2.2动物细胞工程
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
教学目标
1．简述动物细胞培养的过程、条件及应用。
2．简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。
3．举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用。
教学重点
1.动物细胞培养的过程及条件。
2.用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。
3.单克隆抗体的制备和应用。
教学难点
1.用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。
2.单克隆抗体的制备过程。
教学工具：多媒体教学课件
课时安排：2课时
教学过程
课时1 动物细胞培养
一.引入新课
1.教师：植物细胞工程有哪些基本技术？
学生：植物组织培养，植物体细胞杂交。
2.教师：利用植物细胞可以培育成植物体，那么，你利用动物细胞能不能大量繁殖动物体，以提高繁殖率呢？这节课我们来学习动物细胞工程
3.教师：那动物细胞工程又有哪些基本技术呢？
学生：动物细胞培养，动物细胞位移植，动物细胞融合，生产系克隆等。
4.教师：动物细胞培养技术是动物细胞工程技术的基础。让我们这节课学习动物细胞培养的原理、过程及条件
二.动物细胞培养
一）动物细胞培养的概念及实质（原理）
1.教师：请阅读材料，小组讨论解决方案
材料一：对于大面积烧伤的病人，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源又不足，且会产生排斥反应。怎样才能获得大量的自体健康皮肤呢？
材料二：单细胞产生的蛋白质很少，怎样才能获得大量的分泌蛋白呢？
生：取相应细胞，大量培养，即通过动物细胞培养。
2.教师：很好！对于细胞培养我们要了解两个问题。第一个问题：什么是动物细胞培养？
生：动物细胞培养是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养其中，让这些细胞生长和增殖。
3.教师：通过概念我们可以看出动物细胞培养的前提？条件？实质？
学生：（1）需分散成单个细胞；（2）需要在培养基上培养；（3）动物细胞培养的实质是细胞增殖。
二. 动物细胞培养的过程
1.教师：在生物体内，成块的组织中细胞与细胞靠在一起，彼此限制了细胞的生长和增殖，因此，动物细胞培养的是首先要解决什么问题？
生：首先，将组织分散成许多单个细胞
2.教师：怎样做才能既温和的将细胞分散，又不伤及细胞
学生：首先从健康动物体（动物胚胎和幼龄动物）内取出组织块，剪碎，然后，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织，使其分散成单个细胞。
3.教师：进行动物细胞培养时用胰蛋白酶分散细胞，1）表明细胞的物质主要是什么成分？2）用胃蛋白酶行吗？
学生：1）说明细胞间的物质主要是蛋白质。 2）不行，多数动物细胞培养适合的PH为7.2-7.4，而胃蛋白酶的作用的适合PH为2，PH大于6时，蛋白酶就会失去活性。胰蛋白酶的PH为7.6。
4.教师：将组织分散成许多单个细胞后，我们就可以培养了，请大家首先回顾动物体细胞直接生活的环境是什么?
学生：内环境（细胞外液）——液体环境，因此我们动物细胞培养也因采用液体环境——培养液培养
5.教师：具体怎么做？
学生:用培养液将分散的细胞稀释成细胞悬液，放入培养瓶内，适宜条件下培养
6.教师：人们通常将动物组织消化后的初次培养成为原代培养，原代培养会有哪些现象呢？需要注意什么问题？请大家看书P44
学生：1）细胞贴壁和接触抑制。2）培养皿或培养瓶的内表面光滑、灭毒，易于贴附，以促成细胞贴壁生长，防止细胞的接触抑制。
7.教师：为了得到更多的细胞，我们怎么办？
学生：让细胞继续增殖
8.教师：问题是原代培养细胞已经出现了接触抑制现象，怎么解决这个问题？
学生：以贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶等处理分散为单个细胞，稀释成细胞悬液，然后分瓶继续培养。
9.教师：这样的培养过程通常被称为传代培养。传代培养细胞一般传至10代就不易传下去了，那么我们能不能继续利用传代培养得到的细胞培养得到更多细胞呢？看书P45第2段完
学生：不能。一般说来，细胞传至10到50代左右时，增殖会逐渐缓慢，以至于完全停止。如果继续传代培养，少数细胞会发生基因突变获得不死性向癌细胞方向发展。
10教师：因此，动物细胞培养过程中培养几次？
生：两次，原代培养和传代培养。
师：目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内,以保持细胞正常的二倍体核型。
三.动物细胞培养条件
1.教师：体外培养细胞时需要一定的营养和条件。下面，我们来具体了解。
教师：为了使体外动物细胞培养顺利进行，和植物细胞一样，我们应营造怎样的环境？
生：无菌、无毒的环境，培养液和所有培养具进行无菌处理。
2.教师：动物细胞培养中，还不能出现培养基污染，那又该如何避免？
生：培养液中添加一定量的抗生素。
3.教师：很好！细胞培养的过程中会产生代谢产物，其结果会对细胞自身造
成危害，那又该怎样避免呢？
生：定期更换培养液。
4.教师：植物组织培养的培养基中有哪些物质？
生：水、无水盐、植物激素等
5.教师：那么，联系人体细胞生存内环境成分和理化特性知识，动物细细胞培养的培养液中含有哪些物质呢？
生1：营养：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量无素等。
生2：还有血清、血浆等。
教师：上述营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基，称为合成培养基。
6.教师：动物细胞生存还需要什么条件？
学生：温度36.5+-0.5 PH7.2-7.4 O
2
7.教师：怎样维持PH？
学生：CO
2，95%空气加5% CO
2
混合气体
四.动物细胞培养技术的应用
教师：动物细胞工程都有哪些应用呢？请自读P47第1段
学生：1.可大规模生产一些有重要价值的生物制品。
2.培养的动物细胞可作为基因工程中常用的受体细胞。
3.培养的动物细胞可用于检测有毒物质（根据变异率）。
4.培养正常或病变细胞，用于生理、病理、药理等方面的研究。
课堂小结：
一.动物体细胞核移植概念
1.教师：离体的植物细胞或组织我们可用植物组织培养技术发育成完整的植株，现在我们已经掌握了动物细胞培养技术，那么，是否能用类似方法，是动物细胞发育成一个完整个体呢？
学生：目前不能，动物细胞由于高度分化已经丧失了全能性
2.教师：那么我们听说的克隆羊多莉、克隆牛康康都是怎么来的？
学生：由于动物细胞核还保持着全能性，用体细胞克隆的动物，实际是通过核移植来实现的。
3.教师：什么叫动物核移植？分为哪几种？
学生：1）动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。 2）分为胚胎核移植（胚胎细胞分化程度地，恢复全能性容易，难度低）和体细胞核移植
二.体细胞核移植的过程
1.教师：通过概念我们可以发现体细胞核移植大致分为几个阶段？原理？
学生：1）3个阶段①核移植②重组细胞发育成一个新的胚胎③新的胚胎最终发育为动物个体。 2）动物细胞核全能性
2.教师：因此体细胞克隆首先也是核心的过程是？将谁移植到哪儿？
学生：1）核移植 2）移植的是动物细胞的细胞核；利用去核卵母细胞作为受体细胞（卵母细胞体积大，易操作，而且含有促使细胞核表达全能性的某种物质和营养物质）。
3.教师：具体怎么做？需要注意什么？
学生看书P48解说过程
教师提示（1）卵母在体外培养到减数第二次分裂中期（处于此时期的细胞具备与精子受精的能力）。
（2）供体细胞应选取优良动物体细胞，一般用传代培养10代（10—50带左右时部分细胞核会发生基因突变，成为癌细胞，而10代以内细胞一般保持正常）以内细胞。
（3）供体的细胞核移入去核卵母细胞中，其实质是将去核卵母细胞与供体细胞进行细胞融合，一般采用电激法使细胞融合，所以子代的细胞质基因来自于两个亲本。
（4）供体核进入受体卵母细胞后，还需要物质或化学方法激活受体细胞，使其完成减数分裂，因为所选用的受体细胞是处于减数第二次分裂中期的卵母细胞，减数分裂还没有进行完。
4.教师：细胞融合后，接下来第二步做什么？
学生：重组细胞在体外发育成重组胚胎.
