确。高比热意味着需要较多的热才能升高温度。这就有效地缓冲了细胞对周 围环境温度而保持细胞温度的稳定。 4. 错误。与细胞表面受体结合的信号分子不必跨过质膜, 因此, 此类信号分子可 大可小, 疏水或亲水。但与细胞内受体结合的信号分子必须足够小和疏水。 5. 主要是不同的细胞对信号反应的内部机制不同。既便是反应途径相同, 不同的 细胞也会表达不同的蛋白质进行应对。 6. 错误。是因为不同细胞中PKA的底物不同, 而不是蛋白激酶A的不同。 7. 错误。配体与受体酪氨酸激酶的结合引起二聚体的装配。任何受体进行自磷酸 化, 从而启动细胞内的信号级联反应。在某些情况下, 如胰岛素受体, 通过细胞外的两个受体形成二聚体, 然后通过两个α螺旋进行构型的变化。 8. 错误。心钠肽直接与受体鸟苷环化酶结合, 将之激活, 并由激活的鸟苷环化酶 产生cGMP, 再由cGMP激活PKG。 9. 错误。原核细胞同样能进行ATP的合成和光合作用。只不过不是通过细胞内的 区室, 而是通过中膜体之类的结构。 10．正确 三、选择题(请将正确答案的代号填入括号，每题1分，共15分)
2007年中山大学硕士研究生入学考试细胞生物学试题 一?填空题（每空1分〃共15分〃请按顺序将答案写在答卷纸上〃并注明序号） 1.生活在不同环境中的生物〃其细胞质中不饱和脂肪酸的含量是不同的。相比之下,生活在___________________环境中的动物〃其细胞质膜中不饱和脂肪酸的含量高于生活在 _________________ 动物细胞质膜中不饱和脂肪酸的含量。 2.2006年诺贝尔化学奖颁给了美国科学家科恩伯格。其贡献是发现了 ___________________;而发现___________________的两位美国科学家获得了医学/生理学诺贝尔奖。 3.从创新的观点看〃1665年胡克发现细胞的两个主要创新点是： ___________________创新和________________创新。 4.在多细胞生物发育中〃细胞有四种基本的行为〃即：细胞增殖、细胞分化、___________________和___________________。 5.动粒和着丝粒由于它们在染色体中的位置相同〃而倒置认识上的混淆〃其实它们是两个不同的概念〃最本质的差别是：前者是 _________________ 〃后者则是________________ 。 6.根据细胞死亡诱因的不同〃将编程性细胞死亡分为 ___________________ （11）和___________________（12）.
7.紧密连接是表皮组织细胞的重要连接方式〃参与紧密连接的两个重要的蛋白质分别是___________________ 和___________________ . 8.核纤层由核纤层蛋白A、B、C三种亚基组成〃其中 ___________________（15）亚基同染色质结合。 二?判断题（判断各题正误〃无论正确与否都要说明判断的依据〃否则不得分。每题3分〃共30分。请将答案写在答卷纸上〃并标明题号） 1.为了研究某种生物中一种新基因是否含有Ⅱ组内含子。设计了如下实验：将总RNA与放射性标记的G和Mg2+混和在一起〃然后分析放射性标记的G的存在状态。如果RNA样品中没有Ⅰ组内含子的话〃G为游离态：有Ⅱ组内含子时G最终出现在RNA分子中。 2.分别将缺少胞外结构域和缺少胞内结构域的编码突变型受体酉各氨酸激酶基因导入细胞〃虽然这些突变基因比正常基因的表达量高〃但由于细胞仍表达来自其自身正常受体基因的正常受体〃所以这两种转基因细胞不会发生什么变化。 3.限制细胞大小的因素很多〃包括核糖体的大小、表面积/体积比。细胞核产生的mRNA的数量。细胞含水量等。 4.由于蛋白聚糖能够结合大量的水〃进而形成水合胶〃从而增加了细胞外基质的弹性〃增强了抗压能力。水合胶的形成在于蛋白聚糖的糖基具有丰富的正电荷。 5.虽然从破裂的细胞中分离得到的线粒体与叶绿体〃给予适当的营养〃能够在
王金发教授简介 王金发，男，1947年出生，教授，硕士，博士生导师，国家级教学名师。从事细胞生物学专业，研究方向为生命科学。 王金发教授1982年7月中山大学生物系遗传学专业研究生毕业，同时获得理学硕士学位。1989年11月至1993年1月作为访问学者在美国洛杉矶希望城分子免疫学系从事癌基因的分子生物学研究。2002-2008年任中山大学生命科学学院副院长，现任国家级生物学实验教学示范中心主任、教授、博士生导师；中国细胞生物学学会教学普及委员会副主任、广东省遗传学会副理事长。 王金发教授长期从事教学和科学研究工作，所授课程先后被评为国家级精品课程。以王金发教授为带头人的“细胞生物学与遗传学研究性教学团队”于2007年被评为国家级教学团队。先后主持国家和广东省自然科学基金研究课题8项，主持教育部教学研究项目5项、广东省教学研究项目5项。在国内外刊物上发表科研和教学论文120余篇，主编教材5部、词典1部、网络课程电子教材2部、教学辅助读物4部。2000年被评为宝钢教育基金优秀教师，2001年被评为广东省“南粤教书育人优秀教师”，同年被中山大学学生评为“中大学子心目中的良师”，2002年被评为中山大学师德十佳标兵，2003年获得国家首届教学名师奖，2004年被评为南粤杰出教师,2004年被国务院批准享受政府津贴,2005年获广东省五一劳动奖章。 王金发教授倡导的“研究性教学理念”、“开放式、研究性教学模式”、“名师、名课、名教材、名专业”“四名”工程建设等创新性教学理念和教学模式在国内高校有一定影响，自2004年以来先后举办了9期“研究性教学”研讨班，应邀到国内高校作了100多场“研究性教学”理念的报告。王金发教授及其团队于1997年获广东省教学成果二等奖、2001年、2005年连续两届获国家级教学成果二等奖。