5.教师：第三步？
学生：将早期胚胎移植到受体母牛体内，代孕母牛生出克隆牛。
6.教师：克隆牛性状和谁相似？遗传物质完全一样吗？
学生：1）和供核牛相似 2）不，克隆动物绝细胞核来自供体牛，但细胞质来自受体卵母细胞，生物少量DNA在细胞质（线粒体）中
7.教师：此过程涉及哪些技术操作？
学生：动物细胞培养技术、显微注射技术、胚胎移植等
三. 体细胞核移植的应用
1.教师：细胞胞核移植技术的意义是什么？
学生：①可以快速繁殖动物；②属于无性繁殖，可保持优良性状。
2.教师：都有哪些具体应用呢？
学生自读总结，并解说组织器官移植的过程
（1）畜牧业生产中，可加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育。
（2）保护濒危物种
（3）转基因克隆动物可以作为生物反应器
（4）治疗人类疾病
（5）组织器官移植（人的核移植胚胎干细胞）
（6）研究克隆动物和克隆细胞
（7）用克隆动物做疾病模型
四.体细胞核移植技术存在的问题
学生自读总结：
（1）体细胞核移植技术的成功率非常低[来源:高考资源网]
（2）克隆动物存在着健康问题，许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷等板书设计
2.2动物细胞工程
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
一.动物细胞培养的概念
二.实质（原理）：细胞有丝分裂
三. 动物细胞培养的过程
取动物组织块
↓剪碎、胰蛋白酶处理
分散成单个细胞
↓
细胞悬液
↓转入培养液
原代培养
↓胰蛋白酶处理
传代培养
三.动物细胞培养条件
四.动物细胞培养技术的应用
五.动物体细胞核移植概念
六.体细胞核移植的过程
七. 体细胞核移植的应用
八.体细胞核移植技术存在的问题
动物克隆 主要结构： 四：介绍动物克隆研究的历史 （动物克隆研究的三个阶段：胚胎细胞克隆阶段、同种体细胞克隆阶段、异种体细胞克隆阶段；其中可以重点找一些比较有名的克隆动物进行详细介绍，比如”克隆羊多莉”等。所提到的克隆动物最好都能附上图片） 五：介绍中国的动物克隆技术研究历史 六：介绍动物克隆技术的方法、环节（看能不能找到视频） 七：动物克隆技术存在的问题（主要是技术方面的缺陷） 四．动物克隆研究的历史 科学家们很早就开始了动物克隆的研究。早在1938 年,德国胚胎学家Spemann 即提出“奇异的实验”的设想。1952 年,英国科学家Briggs 和King首次报道了蛙的核移植研究。1962 年,英国剑桥大学的Gurdon 获得了成年蛙。我国已故科学家童第周教授在20 世纪60 —70 年代曾用囊胚细胞进行鱼类细胞核移植工作,获得属间和种间移核鱼,使我国鱼类核移植研究居世界领先水平。早期的动物克隆研究仅限于两栖类和鱼类,直到20 世纪80 年代,核移植克隆技术才开始应用于哺乳动物。根据供核细胞的不同,可将动物克隆研究分为三个阶段: 1.胚胎细胞克隆阶段 1981 年, Illmensee 和Hoppe 报道了他们用小鼠的正常囊胚或孤雌活化囊胚的内细胞团细胞作为核供体,直接注入去掉雌雄原核的受精卵胞质中,重构胚体外发育到桑葚胚或囊胚后移植寄母子宫,获得克隆小鼠,这是第一次用胚胎细胞对哺乳类进行核移植获得成功。1983 年,美国科学家利用核移植技术和细胞融合方法获得了克隆小鼠。1986 年,英国的Willadsen 用绵羊的8 —16 细胞阶段的胚胎细胞作为供体进行核移植,首次应用电融合的方法克隆出一只小羊。此后,科学家们又相继克隆出小鼠、绵羊、牛、兔、猪和猴等。我国科学家也在20 世 纪90 年代成功开展了胚胎细胞克隆兔、山羊、小鼠、牛和猪等研究。 2.同种体细胞克隆阶段 1997 年2 月,英国罗斯林研究所Wilmut 等人宣布,他们用6 岁成年羊的高度分化的乳腺细胞进行了核移植,成功地获得了克隆羊“多莉”。这是第一次用成年体细胞作为供核细胞,由此说明高度分化的成年动物的体细胞可在适当条件下发生逆转, 恢复全能性,这是生物技术史上具有划时代意义的重大突破,是克隆技术的一个里程碑,也改写了部分生物学的理论。1998 年5 月,美国科学家Robl 的研究组利用牛胎儿成纤维细胞克隆出了 3 头牛,而且携带了转移的基因。1998 年7 月,日本科学家Kato 等用牛的输卵管细胞克隆出了8 头小牛。1998 年7 月和1999 年6 月,美国夏威夷大学Yanag2imachi 领导的研究小组克隆小鼠成功,并打破了哺乳动物克隆研究初期人们认为只有雌性动物才能被克隆的迷信。此后,同种体细胞克隆出的山羊、猪、猫和兔也都相继诞生。1999 年和2002年,我国
《克隆羊-多莉》的教学设计 教学目标； 知识目标：1.能通过讨论，搜集资料，调查，访问等方式探究克隆技术，和基因工程给人类带来的影响。 2.能将所搜集的资料进行整理，设计成有条理的演讲稿向他人介绍。 3.能有一定根据的提出自己的观点，并且能对别的同学的观点进行评价。 能力目标： 1.能体会到科学技术“双刃剑”的含义，了解科技的两面性。 2.能用自己的话解释克隆技术和基因工程，并对其产生浓厚兴趣。 思想目标： 1.能从正反两方面说出克隆技术给人类带来的影响。 2. 能举出三个实例说明基因技术的广泛应用。 教学重点 1. 了解克隆技术和基因技术工程技术。 2.认识到新技术给人类带来的影响。 3学生通过自己搜集资料来激发学生对生命科学新成果的关注， 难点 1.克隆技术的操作过程。 2.学生自己搜集资料.的能力。 3.克隆技术的利与弊。 学情分析 五年级的学生属于年龄较小，理解能力比较侧重于直观，形象的思维。对于克隆技术，他们既新鲜，喜欢，但是不容易理解。容易产生畏难情绪。所以结合小学生的认知规律，采用直观教学法，采用大量的图片，故事，和flash动画。将深奥的知识用浅显的载体呈现，深入浅出，让学生在快乐的氛围中，高效学习，快乐成长。 课前准备：课件，图片，克隆Flash，月季，半枝莲，蟹爪莲，吊兰。转基因蔬菜（西红柿，柿子椒，土豆等） 教学过程设计 1.故事导入，走进克隆。 师：世界上，每个人，每个动物都有自己的爸爸妈妈，是爸爸妈妈的把自己的带到这个世界上来的，爸爸的精子与妈妈的卵子形成一个受精卵，然后发育成一个新的生命。但是有一个真实的故事，一定让你目瞪口呆。 神奇的小绵羊-多莉 1996年，有一只特殊的小绵羊诞生了，它的诞生震惊了全世界。因为她的出生，是有三个妈妈完成的，完全没有爸爸的参与。英国科学家伊恩-威尔莫特利用三只母羊，科学家尹恩在黑母羊的身上取出了一个体细胞的细胞核，然后把另一个白羊的卵中去掉细胞核，然后通过电击将之融合，形成了胚胎，再把胚胎放进第三只母羊的子宫里，他经过200多次的实验，10多年的尝试，终于成功了。经过184天，小多莉成功出生了。她的降生是科学划时代的进步。小多莉长大后，又生下了四只小羊。在她八岁那年，因为肺部感染得了不治之症，医生给她实施了安乐死，虽然克隆羊多莉比正常的绵羊少活了几年。但是她的一生，带给了科学界巨大的震撼，惊喜，和深思。 这就是今天我们要研究的《克隆羊多莉》（板书） 2.合作探究，了解克隆。
学科：生物模块: 选修3 课题：动物细胞融合与单克隆抗体授课教师：杜庚辰 一、教学目标 1．知识目标： （1）掌握植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术的相同点和不同点 （2）掌握动物细胞融合的方法 （3）简述制备单克隆抗体的原理和过程 2．能力目标： 让学生尝试设计单克隆抗体的制备过程，指导学生掌握获取知识和探索生命科学的基本方法，发展学生的创造性能力。 3．情感态度与价值观： 通过介绍科学家的成长历程和研究单克隆抗体的过程，使学生了解生物技术发展迅猛，曾经的异想天开，若干年后就会成为现实。介绍细胞融合和单克隆抗体的发展动态和一些研究成果，使学生认识到人们对生物奥秘的揭示已经越来越广泛和深入，知识在不断更新，学无止境。 二、重难点分析 1. 教学重点 （1）动物细胞融合技术 （2）单克隆抗体的制备 2. 教学难点 单克隆抗体的制备 三、教学过程 教师活动学生活动设计意图 展示番茄-马铃薯植株理想图，请学生介绍杂种植株的培育过程。 由植物体细胞杂交技术可以创造新的植物品种，能不能通过类似的方法创造新的动物品种呢？导入新课。 展示“熊猫狗”图片，请同学尝试培育动物新品种。引出我们本节课需要了解的动物细胞融合与单克隆抗体技术。 介绍动物细胞融合技术简述植物体细胞杂交 过程 请学生设计培育“熊 猫狗”的过程。 请学生比较植物体细 胞杂交技术和动物融 合技术的区别 回顾知识，引入新技术 的学习 让学生尝试提出动物细 胞融合技术，以及后期 生物技术的综合运用。 掌握植物体细胞杂交技 术与动物细胞融合技术 的相同和不同。
教师活动学生活动设计意图 回顾免疫学相关知识，分析单克 隆抗体的特点是特异性强，灵敏度高 并可大量制备。 介绍制备单克隆抗体的制备原理，给出实验材料，请同学做为科研人员设计实验，制备预防H1N1的单克隆抗体 展示科学家的制备过程，和同学的制备过程进行比较，总结出最佳制备单克隆抗体的方案。 介绍科学家的探索之路，使学生了解生物技术发展迅猛，曾经的异想天开，不久之后也许就会成为现实。学生分组讨论，总结 实验步骤并预设实验 中会遇到的困难。 通过传统抗体与单克隆 抗体的比较，突出现代 生物技术的优越性。 通过学生自主学习，研 讨的方式掌握单克隆抗 体的制备过程。 情感教育 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体一．动物细胞融合 融合方法：物理方法：离心、振动、电激 化学方法：聚乙二醇（PEG） 生物方法：灭活的病毒 二．单克隆抗体 特点：特异性强、灵敏度高、可大量制备制备过程： 抗原 小鼠B淋巴细胞（多种）骨髓瘤细胞 杂交细胞 筛选 杂交瘤细胞（多种） 克隆筛选 产生特定抗体的杂交瘤细胞 体内培养体外培养 小鼠腹腔培养液 单克隆抗体
一、导入： 二、课文学习： 像小紫彤这样要进行肝移植 的病人还有很多很多，但能像小紫 一样幸运的人却是微乎其微。生命 是宝贵的，但生命也是脆弱的，很 多病人禁不起等待，已经离开了他 们所热爱的世界，此时此刻，我们 不禁想象，如果我们的生命，我们 的器官也能像《西游记》中的孙悟 空也在紧要关头随时变幻出千百 个孙悟空来，那该多好。时至今日， 科技高速发达的今天，会实现我们 这个美好的愿望吗？让我们来听 听中科院院士、遗传学家谈家桢是 怎么说的。《板书――奇妙的克 隆》。 5、老师的疑惑，请你解答： （1）课文四个小标题分别讲述了 什么内容？能否分别用一个讲词 语来概括下下？在文中起到什么 作用？ （2）第一节中作者为了说明“克隆 是什么”，都运用了哪些说明手法？ 那什么是克隆呢？ （3）为了说明克隆的探索、发展， 作者都举了哪些例子来说明？你 注意到它们的写作顺序了吗？为 什么这样安排？ （4）克隆羊“多利”的诞生为何会 在全世界引起“轰动”？ （5）如何理解课文最后一节说“科 技进步是一首悲喜交集的进行曲” ？（那到底会给我们带来那些有 关的伦理、道德和法律等问题”可 悲之处呢？比方说克隆人。） 结束语：克隆技术是一把双刃剑， 既可造福人类也可殃及人类。值得 我们欣慰和骄傲的是, 面对克隆, 人类表现得比以往任何时候都富 有成熟理性和远见。如果克隆技术 真是上帝放在人类面前的又一只 潘多拉魔盒, 那么人类将满怀自 信地伸出两手,一只手叫智慧或灵 性, 它让克隆技术为我所用, 造 福世界, 另一只手叫理性, 它将 控制和防止克隆技术走向反面。这 也就是要“兴利除弊”！科学家们 有足够的信心，智慧、理性地运用 1、生齐读课题，说说中心语是 什么？奇妙的在这里起什么作 用？ 2、那么克隆到底奇妙在哪儿 呢？带着这个问题速读课文。在 读之前，让我们先来理解几个词 语：这篇科普文章涉及一些生物 学相关术语，请结合老师提供的 补充注释默读全文。 3、（读后）除了刚才讲到 的生物学相关术语外，同学们还 要注意：专业语与通用语并陈是 科普文章语言的显著特征之一。 现在说说你们的理解，克隆到底 奇妙在哪儿？（“克隆”这项高 科技“奇”就“奇”在无性繁殖， “妙”就“妙”在杂交创新。看 似没有必然联系的生物体，一经 “换核卵”式的杂交，就会繁衍 出新的后代群体。作者先从植物 克隆谈到动物克隆，再从鱼类、 两栖类克隆谈到哺乳类克隆，后 从“克隆羊”谈到“克隆人”， 表明科学家探索的目光没有禁 区，永无止境，这是人类最可宝 贵的科学创造之“神奇”和科学 创造之“美妙”。） 4、接下来就让进一步走近 克隆，请同学们说说读完课文后 你的收获或质疑。 （生齐读“可以期待，许多 生物学家，特别是那些从事无性 繁殖研究的科学家，将会严肃地 考虑它的含义，并展开科学讨 论，用以教育世界人民”） 用生活中的例子来导入 课题，比较有吸引力。
2.2 动物细胞工程 2.2.1动物细胞培养和核移植技术（第二课时） 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 教学目标： 知识目标：简述通过体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用 能力目标：运用动物细胞的基础知识，分析核移植技术的理论基础，搜集有关动物细胞核移植研究进展和应用方面的资料，进行整理、分析和交流情感目标：讨论动物细胞核移植的社会意义，关注动物细胞核移植的发展和应用前景。 旧课复习： 我们已经学习了植物的组织培养，植物体细胞杂交，知道植物细胞可以培养成一棵植株，这说明植物细胞具有全能性，而动物的体细胞离开了母体，却不能培养成一只动物个体难道是动物细胞没有全能性吗？不是。而是动物细胞高度分化，全能性比较低。 导入新课： 假如生活中我们碰到这样的问题,比如：（展示幻灯片，问题的提出） 1997年,美国威斯康星洲的一个奶牛场有一头高产奶牛叫“卢新达”,年产奶量为30.8吨,而我国奶牛年平均产奶量仅为3~4吨.用什么方法能得到更多的“卢新达”呢?学生回答克隆，其实克隆的研究从1938年就开始了。（幻灯片——克隆的历史，多利之后还有许多的动物被克隆，今天，我们要先从多利讲起） 听说过克隆羊多利吧，可以请一位同学来说说来多利的诞生过程。(学生上台讲述多利的培育过程)我们一起来看看多利的培育过程，请问多利像谁呢？母羊A，因为多利的核基因全部来自母羊A。100%象吗？，不，因为还有来自母羊B的细胞质基因。这里哪个细胞是供体细胞呢，乳腺细胞，它是高度分化的体细胞。
来看课本中对克隆的定义：请大家阅读，并划线。 教师板书：1、概念 克隆的定义：动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体. 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物. 分类:体细胞核移植和胚胎细胞核移植（根据提供细胞核的供体不同而区分）多利羊之所以轰动全世界，并非因为它是首只克隆动物，你知道为什么它能一夜成名呢？请一位同学回答：（首先，它选用的细胞是高度分化的体细胞，其次，它是哺乳动物，意味着人可以进行体细胞核移植。所以它的诞生标志着体细胞核移植成功。胚胎时期的细胞进行细胞核移植比体细胞核移植更容易成功，这是为什么呢？原来胚胎细胞分化程度低，所以全能性较高，而体细胞分化程度高,所以全能性也就比较低了。其实我国早在20世纪70年代，就在童第周教授的带领下，克隆出了鱼，但是，多利一夜成名，中国的克隆鱼却默默无闻20年，这是为什么呢？（因为我们的闭塞，导致中国科学的进展不为世界所知。所以要与世界进行交流，同享科技进步成果）。 那么刚才那只卢新达奶牛能用胚胎细胞克隆吗？（请一位同学回答）。不行，本身自己已经过了胚胎期，如果用它的下一代的胚胎细胞，那么已经加入了另一只公牛的基因。所以用体细胞核移植技术。因此，说体细胞核移植技术比较常用于优秀动物个体的克隆。 下面我们通过我国成功克隆高产奶牛的过程来学习动物体细胞核移植的过程。请大家结合课本，看以下的幻灯片
动物细胞培养和核移植技术 备课日期2014年 3 月 4 日课型新授课 教学目标 知识与技能 1\简述动物细胞养的含义。 2\说出动物细胞养的所需条件。 3\简述动物细胞培养的基本程序。 4\简述动物细胞核移植的概念。 过程与方法 情感态度 与价值观 1\通过学习基因工程的概念，使学生认识到科学研究需要的严谨，激 发为祖国而奋斗的精神。 2\通过学习基因操作的工具，使学生树立结构与功能相统一的辩证唯 物主义观念。 教学重点 1\动物细胞培养的过程及条件； 2\用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景 教学难点用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程 教学方法以探究法、谈话法、材料教学法相结合。 教学用具多媒体课件 课时安排1课时 教学内容设计与反思 板书设计:
教学内容设计与反思一、复习导入: 教师活动：投影幻灯片，引导学生思考、分析讨论。 （1）植物细胞工程常用的技术手段有哪些？ 植物组织培养 植物体细胞杂交 （2）植物体细胞杂交的结果是产生了？ （3）植物体细胞杂交过程中涉及的原理是？ 二、讲授新课: （一）动物细胞工程 动物细胞工程常用的技术手段 动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体、动物细胞培养 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。 （二）动物细胞培养 1.发展历史: 单20世纪初，人们不知道神经纤维是由神经细胞的细胞质向外突出形 成的，还是由神经细胞周围的其他细胞融合而成的。生物学家们就这个问 题展开了激烈的争论。1907年，美国生物学家哈里森(Harrison)从蝌蚪的 脊索中分离出神经组织，把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培养。蝌蚪的神 经组织存活了好几周，并且从神经细胞中长出了神经纤维。哈里森的实验 不仅解决了神经纤维的起源问题，而且开创了动物组织培养的先河。此后， 在许多科学家的不懈努力下，动物组织培养不断改进并逐渐发展成为动物 细胞培养。 2、动物细胞培养的应用和概念： 动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关 的组织,将它分散成个细胞,然后,放在适宜的 培养基中,让这些细胞生长和增殖. 3、动物细胞培养过程： 引导学生阅读课文44--46面相关内容。
2020年4月16日磨课教案 第二单元动物细胞工程 2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体 一、学习目标 1．知识目标： ⑴掌握动物细胞融合与植物体细胞杂交的区别和联系。 ⑵简述动物细胞融合和单克隆抗体制备的过程。 ⑶了解单克隆抗体在医学实践中的应用，并说其应用实例。 2．能力目标： 让学生尝试设计单克隆抗体的制备过程，指导学生掌握获取知识和探索生物科学的基本方法，使学生了解生物科学认识模式以发展学生的创造性能力。 3．情感、态度和价值观目标： 通过向学生介绍动物细胞融合与单克隆抗体技术的发展动态及一些新的研究成果，使学生明确人们对生命奥秘的揭示愈加广泛和深入，知识不断更新并向前发展，认识到学无止境，形成终生学习的意识。 二、教学重点难点单克隆抗体的制备过程。 三、流程 1、小结植物细胞工程涉及的技术，让学生回顾有关植物体细胞杂交技术的基本知识 2、探究一：动物细胞的融合 教师提出思考问题，布置学生进行讨论探究，四人一组，探讨交流。 多媒体展示探究思考题。 1）、植物体细胞杂交和动物细胞融合的区别 2）、植物体细胞杂交和动物细胞融合的主要区别是什么？ 3）、为什么可以使用灭活的病毒促进动物细胞融合？ 4）、不灭活的病毒能作为诱导剂吗？ 3、探究二：单克隆抗体制备的原理 多媒体展示探究问题。 1）、传统的抗体生产方法及缺陷是什么？抗体是从何来的？
2）、B淋巴细胞有什么特点？ 3）、若要想获得大量的单一抗体，如何做呢？ 4）、在体外培养的条件下，一个B淋巴细胞是不可能无限增殖的，那么，怎样解决这一问题的呢？ 5)、小结以下内容： ◆利用____________________产生特异性抗体的功能。 ◆利用____________________无限增殖的特性 ◆利用____________________技术将两种细胞融合获得杂交瘤细胞。 ◆利用____________________技术大量培养杂交瘤细胞 4、探究三：单克隆抗体制备的过程 教师通过多媒体展示单克隆抗体的制备过程，同时提出问题，教师展示讨论问题，学生分组讨论。 1）、如何获得B淋巴细胞？ 2）、如果把B淋巴细胞和骨髓瘤细胞放在一起时，会有几种融合方式（类型）？ 3）、选择杂交瘤细胞的两步筛选的目的各是什么？ 4）、如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养？（教师讲解为主） 5、探究四：单克隆抗体的应用 教师引导学生阅读课本进行回答，多媒体展示问题 1）、单克隆抗体的应用有哪些？ 2）、生物导弹的组成及优点 四、二次备课
山东省济南市平阴县孝直中学八年级生物下册第二章第二节克隆技术教案新人教版教 学环节及设计意图：课题：主备人：时间： 学习目标：1.。 2.能概述克隆羊多利的培育过程。 3.分析克隆羊技术及伦理。 4.通过论辩活动，提高语言表达能力和信息交流能力，确立正确的伦理观和价值观。 学习重难点：说出克隆技术的实质及应用 教 师 修 改 及 建 议 ： 一、预习检测: 1.下列繁殖新植物的方法中，不属于克隆的是（） A利用扦插的方法，培育葡萄幼苗B利用组织培养技术，培育烟草 C利用马铃薯的块茎来繁殖新个体D利用种子来繁殖玉米植株 2.克隆实质是（） A无性繁殖B有性繁殖C分裂生殖D营养生殖 3.关于克隆下列说法错误的是（） A利用人体细胞克隆组织或器官，可以消除人体器官移植中的排异的反应。 B利用人体细胞克隆组织或器官可解决供移植的人体器官严重缺乏的难题。 C克隆不是经过受精过程而获得新个体的方法。 D 克隆是通过有性生殖产生出动物个体或群体。 二、自主学习、合作交流 （一）通读课本P97-98相关知识，找出下列问题，并回答有关问题： 1．克隆属于生殖。 1）克隆羊“多利”是用细胞克隆出来的。 2）利用克隆技术，可以快速的培育具有优良品质的品种；克隆技术在制 造 方面前景广阔；利用克隆技术可以将动物大量繁殖；克隆技术还为拯 救 开辟了一条新途径。 （二）小组探究，互助学习： 1、首先学生自主阅读课本97-98页，然后小组长组织组员讨论98页的分析讨论题。 1） 2） 3） 2、课前老师让大家预习了有关克隆技术的问题，在研讨上述问题之后，你还有哪些疑问和困惑？（如： 多利有父亲吗？多利有几个母亲？“新卵细胞”是怎样融合成胚胎的？ 3、请学生模拟克隆“多利”羊的过程。并请学生解答学生的疑问。 4、阅读课本P98-99有关知识，分析讨论下列问题： 克隆羊多利的诞生就意味着人类可以利用动物的体细胞大量复制出完全相同的生命体，打破了千 百年不变的自然规律，这是遗传科学的巨大飞跃，也是人类历史上的一项重大突破，那么克隆技术有 哪些现实意义呢？你认为这项技术广泛用于农业、医药有哪些好处呢？这个问题你们小组内首先进行 交流。
动物细胞培养及无血清培养研究进展 摘要：细胞培养是生物学中一项重要技术，应用较为广泛，目前已渗透到细胞生物学、生物化学、临床检验学等多个领域。其中动物细胞培养是动物细胞工程中最常用的技术手段，而且动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。本文主要介绍了动物细胞培养和其中发展较快的无血清培养技术的研究应用进展。为未来实际的研究和生产作一些总结和展望。 关键词：动物细胞；细胞培养；无血清培养基 1 引言 组织培养技术创建于18世纪末，之后于1907 年美国生物学家Harrison在无菌条件下，以淋巴液为培养基在试管中培养蛙胚神经组织宣告成功后，才逐渐发展成为一种从机体获取细胞，模拟体内生存环境，在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下，使其生长繁殖并维持结构和功能的实验技术。这种技术为细胞学、遗传学、病毒学、免疫学的研究和应用做出了重要贡献。近年来生命科学迅速发展，各种在分子水平的实验如核移植、细胞杂交、DNA 介导的基因转移等，都是借助细胞培养技术而得以实现的。然而各领域的动物细胞培养技术发展并不平衡，存在许多的局限性，使用范围有限，还未出现适合整个生命科学研究领域的培养体系。因此本文对细胞培养及大规模培养、无血清培养做一些总结。 2动物细胞培养 动物细胞培养方式包括原代和传代培养。培养方式有贴壁、悬浮以及固定化培养等方式。 2.1动物细胞培养的基本概念 细胞培养指的是从体内组织取出细胞，并为其提供一个无菌、具有适当温度及酸碱度的环境，给予充分营养，使其生长繁殖并维持其结构和功能的一种培养技术。从体内取出的细胞进行的首次培养式细胞培养最初的阶段，也称为原代培养。原代培养式细胞培养当中重要的必经环节。原代培养细胞生长到一定时候后，由于受群体环境影响，需要转移到另一个容器，这种培养称为传代培养。传代后的动物细胞与原代培物形状一致的话，则表示传代成功，这些细胞称为细胞系或细胞株。 2.2动物细胞培养技术的内容
动物体细胞核移植技术和克隆动物 许昌实验中学万沛沛 一、教学目标： 1．简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。 2．培养理解分析、信息获取、归纳总结和交流合作能力。 3．体验科学发现、技术发明和社会发展之间的关系。 二、教学重点和难点： 用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。 三、教学方法： 讲解讲述、阅读指导、讨论引导、归纳总结等。 四、课时安排：1课时 五、教学过程： Ⅰ、课前准备： 1、搜集相关电子图片（西游记的孙悟空）和克隆动物的图片，并制作成教学课件。 2．制定学生课前预习的学案，并及时检查，了解学生情况，制定上课计划。 Ⅱ、新课讲授： （屏幕展示课前寄语）上课前先送给同学们5个词：博学，审问，明辨，慎思，笃行，希望同学们在学习过程中能广览知识，对问题多思，多问多辩，并切实力行，用我们的努力开启“成功基因”的表达。 好，言归正传，今天我们共同探究的课题是关于克隆动物的培育过程。【导入】 投影幻灯片1——西游记插图 我们每个同学几乎都看过《西游记》，其实唐僧师徒西天取经途中，最大的一个科学发现就是——无性繁殖。他们发现女儿国的女人生孩子不需要与男人结婚，只要喝一口子母河的水，就可以如愿以偿。同时也开了男人也可以怀孕生子的科学先河。 在西游记中，人们最崇拜的一位偶像，怕是要数孙悟空了。孙悟空不但有神出鬼没的七十二变，更神奇的是：他只要从自己身上拔出一根毫毛，放在嘴边一吹，就可以变出无数个跟自己一模一样的小猴子。复制自身，这不就是克隆技术吗？所以说孙悟空是当之无愧的克隆技术的鼻祖。 这个克隆猴的古代神话如今正逐渐变成现实：2000年，科学家第一次成
一、实验目的 1、学习并掌握动物细胞培养的无菌操作技术。 2、学习并掌握细胞传代培养的方法。 3、学习并掌握用倒置荧光显微镜观察细胞细胞形态。 二、实验原理 细胞培养（cell culture）：细胞在体外条件下生长，细胞不再形成组织。 动物细胞培养（animal cell culture）就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞（使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶）然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。由于细胞具有生长和自我复制的能力，为细胞体外培养和研究提供可能。 动物细胞培养可分为原代培养和传代培养。 原代培养（primary culture）即直接从动物机体分离、获得组织细胞，在无菌条件下，用胰蛋白酶消化或机械分散等方法，将动物组织分散成单个细胞开始首次培养长出单层细胞的方法。 传代培养（subculture）当细胞生长增值达到一定密度，用胰蛋白酶将细胞消化分散成单细胞，将细胞转移到新的培养皿中扩大培养的方法。 高等生物是由多细胞构成的整体，在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内的功能活动是十分困难的，但如果把或细胞拿到体外培养、增殖并进行观察和研究，则方便简单的多。被培养的动物细胞是非常好的实验对象和实验研究材料，对体外培养的活细胞进行研究可以帮助人类探索防治各种疾病途径和机制，也可以人为地诱导和改变细胞的遗传性状和特性，因此，动物细胞体外培养技术是研究细胞分子机制非常重要的实验手段，被广泛应用于医学、生物技术、基因工程等研究领域。 三、细胞培养相关设施及材料 1、细胞培养室 无菌操作区：只限于细胞培养及其它无菌操作，与外界隔离。 孵育区：培养箱设定的条件为37℃，5%CO2。 制备区：培养液及有关培养用液体的制备，液体制备后应该在净化工作台进行过滤除菌。 储藏区：包括冰箱、干燥箱、液氮罐等。 清洗区和消毒灭菌区：清洗区为相对污染区，消毒灭菌区与清洗区分开。 2、细胞培养常用基本设施： 荧光显微镜、超净工作台、孵箱、电热鼓风干燥箱、冰箱、液氮罐、消毒器、恒温水浴槽、滤器等。 细胞培养常用器皿：培养瓶、培养板、培养皿，玻璃瓶、吸管，离心管、冻存管，注射器，烧杯、量筒等。 3、细胞培养用品的清洗、消毒 新玻璃器皿要用5%稀盐酸浸泡，以中和其表面碱性物质：刷洗： 硫酸清洁液浸泡：浓硫酸+重铬酸钾+蒸馏水； 冲洗：流水冲洗15-20次，蒸馏水冲洗3次，三蒸水漂洗1-3次。 所有需灭菌的器械、物品灭菌前均需包装，防止灭菌后污染。使用时放入超净工
《第二节克隆技术》教案 教学目标 1、说出克隆技术的实质及应用。 2、概述克隆羊多利的培育过程。 3、分析克隆技术与伦理 重点 概述克隆技术的原理及大致操作过程。 难点 克隆技术的原理及操作过程，举例说出克隆技术和社会伦理问题。 教学突破 本节教学可结合第一节的内容，教师可组织学生展开有关生物技术的发展在给人类带来巨大利益的同时，也带来了一些明显的或潜在的威胁和社会伦理问题的讨论，对提出的问题进行分类整理，分成若干具体问题，如转基因食品的安全问题、克隆人的伦理问题、生物武器制造和应用的安全问题等。让学生根据提出的问题，组成若干个研究小组，分工合作，查找资料，确定论述的主要论点和论据，选择论述的方法和手段，举办关于生物技术引发的安全性和社会伦理问题的研究报告会，使学生明白生物技术是一把双刃剑，如果使用不当，也会给人类带来深重的灾难。 教师准备 教师制作CAI课件，“克隆羊‘多利’”培育过程的flash动画。 学生准备 学生课前查找有关“克隆技术的发展史”和“生物技术的种类”等有关资料。 教学设计 一、导入新课 1、教师课件出示植物的扦插、压条、嫁接和组织培养，提出问题：有心栽花花不开，无心插柳柳成荫，这句诗说的是植物的什么现象？ 2、学生回答：无性生殖。因为没有经过两性生殖细胞的结合。它们与原来植株的遗传物质完全相同。 3、教师总结这种无性生殖现象在生物学上叫做克隆。自然引出本节课题。 二、讲授新课 自主学习一：(一)克隆技术及其应用 1、出示:“多利”和它的缔造者图片，提出问题：你知道它是怎么来的吗？
学生回答：克隆出来的 2、教师动画演示“多利”的培育过程，提出问题： (1)在进行克隆实验时，维尔穆特选用不同品种绵羊的目的是什么？ (2)“多利”的遗传物质与哪只绵羊相同？请说出你的理由。 (3)与普通绵羊的繁殖相比，“多利”的产生有什么特殊之处？ 3、学生分析讨论，教师引导学生解读课本图7、2－7 4、教师引导学生总结： (1)在进行克隆实验时，维尔穆特选用不同品种绵羊的目的是作为对照，增强结论的说服力。 (2)“多利”的遗传物质与白脸绵羊的遗传物质相同。因为白脸绵羊的乳腺细胞中含有该绵羊全套的遗传基因，通过无性生殖产生的“多利”羊，其遗传基因来自白脸绵羊。 (3)普通绵羊是通过有性生殖产生后代的，后代有较多的变异，而“多利”羊是无性生殖产生的后代，其性状表现与亲本一样。 5、教师讲述：高等动物进行无性繁殖曾一度被认为是不可能的，“多利”的诞生打破了人们的传统观念。“多利”的遗传物质来自单一的亲本，它几乎是其原本的个体复制品。自此，克隆技术突飞猛进，各种克隆动物相继问世。提出问题：你知道哪些克隆动物？ 6、学生回答：克隆马、克隆牛…… 自主学习二：(二)克隆技术与伦理 1、教师讲述：克隆动物的不断问世，从理论上证明克隆人是完全可能的。美国和英国都曾克隆出人类胚胎，目前，在克隆人的问题上，人们褒贬不一。提出问题：你同样克隆人吗？ 2、辩论活动：关于是否应该禁止克隆人的辩论。(先组内交流、选出代表，班内辩论) 3、教师引导学生总结：克隆技术是一把双刃剑。克隆技术能给人类带来许多好处。如：保持优良品种，拯救珍惜动物，进行医药生物研究。同样，在提高人类生活质量的同时，也会衍生出危机人类传统伦理及人类基因进化等方面的问题。我们相信，只要我们大家共同遵守社会伦理的基本原则，理性开发和利用克隆技术，生命科学的研究前途一定会更美好。 4、应用实践：制作展板介绍克隆技术(形式多样，内容可选择克隆技术的研究现状、进展及其应用前景等) 点评：从学生感兴趣的克隆人问题入手，让学生充分的表达。交流，认识克隆技术的两面性，培养学生分析能力、逻辑思维能力和关注社会问题的意识。 三、课堂小结 克隆是指生物体通过体细胞进行的无性繁殖群体，克隆技术已被广泛应用于许多领域，如快速繁殖作物和家畜、制造基因工程药物等。目前，人类自身的克隆有桲于伦理道德，破坏了人的尊严，也不利于人类的发展，所以在许多国家已经被明令禁止。
《动物细胞培养技术》复习思考题 1.动物细胞培养的实验器皿清洗要求为何较高？你认为该如何保证器皿中无杂质？如果 器皿中有杂质，会对细胞培养产生什么样的影响？ 答：①离体细胞对各种毒物都很敏感，若所用器材清洗效果未达到要求，各种毒物会损坏细胞影响实验。②器皿使用高压灭菌锅，121.3℃，20~30分钟，在取拿的时候用经过高压灭菌后的镊子取拿，避免造成污染。③ 2.叙述超净工作台的工作原理？ 答：超净工作台最主要的是空气循环过滤的过程，在这个过程中风机起到了心脏的作用。鼓风机驱动空气通过高效过滤器得以净化，净化的空气被徐徐吹过台面空间而将其中的尘埃、细菌甚至病毒颗粒带走，使工作区构成无菌环境。 3.正压过滤器为何会除菌？ 答：正压式过滤器没有内置灭菌灯，正压式过滤器利用的是两层0.22um孔的过滤膜，这层膜可以将细菌阻挡在膜上，过滤的液体流下去就基本上完成了灭菌过程 4.各种细胞培养用液的配制需要很精确吗？如果不精确，会导致什么后果？请举例说明。 你认为精确配制各种溶液？ 答： 5.配制后平衡盐溶液呈黄色意味着液体的pH发生了什么变化？ 答：配制后的液体应呈桃红色，PH值为7.4左右。苯酚红的变色域：1.2（橙）~3.0（黄），6.5（棕色）~8.0（紫色），若为黄色，则液体呈酸性，不利于细胞的生存。 6.用于分离细胞的消化液为什么宜用无Ca、Mg离子的D-Hanks液或PBS液配制 答：Ca＋2、Mg＋2是细胞膜的重要组分，具有使细胞凝聚的作用。因此，用于分离细胞的消化液宜用无Ca＋2、Mg＋2离子的D-Hanks液或PBS液。 7.L-谷氨酰胺在营养液中有何作用？ 答： L－谷氨酰胺是细胞的能量来源；是一种必须氨基酸，是使物体合成核酸、蛋白质、嘌呤、嘧啶的重要前体，也是蛋白质合成分解的调节物；是细胞内氨的清除剂，氨对一些细胞有毒性。 8.HEPES溶液的作用机理？ 答：它是一种氢离子缓冲剂。主要作用是防止培养基pH迅速变动 9.平衡盐溶液的组成与基本作用？小牛血清在细胞培养中有哪些作用？ 答：①平衡盐溶液主要是由无机盐、葡萄糖组成,它的作用是维持细胞渗透压平衡,保持pH 稳定及提供简单的营养.主要用于取材时组织块的漂洗、细胞的漂洗、配制其他试剂等。②作用：a提供能促使细胞指数生长的激素、基础培养基中没有或含量微小的营养物，以及某些低分子营养物质；b提供结合蛋白，识别维生素、脂类、金属离子，并与有毒金属和热源物质结合，起解毒作用；c是细胞贴壁、铺展生长所需因子的来源；d起酸碱度缓冲液作用； e提供蛋白酶抑制剂，细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受损伤。 10.营养液制备后为什么要小剂量分装？ 答：避免营养液被污染后，全部的营养液都被污染。 营养液一次用完过后，下一次的实验就不能用，会引起污染，影响实验，若冷冻营养液，则营养液的营养成分会有所损失，影响细胞的生长 11.10万U/mL单位青霉素、链霉素的配制方法？ 答：用注射器吸10毫升双蒸水溶解100万单位的链霉素，弃去2ml，用剩余的8ml链霉素溶解80万单位的青霉素，配制成每毫升青霉素、链霉素各10万单位的母液。
第二节克隆技术 一、【教材分析】 前面学习了动植物的生殖和生物的遗传和变异的特征。本课是以此为基础，在学生已有的认知和经验基础上，进一步引领学生感悟生命过程的复杂多样，讨论克隆技术给人类带来的影响，思考科学技术的双面性。 二、【教学目标】 （一）知识目标： 1、能通过讨论等方式探究克隆技术带来的影响；能将所收集的资料进行整理，设计成有条理的讲演 稿向其他人介绍；能有一定根据地提出自己的观点，并能对其他同学的观点进行评价。 2、能体会到科学技术的“双刃剑”含义。（难点） 3、能用自己的话解释克隆技术。 4、能从正反两个方面说出克隆技术给人类带来的影响。（重点） （二）能力目标： 1.学会收集资料，能通过各种方法和途径收集到有关克隆技术的发展的资料。 2.学会交流和汇报，能够将自己的收获展示给大家，并能够在交流活动中获得他人的信息。 （三）情感目标： 1.通过收集有关克隆人方面的信息，增强关注社会热点问题的意识； 2.通过分工合作，培养团结互助的协作精神； 3.激发对生物技术发展研究的兴趣和探究的欲望。 四、【教学准备】 教师准备： 收集相关的资料和图片作成多媒体课件； 学生准备： 1、准备“假设我会克隆”小作文；
2、收集有关克隆人方面的信息和资料，为“关于是否应该禁止克隆人的辩论”做准备。 五、【教学过程】 教学环 节及时间安排教师活动学生活动 设计意 图 一、创设情景，激发兴趣： （3分钟）1、【展示】孙悟空图片或视频： 2、【提问】你喜欢孙悟空吗？他有哪些本领？ 3、【过渡】孙悟空拔出一根毫毛能变出千万个一 样的自己来。这个神话引发人类复制自身的幻 想，用现代的眼光看就是“克隆”。今天我们学 习第二节克隆技术。 回答孙悟空会：①七 十二变；②腾云驾 雾；③有一双火眼金 睛，能看穿妖魔鬼怪 的伪装；④一个筋斗 能翻十万八千里；⑤ 拔一根毫毛变出一 样的自己等。 孙悟空 形象和故 事，家喻户 晓。易于激 发学生学 习兴趣。 二、知识回顾: （4分钟）1、【展示图片过渡】植物的“克隆”，老百姓可 能每天都在做。 扦插 嫁接 2、【提问】 植物的扦插、嫁接、压条、组织培养和用种子繁 殖相比，有什么特点？ 3、【过渡】无性生殖在生物学上就叫“克隆”。 植物的克隆我们每天都可以做，高等动物的克隆 看图片回顾植物的 扦插、嫁接、压条、 组织培养的知识。 思考回答：扦插、嫁 接、压条、组织培养 都是无性生殖，没有 两性生殖细胞的结 合而直接由母体产 生新个体。 学生对无 性生殖很 熟悉，但不 知道无性 生殖就是 克隆。教师 利用原有 的知识做 基础，引导 学生回顾、 复习。使课 堂能够顺 利过渡到 克隆技术。
列叙述正确的是() A．三者都涉及基因工程技术 B．三者都是在细胞或细胞器水平上的操作 C．克隆动物属于无性生殖范畴 D．人工种子的胚状体是由受精卵发育而成的 【解析】乳腺生物反应器采用了基因工程技术，人工种子和克隆动物都采用了细胞工程技术，克隆动物是由重组细胞发育成完整的个体，该个体并非由受精卵发育而来，因此克隆动物属于无性生殖的范畴，人工种子的胚状体是由植物组织培养获得的，并非由受精卵发育而来。 【答案】 C 关于哺乳动物细胞体外培养的难易程度，下列表述正确的是()
A．乳腺癌细胞易于乳腺细胞；胚胎细胞易于脂肪细胞 B．乳腺细胞易于乳腺癌细胞；胚胎细胞易于脂肪细胞 C．乳腺细胞易于乳腺癌细胞；脂肪细胞易于胚胎细胞 D．乳腺癌细胞易于乳腺细胞；脂肪细胞易于胚胎细胞 【解析】哺乳动物的乳腺细胞和脂肪细胞都是高度分化的细胞，体外培养难度大，乳腺癌细胞能够恶性增殖，容易进行体外培养，胚胎细胞具有很强的分裂增殖能力，容易进行体外培养，A正确。 【答案】 A 1. (1)均能打破物种之间的生殖隔离，克服远缘杂交不亲和的障碍。 (2)均能按照人的意愿定向改良生物性状。 2．不同点 (1)原理不同：细胞工程是细胞(或细胞核)的全能性，细胞膜的流动性及细胞增殖；基因工程是DNA分子组成、结构和遗传密码的统一性。 (2)操作水平不同：细胞工程是细胞或细胞器水平；基因工程是分子水平。 (3)工具酶不同：细胞工程用到纤维素酶和果胶酶(植物体细胞杂交)或胰蛋白酶(动物细胞培养)；基因工程用到限制性核酸内切酶和DNA连接酶。 (4)目的不同：细胞工程是为了改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品；基因工程是创造出人们需要的新的生物类型和生物产品。 3．联系 (1)转基因植物的获得离不开植物组织培养。 (2)转基因动物的培育离不开动物细胞培养。 下列生物工程技术中，不属于细胞工程的是() A．通过试管动物大量繁殖优良动物 B．利用含有人胰岛素基因的大肠杆菌生产胰岛素 C．通过体细胞克隆技术培养出克隆羊 D．将某人的肝癌细胞在实验室中繁殖成一个细胞系
细胞培养技术
细胞培养发展史及其应用 （一）前言 20世纪初，人们不知道神经纤维是由神经细胞的细胞质向外突出形成的，还是由神经细胞周围的其他细胞融合而成的。生物学家们就这个问题展开了激烈的争论。1907年，美国生物学家哈里森(Harriso n)从蝌蚪的脊索中分离出神经组织，把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培养。蝌蚪的神经组织存活了好几周，并且从神经细胞中长出了神经纤维。哈里森的实验不仅解决了神经纤维的起源问题，而且开创了动物组织培养的先河。此后，在许多科学家的不懈努力下，动物组织培养不断改进并逐渐发展成为动物细胞培养。 所谓动物细胞培养(亦称组织培养)既有别于植物细胞培养，又与微生物的培养完全不同。所谓动物细胞培养是指离散的动物活细胞在体外人工条件下的生长、增殖过程，在此过程中细胞不再形成组织。 由于动物细胞培养是在人工条件下进行的，便于调控和观察，因而成为现今研究动物的物质代谢过程、染色体的形态变化、以及遗传物质的表达调控等高难领域的既便利而又有效的新方法。同时，随着现代生物化学、分子生物学、分子遗传学、以及现代医学的发展，细胞培养也在许多应用领域充分展示了其巨大的发展潜力，并已为世人所关注。尽管如此，动物细胞培养仍是一门年轻的新学科，在发展之初被混淆于动物组织培养之中。 （二）细胞培养技术及其历史 细胞培养的历史最早可追溯到19 世纪末，据可考证的资料记载W ilhelm Roux是第一个进行动物组织培养实验的人。 1885年Wilhelm Roux 将鸡胚髓板放置于温热盐水中使之维持存活了数天，是有记录的第一个体外移植成功的例子。 1887年Arnold把恺木的木髓碎片接种到蛙的身上。当白细胞侵入这些木髓碎片后，他把这些白细胞收集在盛将盐水的小碟中，接下来观察到这些白细胞在运动，并存活了一个短的时间。
2.2动物细胞工程 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 教学目标 1．简述动物细胞培养的过程、条件及应用。 2．简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。 3．举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用。 教学重点 1.动物细胞培养的过程及条件。 2.用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。 3.单克隆抗体的制备和应用。 教学难点 1.用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。 2.单克隆抗体的制备过程。 教学工具：多媒体教学课件 课时安排：2课时 教学过程 课时1 动物细胞培养 一.引入新课 1.教师：植物细胞工程有哪些基本技术？ 学生：植物组织培养，植物体细胞杂交。 2.教师：利用植物细胞可以培育成植物体，那么，你利用动物细胞能不能大量繁殖动物体，以提高繁殖率呢？这节课我们来学习动物细胞工程 3.教师：那动物细胞工程又有哪些基本技术呢？ 学生：动物细胞培养，动物细胞位移植，动物细胞融合，生产系克隆等。 4.教师：动物细胞培养技术是动物细胞工程技术的基础。让我们这节课学习动物细胞培养的原理、过程及条件 二.动物细胞培养 一）动物细胞培养的概念及实质（原理） 1.教师：请阅读材料，小组讨论解决方案 材料一：对于大面积烧伤的病人，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源又不足，且会产生排斥反应。怎样才能获得大量的自体健康皮肤呢？ 材料二：单细胞产生的蛋白质很少，怎样才能获得大量的分泌蛋白呢？ 生：取相应细胞，大量培养，即通过动物细胞培养。 2.教师：很好！对于细胞培养我们要了解两个问题。第一个问题：什么是动物细胞培养？ 生：动物细胞培养是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养其中，让这些细胞生长和增殖。 3.教师：通过概念我们可以看出动物细胞培养的前提？条件？实质？ 学生：（1）需分散成单个细胞；（2）需要在培养基上培养；（3）动物细胞培养的实质是细胞增殖。 二. 动物细胞培养的过程 1.教师：在生物体内，成块的组织中细胞与细胞靠在一起，彼此限制了细胞的生长和增殖，因此，动物细胞培养的是首先要解决什么问题？